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Atividade antimicrobiana de extrato etanólico de própolis verde / Antimicrobial activity of ethanolic extract of green propolisVILELA, Camila de Oliveira 23 February 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-02-23 / Propolis is a resinous substance by bees from exudates of flower-buds from several
plants. Its coloring and consistancy is variable and it is used by bees to fill gaps, to
embalm dead insects, as well as to protect the hive against the invasion of
microorganisms. Green propolis, which has several bioactive proprieties scientifically
proved, was evaluated in this study in the form of ethanolic extract, concerning its
virucidal capacity against the avipoxvirus, inoculated in chorioallantoic membrane of
chicken embryos and concerning its antibactericidal and antifungal action in
embryonated eggs destinated to incubation. To evaluate the virucidal capacity of the
Green própolis, 100 eggs embryonated were used, with nine days of incubation, of
broiler breeders with 62 weeks of age, unvaccinated against avipoxvírus. Propolis
presented virucidal activity depending on the dose and the time of vírus incubation
period before the inoculation. Eggs inoculated with vírus and 2400 μg/dose of
propolis previously incubated for four hours presented decrease in the number of
lesion pox (P<0,05) with regard to the positive control besides a decrease in the
number of bodies of intracytoplasmic inclusion and in the score of vacuolar
degeneration of the epithelial cells of the mesoderm of the chorioallantoic membrane.
After eight hours of vírus incubation the same propolis concentration inativated
completely the avipoxvirus (P<0,0001) and a concentration ten times smaller (240
μ/dose) reduced significativelly the number of pox lesions and the histopathological
findings (P<0,05). To evaluate the antibactericidal and antifungal activities of the
ethanolic extract of the Green própolis, 140 eggs from nests of broiler breeders were
used. The levels of contamination of eggshells through total mesophiles and fungi (
Aspergillus sp and other molds) after the desinfection with propolis were smaller as
compared to the control. As compared to the treatment with formaldehyde (positive
control) the concentrations of propolis 240 μg and 24 μg did not differ concerning the
antibactericidal activity, but to the antifungal activity 2400 μg and 240 μg were
superiors. Concerning the eggs hatchability after 21 days of incubation, the propolis
treatmens (2400 μg and 240 μg) presented the biggest rates, with 94,11%
overcoming the treatment with formaldehyde. Thus, the green propolis, presented
virucidal activity against the avipoxvirus in chorioallantoic membrane, as well as
antibactericidal and antifungal activity in embryonated eggs, representing a new
alternative to treatments against infections caused by virus, as well as a new natural
product disinfectant in substitution to formaldehyde. / A própolis é uma substância resinosa produzida pelas abelhas a partir de exsudatos
de brotos e botões florais de diversas plantas. Possui coloração e consistência
variada e é utilizada pelas abelhas para fechar pequenas frestas, embalsamar
insetos mortos, bem como proteger a colméia contra a invasão de microrganismos.
A própolis verde, com diversas propriedades bioativas cientificamente comprovadas,
foi avaliada neste estudo, na forma de extrato etanólico, quanto a sua capacidade
virucida contra o avipoxvirus, inoculado em membrana corioalantóide de embriões
de galinha e quanto às ações antibacteriana e antifúngica em ovos embrionados
destinados a incubação. Para avaliar a capacidade virucida da própolis verde, foram
utilizados 100 ovos embrionados, com nove dias de incubação, de matrizes pesadas
com 62 semanas de idade, não vacinadas contra o avipoxvírus. A própolis
apresentou atividade virucida dependente da dose e do tempo de incubação com o
vírus antes da inoculação. Ovos inoculados com vírus e 2400 μg/dose de própolis,
previamente incubados por quatro horas, apresentaram redução no número de
lesões pox (P<0,05), em relação ao controle positivo, além da redução no número de
corpúsculos de inclusão intracitoplasmáticos e no escore de degeneração vacuolar
das células epiteliais do mesoderma da membrana corioalantóide. Após oito horas
de incubação com o vírus, a mesma concentração de própolis inativou
completamente o avipoxvirus (P<0,0001) e na concentração dez vezes menor (240
μg/dose) reduziu significativamente o número de lesões pox e os achados
histopatológicos (P<0,05). Para avaliar as atividades antibacteriana e antifungica do
extrato etanólico da própolis verde, foram utilizados 140 ovos de ninhos de matrizes
de postura. Os níveis de contaminação da casca dos ovos por mesófilos totais e
fungos (Aspergillus e outros bolores) após a desinfecção com própolis foram
menores quando comparados ao controle. Na comparação ao tratamento com
formaldeído (controle positivo) as concentrações de própolis com 240 μg e 24 μg
não diferiram para atividade antibacteriana, mas para atividade antifúngica 2400 μg
e 240 μg foram superiores. Com relação à eclodibilidade dos ovos após 21 dias de
incubação, os tratamentos de própolis (2400 μg e 240 μg) apresentaram as maiores
taxas, com 94,11% superando o tratamento com formaldeído. A própolis verde,
portanto, apresentou atividade virucida contra o avipoxvirus em membrana
corioalantóide, bem como atividade antibacteriana e antifúngica em ovos
embrionados, representando uma nova alternativa para tratamentos contra infecções
causadas por vírus, bem como um novo produto natural desinfetante em substituição
ao formaldeído.
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Propriedades de agregação do composto bioativo Artepilina C e interações com agregados anfifílicos de interesse biológico / Aggregation properties of the bioactive compound Artepillin C and interactions with amphiphilic aggregates of biological interestLima, Isamara Julia Camuri de 27 August 2018 (has links)
A própolis verde brasileira é um dos produtos de abelha mais consumidos no mundo devido às suas atividades antioxidantes, antiinflamatórias, antimicrobianas e antitumorais. Coletada pela espécie Apis mellifera, esta própolis possui a maior porcentagem de Artepilina C dentre as demais própolis. A molécula, derivada do ácido cinâmico, possui dois grupos prenilados, o que favorece a afinidade do composto pelo ambiente lipofílico. Um grupo carboxila também está presente na estrutura da Artepilina C, tornando-a um composto sensível ao pH, o que pode modular sua atividade biológica relacionada a interações com a membrana celular de organismos e tecidos. Neste trabalho investigamos as propriedades da Artepilina C em solução aquosa e interações entre Artepilina C e agregados anfifílicos comumente usados como modelos de membranas, ou seja, micelas e vesículas unilamelares, usando absorção óptica e espectroscopias de fluorescência em estado estacionário e resolvida no tempo. O grupo carboxila pode estar tanto na forma protonada quanto na forma desprotonada, mostrando equilíbrio em pH 4,65. Em pH abaixo do valor de pKa, uma banda de absorção aumentou em torno de 350 nm em concentração de Artepillin C acima de 50 M devido à agregação da molécula. Em pH neutro, com excitação a 310 nm, a Artepilina C apresenta dupla emissão a 400 e 450 nm, onde a segunda pode estar relacionada com diferentes interações entre as formas isoméricas da molécula. O tempo de vida fluorescente foi ajustado por uma função triexponencial, dominada por uma componente muito curta, em torno de 60 ps. Desta forma, a emissão fluorescente ocorreu antes da despolarização, resultando em valores muito altos de anisotropia de fluorescência. A interação da Artepilina C e membranas modelo foi estudada com micelas aniônicas, catiônicas e zwitteriônicas (respectivamente SDS, CTAB e HPS) e com vesículas unilamelares grandes de DMPC, DMPG e DODAB. Devido às cargas na superfície das micelas e das vesículas, o pH local é diferente do meio (bulk) e os espectros de absorção óptica mostraram que o estado de protonação do composto depende deste pH local. A polaridade em torno da Artepilina C diminuiu na presença de micelas e vesículas de acordo com os espectros de emissão de fluorescência, levando-nos a acreditar que a molécula está localizada na interface água/lipídio. A carga negativa do composto em estado desprotonado favorece a interação com micelas catiônicas e vesículas neutras. Os efeitos são mais proeminentes quando vesícula lipídica está na fase fluida. / Brazilian green propolis is one of the most consumed bee product in the world because of its known antioxidant, anti-inflammatory, antimicrobial and antitumor activities. Collected by the species Apis mellifera, this propolis has the major percentage of Artepillin C among others worldwide propolis. The molecule, derived of cinnamic acid, has two prenylated groups, which improves the affinity of the compound for lipophilic environment. A carboxylic group is also present in the Artepillin C structure, making it a pH-sensitive compound, what may modulate its biological activity related to interactions with the cellular membrane of organisms and tissues. In this work we investigated the properties of Artepillin C on aqueous solution and interactions between Artepillin C and amphiphilic aggregates commonly used as membrane models, namely, micelles and unilamellar vesicles, using optical absorption, steady state and time-resolved fluorescence spectroscopies. The carboxyl group may be either in protonated or deprotonated form, showing equilibrium at pH 4,65. In pH below the pKa value, an absorption band raised around 350 nm at Artepillin C concentration above 50 M, due to aggregation of the molecule. In neutral pH, with excitation at 310 nm, Artepillin C presents dual emission at 400 and 450 nm, where the second one could be related with different interactions between isomeric forms of the molecule. The fluorescent lifetime is a three-exponential function dominated by a very short component, around 60 ps. Therefore, the emission occurred before fluorescence depolarization, resulting in very high values of fluorescence anisotropy. The interaction of Artepillin C and membrane models was studied with anionic, cationic and zwitterionic (respectively SDS, CTAB and HPS) micelles, and with large unilamellar vesicles of DMPC, DMPG and DODAB. Due to the charges in micelles and in vesicles surfaces, the local pH was different from the bulk and the optical absorption spectra showed that the protonation state of the compound depends on this pH. The polarity around Artepillin C decreased in the presence of micelles and vesicles according to fluorescence emission spectra, leading us to believe that the molecule should be located at the water/lipid interface. The negative charge of the compound in deprotonated state favors the interaction with cationic micelles and neutral vesicles. The effects are more prominent when the lipid vesicles are in the fluid phase
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Propriedades de agregação do composto bioativo Artepilina C e interações com agregados anfifílicos de interesse biológico / Aggregation properties of the bioactive compound Artepillin C and interactions with amphiphilic aggregates of biological interestIsamara Julia Camuri de Lima 27 August 2018 (has links)
A própolis verde brasileira é um dos produtos de abelha mais consumidos no mundo devido às suas atividades antioxidantes, antiinflamatórias, antimicrobianas e antitumorais. Coletada pela espécie Apis mellifera, esta própolis possui a maior porcentagem de Artepilina C dentre as demais própolis. A molécula, derivada do ácido cinâmico, possui dois grupos prenilados, o que favorece a afinidade do composto pelo ambiente lipofílico. Um grupo carboxila também está presente na estrutura da Artepilina C, tornando-a um composto sensível ao pH, o que pode modular sua atividade biológica relacionada a interações com a membrana celular de organismos e tecidos. Neste trabalho investigamos as propriedades da Artepilina C em solução aquosa e interações entre Artepilina C e agregados anfifílicos comumente usados como modelos de membranas, ou seja, micelas e vesículas unilamelares, usando absorção óptica e espectroscopias de fluorescência em estado estacionário e resolvida no tempo. O grupo carboxila pode estar tanto na forma protonada quanto na forma desprotonada, mostrando equilíbrio em pH 4,65. Em pH abaixo do valor de pKa, uma banda de absorção aumentou em torno de 350 nm em concentração de Artepillin C acima de 50 M devido à agregação da molécula. Em pH neutro, com excitação a 310 nm, a Artepilina C apresenta dupla emissão a 400 e 450 nm, onde a segunda pode estar relacionada com diferentes interações entre as formas isoméricas da molécula. O tempo de vida fluorescente foi ajustado por uma função triexponencial, dominada por uma componente muito curta, em torno de 60 ps. Desta forma, a emissão fluorescente ocorreu antes da despolarização, resultando em valores muito altos de anisotropia de fluorescência. A interação da Artepilina C e membranas modelo foi estudada com micelas aniônicas, catiônicas e zwitteriônicas (respectivamente SDS, CTAB e HPS) e com vesículas unilamelares grandes de DMPC, DMPG e DODAB. Devido às cargas na superfície das micelas e das vesículas, o pH local é diferente do meio (bulk) e os espectros de absorção óptica mostraram que o estado de protonação do composto depende deste pH local. A polaridade em torno da Artepilina C diminuiu na presença de micelas e vesículas de acordo com os espectros de emissão de fluorescência, levando-nos a acreditar que a molécula está localizada na interface água/lipídio. A carga negativa do composto em estado desprotonado favorece a interação com micelas catiônicas e vesículas neutras. Os efeitos são mais proeminentes quando vesícula lipídica está na fase fluida. / Brazilian green propolis is one of the most consumed bee product in the world because of its known antioxidant, anti-inflammatory, antimicrobial and antitumor activities. Collected by the species Apis mellifera, this propolis has the major percentage of Artepillin C among others worldwide propolis. The molecule, derived of cinnamic acid, has two prenylated groups, which improves the affinity of the compound for lipophilic environment. A carboxylic group is also present in the Artepillin C structure, making it a pH-sensitive compound, what may modulate its biological activity related to interactions with the cellular membrane of organisms and tissues. In this work we investigated the properties of Artepillin C on aqueous solution and interactions between Artepillin C and amphiphilic aggregates commonly used as membrane models, namely, micelles and unilamellar vesicles, using optical absorption, steady state and time-resolved fluorescence spectroscopies. The carboxyl group may be either in protonated or deprotonated form, showing equilibrium at pH 4,65. In pH below the pKa value, an absorption band raised around 350 nm at Artepillin C concentration above 50 M, due to aggregation of the molecule. In neutral pH, with excitation at 310 nm, Artepillin C presents dual emission at 400 and 450 nm, where the second one could be related with different interactions between isomeric forms of the molecule. The fluorescent lifetime is a three-exponential function dominated by a very short component, around 60 ps. Therefore, the emission occurred before fluorescence depolarization, resulting in very high values of fluorescence anisotropy. The interaction of Artepillin C and membrane models was studied with anionic, cationic and zwitterionic (respectively SDS, CTAB and HPS) micelles, and with large unilamellar vesicles of DMPC, DMPG and DODAB. Due to the charges in micelles and in vesicles surfaces, the local pH was different from the bulk and the optical absorption spectra showed that the protonation state of the compound depends on this pH. The polarity around Artepillin C decreased in the presence of micelles and vesicles according to fluorescence emission spectra, leading us to believe that the molecule should be located at the water/lipid interface. The negative charge of the compound in deprotonated state favors the interaction with cationic micelles and neutral vesicles. The effects are more prominent when the lipid vesicles are in the fluid phase
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ESTUDO QUÍMICO DA PRÓPOLIS DOS CAMPOS GERAIS DO PARANÁCordeiro, Adriana Rute 30 August 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-24T19:38:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2013-08-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed to develop methods for obtaining extracts for the isolation and chemical analysis of propolis using two samples from the region known as “Campos Gerais do Paraná”. One of the studied propolis samples was produced in the district of Ipiranga and another in the municipality of Ponta Grossa. The utilized general fractionation method allowed obtaining from the same sample the essential oils and then the aqueous extracts and various organic fractions containing chemical components of several polarities. The analyses of the essential oils showed that both samples of propolis contain several components found in Baccharis dracunculifolia, known as vassoura or alecrim do campo, indicating that these are similar to those of green propolis produced in southeastern Brazil. The analyses also demonstrated the presence of phenol compounds such as flavonoids and caffeoylquinic acids, pointing once again that the botanical origin of both propolis includes the alecrim do campo. The analyses of essential oils originating from Ipiranga propolis sample indicated spathulenol and (E)-nerolidol as the main components, while the one acquired in Ponta Grossa showed high proportions of two substances containing aromatic rings in their structures, 2,6-di-t-butyl-p-cresol and benzyl benzoate. The two sesquiterpene alcohols spathulenol and (E)-nerolidol are commonly found in essential oils from B. dracunculifolia and appear in propolis from Ponta Grossa in low percentages, while the two mentioned aromatic compounds are not commonly found in the genus Baccharis. The various analyses of extracts and isolates showed that two aromatic acids may be considered as marker substances for both samples of propolis. The para-hydroxycinnamic acid seemed to be characteristic of propolis from Ipiranga, while the benzoic acid could be considered typical of the sample from Ponta Grossa. Atomic absorption spectrometry analyses that were conducted with both studied propolis did not indicate neither high levels of essential minerals nor the presence of heavy metals, and this fact represents a guarantee that producers have been working in clean environments. / Este estudo buscou desenvolver métodos para a obtenção de extratos destinados ao isolamento e análises químicas de própolis utilizando duas amostras provenientes da Região dos Campos Gerais do Paraná. Uma das amostras de própolis estudadas foi produzida no município de Ipiranga e a outra no município de Ponta Grossa. O método geral de fracionamento utilizado permitiu obter, de uma mesma amostra, os óleos essenciais e em seguida o extrato aquoso e diversos extratos orgânicos contendo substâncias de várias polaridades. As análises dos óleos essenciais demonstraram que ambas as amostras de própolis contém vários componentes também presentes na espécie vegetal Baccharis dracunculifolia, conhecida como vassoura ou alecrim do campo, indicando tratar-se da chamada própolis verde, similares às produzidas na região sudeste do Brasil. As análises também demonstraram a presença de substâncias fenólicas, tanto flavonoides como ácidos cafeoilquínicos, reforçando que a origem botânica das própolis analisadas inclui o alecrim dos campos. As análises de óleos essenciais da amostra de Ipiranga indicaram como componentes principais o espatulenol e o (E)-nerolidol, enquanto que as de Ponta Grossa apresentaram altas proporções de duas substâncias contendo anéis aromáticos em suas estruturas, o 2,6-di-t-butil-p-cresol e o benzilbenzoato. Os dois álcoois sesquiterpênicos espatulenol e (E)-nerolidol são encontrados comumente em óleos essenciais de B. dracunculifolia e aparecem na própolis de Ponta Grossa em baixas porcentagens, enquanto que os dois mencionados compostos aromáticos não são tão comuns em espécies do gênero Baccharis. As diversas análises de extratos e isolamentos demonstraram que dois ácidos aromáticos podem ser considerados como substâncias marcadoras das duas amostras de própolis analisadas. O ácido para-hidroxicinâmico mostrou-se característico da própolis de Ipiranga, enquanto que o ácido benzóico pode ser considerado típico da amostra de Ponta Grossa. As análises por espectrometria de absorção atômica que foram conduzidas com ambas as própolis estudadas não indicaram níveis elevados de metais e nem a presença de metais pesados inconvenientes, sendo mais uma garantia de que os produtores estão trabalhando em ambientes limpos quanto a este aspecto.
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