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Seleção e caracterização de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas contra Diatraea saccharalis (Fabr. 1794) (Lepidoptera: Crambidae)

Macedo, Cristina Lima de 30 March 2012 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2012. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2012-07-04T23:59:50Z No. of bitstreams: 1 2012_CristinaLimadeMacedo.pdf: 1092613 bytes, checksum: d4d04d70cd2cf8f4d1fa3dec41b22ff7 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-07-05T17:53:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_CristinaLimadeMacedo.pdf: 1092613 bytes, checksum: d4d04d70cd2cf8f4d1fa3dec41b22ff7 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-05T17:53:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_CristinaLimadeMacedo.pdf: 1092613 bytes, checksum: d4d04d70cd2cf8f4d1fa3dec41b22ff7 (MD5) / Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794; Lepidoptera: Crambidae) é responsável por perdas econômicas nas lavouras afetando a cultura e o aproveitamento industrial da cana-de-açúcar. Seu hábito alimentar gera dificuldade no seu controle causando impactos à cultura canavieira. O desenvolvimento de novas estratégias para o seu controle de extrema importância. Uma alternativa para o controle desses insetos é a utilização de agentes de controle biológico, como Bacillus thuringiensis (Bt), pois esta bactéria sintetiza diferentes proteínas tóxicas a muitas pragas. Este estudo teve como objetivo, selecionar 106 estirpes da coleção de Bactérias de Invertebrados da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia tóxicas à broca-da-cana. As estirpes selecionadas foram caracterizadas por métodos bioquímicos, moleculares e a ligação das toxinas aos receptores presentes no intestino médio das larvas de D. saccharalis foi analisada. Foram selecionadas três estirpes de B. thuringiensis, denominadas S602, S1264 e S1301, que apresentaram atividade contra D. saccharalis. A caracterização do perfil protéico revelou a presença de proteínas de 130 e 65 kDa, que correspondem às toxinas Cry1 e Cry2, respectivamente. A caracterização molecular mostrou a existência dos genes cry1 e cry2, corroborando com os resultados mostrados no perfil protéico. As proteínas Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1Ac e Cry2Aa expressas individualmente por estirpes de Bt foram purificadas, solubilizadas, ativadas com tripsina e biotiniladas para a realização de ensaios de ligação para a observação da ligação da proteína à microvilosidades do intestino do inseto. A CL50 das proteínas Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1Ac, Cry2Aa variou entre 222 e 610 ng/cm2. As mesmas apresentaram resultados de toxicidade significativamente semelhantes. As estirpes tóxicas selecionadas neste trabalho e o padrão apresentaram CL50 entre 8 e 43 ng/cm2 bastante inferior e significativamente diferente do das toxinas puras, indicando haver sinergismo entre as toxinas. Os resultados dos ensaios de ligação aos receptores de membrana intestinais mostraram, pela primeira vez, as interações existentes entre as toxinas e os receptores, confirmando o potencial tóxico destas proteínas à D. saccharalis. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794; Lepidoptera: Crambidae) is responsible for great economic losses in crops affecting the culture and the industrial utilization of sugarcane. There eating habits make harder the control by conventional tools causing impacts to sugarcane crops. The development of new strategies for its control is extremely important. An alternative for the control of this insects is the use of biological control agents such as Bacillus thuringiensis (Bt), based on the action of many different proteins synthesized by the bacteria which are active against insects orders. This study aimed to selective strains from collection of Bt in Embrapa Genetic Resources and Biotechnology toxic to the sugarcane borer, D. saccharalis. The strains selected were characterized by biochemical and molecular methods, and the binding assays of the toxins to midgut cell receptors of D. saccharalis were analysed. We selected three strains of B. thuringiensis, named S602, S1264 and S1301, which showed activity against D. saccharalis. Characterization of protein profiles revealed the presence of proteins of 130 and 65 kDa, corresponding to toxins Cry1 and Cry2, respectively. The molecular characterization showed the presence of cry1 and cry2 genes, confirming the results shown in the protein profile. Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1Ac and Cry2Aa proteins were expressed individually by strains of Bt. The proteins were purified, solubilized, biotinylated and activated with trypsin for performing binding assays for the observation of protein binding to the microvilli of the insect gut. The CL50 of the proteins Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1Ac and Cry2Aa showed variation between 222 and 610 ng/cm2. They have presented in the dose bioassay (LC50) Cry toxins showed no significant differences toxic results. The toxic strains selected at this work and standard showed LC50 between 8 and 43 ng/cm2 values inferior and significant different to the pure toxins, showed existence of synergism between toxins. The results of binding assays done with BBMV’s (Brush-Border Membrane Vesicle) of D. saccharalis, showed for the first time, the interactions between receptors and toxins, confirming the potential toxic effects of these proteins to D. saccharalis.
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Reação de progênies de maracujazeiro-azedo ao Colletotrichum gloeosporioides e biocontrole da antracnose com Trichoderma spp.

Martins, Irene 04 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2006. / Submitted by Luana Patrícia de Oliveira Porto (luana_porto_23@hotmail.com) on 2009-12-17T13:14:43Z No. of bitstreams: 1 2006_Irene Martins.pdf: 1971471 bytes, checksum: e0742738003bdef938c8513d92b0e6b6 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2009-12-17T21:32:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_Irene Martins.pdf: 1971471 bytes, checksum: e0742738003bdef938c8513d92b0e6b6 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-12-17T21:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_Irene Martins.pdf: 1971471 bytes, checksum: e0742738003bdef938c8513d92b0e6b6 (MD5) Previous issue date: 2006-04 / Diante da importância da cultura do maracujazeiro, que confere ao Brasil a posição de principal produtor mundial, o presente trabalho teve como objetivos avaliar a reação de progênies de maracujazeiro-azedo (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg.) ao fungo Colletotrichum gloeosporioides (Penzig) Saccardo e avaliar isolados de Trichoderma spp. como agentes de biocontrole da antracnose. Visando a facilitar a produção de inóculo em quantidade suficiente para a realização dos ensaios, foram conduzidos, ainda, experimentos utilizando método de fermentação líquida, com quatro isolados do fungo. O trabalho foi desenvolvido no Setor de Fitopatologia da Estação Biológica da Universidade de Brasília e no Laboratório de Fitopatologia do Núcleo Temático de Controle Biológico (NTCB) da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia - CENARGEN no ano de 2005. Três isolados de C. gloeosporioides utilizados neste estudo (CEN 419, CEN 421 e CEN 433) foram obtidos a partir de amostras de folhas e frutos coletadas em supermercados e pomares do Distrito Federal (DF), enquanto um (CEN 422) foi gentilmente cedido pela UFRPE. Os isolados de Trichoderma são pertencentes à Coleção de Fungos para Controle Biológico de Fitopatógenos do CENARGEN. Os isolados C. gloeosporioides foram previamente avaliados quanto a patogenicidade, utilizando as progênies suscetíveis Yellow Master FB-100 e MAR#20-13, selecionando-se o isolado CEN 419 para uso em todos os experimentos. No primeiro experimento foram avaliadas 72 progênies de maracujazeiro-azedo quanto à resistência à antracnose, em casa-de-vegetação. Utilizou-se o delineamento em blocos casualizados, com quatro repetições e seis plantas por parcelas subdivididas. O patógeno foi cultivado em meio líquido e, os esporos coletados por centrifugação, foram usados no preparo de uma suspensão aquosa à concentração de 5 x 106 esporos/mL, a qual foi aspergida sobre ferimentos pré-estabelecidos com auxílio de escovas de aço de cerdas finas. As plantas, após a inoculação, foram mantidas sob temperatura entre 10 - 30°C e umidade de 60 -100% e avaliadas quanto à severidade (nota) e incidência (%) da doença aos 20 dias e, posteriormente, a intervalos de sete dias. Houve diferenças significativas entre as progênies na incidência de C. gloeosporioides ao longo das sete avaliações realizadas. No segundo experimento, avaliou-se o potencial antagônico de 20 isolados de Trichoderma spp. sobre o fungo C. gloeosporioides in vitro, selecionando-se nove isolados para testes in vivo. Nos testes realizados in vitro, utilizaram-se os métodos de cultivo pareado e de produção de metabólitos difusíveis, todos os isolados inibiram o crescimento do patógeno. Em casa-de-vegetação, o experimento foi disposto em blocos casualizados, com quatro repetições, sendo a repetição constituída de quatro sacos de polietileno (1, 5kg) num total de oito plantas por parcela. Neste ensaio foram usados 10 isolados de Trichoderma, quatro períodos distintos de inoculação, três épocas de avaliações e mais três testemunhas traduzido em arranjo fatorial 10 x 4 x 3 + 3. A eficiência dos isolados de Trichoderma para o controle da antracnose, foi testada nos seguintes períodos de inoculação: P1 = Trichoderma inoculado 24 horas antes do patógeno; P2 = Trichoderma inoculado 24 horas depois; P3 = Trichoderma inoculado simultaneamente com o patógeno; P4 = Trichoderma inoculado sete dias depois do patógeno e como controle, P5 = apenas Trichoderma; P6 = apenas Colletotrichum e P7 = apenas água destilada. Realizaram-se três avaliações, a primeira aos 12 dias após a inoculação e as demais, a intervalos de 12 dias. Avaliou-se, ainda, a ação dos isolados de Trichoderma sobre a massa fresca e seca da parte aérea e das raízes. O Período de aplicação simultânea foi onde se obteve maior índice de controle da antracnose. O isolado CEN 143 quando aplicado 24 horas depois do Colletotrichum e simultaneamente e os isolados CEN 151, CEN 280 e CEN 279 quando aplicados simultaneamente ao patógeno, proporcionaram os menores valores de severidade da antracnose em mudas de maracujazeiro-azedo. Com relação às testemunhas, observou-se que nas parcelas tratadas com o isolado CEN 151, houve um incremento no peso fresco da parte aérea. No terceiro experimento, foram realizados dois ensaios para avaliar o crescimento micelial e a esporulação de isolados C. gloeosporioides em meios líquidos. No primeiro, observou-se o comportamento de quatro isolados do fungo C. gloeosporioides, quanto ao crescimento e esporulação em diferentes meios líquidos. Cada tratamento foi repetido quatro vezes, em delineamento inteiramente casualizado, sendo o primeiro em esquema fatorial 4x3 (4 isolados e 3 meios) e segundo em esquema simples. Houve interação entre os meios e isolados na produção, tanto de conídios quanto de biomassa seca. Os isolados com maior produção de conídios foram CEN 419 e CEN 422, em meio de batata-dextrose (BD). Quanto ao rendimento de biomassa seca, também houve diferenças significativas entre meios, dependendo de isolado. No segundo ensaio, o desenvolvimento do isolado CEN 419 foi avaliado mediante 10 concentrações diferentes de extrato de levedura incorporadas ao meio BD. Houve diferença significativa para produção de biomassa seca, quanto à produção de conídios houve diferença significativa apenas entre os tratamentos 1 (BD) e 5 (0,4% extrato de levedura). _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Given the importance of the passion fruit crop, where Brazil is the leading world producer, the present work had the objective to evaluate the reaction of lineages of Sour Passionfruit (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg.) to the fungus Colletotrichum gloeosporioides (Penzig) Saccardo, and to evaluate isolates of Trichoderma spp. as biocontrol agents of anthracnose. With the aim of producing inoculum in sufficient quantities for the assays, experiments were performed, using liquid fermentation, with four isolates of the fungus. The work was developed in the Phytopathology section of the Biological Station of the University of Brasilia and in the Phytopathology Laboratory of the Biological Control Department of Embrapa Genetic Resources and Biotechnology Center - CENARGEN in 2005. Three isolates of C. gloeosporioides were used in this study (CEN 419, CEN 421 and CEN 433) which were originally obtained from leaves and fruits, collected in supermarkets and orchards in Federal District (DF), while one (CEN 422) was kindly donated by UFRPE. The isolates of Trichoderma were obtained from the Collection of Fungi for Biological Control of Phytopathogens at CENARGEN. The C. gloeosporioides isolates had been previously evaluated in their pathogenicity using the susceptible lineages Yellow Master FB- 100 and MAR#20-13, while the isolate CEN419, was selected for using in all experiments. In the first experiment, 72 lineages of sour passionfruit were evaluated for their resistance to anthracnose, in the greenhouse. A randomized-block design was used, with four replicates and six plants for each replicate. The pathogen was cultivated in liquid medium and the spores later collected by centrifugation. Aqueous suspensions were then prepared at 5 x 106 spores/ml which were applied to wounds previously established by abrasion with fine steel wire brushes. The inoculated plants were kept at 60 -100% humidity and evaluated as to the severity and incidence of disease 20 days and again, at intervals of 7 days. The lineages showed significant differences in their susceptibility to C. gloeosporioides in the seven evaluations. In a second experiment, the antagonistic potential of 20 Trichoderma spp. isolates against C. gloeosporioides was evaluated, in vitro and in vivo. In tests of diffusible metabolites and in plate confrontations, all the Trichoderma isolates inhibited the growth of the pathogen. The in vivo experiment was carried out in the greenhouse using a randomized block design, with 4 repetitions, whe re a repetition cons isted of 4 polyethylene bags (1.5kg) with 2 plants per bag, with a total of 8 plants per block. Four different periods of application of the isolates of Trichoderma for the control of anthracnose were tested: P1 = inoculated with Trichoderma 24 hours before the pathogen; P2 = inoculated with Trichoderma 24 hours after the pathogen; P3 = Trichoderma inoculated simultaneously with the pathogen; P4 = Trichoderma inoculated seven days after the pathogen and as control treatments; P5 = Trichoderma only; P6 = Colletotrichum only and P7 = distilled water only. Three evaluations were made, at intervals of 12 days. The action of the isolates of Trichoderma was expressed in terms of fresh and dry weights of the aerial plant parts and roots. P3 was found to be the period producing greatest of control of anthracnose. In comparison with controls, it was observed that in the plants treated with the Trichoderma isolate, CEN 151 had an increased growth of aerial parts. In the third experiment, two assays were carried out to evaluate the mycelial growth and sporulation of C. gloeosporioides isolates in liquid media. In the first test, the behavior of four isolates of C. gloeosporioides was observed for their growth and sporulation in different liquid media. Each treatment was repeated four times, in a randomized 4x3 block. There was a significant interaction between the particular isolates and different media in terms of quantity of conidia produced and dry biomass. The isolates with greatest production of conidia were CEN 419 and CEN 422, in potato-dextrose medium (BD). In the second assay, the development of isolate CEN 419 was evaluated in BD medium with the addition of ten different concentrations extract of yeast extract, again in relation to the production of conidia and dry biomass. A significant effect on production of dry biomass was observed. There was a significant difference in the production of conidia only between treatments 1 (BD) and 5 (0.4% yeast extract.
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Utilização sistêmica de Bacillus thuringiensis para controle de Plutella xylostella na cultura de couve

Balsamo, Rayane January 2009 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Texto parcialmente liberado pelo autor - sem capítulo 1, resultados e discussões. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-04-08T13:23:00Z No. of bitstreams: 1 2009_RayaneBalsamo.pdf: 2950463 bytes, checksum: c3c2f767f54d4e7b94255a48940eb6a1 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-04-19T18:40:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_RayaneBalsamo.pdf: 2950463 bytes, checksum: c3c2f767f54d4e7b94255a48940eb6a1 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-04-19T18:40:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_RayaneBalsamo.pdf: 2950463 bytes, checksum: c3c2f767f54d4e7b94255a48940eb6a1 (MD5) Previous issue date: 2009 / A traça-das-crucíferas (TDC) Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae) é a principal praga da cultura das crucíferas e o controle químico é o método mais empregado para reduzir os danos desta praga. Uma alternativa para o controle da P.xylostella é a utilização de agentes de controle biológico, como Bacillus thuringiensis (Bt). Seu uso ainda é restrito, quando comparado aos inseticidas químicos, pois quando aplicado nas folhas, o complexo esporo-cristal fica exposto à radiação solar e é rapidamente desnaturado ou é lavado pela ação das chuvas. A alternativa é o uso endifítico do Bt, que tem a mesma função, sem os limites derivados da baixa ação residual. Este trabalho teve como objetivo determinar o efeito do Bt sobre P. xylostella a partir da aplicação sistêmica da bactéria na planta de couve. Foi utilizado o Bacillus thuringiensis kurstaki marcado com GFP (Btk- GFP), pertencente ao banco de Bacillus spp. da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. A estirpe foi crescida por 72 h em meio nutritivo e inoculada perto da raiz das plantas para avaliar a sua atividade tóxica para nas lagartas de P. xylostella. Após a inoculação foram realizados bioensaios para a determinação da mortalidade das lagartas no terceiro instar. Os resultados obtidos mostraram que, a planta absorveu o Btk-GFP do solo e que este se multiplicou em seu interior, protegendo-a contra os insetos. É possível que esses experimentos preliminares estejam abrindo a possibilidade de uma nova forma de utilização de B. thuringiensis no controle de insetos. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The diamondback moth (DM) Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae) is the major pest of crucifer culture and the chemical control is the method most used to reduce its damage. An alternative to control this pest is the use of biological control agents, such as Bacillus thuringiensis (Bt). Its use is still limited when compared to chemical insecticides, because when applied in complex leaves the spore-crystal is exposed to solar radiation and is rapidly denatured or are "washed" by the action of rain. The alternative is the use of endophitic Bt that has the same function, without the limitation derived from low residual action. This study aimed to determine the effect of Bt on Plutella xylostella from the systemic application of the bacteria in the plant of cabbage. We used the GFP Bacillus thuringiensis kurstaki (Btk-GFP), belonging to the bank of Bacillus spp. at Embrapa Genetic Resources and Biotechnology. The strain was grown for 72 h in nutrient medium and inoculated near the roots of plants to evaluate their toxic activity to the larvae of P. xylostella. After inoculation bioassays were conducted to determine the mortality of the larvae in the third instar. The results showed that the plant absorbs the Btk-GFP from the ground and proliferates in the interior, protecting it against insects. It is possible that these preliminary experiments are opening the possibility of a new way of using B. thuringiensis to control insects.
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Bases ecológicas para o manejo de Bemisia tabaci (Genn.) biótipo B (Hemiptera: Aleyrodidae) em sistemas orgânicos de produção de tomate

Togni, Pedro Henrique Brum 03 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Ecologia, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2009. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-04-13T16:22:02Z No. of bitstreams: 1 2009_PedroHenriqueBrumTogni.pdf: 3570491 bytes, checksum: 0384bdcc97a6fd8478b97991da93546f (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-04-15T14:41:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_PedroHenriqueBrumTogni.pdf: 3570491 bytes, checksum: 0384bdcc97a6fd8478b97991da93546f (MD5) / Made available in DSpace on 2010-04-15T14:41:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_PedroHenriqueBrumTogni.pdf: 3570491 bytes, checksum: 0384bdcc97a6fd8478b97991da93546f (MD5) Previous issue date: 2009-03 / A mosca-branca Bemisia tabaci biótipo B é considerada uma das principais pragas do tomateiro por causar perdas de produtividade devido a danos diretos e pela transmissão de diversas viroses (Geminiviridae). As aplicações de inseticidas para seu controle têm se mostrado cada vez mais incipientes. Isso evidencia a necessidade de novas técnicas de manejo baseado nas interações ecológicas entre a mosca-branca e outros componentes bióticos e abióticos do agroecossistema do tomateiro. Em estudos anteriores o consórcio do tomateiro com coentro reduziu os níveis populacionais de B. tabaci, principalmente em sistemas orgânicos de produção. Porém, os mecanismos pelos quais o coentro pode afetar as populações de mosca-branca ainda não são evidentes. O objetivo deste trabalho é gerar bases científicas para o manejo ecológico de B. tabaci em cultivos de tomate orgânico a partir do consórcio tomate+coentro e do manejo do tipo de irrigação (gotejamento e aspersão). No capítulo 1, foi realizado um experimento em olfatômetro de múltipla escolha do tipo X para avaliar se B. tabaci é atraída pelos voláteis do tomateiro e como o coentro pode afetar esses padrões. Machos e fêmeas da mosca-branca foram atraídos pelos voláteis constitutivos do tomateiro, indicando que os infoquímicos têm um papel importante na seleção da planta hospedeira por este herbívoro. Entretanto, ao contrário do esperado, os voláteis constitutivos do coentro não foram repelentes para o inseto. Quando apresentados em conjunto com os voláteis do tomateiro houve uma redução na preferência pela escolha dos voláteis do tomateiro por B. tabaci. No capítulo 2, foi comparado em campo a flutuação populacional de B. tabaci biótipo B e a ocorrência de predadores e parasitóides em monocultivo de tomate e tomate consorciado com coentro, submetidos a irrigação por gotejamento e por aspersão em diferentes fases fenológicas do tomateiro. Adultos e ninfas de B. tabaci foram menos abundantes nos tratamentos consorciados com coentro, principalmente após as cinco primeiras semanas de amostragem e nos tratamentos irrigados por aspersão. Quanto aos inimigos naturais, foi verificada maior abundância e diversidade de espécies nos tratamentos com coentro, principalmente após a floração e quando irrigado por aspersão. O tipo de irrigação e o consórcio com o coentro afetaram de forma distinta a abundância de diferentes grupos de inimigos naturais como joaninhas, moscas predadoras e parasitóides. No capítulo 3, objetivou-se descrever os padrões espaciais de adultos de mosca branca no início do ciclo da cultura do tomateiro irrigado por aspersão ou gotejamento e plantado em monocultura ou em consórcio com coentro. A população inicial que colonizou os tomateiros apresentou um padrão agregado nos dois sistemas de irrigação na primeira semana de amostragem. No gotejamento esse padrão agregado se manteve ao longo do período de amostragem, enquanto que na aspersão o efeito mecânico da água sobre os indivíduos alterou a distribuição da população que passou a aleatória. O consórcio com o coentro reduziu a colonização da plantas de tomate por B. tabaci. As populações permaneceram agregadas principalmente nas parcelas de monocultivo de tomate, sendo mais evidente no gotejamento onde não há ação mecânica da água sobre os indivíduos. A dispersão do Begomovirus acompanhou a dispersão do vetor na área sendo observado um padrão agregado no gotejamento e aleatório na aspersão. Portanto, o consórcio tomate+coentro e a irrigação por aspersão afetaram a distribuição espacial de adultos de mosca-branca e a incidência de viroses associadas. Esses resultados reforçam a importância do plantio do coentro antes do transplante do tomateiro para o campo. Contudo, ainda são necessários novos trabalhos para identificar os voláteis produzidos pelas plantas e verificar a interação química entre estes e B. tabaci. Apesar de ser recomendado o plantio de tomate em sistemas irrigados por gotejamento devido à incidência de doenças, este trabalho demonstra que para mosca-branca a irrigação por aspersão pode ser mais favorável para seu controle e favorece a abundância e diversidade de inimigos naturais. Dessa forma, essas duas práticas culturais (consórcio tomate+coentro e tipo de irrigação) podem ser estratégias eficientes como medida preventiva para colonização, estabelecimento, distribuição e incidência de B. tabaci e Begomovirus em cultivos de tomate orgânico durante o período de baixa precipitação pluviométrica. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The whitefly Bemisia tabaci biotype B stands out, among the diverse community of pest herbivores that colonize the tomato crop, due to the direct damages and transmission of several pathogenic viruses (Geminiviridae) causing productivity losses. The spraying of insecticides for its control selects resistant populations and promotes the dispersion of adults to other cropped areas. This shows the necessity of new techniques based on knowledge of several ecological interactions relating the tomato and the biotic and abiotic components of tomato agroecosystem. Previous field observations showed that the intercropping of coriander and tomato crops together can reduce the population levels of B. tabaci, mainly in organic crop system. Therefore, how coriander can affect the whiteflies populations is unknown. The objective of this work was to generate new scientific bases for the ecological management of B. tabaci in organic tomato crop systems through intercropping with coriander and managing irrigation systems (sprinklers and drip). Chapter 1: A multiple-choice test in an olfactometer (X type) was conducted to evaluate if B. tabaci is attracted by the tomato volatiles and how the coriander volatiles can affect this pattern. Male and female of whiteflies were attracted by constitutive volatiles of tomato plants showing that these infochemicals have an important role in plant selection by this herbivore. However, on the contrary of what was expected, the constitutive volatiles of coriander alone were not repellent to the insect. Nonetheless, when exposed in a combination with tomato volatiles, there was a reduction in the preference of B. tabaci for tomato plants. Chapter 2: The dynamics of B. tabaci populations and the occurrence of predators and parasitoids in tomato monocultures and tomato-coriander bicultures, submitted to drip and sprinklers irrigation, were compared during different phenological stages of tomato plants. Adults and nymphs of B. tabaci were less abundant in the tomato-coriander biculture treatments, mainly after the five first weeks of sampling, and in the plots irrigated by sprinklers. Higher abundance and species diversity of natural enemies was observed in the treatments with coriander, mainly after its flowering and in the treatments under sprinklers irrigation. The irrigation management and the consortium with coriander affected distinctly the abundance of different groups of natural enemies, such as ladybeetles, predaceous flies, and parasitoids. This knowledge will be helpful in the conservation biological control of different tomato pests, and in different periods of the year. Chapter 3: The spatial distribution pattern of whitefly adults during the colonization period in tomato monoculture and the tomato-coriander biculture and irrigated by drip or sprinkler was described. The initial population that colonized tomato plants in the first sampling week showed a clumped pattern in both drip and sprinklers irrigation systems. The clumped population pattern remained in all sampling periods in the drip system. On the other hand, the mechanical effect of the water from sprinklers on the individuals changed the aggregation pattern from a clumped distribution to a random distribution. The tomato-coriander biculture reduced the plant colonization by B. tabaci compared to the monoculture. The adult population remained clumped, mainly in the plots of single cropped tomato, remaining more evident in plots with drip irrigation where there is no mechanical action of water on the adults. The dispersion of Begomovirus followed the vector dispersion in the area, and it was observed a clumped pattern under the drip irrigation and a random distribution pattern under the sprinklers irrigation. This way, the tomato-coriander biculture and the irrigation by sprinklers affected the spatial distribution of whitefly adults and the incidence of viruses. These results reinforce the importance of planting coriander before the tomato plant in order to diminish the colonization rate of whitefly and reduce the losses caused by disease. Additional studies are needed to identify the volatiles produced by plants and understand the chemical interactions of these volatiles and B. tabaci. Natural enemies specific against these species of whitefly should also be evaluated for population control. Instead of recommendations for irrigating tomato crop by drip system to reduce disease attack, this study showed that for whitefly control the sprinklers system is more efficient. This way, these two cultural practices can be efficient strategies as measures to prevent colonizing and establishing of B. tabaci and Begomovirus in organic tomato crops during the period of low incidence of rains.
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Patologia dos baculovírus : efeito da ação de enzimas heterólogas e análise da resposta transcricional do hospedeiro durante a infecção viral

Gramkow, Aline Welzel 13 August 2010 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2010. / Submitted by Shayane Marques Zica (marquacizh@uol.com.br) on 2011-07-08T19:29:27Z No. of bitstreams: 1 2010_AlineWelzelGramkowParcial.pdf: 2841617 bytes, checksum: 6d3e8691cd26e3d57ff5f9003c7d61c3 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-07-13T21:46:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_AlineWelzelGramkowParcial.pdf: 2841617 bytes, checksum: 6d3e8691cd26e3d57ff5f9003c7d61c3 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-13T21:46:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_AlineWelzelGramkowParcial.pdf: 2841617 bytes, checksum: 6d3e8691cd26e3d57ff5f9003c7d61c3 (MD5) / Os baculovírus compreendem o maior grupo de vírus de insetos estudados no mundo, principalmente pela eficiência em matar pragas da agricultura. Neste trabalho, três baculovírus recombinantes contendo os genes ScathL (Catepsina L) de Sarcophaga peregrina (vSynScathL), Kerat (Queratinase) do fungo Aspergillus fumigatus (vSynKerat) e Quit (Quitinase) do fungo Metarhizium anisopliae (vSynQuit) foram construídos e suas propriedades bioinseticidas analisadas em larvas de Spodoptera frugiperda. Bioensaios em larvas neonatas e de 3º ínstar de S. frugiperda infectadas com os baculovírus vSynScathL, vSynKerat e vSynQuit mostraram uma diminuição no tempo necessário para matar os insetos infectados quando comparado ao vírus selvagem. O vSynScathL apresentou uma TL50 e TD de 47 horas e 2,62 dias, respectivamente, enquanto o AcMNPV, uma TL50 de 136 horas e TD de 5,37 dias, respectivamente para larvas de S. frugiperda de 3º ínstar. Isso representa uma diminuição significativa de 65,5% para TL50 e 50,09% para TD, no tempo necessário para o vírus matar os insetos infectados quando comparado ao vírus selvagem. A TL50 e TD para o vírus vSynKerat foi de 91 horas e 3,70 dias, respectivamente, com uma redução de 32,8% para TL50 e 30,21% para TD, no tempo necessário para o vírus matar os insetos infectados quando comparado ao vírus AcMNPV. Já, o vírus recombinante vSynQuit apresentou uma TL50 de 110,67 horas, o que foi 23,6% menor do que o vírus selvagem (TL50 de 144,97). Já em larvas neonatas de S. frugiperda o vSynScathL mostrou uma TL50 de 77 horas comparado ao AcMNPV de 104 horas quando inoculado com 102 corpos de oclusão/nL, já o TD foi de 3,46 dias para o vírus recombinante e 4,16 dias para o AcMNPV. Isso representa uma redução de 26% na TL50 e 16,82% para TD no tempo necessário para matar os insetos infectados quando comparado ao vírus selvagem AcMNPV. A TL50 do vírus vSynKerat foi de 54 horas, com uma redução de xx 48% comparado ao vírus AcMNPV e o TD de 3,87 dias, reduzindo 6,97% no tempo necessário para matar os insetos; já a TL50 do vírus vSynQuit foi de 86 horas, com uma redução de 45,2% comparado ao vírus selvagem e o TD de 3,75 dias comparado com o vírus selvagem de 4,43 dias, representando uma redução de 15,34% no tempo necessário para matar os insetos. Também mostramos que os vírus vSynScathL e vSynKerat foram capazes de aumentar a atividade de fenoloxidase na hemolinfa de larvas de S. frugiperda em relação ao vírus selvagem e à larva não infectada. A expressão de proteases em larvas infectadas resulta na destruição dos tecidos internos em estágios tardios da infecção, podendo ser uma das razões para o aumento da velocidade para matar as larvas de S. frugiperda, como observado na microscopia eletrônica de varredura para os vírus vSynScathL e vSynKerat em relação ao vírus selvagem e à larva não infectada. O ensaio enzimático com quitina regenerada mostrou também uma diferença quitinolítica significativa em relação aos corpos de oclusão do vírus vSynQuit em comparação ao vírus selvagem. A transcrição de genes celulares em hemócitos derivados de larvas de Anticarsia gemmatalis infectados (12 h p.i.) pelos baculovírus Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) e/ou Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) também foram analisados neste trabalho pela técnica análise de diferença representacional (RDA). Os trancritos mais abundantes encontrados foram para proteases celulares, que estão provavelmente envolvidas na resposta do inseto à infecção viral. Outros genes, como por exemplo, hsp70 e hsc70, proteínas ribossomais, aminopeptidase, beta 1,3 glicanase, proteína induzida pelo hormônio juvenil, lipase também foram detectados. Todos esses transcritos podem de alguma maneira ter um papel na defesa celular e/ou estabelecimento da infecção viral. Para confirmação dos dados obtidos pela RDA, a transcrição do gene hsc70 foi analisada por PCR em tempo real e confirmou sua expressão diferencial. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Baculovirus comprise the largest group of insect viruses most studied worldwide, mainly because they efficiently kill agricutural insect pests. In this study, tree recombinant baculoviruses containing the ScathL gene (Cathepsin L) from Sarcophaga peregrina (vSynScathL), the Kerat gene (Keratinase) from the fungus Aspergillus fumigatus (vSynKerat) and Quit gene (Chitinase) from the fungus Metarhizium anisopliae (vSynQuit) were constructed and their insecticidal properties analysed against Spodoptera frugiperda larvae. Bioassays of third-instar and neonate S. frugiperda larvae with vSynScathL,vSynKerat and vSynQuit showed a decrease in the time needed to kill the infected insects when compared to the wild type virus. The vSynScathL showed LT50 and TD of 47 hours and 2.62 days respectively, while AcMNPV, a LT50 of 136 hours and TD of 5.37 days, respectively for third-instar S. frugiperda.larvae. This represents a significant decrease (from 65.5% for LT50 and 50.09% for TD) in the time required to kill the virus infected insects compared to wild virus. The LT50 and TD for vSynKerat was 91 hours and 3.70 days, respectively, showing also a reduction (32.8% for LT50 and 30.21% for TD), in the time required to kill the virus infected insects compared to AcMNPV. Also, the vSynQuit in another bioassay, showed a LT50 of 110.67 hours, which was 23.6% lower than the wild type virus (LT50 of 144.97 hours). Using neonate larvae of S.frugiperda, the vSynScathL showed a LT50 77 hours compared to 104 hours of AcMNPV when inoculated with 102 occlusion bodies/nL, since the TD was 3.46 days for the recombinant virus and 4.16 days for AcMNPV. This represents a 26% reduction in LT50 and 16.82% for TD compared to wild type virus AcMNPV. The LT50 of the virus vSynKerat was 54 hours with a 48% reduction compared to AcMNPV and in the TD of 3.87 days, 6.97%; with vSynQuit the LT50 was 86 hours, with a reduction of 45.2% compared to the wild virus and TD of 3.75 days compared with 4.43 days for wild type virus, a reduction of 15.34%. We have also shown that vSynScathL and vSynKerat were able to increase phenoloxidase activity in the hemolymph of S. frugiperda larvae compared with the wild type virus and with larvae not infected. The expression of proteases in infected larvae resulted in destruction of internal tissues late in infection, which could be the reason for the increased viral speed of kill, as observed in scanning electron microscopy for viruses vSynScathL and vSynKerat compared to the wild type virus and uninfected larvae. The enzyme assay with regenerated chitin also showed a significant chitinolytic difference with occlusion bodies of the vSynQuit compared to wild type virus . The transcription of cellular genes in hemocytes derived from infected larvae of Anticarsia gemmatalis (12 h p.i.) by Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) and/or Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) were also analyzed in this work by the representational difference analysis (RDA). Transcrits more abundants were cellular proteases, which are probably involved in insect response to viral infection. Other genes, such as hsc70 and hsp70, ribosomal proteins, aminopeptidase, beta 1.3 glucanase, protein induced by juvenile hormone, lipase were also detected. All of these transcripts can somehow play a role in cellular defense and/or establishment of viral infection. To confirm the data obtained by RDA, the hsc70 gene transcription was analyzed by real time PCR and confirmed their differential expression.
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Identificação e relações filogenéticas, potencial de uso de isolados de Trichoderma no controle do mofo branco e como promotores de crescimento do feijoeiro

Carvalho Filho, Magno Rodrigues de January 2013 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-09-25T14:21:10Z No. of bitstreams: 1 2013_MagnoRodriguesdeCarvalhoFilho.pdf: 3266869 bytes, checksum: af4ff8325e1cec5ab19c33e4b2982369 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2013-10-03T13:11:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_MagnoRodriguesdeCarvalhoFilho.pdf: 3266869 bytes, checksum: af4ff8325e1cec5ab19c33e4b2982369 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-03T13:11:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_MagnoRodriguesdeCarvalhoFilho.pdf: 3266869 bytes, checksum: af4ff8325e1cec5ab19c33e4b2982369 (MD5) / Trichoderma constitui um gênero de microfungos mundialmente distribuído na natureza. Nos solos, estão presentes como microorganismos de vida livre ou colonizando raízes de plantas. Podem também colonizar endofiticamente os tecidos vegetais, como simbiontes. Por apresentarem ação antagonista contra fitopatógenos, linhagens de diversas espécies desse gênero vem sendo estudadas como agentes de biocontrole de doenças de plantas, dentre as quais, o mofo branco, causado por Sclerotinia sclerotiorum, em diversas espécies vegetais. A caracterização molecular desse grupo de antagonistas tem grande importância, tanto em estudos de biodiversidade e distribuição das espécies, como na identificação de potenciais agentes de biocontrole, e de possíveis patógenos oportunistas a humanos, a exemplo de Trichoderma longibrachiatum. O objetivo desse trabalho foi identificar 148 isolados em nível de espécie, por sequenciamento das regiões ITS do DNA ribossomal e avaliar a biodiversidade desses isolados com referência à origem geográfica. Foi realizada seleção in vitro de isolados com potencial de biocontrole, os quais foram avaliados, em casa de vegetação, quanto à capacidade de supressão do mofo branco e como promotores de crescimento do feijoeiro. Os 29 isolados selecionados foram também submetidos à técnica de MALDI-TOF MS (Matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry), para confirmação das espécies, correlacionando esta técnica de identificação com a técnica molecular empregada. Filtrados de culturas do isolado CEN201, com potencial de inibição do crescimento micelial do patógeno supracitado, foram submetidos a técnicas de extração e purificação de metabólitos secundários. A capacidade de inibição do crescimento micelial de S. Sclerotiorum, por esses compostos, foi confirmada. No capítulo 1 são relatados resultados desses estudos, mostrando que 17,4% dos isolados apresentaram alto nível de antagonismos em pareamento de culturas e dois grupos apresentaram 83,3 a 88,9% de inibição micelial do patógeno por metabolitos não voláteis. Outro ponto ressaltado nesta pesquisa foi o índice de biodiversidade relativa aos 144 isolados de Trichoderma procedentes de sete estados brasileiros, que alcançou 0,076 com 11 espécies. Já o capítulo 2 relata a supressão do mofo branco com 19 dos 29 isolados selecionados in vitro no capítulo 1. Observou-se, também, promoção de crescimento de plantas de feijão com 7 isolados estudados. Foram ainda mostrados os resultados obtidos na identificação dos isolados por espectrometria de massa (MALDI-TOF MS). Esses resultados, confrontados com os dados obtidos na identificação molecular verificada no capítulo anterior, indicaram a convergência das duas técnicas, confirmando o potencial de MALDI-TOF MS como método rápido para identificação de espécies de Trichoderma. O capítulo 3 está focado nos estudos com metabólitos não voláteis produzidos pelo isolado CEN201 (T.asperellum). As técnicas utilizadas, Cromatografia líquida e MALDI-TOF MS possibilitaram, por homologia de massa/carga, inferir a presença de dois compostos com ação antibiótica, Asperelina B e Trichocompactina, no filtrado de culturas estudado. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Trichoderma composes a genus of microfungi distributed worldwide. In soil, these fungi may be present as free life or colonizing plant roots. Can also to colonize plant tissues endophytically like symbionts. Some species have been studied as biocontrol agents of plant diseases, among which, white mold caused by Sclerotinia sclerotiorum in several plant species. Their mechanisms of action include the production of secondary metabolites with antibiotic effect, mycoparasitism and competition for space and nutrients. The molecular characterization of this group of antagonists is very important, both in studies of biodiversity and species distribution and for identification of potential biocontrol agents, and possible opportunistic pathogens to humans like Trichoderma longibrachiatum. The aim of this study was to identify 148 the isolates of Trichoderma on species level by sequencing the ITS region of Ribossomal and to evaluate their biodiversity with reference to geographical originan. Was performed, in vitro, selection of isolates with potencial biocontrol, which were evaluated in greenhouse as the ability of white mold supression and as beans growth promoters. The 29 selected isolates were also subjected to the technique of MALDI-TOF MS (Matrix-assisted laser desorption / ionization-time of flight mass spectrometry) to confirm the species, correlating this technique in identification with molecular technique employed. Culture filtrates of isolate CEN 201, with potential to inhibit the mycelial growth of the pathogen above, were subjected to techniques of extraction and purification of secondary metabolites. The capacity of mycelial growth inhibition of S. Sclerotiorum by these compounds was confirmed. In chapter 1, are reported results of these studies showing that 17,4% of the isolates showed a high level of antagonism in pairing cultures and two groups showed 83,3 to 88,9% of inhibition of the pathogen by volatile metabolites. Another point emphasized in this study was the index of biodiversity on 144 Trichoderma isolates from seven Brazilian states, which reached 0,076 with 11 species. Already Chapter 2 reports the suppression of white mold with 19 of the 29 isolates selected in vitro in Chapter 1. It was observed, also, promote growth of bean plants with 7 isolates tested. Also shown are the results obtained by identification of the isolated mass spectrometry (MALDI-TOF MS). These results, compared with the data obtained in the molecular identification verified in the previous chapter showed the convergence of the two techniques, confirming the potential of MALDI-TOF MS as a rapid method for identification of Trichoderma species. The Chapter 3 is focused on studies of non-volatile metabolites produced by isolated CEN201 (T.asperellum). The techniques used, liquid chromatography and MALDI-TOF MS was enable, by homology mass/charge, to infer the presence of two compounds with antibiotic activity, Trichocompactin and Asperelin B in culture filtrates studied.
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Caracterização molecular e produção de biomassa de isolados do complexo de espécies Fusarium incarnatum-equiseti em diferentes substratos vegetais

LIMA, Isabela Janne de 25 February 2015 (has links)
Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-10T21:17:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Isabela Janne de Lima.pdf: 1419581 bytes, checksum: 76718044f85ed358745363990a3659ce (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-17T18:10:15Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Isabela Janne de Lima.pdf: 1419581 bytes, checksum: 76718044f85ed358745363990a3659ce (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-17T18:10:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Isabela Janne de Lima.pdf: 1419581 bytes, checksum: 76718044f85ed358745363990a3659ce (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / CNPq / A palma forrageira, adaptada ao semiárido nordestino, está sendo ameaçada pela cochonilha do carmim. Para seu combate, uma alternativa é o controle biológico com fungos entomopatogênicos produzidos em escala comercial. Para tanto, necessita-se de um grande número de conídios viáveis. Uma vez aplicada no campo para o controle de insetos, o monitoramento dos fungos pode ser feito com o uso de marcadores moleculares, como o Inter Simple Sequence Repeats (ISSR). Os objetivos deste trabalho foram selecionar substratos potenciais para produção de biomassa de isolados do complexo de espécies Fusarium incarnatum-equiseti (FIESC) induzindo a sua esporulação e germinação e caracterizar estes isolados por meio de marcadores moleculares. Foram utilizados cinco isolados do FIESC 20-b obtidos de Dactylopius opuntiae coletados em diferentes municípios de Pernambuco. Para o cultivo dos isolados foram utilizados grãos de arroz, grão de arroz + peptona 1%, quirela de milho, quirela de milho + peptona 1%, quirela de milho + extrato de levedura 1%, farinha de palma forrageira, farinha de palma forrageira + peptona 1%, farelo de trigo, farelo de trigo + peptona 1%, torta de mamona e torta de mamona + peptona 1%. A caracterização molecular foi feita utilizando nove primers de ISSR. Dos cinco isolados, os melhores para a produção massal foram URM6779 e URM6782 nos substratos: grãos de arroz, grãos de arroz + peptona (1%), quirela de milho e quirela de milho + peptona (1%). Os isolados selecionados foram cultivados em frascos Erlenmeyer contendo grãos de arroz + fungo e armazenados a 4 e 28ºC durante um período de 90 dias. A melhor temperatura de armazenamento foi a 4ºC e os conídios permaneceram viáveis até 90 dias. Os fungos mostraram-se eficientes no controle de D. opuntiae até 90 dias de armazenamento a 4ºC. Dentre os nove primers utilizados, dois (M13 e UBC849) diferenciaram os cinco isolados estudados, podendo ser utilizados no monitoramento destes fungos no campo. / The forage palm, adapted to the northeastern semi-arid, is being threatened by carmine cochineal. For its combat, an alternative is the biological control with entomopathogenic fungi produced in commercial scale. For this, a large number of viable conidia are needed. Once applied in the field for insect control, monitoring of fungi can be done using molecular markers such as the Inter Simple Sequence Repeats (ISSR). The objectives of this work were to select potential substrates for biomass production of Fusarium incarnatum-equiseti (FIESC) isolates, inducing their sporulation and germination and characterizing these isolates by means of molecular markers. Five FIESC 20-b isolates obtained from Dactylopius opuntiae collected in different municipalities of Pernambuco were used. For the cultivation of the isolates were used rice grains, rice grain + 1% peptone, corn kernel, corn kernel + 1% peptone, corn kernel + 1% yeast extract, forage palm meal, forage palm meal + 1% peptone, wheat bran, wheat bran + 1% peptone, castor cake and castor cake + 1% peptone. Molecular characterization was performed using nine ISSR primers. Of the five isolates, the best for mass production were URM6779 and URM6782 on the substrates: rice grains, rice + peptone (1%), corn kernel and corn kernel + peptone (1%). The selected isolates were grown in Erlenmeyer flasks containing rice grains + fungus and stored at 4 and 28 ° C for a period of 90 days. The best storage temperature was 4ºC and the conidia remained viable for up to 90 days. The fungi were efficient in controlling D. opuntiae up to 90 days of storage at 4ºC. Among the nine primers used, two (M13 and UBC849) differentiated the five isolates studied, and could be used to monitor these fungi in the field.
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Estudos biologicos e patologicos de dois piralideos pragas de produtos armazenados

Amaral Filho, Benedicto Ferreira do, 1946- 02 October 1986 (has links)
Orientador : Mohamed E.M. Habib / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:02:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AmaralFilho_BenedictoFerreirado_D.pdf: 9518484 bytes, checksum: f516cac3e812edab9c828b29de2e32b6 (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: O presente trabalho teve por objetivo estudos biológicos e patológicos de duas espécies de lepidópteros da família Pyralidae, pragas de produtos agrícolas armazenados. A biologia de Anagasta kuhniella (Zeller. 1879) e Plodia interpunctella (Hubner, 1813) foi estudada sob condições de 25 '+ ou '2 GRAUS'C, 70 '+ ou -' 10% U.R e 12 horas de fotofase. As larvas da primeira espécies foram alimentadas com dieta composta por farinha de trigo (80%) e farelo de trigo (20%), enquanto que as da segunda receberam a dieta CENA P-1. Para os estudos de patologia foram realizados esperimentos com Bacillus thuringiensis Berliner var. kurstaki (sorotipo H-3a:3b) em três formulações comerciais (Dipel , Bactospeine e Thuricide) e o isolado Zoocamp -78. Dados referentes ao tempo de duração e mortalidade natural de cada uma das fases evolutivas de cada espécie, assim como o peso médio dos indivíduos, capacidade reprodutiva e a razão sexual foram determinados. Através de parâmetros biológicos convencionais, tanto a dieta oferecida para larvas, como as condições de criação mostraram-se totalmente favoráveis à manutenção das criações dos dois piralídeos. O ciclo total de vida dos indivíduos não acasalados das duas espécies foi mais prolongado do que o dos indivíduos acasalados...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: During the present work, biological aspects and pathological approaches were investigated among two pyralid species. The biology of Anagasta kuhniella as well as that of Plodia interpuncella was studied under constant laboratory conditions of 25 '+ ou '2 GRAUS'C, 70 '+ ou -'10% and 12 hours of photoperiod. /the larvae of the first species were fed on a diet composed of wheat flour + wheat bran (4:1), while that of the second were fed on a special semi-artificial diet (CENA-P1). The development of the two species was investigated under the above mentioned conditions, obtaining data concerning egg stage (incubation period and viability) larval stage (duration time and natural mortality), pupal stage (duration time and viability), adult stage (sex ratio, longevity and reproductive capacity), in addition to the whole life cycle. Conventional biological indicators, revealed that the rearing conditions established in the present work, showed to be of great suitability for maintaining cultures od these two species in the laboratory. The whole life cycle of the unmted individuals lasted more than the mated ones, dues to the greater longevity of the unmated adults. It is probable that the longevity of mated adults in reduce due to the energy spent during the reproductive activities ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas
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Associação de isolados de Fusarium entomopatogênicos aos extratos de Caesalpinia pyramidalis e Ricinus communis visando o controle de Dactylopius opuntiae em Opuntia fícus-indica

SANTOS, Ana Carla da Silva 26 February 2015 (has links)
Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-04-15T18:47:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Ana Carla da Silva Santos.pdf: 1220601 bytes, checksum: c19f2246c1a397087c616725cfdd209c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-15T18:47:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Ana Carla da Silva Santos.pdf: 1220601 bytes, checksum: c19f2246c1a397087c616725cfdd209c (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / CNPQ / No Nordeste Brasileiro, a palma forrageira (Opuntia ficus-indica) é uma das principais espécies destinadas à alimentação de rebanhos animais, desempenhando importante papel econômico e social nas regiões áridas e semiáridas da região. A produtividade da cultura tem sido severamente ameaçada pelo ataque da cochonilha do carmim (Dactylopius opuntiae), sendo necessário investir em métodos que promovam o controle dessa praga. O controle de insetos por meio de fungos entomopatogênicos e extratos vegetais tem se mostrado eficiente e menos prejudicial à saúde das pessoas e dos ecossistemas. Alguns estudos indicam que esses métodos, quando utilizados em conjunto, podem ter sua ação inseticida potencializada. O presente trabalho teve como objetivos avaliar a compatibilidade entre extratos de catingueira (Caesalpinia pyramidalis) e mamona (Ricinnus communis) e isolados de Fusarium obtidos da cochonilha do carmim, visando a possibilidade de empregá-los juntos no controle do inseto; avaliar o efeito inseticida desses separadamente e em combinação contra a cochonilha do carmim em palma forrageira e confirmar a identidade dos isolados de Fusarium por meio do sequenciamento das regiões β-tubulina e TEF-1α do DNA. A identificação molecular revelou que os isolados de Fusarium utilizados pertencem ao Complexo de Espécies F. incarnatum-equiseti. De acordo com os resultados obtidos nos testes de compatibilidade, os isolados URM6776 e URM6778 associados aos extratos aquoso e hidroetanólico de R. communis nas concentrações de 5% e 10%, respectivamente, foram os mais indicados para estudo contra D. opuntiae. Para o extrato aquoso de C. pyramidalis, selecionou-se a concentração de 10% e os isolados URM6776 e URM6777, e para o extrato hidroetanólico, a concentração de 10% e os isolados URM6777 e URM6782. Quanto aos testes contra a cochonilha, bons valores de mortalidade corrigida foram observados para todos os tratamentos, variando de 61.23% (extrato de mamona aquoso a 5%) a 100% (Isolado URM6778 + extrato de mamona aquoso a 5%), tratamento que se revelou, em laboratório, o mais eficiente para o controle de D. opuntiae. Estudos com o intuito de testar a eficiência desses tratamentos em condições de campo, e de fornecer respostas quanto à segurança do uso dos mesmos devem ser conduzidos, visando disponibilizar alternativa eficiente para o controle da praga e não prejudicial ao ambiente e à saúde do produtor familiar e de sua criação. / In the Brazilian Northeast, the cactus Opuntia ficus-indica is a key species for feeding livestock, playing an important economic and social role in the arid and semi-arid areas of the region. The crop productivity has been severely threatened by the attack of cochineal Dactylopius opuntiae, being necessary to invest in methods to promote the control of the pest. The insect control using entomopathogenic fungi and plant extracts has been showing efficient and less harmful to human health and ecosystems. Some studies indicate that these methods, when used together, can have their insecticidal action strengthened. This study aimed to evaluate the compatibility among extracts of Caesalpinia pyramidalis e Ricinnus communis and isolates of Fusarium obtained from D. opuntiae, aiming to the possibility of use them together in insect control; to evaluate the insecticidal effect of these separately and in combination on D. opuntiae in O. ficus-indica and to confirm the identity of isolates of Fusarium by means of the sequencing of â-tubulin and TEF-1á regions of DNA. The molecular identification showed that the Fusarium isolates used belong to the species-complex F. incarnatum-equiseti. According the results obtained in compatibility testing, the URM6776 and URM6778 isolates combinated with aqueous and hydroethanol extracts of R. communis in concentrations of 5% and 10%, respectively, were the most suitable for study against D. opuntiae. To the aqueous extract of C. pyramidalis was selected concentration of 10% and URM6776 and URM6777 isolates, and to the hydroethanolic extract the concentration of 10% and URM6777 and URM6782 isolados. Regarding tests against cochineal, good corrected mortality values were obtained in all treatments, ranging from 61.23% (extracts aqueous of R. communis 5%) to 100% (isolated URM6778 + extracts aqueous of R. communis 5%) treatment that was revealed, under laboratory conditions, the most efficient in the control of D. opuntiae. Studies with the aim of test the effectiveness of these treatments under field conditions, and provide answers about the safety of their use should be conducted, with the purpose of provide efficient alternative to pest control and not harmful to the environment and to the health of family farmer and his breeding.
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Tephritidae (Diptera) associados a inflorescencias de compostos, com enfase em Eupatorium clematideum grisebach : aspectos taxonomicos, bionomicos e ecologicos

Rocha, Yara Valença da 02 December 1992 (has links)
Orientdor : Angelo Pires da Prado / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T04:15:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rocha_YaraValencada_M.pdf: 7031045 bytes, checksum: c2b1f1cb765241b26941946586469612 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: A familia Tephritidae, cujas espécies são intimamente associadas a plantas da família das asteráceas constitui-se, por esse motivo, um excelente objeto de estudo em várias áreas da biologia. Entretanto, o grande volume de dados existentes hoje diz respeito a espécies neárticas e paleàrticas. No Brasil, com raras exceções foram estudadas apenas as espécies frugivoras de interesse econômico. Assim, por consideramos importante o estudo da taxonomia desse grupo, demos início a um levantamento das espécies associadas a inflorescências de compostas, especialmente invasoras, a fim de obtermos um coleção razoável. Em coletas realizadas em 56 localidades, principalmente no Estado de São Paulo, obtivemos 3494 exemplares adultos, 302 pupários e 115 larvas de pelo menos 30 espécies distribuídas por nove gêneros de tefritídeos, associadas a plantas de, pelo menos, 38 espécies distribuídas em 7 tribos de compostas. Por ser o E. clematideum uma invasora facilmente encontrada em terrenos baldios próximos à Unicamp, foi escolhida para que se fizesse estudo em pouco mais aprofundado das formas associadas, o que foi feito em coletas realizadas no período de 28.02.84 a 14.03.85, com algumas interupções. Verificou-se, inicialmente, que as plantas, nas várias populações amostradas, durante todo o período, apresentaram capítulos nas várias fases de desenvolvimento que, arbitrariamente, classificamos em três: pré-floração e pós-floração. A predominância foi de capítulos na primeira fase ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The Terphiritidae species wich are closely associated with composites constitue an excellent subject of study . However, the grat amount of data available today concerns only to Nearctic and Palaearctic species. Moreover, in Brazil, only a few of the species related to fleshy fruits of economic importance were studied. In this work, collections were made of the most common weeds of Compositae to obtain adult diptera. In São Paulo State 56 localities were sampled and few in another States were visited. The total number resulted in 3494 imagoes, 302 puparia and 115 larva, soted into approximately 30 tephritid species associated to 38 weed species of 7 composite tribes. E. clematideum was the most intensively investigated because it is a very common weed, easily found in vacant lost nearby the campus, Barão Geraldo. From this location we have taken samples during the period between 02/28/84 till 03/14/85, with interruption in July and August, when we did not find flowering plants. Captulum phenology was investigated from 02/24 to 06/19 and from 09/26 to 12/06/84. Plants sample were taken weekly and the main developmental stages were arbitrarily fixed in three: pre-blooming, blooming and post-blooming. The samples were numbered and we found that there neads available for oviposition along the whole period ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ecologia / Mestre em Ciências Biológicas

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