Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-04-23Bitstream added on 2015-03-03T12:06:21Z : No. of bitstreams: 1 000807233_20150423.pdf: 130707 bytes, checksum: d1216633a769f5eba4ecf88e8223de6a (MD5) Bitstreams deleted on 2015-04-23T11:39:25Z: 000807233_20150423.pdf,Bitstream added on 2015-04-23T11:39:57Z : No. of bitstreams: 1 000807233.pdf: 3171399 bytes, checksum: 12fcf4cc4f2fcf5fbdcdccd0a49cbe2e (MD5) / A família Laelapidae Berlese (Mesostigmata: Dermanyssoidea) é cosmopolita e ocupa uma diversidade de habitats, onde seus hábitos podem variar de espécies de vida-livre a espécies associadas a artrópodes, mamíferos e pássaros. Algumas espécies dessa família, bem como os nematoides entomopatogênicos (NEP) têm demonstrado bom potencial como agentes de controle biológico. Frankliniella occidentalis (Pergande), uma das espécies mais importantes de tripes-praga, causa danos a várias plantas cultivadas, atuando como praga ou vetor de patógenos. Os objetivos desse estudo foram a preparação de um catálogo taxonômico para lelapídeos de vida-livre e associados a artrópodes, o estudo taxonômico de espécies de Laelapidae coletados no Brasil, a preparação de uma chave para gêneros de Laelapidae de vida livre e associados a artrópodes até o momento conhecidos da América do Sul, e avaliar os efeitos de diferentes espécies de lelapídeos e NEP como agentes de controle de F. occidentalis. Um total de 828 espécies pertencentes a 41 gêneros são relatados no catálogo. Nove espécies novas foram descritas e uma chave para gêneros de ocorrência na América do Sul de Laelapidae foi elaborada. Em testes de laboratório, Cosmolaelaps jaboticabalensis Moreira, Klompen & Moraes e Stratiolaelaps scimitus (Womersley) predaram aproximadamente 2,5 e 3,9 pré-pupa/pupa de F. occidentalis e ovipositaram aproximadamente 2,2 e 1,4 ovos por dia, respectivamente. Heterorhabditis amazonensis GL Andaló, Nguyen & Moino Jr. foi o nematoide mais virulento, causando a mortalidade de aproximadamente 87,5% das pre-pupas/pupas oferecidas. Nenhum dos predadores avaliados mostrou preferência por este nematoide como presa e nenhum dos NEP avaliados interferiram na sobrevivência dos predadores. Para C. jaboticabalensis, a fase imatura (ovo-adulto) foi completada em 12,3 ± 5; 6,6 ± 0,6 e 7,1 ± 0,6 em F. occidentalis, Protorhabditis sp. ... / The cosmopolitan Dermanyssoidea mite family Laelapidae Berlese occupies a diversity of habitats, where their habits vary from free-living to arthropod, mammal and bird associates. Some species of this family as well the entomopathogenic nematodes (EPN) have shown good potential as biological control agents. Frankliniella occidentalis (Pergande), one of the most important thrips pests, causes major damage to several cultivated plants, acting as pest or vector of pathogens. The aims of the study reported in this document were the preparation of a taxonomic catalog of the free-living and arthropod associated laelapid mites, the taxonomic study of the laelapid species collected in Brazil, the preparation of a key for the South American free-living and arthropod associated genera, and evaluations of the effect of different laelapid and EPN species as control agents of F. occidentalis. A total of 828 species of 41 genera are reported in the catalog. Nine new species were described and a key for the separation of genera reported in South America genus was prepared. In laboratory tests, Cosmolaelaps jaboticabalensis Moreira, Klompen and Moraes and Stratiolaelaps scimitus (Womersley) preyed upon about 2.5 and 3.9 pre-pupae/pupae of F. occidentalis and laid about 2.2 and 1.4 eggs per day, respectively. Heterorhabditis amazonensis GL Andaló, Nguyen and Moino Jr. was the most virulent nematode, producing mortality of about 87.5% of exposed pre-pupae/pupae. None of the evaluated predators showed preference for that nematode as prey and none of the evaluated nematodes interfered in the survivorship of the predators. For C. jaboticabalensis, total immature development (egg-adult) was completed in 12.3 ± 5, 6.6 ± 0.6 and 7.1 ± 0.6 on F. occidentalis, Protorhabditis sp. and T. putrescentiae, respectively. Fecundity and intrinsic rate of increase were higher on Protorhabditis sp. (71.6 ± 9.1 eggs/female; 0.28 female/female/day) than ...

Orientador: Sergio Antonio de Bortoli / Banca: Ricardo Antônio Polanczyk / Banca: Fernando Hercos Valicente / Banca: Daniel Junior de Andrade / Banca: Pedro Takao Yamamoto / Resumo: O objetivo desta pesquisa foi estudar algumas estratégias para o manejo de Helicoverpa armigera (Hübner) (Lep.: Noctuidae), como o uso de inseticidas químicos (clorantraniliprole, clorfenapir e zeta-cipermetrina) e biológicos (Bacillus thuringiensis kurstaki, Bacillus thuringiensis aizawai e VPN-HzSNPV), o uso do parasitoide de ovos Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae), além da compatibilidade entre estas ferramentas, em condições de laboratório. Para os testes de toxicidade foi avaliada a mortalidade das lagartas de segundo ínstar via ingestão e contato, e estimada a CL50, via ingestão, dos inseticidas. Por ingestão, todos os produtos testados, exceto VPN-HzSNPV, provocaram 100% de mortalidade. Por contato, os produtos clorfenapir e clorantraniliprole mataram 100% dos insetos. Clorfenapir matou as lagartas em menos tempo. Dentre os produtos químicos, zeta-cipermetrina foi o que demorou mais tempo para matar os insetos. Clorantraniliprole (0,00031 g i.a./L) e VPN-HzSNPV (0,001293 g i.a./L) apresentam os menores valores de CL50. Nos testes com T. pretiosum, comparados com Corcyra cephalonica (Staiton) (Lep.: Pyralidae), foi estudado o parasitismo, a emergência e o período de ovo a adulto, com 24 e 48 h de exposição do parasitoide aos ovos de H. armigera; a longevidade dos descendentes com 24 h de exposição; o parasitismo e a emergência em ovos de diferentes idades e diferentes dias de oviposição dos lepidópteros; e a preferência hospedeira. O parasitis... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this research was to study some strategies for Helicoverpa armigera (Hübner) (Lep.: Noctuidae) management, such as: chemicals (chlorantraniliprole, chlorfenapyr and zeta-cypermethrin) and biological insecticides use (Bacillus thuringiensis kurstaki, Bacillus thuringiensis azawai and VPN-HzSNPV), egg parasitoid Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae), in addition to the compatibility among these tools, under laboratory conditions. In the toxicity tests, the second instar larvae mortality was evaluated through insecticides ingestion and contact; the LC50 was estimated through ingestion. All products tested by ingestion caused 100% mortality, except VPN-HzSNPV. Chlorfenapyr and chlorantraniliprole killed 100% of the insects in the contact tests, and chlorfenapyr killed the larvae in less time. Among the chemicals, zeta-cypermethrin took longer to kill the insects. Chlorantraniliprole (0.00031 g a.i./L) and VPN-HzSNPV (0.001293 g a.i./L) had the lowest LC50 value. In the T. pretiosum tests, parasitism, emergence and egg-to-adult period with 24 and 48 h of parasitoid exposure to H. armigera eggs, offspring longevity with 24 h of exposure, parasitism and emergence in different egg ages and in eggs from different days of lepidopteran oviposition, and the host preference were studied and compared to Corcyra cephalonica (Staiton) (Lep.: Pyralidae). The parasitism was higher in C. cephalonica than H. armigera after 24 and 48 h of exposure (57.4% e 84.6%, respectively). When eggs laid in different days were used in C. cephalonica, the highest parasitism was on the second day (76.2%), and in H. armigera on the third one (71.1%). When different egg ages were used, the lowest parasitism was in C. cephalonica, with two-day-old eggs (63.3%) and H. armigera with three-day-old eggs (41.3%). In the test with chance of choice... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Antonio Carlos Busoli / Coorientador: Leila Luci Dinardo Miranda / Coorientador: Arlindo Leal Boiça Junior / Banca: Fernando Javier Sanhueza Salas / Banca: Ivan Antônio dos Anjos / Banca: Sergio Antonio De Bortoli / Banca: Raphael de Campos Castilho / Resumo: Considerada uma das principais pragas de Saccharum spp., Mahanarva spp. apresenta-se amplamente distribuídas nos canaviais das regiões tropicais. O ataque da cigarrinha das raízes causa severos danos às plantas. Apesar de terem grande importância no manejo integrado de pragas as informações sobre a resistência dos genótipos de Saccharum spp. à Mahanarva spp. são bastante escassas. No presente trabalho foram avaliados os tipos de resistência de sete genótipos Saccharum spp. em relação ao ataque de Mahanarva sp.1. O estudo foi realizado no Centro de Cana do Instituto Agronômico de Campinas em Ribeirão Preto - São Paulo em condições de laboratório. Foram realizados testes de antibiose, preferência para oviposição com e sem chance de escolha, preferência para alimentação com chance de escolha e tolerância. Nos testes de antibiose foram avaliadas a viabilidade e a duração da fase ninfal e a razão sexual dos adultos. No teste de preferência com chance de escolha foram avaliadas atratividade aos adultos, a intensidade dos danos e número de ovos. No teste de preferência sem chance de escolha foram avaliados o número de ovos. Nos testes de tolerância à ninfa e adulto foram avaliadas a intensidade dos danos e as perdas no teor de clorofila e biomassa. Alguns genótipos interferiram significativamente na sobrevivência ninfal, razão sexual e atratividade dos adultos e oviposição. A intensidade dos danos variou significativamente entre os genótipos. O genótipo IACBIO-195 expressa resistênc... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Mahanarva spp. is considered one of the major pests of Saccharum spp., as it is widely distributed in tropical regions. The spittllebug might cause severe damage to sugarcane. Despite the fact that studies focused on Saccharum spp. resistance to Manaharva spp. have a large importance, they still remain scarce. On this study, we evaluated the resistance of seven genotypes of Saccharum spp. to feeding damage of Mahanarva sp.1. The experiments were conducted at the Sugarcane Agronomic Institute of Campinas Center located in Ribeirão Preto, São Paulo State, Brazil. Under laboratory conditions we conducted bioassays to evaluate antibiosis; with and without feeding and oviposition preference tests and plant tolerance. For the antibiosis tests we checked for viability and duration of nymphs as well sex ratio of adults of Mahanarva sp.1. On the feeding and oviposition preference tests, adults attractiveness, damage intensity and number of eggs were recorded in a free choice condition. In tests with no choice, we assessed the number of eggs and the intensity of damage on each genotype. In order to evaluate the plant tolerance to Mahanarva sp.1 damage we evalulated the damage intensity and also losses in chlorophyll content and biomass. Some genotypes had a significant impact on the Mahanarva sp.1 nymphal survival, sex ratio and also adult attractiveness to feeding and oviposition. The intensity of the damage varied significantly. The IACBIO-195 genotype expressed resistance by antibio... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Gilberto José de Moraes / Coorientador: Antônio Carlos Busoli / Banca: Vanessa Andaló Mendes de Carvalho / Banca: Reinaldo José Fazzio Feres / Banca: Raphael de Campos Castilho / Banca: Daniel Junior de Andrade / Resumo: A família Laelapidae Berlese (Mesostigmata: Dermanyssoidea) é cosmopolita e ocupa uma diversidade de habitats, onde seus hábitos podem variar de espécies de vida-livre a espécies associadas a artrópodes, mamíferos e pássaros. Algumas espécies dessa família, bem como os nematoides entomopatogênicos (NEP) têm demonstrado bom potencial como agentes de controle biológico. Frankliniella occidentalis (Pergande), uma das espécies mais importantes de tripes-praga, causa danos a várias plantas cultivadas, atuando como praga ou vetor de patógenos. Os objetivos desse estudo foram a preparação de um catálogo taxonômico para lelapídeos de vida-livre e associados a artrópodes, o estudo taxonômico de espécies de Laelapidae coletados no Brasil, a preparação de uma chave para gêneros de Laelapidae de vida livre e associados a artrópodes até o momento conhecidos da América do Sul, e avaliar os efeitos de diferentes espécies de lelapídeos e NEP como agentes de controle de F. occidentalis. Um total de 828 espécies pertencentes a 41 gêneros são relatados no catálogo. Nove espécies novas foram descritas e uma chave para gêneros de ocorrência na América do Sul de Laelapidae foi elaborada. Em testes de laboratório, Cosmolaelaps jaboticabalensis Moreira, Klompen & Moraes e Stratiolaelaps scimitus (Womersley) predaram aproximadamente 2,5 e 3,9 pré-pupa/pupa de F. occidentalis e ovipositaram aproximadamente 2,2 e 1,4 ovos por dia, respectivamente. Heterorhabditis amazonensis GL Andaló, Nguyen & Moino Jr. foi o nematoide mais virulento, causando a mortalidade de aproximadamente 87,5% das pre-pupas/pupas oferecidas. Nenhum dos predadores avaliados mostrou preferência por este nematoide como presa e nenhum dos NEP avaliados interferiram na sobrevivência dos predadores. Para C. jaboticabalensis, a fase imatura (ovo-adulto) foi completada em 12,3 ± 5; 6,6 ± 0,6 e 7,1 ± 0,6 em F. occidentalis, Protorhabditis sp. ... / Abstract: The cosmopolitan Dermanyssoidea mite family Laelapidae Berlese occupies a diversity of habitats, where their habits vary from free-living to arthropod, mammal and bird associates. Some species of this family as well the entomopathogenic nematodes (EPN) have shown good potential as biological control agents. Frankliniella occidentalis (Pergande), one of the most important thrips pests, causes major damage to several cultivated plants, acting as pest or vector of pathogens. The aims of the study reported in this document were the preparation of a taxonomic catalog of the free-living and arthropod associated laelapid mites, the taxonomic study of the laelapid species collected in Brazil, the preparation of a key for the South American free-living and arthropod associated genera, and evaluations of the effect of different laelapid and EPN species as control agents of F. occidentalis. A total of 828 species of 41 genera are reported in the catalog. Nine new species were described and a key for the separation of genera reported in South America genus was prepared. In laboratory tests, Cosmolaelaps jaboticabalensis Moreira, Klompen and Moraes and Stratiolaelaps scimitus (Womersley) preyed upon about 2.5 and 3.9 pre-pupae/pupae of F. occidentalis and laid about 2.2 and 1.4 eggs per day, respectively. Heterorhabditis amazonensis GL Andaló, Nguyen and Moino Jr. was the most virulent nematode, producing mortality of about 87.5% of exposed pre-pupae/pupae. None of the evaluated predators showed preference for that nematode as prey and none of the evaluated nematodes interfered in the survivorship of the predators. For C. jaboticabalensis, total immature development (egg-adult) was completed in 12.3 ± 5, 6.6 ± 0.6 and 7.1 ± 0.6 on F. occidentalis, Protorhabditis sp. and T. putrescentiae, respectively. Fecundity and intrinsic rate of increase were higher on Protorhabditis sp. (71.6 ± 9.1 eggs/female; 0.28 female/female/day) than ... / Doutor

Orientador: Odair Aparecido Fernandes / Banca: Arlindo Leal Boiça Junior / Banca: Renato Assis de Carvalho / Resumo: Chrysodeixis includens (Walker) e Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) são consideradas pragas de grande importância na cultura da soja, enquanto Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera: Crambidae) é considerada importante na cultura do milho no Brasil Central. Para o controle bem-sucedido dessas pragas usando plantas Bt, bem como o desenvolvimento de estratégias do manejo de resistência, é essencial conhecer a movimentação do estágio larval desses insetos. O estudo foi conduzido dentro de gaiolas teladas (3,00 x 3,00 x 1,80 m), a fim de evitar infestações naturais. As lagartas foram liberadas em uma planta localizada no centro das gaiolas. As lagartas e as injurias foram observadas a fim de registrar a posição na planta e a localização na gaiola. Lagartas de C. includens e H. armigera apresentaram movimentação entre as plantas de soja, enquanto lagartas de D. saccharalis praticamente se mantiveram nas plantas onde houve a liberação. Com isso, a adoção de mistura de sementes não Bt e Bt para o estabelecimento de refúgio em cultivos Bt pode ser adequado apenas para D. saccharalis. / Abstract: Chrysodeixis includens (Walker) and Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) are considered pests of great importance in soybean crop, while Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera: Crambidae) is considered important in maize crop in the Brazilian Central region. For the successful control of these pests using Bt plants as well as development of resistance management strategies, it is essential to know the larval stage movement of these insects. The study was carried out inside saran cages (3.00 x 3.00 x 1.80 m), in order to avoid natural infestation. Larvae were released in a plant located in the center of the cages. Larvae and injuries were observed in order to register the position in the plant and the location in the cage. Larvae of C. includens e H. armigera moved between soybean plants, whereas D. saccharalis practically remained in the plants where they were released. Thus, the adoption of non-Bt and genetically modified seed mixture for refuge establishment in Bt crops may be suitable only for D. saccharalis. / Mestre

Orientador: Nilza Maria Martinelli / Coorientadora: Ana Lúcia Benfatti Gonzales Peronti / Banca: Ivan Antônio dos Anjos / Banca: arlindo Leal Boiça Junior / Resumo: As espécies de cochonilhas (Hemiptera: Coccomorpha) associadas a Saccharum spp. (Poaceae) nas diferentes regiões produtoras ao redor do mundo são distintas. Saccharicoccus sacchari (Cockerell, 1895) (Pseudococcidae) é uma espécie comum em praticamente todas as áreas, encontrada na maioria dos países onde a cana-de-açúcar é cultivada, sendo considerada uma praga importante no Havaí e na China. Para o estado de São Paulo, principal produtor brasileiro, que concentra as maiores áreas do cultivo, destacam-se Aclerda takahashii (Kuwana, 1932) (Aclerdidae) e S. sacchari. Entretanto, o pseudococcídeo tem sido relatado pelos produtores em altas infestações, juntamente com a ocorrência da doença da podridão vermelha em cana causada pelo fungo fitopatogênico Colletotrichum falcatum Went, 1893 (Glomerellales: Glomerellaceae). Este trabalho teve como objetivos: estudar a distribuição de A. takahashii e S. sacchari associadas à cana-de-açúcar no estado de São Paulo, além da sazonalidade das duas espécies de cochonilhas no município de Jaboticabal, SP; avaliar a hipótese de que a S. sacchari possa atuar como facilitadora da penetração do fitopatógeno C. falcatum, causador da doença da podridão vermelha, em cana-de-açúcar; e registrar a ocorrência de outras espécies associadas a Saccharum spp. O levantamento das cochonilhas foi realizado em áreas de plantio semi-mecanizado nos meses de junho, e entre agosto e dezembro de 2017, em localidades de 17 municípios; e a sazonalidade durante o perí... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The species of scale insects (Hemiptera: Coccomorpha) associated with Saccharum spp. (Poaceae) in the different producing regions around the world are distinct. Saccharicoccus sacchari (Cockerell, 1895) (Pseudococcidae) is a common species in practically all areas, found in most countries where sugarcane is grown and considered a major pest in Hawaii and China. For the state of São Paulo, the main Brazilian producer, which concentrates the largest crop areas, stand out Aclerda takahashii (Kuwana, 1932) (Aclerdidae) and S. sacchari. However, the pseudococcid has been reported by growers in high infestations, jointly with the occurrence of red rot disease in sugarcane caused by the phytopathogenic fungus Colletotrichum falcatum Went, 1893 (Glomerellales: Glomerellaceae). The objectives of this work were: to study the distribution of A. takahashii and S. sacchari associated to sugarcane in the state of São Paulo, as well as the seasonality of the two species of scale insect in the municipality of Jaboticabal, SP; to evaluate the hypothesis that S. sacchari can act as a facilitator of the penetration of the plant pathogen C. falcatum, which causes red rot disease in sugarcane; and, to record the occurrence of other species associated with Saccharum spp. The sampling of the scale insects was carried out in semi-mechanized planting areas in the months of June, and, between August and December of 2017, in localities of 17 municipalities; and the seasonality during a period of one ye... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Janete Apparecida Desidério / Coorientador: Odair Aparecido Fernandes / Banca: Maria Inês Tiraboschi Ferro / Banca: Juliana Regina Vieira da Costa / Resumo: A bactéria Bacillus thuringiensis (Bt) possui a capacidade de produzir inclusões protéicas (proteína Cry) e proteínas vegetativas (Vip). Estas proteínas podem ser tóxicas para insetos e por meio de transgenia, a expressão em plantas, podem também proporcionar controle de importantes pragas agrícolas. Nesse sentido, esta pesquisa teve por objetivo avaliar o potencial de controle das proteínas Cry1Aa, Cry1Ac, Cry1Ca, Vip3A(1), Vip3A(2) e Vip3A(3) em uma população brasileira da lagarta-da-maçã, Heliothis virescens (Lepidoptera: Noctuidae), bem como o efeito subletal e efeito sinérgico entre estas proteínas e a proteólise pelo suco do intestino do inseto praga em estudo. Para tanto, clones de Escherichia coli recombinantes portadores de genes únicos foram cultivados em meio para a indução das proteínas e os lisados obtidos foram utilizados para as análises de toxicidade por meio de bioensaios. Diferentes concentrações protéicas foram utilizadas para conduzir os bioensaios. A mortalidade foi avaliada e obteve-se a CL50. Desta forma, observou-se que, dentre as proteínas testadas, Cry1Ac (CL50 39,89 ng.cm-2), Vip3A(2) (CL50 945,77 ng.cm-2) e Vip3A(3) (CL50 874,45 ng.cm-2 ) foram as mais tóxicas e houve correlação negativa entre a concentração de proteínas e o peso das lagartas. Nos ensaios referentes ao efeito sinérgico das proteínas, ativadas e não ativadas com tripsina comercial, foram encontradas possíveis combinações eficientes no controle da praga em estudo destacando-se Vip3A(2)/Cry1Aa, Vip3A(1)/Cry1Aa, Vip3A(1)/Cry1Ac, e Vip3A(2)/Cry1Ac. Os resultados referentes à interação das enzimas digestivas do intestino de H. virescens com as toxinas Cry1 e Vip3A permitiram constatar que as proteínas são ativadas / Abstract: Bacillus thuringiensis (Bt) produces protein inclusions (Cry proteins) and vegetative proteins (Vip). Such proteins may act as toxic to some insects and through transgenesis plants they may be able to control important agricultural pests. Thus this work aimed to evaluate the control potential of Cry1Aa, Cry1Ac, Cry1Ca, Vip3A(1), Vip3A(2) and Vip3A(3) proteins in a Brazilian population of Heliothis virescens (tobacco budworm) (Lepidoptera: Noctuidae), as well as to analyze the sublethal and the synergic effects among these proteins and the proteolysis on the intestinal juice of this pest. In order to do this, Escherichia coli clones expressing each one of the above mentioned proteins were induced to produce them and the obtained lysates were used to determine the level of toxicity through bioassays with neonatal larvae of H. virescens. Different protein concentrations were used to carry out the bioassays. The mortality was evaluated and it was possible to detect the CL50. It was possible to observe that among the tested proteins, Cry1Ac (CL50 39.89 ng.cm-2), Vip3A(2) (CL50 945,77 ng.cm-2) and Vip3A (3) (CL50 874,45 ng.cm-2) were the most toxic and showed a negative correlation between the protein concentration and larvae weight. During the bioassays concerning the synergistic effect of these proteins, which were either previously activated or not using commercial trypsin, there we found efficient combinations for the control of the pest under study in this work, being that the combinations Vip3A(2)/Cry1Aa, Vip3A(1)/Cry1Aa, Vip3A(1)/Cry1Ac and Vip3A(2)/Cry1Ac were considered the best ones. The results with reference to the interaction of the digestive enzymes from the intestine of H. virescens larvae when using the toxins Cry1 and Vip3A allowed us to detect that these proteins are activated / Mestre

Orientador: Janete Apparecida Desidério / Banca: Odair Aparecido Fernandes / Banca: Agda Paula Facincani / Banca: Paula Cristina Brunini Crialesi Legori / Banca: Juliana Regina Rossi / Resumo: As proteínas Vip3Aa e Cry1Ia apresentam potencial no controle de lepidópteros-praga e surgem como alternativa promissora no manejo da resistência de pragas as proteínas Cry1A, que tem sido altamente utilizada na formulação de bioinseticidas comerciais à base de Bacillus thuringiensis (Bt) e em plantas transgênicas. Assim sendo, o presente trabalho teve como objetivo a clonagem e expressão das proteínas Vip3Aa42, Vip3Aa43 e Cry1Ia10 em Escherichia coli, a fim de se analisar a correlação entre a união aos receptores por meio de análises de competição entre as diferentes toxinas Vip3Aa e a toxina Cry1Ia10, e a toxicidade a lepidópteros-praga, inferindo-se quais as combinações que poderiam ser utilizadas na produção de plantas transgênicas, contendo múltiplos genes, as quais vêm sendo empregadas para contornar a evolução da resistência dos insetos às toxinas Bt. Para tanto, os genes vip3Aa e cry1Ia10 foram clonados no vetor pET SUMO, expressos em E. coli e a toxicidade das proteínas foram testadas em bioensaios com lagartas neonatas de Spodoptera frugiperda, Anticarsia gemmatalis e Heliothis virescens. As BBMVs ("Brush Border Membrane Vesicles") foram preparadas a partir dos intestinos das três espécies e ensaios de competição homóloga e heteróloga foram realizados. As proteínas Vip3Aa42 e Vip3Aa43 apresentaram toxicidade para S. frugiperda e A. gemmatalis. Já a proteína Cry1Ia10 apresentou toxicidade apenas para A. gemmatalis e, as proteínas não se mostraram tóxicas para H. virescens. Os ensaios de ligação às BBMVs demonstraram que as proteínas Vip3Aa42, Vip3Aa43 e Cry1Ia10 se unem aos receptores presentes no intestino médio de forma efetiva nas três espécies e que, portanto, houve correlação entre a toxicidade e a união aos receptores para as populações de S. frugiperda e A. gemmatalis, porém para H. virescens não houve relação entre a toxicidade e a união aos receptores. Sendo assim ... / Abstract: Vip3Aa and Cry1Ia proteins have potential in control of Lepidopteran pest and emerge as a promising alternative in the pest resistance management the Cry1A proteins, which has been highly used in the formulation of commercial insecticides based on Bacillus thuringiensis (Bt) and in transgenic plants. Therefore, this study aimed to cloning and expression of Vip3Aa42, Vip3Aa43 and Cry1Ia10 proteins in Escherichia coli, in order to analyze the correlation between the binding to receptors through competition assays between the different Vip3Aa toxins and toxin Cry1Ia10, and toxicity to lepidopteran pests inferring up which combinations that could be used to produce transgenic plants containing multiple genes, which have been used to circumvent the development of insects resistance to Bt toxins. Therefore, vip3Aa and cry1Ia10 genes were cloned into the pET SUMO vector, expressed in E. coli and toxicity of proteins were tested in bioassays with neonate larvae of Spodoptera frugiperda, Anticarsia gemmatalis and Heliothis virescens. The BBMVs (Brush Border Membrane Vesicles) were prepared from the gut of the three species, and homologous and heterologous competition assays were performed. The Vip3Aa42 and Vip3Aa43 proteins were toxic to S. frugiperda and A. gemmatalis. Already Cry1Ia10 protein showed toxicity only for A. gemmatalis and proteins were not toxic to H. virescens. Binding assays to BBMVs demonstrated that Vip3Aa42, Vip3Aa43 and Cry1Ia10 proteins binding effectively to receptors present in the midgut in three species and, therefore, was correlation between toxicity and the binding to receptors for the populations of S. frugiperda and A. gemmatalis, but for H. virescens there was no relationship between toxicity and the binding to receptors. Thus, the combination of Cry1Ia10 and Vip3Aa42 or Vip3Aa43 proteins is indicated for the production of biological insecticidal, as well as for the production of transgenic plants to circumvent ... / Doutor

Orientador: Regiane Cristina O de Freitas Bueno / Coorientador: Bruno Alexis Zachrisson Salamina / Banca: Ricardo Antonio Polanczyk / Banca: Paulo César Bogorni / Resumo: O parasitoide de ovos Telenomus podisi é um agente de controle biológico de Euschistus heros, e tem potencial de ser utilizado como ferramenta no programa de controle biológico aplicado deste inseto-praga, contribuindo para a adoção do MIP na cultura da soja. O percevejo-marrom, E. heros, é considerado uma das pragas-chave da cultura da soja e se alimenta diretamente das vagens afetando seriamente a produtividade. O controle da praga tem sido realizado pelo uso exclusivo de inseticidas sintéticos, muitas vezes de forma errônea e excessiva. Assim, objetivou-se avaliar a eficácia da liberação de diferentes quantidades de T. podisi para o controle de E. heros na cultura da soja. Os experimentos foram realizados em campos comerciais de produção de soja na safra 2017/18. Foram instaladas três áreas experimentais em localidades diferentes, sendo cada área composta por 25 ha. Os experimentos foram realizados em: Pardinho - SP na Fazenda Santa Fé, Tatuí - SP, Fazenda Dois Lagos e Angatuba - SP, Fazenda Santa Irene. O delineamento experimental foi blocos ao acaso com cinco tratamentos e cinco repetições. Foram realizadas três liberações em cada tratamento. Os tratamentos foram: T1 - 2.000 ovos, T2 - 3.500 ovos, T3 - 5.000 ovos, T4 - 6.500 ovos e T5 - testemunha sem liberação. A liberação dos parasitoides adultos foi manual e o caminhamento foi realizado no centro das parcelas formando uma circunferência de 15 metros de raio e as liberações concentraram-se na faixa central das parcelas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The egg parasitoid Telenomus podisi is a biological control agent of Euschistus heros and has the potential to be a tool in the biological control program applied for this insect pests, contributing to the adoption of IPM in the soybean crop. The brown stink bug, E. heros, is considered one of the key pests of soybean cultivation, and feeds directly from the pods seriously affecting productivity. The control of pest has been done exclusively by the use of chemical insecticides, often erroneously and excessively. Thus, the objective of this study was to evaluate the effectiveness of the release of different amounts of T. podisi for the control of E. heros in the soybean crop. The experiments were carried out in commercial fields of soy production in the 2017/18 harvest. Three experimental areas were installed in different locations, each area consisting of 25 ha. The experiments were carried out in: Pardinho - SP at Fazenda Santa Fé, Tatuí - SP, Fazenda Dois Lagos and Angatuba - SP, Fazenda Santa Irene. The experimental design was made in randomized blocks with five treatments and five replicates. Three releases were performed in each treatment. The treatments were: T1 - 2,000 eggs, T2 - 3,500 eggs, T3 - 5,000 eggs, T4 - 6,500 eggs and T5 - control without release. The release of the adult parasitoids was performed manually and the walking was in the center of the plots forming a circumference of 15 meters radius, concentrated in the central range of the plots considering the dispersion capacity of the T. podisi. The count of the nymphs and adults of the bedbug in each experimental area was performed with samplings using the cloth-of-beat method. In each plot, four zigzag walking samplings were performed, distributed in 20 points. The egg parasitoid, T. podisi has an effect on the control of the brown stink bug, reducing the number of individuals in relation to the control. However, only when ... / Mestre

Orientador: Janete Apparecida Desidério / Banca: Vivian Boter Bergamasco / Banca: Sonia Marli Zingaretti / Banca: Odair Aprecido Fernandes / Banca: Ana Maria Guidelli Thuler / Resumo: Este trabalho teve como objetivo estudar a toxicidade e a interação entre proteínas Cry1Ab, Cry1Ac, Cry2Aa, Cry2Ab e Vip3Aa em lagartas neonatas de Anticarsia gemmatalis, Chrysodeixis includens e Spodoptera frugiperda. Lisados das proteínas foram utilizados em bioensaios com lagartas neonatas para determinar a CL50 e CL90 das proteínas Cry1Ab, Cry1Ac, Cry2Aa, Cry2Ab e Vip3Aa e realizar experimentos histopatológicos. Ensaios de competição, entre as proteínas Cry1, Cry2 e Vip3 biotiniladas, foram realizados com as proteínas das vesículas de membrana da microvilosidade apical do intestino médio ("Brush Border Membrane Vesicles" - BBMV) das lagartas. Foi feita a purificação de receptores para toxina Cry1Ac a partir da BBMV de A. gemmatalis e C. includens por afinidade seguida da identificação das proteínas ligantes. As toxinas Cry1A e Cry2A demonstraram maior toxicidade para A. gemmatalis e C. includens que a proteína Vip3Aa, porém o inverso foi observado em S. frugiperda. As lagartas da espécie A. gemmatalis se mostraram mais suscetíveis as proteínas testadas do que as de S. frugiperda e C. includens. As espécies diferiram também quanto ao tipo de interação entre as toxinas. Enquanto para S. frugiperda e C. includens, as interações foram sinérgicas, para A. gemmatalis foram predominantemente antagônicas. As proteínas se uniram aos receptores presentes nas BBMV de S. frugiperda, A. gemmatalis e C. includens, permitindo inferir sobre a presença e ausência de comp... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work aimed to study the toxicity and interaction between Cry1Ab, Cry1Ac, Cry2Aa, Cry2Ab and Vip3Aa proteins in neonate larvae of Spodoptera frugiperda, Anticarsia gemmatalis and Chrysodeixis includens. Lysates containing proteins were used in bioassays for the determination of LC50 and LC90 of the Cry1Ab, Cry1Ac, Cry2Aa, Cry2Ab and Vip3Aa proteins. Histopathological experiments were realized with A. gemmatalis, C. includens (fed with Cry1Ac and Vip3Aa) and S frugiperda (fed with Cry1Ab and Vip3Aa). Competition assays, among biotinylated Cry1, Cry2 and Vip3 proteins, were performed with brush border membrane vesicles (BBMV) proteins from A. gemmatalis, C. includens and S. frugiperda. Purification of Cry1Ac receptors from A. gemmatalis and C. includens BBMV was performed by affinity followed by identification of binding proteins. The Cry1A and Cry2A toxins demonstrated higher toxicity to A. gemmatalis and C. includens than the Vip3Aa protein, but the inverse was observed to S. frugiperda. A. gemmatalis larvae were more susceptible as Cry and Vip proteins than as S. frugiperda and C. includens. Species differed about type of protoxins interaction. While for S. frugiperda and C. includens, the protoxins showed as synergistic interactions, for A. gemmatalis they were predominantly antagonistic. It was possible to infer about presence and absence of competition of the receptors in the BBMV from S. frugiperda, A. gemmatalis and C. includens. Histopathological changes as vacuolization and disruption were observed in the intestine from S. frugiperda larvae, fed with Cry1Ab and Vip3Aa and A. gemmatalis and C. includens, fed with Cry1Ac and Vip3Aa. Putative receptors were to identified from A. gemmatalis and C. includens to Cry1Ac toxin. The combination of Cry and Vip proteins, as well as helping to manage resistance and can increase toxicity through synergistic acti... (Complete abstract electronic access below) / Doutor