Submitted by Adriana Martinez (amartinez@unoeste.br) on 2017-09-22T18:22:04Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Adriano Falvo.pdf: 401706 bytes, checksum: 62cf14b1237c1f73ed1dcb3fc033dd57 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-22T18:22:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Adriano Falvo.pdf: 401706 bytes, checksum: 62cf14b1237c1f73ed1dcb3fc033dd57 (MD5) Previous issue date: 2017-06-28 / According to the World Health Organization (WHO), cigarette smoking accounts for 5 million annual deaths. Cigarette smoke causes malevolent effects in many other systems, including the male reproductive system and functional foods that may mitigate the toxic effects of cigarette smoking. The objective of the present study was to investigate the possible attenuating effects of prebiotic, probiotic and symbiotic oral supplementation on the testis and epididymis of growing rats exposed to cigarette smoke. To perform the present study, 72 male rats were randomly divided into eight groups: control; probiotic; Prebiotic (MOS); Symbiotic; Smoking Control; Prebiotic Tobacco; Probiotic Smoking; And Smoking Symbiotic. The animals in the smoking groups were exposed to cigarette smoke for one hour daily, divided into two 30-minute periods, five days a week. After the experimental period, the animals were anesthetized, sacrificed, the testes and epididymides were removed. Microscopic lesions were analyzed using the chi-square test, Fisher's exact test or G test at 5% significance. The results showed that the smoking groups had a higher prevalence of lesions in the testes and epididymis when compared to the control groups. Functional, prebiotic, probiotic, and symbiotic foods attenuated the harmful effects of chronic exposure to cigarette smoke in the testis and epididymis. The results allow us to state that functional, probiotic, prebiotic and symbiotic foods can attenuate the chronic harmful effects of passive smoking on the testis and epididymis of rats during the growth phase. / Segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS), o cigarro é responsável por 5 milhões de mortes anuais. A fumaça do cigarro causa efeitos maléficos em muitos outros sistemas, incluindo entre eles o sistema reprodutor masculino e alimentos funcionais podem atenuar os efeitos tóxicos do tabagismo. O objetivo do presente estudo foi o investigar os possíveis efeitos atenuadores da suplementação oral do prebiótico, probiótico e simbiótico sobre o testículo e epidídimo de ratos em fase de crescimento expostos à fumaça de cigarro. Para realização do presente estudo, foram utilizados 72 ratos machos, divididos aleatoriamente em oito grupos: controle; probiótico; prebiótico (MOS); Simbiótico; Controle Tabagista; Prebiótico Tabagista; Probiótico Tabagista; e Simbiótico Tabagista. Os animais dos grupos tabagistas foram expostos a fumaça de cigarro por uma hora diária, divididos em dois períodos de 30 minutos, cinco dias por semana. Após o período experimental, os animais foram anestesiados, sacrificados, os testículos e epidídimos foram retirados. As lesões microscópicas foram analisadas por meio do teste do qui-quadrado, teste exato de Fisher ou teste G a 5% de significância. Os resultados revelaram que os grupos tabagistas apresentaram uma maior prevalência de lesões nos testículos e epidídimo, quando comparados com os grupos controle. Os alimentos funcionais, prebiótico, probiótico e simbiótico, atenuaram os efeitos nocivos da exposição crônica a fumaça do cigarro no testículo e epidídimo. Os resultados obtidos nos permitem afirmar que os alimentos funcionais, probiótico, prebiótico e simbiótico, podem atenuar os efeitos crônicos nocivos do tabagismo passivo no testículo e epidídimo de ratos na fase de crescimento.

Xilooligossacarídeos (XOS) são produzidos a partir materiais lignocelulósicos contendo xilanos através de métodos químicos, hidrólise enzimática direta de um substrato susceptível à ação de xilanases e outras enzimas líticas, ou uma combinação de tratamentos químicos e enzimáticos. Os XOS são reconhecidos por trazerem benefício a saúde e são considerados ingredientes prebióticos. A utilização de resíduos agro-industriais produzidos no Rio Grande do Sul, tais como a casca de arroz, a casca de soja e o extrato de malte proveniente de cervejarias tornam-se substratos com grande potencial para a produção da enzima xilanase, principalmente em cultivo em estado sólido. Neste trabalho, foram analisados o potencial de diversos fungos selvagens e de um fungo recombinante na produção da enzima xilanase e outras enzimas importantes para a hidrólise de biomassa lignocelulósica, e a aplicação destes microrganismos para a produção de XOS em cultivos em estado sólido. Através de uma seleção de fungos foi possível definir o Aspergillus brasiliensis BLf1 como maior produtor de xilanase em cultivo sobre casca de arroz, obtendo atividade de 120,5 U.g-1 substrato. Nesta seleção foram analisadas também as enzimas celulase, β-glicosidase e β-xilosidase Um planejamento experimental fracionário 2(5-1) deste fungo selecionado e do fungo recombinante Aspergillus nidulans XynC A773 determinaram variáveis que influenciam a produção da enzima xilanase, chegando a uma atividade máxima de 230,7 U.g-1 para A. brasiliensis BLf1 e 187,9 U.g-1 para A. nidulans XynC A773. Posteriormente, estas preparações enzimáticas foram aplicadas à casca de arroz para hidrolisar sua estrutura hemicelulósica polimérica e obter xilolossacarídeos (37,25 mg de XOS.g-1 de substrato e 75,92 mg de XOS.g-1 de substrato, respectivamente). Por fim, foi avaliado o potencial prebiótico de XOS obtidos. Os resultados deste estudo revelaram o crescimento de L. plantarum BL011 e B. lactis BB-12 em XOS, com um aumento de massa celular seca de até 1,7 g.L-1 em 120h. Os resultados obtidos neste trabalho sugerem que é possível a obtenção de XOS a partir de resíduos abundantes no Estado e que os mesmos possuem potencial para serem utilizados como prebióticos, podendo, portanto, ser usados em aplicações relacionadas aos alimentos funcionais. / Xylooligosaccharides (XOS) are produced from lignocellulosic materials containing xylan by chemical methods, direct enzymatic hydrolysis of susceptible substrates using xylanases and other lytic enzymes, or a combination of chemical and enzymatic treatments. XOS are recognized for bringing benefit to health of the host and are considered prebiotic ingredients. The use of lignocellulosic residues produced in Rio Grande do Sul, such as rice husk, soybean hulls, and spent malt from brewery hold potential for the production of xylanase enzyme, especially under solid-state cultivation. In this work, several wild strains of fungi and one recombinant strain were tested for their potential of producing xylanase and their application in solid-state cultivation to obtain XOS. It was possible to define the Aspergillus brasiliensis BLf1 as the best producer of xylanase on rice husk, obtaining an activity of 120.5 U.g-1. Other important lytic enzymes were also analyzed: cellulase, β-glucosidase, and β-xylosidase The statistical experiment fractional factorial design 2(5-1) of cultures of this fungus and of the recombinant strain Aspergillus nidulans XynC A773 defined the variables that influenced the production of xylanase, showing maximal activities of 230.7 U.g-1 for A. brasiliensis BLf1 and 187.9 U.g-1 for A. nidulans XynC A773. Subsequently, these enzymatic preparations were applied to rice husk to hydrolyse its polymeric hemicellulosic structure and obtain xylooligosaccharides (37.25 mg XOS.g-1 substrate and 75.92 mg XOS.g-1 substrate, respectively). Finally, the prebiotic potential of XOS was evaluated by using them to grow L. plantarum BL011 and B. lactis BB-12, showing an increase in the dry cell mass of 1.7 g.L-1 at 120 hours. The results obtained in this research suggest that it is possible to obtain XOS from agro industrial residues of local production and they have the potential to be used as prebiotics, and could be used in food related applications.

Os objetivos deste trabalho foram avaliar a sobrevivência de cepas probióticas incorporadas em queijo petit-suisse potencialmente probiótico e simbiótico no produto armazenado por até 28 dias e em ensaios de sobrevivência in vitro frente às condições encontradas no trato gastrintestinal, utilizando-se métodos independentes de cultivo, paralelamente aos métodos convencionais de semeadura em ágar seletivo, bem como avaliar características tecnológicas dos queijos elaborados. O delineamento experimental constituiu-se de 3 tratamentos de queijo petit-suisse: QP = queijo probiótico (com cultura ABT-4, composta por Lactobacillus acidophilus LA-5 e Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB-12 e da cultura starter Streptococcus thermophilus); QS = queijo simbiótico, contendo os probióticos e prebióticos (cultura ABT-4 + inulina e fruto-oligossacarídeo) e QC = queijo controle, elaborado apenas com uma cultura starter de Streptococcus thermophilus. Os queijos foram armazenados a 4 ºC e as análises foram realizadas semanalmente, por 28 dias. A contagem dos micro-organismos probióticos foi realizada por técnicas independentes (qPCR) e dependentes de cultivo. Adicionalmente, foi monitorada a presença de contaminantes e avaliadas a aceitabilidade sensorial e a textura instrumental dos produtos ao longo de seu armazenamento. Os queijos petit-suisse apresentaram populações de L. acidophilus LA-5 e B. animalis BB-12 superiores a 7 log UFC/g, até o 28º dia de armazenamento. Em QS, observou-se maior estabilidade da população de L. acidophilus LA-5, ao longo do armazenamento e maior sobrevivência in vitro de B. animalis BB-12, até 14 dias de armazenamento (p < 0,05), com taxas médias de sobrevivência diminuindo de 88,0% (dia 1) para 59,6% (dia 28) em QS e de 80,0% (dia 1) para 59,8 (dia 28) em QP. Em contrapartida, para L. acidophilus LA-5, as taxas médias de sobrevivência diminuíram de 49,1% (dia 1) para 36,9% (dia 28) em QS e de 61,6% (dia 1) para 39,2% (dia 28) em QP, e foram maiores em QP nos dias 1 e 14 (p < 0,05). A adição de probióticos no queijo petit-suisse resultou em influência significativa nos parâmetros de textura, com uma diminuição da dureza, o que provavelmente contribuiu para maiores escores de aceitabilidade, nas formulações com probióticos (> 5,9), em relação ao produto controle (< 5,3). Adicionalmente, houve influência positiva da mistura prebiótica na aceitabilidade de QS (escore = 6,8), aos 21 dias de armazenamento (p < 0,05). Entre os métodos utilizados para a quantificação de micro-organismos, os valores obtidos através dos métodos convencional e qPCR foram semelhantes, porém observou-se uma tendência a superestimar a população dos micro-organismos, no método de qPCR. No ensaio de sobrevivência in vitro, observou-se valores semelhantes e um coeficiente de correlação de Pearson de 0,92 entre os método de qPCR com Propidium Monoazide (PMA) e convencional, para B. animalis subsp. lactis BB-12, enquanto que para L.acidophilus LA-5, os resultados mostraram-se promissores, particularmente na quantificação de células viáveis, porém não cultiváveis. Os resultados obtidos sugerem que a formulação QS foi a mais favorável em termos de estabilidade e sobrevivência dos probióticos, além de apresentar a melhor aceitabilidade aos 21 dias de armazenamento. Em relação aos métodos de quantificação, técnicas moleculares mostraram-se mais adequadas, particularmente com a utilização de PMA, embora requeiram otimizações. / This study aimed to evaluate the survival of probiotic strains incorporated into petit-suisse cheese in the product stored for up to 28 days and under in vitro gastrointestinal tract simulated resistance assay, using culture-independent and culture-dependent methods. Furthermore, sensory acceptability and instrumental texture of the cheeses studied were evaluated. Experimental design involved the evaluation of three trials of petit-suisse cheese, as follows: PC = probiotic cheese (with the ABT-4 culture, containing Lactobacillus acidophilus LA-5, Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB-12, and Streptococcus thermophilus, as starter culture), SC = synbiotic cheese, containing both the probiotics and the prebiotics (with the ABT-4 culture + inulin and fructooligosaccharides), and CC = control cheese (containing only the starter culture of Streptococcus thermophilus). Cheeses were stored at 4°C and the microbial counts in the products, as well as the in vitro survival assays were conducted weekly up to the 28th day. The probiotic counts in the product and in the in vitro assays were conducted through culture-independent (qPCR) and dependent methods. Additionally, the presence of contaminants was monitored and the sensory acceptability and instrumental texture of the products were evaluated during storage at 4°C. The petit-suisse cheeses presented L. acidophilus LA-5 and B. animalis BB-12 populations above 7 log CFU/g, up to the 28th day of storage. For SC, a higher L. acidophilus LA 5 population stability during the shelf-life and a higher B. animalis BB-12 in vitro survival up to 14 days of storage (p < 0.05) were observed. BB-12 presented mean survival rates decreasing from 88.0% (day 1) to 59.6% (day 28) in SC and from 80.0% (day 1) to 59.8% (day 28) in PC. In contrast, for L. acidophilus LA-5, the mean survival rates decreased from 49.1% (day 1) to 36.8% (day 28) in SC and from 61.6% (day 1) to 39.2% (day 28) in PC, which presented higher survival rate on days 1 and 14 (p < 0.05). The addition of probiotics in petit-suisse cheese influenced texture parameters significantly, leading to decreased hardness (p < 0.05), which probably contributed for the higher acceptability scores of both cheeses supplemented with probiotics (> 5.9), compared to the control product (< 5.3). Additionally, there was a positive influence of the prebiotic mixture on the SC acceptability (score = 6.8) on day 21 of storage (p < 0.05). Regarding the methods used for the enumeration of microorganisms, the results for the qPCR and the conventional method were quite similar. However, a trend towards overestimating microbial populations with the qPCR method was observed. For the in vitro survival assays, we observed similar results for the qPCR method with Propidium Monoazide (PMA) and the conventional method for B. animalis subsp. lactis BB-12 and a Pearson correlation coefficient of 0.92, whereas for L. acidophilus LA-5, the results were promising, especially in the quantification of viable, but not cultivable cells. The results suggest that the synbiotic cheese was the most favorable in terms of stability and probiotics survival, besides presenting the highest acceptance at 21 days of storage. Regarding quantification methods, molecular techniques have proved to be more suitable, particularly with PMA, but an optimization is required.

El presente trabajo ha sido dividido en tres estudios diferentes, en el primer estudio se evaluó la fermentación in vitro de diversos oligosacáridos por cuatro especies de bifidobacterias, mostrando que 4'-galactosil lactosa (4'-GOS) estimuló en mayor medida el crecimiento de las bacterias estudiadas, especialmente de B. breve y B. bifidum. En un segundo estudio, se evaluó la viabilidad de las bifidobacterias presentes en una fórmula comercial probiótica (B. bifidum y B. longum) durante un máximo de 14 días, mostrando que aunque el paso del tiempo redujo significativamente (p<0,05) los recuentos bacterianos, éstos se mantuvieron siempre por encima del nivel recomendado (106 células/g de producto). Posteriormente se estudió el efecto de ésta fórmula probiótica sobre la flora fecal infantil durante el primer año de vida. Los resultados mostraron que los recuentos no fueron significativamente (p<0,05) superiores a los del grupo control hasta tres meses después de estar tomando la fórmula probiótica (7 y 9 meses de edad). En el tercer estudio se elaboraron siete dietas experimentales (1 dieta probiótica, 3 prebióticas y 3 simbióticas) que fueron administradas a un total de 54 ratas recién destetadas durante 30 días, donde se evaluó el efecto de los probióticos (B. bifidum y B. longum) y prebióticos (4'-GOS) sobre la absorción de los minerales mediante un balance mineral realizado en tres periodos. El análisis factorial de los resultados observados reveló que el aumento en la absorción de Ca, Mg y Fe estuvo relacionado con el descenso del pH y el incremento en la proliferación del epitelio del colon. Igualmente, este estudio permitió relacionar el depósito en huesos (tibia y fémur) con la absorción y retención mineral, el pH en el contenido del ciego y colon y la proliferación del epitelio del colon. / The present work has been divided into three studies, in the first study the in vitro fermentation of some oligosaccharides by four species of bifidobacteria. It showed that 4'-gallactosyllactose (4'-GOS) estimulated more intensively the bacterial growth specially of B. breve and B. bifidum. In the second study, it was evaluated the viability of bifidobacteria presents in a commercial probiotic infant formula (B. bifidum and B. longum) during 14 days as maximum. The counts were decreasing significantly (p<0,05) with days. However, they were kept above the recommended level (106 cells/g of product). Later, it was studied the effect of the probiotic formula on infant fecal flora during the first year of life. The results showed that bifidobacteria fecal counts of probiotic formula fed infants were not significantly (p<0,05) larger than those of the control group until three months after consuming the probiotic formula (7 and 9 months of age). In the third study, a total of seven experimental diets were elaborated (1 probiotic, 3 prebiotics and 3 synbiotics diets) that were administered to 54 weanling rats during 30 days, and the effect of probiotics (B. bifidum and B. longum) and prebiotics (4'-GOS) added to the diet on mineral absorption by mineral balance of three periods was evaluated. The factorial analysis of the results exhibited that the increase of Ca, Mg and Fe absorption was related with the pH decrease and the increase of cell proliferation in the epithelium of the colon. Likewise, this study allowed relating the mineral content in bones (femur and tibia) with the mineral absorption and retention, pH of the content of the cecum and colon and the proliferation of the epithelium of colon.

A Salmonella é um dos mais importantes patógenos veiculados por alimentos. Dentre os sorotipos, a Salmonella Heidelberg (SH) vem se destacando nas monitorias dos plantéis avícolas devido ao fato de possuir um grande número de reservatórios, apresentar sorotipos inespecíficos quanto aos hospedeiros e possuir cepas multirresistentes aos antibacterianos. Aditivos Eubióticos, como probióticos e prebióticos vem sendo avaliados, não para substituir totalmente os antimicrobianos, mas para ser uma ferramenta estratégica para diminuir seu uso. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de dois probióticos e um prebiótico contra um desafio horizontal de Salmonella Heidelberg em frangos de corte, através da contagem de UFC/g de conteúdo cecal e sob os parâmetros zootécnicos. Foram utilizadas 224 aves, distribuídas em 16 boxes de 2m2 cada. As aves foram agrupadas em 4 tratamentos com 4 repetições de 14 aves por boxe, um total de 56 aves por grupo em um delineamento em blocos casualizado (DBC). Foi testado um prebiótico constituído por Mananoligossacarídeos (MOS) associado a um fermentado de Bacillus subtilis (Pre1) fornecido no 2º e 14º dias de idade, por gavagem oral, e mais dois probióticos, um constituído por 11 cepas de Lactobacillus (Pro1) fornecido no 1º, 17º e 18º dias, na água de bebida, e outro constituído de esporos de Bacillus subtilis (Pro2) fornecido na ração durante todo período experimental. A inoculação de SH foi aos 2 dias de idade usando (1,0x106 UFC/ave) por gavagem oral em 4 aves denominadas contaminadas por boxe, as demais 10 aves foram denominadas não contaminadas para avaliar a contaminação horizontal. Semanalmente as aves foram pesadas e calculado seu consumo de ração em cada grupo. Aos 28 dias de idade, 40 aves não contaminadas por grupo foram sacrificadas e avaliado a contagem de UFC/g do conteúdo cecal. Os resultados obtidos nas contagens de UFC/g de conteúdo cecal em cada tratamento Pre1, Pro1 e Pro2 não apresentaram diferenças significativas (P>0.05) em relação ao grupo controle. O resultado zootécnico apresentou apenas diferenças significativas (P<0.05) na conversão alimentar, com resultados favoráveis ao uso dos probióticos e prebiótico nos períodos finais de desenvolvimento das aves 14 a 21 e 21 a 28 dias de idade. / Salmonella is one of the leading foodborne pathogens. Among the serotypes, Salmonella Heidelberg (SH) has been standing out in the creation of chickens because of the fact of having a large number of reservoirs, presenting nonspecific serotypes and multidrug-resistant strains to antibacterial. Eubiótics additives such as probiotics and prebiotic are being evaluated not to fully replace antibiotics, but to be a strategic tool to reduce their use. This study aimed to evaluate the effect of two probiotics and prebiotic against a horizontal challenge Salmonella Heidelberg in broilers through count CFU/g of cecal contents and under the zootechnical parameters. 224 chickens were used, distributed in 16 boxes of 2m2 every. The chickens were grouped into 4 treatments with 4 replications of 14 chickens every boxe, a total of 56 chickens per group on a design in casualized blocks (DBC). It has been tested a prebiotic consisting mananoligossacarids (MOS) associated with a fermentation of Bacillus subtilis (Pre1) provided on the 2 and 14 days of age by oral gavage, and two probiotics, one composed of 11 Lactobacillus strains (Pro1) provided at 1, 17 and 18 days, in drinking water, and another composed of Bacillus subtilis spores (Pro2) supplied the feed all through the experimental period. Inoculation with SH was at 2 days of age using (1,0x106 UFC/chicken) by oral gavage for 4 chicks denominated contaminated by boxe, the other 10 chicks were denominated non contaminated to evaluate the horizontal contamination. The chickens were weighed a weekly basis, and feed consumption calculated from each group. At 28 days of age, 40 poultry non contaminated per group were sacrificed and we evaluated the counts CFU/g of cecal content. The results obtained for the count of CFU/g of cecal content in every Pre1 treatment, Pro1 and Pro2 no significant differences (P>0.05) compared to the control group. The zootechnical results presented only significant differences (P<0.05) feed conversion, with results favorable to the use of probiotics and prebiotics in late periods of growth of the poultry 14 to 21 and from 21 to 28 days.

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da utilização de níveis crescentes do prebiótico mananoligossacarídeo (MOS) em juvenis de tilápia do Nilo sob os parâmetros de desempenho e morfologia intestinal. O estudo foi conduzindo no lago da Usina Hidrelétrica de Salto Caxias, no rio Jacutinga, localizada no município de Boa Vista da Aparecida, no estado do Paraná, na área experimental da Universidade Estadual do Oeste do Paraná (Unioeste). Foram utilizados 20 juvenis de tilápia-do-Nilo com peso inicial 12,62 g, em cada gaiola, totalizando 16 gaiolas de 0,25 m3 cada. As gaiolas foram distribuídas em tanques rede de 4 m3 (quatro gaiolas por tanque-rede) compondo um delineamento inteiramente casualizado, com quatro tratamentos, 0,0; 0,2; 0,4 e 0,8% de inclusão de MOS na dieta e quatro repetições. A alimentação foi realizada quatro vezes ao dia, até a aparente saciedade, durante 60 dias. Ao final de 30 e 60 dias de cultivo foram realizadas biometrias para cálculo dos índices de desempenho e coleta de material para análise histológica do intestino. Os parâmetros de qualidade da água se mantiveram dentro dos valores de referência para a espécie. O consumo de ração aos dias de experimento foi maior (P<0,05) nos peixes suplementados com 0,4% quando comparados ao grupo controle. Aos 30 dias de experimento, peixes alimentados com 0,4% de MOS na dieta apresentaram maior (P<0,05) altura das vilosidades intestinais e, aos 60 dias, peixes alimentados com a dieta controle apresentaram maior (P<0,05) altura das vilosidades intestinais. No entanto os parâmetros de desempenho não foram significativamente afetados pela adição de MOS a dieta. No presente trabalho, uso estratégico de prebióticos durante o ciclo de produção abre perspectivas promissoras na modulação das características morfológicas do intestino, apesar de não ter influenciado no crescimento de juvenis de tilápia-do Nilo. / The present study has as an objective to analyze the effect of using crescent levels of prebiotic mananoligosaccharides (MOS) in Nile tilapia juveniles, according to the parameters of performance and intestinal morphology. The study was done at Salto Caxias hydroelectric plant lake, Jacutinga river, located in Boa Vista da Aparecida city, state of Paraná, experimental area of UNIOESTE – Universidade Estadual do Oeste do Paraná. An amount of 20 Nile tilapia juveniles were used, with 12,62 g initial weight, in each cage, being 16 0,25-cubic-meter cages. The cages were distributed in 4-cubic-meter tanks (four cages in each tank) generating a randomized lineation, with four species of treatments, 0,0; 0,2; 0,4 and 0,8% of MOS inclusion in diet and four repetitions. The feeding process happened four times a day, until apparent satiety, for 60 days. After 30 and 60 days, biometry was done to calculate performance levels and to analyze intestinal histology. The parameters of water quality were kept within reference values for the species. The consumption of ration during the experiment days was higher (P<0,050) for fish supplemented with 0,4% when compared to the control group. After 30 days of the onset, fish fed with 0,4% of MOS in their diet presented higher (P<0,05) intestinal villi and, after 60 days, fish fed with control diet presented higher (P<0,05) intestinal villi. However, the parameters of performance were not significantly affected by the addition of MOS to the diet. In the present study, strategic use of prebiotics during the production cycle brings up promising perspectives to modulate morphological features of the intestine, although it did not influence the growth of Nile tilapia juveniles.

A Salmonella é um dos mais importantes patógenos veiculados por alimentos. Dentre os sorotipos, a Salmonella Heidelberg (SH) vem se destacando nas monitorias dos plantéis avícolas devido ao fato de possuir um grande número de reservatórios, apresentar sorotipos inespecíficos quanto aos hospedeiros e possuir cepas multirresistentes aos antibacterianos. Aditivos Eubióticos, como probióticos e prebióticos vem sendo avaliados, não para substituir totalmente os antimicrobianos, mas para ser uma ferramenta estratégica para diminuir seu uso. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de dois probióticos e um prebiótico contra um desafio horizontal de Salmonella Heidelberg em frangos de corte, através da contagem de UFC/g de conteúdo cecal e sob os parâmetros zootécnicos. Foram utilizadas 224 aves, distribuídas em 16 boxes de 2m2 cada. As aves foram agrupadas em 4 tratamentos com 4 repetições de 14 aves por boxe, um total de 56 aves por grupo em um delineamento em blocos casualizado (DBC). Foi testado um prebiótico constituído por Mananoligossacarídeos (MOS) associado a um fermentado de Bacillus subtilis (Pre1) fornecido no 2º e 14º dias de idade, por gavagem oral, e mais dois probióticos, um constituído por 11 cepas de Lactobacillus (Pro1) fornecido no 1º, 17º e 18º dias, na água de bebida, e outro constituído de esporos de Bacillus subtilis (Pro2) fornecido na ração durante todo período experimental. A inoculação de SH foi aos 2 dias de idade usando (1,0x106 UFC/ave) por gavagem oral em 4 aves denominadas contaminadas por boxe, as demais 10 aves foram denominadas não contaminadas para avaliar a contaminação horizontal. Semanalmente as aves foram pesadas e calculado seu consumo de ração em cada grupo. Aos 28 dias de idade, 40 aves não contaminadas por grupo foram sacrificadas e avaliado a contagem de UFC/g do conteúdo cecal. Os resultados obtidos nas contagens de UFC/g de conteúdo cecal em cada tratamento Pre1, Pro1 e Pro2 não apresentaram diferenças significativas (P>0.05) em relação ao grupo controle. O resultado zootécnico apresentou apenas diferenças significativas (P<0.05) na conversão alimentar, com resultados favoráveis ao uso dos probióticos e prebiótico nos períodos finais de desenvolvimento das aves 14 a 21 e 21 a 28 dias de idade. / Salmonella is one of the leading foodborne pathogens. Among the serotypes, Salmonella Heidelberg (SH) has been standing out in the creation of chickens because of the fact of having a large number of reservoirs, presenting nonspecific serotypes and multidrug-resistant strains to antibacterial. Eubiótics additives such as probiotics and prebiotic are being evaluated not to fully replace antibiotics, but to be a strategic tool to reduce their use. This study aimed to evaluate the effect of two probiotics and prebiotic against a horizontal challenge Salmonella Heidelberg in broilers through count CFU/g of cecal contents and under the zootechnical parameters. 224 chickens were used, distributed in 16 boxes of 2m2 every. The chickens were grouped into 4 treatments with 4 replications of 14 chickens every boxe, a total of 56 chickens per group on a design in casualized blocks (DBC). It has been tested a prebiotic consisting mananoligossacarids (MOS) associated with a fermentation of Bacillus subtilis (Pre1) provided on the 2 and 14 days of age by oral gavage, and two probiotics, one composed of 11 Lactobacillus strains (Pro1) provided at 1, 17 and 18 days, in drinking water, and another composed of Bacillus subtilis spores (Pro2) supplied the feed all through the experimental period. Inoculation with SH was at 2 days of age using (1,0x106 UFC/chicken) by oral gavage for 4 chicks denominated contaminated by boxe, the other 10 chicks were denominated non contaminated to evaluate the horizontal contamination. The chickens were weighed a weekly basis, and feed consumption calculated from each group. At 28 days of age, 40 poultry non contaminated per group were sacrificed and we evaluated the counts CFU/g of cecal content. The results obtained for the count of CFU/g of cecal content in every Pre1 treatment, Pro1 and Pro2 no significant differences (P>0.05) compared to the control group. The zootechnical results presented only significant differences (P<0.05) feed conversion, with results favorable to the use of probiotics and prebiotics in late periods of growth of the poultry 14 to 21 and from 21 to 28 days.

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da utilização de níveis crescentes do prebiótico mananoligossacarídeo (MOS) em juvenis de tilápia do Nilo sob os parâmetros de desempenho e morfologia intestinal. O estudo foi conduzindo no lago da Usina Hidrelétrica de Salto Caxias, no rio Jacutinga, localizada no município de Boa Vista da Aparecida, no estado do Paraná, na área experimental da Universidade Estadual do Oeste do Paraná (Unioeste). Foram utilizados 20 juvenis de tilápia-do-Nilo com peso inicial 12,62 g, em cada gaiola, totalizando 16 gaiolas de 0,25 m3 cada. As gaiolas foram distribuídas em tanques rede de 4 m3 (quatro gaiolas por tanque-rede) compondo um delineamento inteiramente casualizado, com quatro tratamentos, 0,0; 0,2; 0,4 e 0,8% de inclusão de MOS na dieta e quatro repetições. A alimentação foi realizada quatro vezes ao dia, até a aparente saciedade, durante 60 dias. Ao final de 30 e 60 dias de cultivo foram realizadas biometrias para cálculo dos índices de desempenho e coleta de material para análise histológica do intestino. Os parâmetros de qualidade da água se mantiveram dentro dos valores de referência para a espécie. O consumo de ração aos dias de experimento foi maior (P<0,05) nos peixes suplementados com 0,4% quando comparados ao grupo controle. Aos 30 dias de experimento, peixes alimentados com 0,4% de MOS na dieta apresentaram maior (P<0,05) altura das vilosidades intestinais e, aos 60 dias, peixes alimentados com a dieta controle apresentaram maior (P<0,05) altura das vilosidades intestinais. No entanto os parâmetros de desempenho não foram significativamente afetados pela adição de MOS a dieta. No presente trabalho, uso estratégico de prebióticos durante o ciclo de produção abre perspectivas promissoras na modulação das características morfológicas do intestino, apesar de não ter influenciado no crescimento de juvenis de tilápia-do Nilo. / The present study has as an objective to analyze the effect of using crescent levels of prebiotic mananoligosaccharides (MOS) in Nile tilapia juveniles, according to the parameters of performance and intestinal morphology. The study was done at Salto Caxias hydroelectric plant lake, Jacutinga river, located in Boa Vista da Aparecida city, state of Paraná, experimental area of UNIOESTE – Universidade Estadual do Oeste do Paraná. An amount of 20 Nile tilapia juveniles were used, with 12,62 g initial weight, in each cage, being 16 0,25-cubic-meter cages. The cages were distributed in 4-cubic-meter tanks (four cages in each tank) generating a randomized lineation, with four species of treatments, 0,0; 0,2; 0,4 and 0,8% of MOS inclusion in diet and four repetitions. The feeding process happened four times a day, until apparent satiety, for 60 days. After 30 and 60 days, biometry was done to calculate performance levels and to analyze intestinal histology. The parameters of water quality were kept within reference values for the species. The consumption of ration during the experiment days was higher (P<0,050) for fish supplemented with 0,4% when compared to the control group. After 30 days of the onset, fish fed with 0,4% of MOS in their diet presented higher (P<0,05) intestinal villi and, after 60 days, fish fed with control diet presented higher (P<0,05) intestinal villi. However, the parameters of performance were not significantly affected by the addition of MOS to the diet. In the present study, strategic use of prebiotics during the production cycle brings up promising perspectives to modulate morphological features of the intestine, although it did not influence the growth of Nile tilapia juveniles.

Os objetivos deste trabalho foram avaliar a sobrevivência de cepas probióticas incorporadas em queijo petit-suisse potencialmente probiótico e simbiótico no produto armazenado por até 28 dias e em ensaios de sobrevivência in vitro frente às condições encontradas no trato gastrintestinal, utilizando-se métodos independentes de cultivo, paralelamente aos métodos convencionais de semeadura em ágar seletivo, bem como avaliar características tecnológicas dos queijos elaborados. O delineamento experimental constituiu-se de 3 tratamentos de queijo petit-suisse: QP = queijo probiótico (com cultura ABT-4, composta por Lactobacillus acidophilus LA-5 e Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB-12 e da cultura starter Streptococcus thermophilus); QS = queijo simbiótico, contendo os probióticos e prebióticos (cultura ABT-4 + inulina e fruto-oligossacarídeo) e QC = queijo controle, elaborado apenas com uma cultura starter de Streptococcus thermophilus. Os queijos foram armazenados a 4 ºC e as análises foram realizadas semanalmente, por 28 dias. A contagem dos micro-organismos probióticos foi realizada por técnicas independentes (qPCR) e dependentes de cultivo. Adicionalmente, foi monitorada a presença de contaminantes e avaliadas a aceitabilidade sensorial e a textura instrumental dos produtos ao longo de seu armazenamento. Os queijos petit-suisse apresentaram populações de L. acidophilus LA-5 e B. animalis BB-12 superiores a 7 log UFC/g, até o 28º dia de armazenamento. Em QS, observou-se maior estabilidade da população de L. acidophilus LA-5, ao longo do armazenamento e maior sobrevivência in vitro de B. animalis BB-12, até 14 dias de armazenamento (p < 0,05), com taxas médias de sobrevivência diminuindo de 88,0% (dia 1) para 59,6% (dia 28) em QS e de 80,0% (dia 1) para 59,8 (dia 28) em QP. Em contrapartida, para L. acidophilus LA-5, as taxas médias de sobrevivência diminuíram de 49,1% (dia 1) para 36,9% (dia 28) em QS e de 61,6% (dia 1) para 39,2% (dia 28) em QP, e foram maiores em QP nos dias 1 e 14 (p < 0,05). A adição de probióticos no queijo petit-suisse resultou em influência significativa nos parâmetros de textura, com uma diminuição da dureza, o que provavelmente contribuiu para maiores escores de aceitabilidade, nas formulações com probióticos (> 5,9), em relação ao produto controle (< 5,3). Adicionalmente, houve influência positiva da mistura prebiótica na aceitabilidade de QS (escore = 6,8), aos 21 dias de armazenamento (p < 0,05). Entre os métodos utilizados para a quantificação de micro-organismos, os valores obtidos através dos métodos convencional e qPCR foram semelhantes, porém observou-se uma tendência a superestimar a população dos micro-organismos, no método de qPCR. No ensaio de sobrevivência in vitro, observou-se valores semelhantes e um coeficiente de correlação de Pearson de 0,92 entre os método de qPCR com Propidium Monoazide (PMA) e convencional, para B. animalis subsp. lactis BB-12, enquanto que para L.acidophilus LA-5, os resultados mostraram-se promissores, particularmente na quantificação de células viáveis, porém não cultiváveis. Os resultados obtidos sugerem que a formulação QS foi a mais favorável em termos de estabilidade e sobrevivência dos probióticos, além de apresentar a melhor aceitabilidade aos 21 dias de armazenamento. Em relação aos métodos de quantificação, técnicas moleculares mostraram-se mais adequadas, particularmente com a utilização de PMA, embora requeiram otimizações. / This study aimed to evaluate the survival of probiotic strains incorporated into petit-suisse cheese in the product stored for up to 28 days and under in vitro gastrointestinal tract simulated resistance assay, using culture-independent and culture-dependent methods. Furthermore, sensory acceptability and instrumental texture of the cheeses studied were evaluated. Experimental design involved the evaluation of three trials of petit-suisse cheese, as follows: PC = probiotic cheese (with the ABT-4 culture, containing Lactobacillus acidophilus LA-5, Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB-12, and Streptococcus thermophilus, as starter culture), SC = synbiotic cheese, containing both the probiotics and the prebiotics (with the ABT-4 culture + inulin and fructooligosaccharides), and CC = control cheese (containing only the starter culture of Streptococcus thermophilus). Cheeses were stored at 4°C and the microbial counts in the products, as well as the in vitro survival assays were conducted weekly up to the 28th day. The probiotic counts in the product and in the in vitro assays were conducted through culture-independent (qPCR) and dependent methods. Additionally, the presence of contaminants was monitored and the sensory acceptability and instrumental texture of the products were evaluated during storage at 4°C. The petit-suisse cheeses presented L. acidophilus LA-5 and B. animalis BB-12 populations above 7 log CFU/g, up to the 28th day of storage. For SC, a higher L. acidophilus LA 5 population stability during the shelf-life and a higher B. animalis BB-12 in vitro survival up to 14 days of storage (p < 0.05) were observed. BB-12 presented mean survival rates decreasing from 88.0% (day 1) to 59.6% (day 28) in SC and from 80.0% (day 1) to 59.8% (day 28) in PC. In contrast, for L. acidophilus LA-5, the mean survival rates decreased from 49.1% (day 1) to 36.8% (day 28) in SC and from 61.6% (day 1) to 39.2% (day 28) in PC, which presented higher survival rate on days 1 and 14 (p < 0.05). The addition of probiotics in petit-suisse cheese influenced texture parameters significantly, leading to decreased hardness (p < 0.05), which probably contributed for the higher acceptability scores of both cheeses supplemented with probiotics (> 5.9), compared to the control product (< 5.3). Additionally, there was a positive influence of the prebiotic mixture on the SC acceptability (score = 6.8) on day 21 of storage (p < 0.05). Regarding the methods used for the enumeration of microorganisms, the results for the qPCR and the conventional method were quite similar. However, a trend towards overestimating microbial populations with the qPCR method was observed. For the in vitro survival assays, we observed similar results for the qPCR method with Propidium Monoazide (PMA) and the conventional method for B. animalis subsp. lactis BB-12 and a Pearson correlation coefficient of 0.92, whereas for L. acidophilus LA-5, the results were promising, especially in the quantification of viable, but not cultivable cells. The results suggest that the synbiotic cheese was the most favorable in terms of stability and probiotics survival, besides presenting the highest acceptance at 21 days of storage. Regarding quantification methods, molecular techniques have proved to be more suitable, particularly with PMA, but an optimization is required.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-10-21T18:53:24Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Evando Alves Filgueiras - 2013.pdf: 1115430 bytes, checksum: 62f6695a211d8461f75ac10013af7bed (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-10-21T20:21:49Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Evando Alves Filgueiras - 2013.pdf: 1115430 bytes, checksum: 62f6695a211d8461f75ac10013af7bed (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-21T20:21:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Evando Alves Filgueiras - 2013.pdf: 1115430 bytes, checksum: 62f6695a211d8461f75ac10013af7bed (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-11-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Biological additives, such as probiotics, prebiotics and digestive enzymes, as well as the combination of these components - commonly called synbiotics - are an alternative to improve livestock performance. In order to evaluate the effects in dairy cattle of a synbiotic containing microencapsulated bacteria, a meta- analysis was conducted using results obtained on commercial farms. Variables included milk production and quality, and reproductive performance. Data were collected on 22 farms feeding a commercial synbiotic composed of microencapsulated probiotics, prebiotics and fibrolytic enzymes (Biofórmula Leite®). All herds followed the manufacturer's recommended dosage of 2 g / animal / day. Information was collected on bulk tank milk production and quality (Somatic Cell Count - SCC,and contents of milk fat, protein and total solids), as well as reproductive data, such as inseminations and calving dates. These data were pooled for meta-analysis, which was performed according to the mixed models procedures recommended by St. Pierre. An analysis of variance was performed, considering the farm as a random variable and treatment as a fixed effect, with time period nested within farm. For each analysis, we used the GLM procedure of Minitab (Minitab, Inc., State College, PA, USA). A probability level of 0.05% was used to determine the statistical significance of each effect. Treatment with the synbiotic produced significant reductions in bulk tank SCC(-41%) , and in calving interval (- 73 days). There was no significant effect on the contents of fat, protein, and total solids in milk. The synbiotic additive used in this study proved to be an effective tool in the reduction of somatic cells in milk, as well as improving the fertility of animals. / Os aditivos biológicos, como os probióticos, prebióticos e enzimas digestivas, ou mesmo, a combinação destes componentes, comumente denominada de simbióticos, têm se mostrado como uma alternativa para melhorar o desempenho dos animais. Com a finalidade de observar os benefícios advindos dos simbióticos com bactérias microencapsuladas em bovinos de leite, objetivou-se nessa pesquisa, realizar uma meta-análise dos resultados obtidos em nível de campo com a utilização de um produto simbiótico no desempenho produtivo, reprodutivo e na qualidade do leite de vacas leiteiras. Os dados foram coletados em 22 propriedades que utilizam o simbiótico comercial Biofórmula Leite®, composto por probióticos, prebióticos e enzimas fibrolíticas. A dosagem utilizada em todas as propriedades seguiu a indicação do fabricante de 2 g/animal/dia. Foram coletadas informações de qualidade do leite (Contagem de Células Somáticas - CCS, teores de Gordura, Proteína e Sólidos Totais), foram registradas também as médias de produção dos animais ou quantidades entregues no laticínio, bem como os dados reprodutivos, como datas das inseminações e dos partos. Esses dados foram agrupados para realização de uma meta-análise, que foi realizada de acordo com os procedimentos de modelos mistos preconizados por St. Pierre. Foi realizada uma análise de variância usando o modelo misto, considerando a fazenda como variável aleatória e o tratamento como efeito fixo, e o período aninhado na fazenda. Para cada análise, foi utilizado o procedimento GLM do Minitab (Minitab, Inc., State College, PA, EUA). O nível de probabilidade de 0,05% foi utilizado para determinar a significância estatística de cada efeito. Foi observada uma redução significativa na média de CCS dos tanques (-41%), além de uma redução de 73 dias no IP. Não foi constatado efeito significativo nos teores de gordura, proteína, e sólidos totais do leite. O aditivo simbiótico utilizado neste estudo demonstrou ser uma ferramenta eficaz na redução de células somáticas no leite, bem como na melhoria da fertilidade dos animais.