Para produção de biofármacos protéicos, como a eritropoietina recombinante humana (EPOrh), são necessárias alterações pós-traducionais adequadas que garantam a sua especificidade e atividade biológica. Essas características são obtidas apenas em biorretores baseados em células eucarióticas, como as da glândula mamária. Sistemas baseados nesse tipo celular, tanto in vivo quanto in vitro, já são utilizados para produção estratégica e viável de proteínas recombinantes biologicamente ativas. Assim, tanto o estabelecimento de novas linhagens de células mamárias que apresentem boa expressão protéica quanto o desenvolvimento de sistemas in vivo que utilizem a estrutura da glândula mamária para essa produção de proteínas recombinantes são de grande valia. O presente trabalho teve como objetivo comparar dois métodos de estabelecimento de uma cultura de células de glândula mamárias ovinas, enzimático e não enzimático, e verificar sua capacidade de expressão das proteínas do leite β-lactoglobulina, α-caseína, β-caseína e κ-caseína mediante o tratamento com SFB (soro fetal bovino) ou SOL (soro de ovelha lactante), na presença ou não de Matrigel. Para isso, foi realizado um experimento in vitro, no qual foi estabelecido o cultivo celular até a passagem 12 (P12) de duas linhagens celulares: digerida (LD) e não digerida (LND). Para a LD na P12 foi observado apenas um tipo celular, o qual era positivo para a marcação com vimentina. Essa linhagem apresentou expressão gênica de β-caseína e β-lactoglobulina apenas quando tratada com meio de cultivo acrescido de SFB, sendo a expressão inferior (P=0,001) ao grupo da LND submetido ao mesmo tratamento. Já a LND, quando tratada com meio adicionado com SFB expressou κ-caseína além da β-caseína e β-lactoglobulina. A troca do SFB do meio de cultivo por SOL aumentou a expressão gênica de β-lactoglobulina (P=0,001) para ambas linhagens. Foi realizada a curva de crescimento para LD e LND na P12 com o meio de cultivo acrescido com SFB ou SOL. Para a LND observou-se o efeito do meio na velocidade de crescimento celular, sendo que foi maior para o grupo tratado com SFB (P<0,05). Para a LD, não ocorreu o efeito do meio na velocidade de crescimento celular (P>0,05), não sendo observada diferença com a LND tratada com SOL (P>0,05). A LND apresentou marcação positiva para a presença de vimentina e citoqueratina. Este trabalho visou, ainda, estabelecer um sistema de produção da EPOrh no leite de ovelhas não transgênicas pela técnica de infusão intra-mamária in vivo de dois plasmídeos diferentes e verificar a secreção qualitativa desta proteína por Western-blotting. Assim, foi feito um experimento in vivo no qual glândulas mamárias de ovelhas foram transfectadas com dois plasmídeos diferentes: ALAC (n=2), BGL (n=2) e controle negativo (n=2). Após a infusão dos plasmídeos, foi realizada a eletroporação de cada teto (3 choques de 500 volts com a duração de 15ms cada, sendo realizada a inversão da polaridade). Os animais foram ordenhados durante 20 dias após a transfecção, porém não foi possível detectar a presença de EPOrh nas amostras de leite analisadas. O limiar de detecção do teste utilizado foi de 67,5pg de EPOrh (Eritromax®) em leite controle negativo de ovelha. Concluindo, foi possível estabelecer o cultivo in vitro das LD e LND com capacidade de expressar proteínas do leite, sendo a expressão da β-lactoglobulina aumentada pelo tratamento com SOL. Ambas as linhagens apresentaram marcação positiva para vimentina, mas apenas LND para citoqueratina. Ainda, para o experimento in vivo, não foi possível detectar a expressão de EPOrh no leite das ovelhas transfectadas com os plasmídeos ALAC e BGL. / Some post-translational modifications are necessary for the production of biopharmaceutical proteins, such as recombinant human erythropoietin (rhEPO), with a good specific action and a high biological activity. These modifications are obtained only by bioreactors based on eukaryotic cell as mammary cells. Bioreactors, in vivo or in vitro, with this kind of cell have been used for a viable and strategic production of biologically active recombinant proteins. For this reason, the establishment of a new line of mammary cells with high milk protein expression and the development of systems for production of recombinant proteins by the mammary gland in vivo are essential studies. One of the main objectives of this study was to compare two methods, enzymatic and non-enzymatic, to establish ovine mammary cells culture and verify their gene expression of milk proteins such as β-lactoglobulin, α-casein, β-casein and κ-casein with different treatments: LOS (lactating ovine serum) or FBS (fetal bovine serum) added to the culture medium, in the presence or absence of Matrigel®. In this manner, an in vitro study was performed and the culture of two lines were established, digested (DL) and non-digested (NDL), of ovine mammary cell until the passage 12 (P12). In DL was observed just one cellular type that was positive for staining with vimentin. This cell line expressed β-lactoglobulin and β-casein genes with the FBS treatment and without Matrigel. The gene expression was lower (P=0,001) when compared to the NDL under the same conditions of culture. Then, the NDL expressed β-lactoglobulin, β-casein and κ-casein genes when treated with FBS without Matrigel. The treatment with LOS in the culture medium increased the gene expression of β-lactoglobulin for both cell lines. The growth curve was determined with both cell lines in P12 with FBS or LOS treatment. For the NDL, the type of medium had effect on the cell growth speed and was highest with the FBS treatment (P<0,05). However, the medium did not have effect on growth speed of LD (P>0,05) and no difference was observed at the NDL treated with LOS (P>0,05). The NDL was positive for staining with vimentin and cytokeratin. The second main objective of this study was to establish an in vivo system for the production of rhEPO in milk of non-transgenic ewes by the intra-mammary infusion of two different plasmids and verify the qualitative milk secretion of this protein by western-blotting. In this way, in the in vivo experiment ovine mammary glands were transfected with two different plasmids: ALAC (n=2), BGL (n=2) and negative control (n=2). Each half udder was filled with plasmid solution and three 3 electric pulses of 500 volts were applied for 15ms each, followed by another three pulses with reversed polarity. The three animals were milked for 20 days after transfection, nevertheless it was not possible to identify rhEPO in any milk sample. The test threshold to identify rhEPO (Eritromax®) in milk from a negative control animal was 67,5pg. In conclusion, the in vitro culture of NDL and DL was established up to the P12 with expression of milk protein and the LOS treatment increased the expression of β-lactoglobulin. The two cell lines culture were positive for staining of vimentina but only NDL was positive for cytokeratin. In the in vivo experiment, rhEPO secretion was not detected in the milk from ewes transfected with ALAC and BGL plasmids.

O presente estudo teve por objetivo estudar a variabilidade da proteína verdadeira do leite em rebanhos leiteiros do estado de São Paulo, segundo a influência da contagem de células somáticas, raça, estação do ano e tipo de sistema de alimentação. Para tanto, foram utilizados 50 rebanhos comerciais distintos, formados por três raças distribuídas da seguinte forma: 17 da raça Holandesa, seis da raça Jersey e 26 da raça Girolando. Mensalmente foram coletadas amostras de leite do tanque de expansão sendo estas analisadas em relação à composição e contagem de células somáticas pelo método automatizado, e em relação ao teor de proteína verdadeira pelo de Kjeldahl. O teor de nitrogênio total foi multiplicado por 6,38 para transformá-lo em proteína bruta do leite (PB). O teor de proteína verdadeira (PV) do leite foi calculado pela diferença entre estas duas frações nitrogenadas (PV = PB - NNP). As diferenças observadas nos teores de proteína verdadeira, quando considerados os efeitos da época do ano, raça, sistema de alimentação e contagem de células somáticas, não foram significativas, o que permitiu a formulação de uma equação, a qual possibilita determinar a proteína verdadeira de forma simplificada. Foi proposta a equação: PV = 0,1862+(1,0869 x PB) - (1,2895 x NNP) + 0,0687, com R2 = 0,82 . A utilização do teor de proteína verdadeira ao invés do teor de proteína bruta, como ainda é feito no Brasil, na calibração dos equipamentos automatizados, aumentaria de forma significativa a acurácia nos resultados de proteína do leite, permitindo aos laticínios melhor classificação dos produtores dentro dos sistemas de pagamento, remunerando os produtores de forma mais justa. / The objective of this experiment was to study the variability of the true protein of milk produced in dairy herds of Sao Paulo State, under the influence of milk somatic cell count, breeds, season of the year and production system. For this aim, fifty commercial herds were selected; these herds were divided by breeds in: 17 Holstein, six Jersey, and 26 Girolando. Milk samples from the bulk tank were collected monthly and were analyzed to determine milk somatic cell count (SCC) and milk composition by the automatic method and to determine the true protein of milk (TP) by Kjeldahl method. The total nitrogen was multiplied by a factor of 6.38 to express the results in crude protein (CP) basis. True protein of milk was determined by the equation (TP = CP - NPN). No significative effect were observed for season of the year, breed, SCC and system of production were observed and this fact aloud a confection of one equation to predict milk true protein: PV = 0,1862+(1,0869 x PB) - (1,2895 x NNP) + 0,0687, com R2 = 0,82 . The use true protein of milk instead of crude protein, like it is still used in Brazil, will increase the accuracy of protein testing, and will improve substantially the milk payment system.

Para produção de biofármacos protéicos, como a eritropoietina recombinante humana (EPOrh), são necessárias alterações pós-traducionais adequadas que garantam a sua especificidade e atividade biológica. Essas características são obtidas apenas em biorretores baseados em células eucarióticas, como as da glândula mamária. Sistemas baseados nesse tipo celular, tanto in vivo quanto in vitro, já são utilizados para produção estratégica e viável de proteínas recombinantes biologicamente ativas. Assim, tanto o estabelecimento de novas linhagens de células mamárias que apresentem boa expressão protéica quanto o desenvolvimento de sistemas in vivo que utilizem a estrutura da glândula mamária para essa produção de proteínas recombinantes são de grande valia. O presente trabalho teve como objetivo comparar dois métodos de estabelecimento de uma cultura de células de glândula mamárias ovinas, enzimático e não enzimático, e verificar sua capacidade de expressão das proteínas do leite β-lactoglobulina, α-caseína, β-caseína e κ-caseína mediante o tratamento com SFB (soro fetal bovino) ou SOL (soro de ovelha lactante), na presença ou não de Matrigel. Para isso, foi realizado um experimento in vitro, no qual foi estabelecido o cultivo celular até a passagem 12 (P12) de duas linhagens celulares: digerida (LD) e não digerida (LND). Para a LD na P12 foi observado apenas um tipo celular, o qual era positivo para a marcação com vimentina. Essa linhagem apresentou expressão gênica de β-caseína e β-lactoglobulina apenas quando tratada com meio de cultivo acrescido de SFB, sendo a expressão inferior (P=0,001) ao grupo da LND submetido ao mesmo tratamento. Já a LND, quando tratada com meio adicionado com SFB expressou κ-caseína além da β-caseína e β-lactoglobulina. A troca do SFB do meio de cultivo por SOL aumentou a expressão gênica de β-lactoglobulina (P=0,001) para ambas linhagens. Foi realizada a curva de crescimento para LD e LND na P12 com o meio de cultivo acrescido com SFB ou SOL. Para a LND observou-se o efeito do meio na velocidade de crescimento celular, sendo que foi maior para o grupo tratado com SFB (P<0,05). Para a LD, não ocorreu o efeito do meio na velocidade de crescimento celular (P>0,05), não sendo observada diferença com a LND tratada com SOL (P>0,05). A LND apresentou marcação positiva para a presença de vimentina e citoqueratina. Este trabalho visou, ainda, estabelecer um sistema de produção da EPOrh no leite de ovelhas não transgênicas pela técnica de infusão intra-mamária in vivo de dois plasmídeos diferentes e verificar a secreção qualitativa desta proteína por Western-blotting. Assim, foi feito um experimento in vivo no qual glândulas mamárias de ovelhas foram transfectadas com dois plasmídeos diferentes: ALAC (n=2), BGL (n=2) e controle negativo (n=2). Após a infusão dos plasmídeos, foi realizada a eletroporação de cada teto (3 choques de 500 volts com a duração de 15ms cada, sendo realizada a inversão da polaridade). Os animais foram ordenhados durante 20 dias após a transfecção, porém não foi possível detectar a presença de EPOrh nas amostras de leite analisadas. O limiar de detecção do teste utilizado foi de 67,5pg de EPOrh (Eritromax®) em leite controle negativo de ovelha. Concluindo, foi possível estabelecer o cultivo in vitro das LD e LND com capacidade de expressar proteínas do leite, sendo a expressão da β-lactoglobulina aumentada pelo tratamento com SOL. Ambas as linhagens apresentaram marcação positiva para vimentina, mas apenas LND para citoqueratina. Ainda, para o experimento in vivo, não foi possível detectar a expressão de EPOrh no leite das ovelhas transfectadas com os plasmídeos ALAC e BGL. / Some post-translational modifications are necessary for the production of biopharmaceutical proteins, such as recombinant human erythropoietin (rhEPO), with a good specific action and a high biological activity. These modifications are obtained only by bioreactors based on eukaryotic cell as mammary cells. Bioreactors, in vivo or in vitro, with this kind of cell have been used for a viable and strategic production of biologically active recombinant proteins. For this reason, the establishment of a new line of mammary cells with high milk protein expression and the development of systems for production of recombinant proteins by the mammary gland in vivo are essential studies. One of the main objectives of this study was to compare two methods, enzymatic and non-enzymatic, to establish ovine mammary cells culture and verify their gene expression of milk proteins such as β-lactoglobulin, α-casein, β-casein and κ-casein with different treatments: LOS (lactating ovine serum) or FBS (fetal bovine serum) added to the culture medium, in the presence or absence of Matrigel®. In this manner, an in vitro study was performed and the culture of two lines were established, digested (DL) and non-digested (NDL), of ovine mammary cell until the passage 12 (P12). In DL was observed just one cellular type that was positive for staining with vimentin. This cell line expressed β-lactoglobulin and β-casein genes with the FBS treatment and without Matrigel. The gene expression was lower (P=0,001) when compared to the NDL under the same conditions of culture. Then, the NDL expressed β-lactoglobulin, β-casein and κ-casein genes when treated with FBS without Matrigel. The treatment with LOS in the culture medium increased the gene expression of β-lactoglobulin for both cell lines. The growth curve was determined with both cell lines in P12 with FBS or LOS treatment. For the NDL, the type of medium had effect on the cell growth speed and was highest with the FBS treatment (P<0,05). However, the medium did not have effect on growth speed of LD (P>0,05) and no difference was observed at the NDL treated with LOS (P>0,05). The NDL was positive for staining with vimentin and cytokeratin. The second main objective of this study was to establish an in vivo system for the production of rhEPO in milk of non-transgenic ewes by the intra-mammary infusion of two different plasmids and verify the qualitative milk secretion of this protein by western-blotting. In this way, in the in vivo experiment ovine mammary glands were transfected with two different plasmids: ALAC (n=2), BGL (n=2) and negative control (n=2). Each half udder was filled with plasmid solution and three 3 electric pulses of 500 volts were applied for 15ms each, followed by another three pulses with reversed polarity. The three animals were milked for 20 days after transfection, nevertheless it was not possible to identify rhEPO in any milk sample. The test threshold to identify rhEPO (Eritromax®) in milk from a negative control animal was 67,5pg. In conclusion, the in vitro culture of NDL and DL was established up to the P12 with expression of milk protein and the LOS treatment increased the expression of β-lactoglobulin. The two cell lines culture were positive for staining of vimentina but only NDL was positive for cytokeratin. In the in vivo experiment, rhEPO secretion was not detected in the milk from ewes transfected with ALAC and BGL plasmids.

Durante a vida reprodutiva de uma fêmea a glândula mamária passa por diversas modificações. O período seco é de extrema importância para a renovação celular do tecido mamário para a próxima lactação, ocorrendo, nessa fase, intensa apoptose nas células epiteliais mamárias. Com isso, acredita-se que os glicocorticoides podem inibir a expressão de genes relacionados à síntese de leite e síntese de proteínas do leite durante a involução mamária. Além disso, nas horas seguintes à interrupção de ordenha, as células epiteliais ainda sintetizam leite, a qual gera um acúmulo de leite na glândula mamária, aumento da pressão intramamária e pode causar a abertura do canal do teto, favorecendo a entrada de microrganismos patógenos, aumentando a temperatura superficial do úbere. Foram utilizadas cabras da raça Saanen submetidas ao processo de secagem aos 249 ± 8 dias de lactação. O primeiro estudo teve como objetivo avaliar o aumento de cortisol plasmático (via administração exógena do hormônio adrenocorticotrófico) sobre a expressão dos genes da via IGF-1R/PI3K/Akt/mTOR e proteínas do leite (LALBA, CSN2 e LF) no tecido mamário, e a composição das secreções mamárias durante o período inicial da secagem. Observou-se que o aumento do cortisol causou uma diminuição significativa na expressão relativa de IGF-1R. Porém, não apresentou efeito sobre os demais genes PI3K/Akt/mTOR e LALBA, CSN2 e LF. O período de secagem diminuiu significativamente a expressão de LALBA e CSN2 e aumentou a expressão de LF. Além disso, o cortisol aumentou significativamente a infiltração de células imunes e manteve a concentração de lactoferrina mais elevada nas secreções mamárias. Os componentes do leite não foram alterados com a administração de ACTH. No entanto, o período de secagem aumentou significativamente a porcentagem de gordura, lactose, proteína e extrato seco. O segundo estudo teve por objetivo avaliar a temperatura superficial do úbere e ocular através da temperatura por infravermelho e relaciona-las com a contagem de células somáticas durante o período de secagem. Assim, a temperatura superficial do úbere foi significativamente correlacionada com o status de saúde do úbere das cabras Saanen. Por fim, a temperatura por infravermelho detectou as alterações nas temperaturas superficiais e a suas relações com a contagem de células somáticas. / During the reproductive life of a female, the mammary gland undergoes several modifications. The dry period is of extreme importance for the cellular renewal of the mammary tissue for the next lactation, occurring, at this stage, intense apoptosis in the mammary epithelial cells. With this, it is believed that glucocorticoids can inhibit the expression of genes related to milk synthesis and milk protein synthesis during mammary involution. In the hours following the interruption of milking, the epithelial cells still synthesize milk, which generates an accumulation of milk in the mammary gland, increased intramammary pressure and can cause the opening of the roof canal favoring the entry of pathogenic microorganisms and increasing the udder superficial temperature. So, Saanen goats were submitted to the drying process at 249 ± 8 days of lactation. The first study aimed to evaluate the increase of plasma cortisol (via exogenous adrenocorticotrophic hormone administration) on the expression of IGF-1R/PI3K /Akt /mTOR and milk proteins (LALBA, CSN2 and LF) genes in mammary tissue, and the composition of the mammary secretions during the initial drying period. It was observed that increased cortisol caused a significant decrease in the relative expression of IGF-1R. However, it had no effect on the other PI3K/Akt/mTOR and LALBA, CSN2 and LF genes. The drying period significantly decreased LALBA and CSN2 expression and increased LF expression. In addition, cortisol significantly increased the infiltration of immune cells and maintained the higher concentration of lactoferrin in mammary secretions. Milk components were not altered with ACTH administration. However, the drying period significantly increased the percentage of fat, lactose, protein and dry extract. The second study aimed to evaluate the udder and ocular surface temperature through infrared temperature and correlates them with the somatic cell count during the drying period. Thus, the surface temperature of the udder was significantly correlated with the health status of the udder of the Saanen goats. Finally, the infrared temperature detected changes in surface temperatures and their relationships with somatic cell counts.

O presente estudo teve por objetivo estudar a variabilidade da proteína verdadeira do leite em rebanhos leiteiros do estado de São Paulo, segundo a influência da contagem de células somáticas, raça, estação do ano e tipo de sistema de alimentação. Para tanto, foram utilizados 50 rebanhos comerciais distintos, formados por três raças distribuídas da seguinte forma: 17 da raça Holandesa, seis da raça Jersey e 26 da raça Girolando. Mensalmente foram coletadas amostras de leite do tanque de expansão sendo estas analisadas em relação à composição e contagem de células somáticas pelo método automatizado, e em relação ao teor de proteína verdadeira pelo de Kjeldahl. O teor de nitrogênio total foi multiplicado por 6,38 para transformá-lo em proteína bruta do leite (PB). O teor de proteína verdadeira (PV) do leite foi calculado pela diferença entre estas duas frações nitrogenadas (PV = PB - NNP). As diferenças observadas nos teores de proteína verdadeira, quando considerados os efeitos da época do ano, raça, sistema de alimentação e contagem de células somáticas, não foram significativas, o que permitiu a formulação de uma equação, a qual possibilita determinar a proteína verdadeira de forma simplificada. Foi proposta a equação: PV = 0,1862+(1,0869 x PB) - (1,2895 x NNP) + 0,0687, com R2 = 0,82 . A utilização do teor de proteína verdadeira ao invés do teor de proteína bruta, como ainda é feito no Brasil, na calibração dos equipamentos automatizados, aumentaria de forma significativa a acurácia nos resultados de proteína do leite, permitindo aos laticínios melhor classificação dos produtores dentro dos sistemas de pagamento, remunerando os produtores de forma mais justa. / The objective of this experiment was to study the variability of the true protein of milk produced in dairy herds of Sao Paulo State, under the influence of milk somatic cell count, breeds, season of the year and production system. For this aim, fifty commercial herds were selected; these herds were divided by breeds in: 17 Holstein, six Jersey, and 26 Girolando. Milk samples from the bulk tank were collected monthly and were analyzed to determine milk somatic cell count (SCC) and milk composition by the automatic method and to determine the true protein of milk (TP) by Kjeldahl method. The total nitrogen was multiplied by a factor of 6.38 to express the results in crude protein (CP) basis. True protein of milk was determined by the equation (TP = CP - NPN). No significative effect were observed for season of the year, breed, SCC and system of production were observed and this fact aloud a confection of one equation to predict milk true protein: PV = 0,1862+(1,0869 x PB) - (1,2895 x NNP) + 0,0687, com R2 = 0,82 . The use true protein of milk instead of crude protein, like it is still used in Brazil, will increase the accuracy of protein testing, and will improve substantially the milk payment system.

The allergy to the cow s milk protein affects 2 to 5% from the infantsand its symptoms can vary from minor to life threatening. β-lactoglobulin is the protein fraction more allergenic from the whey. Many processes were developed for the separation and purification of proteins and among them is the ion exchange chromatography. The objective of this work was to obtain the separation of β-lactoglobulin from the whey protein concentrate by ion exchange chromatography, aiming the application in milk formulas. Physical-chemical analysis of the protein concentrate, separation of β- lactoglobulin by ion exchange chromatography, analysis of amino acids profile and of the final amount of β-lactoglobulin in the resulting product and in two hypoallergenic infant formulas were performed. From the results in this study, it is possible to ascertain that it was feasible to separate the protein fractions of β-lactoglobulin by the ion chromatography process.The protein obtained by this process was proven to be a great amino acid source compared to the hypoallergenic infant formulas. / A alergia à proteína do leite de vaca atinge 2 a 5% dos lactentes e desencadeia sintomas que podem variar de leve a risco de vida. A β-lactoglobulina é a fração protéica mais alergênica do soro do leite. Vários processos foram desenvolvidos para a separação e purificação protéica, dentre eles a cromatografia de troca iônica. O objetivo deste trabalho foi realizar a separação da β-lactoglobulina do concentrado protéico do soro do leite através de cromatografia de troca iônica, visando aplicação em fórmulas lácteas. Foram realizadas análises físico-químicas do concentrado protéico, separação da β-lactoglobulina por cromatografia de troca iônica, análise do perfil de aminoácidos e da quantidade final de β-lactoglobulina no produto obtido e em duas fórmulas lácteas hipoalergênicas. A partir dos resultados encontrados no presente estudo, pode-se verificar que foi possível separar a fração protéica de β- lactoglobulina do concentrado protéico do soro do leite através do processo de cromatografia iônica. A proteína obtida através deste processo demonstrou possuir uma ótima fonte de aminoácidos ao ser comparada com as fórmulas lácteas hipoalergênicas.

Foram utilizados 120 leitões (60 em cada experimento) da genética Dalland, desmamados aos 21 dias de idade e pesos médios iniciais de 5,43 kg &#177; 0,46 (Exp. 1) e 5,81 kg &#177; 0,54 (Exp. 2) com o objetivo de avaliar a presença de proteína láctea ou zinco suplementar (Znaminoácidos) sobre o desempenho, concentrações sanguíneas de IGF-I, GH, zinco, morfologia intestinal e peso relativo do fígado e intestino delgado dos leitões. O delineamento experimental foi o de blocos casualisados, com 14 dias (Exp.1) e 28 dias (Exp.2) de duração em um fatorial 2 x 2 (proteína láctea e zinco suplementar): T1 = Dieta basal constituída de milho e farelo de soja (DB), com proteína láctea (PL) e com Zn suplementar (2000 ppm de zinco - ZnO + 250 ppm de zinco ? Znaminoácidos); T2 = DB com PL e sem zinco suplementar; T3 = DB sem PL e com zinco suplementar; T4 = DB sem PL e sem zinco suplementar. No Exp.1, o zinco suplementar, proporcionou melhor conversão alimentar (CA) para a fase de 1 a 7 dias (P<0,04) e para a fase de 1 a 14 dias, proporcionou maior peso aos 14 dias (P14) (P<0,06) e maior ganho de peso diário (GPD) (P<0,05). A PL, proporcionou aos animais, menor CA para as fases de 1 a 7 dias (P<0,001) e de 1 a 14 dias (P<0,02), respectivamente. Para os dados sanguíneos, ao 14º dia de experimento, o zinco proporcionou menor concentração de IGF-1 (P<0,007), enquanto que a PL proporcionou maior concentração desta variável (P<0,001). Para os dados de morfologia intestinal, a PL proporcionou menor profundidade de cripta (PC) no jejuno ao 7º dia de experimento (P<0,07) e maior altura de vilosidade (AV) no duodeno ao 14º dia de experimento (P<0,04). Houve interação dos fatores PL e zinco suplementar para relação AV:PC do jejuno ao 7&#186; dia de experimento (P<0,009) e que também foi maior nos animais recebendo PL (P<0,004) e zinco suplementar (P<0,02). O peso relativo do fígado ao 14&#186; dia de experimento, foi menor para os animais recebendo zinco suplementar (P<0,02). Com relação ao Exp. 2, para a fase de 1 a 14 dias, os animais recebendo PL tiveram menor CDR (P<0,01), enquanto que o zinco suplementar proporcionou maior P14 (P<0,07) e menor CDR (P<0,01). No período de 14 a 28 dias, houve interação entre PL e zinco suplementar para peso aos 28 dias (P28) e GDP (P<0,05). Também, o zinco suplementar proporcionou maior P28 e GDP nos animais. Para o período de 1 a 28 dias, houve interação entre PL e zinco suplementar (P<0,07) para P28, GPD e CA, e que o zinco suplementar proporcionou maior P28 (P<0,007) e maior GPD (P<0,007). A PL para esta fase proporcionou menor CA (P<0,01). / A hundred and twenty Dalland pigs (60 in each experiment), weaned at 21 days of age and with 5,43 kg &#177; 0,46 (Exp. 1) e 5,81 kg &#177; 0,54 (Exp. 2) of average live weight were used to evaluate the presence of milk protein or supplemental zinc on performance, IGF-I, GH and zinc plasma concentrations, intestinal morphology and relative weight of liver and small intestine. A 14-d (Exp.1) and 28-d (Exp.2) randomized complete block design with a 2 x 2 factorial arrangement (milk protein and supplemental zinc): T1 = basal diet with corn and soybean meal (BD) with milk protein (MP) + 2000 ppm of zinc (ZnO) + 250 ppm of zinc (Zn-amino acid); T2 = BD with MP with no supplemental zinc; T3 = BD with no MP + 2000 ppm of zinc (ZnO) + 250 ppm of zinc (Zn- amino acid); T4 = BD with no MP and no supplemental zinc. In Exp.1, pigs fed with supplemental zinc had lower feed conversion (FC) for 1-7d period (P<.04) and for 1-14d period showed higher body weight at 28 days (BW28) (P<.06) and average daily gain (ADG) (P<.05). The MP improved FC for 1-7d (P<.001) and 1-14d period (P<.02), respectively. For plasma concentrations, supplemental zinc decreased IGF-I concentrations (P<.007) while there was an increase IGF-I concentration for MP at 14-d. For morphology data, MP provided shorter crypts depth (CD) on jejune at 7-d (P<.07) and higher villus height (VH) on duodenum at 14-d (P<.04). There was interaction between zinc and MP for VH:CD relation on jejune at 7-d (P<.009) and also this relation was bigger for animals fed with MP (P<.004) and supplemental zinc (P<.02). The relative weight of liver at 14-d was smaller for animal fed with supplemental zinc (P<.02). In Exp.2, for 1-14d period, the animals fed with MP decreased average daily feed intake (ADFI) (P<.01), while the supplemental zinc increased BW14 (P<.07) e decreased ADFI (P<.01). For 14-28d period, there was interaction between MP and supplemental zinc for BW28 e ADG (P<.05). Also, the animals fed supplemental zinc had higher BW28 e ADG. For the whole period (1-28d), there was interaction between MP and supplemental zinc (P<.07) for BW28, ADG e FC and considering isolated factors, supplemental zinc provided higher BW28 (P<.007) e higher ADG (P<.007) and MP for this period provided better FC (P<.01).

Foram utilizados 120 leitões (60 em cada experimento) da genética Dalland, desmamados aos 21 dias de idade e pesos médios iniciais de 5,43 kg &#177; 0,46 (Exp. 1) e 5,81 kg &#177; 0,54 (Exp. 2) com o objetivo de avaliar a presença de proteína láctea ou zinco suplementar (Znaminoácidos) sobre o desempenho, concentrações sanguíneas de IGF-I, GH, zinco, morfologia intestinal e peso relativo do fígado e intestino delgado dos leitões. O delineamento experimental foi o de blocos casualisados, com 14 dias (Exp.1) e 28 dias (Exp.2) de duração em um fatorial 2 x 2 (proteína láctea e zinco suplementar): T1 = Dieta basal constituída de milho e farelo de soja (DB), com proteína láctea (PL) e com Zn suplementar (2000 ppm de zinco - ZnO + 250 ppm de zinco ? Znaminoácidos); T2 = DB com PL e sem zinco suplementar; T3 = DB sem PL e com zinco suplementar; T4 = DB sem PL e sem zinco suplementar. No Exp.1, o zinco suplementar, proporcionou melhor conversão alimentar (CA) para a fase de 1 a 7 dias (P<0,04) e para a fase de 1 a 14 dias, proporcionou maior peso aos 14 dias (P14) (P<0,06) e maior ganho de peso diário (GPD) (P<0,05). A PL, proporcionou aos animais, menor CA para as fases de 1 a 7 dias (P<0,001) e de 1 a 14 dias (P<0,02), respectivamente. Para os dados sanguíneos, ao 14º dia de experimento, o zinco proporcionou menor concentração de IGF-1 (P<0,007), enquanto que a PL proporcionou maior concentração desta variável (P<0,001). Para os dados de morfologia intestinal, a PL proporcionou menor profundidade de cripta (PC) no jejuno ao 7º dia de experimento (P<0,07) e maior altura de vilosidade (AV) no duodeno ao 14º dia de experimento (P<0,04). Houve interação dos fatores PL e zinco suplementar para relação AV:PC do jejuno ao 7&#186; dia de experimento (P<0,009) e que também foi maior nos animais recebendo PL (P<0,004) e zinco suplementar (P<0,02). O peso relativo do fígado ao 14&#186; dia de experimento, foi menor para os animais recebendo zinco suplementar (P<0,02). Com relação ao Exp. 2, para a fase de 1 a 14 dias, os animais recebendo PL tiveram menor CDR (P<0,01), enquanto que o zinco suplementar proporcionou maior P14 (P<0,07) e menor CDR (P<0,01). No período de 14 a 28 dias, houve interação entre PL e zinco suplementar para peso aos 28 dias (P28) e GDP (P<0,05). Também, o zinco suplementar proporcionou maior P28 e GDP nos animais. Para o período de 1 a 28 dias, houve interação entre PL e zinco suplementar (P<0,07) para P28, GPD e CA, e que o zinco suplementar proporcionou maior P28 (P<0,007) e maior GPD (P<0,007). A PL para esta fase proporcionou menor CA (P<0,01). / A hundred and twenty Dalland pigs (60 in each experiment), weaned at 21 days of age and with 5,43 kg &#177; 0,46 (Exp. 1) e 5,81 kg &#177; 0,54 (Exp. 2) of average live weight were used to evaluate the presence of milk protein or supplemental zinc on performance, IGF-I, GH and zinc plasma concentrations, intestinal morphology and relative weight of liver and small intestine. A 14-d (Exp.1) and 28-d (Exp.2) randomized complete block design with a 2 x 2 factorial arrangement (milk protein and supplemental zinc): T1 = basal diet with corn and soybean meal (BD) with milk protein (MP) + 2000 ppm of zinc (ZnO) + 250 ppm of zinc (Zn-amino acid); T2 = BD with MP with no supplemental zinc; T3 = BD with no MP + 2000 ppm of zinc (ZnO) + 250 ppm of zinc (Zn- amino acid); T4 = BD with no MP and no supplemental zinc. In Exp.1, pigs fed with supplemental zinc had lower feed conversion (FC) for 1-7d period (P<.04) and for 1-14d period showed higher body weight at 28 days (BW28) (P<.06) and average daily gain (ADG) (P<.05). The MP improved FC for 1-7d (P<.001) and 1-14d period (P<.02), respectively. For plasma concentrations, supplemental zinc decreased IGF-I concentrations (P<.007) while there was an increase IGF-I concentration for MP at 14-d. For morphology data, MP provided shorter crypts depth (CD) on jejune at 7-d (P<.07) and higher villus height (VH) on duodenum at 14-d (P<.04). There was interaction between zinc and MP for VH:CD relation on jejune at 7-d (P<.009) and also this relation was bigger for animals fed with MP (P<.004) and supplemental zinc (P<.02). The relative weight of liver at 14-d was smaller for animal fed with supplemental zinc (P<.02). In Exp.2, for 1-14d period, the animals fed with MP decreased average daily feed intake (ADFI) (P<.01), while the supplemental zinc increased BW14 (P<.07) e decreased ADFI (P<.01). For 14-28d period, there was interaction between MP and supplemental zinc for BW28 e ADG (P<.05). Also, the animals fed supplemental zinc had higher BW28 e ADG. For the whole period (1-28d), there was interaction between MP and supplemental zinc (P<.07) for BW28, ADG e FC and considering isolated factors, supplemental zinc provided higher BW28 (P<.007) e higher ADG (P<.007) and MP for this period provided better FC (P<.01).