Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / A lo largo del tiempo, los antibacterianos han sido ampliamente utilizados en el tratamiento y control de enfermedades infecciosas. Actualmente la lucha contra varias enfermedades de origen bacteriano se ha vuelto un problema de salud a nivel mundial, debido a la resistencia bacteriana. Sumado a lo anterior, la tendiente disminución en investigación y desarrollo de nuevos antibacterianos nos insta a destinar los esfuerzos en investigar nuevos compuestos activos, idealmente, frente a bacterias multirresistentes, con una estructura química y mecanismo de acción novedoso. En este sentido la cadena transportadora de electrones, y en particular la ubiquinona aparece como un blanco interesante para el desarrollo de nuevos antibacterianos. Por este motivo nuestro grupo de investigación ha llevado a cabo el desarrollo de derivados isoquinolinquinona activos en bacterias Gram positivo. Sin embargo, los factores que modulan la actividad de estos compuestos no han sido estudiados. De esta forma, el objetivo de este estudio es desarrollar un modelo 3D- QSAR/CoMFA y compararlo con la gráfica de Craig para establecer si estos modelos son útiles para el desarrollo de nuevos compuestos antibacterianos. La metodología CoMFA, la cual mide parámetros estéricos y electrostáticos de cada molécula, indica que el primer parámetro es el principal contribuyente de la actividad de esta familia de compuestos. En contraste, la gráfica de Craig, la cual relaciona la constante de hidrofobicidad y el carácter electrónico de los sustituyentes, entrega como resultado que la actividad de esta serie de compuestos depende principalmente del carácter hidrofóbico del sustituyente. Para validar estos resultados se realizó la síntesis de 8 derivados 8-aril-mercapto-pirimidoisoquinolinquinona, obteniéndose en dos pasos, con rendimientos para la última etapa entre 43% y 89%. Los compuestos obtenidos fueron evaluados para determinar su concentración inhibitoria mínima, en 6 bacterias prototipo. Los resultados muestran que 5 compuestos presentaron actividad en las bacterias Gram positivo ensayadas. Ninguno de los compuestos presento actividad en bacterias Gram negativa. En conclusión, se establece que el empleo de la gráfica de Craig y modelo CoMFA resultaron ser herramientas útiles para el desarrollo de nuevos compuestos antibacterianos de estructura 8-(4’-aril-mercapto)-pirimidoisoquinolinquinonas / Antibacterials have been used in treatment and control of infectious diseases in modern times. Today, the struggle against several diseases with bacterial origins has become a global health problem, due to bacterial resistance. In addition, diminishing research and development trends in antibacterial drugs urges us to focus resources on new active compounds. These should target multi-resistant bacteria with novel chemical structures and action mechanisms. In this sense, the electron transport chain and in particular the ubiquinone seems like an interesting target for new antibacterial developments. For this reason, our research group has conducted the development of active isoquinolinquinone derivatives on gram positive bacteria. However, the research of the factors that modulate the activity of these compounds has not been previously performed. The objective of this research is to develop a CoMFA model and compare it with Craig´s graph to establish the usefulness of these models for the development of new antibacterial compounds. The CoMFA methodology measures steric and electrostatic parameters of each molecule and indicates that the first parameters are the main contributors to the activity of this compound family. In contrast, Craig plot relates the hydrophobic and electronic constants of the substituents. From this plot, as a result of the activity of this compound series, it is derived that the hydrophobic properties of the substituents are the main contributor. To validate these results, eight derivatives of 8-aril-mercapto-pirimidoisoquinolinquinone were synthesized, in two steps, with efficiency between 42.7% and 88.5%. These compounds were evaluated to determine the minimum inhibitory concentration, using six prototype bacteria. The results show that five compounds achieved activity on the tested Gram-positive bacteria. None of these compounds revealed activity on Gram-negative bacteria. In conclusion, it has been stablished that both tools, Craig plot and CoMFA, are useful methods in the development of new antibacterial compounds of 8-(4’-aryl-mercapto)-pyrimidoisoquinolinquinone structure

Unidad de práctica para optar al título de Químico Farmacéutico / Los medicamentos esenciales son los productos farmacéuticos indispensables que cubren las necesidades sanitarias básicas de la población, y que son primordiales para el acceso a la salud. En Chile desde el año 1969, existe una lista con los medicamentos esenciales denominado Formulario Nacional de Medicamentos (FNM), el cual se actualizó por última vez en el año 2005. Este trabajo tiene como objetivo realizar un diagnóstico sobre la utilidad que tienen los medicamentos esenciales, tanto en Chile como en el resto del mundo; para generar una recomendación sobre el proceso, la actualización y la utilidad del FNM, incluyendo una propuesta de criterios para la inclusión de medicamentos en el Petitorio Mínimo exigido a las farmacias del sector privado. La Organización Mundial de la Salud (OMS) entrega cada dos años una lista modelo de medicamentos esenciales, los cuales son una guía para las Lista de Medicamentos Esenciales de cada nación, en las que existen criterios de selección, además de la formación de una comisión o comité multidisciplinario asesor que contribuye en la realización y actualización de dicha lista. En Chile la legislación indica cuales son los criterios de selección para la elaboración del FNM, y que son similares a los de la OMS. Sin embargo, a diferencia de la OMS, Chile no ha actualizado su FNM desde el año 2005, por lo que cuenta con productos que no están en el comercio o que están sin un registro sanitario vigente, dejando a la población sin el suministro o la disponibilidad de un producto esencial para su salud. Por lo tanto, para que el FNM cumpla con su objetivo, es indispensable que se revise y se actualice periódicamente, optimizando los recursos económicos en salud, mayor suministro y disponibilidad de medicamentos, entre otros; para aportar con un sistema de salud de calidad y el acceso a la salud de las personas. Este trabajo plantea una recomendación de la actualización del FNM, proponiendo la eliminación de algunos medicamentos basados en la recomendación de la OMS, arsenales fármaco-terapéuticos entre otros; también se recomienda dar cumplimiento a la exigencia de las monografías oficiales que se exigen y se anexan al Formulario, para poder entregar información completa del tratamiento los medicamentos y utilizarlo como una herramienta para el Uso Racional de medicamentos. Por otro lado, se recomienda al Ministerio de Salud que se incorporen de forma regular y periódica las actividades y tareas que demanda el Formulario, asignando los recursos humanos y materiales necesarios que den cumplimiento a la exigencia reglamentaria, en un trabajo coordinado entre los distintos actores del Ministerio de Salud. Finalmente, se recomienda establecer una estrecha red de colaboración entre los distintos actores interministeriales; todo esto servirá como herramienta para la optimización y gestión de compras, suministro y disponibilidad de medicamentos esenciales para contribuir a la salud de las personas

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / Buddleja globosa Hope es una planta nativa de Chile que ha demostrado efectos analgésicos, antioxidantes, antiinflamatorio, antibacterianos y antifúngicos. En la Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas de la Universidad de Chile se han realizado estudios que comprueban su actividad analgésica, antiinflamatoria y antioxidante. Además se han evaluado preparados farmacéuticos (crema y gel) en el tratamiento de eritrodisestesia palmo-plantar secundaria a terapia antineoplásica y radioepitelitis. Con estos antecedentes se propone la elaboración de un colutorio a base de un extracto de B. globosa para el tratamiento de mucositis oral, una enfermedad inflamatoria resultante de la terapia contra el cáncer, cuya incidencia es del 40-90% y se manifiesta como lesiones inflamatorias y/o ulcerativas del tracto oral y/o gastrointestinal. Este efecto secundario puede no sólo comprometer la salud de los pacientes que la presentan, sino también, la terapia a la que están sujetos. Hasta hoy no existe ningún producto aprobado para su uso en mucositis oral que haya demostrado eficacia en su prevención y/o tratamiento. El objetivo general de este trabajo consiste en estandarizar un extracto alcohólico de hojas de B. globosa y evaluar mediante un ensayo preclínico la efectividad de un colutorio a base de dicho extracto estandarizado en sus componentes activos. Para la elaboración del extracto etanólico semipurificado (EMAT) se utilizó material vegetal (hojas) recolectado en la Facultad de Ciencias Agronómicas de la Universidad de Chile, Santiago. Con el material seco y molido se realizaron extracciones seriadas con solventes de polaridad creciente (hexano, diclorometano y etanol). La valoración de EMAT y colutorio se realizó por cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE) cuantificando los metabolitos verbascósido y 7-O-glucósido de luteolina mediante curvas de calibración elaboradas con los respectivos patrones. Se evaluó la estabilidad de EMAT y colutorio en estufa a 40°C y a temperatura ambiente. Se realizó un estudio in vivo con Ratas hembras Sprague-Dawley, se estudiaron 7 grupos (control sano, control de mucositis, tratamiento de referencia (glutamina), colutorio al 1% EMAT vía oral, colutorio 5%EMAT vía oral, colutorio 1% EMAT vía tópica y colutorio 5% EMAT vía tópica) evaluando grado de mucositis, peso corporal y consumo de alimento. Además, se realizaron análisis histológicos a muestras de lengua. La metodología CLAE permitió cuantificar los componentes principales (verbascósido y 7-O-glucósido de luteolina) en EMAT (90,58± 1,377 ppm y 9,823± 0,131 ppm) y en las dos formulaciones elaboradas del colutorio, al 1% en EMAT (80,37± 4,454 ppm y 7,068± 0,3942 ppm) y al 5% en EMAT (325,1±9,668 ppm y 38,42± 1,367 ppm) Con respecto a la estabilidad química de los compuestos activos del colutorio, se estableció que se produce degradación, llegando a un 8,09% de verbascósido al tercer mes en estufa a 40°C y 18,96% en el caso de 7-O-glucósido de luteolina. Mientras que en EMAT la concentración del verbascósido fue un 77,63% al cabo de tres meses en estufa a 40°C y el 7-O-glucósido de luteolina de un 82,24% respecto a la concentración inicial. El colutorio a base de EMAT al ser un producto estandarizado en sus compuestos activos asegura la reproducibilidad lote a lote, la trazabilidad de la composición química del producto y por ende su acción farmacológica. En el estudio in vivo no se observan signos físicos de desarrollo de mucositis oral en ningún grupo y no se observan diferencias estadísticamente significativas en el peso y consumo de alimento entre los grupos estudiados. Sin embargo, en el análisis histológico de mucosa lingual revela diferencias entre los grupos, principalmente en el grosor epitelial que se ve más delgado en los grupos de control de mucositis y tratamiento de referencia, no así en los grupos tratados con colutorios que se asemejan más al control sano. En base a los resultados obtenidos en el estudio histológico, se encuentran evidencias que los colutorios al 1% y 5% en EMAT, tanto por vía oral como tópica, podrían ser efectivos en el tratamiento de la mucositis oral inducida por busulfán / Buddleja globosa Hope is a native plant from Chile that has shown analgesic, antioxidant, anti-inflammatory, antibacterial and antifungal effects. In the Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas de la Universidad de Chile, studies that verify its analgesic, anti-inflammatory and antioxidant activity have been carried out. In addition, pharmaceutical formulations (cream and gel) have been evaluated in the treatment of palmar-plantar erythrodysesthesia secondary to antineoplastic therapy and radioepithelitis. With this background it is proposed the development of a mouthwash based on an extract of Buddleja globosa Hope for the treatment of oral mucositis, an inflammatory disease resulting from cancer therapy. Oral mucositis’ incidence is 40-90% and is manifested as inflammatory and/or ulcerative lesions of the oral and/or gastrointestinal tract. This side effect may not only compromise the health of the patients presenting it, but also the therapy to which they are subject. To the date there is no approved product in the treatment and/or prevention of oral mucositis that has been demonstrated efficacious. The general objective of this work is to standardize an alcoholic extract of leaves of Buddleja globosa Hope and to evaluate, by a preclinical test, the effectiveness of a mouthwash based on this standardized extract in its active components. For the elaboration of fractionated ethanolic extract (EMAT) plant material (leaves), collected in the Facultad de Ciencias Agronómicas de la Universidad de Chile, Santiago, was used. With the dry and milled material, serial extractions were carried out with increasing polarity solvents (hexane, dichloromethane and ethanol). The analysis of the extract and mouthwash was performed by HPLC methodology, quantifying the metabolites verbascoside and luteolin 7-O-glucoside using calibration curves elaborated with the respective standards. Stability of the extract and mouthwash was evaluated in an oven at 40 ° C and at room temperature. An in vivo study was performed with 7 groups of female Sprague-Dawley rats (healthy control, mucositis control, standard treatment (glutamine), mouthwash 1% EMAT orally, mouthwash 5% EMAT orally, mouthwash 1% EMAT topically and mouthwash 5% EMAT topically) evaluating the degree of mucositis, body weight and food intake. In addition, histological analyzes were performed on tongue samples. The HPLC methodology allowed quantification of the major components (verbascoside and luteolin 7-O-glucoside) in EMAT (90.58 ± 1.377 ppm and 9.823 ± 0.131 ppm) and in the two formulations of the mouthwash, 1% in EMAT (80, 37 ± 4.454 ppm and 7.068 ± 0.3942 ppm) and 5% in EMAT (325.1 ± 9.668 ppm and 38.42 ± 1.367 ppm) Regarding the chemical stability of the active compounds of the mouthwash it was established that degradation occurs, reaching 8.09% verboscoside at the third month in an oven at 40 ° C and 18.96% in the case of luteolin 7-O- glucoside, while in the dry extract EMAT the concentration of verbascoside was 77.63% after three months in a stove at 40 ° C and luteolin 7-O-glucoside of 82.24% in relation to the initial concentration. The EMAT-based mouthwash as a standardized product concerning its active compounds ensures batch-to-batch reproducibility, traceability of the chemical composition of the product and thus its pharmacological action. In the in vivo study no physical signs of oral mucositis development were observed in any group and no statistically significant differences were observed in weight and feed intake among the groups studied; however, the histological analysis of lingual mucosa reveals differences between them, mainly in the epithelial thickness that was thinner in the control group of mucositis and standard treatment group, but not in the ones treated with mouthwashes, where a resemble to the healthy control group was observed. Based on the results obtained in the histological study, there is evidence that 1% and 5% mouthwashes in EMAT, both orally and topically, could be effective in the treatment of oral mucositis induced by busulfan / 31/12/2018

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / Los fibroblastos cardíacos (FC) son considerados células centinelas del tejido cardíaco, por su compleja y variada respuesta en la mantención de la homeostasis o frente a un evento de injuria cardíaca, como infarto al miocardio (MI). La necrosis de cardiomiocitos involucra la liberación diversos patrones moleculares asociados a daño (DAMPs), entre ellos el heparán sulfato (HS), constituyente de la matriz extracelular (MEC) de FC que ejerce sus efectos a través del receptor Tipo-Toll 4 (TLR4). La cascada inflamatoria gatilla la infiltración y adhesión de leucocitos, que se encargan de limpiar restos celulares y liberar citoquinas que favorecen la diferenciación de FC a miofibroblastos (MFC), iniciando el proceso fibrótico y formación de cicatriz. La activación crónica de MFC por citoquinas y DAMPs en esta etapa puede provocar deposición excesiva de colágeno, conocida como fibrosis cardiaca, con consecuencias como arritmias e insuficiencia cardíaca. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de HS en la expresión de proteínas de adhesión en el FC junto con la adhesión de leucocitos y sus consecuencias en la modulación del fenotipo del FC. Se demostró que en FC in vitro, HS aumenta la expresión de ICAM-1 y VCAM-1, y como consecuencia de ello, aumenta la adhesión de células mononucleares de bazo (SMC) y polimorfonucleares de médula ósea (PMN) a FC. El co-cultivo de FC con SMC generó un aumento en la expresión de alfa-actina de músculo liso (α-SMA), que es revertido al pre-tratar los FC con HS. Estos resultados dan cuenta del rol dual del HS durante las etapas de la cicatrización post-MI, permitiendo la adhesión de SMC y diferenciación de los FC a un fenotipo pro-fibrótico, pero manteniendo a la vez características pro-inflamatorias necesarias para llevar a cabo el proceso de cicatrización, y mantener la homeostasis con el fin de mantener el funcionamiento del tejido cardíaco / Cardiac fibroblasts (CF) act as sentinel cells of the heart tissue, due to its complex response in the maintenance of homeostasis or in cardiac injury events, such as myocardial infarction (MI). Cardiomyocyte necrosis involves the release of various damage-associated molecular patterns (DAMPs) including heparan sulfate (HS), constituent of the extracellular matrix (ECM), whose effects are exerted through the TLR4 receptor. The inflammatory cascade triggers the infiltration and adhesion of leukocytes, which are responsible of clearing cell debris and releasing cytokines that promote CF differentiation to myofibroblast (CMF), initiating the fibrotic process and scar formation. Chronic activation of CMF at this stage may cause excessive collagen deposition, known as cardiac fibrosis, with consequences such as arrhythmia and heart failure. The overall objective was to study the effect of HS on the expression of adhesion proteins in CF, along with leukocyte adhesion and its consequences in modulating the phenotype of CF. HS enhanced ICAM-1 and VCAM-1 expression, with increased spleen mononuclear cells (SMC) and bone marrow granulocytes (PMN) adhesion to CF. Co-culture of CF with SMC caused an increment of α-SMA expression, skewing CF towards a profibrotic phenotype, but pre-treating CF with HS partially reverted this effect. These data shows the dual role of HS during the initial stages of wound healing, allowing the adhesion of SMC and differentiation of CF to a profibrotic phenotype, while mantaining proinflammatory properties to ensure tissue homeostasis and prevent complications such as heart rupture / FONDECYT N° 1130300