Analiza la extracción y purificación de lectinas de semillas de Lupinus mutabilis del ecotipo Patón Grande, se evalúa su actividad hemaglutinante, se caracteriza bioquímicamente y se determina su efecto sobre leucocitos polimorfonucleares. / Tesis

Objetivo: El objetivo del presente estudio fue determinar la asociación entre los valores del leucograma con el estadío anatomopatológico de la apendicitis aguda. Métodos y materiales: Se realizó un estudio descriptivo, transversal retrospectivo, donde se seleccionó los pacientes ingresados a sala de operaciones con el diagnóstico preoperatorio de apendicitis aguda en un periodo de 6 meses en el Hospital Emergencias Grau y se recolectó en una ficha de datos los datos de los valores de leucograma, filiación e informe anatomopatológico de la muestra operatoria, a fin de realizar los análisis de frecuencia y estadísticos con pruebas de chi cuadrado y medidas simétricas. Resultados: De un total de 229 pacientes, 58,1% fue de sexo masculino, la apendicitis supurada fue el estadío más frecuente con 34,9%. Conteo de leucocitos tuvo una media para apendicitis congestiva: 12042/mL, apendicitis supurada: 14586/mL, apendicitis gangrenada: 15006/mL y apendicitis perforada: 15724/mL. El análisis de estadísticos para determinar asociación entre los valores de leucograma con el estadío anatomopatológico de apendicitis resultó: Conteo de leucocitos chi2: 52,1 (p< 0,05), Coeficiente de contingencia: 0,43 (p< 0,05), Gamma: 0,38 (p< 0,05); conteo relativo abastonados chi2: 4,2 (p: 0,39); conteo absoluto abastonados chi2: 26,3 (p< 0,05), Coeficiente de contingencia: 0,32 (p< 0,05), Gamma: 0,49 (p< 0,05); conteo relativo neutrófilos chi2: 16,2 (p< 0,05), Coeficiente de contigencia: 0,26 (p< 0,05), Gamma: 0,38 (p< 0,05); conteo absoluto neutrófilos chi2: 35,7 (p< 0,05), Coeficiente de contingencia: 0,37 (p< 0,05), Gamma: 0,57 (p< 0,05). Conclusiones: El conteo de leucocitos, conteo absoluto de abastonados, conteo relativo y absoluto de neutrófilos están asociados levemente y a mayor valor corresponde mayor estadío anatomopatológico de apendicitis aguda.

Objetivo: Determinar el valor predictivo del recuento de leucocitos en materia fecal para el diagnóstico de Salmonella, Shigella y E. coli en lactantes y preescolares con Enfermedad Diarreica Aguda atendidos en el Hospital María Auxiliadora 2013 – 2015. Material y Métodos: Estudio observacional, descriptivo, retrospectivo. La muestra final estuvo conformada por 132 lactantes y preescolares atendidos en el Hospital María Auxiliadora, donde el resultado de coprocultivo fue: la mitad positivo y la otra mitad negativo. Para determinar el valor diagnóstico del recuento de leucocitos se empleó la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo (VPP) y negativo (VPN), cociente de probabilidad (CP). Resultados: Los enteropatógenos identificados en las muestras de coprocultivo positivo fueron Escherichia coli (56,1%), Shigella (27,3%) y Salmonella (16,7%). Al analizar el rendimiento diagnóstico del recuento de leucocitos para la identificación de Escherichia coli se encontró que el punto de corte mayor a 5 leucocitos/campo mostró la mayor sensibilidad (89%), especificidad: 57%, VPP: 45% y VPN: 93%, el CP positivo 2,1. Para la identificación de la Shigella, la presencia mayor a 20 leucocitos/campo presentó sensibilidad: 94%, especificidad: 50%, VPP: 32%, VPN: 99% y su CP positivo 3,0. En la Salmonella, el recuento mayor a 20 leucocitos/campo presentó sensibilidad: 55%, especificidad: 61%, VPP: 11%, VPN: 94% y un CP positivo 1,4. Conclusiones: El recuento mayor a 5 leucocitos/campo tiene mejor valor predictivo para identificar Escherichia coli mientras para Shigella y Salmonella fue mayor a 20 leucocitos/campo; sin embargo la capacidad predictiva del recuento de leucocitos en lactantes y preescolares con enfermedad diarreica aguda en general no es óptima.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Una de las principales características de los sistemas productivos es su alto grado de intensidad, por lo que siempre es necesario contar con herramientas que nos permitan monitorear el estado sanitario de los individuos que forman parte de éste. El control de los agentes etiológicos, las enfermedades y los factores que contribuyen a su presentación como el hacinamiento, agentes estresores, nutrición, atención y manejo, permiten que los animales puedan crecer y desarrollarse logrando sus máximos potenciales genéticos en términos productivos acorde a su bienestar fisiológico. En la actualidad existen diversas metodologías que se usan para obtener información relacionada con el estado sanitario de peces en cultivo intensivo. Estos procedimientos, dentro de los cuales se encuentran la toma de muestras de órganos y necropsias, están aceptados y validados, pero la mayoría de las veces contemplan el sacrificio del pez. El uso de estudios hematológicos, que en la actualidad no forman parte de los métodos de rutina en salmones, también permiten el monitoreo de una población o de un mismo individuo repetidas veces. En mamíferos, se utilizan como prevención y apoyo al diagnóstico en forma rutinaria lo que es de gran valor para conocer el estado sanitario de un individuo y establecer la presencia o ausencia de una condición patológica. Dentro de las técnicas hematológicas utilizadas en todas las especies se encuentra el método del hemocitómetro, que es el método estándar para realizar los recuentos totales de células en sangre. Otra técnica, es el estudio del frotis sanguíneo, cuyo objetivo principal es realizar los recuentos diferenciales de células y el análisis morfológico, pero que en algunas especies como humanos y caninos, se utiliza como un método indirecto para los recuentos totales de células leucocitarias. Ambas técnicas son complementarias, ya que permiten obtener la cantidad total de células sanguíneas presentes (eritrocitos, leucocitos, trombocitos), y la distribución y morfología respectivamente. Sin embargo, desde un punto de vista práctico, el método del hemocitómetro es muy complejo de utilizar en terreno debido especialmente a la experiencia del observador y al tiempo que se requiere para obtener un resultado confiable. En humanos y caninos se ha logrado obtener estandarizaciones para la utilización del frotis sanguíneo como base para extrapolar los recuentos totales de células en sangre, lo que en peces aún no ha sido descrito, estrategia que podría tener un gran potencial de aplicación. Un método práctico y asequible como herramienta de trabajo de terreno que permita contar con una cuenta celular más efectiva en sangre de peces, permitiría instalar el uso de este tipo de exámenes como rutina para así tener una mejor aproximación del estado sanitario sin sacrificio de los animales. De esta forma, el presente estudio tiene como objetivo principal correlacionar el método tradicional de recuento total y diferencial de células con un método indirecto efectuado sólo en frotis sanguíneo en peces sanos a fin de obtener información hematológica consistente y confiable en individuos de importancia económica / Financiamiento: CORFO Sanitario (2009-6682)

La infección con el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV), causa una profunda inmunodepresión que expone a las personas infectadas a diversas infecciones oportunistas. Lepidium peruvianum Ch. presenta varias propiedades como, su capacidad estimulante de la reproducción y energizante, investigaciones recientes han demostrado su capacidad antitumoral e inmunoestimulante. El objetivo del presente trabajo fue determinar la actividad de tres tipos de extractos (clorofórmico, acuoso y metanólico) de L. peruvianum Ch. en cultivos de leucocitos de personas saludables y HIV-1+. Para ello, células sanguíneas de 5 voluntarios sanos y 5 HIV-1+ fueron cultivadas por triplicado en presencia de cada extracto a una concentración final de 800µg/mL y se incubó por 16 horas a 37 ºC. Se realizó el recuento de los leucocitos y sus 4 estirpes celulares (linfocitos, neutrófilos, eosinófilos y monocitos) mediante hemograma manual y de las poblaciones de linfocitos T CD3+CD4+ y CD3+CD8+ por citometría de flujo. Se empleó el medio de cultivo RPMI como control negativo de la prueba. En las personas saludables, para las 4 estirpes celulares evaluadas, el extracto clorofórmico logró incrementar significativamente el número de linfocitos (p=0.003). La población linfocitaria T CD3+CD4+ presentó un incremento celular con el extracto clorofórmico (p= 0.004).En las personas HIV-1+, los 3 extractos lograron incrementar el número de leucocitos. En los individuos pertenecientes al estadío C se observó que el extracto clorofórmico logró un incremento significativo del número de linfocitos respecto al control. Estos resultados pueden ser de gran ayuda para utilizar a L. peruvianum Ch. en el tratamiento de personas infectadas con HIV-1 contribuyendo con restaurar el nivel y funcionamiento de las células T infectadas por el virus. Palabras Clave: Lepidium peruvianum, Lepidium meyenii, maca, inmunoestimulante, metabolitos secundarios, HIV-1, SIDA. / --- Infection with the human immunodeficiency virus (HIV), causes a profound immunosuppression that exposes people infected to various opportunistic infections. Lepidium peruvianum Ch. has several properties, the most known, its ability stimulating the reproduction and energizing or revitalizing, recent research has shown antitumor and immunostimulatory capacity. The aim of this study was to determine the activity of three types of extracts (chloroform, methanol and aqueous) of L. peruvianum Ch. in cultures of leukocytes from healthy people and HIV-1+. To do this, blood cells from 5 healthy and 5 HIV-1+ volunteers were cultured in triplicate in the presence of each extract at a final concentration of 800μg/mL and incubated for 16 hours at 37 ° C. We performed the counting of leukocytes and their 4 cell lines (lymphocytes, neutrophils, eosinophils and monocytes) through a hemogram and populations of T lymphocytes CD3+ CD4+ and CD3+ CD8+ by flow cytometry. We employed RPMI culture medium as negative control test. In healthy people, for the 4 cell lines tested, the chloroform extract was able to increase significantly the number of lymphocytes (p= 0.003). The CD3+CD4+ lymphocyte population showed an increase cell with the chloroform extract (p= 0.004). In people HIV-1+ the 3 extracts were able to increase the number of leukocytes. In individuals belonging to stage C showed that the chloroform extract achieved a significant increase in number of lymphocytes over control. These results may be helpful to use a L. peruvianum Ch. in treating people infected with HIV-1 contributing to restore the level and function of T cells infected with the virus. Key Words: Lepidium peruvianum, Lepidium meyenii, maca, immunostimulant, secondary metabolites, HIV-1, AIDS.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Determina el rol del nivel leucocitario en el diagnóstico de apendicitis aguda en el Tópico de Cirugía de Emergencia del Hospital Emergencias Grau durante el periodo enero-diciembre 2013, Lima-Perú. El estudio es de tipo observacional, descriptivo, retrospectivo. Se recogieron los datos de 621 historias clínicas de pacientes con sospecha de apendicitis aguda que fueron sometidos a cirugía, que cumplieron criterios de inclusión y exclusión. Se analizaron en distribución de frecuencias, medidas de tendencia central y dispersión. El performance diagnóstico del nivel de leucocitos totales, abastonados y neutrófilos, fue analizado mediante el uso de Curvas ROC. De los pacientes con apendicitis, 59.8% (n=332) eran hombres y 40.2% (n=223) mujeres. El grupo etáreo más afectado fue de 20 a 29 años (23.6%). El índice de apendicectomia con apéndice sin alteraciones significativas fue de 10.6%. Se confirmó apendicitis aguda mediante histopatología en el 92.6% (n=428) de pacientes con nivel de leucocitos totales elevado, en el 93.4% de pacientes con nivel de abastonados >500 cel/mm3 y en el 92.7% de pacientes con nivel de neutrófilos elevado. La media del conteo de leucocitos totales (17604 ± 4708), abastonados (958 ± 1081) y neutrófilos (13991 ± 4276) fue mayor en los pacientes con apendicitis aguda gangrenada. Para diferenciar entre pacientes con y sin apendicitis el punto de corte con mejor performance de leucocitos totales fue 12,320 cel/mm3 (S: 70.45%; E: 69.70% y ABC=0.708), de abastonados fue 384 cel/mm3 (S: 53.15%; E: 75.76% y ABC=0.655), y de neutrófilos fue 10,260 cel/mm3 (S: 63.60%; E: 77.27% y ABC=0.717); para diferenciar entre pacientes con apéndice normal y apendicitis no perforada (simple y gangrenada) el punto de corte de leucocitos totales fue 12,870 cel/mm3 (S: 64.97%; E: 74.24% y ABC=0.707), de abastonados fue 384 cel/mm3 (S: 52.45%; E: 75.76% y ABC=0.649), y de neutrófilos fue 10,260 cel/mm3 (S: 63.01%; E: 77.27% y ABC=0.714); y para diferenciar entre pacientes con apendicitis perforada vs pacientes con apéndice normal y apendicitis no perforada, el punto de corte de leucocitos totales fue 12,640 cel/mm3 (S: 81.82%; E: 37.78% y ABC=0.539), de abastonados fue 187 cel/mm3 (S: 88.64%; E: 36.05% y ABC=0.574), y de neutrófilos fue 9,468 cel/mm3 (S: 81.82%; E: 35.88% y ABC=0.557). Se concluye que los niveles de leucocitos totales, abastonados y/o neutrófilos no pueden ser utilizados como test diagnóstico ni marcadores de severidad del cuadro de apendicitis aguda, sin embargo estos niveles elevados sí apoyan al diagnostico de apendicitis aguda. Además un nivel de leucocitos totales mayor a 17604 cel/mm3, abastonados mayor a 958 cel/mm3, y/o de neutrófilos mayor a 13991 cel/mm3, apoyan al diagnóstico de apendicitis aguda gangrenada. / Tesis

Artritis reumatoidea Juvenil (ARJ) es una enfermedad inflamatoria crónica, autoinmune que afecta a mas de una articulación en lugar y numero. Es una de las enfermedades más comunes en la consulta pediátrica reumatológica y una de las menos estudiadas desde el punto de vista inmunogenetico. En la literatura se ha reportado varias asociaciones de (HLA) Antigenos de Leucocitos Humanos y ARJ con diferentes grupos étnicos, sobre todo con los antigenos HLA clase II: HLA-DR1 y DR4 asociándolos con el subgrupo clínico poliarticularLo contrario a la arthritis reumatoidea del adulto, la ARJ presenta variante clinicas el cual la hace mas interesante desde el punto de vista genetico (fenotipo). Desde el punto de vista patogénesis se han encontrado varios posibles factores que podrían estar en parte, determinados por alteraciones a nivel trimolecular compuesto por un antigeno putativo, el receptor del linfocito T CD4+ y las moléculas HLA.Este estudio se realizo en un grupo de mestizos Colombianos el cual contiene una mezcla génica de amerindio, europea y africana que padecían de ARJ. Se estudio la asociación de los antigenos de leucocitos humanos HLA-DRB1 y HLA -DQB1 en 65 pacientes con ARJ y 65 controles sanos de Colombia En resumen, en este estudio lo hallazgos encontrados fueron la presencia de los alelos HLADRB1*1104 y DRB1*1602 asociados como marcadores de susceptibilidad y los alelos HLA-DRB1*1501 y HLA DRB1*1402 se comportaron como alelos asociados con protección. Al comparar las asociaciones entre alelos y los diferentes subgrupos clínicos se encontró asociación entre ARJ oligoarticular con HLA-DRB1* 1104, ARJ poliarticular se asoció con el alelo HLA-DRB1* 0404 y en el grupo sistémico, el alelo más expresado fue el HLA-DRB1*1602. La presencia de Factor Reumatoide estuvo asociado con los alelos HLA-DRB1*0407 y HLA-DRB1*1302. En el grupo de pacientes con ANA+ solo hubo significancia estadística para el HLA-DRB1* 0701. El subgrupo poliarticular mostró asociación con la secuencia aminoacidica 70 QRRAA74 el cual incluye los alelos HLA DRB1*04, 01 y 1402. Con relación a la asociación haplotipos y subgrupos clínicos, se destacan dos nuevos hallazgos de interés: ARJ oligoarticular se asoció con el haplotipo cacausoide DRB1*1104, DQB1*0301, y el haplotipo amerindio DRB1*1602, DQB1*0602, con AR sistémico. Es de resaltar que le alelos DRB1 de estos dos haplotipos comparten el epitope 70 DRRAA 74. La información obtenida en nuestros pacientes mestizos colombianos son relevante s e importantes por que desde el punto de vista molecular a nivel de presentación antigénica el aminoácido 70 en el motivo 67-73 podría estar activando las células TH1 o TH2 el cual estaría comprometida en la patogénesis de la enfermedad.Nuestros resultados sugieren que los estudios de asociación y susceptibilidad con enfermedades llevados a cabo en poblaciones mestizas, deben considerar la carga genética mixta de estos grupos, étnicos con el objeto de evitar factores de estratificación genética. Nuestros estudios muestran que utilizando técnicas de alta resolución para la tipificación de los alelos HLA-DRB1 y DQB1 serian de gran información para la detección de epitopes específicos de los alelos HLA DRB1 el cual estarían participando no solo en la susceptibilidad a desarrollar ARJ en estos pacientes mestizos, sino también contribuyen en la expresión clínica de la enfermedad. / Juvenile rheumatoid arthritis is the most prevalent pediatric rheumatic diagnosis among children. The term designates a group of diseases that have in common chronic idiopathic inflammation of one or more joints. Substantial evidence points to an autoimmune pathogenesisThe clinical features are paralleled by immunogenetic characteristics that have been found to involve primarily, the major histocompatibility complex (MHC). There are over 50 series reporting HLA associations in JRA. The class II genes, HLA-DR1 and HLA-DR4, have been reported to increase risk for polyarticular JRA in many populations. Contrary to JRA the adult rheumatoid arthritis (RA), JRA has certain clinical variants which make it more interesting from the genetic point of view (phenotypes). In its pathogenesis several factors have been identified, which as a whole would explain the onset and the perpetuation of the inflammatory response affecting joints and nearby tissue as well as its imminent destruction given no control of it as in the case in other autoimmune diseases. The disease pathogenesis can be determined by alterations at the trimolecular level formed by a putative antigen the lymphocyte T receptor and the MHC.We studied the association of human leukocyte antigen HLA-DRB1 and HLA-DQB1 alleles and HLA haplotypes with juvenile rheumatoid arthritis in 65 patients and 65 controls from Colombia. The distribution of these alleles was examined in a group of Colombian mestizo children (genetic admixture of Amerindians, Europeans and Africans) suffering from clinically distinct JRA subsets in order Two alleles were associated with protection, HLA-DRB1*1501and HLA-DRB1*1402. HLA-DRB1*1602 was associated with susceptibility for systemic JRA and HLA-DRB1*1104 for pauciarticular JRA. The relationship between some HLA-DRB1 alleles and clinical features was also compared. The presence of rheumatic factor was associated with the alleles HLA-DRB1*0407 and HLA-DRB1*1302. There was also an association between HLA-DRB1*0701 with expressing ANA+. We found that in the expressed most commonly. In the polyarticular group, the alleles most frequently expressed were HLA-DRB1*0404. It is important to highlight that all the alleles linked to susceptibility share the Asp amino acid in position 70, and those shown as protection markers have Val in the same position.Amino acid sequences at residues 70-74 of DRB1 chain shared by HLA-DRB1 alleles (shared epítope) were also informative. The polyarticular JRA subset revealed association with 70QRRAA74, which includes HLA-DRB1*04, 01, and 70DRRAA74, which includes DRB1*1601, 1602, 1101, and 1104. Two new findings of interest were the association of the haplotypes DRB1*1104, DQB1*0301 with pauciarticular JRA and DRB1*1602, DQB1*0301 association with systemic JRA. The DRB1 alleles of these two haplotypes share the epítope 70DRAA74 and were associated with both the pauciarticular and the systemic subset of JRA. Our results suggest that studies of disease susceptibility in populations of admixed genetic background should take into account the contribution of different ethnic groups or nationalities in the recruitments of controls and patients studied in order to rule our genetic stratification.The information obtained from our findings in our series of Colombian patients are relevant and important because from the molecular point of view, at an antigenic presentation level, the amino acid in position 70 in the motif 67 to 73, at HLA molecule level, could activate TH1 or TH2 cells, which would be compromised in the immunopathology of this entity . Other genetic or/and environmental factors linked to these molecular characteristics expressed at the level of the HLA molecule and compromised in the antigenic response could interact and its result would be influencing the development and the expression of JRA In conclusion, our results demonstrated that the use of high-resolution typing for HLA-DRB1 and DQB1 alleles were informative for detecting specific epitopes of the HLA-DRB1 alleles to produce either protection from JRA susceptibility for pauciarticular or systemic subsets in Colombian mestizos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-23T14:23:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 247012.pdf: 343558 bytes, checksum: 0f8ff6c64382af553716a87feda6562a (MD5) / Espécies do gênero Solidago têm sido utilizadas na medicina popular de diversos países no tratamento de infecções e na inflamação. Objetivo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito antiinflamatório do extrato aquoso (AE) e de duas frações isoladas: fração butanólica (BuOH) e resíduo aquoso (AR) das raízes de Solidago chilensis Meyen, sobre os níveis de leucócitos, exsudação, mieloperoxidase (MPO), adenosina-deaminase (ADA), óxido nítrico (NOx), interleucina-1 beta (IL-1 ), quemocina para neutrófilos (KC), e fator de necrose tumoral-alfa (TNF- ), utilizando o modelo de inflamação induzida pela carragenina na bolsa de ar, em camundongos. Metodologia: As raízes da Solidago chilensis foram submetidas à extração, sob infusão. O extrato foi filtrado e uma alíquota liofilizada em Edward® (Edward®, EUA). Parte deste extrato foi fracionada com n-BuOH, resultando nas frações butanólica (BuOH) e resíduo aquoso (AR). Nos ensaios in vivo utilizaram-se camundongos albinos suíços de 2 meses de idade de ambos os sexos. Neste protocolo experimental, a bolsa de ar foi induzida em diferentes grupos, por meio da administração de 1,5 mL de ar durante três dias alternados. No sexto dia, a inflamação foi induzida pela administração de 0,5 mL de carragenina (Cg 1%, s.c.). Para analisar o efeito antiinflamatório do extrato e suas frações, diferentes grupos de animais foram tratados com AE (10-200 mg/kg,i.p.), BuOH ou AR (10-50 mg/kg,i.p.), 0,5 h antes da indução da inflamação. Os parâmetros inflamatórios foram avaliados 24 h após. A diferença estatística entre os grupos foi determinada pela análise dos testes estatísticos de variância (ANOVA) e pelo teste de Dunnett ou teste t de Student. Valores de P < 0.05 foram considerados significativos. Resultados: O extrato aquoso das raízes de Solidago chilensis (50-200 mg/kg) e suas frações (10-50 mg/kg, i.p.) reduziram significativamente os níveis de leucócitos, neutrófilos e exsudação (P < 0,01). Além disso, o material vegetal inibiu as atividades de MPO e ADA, além dos níveis de NO, IL-1 ,TNF- e KC (P < 0,05). A indometacina e a dexametasona inibiram todos os parâmetros estudados (P < 0,01), exceto a indometacina, que não inibiu os níveis de TNF- (P > 0,05) e a dexametasona, que não inibiu os níveis de KC (P > 0,05). Conclusão: O extrato aquoso e as frações isoladas da Solidago chilensis demonstraram importante atividade antiinflamatória, inibindo não somente os mediadores pró-inflamatórios liberados na inflamação pela carragenina, mas a infiltração de leucócitos para o sítio da inflamação. Além disso, os resultados obtidos com a Solidago chilensis são semelhantes àqueles obtidos com os animais tratados com indometacina ou dexametasona, indicando que estes podem ter uma via comum de ação antiinflamatória.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:39:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327519.pdf: 2268831 bytes, checksum: 8560bf1399a17486016d9ddffbe61734 (MD5) Previous issue date: 2014 / A tuberculose (TB) é uma doença infectocontagiosa causada pelo Mycobacterium tuberculosis (MTB) transmitida diretamente de pessoa para pessoa, através da inalação de partículas infectadas pelo MTB. A TB é considerada um problema de saúde pública mundial. A cada ano, são registrados mundialmente, aproximadamente, 9 milhões de novos casos de TB e 1,4 milhões de mortes decorrentes da doença. Indivíduos infectados pelo MTB podem desenvolver tanto uma doença progressiva quanto uma infecção latente, dependendo do seu estado imunológico. Com o advento da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS), caracterizada como uma disfunção grave do sistema imunológico de pacientes infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV), houve um profundo impacto sobre o aumento do número de novos casos de TB. Apesar da forte correlação entre o desenvolvimento da TB e a diminuição de células T CD4+ no sangue periférico de indivíduos coinfectados pelo MTB/HIV estar bem estabelecida, a resposta imune celular pulmonar permanece incerta. Informações relacionadas à citologia do escarro de pacientes com TB são escassas e não se sabe exatamente se há diferenças na resposta imune celular pulmonar entre os pacientes HIV soropositivos e HIV soronegativos. Estas observações reforçam a importância da pesquisa para o desenvolvimento e avaliação de métodos que permitam o estudo das células que envolvem a resposta imune pulmonar no combate à infecção pelo MTB, principalmente nos casos de coinfecção pelo HIV/MTB. A análise das células de escarro por microscopia óptica é um método bem estabelecido para a determinação das subpopulações leucocitárias. No entanto, essa metodologia possui algumas limitações, como a impossibilidade de diferenciação de subtipos celulares morfologicamente idênticos e a necessidade de uma amostra de boa qualidade. Diante do exposto, o objetivo desse trabalho foi a investigação da importância da citometria de fluxo na avaliação da resposta imune celular em indivíduos portadores de tuberculose pulmonar ativa e bacilíferos soro negativos ou soro positivos ao HIV. Inicialmente, realizou-se a padronização da citometria de fluxo para avaliação dos fenótipos leucocitários do escarro. Após a padronização, avaliou-se a celularidade de 30 amostras de escarro de pacientes portadores de TB pulmonar ativa e bacilíferos. Os resultados demonstraram que os neutrófilos (95,68%) compunham maior percentual do que os monócitos/macrófagos (2,62%) e os linfócitos (1,64%) na celularidade total das amostras de escarro analisadas. Além disso, com relação ao total de linfócitos T (100%),foram observados em média 12,31% de linfócitos T auxiliares, 24,13% de linfócitos T citotóxicos, 62,85% de linfócitos T gama/delta (?d) e 0,02% de linfócitos T com fenótipo CD4+ e CD8+. Após a determinação da celularidade, os resultados das amostras de escarro foram subdividos em dois grupos, soropositivos e soronegativos ao HIV. Na associação desses subgrupos leucocitários acima descritos, foram observadas diferenças estatisticamente significativas somente para os percentuais de monócitos/macrófagos. Os resultados encontrados mostram que a citometria de fluxo é um método eficaz para avaliar os diferentes subtipos de linfócitos presentes nas amostras de escarro, mesmo daquelas consideradas inviáveis para análise por microscopia óptica. Sendo assim, é de grande importância para o enriquecimento das informações associadas à imunologia da coinfecção pelo MTB/HIV.<br> / Abstract : Tuberculosis (TB) is an infectious disease caused by Mycobacterium tuberculosis (MTB) that is transmitted directly from person to person through inhalation of infected particles MTB. TB is considered a worldwide public health problem. Each year, an estimated 9 million people developed TB and 1.4 million died from the disease. MTB-infectious individuals may develop either a progressive disease as well as a latent infection, and it is imune-dependent status. With the advent of Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS) that is characterized as a severe dysfunction of the immune system of patients infected with human immunodeficiency virus (HIV), there was a profound impact on increasing number of new TB cases. Despite the strong relationship between the TB development and the decrease of CD4 + cells in peripheral blood of co-infected MTB/HIV individuals be well established, the lung cellular immune response remains unclear. Information regarding the sputum of TB patients is scarce and it is not known exactly if there are cellular differences in lung immune response among HIV-positive and HIV-negative individuals. These observations emphasize the importance of research for development and evaluation techniques to study cells that surround the pulmonary immune response against MTB infection, especially in cases of coinfection HIV/MTB. The analysis of sputum cells by optical microscopy is a well-established method for the determination of leukocyte subpopulations. However, this methodology has some limitations such as the inability to differentiate morphologically identical cell subtypes and the need for a good quality sputum sample. Given the above, the aim of this study was to investigate the importance of flow cytometry to assess the cellular immune response in individuals with active pulmonary TB and bacillary, in HIV-negative or HIV-positive. First, the standardization of flow cytometry was done for assessment of leukocyte phenotypes sputum. After standardization, there were evaluated the cellularity of 30 sputum samples from patients with active pulmonary TB. The results demonstrated that neutrophils (95.68%) comprised the greatest percentage of sputum cellularity cells comparing to monocytes/macrophages (2.62%) and lymphocytes (1.64%) populations in the analyzed samples. Besides that, regarding to total T-lymphocytes (100%) there were observed on average of 12.31% of T helper, 24.13% of T cytotoxic, 62.85% of T gamma/delta (?d) and 0.02% of T with the phenotype CD4+ and CD8+. After the sputum cellularity determination, the results of the sputum samples were subdivided into two groups,HIV-positive and HIV-negative. In the association of these leukocyte subsets described above, only statistically significant differences were observed for the percentage of monocytes/ macrophages. The results show that flow cytometry is a powerful method to evaluate the different subtypes of lymphocytes present in sputum samples, even those considered unviable for analysis by light microscopy. Therefore, flow cytometry is of great importance to enrich the informations about the co infection MTB/HIV immunology.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La parotiditis crónica recurrente infantil (PCRI) es una enfermedad inflamatoria crónica y episódica que afecta a las glándulas parótidas. Dentro de los diagnósticos diferenciales de PCRI se encuentra el Síndrome de Sjögren (SS) primario infantil, el cual es una enfermedad autoinmune que afecta a las glándulas exocrinas. Una de las manifestaciones más frecuentes de SS primario infantil es la PCRI por sobre los síntomas clásicos de xerostomía y xeroftalmia. Dentro de los criterios diagnósticos pediátricos propuestos para SS se encuentran leucopenia y aumento de la velocidad de sedimentación (VHS). Esta investigación se plantea como un estudio preliminar cuyo propósito es evaluar el recuento de leucocitos y la VHS de pacientes con PCRI y comparar estos resultados con los de pacientes infantes y adolescentes sistémicamente sanos con el fin de descartar el azar en los mismos. La justificación de la comparación con pacientes sanos se basa en la poca frecuencia con que se presenta el SS primario infantil, así como también para discriminar indicadores diagnósticos poco definidos. Material y Métodos: Estudio epidemiológico observacional longitudinal retrospectivo y analítico de tipo caso control entre 2008 y 2017. El grupo casos se compuso de 69 pacientes con PCRI y el grupo control de 31 pacientes infantes y adolescentes sistémicamente sanos. Se describió epidemiológicamente a ambos grupos determinándose también la prevalencia de alteraciones en el recuento de leucocitos y VHS. Se comparó los resultados del recuento leucocitario y la VHS entre ambos grupos mediante el test de chi cuadrado. Resultados: Hubo un 62,32% de pacientes de sexo masculino en el grupo casos, en el grupo control un 58,06%. La edad de los pacientes al tomar los exámenes de sangre fue de 12,35 ± 2,88 años para el grupo casos y 6,77 ± 3,15 años para el grupo control. Se determinó una prevalencia de 5,8% de recuento de leucocitos alterado para el grupo casos (1,45% leucocitosis; 4,35% leucopenia) y de 0 para el grupo control. Hubo una prevalencia de 5,8% de VHS aumentada en el grupo casos y de 12,9% en el grupo control. No se evidenció una diferencia estadísticamente significativa entre ambos grupos en recuento de leucocitos ni en VHS. Conclusiones: La mayoría de los pacientes del grupo casos presentan recuento de leucocitos y VHS normales. La totalidad de los pacientes del grupo control presentan recuento de leucocitos normal, la mayoría de ellos presenta VHS normal. No se evidencia diferencia estadísticamente significativa entre ambos grupos. Es necesario aumentar el número de pacientes participantes del estudio para poder realizar inferencia estadística significativa. / Adscrito a proyecto PRIOODO 014/016