O transplante hepático é o tratamento de escolha para uma série de doenças terminais agudas e crônicas do fígado. Contudo, sua oferta tem sido restringida pela falta de doadores, o que tem provocado o aumento do número de pacientes em lista de espera. A escassez de órgãos condiciona a aceitação para transplante de enxertos provindos de doadores sem as melhores condições para tal – os chamados doadores marginais. O dano de isquemia/reperfusão (IR) é resultado dos fatores perioperatórios inerentes ao procedimento, incluindo as condições do doador. Quanto pior o doador, pior o órgão transplantado, e maior a possibilidade de desenvolvimento de disfunção primária do enxerto (DPE). DPE comumente é definida pela elevação das enzimas hepáticas. As aminotransferases, entretanto, podem alterar-se por outras complicações que não a lesão de isquemia/reperfusão. A histologia hepática, por sua vez, pode fornecer informações acerca da IR. Com o objetivo de estimar a extensão histológica do dano de preservação (necrose hepatocelular e neutrofilia sinusoidal), correlacioná-la a variáveis bioquímicas (índice de reperfusão: AST + ALT + LDH / 3) e avaliar a sua influência no período pós-operatório imediato (até 7 dias), foi realizado um estudo transversal com análise sistemática de 55 pacientes adultos que receberam seu primeiro enxerto hepático entre Setembro de 1996 e Dezembro de 1999. Foram comparados os fatores de risco relacionados ao doador, ao receptor, ao procedimento cirúrgico e ao período pós-operatório e analisadas as biópsias feitas antes e imediatamente após o procedimento cirúrgico. Houve dano de preservação em todos os pacientes estudados tanto por critérios anatomopatológicos quanto por critérios bioquímicos. Houve associação significativa entre os achados bioquímicos e histológicos (p=0,04; coeficiente gamma=0,49). A extensão da necrose hepatocitária parece ser o dado anatomopatológico isolado que melhor se relaciona ao índice de reperfusão (p=0,05; coeficiente gamma=0,48). Houve associação entre DPE e a histologia hepática (p=0,02). O índice bioquímico associou-se à DPE (p=0,001) e à incidência de insuficiência renal aguda (IRA) (p<0,0001). A mortalidade inicial foi maior nos pacientes com índice de reperfusão grave (p=0,002). O índice de reperfusão foi um fator de risco independente para a função do enxerto (p=0,004) e IRA (0,04). A sobrevida atuarial em 1 ano foi significativamente menor nos pacientes com dano de preservação grave (p=0,003). A análise da biópsia de reperfusão é capaz de detectar o dano de preservação sofrido pelo enxerto e se correlaciona às variáveis bioquímicas em sua estimativa. / Orthotopic liver transplantation has become an established therapy for patients with end-stage liver disease. Its rapid growth has been curtailed by the lack of organ donors and has led to an expansion in the number of patients on the waiting list. This growing imbalance has led to the relaxing of selection criteria for donors. Many donors which were previously not considered for transplantation are now used – the called marginal donors. Ischemic/reperfusion injury (IR) within the liver allograft occurs as a result of numerous factors and events inherent to the transplantation process. Worst the donor, worst can be the allograft, and more prone it will be to exhibit initial poor function (IPF). IPF is commonly defined on the basis of elevated liver tests, but early aminotransferase elevation after liver transplantation may result from complications other than ischemic/reperfusion lesion. Liver histology can provide some useful information to assess IR. We conducted a cross-sectional study on 55 adult liver transplant recipients, who received their first liver allograft between September 1996 and December 1999, in order to assess IR according to biochemical (reperfusion index: AST + ALT + LDH / 3) and pathological (sinusoidal neutrophilia and hepatocellular necrosis) variables. The risk factors related to donor, recipient, surgical procedure, and postoperative period (until 7 days) were studied, as well as liver biopsies collected before and immediately after transplantation. Some degree of IR was universally found. There was association between biochemical and pathological findings (p=0,04; gamma=0,49). There was a trend toward to extension of hepatocellular necrosis to be isolatedly related to reperfusion index (p=00,5; gamma=0,48). Liver histology was associated with IPF (p=0,02). Reperfusion index was significantly associated to IPF (P=0,001) and acute renal failure (P<0,001). Early mortality rate was greater when reperfusion index was severe (p=0,002). Reperfusion index was an independent risk factor for the development of graft dysfunction (p=0,004) and renal failure (p=0,04). 1-year patient survival was significantly reduced in patients with severe lesion detected by reperfusion index (p=0,003). Reperfusion biopsy seems to detect preservation injury and it is associated with biochemical parameters for insult assessment.

PORTO, André de Oliveira. Ornitina α-cetoglutarato na isquemia-reperfusão em membro pélvico de ratos. 2007. 121 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-17T15:34:15Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_aoporto.pdf: 1163229 bytes, checksum: 32a8263a16dd9f5a230a65f29b7a72a7 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-17T15:34:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_aoporto.pdf: 1163229 bytes, checksum: 32a8263a16dd9f5a230a65f29b7a72a7 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-17T15:34:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_aoporto.pdf: 1163229 bytes, checksum: 32a8263a16dd9f5a230a65f29b7a72a7 (MD5) Previous issue date: 2007 / To investigate the effects of the ornitine α-ketoglutarate (OKG) upon metabolites in vivo concentrations in whole blood and gastrocnemic muscle tissue of rats submitted to ischemia-reperfusion of the pelvic limb. Methods - Forty two rats were randomly distributed into three groups: Sham (S), Ischemia (I) and Ischemia-reperfusion (R). These groups were redistributed into subgroups, according to time and to the substance used in the gavage. All animals received via gavage calcium caseinate or OKG as a single dose, ninety minutes before the first laparotomy (L). The subgroup S received only caseinate, whereas subgroups I and R received caseinate or OKG, at the same dose of 5g/kg body weight. Samples were collected at three moments: immediately after L; after 6h with ischemia (ischemia of 6h) or without ischemia; and after 6,5h of L with ischemia-reperfusion (reperfusion of 0,5h) or without ischemia-reperfusion. Data expressed as: mean ± standard deviation, normality test of Korogorov-Smirnov. In case of the results went normalized, the test ANOVA was applied for evaluation significant difference, in case of the results was not normalized, the test of Kurskal-Wallis was used. Significant variations were considered when p <0,05.Results - In S group, at the plasmatic samples, after six hours (6h) or six hours and thirty minutes (6,5h) of L, when compared versus at the moment of L (0h), there was increase of: CPK 6h [141,83 ± 47,88 versus 67,17 ± 21,58 - p <0,004], CPK 6,5h [180,67 ± 70,19 versus 67,17 ± 21,58 - p <0,001]; LDH 6h [248,96 ± 80,62 versus 74,40 ± 33,84 - p <0,001]. In muscular samples there was increase of: lactate 6,5h [3,52 ± 1,27 versus 1,57 ± 0,76 - p <0,008]; there were reductions of: pyruvate 6h [0,035 ± 0,024 versus 0,087 ± 0,041 - p <0,004]. In group I it was observed, for the subgroup submitted to ischemia + caseinate in relation to sham, in plasma, elevations of: CPK [635,17 ± 231,71 versus 141,83 ± 47,88 - p <0,001], DHL [551,16 ± 142,63 versus 248,96 ± 80,62 - p <0,002], pyruvate [0,390 ± 0,069 versus 0,061 ± 0,045 - p <0,001]. In muscle there were elevations of: pyruvate [0,127 ± 0,044 versus 0,035 ± 0,024 - p <0,002], lactate [8,15 ± 0,71 versus 2,73 ± 0,49 - p <0,001] and TBARS [0,012 ± 0,004 versus 0,002 ± 0,001 - p <0,001]. In this same group when comparing subgroup ischemia + OKG versus subgroup sham there were, in the plasma, elevations of: CPK [868,17 ± 308,30 versus 141,83 ± 47,88 - p <0,001], glutathione [19,54 ± 2,08 versus 6,43 ± 1,06 - p <0,001]. In muscle there was elevation of glutathione [101,851 ± 16,457 versus 14,737 ± 0,874 p <0,001]. Still in the I group, it was observed, when subgroup ischemia + OKG was compared to ischemia + caseinate, in the plasma, a decrease of: LDH [296,26 ± 93,62 versus 551,16 ± 142,62 - p <0,004], glucose [104,16 ± 20,81 versus 160,33 ± 27,47 - p <0,001], pyruvate [0,046 ± 0,012 versus 0,390 ± 0,069 - p <0,001] and an elevation of glutathione [19,54 ± 2,08 versus 5,52 ± 0,92 - p <0,001]. In muscle there were decreases of pyruvate [0,047 ± 0,031 versus 0,127 ± 0,045 - p <0,004], lactate [2,47 ± 0,74 versus 8,15 ± 0,71 - p <0,001], TBARS [0,004 ± 0,004 versus 0,012 ± 0,004 - p <0,013]. It was observed elevation of glutathione [101,85 ± 16,45 versus 14,44 ± 2,09 - p <0,001]. In R group, it was observed, when comparing subgroup reperfusion + caseinate versus sham at the plasma, elevations of: CPK [606,33 ± 79,84 versus 180,66 ± 70,19 - p <0,001]. In muscle it was observed elevations of lactate [7,16 ± 2,33 versus 3,52 ± 1,27 - p <0,013] and decrease of G6PDH [0,462±0,22 versus 0,207±0,22 p<0,04]. In R group, when comparing subgroup reperfusion + OKG to subgroup sham, at the plasma, it was evidenced increase of: CPK [558,00 ± 102,83 versus 180,66 ± 70,19 - p <0,001], glucose [232,16 ± 59,76 versus 118,16 ± 24,22 - p <0,001]. In muscle there was observed decrease of G6PDH [0,182±0,22 versus 0,462±0,22]. Still in the group R when comparing the subgroup reperfusion + OKG versus the subgroup reperfusion + caseinate, at the plasma, there were elevations of glucose [232,16 ± 59,76 versus 158,00 ± 24,20 - p <0,013]. In muscle it was noticed a decrease of lactate [3,63 ± 1,16 versus 7,16 ± 2,33 - p <0,008] and elevation of glutathione [63,18 ± 18,98 versus 16,17 ± 1,96 - p <0,001]. Conclusions - Surgical trauma promoted significant alterations in some studied samples. The ischemia-reperfusion model demonstrated to be effective. OKG, as a single dose for gavage demonstrated pro glycolytic aerobic effect. Muscular and systemic protection against muscle cell lesion was also observed as well as an antioxidant effect at the end of ischemia and after ischemia-reperfusion injury. / Investigar os efeitos da ornitina α-cetoglutarato (OKG) no sangue e músculo gastrocnêmio de ratos submetidos à isquemia-reperfusão do membro pélvico. Método - Quarenta e dois ratos foram distribuídos aleatoriamente em três grupos: Sham (S), Isquemia (I) e Isquemia-reperfusão (R). Estes grupos foram distribuídos em subgrupos de acordo com o tempo e com o composto utilizado na gavagem. Todos os animais receberam gavagem de caseinato de cálcio ou OKG em dose única, noventa minutos antes da primeira laparotomia exploradora (LE). Os subgrupos S receberam apenas caseinato, os subgrupos I e R receberam caseinato ou OKG na mesma dose, de 5g/kg de peso. As amostras foram colhidas em três momentos: imediatamente após a LE; após 6h da LE com isquemia (6h de isquemia) e sem isquemia e após 6,5h da LE com isquemia-reperfusão (0,5h de reperfusão) e sem isquemia-reperfusão. Para análise dos resultados foram utilizados: média, desvio padrão e teste de normalidade de Korogorov-Smirnov. Caso os resultados fossem normalizáveis, aplicou-se o teste ANOVA para avaliação de diferença significante, no caso dos resultados não serem normalizáveis utilizou-se o teste de Kurskal-Wallis com o mesmo fim. Em todos os testes fixou-se em 0,05 ou 5%, a significância estatística. Resultados - No grupo S, nos metabólitos plasmáticos, após 6h e 6,5h da LE, quando comparados ao momento da LE (0h), houve aumento de: CPK 6h [141,83 ± 47,88 versus 67,17 ± 21,58 – p<0,004], CPK 6,5h [180,67 ± 70,19 versus 67,17 ± 21,58 – p<0,001]; LDH 6h [248,96 ± 80,62 versus 74,40 ± 33,84 – p<0,001]. Nos metabólitos musculares houve aumento de: lactato 6,5h [ 3,52 ± 1,27 versus 1,57 ± 0,76 – p<0,008]. Houve redução de: piruvato 6h [0,035 ± 0,024 versus 0,087 ± 0,041 – p<0,004]. No grupo I foram observadas, para o subgrupo submetido à isquemia + caseinato em relação ao sham, no plasma, elevações em: CPK [635,17 ± 231,71 versus 141,83 ± 47,88 – p<0,001], LDH [551,16 ± 142,63 versus 248,96 ± 80,62 – p<0,002], piruvato [0,390 ± 0,069 versus 0,061 ± 0,045 – p<0,001]. No músculo houve elevação de: piruvato [0,127 ± 0,044 versus 0,035 ± 0,024 – p<0,002], lactato [8,158 ± 0,717 versus 2,737 ± 0,499 – p<0,001] e TBARS [0,012 ± 0,004 versus 0,002 ± 0,001 – p<0,001. Neste mesmo grupo comparando-se o subgrupo isquemia + OKG ao subgrupo sham encontrou-se, no plasma, elevação em: CPK [868,17 ± 308,30 versus 141,83 ± 47,88 – p<0,001], glutationa [19,545 ± 2,088 versus 6,432 ± 1,062 – p<0,001] e no músculo elevação da glutationa [101,85 ± 16,45 versus 14,73 ± 0,87 p<0,001]. Ainda no grupo I, foi observado, para o subgrupo isquemia + OKG versus isquemia + caseinato, no plasma, queda em: LDH [296,26 ± 93,62 versus 551,16 ± 142,62 – p<0,004], glicose [104,16 ± 20,81 versus 160,33 ± 27,47 – p<0,001], piruvato [0,046 ± 0,012 versus 0,390 ± 0,069 – p<0,001], e elevação de glutationa [19,54 ± 2,08 versus 5,52 ± 0,92 – p<0,001]. No músculo foi evidenciada diminuição do piruvato [0,047 ± 0,031 versus 0,127 ± 0,045 – p<0,004], lactato [2,47 ± 0,74 versus 8,15 ± 0,71 – p<0,001], TBARS [0,004 ± 0,004 versus 0,012 ± 0,004 – p<0,013] e elevação glutationa [101,85 ± 16,45 versus 14,44 ± 2,09 – p<0,001]. No grupo R. foi observada, quando comparado o subgrupo reperfusão + caseinato ao Sham, no plasma, elevação de: CPK [606,33 ± 79,84 versus 180,66 ± 70,19 – p<0,001], No músculo elevação do piruvato [0,065 ± 0,027 versus 0,030 ± 0,033 – p<0,047] e lactato [7,16 ± 2,33 versus 3,52 ± 1,27 – p<0,013] além de queda na G6PDH [0,462±0,22 versus 0,207±0,22 p<0,04] . No grupo R quando comparado o subgrupo reperfusão + OKG ao subgrupo Sham, no plasma, foi evidenciado aumento em: CPK [558,00 ± 102,83 versus 180,66 ± 70,19 – p<0,001] e glicose [232,16 ± 59,76 versus 118,16 ± 24,22 – p<0,001]. No músculo houve diminuição de G6PDH [0,182±0,22 versus 0,462±0,22]. Ainda no grupo R quando comparado o subgrupo reperfusão + OKG ao reperfusão + caseinato, no plasma, houve elevação da glicose [232,16 ± 59,76 versus 158,00 ± 24,20 – p<0,013]. No músculo foi notada queda no lactato [3,63 ± 1,16 versus 7,16 ± 2,33 – p<0,008] e elevação da glutationa [63,18 ± 18,98 versus 16,17 ± 1,96 – p<0,001]. Conclusões - O trauma cirúrgico desencadeou alterações significativas em alguns metabólitos estudados. O modelo de isquemia-reperfusão demonstrou efetividade. A OKG, em dose única por gavagem, demonstrou ações pró-glicolíticas aeróbica a nível muscular e sistêmico; proteção contra lesão da célula muscular, e efeito antioxidante muscular e sistêmico durante a lesão de isquemia quanto após lesão de isquemia/reperfusão.

NOGUEIRA, Andréia da Nóbrega Cirino. Efeitos da L-Alanil-glutamina na isquemia e perfusão em cérebro de ratos wistar. 2009. 62 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-17T16:22:41Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_ancnogueira.pdf: 972343 bytes, checksum: 1463848185daf24a3b9020d4adfb344e (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-17T16:22:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_ancnogueira.pdf: 972343 bytes, checksum: 1463848185daf24a3b9020d4adfb344e (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-17T16:22:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_ancnogueira.pdf: 972343 bytes, checksum: 1463848185daf24a3b9020d4adfb344e (MD5) Previous issue date: 2009 / The aim of this study was to investigate the effects of L-alanyl-glutamine (Ala-Gln) in ischemia and reperfusion in rat brain. We used 48 male rats, Wistar, with a mean age of 62 days and average weight of 276.38 g, divided into four groups: Sham 30 minutes ischemia, 90 minutes and Sham Ischemia / Reperfusion. We used a model of experimental global cerebral ischemia with occlusion of bilateral common carotid artery and administration of saline or Ala-Gln. The results of this study showed a statistically significant increase in the percentage of necrotic area of the ischemia group (13.24 ± 8.82) than in group Sham 30 minutes (0.12 ± 0.20, p= 0.01). The same occurred in relation to the area of necrosis in ischemia-reperfusion group (13.30 ± 9.91) compared to Sham 90 minutes (0.70 ± 1.35, p= 0.01). These results demonstrate the effectiveness of the model Ischemia and Ischemia / Reperfusion brain used. There was no significant change in the percentage of necrotic area between Salina ischemia groups (13.24 ± 8.82) and ischemia Ala-Gln (15.35 ± 6.80, p= 0.34). The average percentage of ischemic area of group Ischemia / Reperfusion Ala-Gln (4.65 ± 1.44) was significantly lower than that in group Ischemia / Reperfusion Salina (13.30 ± 9.91, p= 0.03). The prior administration of Ala-Gln in rats subjected to ischemia / reperfusion did not cause reduction in the percentage of necrosis in ischemic injury. Moreover, this dipeptide reduced the percentage of necrosis in the cerebral injury cerebral ischemia / reperfusion. / O objetivo do presente estudo foi verificar os efeitos da L-alanil-glutamina (Ala-Gln) na isquemia e reperfusão em cérebro de ratos. Foram utilizados 48 ratos machos, da linhagem Wistar, com idade média de 62 dias e peso médio de 276,38g, distribuídos em quatro grupos: Sham 30 minutos, Isquemia, Sham 90 minutos e Isquemia/ Reperfusão. Foi utilizado um modelo de isquemia cerebral experimental global, com oclusão da artéria carótida comum bilateral e administração de solução salina ou Ala-Gln. Os resultados do presente estudo mostraram elevação estatisticamente significante no percentual de área de necrose do grupo Isquemia (13,24 ± 8,82) em relação ao grupo Sham 30 minutos (0,12 ± 0,20, p= 0,01). O mesmo ocorreu em relação à área de necrose do grupo Isquemia/Reperfusão (13,30 ± 9,91) em relação ao Sham 90 minutos (0,70 ± 1,35, p= 0,01). Tais resultados demonstram a efetividade do modelo Isquemia e Isquemia/Reperfusão cerebrais utilizados. Não foi observada alteração significante no percentual de área de necrose entre os grupos Isquemia Salina (13,24 ± 8,82) e Isquemia Ala-Gln (15,35 ± 6,80, p= 0,34). A média do percentual de área isquêmica do grupo Isquemia/Reperfusão Ala-Gln (4,65 ± 1,44) foi significantemente inferior àquela encontrada no grupo Isquemia/Reperfusão Salina (13,30 ± 9,91, p= 0,03). A administração prévia de Ala-Gln a ratos submetidos à Isquemia/reperfusão cerebral não promoveu redução no percentual de área de necrose na lesão isquêmica. Por outro lado, esse dipeptídeo reduziu o percentual de necrose cerebral na lesão Isquemia/Reperfusão cerebral.

GONÇALVES, Eduardo Sílvio Gouveia. Ornitina alfa-cetoglutarato na isquemia-reperfusão intestinal em ratos. 2009. 138 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-19T12:10:03Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_esggonçalves.pdf: 1592149 bytes, checksum: 0dd9b663bd98b55bc4a2b52ce29bb13c (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-19T12:11:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_esggonçalves.pdf: 1592149 bytes, checksum: 0dd9b663bd98b55bc4a2b52ce29bb13c (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-19T12:11:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_esggonçalves.pdf: 1592149 bytes, checksum: 0dd9b663bd98b55bc4a2b52ce29bb13c (MD5) Previous issue date: 2009 / Objective: To evaluate the effect of ornithine alpha-ketoglutarate (OKG) in the blood and intestinal tissue of rats submitted to intestinal ischemia/reperfusion, using the blood concentrations of glucose, G6PDH, pyruvate, acetoacetate, lactate, 3HBDH, glutathione, T-Bars, myeloperoxydase, CPK and LHD, evaluated in vivo on these tissues. Methods: Sixty rats (Rattus norvergicus albinus, Rodentia Mammalia) were selected and aleatorily distributed in five groups of twelve animals, which were: Sham0’(s0’), Sham30’(s30’), Sham60’(s60’), Isquemia(i30’), Reperfusão(r30’). These groups were distributed in subgroups according to the time and the compost used to the “gavagem”. All de animals received the “gavagem” with calcium caseinate or okg, only one dosage, thirty minutes before the exploratory laparotomy (EL). The subgroups s0’Ca, s30’Ca, s60’Ca, i30’Ca and r30’Ca received only calcium caseinate. The subgroups s0’okg, s30’okg, s60’okg, i30’okg and r30’okg received 5g of okg par each kilogram. The samples were taken in five moments: immediately passed the EL; passed 30 minutes of the EL; passed 60 minutes of the EL; passed 30 minutes of the isquemia; passed 30 minutes of the reperfusion. The descriptive statistics were media, error and standard deviation. The values before and after the procedures were compared using the “t” test (“Student pareado” to homogeny and heterogeny variation) and ANOVA. Then, it was used Kolmogorov-Smirnov to compare the normal results. The results were not normal, it was used the Kruskal-Wallis test. Results: It was shown an improvement on the blood lactate(1.186 + 0,18 versus 0,794 + 0,06, p<0,01) to the animals that received okg from i30’. A reduction on blood lactate lactato (0,107 + 0,01 versus 0,266 + 0,02, p<0,05) was noticed in the group r30’ that received okg. It occurred a reduction on plasmatic and tissue pyruvate reduzido (0,146 + 0,24 versus 0,156 + 0,17 and 0,094 + 0,02 versus 0,248 + 0,03, p<0,05) to the group r30’ that received okg. The acetoacetate was reduced to both groups, isquemia and reperfusion, that received okg0,57 + 0,01 versus 0,0685 + 0,01 e 0,128 + 0,04 versus 0,156 + 0,03,*p<0,05). The plasmatic glucose was reduced to the group i30’( 0,1442 + 0,048 versus 1,1098 + 0,0796, *p<0,05) treated with okg and the same happened to the tissue glucose after isquemia (0,1002 + 0,02 versus 0,147 + 0,0264, p<0,05). The LDH had an improvement (0,1002 + 0,02 versus 0,147 + 0,0264, p<0,05) to the group i30’ treated with okg. CPK was reduced (115,13 + 11,77 versus 166,70+6,23,p<0,05) to the group r30’ treated with okg. The tissue glutathione had an improvement to sham okg 30’ (59,17 + 2,39 versus 25,09 + 1.53, p<0,05) and a reduction on isquemia period to the animals treated with okg and CaCa . 3HBDH was reduced (0,062 + 0,01 versus 0,075 + 0,02,p<0,01) in the blood and in the tissues from i30’. This difference was kept to animals’ blood from r30’okg when related to r30’CaCa(0,03 + 0,00 versus 0,0615 + 0,01, p<0,01). There was a reduction on tissue T-BARS to r30’OKG when compared to r30’CaCa(0,0522 + 0,03 versus 0,0745 + 0,02, p<0,05) and an improvement to sham60’CaCa(0,0937 + 0,02 versus 0,020 + 0,01, p<0,01). Glicose and Myeloperoxydase were not affected by the use of okg. All the results were compared to the respective control groups. Conclusion: The used procedures could bring useful results to metabolites in study. The isquemia/reperfusion showed efficiency, offering exogen okg leads to a rising on glicolitic and aerobic activity to tissues and systems. This offer protects yet from the tissue injury and has antioxidant effect during the isquemia/reperfusion injury. / Objetivo: Avaliar os efeito da ornitina α-cetoglutarato (OKG) no sangue e tecido intestinal de ratos submetidos à isquemia/reperfusão intestinal através da determinação das concentrações in vivo no sangue e no tecido do intestino delgado, submetido a isquemia/reperfusão, de glicose, G 6 PDH, piruvato, acetoacetato, lactato, 3 HBDH, glutationa, T-Bars, mieloperoxidase, CPK e LDH. Método: Sessenta ratos (Rattus norvergicus albinus, Rodentia Mammalia) foram distribuídos aleatoriamente em cinco grupos de 12 animais: Sham 0’ (s0’), Sham 30’ (s30’), Sham 60’ (s60’), Isquemia (i30’), Reperfusão (r30’). Estes grupos foram distribuídos em subgrupos de acordo com o tempo e com o composto utilizado na gavagem. Todos os animais receberam gavagem de caseinato de cálcio ou OKG em dose única, trinta minutos antes da laparotomia exploradora (LE). Os subgrupos s0’CaCa s30’CaCa, s60’c, i30’CaCa e r30’CaCa receberam apenas caseinato, de cálcio. Os subgrupos s0’OKG, s30’OKG, s60’OKG, i30’OKG e r30’OKG receberam OKG na dose de 5g/kg de peso. As amostras foram colhidas em cinco momentos: imediatamente após a LE; após 30 minutos da LE; Após 1h da LE; Após 30 minutos de isquemia; Após 30 minutos de reperfusão. A estatística discritiva foi expressa através da média, erro e desvio padrão, acompanhando-se pelo intervalo de confiança da média a 95% . Para comparar os valores pré e pós-procedimentos nas concentrações das variáveis estudadas foram empregados os teste “t” de Student pareado (para variância homogênea e heterogênea) e ANOVA após análise de normalidade através do teste Kolmogorov-Smirnov. Quando observou a não normalidade aplicou-se o teste de Kruskal-Wallis. Resultados: Os resultados apontaram um aumento significativo na lactacemia (1.186 + 0,18 versus 0,794 + 0,06, p<0,01) nos animais que receberam OKG em relação ao controle nos subgrupos isquemia trinta minutos (i30’). No tecido intestinal reperfundido (r30’) ocorreu redução significativa da concentração de lactato (0,107 + 0,01 versus 0,266 + 0,02, p<0,05) nos animais recipientes de OKG em relação ao animais controle, O piruvato plasmático e tecidual se mostrou significantemente reduzido (0,146 + 0,24 versus 0,156 + 0,17 e 0,094 + 0,02 versus 0,248 + 0,03, p<0,05) após o período de reperfusào de trinta minutos nos animais recipientes da OKG em relação aos animais controle. Houve redução significativa da concentração do acetoacetato no tecido intestinal nos tempos pós isquemia e pós reperfusão dos animais recipientes da OKG (0,57 + 0,01 versus 0,0685 + 0,01 e 0,128 + 0,04 versus 0,156 + 0,03,*p<0,05) quando comparados ao animais não tratados. A glicose 6 PDH apresentou redução significativa da sua concentração plasmática no tempo isquemia trinta minutos dos animais recipientes da OKG em relação aos não tratados ( 0,1442 + 0,048 versus 1,1098 + 0,0796, *p<0,05) , ocorrendo o mesmo na concentração tecidual, no pós isquemia (0,1002 + 0,02 versus 0,147 + 0,0264, p<0,05). A LDH apresentou elevação significativa da sua concentração nos animais recipientes da OKG em relação ao controle (278,01 + 51,52 versus 132,93 + 12,54, *p<0,05) no grupo isquemia (i30’) . Ocorreu redução significativa da CPK no grupo reperfusão (r30’) dos animais recipientes da OKG em comparação aos animais controle (115,13 + 11,77 versus 166,70+6,23,p<0,05). A glutationa tecidual apresentou elevação significativa no sham OKG 30 minutos em relação ao nimais controle (59,17 + 2,39 versus 25,09 + 1.53, p<0,05) e redução significante no tempo isquemia, tanto nos animais OKG quanto CaCa. Durante o período de reperfusão a glutationa não apresentou alterações significativas entre os animais tratados e controle. A OKG influenciou de maneira significativa na redução da concentração da 3HDBH tecidual no tempo i30’ (0,062 + 0,01 versus 0,075 + 0,02,p<0,01) Esta diferença significativa foi mantida no sangue dos animais tratados no grupo reperfusão 30’OKG em relação aos animais r30’CaCa (0,03 + 0,00 versus 0,0615 + 0,01, p<0,01). A T-bars tecidual apresentou redução significante no grupo r30’OKG em comparação ao r30’CaCa (0,0522 + 0,03 versus 0,0745 + 0,02, p<0,05), com elevação significativa no grupo sham 60’CaCa em relação aos animais tratados 0,0937 + 0,02 versus 0,020 + 0,01, p<0,01). A oferta exógena da alfa-cetoglutarato não ocasionou nenhuma alteração significante nas concentrações de glicose e mieloperoxidase (MPO) entre os animais do subgrupo experimento quando comparados aos do subgrupo controle. Conclusões: Os procedimentos realizados foram suficientes para desencadear alterações significativas em alguns metabólitos estudados. O modelo de isquemia-reperfusão demonstrou efetividade. A oferta exógena OKG, em dose única por gavagem, sugere aumento na atividade pró-glicolíticas aeróbica a nível tecidual e sistêmico; proteção contra lesão celular do tecido intestinal, e efeito antioxidante tecidual e sistêmico durante a lesão de isquemia e após a lesão de reperfusão.

ALVES, Marcos Antonio. Efeitos da L-Alanil glutamina sobre as concentrações in vivo de metabólitos em ratos submetidos à isquemia-reperfusão do membro pélvico esquerdo. 2005. 149 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2005. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-10T16:17:10Z No. of bitstreams: 1 2005_dis_maalves.pdf: 4146103 bytes, checksum: 2dd415f99c496d59608935d7726eb4ae (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-03-10T16:18:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2005_dis_maalves.pdf: 4146103 bytes, checksum: 2dd415f99c496d59608935d7726eb4ae (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-10T16:18:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005_dis_maalves.pdf: 4146103 bytes, checksum: 2dd415f99c496d59608935d7726eb4ae (MD5) Previous issue date: 2005 / A study has been conducted to investigate the effects of L-alanyl-glutamine upon blood and tissue concentrations of metabolites (pyruvate, lactate, glucose, acetoacetato, 3-hydroxybutyrate, ketone bodies and ATP) in Wistar rats subjected to ischemia/reperfusion of hind limb. Ninety-six adult male rats were randomized in 4 groups and pre-treated with saline 2.0 mL (G-1,G-3) or L-alanyl-glutamine solution 0.75 mgKg-1(G-2, G-4) during 7 days. One-hour after the last gavage all rats were submitted to clamping of the left iliac artery or sham operation. The clamp was removed after 3 h; sham rats were operated once more. Muscle, liver, kidney and blood samples were collected at the end of ischemia and at 1-3-6 h during reperfusion. Metabolites were submitted to enzymatic analyses. Results were expressed as Mean ± S.E.M. Non-parametric tests (Mann-Whitney and Kruskal-Wallis/Dunn) were utilized for statistical analyses. P<0.05 was accepted as significant. Lactate, pyruvate and glucose concentrations did not increase during ischemia or reperfusion in rats pre-treated with saline (G-1 vs. G-2). On the other hand ketone bodies concentrations were decreased in T-0 and blood glucose was elevated during reperfusion. Liver lactate and muscle glucose were increased and lactate concentration was decreased in L-alanyl-glutamine pre-treated rats. Ketone bodies were elevated in the liver, muscle and blood and renal lactate was also elevated in the aforementioned rats. It is concluded that the model utilized in this study promotes significant metabolic alterations due to ischemia/reperfusion injury. L-Ala-Gln dipeptide induced increased hepatic lactate and muscle glucose concentrations and decreased of muscle lactate concentrations point out to increased turnover of glucose. L-Ala-Gln also induced increased ketogenesis, ketonemia and ketone bodies uptake during reperfusion along with increased lactacidemia and kidney lactate concentrations. Increased glycolytic activity in peripheral tissues via malate-aspartate shuttle activation lead to decreased insulin resistance with possible decrease in plasma insulin levels and increased ketogenesis. / Foram investigados os efeitos metabólicos da L-alanil-glutamina nas concentrações sanguíneas e teciduais dos metabólitos (piruvato, lactato, glicose, acetoacetato, 3-hidroxibutirato, corpos cetônicos e ATP) em ratos Wistar submetidos à isquemia/reperfusão do membro pélvico. Utilizaram-se 96 ratos adultos, machos, distribuídos aleatoriamente em 4 grupos numericamente iguais e pré-tratados com solução salina 2,0 mL (G-1 e G-3) ou L-alanil-glutamina 0,75 g Kg-1(G-2 e G-4), durante 7 dias. Uma hora após a última gavagem, todos os ratos foram submetidos ao pinçamento da artéria ilíaca esquerda ou operação simulada. Após 3 horas a pinça foi removida; nos grupos simulados realizou-se nova intervenção cirúrgica. Amostras (músculo, fígado, rim e sangue) foram coletadas ao final da isquemia máxima (T-0) e durante a reperfusão (1, 3 e 6h). Os metabólitos foram determinados por ensaio enzimático e expressos como Média ± E.P.M. Testes não paramétricos (Mann-Whitney e Kruskal-Wallis/Dunn) foram utilizados para a análise estatística. O nível de significância foi de p<0,05. Não foi evidenciada elevação nas concentrações de lactato, piruvato e glicose durante a lesão de isquemia ou reperfusão, comparando-se os grupos tratados com solução salina (G-1 vs. G-2). Por outro lado houve redução nas concentrações de corpos cetônicos em tecido muscular no tempo de isquemia máxima e hiperglicemia durante o período de reperfusão. Houve elevação nas concentrações hepáticas de lactato e glicose muscular e redução de lactato no mesmo tecido, nos ratos pré-tratados com o dipeptídeo. Observou-se ainda, nos mesmos animais, elevação das concentrações de corpos cetônicos no fígado, no sangue, no músculo e nas concentrações renais de lactato. Conclui-se, portanto, que o modelo de pinçamento da artéria ilíaca esquerda promove alterações metabólicas decorrentes da lesão de isquemia/reperfusão. O dipeptídeo L-ALA-GLN induz aumento nas concentrações hepáticas de lactato, promove elevação de glicose muscular e redução de lactato no mesmo tecido indicando aumento no “turn over” de glicose. O dipeptídeo causou aumento da cetogênese, cetonemia e captação de corpos cetônicos durante a reperfusão, assim como hiperlactacemia e aumento nas concentrações renais de lactato. Maior atividade glicolítica em tecidos periféricos, via ativação do ciclo malato-aspartato, levou a diminuição da resistência insulínica com possível queda de insulinemia, com aumento da cetogênese.

PIRES, Vilma Leite de Sousa. Pré-condicionamento com l-alanil-glutamina na lesão aguda de isquemia e reperfusão cerebral em gerbils. 2010. 159 f. Tese (Doutorado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-27T13:08:03Z No. of bitstreams: 1 2010_tese_vlspires.pdf: 1200999 bytes, checksum: e6712b8072c1aa5ecb64059ca2b9b4c0 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-03-27T13:22:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_tese_vlspires.pdf: 1200999 bytes, checksum: e6712b8072c1aa5ecb64059ca2b9b4c0 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-27T13:22:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_tese_vlspires.pdf: 1200999 bytes, checksum: e6712b8072c1aa5ecb64059ca2b9b4c0 (MD5) Previous issue date: 2010 / We investigated the metabolic effects of L-alanyl-Glutamine (L-ALN-GLN) on blood and tissue concentrations of metabolites (lactate, pyruvate, glucose and ketone bodies), thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), glutathione (GSH), myeloperoxidase (MPO) and histopathologic evaluation of gerbils. This was an experimental and controlled study. Fifty-four male gerbils with a mean weight of 150gwere used, and were divided randomly and equally into 3 groups: saline with ischemia and reperfusion (SIR), saline without ischemia and reperfusion (SSI), L-alanyl-glutamine ischemia and reperfusion (GIR). They were then redistributed into three subgroups: T0 (maximum time of ischemia), T30 (30 min of reperfusion) and T60 (60 min of reperfusion), containing 6 animals each. They were pretreated with saline 2.0 mL 0.9% intra-venous (iv) or ALN-L-GLN 0.75 g / kg (iv) 30 min before the start of the experiments. Cerebral ischemia was induced by bilateral occlusion of the common carotid arteries (CCAs) for a period of 15 minutes. After all surgical procedures, the samples (blood and tissue) were collected at the end of the three periods. When comparing SSI and SIR groups, a significant increase of lactate was found in SIR group in T0 (0.756±0.091 versus 3.596±1.546; p=0.0122, T30 (0.869±0.254 versus 3.316±1.356); p=0.0015, and T60 (0.858±0.460 versus 2.409±0.801); (p=0.0122). In brain tissue there was significant lactate increase in TO (1.374±0.172 versus 2.530±0.850); p=0.0085, T30 (0.891±0.697 versus 1.840±0.530); p=0.0243 and T60 (1.182±0.136 versus 1.744±0.463); p=0.0173, in SIR group. In blood and tissue concentrations of pyruvate was found a significant increase in T0 (p=0.424), T30 (p=0.0271) and T60 (p=0.0175), and in brain tissue in T0 (p=0.0369) in the SIR group. In glucose blood concentrations there was a significant increase in T0 (0.493±0.393 versus 1.116±0.364); p=0.0174, T30 (0.617±0.356 versus 1.502±0.314); p=0.0010 and T60 (0.998±0.411 versus 1.718±0.477); p=0.0190, and in brain tissue in T0 (0.292±0.081 versus 0.952±0.7140); p=0.0484, T30 (0.264±0.080 versus 1.038±0.609); p=0.0116 and T60 (0.234±0.089 versus 0.985±0.533); p=0.0067, in the SIR group. On blood ketone bodies there was a significant increase in T0 (p=0.0006) and T60 (p=0.0455), and in brain tissue in T0 (p=0.0428) in SIR group. There was a significant increase in MPO enzyme levels at T0 (p<0.0001), T30 (p=0.0269) and T60 (p=0.0005). In the histopathological evaluation in the internal pyramidal and granular layers in group CRS observed a significant increase of pyknosis, red neurons, congestion and edema, at T0, T30 and T60. In the comparison between the (SIR) and (GIR) groups, there was a significant decrease in T0 (3.596±1.546 versus 1.960±0.450); p=0.0321, T30 (3.316±1.356 versus 1.971±0.568); p=0.0490 and T60 (2.409±0.801 versus 1.516±0.307); p=0.0290, and in brain tissue there was significant decrease in T0 (2,530±0,850 versus 1.540±0,302); p=0.0228. In brain tissue was found significant decrease in TBARS concentrations in T30 (0.110±0.006 versus 0.057±0.040); p=0.0102, and a significant increase of GSH in T0 (3.454±1.584 versus 10.054±2.880), p=0.0006, T30 (10.949±1.579 versus 81.767±9.060); p<0.0001 and T60 (101.83±2.631 versus 114.924±6.311); p=0.0011 in GIR group. Regarding the histological examination, a significant decrease of pyknosis was found at T30 (3.00 (2.75 to 4.25) versus 1.50 (0.75 to 2.00); p= 0.0086 and T60 (4.00 (3.75 to 5.55) versus 2.00 (1.75 to 4.00); p=0.0379 and red neurons at T30 (3,00 (2,00 to 4.25) versus 1.50 (0.75 to 2.00); p=0.0159 and T60 (4.00 (3.75 to 4.75) versus 2,00 (1.75 to 4.00); p= 0.0493. in the internal pyramidal layer. In the Internal granular layer in GIR group there was a significant reduction of pyknosis at T30 (2.00 (1.00 to 3.25) versus 1.00 (0.00 to 1.00); p=0.0208 and T60 1.50 (0.00 to 1.00) versus 0.00 (1.00 to 3.50); p=0.0412, red neurons in T30 (2.00 (1.00 to 3.25) versus 1.00 (0.00 to 1.00); p=0.0208 and T60 1.50 (0.00 to 1.00) versus 0.00 (1.00 to 3.50); p=0.0412 and on the intracerebral edema level at T30 (2.00 (1.00 to 2.00) versus 1.00 (0.75 to 1.00); p=0.0225. Therefore, the preconditioning with L-GLN-ALN is able to induce brain glicolise and promote a protective effect on ischemic brain injury and reperfusion in gerbils, since it increased the glutathione synthesis both on ischemia and reperfusion, as well as decreasing lipid peroxidation during the reperfusion phase and decreased the intercerebral edema level, and the number of pyknosys and red neurons in brain tissue. / Foram investigados os efeitos da L-alanil-glutamina (L-ALN-GLN) sobre as concentrações sanguíneas e teciduais de metabólitos (lactato, piruvato, glicose e corpos cetônicos), substâncias reagentes ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), glutationa (GSH), mieloperoxidase (MPO) e avaliação histopatológica em gerbils. Tratou-se de um estudo experimental, controlado. Utilizaram-se 54 gerbils, machos, com peso médio de 150g, distribuídos aleatoriamente em 3 grupos: salina com isquemia e reperfusão (SIR), salina sem isquemia e reperfusão (SSI), L-alanil-glutamina com isquemia e reperfusão (GIR), redistribuídos em 3 subgrupos: T0 (tempo máximo de isquemia), T30 (30 min de reperfusão) e T60 (60 min de reperfusão), com 6 animais cada. Foram pré-tratados com solução salina 2,0 mL 0,9% endovenoso (e.v.) ou L-ALNGLN 0,75g/Kg (e.v.), 30 min antes do início dos experimentos. A isquemia cerebral foi induzida pela oclusão bilateral das artérias carótidas comuns (ACCs), por um período de 15 minutos. Após todos os procedimentos cirúrgicos as amostras (sangue e tecido) foram coletadas ao final dos três tempos. Nas comparações entre os grupos (SSI) e (SIR) houve um aumento significante nas concentrações de lactato no sangue no grupo SIR em T0 (0,756±0,091 versus 3,596±1,546); p=0,0122, T30 (0,869±0,254 versus 3,316±1,356); p=0,0015 e em T60 (0,858±0,460 versus 2,409±0,801); p=0,0021. No tecido cerebral houve um aumento significante do lactato em T0 (1,374±0,172 versus 2,530±0,850); p=0,0085, T30 (0,891±0,697 versus 1,840±0,530); p=0,0243 e em T60 (1,182±0,136 versus 1,744±0,463); p=0,0173 no grupo SIR. Para as concentrações de piruvato no sangue observou-se um aumento significante em T0 (p=0,0424); T30 (p=0,0271) e em T60 (p=0,0175) e no tecido cerebral em T0 (p=0,0369) no grupo SIR. Para as concentrações de glicose no sangue houve um aumento significante em T0 (0,493±0,393 versus 1,116±0,364); p=0,0174, T30 (0,617±0,356 versus 1,502±0,314); p=0,0010 e em T60 (0,998±0,411 versus 1,718 ± 0,477); p=0,0190 e no tecido cerebral em T0 (0,292±0,081 versus 0,952±0,7140); p=0,0484, T30 (0,264±0,080 versus 1,038±0,609); p=0,0116 e em T60 (0,234±0,089 versus 0,985±0,533); p=0,0067, no grupo SIR. Verificou-se um aumento significante nos níveis enzimáticos de MPO em T0 (p<0,0001), T30 (p=0,0269) e em T60 (p=0,0005) no grupo SIR. Na avaliação histopatológica no grupo SIR nas camadas piramidal interna e granular interna foram observados aumento significante de picnose, neurônios vermelhos, congestão e edema, em T0, T30 e T60. Nas comparações entre grupos (SIR) e (GIR) houve diminuição significante no grupo GIR no sangue de lactato em T0 (3,596±1,546 versus 1,960±0,450); p=0,0321, T30 (3,316±1,356 versus 1,971± 0,568); p=0,0490 e em T60 (2,409±0,801 versus 1,516±0,307); p=0,0290 e no tecido cerebral em T0 (2,530±0,850 versus 1,540±0,302); p=0,0228. No tecido cerebral no grupo GIR houve diminuição significante de TBARS em T30 (0,110±0,006 versus 0,057±0,040); p=0,0102 e um aumento significante de GSH em T0 (3,454±1,584 versus 10,054±2,880); p=0,0006, T30 (10,949±1,579 versus 81,767±9,060); p<0,0001 e em T60 (101,83±2,631versus 114,924±6,311); p=0,0011. Na avaliação histopatológica no grupo GIR na camada piramidal interna foram observados diminuição significante de picnose nos tempos T30 (3,00 (2,75 a 4,25) versus 1,50 (0,75 a 2,00); p=0,0086 e em T60 (4,00 (3,75 a 5,55) versus 2,00 (1,75 a 4,00); p=0,0379 e nos neurônios vermelhos em T30 (3,00 (2,00 a 4,25) versus 1,50 (0,75 a 2,00); p=0,0159 e em T60 (4,00 (3,75 a 4,75) versus 2,00 (1,75 a 4,00); p=0,0493. Na camada granular interna no grupo GIR houve diminuição significante de picnose em T30 (2,00 (1,00 a 3,25) versus 1,00 (0,00 a 1,00); p=0,0208 e em T60 1,50 (0,00 a 1,00) versus 0,00 (1,00 a 3,50); p= 0,0412, neurônios vermelhos em T30 (2,00 (1,00 a 3,25) versus 1,00 (0,00 a 1,00); p=0,0208 e em T60 1,50 (0,00 a 1,00) versus 0,00 (1,00 a 3,50); p=0,0412 e no grau de edema em T30 (2,00 (1,00 a 2,00) versus 1,00 (0,75 a 1,00); p=0,0225. Portanto, o pré-condicionamento com L-ALN-GLN foi capaz de induzir glicólise cerebral e de promover um efeito protetor na lesão de isquêmia e reperfusão em gerbils, uma vez que elevou a síntese de glutationa tanto na isquemia quanto na reperfusão, reduziu a peroxidação lipídica durante a fase de reperfusão e diminuiu o grau de edema intracerebral, a quantidade de picnose e neurônios vermelhos no tecido cerebral.

O transplante hepático é o tratamento de escolha para uma série de doenças terminais agudas e crônicas do fígado. Contudo, sua oferta tem sido restringida pela falta de doadores, o que tem provocado o aumento do número de pacientes em lista de espera. A escassez de órgãos condiciona a aceitação para transplante de enxertos provindos de doadores sem as melhores condições para tal – os chamados doadores marginais. O dano de isquemia/reperfusão (IR) é resultado dos fatores perioperatórios inerentes ao procedimento, incluindo as condições do doador. Quanto pior o doador, pior o órgão transplantado, e maior a possibilidade de desenvolvimento de disfunção primária do enxerto (DPE). DPE comumente é definida pela elevação das enzimas hepáticas. As aminotransferases, entretanto, podem alterar-se por outras complicações que não a lesão de isquemia/reperfusão. A histologia hepática, por sua vez, pode fornecer informações acerca da IR. Com o objetivo de estimar a extensão histológica do dano de preservação (necrose hepatocelular e neutrofilia sinusoidal), correlacioná-la a variáveis bioquímicas (índice de reperfusão: AST + ALT + LDH / 3) e avaliar a sua influência no período pós-operatório imediato (até 7 dias), foi realizado um estudo transversal com análise sistemática de 55 pacientes adultos que receberam seu primeiro enxerto hepático entre Setembro de 1996 e Dezembro de 1999. Foram comparados os fatores de risco relacionados ao doador, ao receptor, ao procedimento cirúrgico e ao período pós-operatório e analisadas as biópsias feitas antes e imediatamente após o procedimento cirúrgico. Houve dano de preservação em todos os pacientes estudados tanto por critérios anatomopatológicos quanto por critérios bioquímicos. Houve associação significativa entre os achados bioquímicos e histológicos (p=0,04; coeficiente gamma=0,49). A extensão da necrose hepatocitária parece ser o dado anatomopatológico isolado que melhor se relaciona ao índice de reperfusão (p=0,05; coeficiente gamma=0,48). Houve associação entre DPE e a histologia hepática (p=0,02). O índice bioquímico associou-se à DPE (p=0,001) e à incidência de insuficiência renal aguda (IRA) (p<0,0001). A mortalidade inicial foi maior nos pacientes com índice de reperfusão grave (p=0,002). O índice de reperfusão foi um fator de risco independente para a função do enxerto (p=0,004) e IRA (0,04). A sobrevida atuarial em 1 ano foi significativamente menor nos pacientes com dano de preservação grave (p=0,003). A análise da biópsia de reperfusão é capaz de detectar o dano de preservação sofrido pelo enxerto e se correlaciona às variáveis bioquímicas em sua estimativa. / Orthotopic liver transplantation has become an established therapy for patients with end-stage liver disease. Its rapid growth has been curtailed by the lack of organ donors and has led to an expansion in the number of patients on the waiting list. This growing imbalance has led to the relaxing of selection criteria for donors. Many donors which were previously not considered for transplantation are now used – the called marginal donors. Ischemic/reperfusion injury (IR) within the liver allograft occurs as a result of numerous factors and events inherent to the transplantation process. Worst the donor, worst can be the allograft, and more prone it will be to exhibit initial poor function (IPF). IPF is commonly defined on the basis of elevated liver tests, but early aminotransferase elevation after liver transplantation may result from complications other than ischemic/reperfusion lesion. Liver histology can provide some useful information to assess IR. We conducted a cross-sectional study on 55 adult liver transplant recipients, who received their first liver allograft between September 1996 and December 1999, in order to assess IR according to biochemical (reperfusion index: AST + ALT + LDH / 3) and pathological (sinusoidal neutrophilia and hepatocellular necrosis) variables. The risk factors related to donor, recipient, surgical procedure, and postoperative period (until 7 days) were studied, as well as liver biopsies collected before and immediately after transplantation. Some degree of IR was universally found. There was association between biochemical and pathological findings (p=0,04; gamma=0,49). There was a trend toward to extension of hepatocellular necrosis to be isolatedly related to reperfusion index (p=00,5; gamma=0,48). Liver histology was associated with IPF (p=0,02). Reperfusion index was significantly associated to IPF (P=0,001) and acute renal failure (P<0,001). Early mortality rate was greater when reperfusion index was severe (p=0,002). Reperfusion index was an independent risk factor for the development of graft dysfunction (p=0,004) and renal failure (p=0,04). 1-year patient survival was significantly reduced in patients with severe lesion detected by reperfusion index (p=0,003). Reperfusion biopsy seems to detect preservation injury and it is associated with biochemical parameters for insult assessment.

O transplante hepático é o tratamento de escolha para uma série de doenças terminais agudas e crônicas do fígado. Contudo, sua oferta tem sido restringida pela falta de doadores, o que tem provocado o aumento do número de pacientes em lista de espera. A escassez de órgãos condiciona a aceitação para transplante de enxertos provindos de doadores sem as melhores condições para tal – os chamados doadores marginais. O dano de isquemia/reperfusão (IR) é resultado dos fatores perioperatórios inerentes ao procedimento, incluindo as condições do doador. Quanto pior o doador, pior o órgão transplantado, e maior a possibilidade de desenvolvimento de disfunção primária do enxerto (DPE). DPE comumente é definida pela elevação das enzimas hepáticas. As aminotransferases, entretanto, podem alterar-se por outras complicações que não a lesão de isquemia/reperfusão. A histologia hepática, por sua vez, pode fornecer informações acerca da IR. Com o objetivo de estimar a extensão histológica do dano de preservação (necrose hepatocelular e neutrofilia sinusoidal), correlacioná-la a variáveis bioquímicas (índice de reperfusão: AST + ALT + LDH / 3) e avaliar a sua influência no período pós-operatório imediato (até 7 dias), foi realizado um estudo transversal com análise sistemática de 55 pacientes adultos que receberam seu primeiro enxerto hepático entre Setembro de 1996 e Dezembro de 1999. Foram comparados os fatores de risco relacionados ao doador, ao receptor, ao procedimento cirúrgico e ao período pós-operatório e analisadas as biópsias feitas antes e imediatamente após o procedimento cirúrgico. Houve dano de preservação em todos os pacientes estudados tanto por critérios anatomopatológicos quanto por critérios bioquímicos. Houve associação significativa entre os achados bioquímicos e histológicos (p=0,04; coeficiente gamma=0,49). A extensão da necrose hepatocitária parece ser o dado anatomopatológico isolado que melhor se relaciona ao índice de reperfusão (p=0,05; coeficiente gamma=0,48). Houve associação entre DPE e a histologia hepática (p=0,02). O índice bioquímico associou-se à DPE (p=0,001) e à incidência de insuficiência renal aguda (IRA) (p<0,0001). A mortalidade inicial foi maior nos pacientes com índice de reperfusão grave (p=0,002). O índice de reperfusão foi um fator de risco independente para a função do enxerto (p=0,004) e IRA (0,04). A sobrevida atuarial em 1 ano foi significativamente menor nos pacientes com dano de preservação grave (p=0,003). A análise da biópsia de reperfusão é capaz de detectar o dano de preservação sofrido pelo enxerto e se correlaciona às variáveis bioquímicas em sua estimativa. / Orthotopic liver transplantation has become an established therapy for patients with end-stage liver disease. Its rapid growth has been curtailed by the lack of organ donors and has led to an expansion in the number of patients on the waiting list. This growing imbalance has led to the relaxing of selection criteria for donors. Many donors which were previously not considered for transplantation are now used – the called marginal donors. Ischemic/reperfusion injury (IR) within the liver allograft occurs as a result of numerous factors and events inherent to the transplantation process. Worst the donor, worst can be the allograft, and more prone it will be to exhibit initial poor function (IPF). IPF is commonly defined on the basis of elevated liver tests, but early aminotransferase elevation after liver transplantation may result from complications other than ischemic/reperfusion lesion. Liver histology can provide some useful information to assess IR. We conducted a cross-sectional study on 55 adult liver transplant recipients, who received their first liver allograft between September 1996 and December 1999, in order to assess IR according to biochemical (reperfusion index: AST + ALT + LDH / 3) and pathological (sinusoidal neutrophilia and hepatocellular necrosis) variables. The risk factors related to donor, recipient, surgical procedure, and postoperative period (until 7 days) were studied, as well as liver biopsies collected before and immediately after transplantation. Some degree of IR was universally found. There was association between biochemical and pathological findings (p=0,04; gamma=0,49). There was a trend toward to extension of hepatocellular necrosis to be isolatedly related to reperfusion index (p=00,5; gamma=0,48). Liver histology was associated with IPF (p=0,02). Reperfusion index was significantly associated to IPF (P=0,001) and acute renal failure (P<0,001). Early mortality rate was greater when reperfusion index was severe (p=0,002). Reperfusion index was an independent risk factor for the development of graft dysfunction (p=0,004) and renal failure (p=0,04). 1-year patient survival was significantly reduced in patients with severe lesion detected by reperfusion index (p=0,003). Reperfusion biopsy seems to detect preservation injury and it is associated with biochemical parameters for insult assessment.

Orientador: Paulo Afonso Ribeiro Jorge / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-22T11:49:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CredidioNetto_Luiz_M.pdf: 8072213 bytes, checksum: 33278f24e248abdcd3f53745c6d090ea (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O objetivo do presente trabalho é estudar o efeito da isquemia/reperfusão sobre a função endotelial dos vasos coronários de resistência. Desenvolvemos a experiência com 12 cães mestiços, adultos, com peso médio de 17,7Kg. Após anestesia e abertura do tórax, fez-se a dissecção da artéria coronária descendente anterior (DA) e o coração foi preparado com duas agulhas, colocadas na raiz da aorta e no ventrículo esquerdo para medição das pressões, através de transdutores de pressão Stathan P23Db. O "probe" de um fluxômetro eletromagnético (Carolina Medical Electronics, Inc.) foi posicionado na artéria DA e, acima do mesmo, passou-se um fio de polipropileno envolvendo a DA, para oclusão e desoclusão do vaso. Abaixo do "probe" foi introduzida uma agulha, conectada a uma bomba de infusão (B. Braun Melsungen AG), para administração de acetilcolina. Foram instaladas derivações para obtenção do eletrocardiograma. Todos os parâmetros foram registrados em polígrafo Siemens, modelo Mingograph 804. A oclusão do vaso teve a duração de 90 minutos, seguida de 20 minutos de reperfusão. Registraram-se os fluxos coronários e os demais parâmetros (variáveis do estudo) em situações controles, durante a infusão de acetilcolina nos períodos pré-oclusão (C1 e ACh1) e após 20 minutos de reperfusão (C2 e ACh2). Estes dados foram também registrados durante a fase de hiperemia reativa (HR), que sucedeu a desoclusão da DA, após 90 minutos de oclusão. A acetilcolina foi administrada na dose de 15ug/Kg/min. A coloração com cloreto de trifeniltetrazolio mostrou infarto do miocárdio em todos os corações estudados. A comparação dos fluxos coronários controles e com acetilcolina no período de pré-oclusão coronária, mostrou elevação significante do fluxo (P<0,05), de 155,5%. Para os valores de fluxo C2 e ACh2, no período de reperfusão, não houve diferença estatisticamente significante, a qual também não ocorreu entre as demais variáveis do estudo (freqüência cardíaca, pressões sistólica e diastólica de aorta e pressões sistólica e diastólica final de ventrículo esquerdo), no momento de registro dos fluxos controles e com acetilcolina (C1-ACh1 e C2-ACh2). O fluxo obtido na hiperemia reativa (HR) foi significantemente maior do que aquele obtido durante a infusão de acetilcolina, no período de pré-oclusão (ACh1) (P<0,05). O autor conclui que a reperfusão que se seguiu ao infarto do miocárdio, reduziu o fluxo coronário durante a administração de acetilcolina e interpreta este resultado como decorrente da disfunção endotelial, que se instala nos vasos coronários de resistência, durante a restauração do fluxo sangüíneo ao músculo cardíaco / Abstract: The aim of the present report was to study the effect of ischemia/reperfusion on the endothelial cell function of the resistance coronary vessels. Twelve adult mongrel dogs weighing 12.0Kg to 25.0kg (mean weight of 17.7Kg) were studied. After anesthesia and thoracotomy, the anterior descending coronary artery was dissected and an electromagnetic flowmeter probe (Carolina Medical Electronics, Inc.) positioned near the coronary emergency. A needle connected to an infusion pump (B. Braun Melsungen AG) was introduced into the coronary artery for administration of acetylcholine at a rate of 15|ig/Kg/min. A thread was passed above the probe and around the artery for vessel occlusion and deocclusion. Two other needles were placed into the aortic root and left ventricular chamber for pressures measurement. Electrocardiogram was also registered. All the physiologic parameters were registered on a Siemens Mingoghaph 804 multi-channel recorder. The coronary vessel was occluded for 90 minutes, followed by 20 minutes of reperfusion. Coronary flow, electrocardiogram and the aortic and ventricular pressures were registered during the pre-occlusion period and after 20 minutes of reperfusion under basal conditions, as well as during acetylcholine administration. The same parameters were also registered during reactive hyperemia following vessel deocclusion. A comparison between the coronary flows in the absence and presence of acetylcholine during the pre-occlusion period showed a 155.5% increase in flow (P<0.05). In the reperfiision period, no statistically significant difference was observed between the flows in the absence and presence of that substance, nor there were diferences in other physiologic parameters. Triphenyltetrazolium staining showed myocardial infarction in all the hearts examined. The author concludes that reperfusion following myocardial infarction reduces coronary flow during the admini strati on of acetylcholine, as a result of endothelial dysfunction installed in the resistance coronary vessels during blood flow restoration / Mestrado / Mestre em Cirurgia

Orientador: Ana Terezinha Guillaumon / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T15:42:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Couto_MuriloAntonio_D.pdf: 2252260 bytes, checksum: 2f6594d5f81424dbb347d54e1c0aed51 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A isquemia e a reperfusão podem acarretar diversas alterações histopatológicas, bioquímicas e inflamatórias no intestino. No presente estudo objetivamos observar as alterações que ocorrem no epitélio intestinal de ratos, quando submetidos à isquemia de tempos variados e reperfusão programada de diferentes tempos de isquemia, é assim discriminado; Grupo I - controle, Grupo II - isquemia 10 minutos, Grupo III - isquemia 20 minutos, Grupo IV isquemia de 30 minutos, Grupo V- isquemia 40 minutos e Grupo VI- isquemia 60 minutos. Todos os grupos foram submetidos ao mesmo tempo de reperfusão (24 horas ),e realizando-se ressecção do intestino para análise histopatológica. Para avaliação das possíveis diferenças entre os grupos previamente definidos para os variáveis comprimento do vilo, largura do vilo e índice mitótico, usamos o teste não paramétrico para médias de KRUSKAL- WALLIS, ressaltando-se que, quando houve significância estatística, completamos este teste pelo teste de comparações múltiplas. O estudo demonstrou que, do ponto de vista qualitativo o epitélio intestinal se encontra regenerado, ao ser submetido a diferentes tempos de isquemia e reperfusão de 24 horas. Entretanto observamos que, ao se analisar a morfometria (análises quantitativas) considerando como parâmetro o comprimento e a largura do vilo bem como o índice mitótico detectamos alterações significativas. Estas alterações caracterizam-se por uma diminuição do comprimento e aumento da largura do vilo à medida que o tempo de isquemia aumentava. Acrescente-se também que o índice mitótico apresentou aumento após ter se iniciado a isquemia (sendo significativo grupo III em relação ao controle) / Abstract: Schemia and reperfusion can entail several histopathological, biochemical, and inflammatory changes in the intestine. This study is intended to observe the changes which occur in the intestinal epithelium of rats, when submitted to the ischemia of varied time and scheduled reperfusion of 24 hours. For this purpose, the following groups were established: Group I - control, Group II - 10 minutes ischemia, Group III¿ 20 minutes ischemia, Group IV - 30 minutes ischemia, Group V - 40 minutes ischemia, and Group VI - 60 minutes ischemia. All groups were submitted to the same reperfusion time (24 hours), their intestines being resected for histopathological analysis. For the evaluation of possible differences among the groups previously defmed, the variables length of the villus, width of the villus, and mitotic index were considered, applying the nonparametric test for averages of KRUSKAL- WALLIS, stressing that whenever there was statistical significance, this test was completed by the test of multiple comparisons. This study showed that, from the qualitative point of view, the intestinal epithelium is regenerated when submitted to different ischemia and reperfusion times of 24 hours. It was observed, however, that when analysing the morphometry (quantitative analyses), taking villus length and width as well as mitotic index as parametre, meaningful alterations were detected. Such alterations are characterized by a diminution of the villus length and width as the ischemia time increased. lt should be added that the mitotic index increased after the ischemia start (Group III being meaninful in relation to the control) / Doutorado / Cirurgia / Doutor em Cirurgia