GALERA, Siulmara Cristina. Efeito da suplementação oral de glutamina sobre o estresse oxidativo em indivíduos de meia idade e idosos. 2008. 162 f. Tese (Doutorado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-27T12:29:56Z No. of bitstreams: 1 2008_tese_scgalera.pdf: 2578070 bytes, checksum: 59864078676e9bafad257ec6a20db937 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-03-27T12:36:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_tese_scgalera.pdf: 2578070 bytes, checksum: 59864078676e9bafad257ec6a20db937 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-27T12:36:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_tese_scgalera.pdf: 2578070 bytes, checksum: 59864078676e9bafad257ec6a20db937 (MD5) Previous issue date: 2008 / Significant alterations in the organism occur in the human aging process, including the increase of oxidative stress which has been held responsible for unleashing many degenerative diseases. The adoption of a strategy able to interfere in the oxidative process would be essential to ease or retard the appearance of disorders prevailing in advanced age. The usage of substances in nutraceutic dosages as antioxidants precursors has been much studied. Safety and effects of the oral L-glutamine supplementation, in nutraceutic dosages,on oxidative stress and glucose metabolism were analyzed in middle-aged and elderly individuals. Thus, a randomized, controlled, cross-over, double-blind clinic trial was performed. Through the SENIEUR test protocol criteria with modifications, 32 people living in a nursing home were selected, divided in 2 groups and submitted to oral L-glutamine and calcium caseinate supplementation at the dosage of 0.5/kg/day for a 14-day period intercalated by a 5-day washout period. Tests were performed in order to evaluate hematological, hepatic, renal alterations and the estimated Glomerular Filtration Rate (eGFR) was calculated, the antioxidant capacity was evaluated through the total glutathione dosage,calculation of GSH/GSSG ratio of the redox (oxidation-reduction) potential through the Nerst equation and the lipid peroxidation was evaluated through dosage of TBARS (thiobarbituric acid reacting substances), before (T0) and after (T1) supplementation. From 32 participants that started the study, one was excluded due to anti-inflammatory usage and the other withdrew by own will. 16 (53.3%) out of 30 were men, average age 69 } 8.8 years, average weight 61.8 } 14.2 kg, serum albumine 4.0 } 0.3 g/dl. There was no clinical adverse effect during the L-glutamine usage, nor significant clinical alteration of laboratory parameters except for an increase in urea levels either at the caseinate group (T0= 34.100 } 9.117; T1 = 44.200 } 8.833; p<0.0001) as at the glutamine group (T0 = 34.100 } 9.117; T1 = 44.200 } 8.833; p<0.0001) and a statistically significant creatinine increase at the glutamine group (T0 = 0.917 } 0.123; T1 = 1.050 } 0.138; p<0.0001) and at the GFRe: 13.3% in Lglutamine supplementation and 2.9% in calcium caseinate supplementation, but without clinical significance. Blood levels of the Total Glutathione did not show alteration with Lglutamine supplementation, nor alteration in the anti-oxidation capacity of the glutathione system assessed through TBARS ratio calculation. L-glutamine supplementation had no impact on the glycolitic path and insulin secretagogue. It is concluded that the increase in urea and creatinine serum levels and the reduction of the estimated Glomerular Filtration Rate occur probably due to the difficulty of the aged kidneys to metabolize protein-sourced supplements. Although they are not clinically significant, these alterations impose a rigorous control in the evaluation of the kidney function parameters during the L-glutamine supplementation with doses of 0.5g/kg/day on middle-aged and elderly individuals. In absence of additional stress, the L-glutamine supplementation does not alter the organic reactions standard of oxidative stress, pertaining to aging, not justifying, therefore, its usage in these situations. / No processo do envelhecimento humano ocorrem alterações significativas no organismo,incluindo o aumento do estresse oxidativo, que tem sido responsabilizado pelo desencadeamento de muitas doenças degenerativas. A adoção de estratégia capaz de interferir no processo oxidativo seria fundamental para amenizar ou retardar o surgimento de afecções prevalentes na idade avançada. A utilização de substâncias em doses nutracêuticas, como precursoras de antioxidantes, tem sido muito estudada. A segurança e os efeitos da suplementação via oral de glutamina, em doses nutracêuticas, sobre o estresse oxidativo e o metabolismo glicêmico foram analisados em indivíduos de meia-idade e idosos. Para tanto, foi realizado um ensaio clínico randomizado, controlado, cruzado, duplo-cego. Foram selecionados, pelos critérios do Protocolo SENIEUR com modificações, 32 residentes em instituição de longa permanência, divididos em 2 grupos e submetidos à suplementação com L-glutamina e caseinato de cálcio via oral, na dose de 0,5g/Kg/dia por período de 14 dias intercalados por pausa temporal (washout period) de 5 dias. Foram realizados exames para avaliação de alterações hematológicas, hepáticas, renais e calculada a estimativa do Ritmo de Filtração Glomerular (eRFG), avaliada a capacidade antioxidante pela dosagem da Glutationa Total, cálculo da razão GSH/GSSG, do potencial redox pela Equação de Nerst e avaliada a peroxidação lipídica pela dosagem do TBARS (substância reativa ácido tiobarbitúrico) antes (T0) e após (T1) suplementação. Dos 32 participantes que iniciaram o estudo, um foi excluído por uso de antiinflamatório e out o e retirou por vontade própria. Dos 30 indivíduos restantes, 16 (53,3%) eram homens, média de idade 69 ± 8,8 anos, peso médio 61,8 ± 14,2Kg,albumina sérica 4,0 ± 0,3g/dL. Não houve efeito clínico adverso durante a utilização de Lglutamina,tampouco alteração significativa dos parâmetros laboratoriais, exceto aumento nos níveis de uréia, tanto no grupo caseinato (T0 = 33,033 ± 8,688; T1 = 43,066 ± 11,732; p <0,0001) quanto no grupo glutamina (T0 = 34,100 ± 9,117; T1 = 44,200 ± 8,833; p<0,0001) e aumento estatisticamente significante de creatinina no grupo glutamina (T0 = 0,917 ± 0,123;T1 = 1,050 ± 0,138; p<0,0001) e redução da eRFG: 13,3% na suplementação de L-glutamina e de 2,9% na suplementação de caseinato de cálcio, porém sem significado clínico. A concentração sanguínea de Glutationa Total não mostrou alteração com a suplementação de L-glutamina, tampouco houve alteração na capacidade de antioxidação do sistema glutationa avaliada pelo cálculo da razão GSH/GSSG, pela equação de Nerst e na peroxidação de lipídeos avaliada pela dosagem de TBARS. A suplementação de L-glutamina não teve impacto sobre a via glicolítica e secretagoga de insulina. Conclui-se que aumento nos níveis séricos de uréia e creatinina e a redução da estimativa de Ritmo de Filtração Glomerular são provavelmente devidos à dificuldade dos rins envelhecidos de metabolizar suplementos de fonte protéica. Embora não clinicamente significativas, estas alterações impõem um rigoroso controle na avaliação dos parâmetros da função renal durante a suplementação de L-glutamina na dose de 0,5g/kg/dia em indivíduos de meia-idade e idosos. Na ausência de estresse adicional, a suplementação de L-glutamina não altera o padrão das reações orgânicas de estresse oxidativo, próprias do envelhecimento, não justificando, portanto, seu uso nestas situações.

Made available in DSpace on 2014-06-12T22:58:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8887_1.pdf: 2864057 bytes, checksum: 5078efb99d9ca60da10286124d6277fd (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Estudaram-se os efeitos do treinamento físico moderado e da suplementação com glutamina sobre parâmetros imunológicos de ratos submetidos ou não a estresse agudo na idade adulta. Foram avaliadas: eventuais alterações qualitativas e quantitativas nas séries vermelha e branca do sangue, a taxa de fagocitose e a liberação de radical superóxido em macrófagos alveolares. Animais jovens recebiam dietas suplementadas com L-glutamina ou com L-glicina durante 10 dias prévios a realização dos estudos. Outro grupo foi submetido a treinamento de natação durante 45 minutos por dia, 5 dias por semana, durante 6 semanas, com aumento progressivo de carga, segundo o peso corporal do animal até atingir um máximo de 3%. Após 24 horas do término do período de suplementação ou do treinamento, eram submetidos ou não a estresse agudo de contenção durante 40 minutos.. O estresse, a aplicação de programa controlado de treinamento moderado ou o emprego de suplementação com glutamina, não modificaram os níveis hematimétricos nos animais. Demonstrou-se que o estresse agudo reduz o número total de leucócitos periféricos com aumento no percentual de neutrófilos (p < 0,002) e eosinófilos(p < 0,02) e, redução de linfócitos (p < 0,001). Foi demonstrado que o estresse causa redução na taxa de fagocitose (p < 0,001) e na liberação de radicais superóxido (p < 0,001) por macrófagos. O modelo do treinamento evitou a redução de leucócitos periféricos (p<0,001) e diminuição da fagocitose (p<0,001) ocorrida após estresse, mas não alterou a liberação de superóxido. A suplementação com glutamina não induziu proteção à redução de leucócitos ou na taxa de fagocitose após o estresse e nem alterou a liberação de superóxido. Porém, suprimiu a neutrocitose (p<0,002) e linfopenia (p<0,001). Os achados constituem um alerta acerca dos efeitos deletérios que o estresse pode vir a causar no organismo, sugerem que a realização de exercícios moderados regulares fortalece algumas funções do sistema imune contra as reações adversas do estresse psicológico. Além disso indicam que mais estudos devem ser realizados para discernirem o real efeito de imunonutrientes como a glutamina, uma vez que não foi detectada mudanças globais na imunidade ou proteção contra reações deletérias do estresse agudo em indivíduos sadios, mas, detectou-se efeitos específicos em subpopulações leucocitárias

Foram investigados os efeitos da glutamina sobre marcadores de estresse oxidativo, ativação do fator de transcrição nuclear Kappa Beta e mediadores próinflamatórios em um modelo de colite experimental induzida por ácido acético em ratos Wistar. A glutamina (25 mg / Kg), foi administrada via retal 48 e 24 horas antes da instilação de ácido acético. A Glutamina reduziu significativamente os escores de dano histológico e preveniu parcialmente a diminuição das pressões anais esfincterianas nos animais que receberam ácido acético. Os valores da lipoperoxidação medidos por TBARS e quimiluminescência foram significativamente inferiores no grupo que recebeu glutamina profilática em comparação ao grupo colite. A instilação de ácido acético induziu a um aumento significativo na expressão do NF-KB no núcleo, o que resultou em alterações nas concentrações citosólicas do IKK e da forma não fosforilada do inibidor IKB. A expressão da enzima óxido nítrico sintase (iNOS) e da cicloxigenase-2 (COX-2) estão significativamente aumentados. Todos estes efeitos foram parcialmente prevenidos pela administração de glutamina. Concluiu - se que a atividade antinflamatória da glutamina no modelo de colite induzida por ácido acético em ratos deve-se, pelo menos em parte, pela inibição da expressão de certos mediadores pró - inflamatórios que são regulados pela rota de transcrição do NF-KB.

A hipertensão portal é uma complicação da cirrose com alterações hemodinâmicas, que se caracterizam pelo aumento do fluxo sangüíneo e/ou aumento da resistência vascular no sistema porta. É uma das principais causas da mortalidade entre pacientes cirróticos, devido à hemorragia digestiva alta, provocada pelo surgimento de colaterais portossistêmicos, ou seja, o surgimento de varizes gastro-esofágicas. A glutamina é um aminoácido abundante encontrado no músculo, plasma e tecidos. Ela atua em resposta à ação celular, no sistema imune e serve como substrato para a síntese da glutationa. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação da glutamina, por via intraperitonial, em estômagos de ratos, com ligadura parcial de veia porta (LPVP), avaliando a pressão portal e o estresse oxidativo. Foram utilizados 24 ratos machos Wistar, pesando em média 300g, divididos em 4 grupos: 1. SO (controle); 2. SO + G: (controle tratado com glutamina), a partir do 8º dia, administração de glutamina (25mg/Kg); 3. LPVP: ligadura parcial da veia porta; 4. LPVP + G: ligadura parcial da veia porta e, a partir do 8º dia, administração de glutamina (25mg/Kg). No 15° dia, foi verificada a pressão portal por punção da veia mesentérica dos ratos, através de um polígrafo de pressão Lettica e após a retirada de sangue para as provas de integridade hepática e dos estômagos para as medidas de estresse oxidativo. Foram quantificados os valores de proteínas (Lowry et al, 1951), os níveis de substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS) (Bueges e Aust, 1978) e das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (Mirsa e Fridovich, 1983), catalase (Boveris e Chance, 1973) e, glutationa peroxidase (Flohé et al., 1974) e avaliação de nitritos e nitratos pelo reagente de Griess (Granger, 1999) em homogeneizado dos estômagos desses animais. A histologia de estômago foi avaliada pela coloração de hematoxilina e eosina (HE). Foi observado um aumento da pressão portal no grupo LPVP quando comparado ao grupo controle (P<0,05) e uma redução significativa da pressão portal no grupo LPVP+G quando comparado ao grupo LPVP (P<0,05). Houve também um aumento dos níveis de TBARS e QL e uma redução dos níveis de SOD no grupo LPVP, quando comparado aos grupos controles (P<0,05), bem como uma melhora significativa destes valores no grupo tratado com glutamina (P<0,05). Não houve diferença entre nenhum dos grupos em relação aos níveis séricos das enzimas hepáticas e dos níveis de catalase. Os níveis de glutationa peroxidase no grupo SO+G aumentaram significativamente em relação aos demais (P<0,05). Na avaliação dos metabólitos do NO, observou-se um aumento dos níveis de NO no grupo LPVP em comparação ao grupo LPVP+G (P<0,05). Na análise histológica do estômago observou-se edema e pontos de vasodilatação nos animais LPVP, enquanto no grupo LPVP+G houve redução do edema e da angiogênese. Para análise estatística, foi utilizado análise de variância (ANOVA) seguida de teste Tukey-Kramer para múltiplas comparações, sendo o nível de significância adotado de 5% (P<0,05). Este estudo sugere que a administração de glutamina, através da inibição do estresse oxidativo, reduz a pressão portal em animais com ligadura parcial de veia porta. / Portal hypertension is a complication of the cirrhosis that is characterized by the increase of the blood flow and/or of the vascular resistance in the portal system. It is one of the principal causes of mortality between cirrhotic patients due to the situation of high digestive hemorrhage in function of the appearance of portosystemic collaterals, characteristic of the gastropathy of portal hypertension. Glutamine is an abundant aminoacid found in the muscle, plasma and tissues. It acts in reply to cellular action, immune system and serves as substrate for glutationa. The objective of this study was to evaluate the action of glutamine, by intraperitonial way in stomachs of animals with partial ligature of the portal vein (LPVP), evaluating the regulation of the portal pressure and the oxidative stress. 24 male Wistar rats were used, weighing on average of 300g, divided in 4 groups: 1. Sham Operated (SO); 2. LPVP: partial ligature of the portal vein; 3. SO+Glu: from the 8th day administration of glutamine (25mg/Kg); 4. LPVP+Glu: from the 8th day administration of glutamine (25mg/Kg). In 15th day was checked the pressure in the mesenteric vein of the rats through a polygraph of pressure Lettica. Blood samples was used to evaluated the hepatic function. The stomach was used to evaluated the oxidative stress. We quantified the values of proteins, the levels of substances that react to the tiobarbituric acid (TBARS) the antioxidant enzymes superoxide dismutase and catalase and nitrites and nitrates levels by the Griess reaction in homogenized of the animals stomachs. We observed an increase of the portal pressure in the group LPVP when compared to the control group (P<0,05) and a significant reduction of the portal pressure in the group LPVP+Glu comparing to the group LPVP (P<0,05). There was also an increase of TBARS and chemiluminescense levels and a reduction of SOD levels in the group LPVP when compared to the control groups (P<0,05). The glutamine, when administered, reduced the values of TBARS in the group LPVP+Glu and increased the antioxidant enzymes. There was no difference between the groups regarding the plasmatic levels of hepatic function enzymes and catalase. The glutathione peroxidase levels in the group SO + G significantly increased compared to the other groups (P <0.05). In the assessment of the NO metabolites, there was an increase in NO levels in the group LPVP compared to the group LPVP + G (P <0.05). In histological analysis there was edema and points of vasodilation in animals LPVP, while in Group G + LPVP a reduction of edema and in the vessels growth. For statistical analysis we used analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey-Kramer test for multiple comparisons, and the level of significance of 5% (P <0.05). This study suggests that the administration of glutamine, inhibiting the oxidative stress, reduces portal pressure in animals with partial ligature of the portal vein.

SANTOS, Ana Angélica Queiroz Assunção. Estudo das alterações morfológicas induzidas pela Toxina A, do Clostridium difficile em células epiteliais intestinais e do efeito protetor da Glutamina e Alanil-glutamina. 2011. 120 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-12-06T13:02:50Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_aaqasantos.pdf: 6513486 bytes, checksum: b4873c52295127b43af4843d288a42bf (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2013-12-06T13:03:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_aaqasantos.pdf: 6513486 bytes, checksum: b4873c52295127b43af4843d288a42bf (MD5) / Made available in DSpace on 2013-12-06T13:03:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_aaqasantos.pdf: 6513486 bytes, checksum: b4873c52295127b43af4843d288a42bf (MD5) Previous issue date: 2011 / Clostridium difficile is the major cause of antibiotic-associated colitis, a disease with significant morbidity and mortality. Glutamine (Gln), a non-essential aminoacid, is a major fuel for the dynamic intestinal cell population. Alanyl-glutamine (Ala-Gln) is a dipeptide that is highly soluble and well tolerated. The aim of this study was to analyze the changes induced by Clostridium difficile toxin A (TcdA) in intestinal epithelial cell morphology and cytoskeletal element and the effect of Gln and Ala-Gln treatment, using advanced microscopic techniques. Twelve well cell culture plates, with 13 mm diameter glass coverlids, were seeded with 5x105 IEC-6 cells and grown for 24h in DMEM media. Afterwards, the wells were incubated for 24h as follow: control, TcdA (10 ng/mL), TcdA + Gln (10 mM) and TcdA + Ala-Gln (10 mM). The cells were than fixed in 4% formaldehyde for 14 h and afterwards they were examined by atomic force microscopy (AFM), scanning electronic microscopy (SEM) and Fluorescent microscopy. For the SEM the samples were fixed to samples holders with carbon adhesive tape and covered with a 15 mm gold film for conductivity by sputter. To fluorescent microscopy the cells were permeabilizided with PBS/Triton after that they were marked with stained with FITC-RhoA, Rodhamine-phallodin and DAPI performed using an inverted fluorescence microscope. An immunoblotting was realized with the same groups. The PVDF membrane was incubated with RhoA antibody overnight and afterwards activated by Amershan kit. The proteic control was made by α- tubulin. Also performed experiments of cellular proliferation and oxidative stress. As observed by AFM, SEM and Fluorescent microscopy TcdA caused intense cell shrinkage with multiple extensions. This change in shape was associated with collapse of the F-actin cytoskeleton demonstrated by fluorescent microscopy. An increase of RhoA production was detected in the groups treated with Gln e Ala-Gln. We demonstrated that TcdA dramatically altered the intestinal cell morphology and cytoskeleton organization and that Ala-Gln and Gln supplementation consistently prevented the intestinal epithelial cell damage induced by TcdA probably by increasing RhoA expression. The TcdA induced a reduction of 8.4% in cell proliferation while the Ala-Gln and Gln increased by 13.2% and 12.7%, respectively. The TcdA induced cells to oxidative damage, which was reversed by the use of Gln and Ala-Gln.. Our findings provide rationale for the potential use of Ala-Gln and Gln as adjuvant therapy in Clostridium difficile disease. Investigation of morphological and cytoskeleton changes using advanced microscopic techniques may aid in the evaluation of the protective or therapeutic activity of drugs against TcdA effects. / Clostridium difficile é a maior causa de colite associada ao uso de antibióticos, com significante morbidade e mortalidade. Glutamina (Gln), um aminoácido não-essencial, é a maior fonte combustível para a dinâmica das células intestinais. Alanil-glutamina (Ala-Gln) é um dipeptídeo, altamente solúvel e bem tolerado. O objetivo deste estudo foi analisar as alterações induzidas pela toxina A (TcdA) do Clostridium difficile na morfologia e elementos do citoesqueleto das células epiteliais intestinais e o efeito do tratamento com Gln e Ala-Gln, utilizando técnicas avançadas de microscopia. Placas de cultura de células com doze poços, previamente acrescidas de lamínulas de vidro, com diâmetro de 13mm, IEC-6, 5x105 foram semeadas e cultivadas por 24 horas em meio DMEM. Depois, as células foram incubadas por 24h de acordo com os seguintes grupos: Controle, TcdA (10 ng / mL), TcdA + Gln (10 mM) e TcdA + Ala-Gln (10 mM). As células foram fixados em formol a 4% por 14h, depois foram examinados na microscopia de força atômica (AFM), microscopia eletrônica de varredura (SEM), microscopia confocal e fluorescente. Para o SEM as amostras foram fixadas em porta amostras fita adesiva de carbono e cobertos com uma película de ouro 15 mm para adquirir condutividade por pulverização catódica. Para microscopia de fluorescência e o confocal, as células foram permeabilizadas com PBS/Triton depois foram marcados com RhoA- FITC, Faloidina –Rodamina e DAPI e as imagens capturadas através de um microscópio invertido de fluorescência ou confocal. Um immunoblotting foi realizado com os mesmos grupos. A membrana PVDF foi incubada com o anticorpo RhoA overnight, em seguida ativado pelo kit Amershan. O controle protéico foi feito por α-tubulina. Também realizarmos experimentos de proliferação celular e estresse oxidativo. Observou-se que a TcdA causa intenso encolhimento celular restando múltiplas extensões filamentosas. Esta alteração na forma foi associada ao colapso do citoesqueleto de F-actina demonstrada na microscopia de fluorescência. Um aumento da produção RhoA foi detectada no grupo tratado com Gln e Ala-Gln. Demonstramos que a morfologia das células intestinais e organização do citoesqueleto foram dramaticamente alteradas pela TcdA e que a suplementação com Ala-Gln e Gln impediu o dano celular epitelial intestinal induzida pela TcdA provavelmente por aumentar a expressão RhoA. A TcdA induziu uma redução de 8,4% na proliferação celular, enquanto o Ala-Gln e Gln aumentou 13,2% e 12,7%, respectivamente. A TcdA induziu as células ao dano oxidativo, que foi revertido com o uso de Gln e Ala-Gln. Nossos resultados fornecem justificativa para o uso potencial de Ala-Gln e Gln como terapia adjuvante na doença causada pelo Clostridium difficile. Investigação de alterações morfológicas e citoesqueleto usando avançadas técnicas de microscopia pode auxiliar na avaliação da atividade de proteção ou terapêutica de drogas contra os efeitos TcdA.

PORTO, André de Oliveira. Ornitina α-cetoglutarato na isquemia-reperfusão em membro pélvico de ratos. 2007. 121 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-17T15:34:15Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_aoporto.pdf: 1163229 bytes, checksum: 32a8263a16dd9f5a230a65f29b7a72a7 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-17T15:34:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_aoporto.pdf: 1163229 bytes, checksum: 32a8263a16dd9f5a230a65f29b7a72a7 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-17T15:34:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_aoporto.pdf: 1163229 bytes, checksum: 32a8263a16dd9f5a230a65f29b7a72a7 (MD5) Previous issue date: 2007 / To investigate the effects of the ornitine α-ketoglutarate (OKG) upon metabolites in vivo concentrations in whole blood and gastrocnemic muscle tissue of rats submitted to ischemia-reperfusion of the pelvic limb. Methods - Forty two rats were randomly distributed into three groups: Sham (S), Ischemia (I) and Ischemia-reperfusion (R). These groups were redistributed into subgroups, according to time and to the substance used in the gavage. All animals received via gavage calcium caseinate or OKG as a single dose, ninety minutes before the first laparotomy (L). The subgroup S received only caseinate, whereas subgroups I and R received caseinate or OKG, at the same dose of 5g/kg body weight. Samples were collected at three moments: immediately after L; after 6h with ischemia (ischemia of 6h) or without ischemia; and after 6,5h of L with ischemia-reperfusion (reperfusion of 0,5h) or without ischemia-reperfusion. Data expressed as: mean ± standard deviation, normality test of Korogorov-Smirnov. In case of the results went normalized, the test ANOVA was applied for evaluation significant difference, in case of the results was not normalized, the test of Kurskal-Wallis was used. Significant variations were considered when p <0,05.Results - In S group, at the plasmatic samples, after six hours (6h) or six hours and thirty minutes (6,5h) of L, when compared versus at the moment of L (0h), there was increase of: CPK 6h [141,83 ± 47,88 versus 67,17 ± 21,58 - p <0,004], CPK 6,5h [180,67 ± 70,19 versus 67,17 ± 21,58 - p <0,001]; LDH 6h [248,96 ± 80,62 versus 74,40 ± 33,84 - p <0,001]. In muscular samples there was increase of: lactate 6,5h [3,52 ± 1,27 versus 1,57 ± 0,76 - p <0,008]; there were reductions of: pyruvate 6h [0,035 ± 0,024 versus 0,087 ± 0,041 - p <0,004]. In group I it was observed, for the subgroup submitted to ischemia + caseinate in relation to sham, in plasma, elevations of: CPK [635,17 ± 231,71 versus 141,83 ± 47,88 - p <0,001], DHL [551,16 ± 142,63 versus 248,96 ± 80,62 - p <0,002], pyruvate [0,390 ± 0,069 versus 0,061 ± 0,045 - p <0,001]. In muscle there were elevations of: pyruvate [0,127 ± 0,044 versus 0,035 ± 0,024 - p <0,002], lactate [8,15 ± 0,71 versus 2,73 ± 0,49 - p <0,001] and TBARS [0,012 ± 0,004 versus 0,002 ± 0,001 - p <0,001]. In this same group when comparing subgroup ischemia + OKG versus subgroup sham there were, in the plasma, elevations of: CPK [868,17 ± 308,30 versus 141,83 ± 47,88 - p <0,001], glutathione [19,54 ± 2,08 versus 6,43 ± 1,06 - p <0,001]. In muscle there was elevation of glutathione [101,851 ± 16,457 versus 14,737 ± 0,874 p <0,001]. Still in the I group, it was observed, when subgroup ischemia + OKG was compared to ischemia + caseinate, in the plasma, a decrease of: LDH [296,26 ± 93,62 versus 551,16 ± 142,62 - p <0,004], glucose [104,16 ± 20,81 versus 160,33 ± 27,47 - p <0,001], pyruvate [0,046 ± 0,012 versus 0,390 ± 0,069 - p <0,001] and an elevation of glutathione [19,54 ± 2,08 versus 5,52 ± 0,92 - p <0,001]. In muscle there were decreases of pyruvate [0,047 ± 0,031 versus 0,127 ± 0,045 - p <0,004], lactate [2,47 ± 0,74 versus 8,15 ± 0,71 - p <0,001], TBARS [0,004 ± 0,004 versus 0,012 ± 0,004 - p <0,013]. It was observed elevation of glutathione [101,85 ± 16,45 versus 14,44 ± 2,09 - p <0,001]. In R group, it was observed, when comparing subgroup reperfusion + caseinate versus sham at the plasma, elevations of: CPK [606,33 ± 79,84 versus 180,66 ± 70,19 - p <0,001]. In muscle it was observed elevations of lactate [7,16 ± 2,33 versus 3,52 ± 1,27 - p <0,013] and decrease of G6PDH [0,462±0,22 versus 0,207±0,22 p<0,04]. In R group, when comparing subgroup reperfusion + OKG to subgroup sham, at the plasma, it was evidenced increase of: CPK [558,00 ± 102,83 versus 180,66 ± 70,19 - p <0,001], glucose [232,16 ± 59,76 versus 118,16 ± 24,22 - p <0,001]. In muscle there was observed decrease of G6PDH [0,182±0,22 versus 0,462±0,22]. Still in the group R when comparing the subgroup reperfusion + OKG versus the subgroup reperfusion + caseinate, at the plasma, there were elevations of glucose [232,16 ± 59,76 versus 158,00 ± 24,20 - p <0,013]. In muscle it was noticed a decrease of lactate [3,63 ± 1,16 versus 7,16 ± 2,33 - p <0,008] and elevation of glutathione [63,18 ± 18,98 versus 16,17 ± 1,96 - p <0,001]. Conclusions - Surgical trauma promoted significant alterations in some studied samples. The ischemia-reperfusion model demonstrated to be effective. OKG, as a single dose for gavage demonstrated pro glycolytic aerobic effect. Muscular and systemic protection against muscle cell lesion was also observed as well as an antioxidant effect at the end of ischemia and after ischemia-reperfusion injury. / Investigar os efeitos da ornitina α-cetoglutarato (OKG) no sangue e músculo gastrocnêmio de ratos submetidos à isquemia-reperfusão do membro pélvico. Método - Quarenta e dois ratos foram distribuídos aleatoriamente em três grupos: Sham (S), Isquemia (I) e Isquemia-reperfusão (R). Estes grupos foram distribuídos em subgrupos de acordo com o tempo e com o composto utilizado na gavagem. Todos os animais receberam gavagem de caseinato de cálcio ou OKG em dose única, noventa minutos antes da primeira laparotomia exploradora (LE). Os subgrupos S receberam apenas caseinato, os subgrupos I e R receberam caseinato ou OKG na mesma dose, de 5g/kg de peso. As amostras foram colhidas em três momentos: imediatamente após a LE; após 6h da LE com isquemia (6h de isquemia) e sem isquemia e após 6,5h da LE com isquemia-reperfusão (0,5h de reperfusão) e sem isquemia-reperfusão. Para análise dos resultados foram utilizados: média, desvio padrão e teste de normalidade de Korogorov-Smirnov. Caso os resultados fossem normalizáveis, aplicou-se o teste ANOVA para avaliação de diferença significante, no caso dos resultados não serem normalizáveis utilizou-se o teste de Kurskal-Wallis com o mesmo fim. Em todos os testes fixou-se em 0,05 ou 5%, a significância estatística. Resultados - No grupo S, nos metabólitos plasmáticos, após 6h e 6,5h da LE, quando comparados ao momento da LE (0h), houve aumento de: CPK 6h [141,83 ± 47,88 versus 67,17 ± 21,58 – p<0,004], CPK 6,5h [180,67 ± 70,19 versus 67,17 ± 21,58 – p<0,001]; LDH 6h [248,96 ± 80,62 versus 74,40 ± 33,84 – p<0,001]. Nos metabólitos musculares houve aumento de: lactato 6,5h [ 3,52 ± 1,27 versus 1,57 ± 0,76 – p<0,008]. Houve redução de: piruvato 6h [0,035 ± 0,024 versus 0,087 ± 0,041 – p<0,004]. No grupo I foram observadas, para o subgrupo submetido à isquemia + caseinato em relação ao sham, no plasma, elevações em: CPK [635,17 ± 231,71 versus 141,83 ± 47,88 – p<0,001], LDH [551,16 ± 142,63 versus 248,96 ± 80,62 – p<0,002], piruvato [0,390 ± 0,069 versus 0,061 ± 0,045 – p<0,001]. No músculo houve elevação de: piruvato [0,127 ± 0,044 versus 0,035 ± 0,024 – p<0,002], lactato [8,158 ± 0,717 versus 2,737 ± 0,499 – p<0,001] e TBARS [0,012 ± 0,004 versus 0,002 ± 0,001 – p<0,001. Neste mesmo grupo comparando-se o subgrupo isquemia + OKG ao subgrupo sham encontrou-se, no plasma, elevação em: CPK [868,17 ± 308,30 versus 141,83 ± 47,88 – p<0,001], glutationa [19,545 ± 2,088 versus 6,432 ± 1,062 – p<0,001] e no músculo elevação da glutationa [101,85 ± 16,45 versus 14,73 ± 0,87 p<0,001]. Ainda no grupo I, foi observado, para o subgrupo isquemia + OKG versus isquemia + caseinato, no plasma, queda em: LDH [296,26 ± 93,62 versus 551,16 ± 142,62 – p<0,004], glicose [104,16 ± 20,81 versus 160,33 ± 27,47 – p<0,001], piruvato [0,046 ± 0,012 versus 0,390 ± 0,069 – p<0,001], e elevação de glutationa [19,54 ± 2,08 versus 5,52 ± 0,92 – p<0,001]. No músculo foi evidenciada diminuição do piruvato [0,047 ± 0,031 versus 0,127 ± 0,045 – p<0,004], lactato [2,47 ± 0,74 versus 8,15 ± 0,71 – p<0,001], TBARS [0,004 ± 0,004 versus 0,012 ± 0,004 – p<0,013] e elevação glutationa [101,85 ± 16,45 versus 14,44 ± 2,09 – p<0,001]. No grupo R. foi observada, quando comparado o subgrupo reperfusão + caseinato ao Sham, no plasma, elevação de: CPK [606,33 ± 79,84 versus 180,66 ± 70,19 – p<0,001], No músculo elevação do piruvato [0,065 ± 0,027 versus 0,030 ± 0,033 – p<0,047] e lactato [7,16 ± 2,33 versus 3,52 ± 1,27 – p<0,013] além de queda na G6PDH [0,462±0,22 versus 0,207±0,22 p<0,04] . No grupo R quando comparado o subgrupo reperfusão + OKG ao subgrupo Sham, no plasma, foi evidenciado aumento em: CPK [558,00 ± 102,83 versus 180,66 ± 70,19 – p<0,001] e glicose [232,16 ± 59,76 versus 118,16 ± 24,22 – p<0,001]. No músculo houve diminuição de G6PDH [0,182±0,22 versus 0,462±0,22]. Ainda no grupo R quando comparado o subgrupo reperfusão + OKG ao reperfusão + caseinato, no plasma, houve elevação da glicose [232,16 ± 59,76 versus 158,00 ± 24,20 – p<0,013]. No músculo foi notada queda no lactato [3,63 ± 1,16 versus 7,16 ± 2,33 – p<0,008] e elevação da glutationa [63,18 ± 18,98 versus 16,17 ± 1,96 – p<0,001]. Conclusões - O trauma cirúrgico desencadeou alterações significativas em alguns metabólitos estudados. O modelo de isquemia-reperfusão demonstrou efetividade. A OKG, em dose única por gavagem, demonstrou ações pró-glicolíticas aeróbica a nível muscular e sistêmico; proteção contra lesão da célula muscular, e efeito antioxidante muscular e sistêmico durante a lesão de isquemia quanto após lesão de isquemia/reperfusão.

GONÇALVES, Eduardo Sílvio Gouveia. Ornitina alfa-cetoglutarato na isquemia-reperfusão intestinal em ratos. 2009. 138 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-19T12:10:03Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_esggonçalves.pdf: 1592149 bytes, checksum: 0dd9b663bd98b55bc4a2b52ce29bb13c (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-19T12:11:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_esggonçalves.pdf: 1592149 bytes, checksum: 0dd9b663bd98b55bc4a2b52ce29bb13c (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-19T12:11:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_esggonçalves.pdf: 1592149 bytes, checksum: 0dd9b663bd98b55bc4a2b52ce29bb13c (MD5) Previous issue date: 2009 / Objective: To evaluate the effect of ornithine alpha-ketoglutarate (OKG) in the blood and intestinal tissue of rats submitted to intestinal ischemia/reperfusion, using the blood concentrations of glucose, G6PDH, pyruvate, acetoacetate, lactate, 3HBDH, glutathione, T-Bars, myeloperoxydase, CPK and LHD, evaluated in vivo on these tissues. Methods: Sixty rats (Rattus norvergicus albinus, Rodentia Mammalia) were selected and aleatorily distributed in five groups of twelve animals, which were: Sham0’(s0’), Sham30’(s30’), Sham60’(s60’), Isquemia(i30’), Reperfusão(r30’). These groups were distributed in subgroups according to the time and the compost used to the “gavagem”. All de animals received the “gavagem” with calcium caseinate or okg, only one dosage, thirty minutes before the exploratory laparotomy (EL). The subgroups s0’Ca, s30’Ca, s60’Ca, i30’Ca and r30’Ca received only calcium caseinate. The subgroups s0’okg, s30’okg, s60’okg, i30’okg and r30’okg received 5g of okg par each kilogram. The samples were taken in five moments: immediately passed the EL; passed 30 minutes of the EL; passed 60 minutes of the EL; passed 30 minutes of the isquemia; passed 30 minutes of the reperfusion. The descriptive statistics were media, error and standard deviation. The values before and after the procedures were compared using the “t” test (“Student pareado” to homogeny and heterogeny variation) and ANOVA. Then, it was used Kolmogorov-Smirnov to compare the normal results. The results were not normal, it was used the Kruskal-Wallis test. Results: It was shown an improvement on the blood lactate(1.186 + 0,18 versus 0,794 + 0,06, p<0,01) to the animals that received okg from i30’. A reduction on blood lactate lactato (0,107 + 0,01 versus 0,266 + 0,02, p<0,05) was noticed in the group r30’ that received okg. It occurred a reduction on plasmatic and tissue pyruvate reduzido (0,146 + 0,24 versus 0,156 + 0,17 and 0,094 + 0,02 versus 0,248 + 0,03, p<0,05) to the group r30’ that received okg. The acetoacetate was reduced to both groups, isquemia and reperfusion, that received okg0,57 + 0,01 versus 0,0685 + 0,01 e 0,128 + 0,04 versus 0,156 + 0,03,*p<0,05). The plasmatic glucose was reduced to the group i30’( 0,1442 + 0,048 versus 1,1098 + 0,0796, *p<0,05) treated with okg and the same happened to the tissue glucose after isquemia (0,1002 + 0,02 versus 0,147 + 0,0264, p<0,05). The LDH had an improvement (0,1002 + 0,02 versus 0,147 + 0,0264, p<0,05) to the group i30’ treated with okg. CPK was reduced (115,13 + 11,77 versus 166,70+6,23,p<0,05) to the group r30’ treated with okg. The tissue glutathione had an improvement to sham okg 30’ (59,17 + 2,39 versus 25,09 + 1.53, p<0,05) and a reduction on isquemia period to the animals treated with okg and CaCa . 3HBDH was reduced (0,062 + 0,01 versus 0,075 + 0,02,p<0,01) in the blood and in the tissues from i30’. This difference was kept to animals’ blood from r30’okg when related to r30’CaCa(0,03 + 0,00 versus 0,0615 + 0,01, p<0,01). There was a reduction on tissue T-BARS to r30’OKG when compared to r30’CaCa(0,0522 + 0,03 versus 0,0745 + 0,02, p<0,05) and an improvement to sham60’CaCa(0,0937 + 0,02 versus 0,020 + 0,01, p<0,01). Glicose and Myeloperoxydase were not affected by the use of okg. All the results were compared to the respective control groups. Conclusion: The used procedures could bring useful results to metabolites in study. The isquemia/reperfusion showed efficiency, offering exogen okg leads to a rising on glicolitic and aerobic activity to tissues and systems. This offer protects yet from the tissue injury and has antioxidant effect during the isquemia/reperfusion injury. / Objetivo: Avaliar os efeito da ornitina α-cetoglutarato (OKG) no sangue e tecido intestinal de ratos submetidos à isquemia/reperfusão intestinal através da determinação das concentrações in vivo no sangue e no tecido do intestino delgado, submetido a isquemia/reperfusão, de glicose, G 6 PDH, piruvato, acetoacetato, lactato, 3 HBDH, glutationa, T-Bars, mieloperoxidase, CPK e LDH. Método: Sessenta ratos (Rattus norvergicus albinus, Rodentia Mammalia) foram distribuídos aleatoriamente em cinco grupos de 12 animais: Sham 0’ (s0’), Sham 30’ (s30’), Sham 60’ (s60’), Isquemia (i30’), Reperfusão (r30’). Estes grupos foram distribuídos em subgrupos de acordo com o tempo e com o composto utilizado na gavagem. Todos os animais receberam gavagem de caseinato de cálcio ou OKG em dose única, trinta minutos antes da laparotomia exploradora (LE). Os subgrupos s0’CaCa s30’CaCa, s60’c, i30’CaCa e r30’CaCa receberam apenas caseinato, de cálcio. Os subgrupos s0’OKG, s30’OKG, s60’OKG, i30’OKG e r30’OKG receberam OKG na dose de 5g/kg de peso. As amostras foram colhidas em cinco momentos: imediatamente após a LE; após 30 minutos da LE; Após 1h da LE; Após 30 minutos de isquemia; Após 30 minutos de reperfusão. A estatística discritiva foi expressa através da média, erro e desvio padrão, acompanhando-se pelo intervalo de confiança da média a 95% . Para comparar os valores pré e pós-procedimentos nas concentrações das variáveis estudadas foram empregados os teste “t” de Student pareado (para variância homogênea e heterogênea) e ANOVA após análise de normalidade através do teste Kolmogorov-Smirnov. Quando observou a não normalidade aplicou-se o teste de Kruskal-Wallis. Resultados: Os resultados apontaram um aumento significativo na lactacemia (1.186 + 0,18 versus 0,794 + 0,06, p<0,01) nos animais que receberam OKG em relação ao controle nos subgrupos isquemia trinta minutos (i30’). No tecido intestinal reperfundido (r30’) ocorreu redução significativa da concentração de lactato (0,107 + 0,01 versus 0,266 + 0,02, p<0,05) nos animais recipientes de OKG em relação ao animais controle, O piruvato plasmático e tecidual se mostrou significantemente reduzido (0,146 + 0,24 versus 0,156 + 0,17 e 0,094 + 0,02 versus 0,248 + 0,03, p<0,05) após o período de reperfusào de trinta minutos nos animais recipientes da OKG em relação aos animais controle. Houve redução significativa da concentração do acetoacetato no tecido intestinal nos tempos pós isquemia e pós reperfusão dos animais recipientes da OKG (0,57 + 0,01 versus 0,0685 + 0,01 e 0,128 + 0,04 versus 0,156 + 0,03,*p<0,05) quando comparados ao animais não tratados. A glicose 6 PDH apresentou redução significativa da sua concentração plasmática no tempo isquemia trinta minutos dos animais recipientes da OKG em relação aos não tratados ( 0,1442 + 0,048 versus 1,1098 + 0,0796, *p<0,05) , ocorrendo o mesmo na concentração tecidual, no pós isquemia (0,1002 + 0,02 versus 0,147 + 0,0264, p<0,05). A LDH apresentou elevação significativa da sua concentração nos animais recipientes da OKG em relação ao controle (278,01 + 51,52 versus 132,93 + 12,54, *p<0,05) no grupo isquemia (i30’) . Ocorreu redução significativa da CPK no grupo reperfusão (r30’) dos animais recipientes da OKG em comparação aos animais controle (115,13 + 11,77 versus 166,70+6,23,p<0,05). A glutationa tecidual apresentou elevação significativa no sham OKG 30 minutos em relação ao nimais controle (59,17 + 2,39 versus 25,09 + 1.53, p<0,05) e redução significante no tempo isquemia, tanto nos animais OKG quanto CaCa. Durante o período de reperfusão a glutationa não apresentou alterações significativas entre os animais tratados e controle. A OKG influenciou de maneira significativa na redução da concentração da 3HDBH tecidual no tempo i30’ (0,062 + 0,01 versus 0,075 + 0,02,p<0,01) Esta diferença significativa foi mantida no sangue dos animais tratados no grupo reperfusão 30’OKG em relação aos animais r30’CaCa (0,03 + 0,00 versus 0,0615 + 0,01, p<0,01). A T-bars tecidual apresentou redução significante no grupo r30’OKG em comparação ao r30’CaCa (0,0522 + 0,03 versus 0,0745 + 0,02, p<0,05), com elevação significativa no grupo sham 60’CaCa em relação aos animais tratados 0,0937 + 0,02 versus 0,020 + 0,01, p<0,01). A oferta exógena da alfa-cetoglutarato não ocasionou nenhuma alteração significante nas concentrações de glicose e mieloperoxidase (MPO) entre os animais do subgrupo experimento quando comparados aos do subgrupo controle. Conclusões: Os procedimentos realizados foram suficientes para desencadear alterações significativas em alguns metabólitos estudados. O modelo de isquemia-reperfusão demonstrou efetividade. A oferta exógena OKG, em dose única por gavagem, sugere aumento na atividade pró-glicolíticas aeróbica a nível tecidual e sistêmico; proteção contra lesão celular do tecido intestinal, e efeito antioxidante tecidual e sistêmico durante a lesão de isquemia e após a lesão de reperfusão.

LEITÃO, João Paulo de Vasconcelos. Efeitos do tratamento com l-alanil-glutamina sobre o estresse oxidativo em ratos jovens submetidos à torção do cordão espermático. 2007. 73 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-27T15:43:17Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_jpvleitão.pdf: 521024 bytes, checksum: 84623090712e98cba62168bcdb3f0246 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-27T15:43:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_jpvleitão.pdf: 521024 bytes, checksum: 84623090712e98cba62168bcdb3f0246 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-27T15:43:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_jpvleitão.pdf: 521024 bytes, checksum: 84623090712e98cba62168bcdb3f0246 (MD5) Previous issue date: 2007 / The effect of L-alanil-glutamine was tested in a situation of oxidative stress induced by torsion of the spermatic cord. Eighty four male young Wistar rats were distributed randomly in 6 groups: Saline group 1h (GSa1) and Ala-Gln Group 1h (GAg1), animals of these groups were submitted to 1 hour of ischemia and 6 hours of reperfusion and were treated 30 minutes before the torsion, by intravenous way, with saline solution and L-alanil-glutamine (0,75g/Kg) respectively; Saline group 3h (Gsa3) and Ala-Gln Group 3h (Gag3), animals of these groups were submitted to 3 hours of ischemia and 6 hours of reperfusion, had been treated, 30 minutes before the torsion, by intravenous way, with saline solution and L-alanil-glutamine (0,75g/Kg) respectively; each group, consisting of 18 rats, was distributed equitable, in 3 sub-groups (T-0, T-2, T-6), each one with 6 animals, which represented the times that testis were colected, being T-0 the maximum time of ischemia, T-2 after 2 hours of reperfusion and T-6 after 6 hours of reperfusion. Two groups (Sham 1h and Sham 3h) were submitted to sham operation, being the testis colected two hours after simulated trauma. Thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and reduced glutathione levels were assayed in testis. Comparasion between groups were made using Mann-Whitney e Kruskal-Wallis tests, and temporal comparations were made using Dunn test. P values of <0,05 were considered to indicate statistical significance. GSH concentration was significantly increased in testis of the rats submitted to 1 hour of ischemia, followed by 6 hours of reperfusion, treated with L-Ala-Gln in all the studied times, when compared with the control group; in the animals submitted to the 3 hours of ischemia, significant increase of GSH was demonstrated in the maximum time of ischemia and 6 hours of reperfusion time. Significant decrease of TBARS levels were seen in rats submitted to 3 hours of ischemia followed by reperfusion, treated with L-alanil-glutamine, in maximum time of ischemia and after 6 hours of reperfusion. These results demonstrates that glutamine may play a role in the maintenance of the tecidual levels of GSH in two models of ischemia/reperfusion of the testis studied, by an antioxidant effect, and may promote cell membrane protection during the ischemia (3h)/reperfusion by decreasing lipid peroxidation / O efeito da L-alanil-glutamina foi testado numa situação de estresse oxidativo induzida por um modelo experimental de isquemia/reperfusão testicular através de torção do cordão espermático. Oitenta e quatro ratos Wistar jovens foram distribuídos aleatoriamente em 6 grupos da seguinte forma: Grupo Salina 1h (GSa1) e Grupo Ala-Gln 1h (GAg1), tendo sido os animais submetidos à 1 hora de isquemia e 6 horas de reperfusão, tratados 30 minutos antes da torção, por via intravenosa, com solução salina e L-alanil-glutamina (0,75g/Kg) respectivamente; Grupo Salina 3h (GSa3) e Grupo Ala-Gln 3h (GAg3), tendo sido os animais submetidos a 3 horas de isquemia e 6 horas de reperfusão, tratados 30 minutos antes da torção, por via intravenosa, com solução salina ou L-alanil-glutamina (0,75g/Kg) respectivamente; cada grupo, constituído por 18 ratos, foi distribuído equitativamente, , em 3 subgrupos (T-0, T-2, T-6), cada um com 6 animais, os quais representavam os tempos de coleta do testículo, sendo T-0 o tempo máximo de isquemia, T-2 após 2 horas de reperfusão e T-6 após 6 horas de reperfusão. Dois grupos simulados (Sham), cada um com 6 animais, mimetizava o procedimento de indução de isquemia por 1 ou 3 horas, seguido de um período de pós-trauma de 2 horas, sendo a coleta realizada neste momento. Foram determinadas as concentrações das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e glutationa reduzida (GSH) nas amostras de tecido (testículo) obtidas nos diversos subgrupos. As comparações entre os grupos foram realizadas utilizando-se o teste de Mann-Whitney e Kruskal-Wallis com comparações temporais pelo teste de Dunn. A significância estatística foi com valores de p<0,05. Houve aumento significante das concentrações de GSH, no testículo dos ratos submetidos à 1 hora de isquemia seguida de 6 horas reperfusão, tratados com L-Ala-Gln em todos os tempos estudados, quando comparados ao grupo controle; nos animais submetidos à 3 horas de isquemia, demonstrou-se aumento significativo de GSH no tempo máximo de isquemia e após 6 horas de reperfusão. Houve redução significante nas concentrações de TBARS, no testículo dos ratos submetidos à 3 horas de isquemia seguida de reperfusão, nos animais tratados L-Ala-Gln no tempo máximo de isquemia e após 2 horas de reperfusão. Estes resultados demonstram um efeito protetor que a glutamina exerce no testículo durante a isquemia/reperfusão, mostrando-se eficaz na manutenção dos níveis teciduais de GSH nos dois modelos de torção do cordão espermático, reduzindo a magnitude do estresse oxidativo e também reduzindo a peroxidação lipídica nos animais submetidos á 3 horas de isquemia, até a segunda hora de reperfusão.

GUIMARÃES FILHO, Artur. Alterações metabólicas e enzimáticas na regeneração hepática em ratos alimentados com dietas suplementar de L-Glutamina e Alfa-Cetoglutarato. 2012. 181 f. Tese (Doutorado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-14T16:48:08Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_aguimarãesfilho.pdf: 4581094 bytes, checksum: 84a3cc331dc0857a6d77bfa6ca795bb5 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-03-14T16:49:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_aguimarãesfilho.pdf: 4581094 bytes, checksum: 84a3cc331dc0857a6d77bfa6ca795bb5 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-14T16:49:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_aguimarãesfilho.pdf: 4581094 bytes, checksum: 84a3cc331dc0857a6d77bfa6ca795bb5 (MD5) Previous issue date: 2012 / Studies have shown that partial hepatectomia (HP) with removal of two thirds of the organ, in rodents, is followed by growth of remnant liver. In eukaryotic cells the enzyme malate dehydrogenase, from Krebs cycle, can be found in the cytoplasm (cytoplasmic malate dehydrogenase (MDH1) and in the mitochondrial matrix mitochondrial malate dehydrogenase (MDH2). Ammonia, a chemical compound that is toxic to animals, is produced in the course of metabolism. The liver actively participates in the mechanism of detoxification of ammonia. Two enzymes are involved in the disposal of excess ammonia in the cytosol: the glutamate dehydrogenase and glutamine synthetase which reduce α-ketoglutarate (AKG) to glutamate and glutamate to glutamine (GLN), respectively. Considering the effects of AKG and GLN in the liver of rodents, this study aims at assessing the metabolic enzyme changes that take place in regenerating livers after HP in rats treated with these amino acids. Anesthetized rats (Ketamine 50mg/mL + Xilazine 2% -1:0,5 mL) were submitted to HP and treated with calcium caseinate (CCA), L-glutamine (GLN) or ornithine alpha ketoglutarate (OKG) solutions administered by gavage, according to weight of each animal (0, 5gKg). One hundred and eight rats were distributed in 6 groups (n=18) and named according to the treatment used: G-1= Laparotomy (LAP) + CCA; G-2-HP+CCA; G-3 = LAP + GLN; G-4 HP + GLN; G-5 = LAP +ACG; G-6 = HP + ACG. Each group was redistributed into 3 subgroups. Blood and liver samples were collected on the 3rd, 7th and 14th postoperative days for quantification of metabolites (glucose, ketone bodies, lactate, pyruvate and ATP) and enzymes (MDH1 and MDH2). There was an increase of glycemia in 3rd day both in rats subjected to LAP and treated with ACG (G-5) as well as those submitted to HP and treated with GLN (G-3). There was significant reduction in expression of MDH1 enzyme in the liver in the 3rd and 14th day in rats subjected to LAP and treated with ACG and GLN (G-5 and G-3) compared to the control G-1 as well as in the expression of the enzyme MDH2 in 3rd day in the liver of G-6 and G-2 rats. Moreover no changes occurred in the expression of MDH2 in Group G-4 in relation to G-2. It is concluded that the surgical trauma in animals subjected to LAP or HP and treated with ACG or GLN induces increased glycemia in post-operative stage. ACG or GLN promotes reduction in expression of MDH1 enzyme in the liver of rats subjected to surgical trauma in 3rd and 14 days post surgery. ACG promotes reduction in the expression of MDH2 in the liver of rats undergoing HP or LAP only on the 3rd and 14 days post surgery, respectively. GLN given to HP rats does not alter the expression of MDH2 in the liver during the first 14 days post surgery. / Estudos demonstraram que a hepatectomia parcial (HP) com remoção de dois terços do órgão, em roedores, é seguida por crescimento do fígado remanescente. Em células eucariontes a enzima malato desidrogenase, do ciclo de Krebs, pode ser encontrada no citoplasma (malato desidrogenase citoplásmica – (MDH1) e na matriz mitocondrial (malato desidrogenase mitocondrial - MDH2). A amônia, um composto químico tóxico para os animais, é produzida no curso do metabolismo. O fígado participa ativamente do mecanismo de detoxificação da amônia. Duas enzimas participam da eliminação do excesso de amônia do citosol: a glutamato desidrogenase e a glutamina sintetase que reduzem o alfa-cetoglutarato (ACG) em glutamato e glutamato em glutamina (GLN), respectivamente. Considerando os efeitos do ACG e da GLN no fígado de roedores, este estudo tem como objetivo avaliar as alterações metabólicas e enzimáticas observadas em fígados em regeneração após HP em ratos tratados com esses aminoácidos. Ratos anestesiados (Ketamina 50mg/mL + Xilazina 2% -1:0,5 mL) foram submetidos a HP e tratados com soluções de caseinato de cálcio (CCA), L-glutamina (GLN) ou ornitina alfa cetoglutarato (OKG), administradas por gavagem, de acordo com massa de cada animal (0,5g/Kg). Cento e oito ratos foram distribuídos em 6 grupos (n=18) e denominados conforme o tratamento usado: G-1= Laparotomia (LAP) + CCA; G-2= HP + CCA; G-3 = LAP + GLN; G-4 = HP + GLN; G-5= LAP + ACG; G-6 = HP + ACG. Cada grupo foi redistribuído em 3 subgrupos. Amostras (sangue e fígado) foram coletadas no 3º, 7º e 14º dias do pós-operatório, para quantificação de metabólitos (glicose, corpos cetônicos, piruvato, lactato e ATP) e enzimas (MDH1 e MDH2). Houve aumento da glicemia no 3º dia tanto nos ratos submetidos a LAP e tratados com ACG (G-5) bem como naqueles submetidos a HP e tratados com GLN (grupo G-3 ).Houve redução significante na expressão da enzima MDH1 no fígado no 3º e 14º dia nos ratos submetidos a LAP e tratados com ACG e GLN (G-5 e G-3) em relação ao controle G-1 bem como na expressão da enzima MDH2 no 3º dia no fígado dos ratos do G-6 em relação ao G-2. Também não foram observadas alterações na expressão da enzima MDH2 no grupo G-4 em relação ao grupo G-2. Conclui-se que o trauma cirúrgico em animais submetidos a LAP ou HP e tratados com ACG ou GLN induz aumento da glicemia na fase pós-operatoria. A oferta de ACG ou GLN promove redução na expressão da enzima MDH1 no fígado de ratos submetidos ao trauma cirúrgico no 3º e 14º dias pós cirurgia. A oferta de ACG promove redução na expressão da enzima MDH2 no fígado de ratos submetidos à HP ou somente LAP no 3º e 14º dias pós cirurgia, respectivamente. A oferta de GLN à ratos hepatectomizados não altera a expressão da enzima MDH2 no fígado desses animais nos primeiros 14 dias pós cirurgia.

ARAÚJO, Celina Viana De. Efeitos da alanil-glutamina na mucosite intestinal induzida pelo 5-fluorouracil em camundongos deficientes da apolipoproteína-E. 2014. 85 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-17T11:58:18Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_cvaraújo.pdf: 1984661 bytes, checksum: edb23df4351ef6d82b7fcf4b77c61ccb (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-03-17T11:58:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_cvaraújo.pdf: 1984661 bytes, checksum: edb23df4351ef6d82b7fcf4b77c61ccb (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-17T11:58:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_cvaraújo.pdf: 1984661 bytes, checksum: edb23df4351ef6d82b7fcf4b77c61ccb (MD5) Previous issue date: 2014 / A mucosite intestinal é uma reação inflamatória e/ou ulcerativa do revestimento gastrointestinal, podendo ocorrer pelo efeito citotóxico direto dos agentes de quimioterapia e radioterapia antineoplásicas. O 5-fluorouracil (5-FU) é um antineoplásico que está clinicamente indicado no tratamento de diversos tipos de câncer. A glutamina (Gln) é o aminoácido mais comumente encontrado no organismo, sendo benéfica na recuperação da mucosite oral e intestinal. A suplementação com derivados mais estáveis da Gln, tal como alanil-glutanina (Ala-Gln), representa um meio de fornecimento de Gln para o organismo. Um estudo recente do nosso grupo mostrou que animais deficientes da apolipoproteína E tinham agravamento da mucosite intestinal induzida pelo 5-FU. Este trabalho teve como objetivo investigar os efeitos da Ala-Gln no tratamento da mucosite intestinal induzida por 5-FU em camundongos C57BL6J APOE nocautes (ApoE-/-) e selvagens. Utilizamos camundongos com pesos entre 20-25 g, de ambos os sexos, sendo desafiados com injeção intraperitoneal de 5-FU (450 mg/kg), dose única, e controles receberam PBS. Os animais foram tratados com doses de Ala-Gln (100 mM) ou PBS por gavagem (0,5 mL) três dias antes da administração do 5-FU e durante cinco dias consecutivos, sendo sacrificados com solução de eutanásia no sexto dia. Amostras de íleo foram armazenadas em freezer (-80 ºC) para uso em protocolos de biologia molecular. Amostras também foram fixadas em formaldeído para processamento histológico. O peso corporal dos animais foi monitorado diariamente e o efeito citotóxico mielosupressor do 5-FU avaliado pela técnica de leucometria. Também foram considerados parâmetros morfométricos de altura de vilos e profundidade das criptas, índice mitótico e apoptótico, bem como os seus escores para necrose. O Western blot foi usado para a detecção da expressão de vilina e TNF-α intestinais; ELISA para o estudo de citocinas e PCR em tempo real (qPCR) para detecção e quantificação de IGF-1e Bcl-2 intestinais. Os animais selvagens e APOE nocautes, mesmo àqueles tratados com Ala-Gln, apresentaram perda de peso corporal quando desafiados com 5-FU, não havendo diferença entre os grupos. Porém, estes diferiram estatisticamente, apenas, quando comparados aos controles PBS (p<0,001). Verificamos uma leucopenia significativa nos animais selvagens e nocautes desafiados pelo 5-FU em comparação ao grupo PBS (p<0,001), não sendo este efeito revertido ou melhorado com a administração de Ala-Gln. Nas análises morfométricas do íleo, encontramos uma redução na altura de vilos (p<0,001), um aumento da profundidade das criptas (p<0,001 e p<0,01) e uma redução da razão vilo/cripta (p<0,0001) nos animais selvagens e nocautes desafiados pelo 5-FU em comparativo aos respectivos controles PBS. O tratamento com Ala-Gln melhorou a razão vilo/cripta (p<0,0001) e a profundidade das criptas (p<0,001 e p<0,0001) nos animais selvagens e nocautes em relação aos respectivos animais desafiados pelo 5-FU. A altura de vilos foi melhorada (p<0,01) apenas nos animais APOE nocautes tratados com Ala-Gln em relação aos respectivos animais desafiados pelo 5-FU. O desafio pelo 5-FU não aumentou o índice mitótico nas criptas dos animais selvagens e APOE nocautes em relação os controles PBS e os tratados com Ala-Gln. Houve um aumento de células em apoptose nos animais selvagens e nocautes desafiados pelo 5-FU e tratados com Ala-Gln (p<0,01 e p<0,05) em relação aos seus controles PBS. Houve um aumento significativo nos escores para criptas necróticas (p<0,028) em animais selvagens e APOE nocautes desafiados pelo 5-FU em relação aos respectivos controles não desafiados. Apenas os camundongos selvagens tratados com Ala-Gln tiveram uma redução significativa (p<0,04) nos seus escores em comparação com os animais não tratados injetados com 5-FU. Não houve diferença estatística nos níveis da citocina IL-1β detectadas por ELISA no íleo nos animais selvagens desafiados pelo 5-FU comparados aos controles PBS e Ala-Gln. Contudo, houve um aumento significativo nos níveis dessa citocina nos animais APOE nocautes desafiados pelo 5-FU e tratados com Ala-Gln. Não houve diferença na expressão de vilina e TNF-α no íleo nos grupos estudados. Transcritos de RNAm de IGF-1 e Bcl-2 no íleo foram encontrados diminuídos nos animais APOE nocautes em comparação aos animais selvagens. Nossos resultados sugerem que a deficiência de APOE tem um papel fundamental durante a mucosite intestinal induzida pelo 5-FU seguido pelo tratamento com Al.