Orientador: Ilda de Godoy / Banca: Carmen Maria Casquel Monti Juliani / Banca: Udelysses Janete Veltrini Fonzar / Resumo: A raiva é uma doença letal e um grande desafio para a saúde pública do Brasil e em muitos países do mundo é passível de eliminação e prevenção no ciclo urbano por meio de medidas eficientes e intervenção junto ao ser humano e à fonte de infecção. A profilaxia é extremamente importante devendo ser adequada a cada caso após a anamnese e o preenchimento de todos os dados da ficha de notificação. Trata-se de um estudo descritivo quantitativo com o objetivo de analisar os acidentes rábicos quanto ao perfil, conduta adotada e preenchimento das fichas de notificação, em um município do Norte do Paraná. Foram analisados 1.057 casos de acidentes rábicos, sendo que em 70% deles a conduta foi adequada de acordo com o protocolo do Ministério da Saúde e 30% foi inadequada, destas 6,9% não apresentavam informações suficientes para avaliação do caso, 16,1% não garantiam proteção e 7% apesar da conduta ser inadequada, garantiam proteção. A incidência de agressões neste estudo foi de 29,6/10.000 habitantes. O maior risco para os acidentes rábicos encontra-se na faixa etária de 0 a < de dez anos e idosos (5,7/1000 habitantes). Predominaram os acidentes em pessoas da raça branca com o Ensino Fundamental, sem diferença entre o gênero. A maioria dos atendimentos foi realizada por Enfermeiros nas Unidades de Pronto Atendimento (Hospital Municipal e Núcleo Integrado de Saúde III Zona Norte). Os meses em que mais ocorreram os acidentes foram janeiro e agosto, e o tipo de exposição mais frequente foi a mordedura com predomínio das lesões em mãos e pés, ferimentos únicos e superficiais. Em 71,8% dos casos não apresentava antecedente de profilaxia para a raiva. A espécie de animal predominante nos acidentes foi o cão, sadio passível de observação. No presente estudo, 66,9% das pessoas envolvidas em acidentes rábicos foram submetidas à profilaxia antirrábica apesar da maior dos animais serem ... / Abstract: Rabies, a highly lethal disease, is still a great challenge to public health in Brazil and in many countries. Rabies may de eliminated and prevented within the urban area through efficient measures and interventions within the context of the community and the infection source. Its prophylaxis is important and should be adequate to each case after clinical examination and the filling of data on the notification card. Current analysis consists of a descriptive quantitative study to investigate rabies accidents with regard to the disease profile, behavior employed and filling of notification cards in a municipality in the northern region of the state of Paraná, Brazil. Within the 1057 rabies cases investigated, 70% revealed a behavior complying with the Health Ministry protocol, while 30% revealed inadequate behavior. Further, 6.9% of the latter failed to give sufficient information for an evaluation of the case; 16.1% did not warrant any protection; 7% warranted protection although behavior was not adequate. In current study aggression incidences reached 29.6/10,000 inhabitants. Highest risk in rabies accidents occurred in people within the 0 - <10 years and in the elderly (5.7/1000 inhabitants). Accidents against white people with primary schooling, without any gender difference, were prevalent. Most attendances were done by nurses in first aid clinics (Municipal Hospital and Health Nucleus). January and August were the months in which accidents most occurred, featuring bites predominantly on the hands and feet as single and peripheral wounds. Most people (71.8%) did not present any previous rabies prophylaxis. Healthy dogs which could be observed were the predominant animals in rabies accidents. Current investigation shows that 66.9% of people involved in rabies accidents underwent rabies prophylaxis even though most animals could be followed up. A high number of information gaps were found in the ... / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-22Bitstream added on 2014-06-13T18:31:11Z : No. of bitstreams: 1 allendorf_sd_me_botfmvz.pdf: 391470 bytes, checksum: 4de5cbdaf392b6546f0a5a82ea035e2b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Morcegos vêm recebendo crescente importância em Saúde Pública, pois são os principais reservatórios para a raiva em diversas partes do mundo. Pouco se conhece a respeito da distribuição do vírus rábico em tecidos e órgãos não nervosos. O objetivo deste estudo foi avaliar a distribuição do vírus rábico em órgãos e tecidos de quirópteros naturalmente infectados de diferentes hábitos alimentares, e avaliar a existência de alguma possível correlação com a filogenia das amostras. Foram utilizados 26 morcegos previamente diagnosticados positivos para raiva pelos métodos padrão, sendo coletado cérebro, glândulas salivares, pulmão, coração, fígado, baço, estômago, intestinos, rins, bexiga, gordura interescapular e fezes. As amostras foram submetidas à extração do material genético e submetidas à reação de RT-PCR com iniciadores específicos para o gene N. As amostras que resultaram negativas na primeira reação foram submetidas a uma segunda amplificação (hemi-nested PCR). Os produtos amplificados foram submetidos ao sequenciamento genético e as sequências alinhadas com sequências homólogas obtidas do GenBank para construção da árvore filogenética. Os resultados demonstraram uma ampla distribuição do vírus em órgãos e tecidos dos morcegos, não sendo possível correlacionar com a espécie e tão pouco com a linhagem viral encontrada. O maior percentual de positividade foi encontrado em cérebro e glândula salivar e a técnica de heminested PCR demonstrou ter maior sensibilidade na detecção do vírus rábico nas amostras estudadas. Na análise filogenética observou-se o agrupamento das amostras de acordo com as espécies, confirmando a existência de linhagens gênero específicas / Bats have been assigned an increasing importance in Public Health as these are the main rabies reservoirs in many parts of the world. Little is known about the distribution of rabies virus in non-nervous tissues and organs. The aim of this study was to evaluate the distribution of rabies virus in organs and tissues of naturally infected bats with different feeding habits, and evaluate the existence of any possible correlation with the phylogeny of the samples. 26 bats previously diagnosed as positive for rabies by standard methods were used; the brain, salivary glands, lung, heart, liver, spleen, stomach, intestine, kidneys, urinary bladder, interscapular fat and feces were collected. The genetic material were extracted and submited to RT-PCR reaction with specific primers for the N gene. The samples that were negative in the first reaction underwent a second amplification (hemi-nested PCR). The amplified products were subjected to genetic sequencing and the sequences aligned with homologous sequences obtained from GenBank for phylogenetic tree construction. The results showed a wide distribution of virus in organs and tissues of bats, it was not possible to correlate the viral distribuition with the species nor with the viral strain found. The highest percentage of positivity was found in brain and salivary glands and the technique of heminested PCR demonstrated to have a greater sensitivity for detection of rabies virus in the studied samples. The phylogenetic analysis showed the clustering of samples according to the species, confirming the existence of genus specific lineages

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-20Bitstream added on 2014-06-13T19:14:35Z : No. of bitstreams: 1 carvalho_c_me_araca.pdf: 284989 bytes, checksum: 926c8c7db1bce860bcc7f1964a72b6fc (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A riqueza de espécies da fauna de morcegos e a ocorrência de vírus rábico foram avaliadas em área urbana (municípios da região de Araçatuba) e florestal (fragmento localizado no município de Valparaíso-SP), ambos localizados na região noroeste do Estado de São Paulo. Os morcegos da área urbana foram recebidos diretamente no laboratório de diagnóstico de raiva da UNESP - Campus de Araçatuba no período de 2006 a 2007. Morcegos da área florestal foram capturados mensalmente, no período de um ano de coletas em 2007, resultando em uma baixa diversidade de espécies. As amostras das duas áreas foram submetidas ao exame de diagnóstico de raiva, por meio das técnicas de imunofluorescência direta (IDF) e inoculação intracerebral em camundongos. Foram analisados 968 morcegos pertencentes a quatro famílias, Phyllostomidae, Noctilionidae, Molossidae e Vespertilionidae. Os morcegos observados em ambas as áreas no período de 2007 resultaram em uma similaridade na composição das espécies representada pela família Phyllostomidae. Morcegos da família Molossidae foram registrados na sua maioria em áreas urbanas, observando-se somente uma espécie no fragmento Florestal. A taxa de positividade na área urbana no período de 2006 a 2007 foi de 0,72%, inferior à média registrada em estudos anteriores, sendo os casos positivos em morcegos de hábito alimentar frugívoro e insetívoro. Todos os morcegos da área florestal foram negativos para o diagnóstico da raiva. O estudo pode contribuir para o conhecimento da diversidade de morcegos e a epidemiologia da raiva na região. / The species richness of bat fauna and the ocurrence of rabies virus were studied in urban (municipal districts from Araçatuba region) and natural (forest fragment in Valparaiso town) environments, both located in the Northwestern Sao Paulo State. Bats from the natural forest were collected with mist nets in four different areas: forest, boarding areas, natural clearings in the woods and areas close to water and food sources. Urban samples were composed by bats, sent to UNESP Rabies Laboratory, for rabies virus research by fluorescent antibody test (FAT) and mouse inoculation test (MIT). A total of 968 bats belonging to four families, Phyllostomidae, Noctilionidae, Molossidae e Vespertilionidae, were analyzed. The results obtained from both areas showed a closed similarity in the composition of species and some particularities in the distribution of species according to trophic guilds in bats from Phyllostomidae family. Most of bats from the Molossidade family were recorded in urban areas, with only one species in the forest fragment. Considering all samples, 0,72% was rabies positive, a lower index compared to the mean index registered in the last years. All the positive cases occurred in frugivorous and insectivorous bats. This study was important to improve the knowlegment of bat diversity and rabies epidemiology in this specific region.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-06-21Bitstream added on 2014-06-13T18:59:02Z : No. of bitstreams: 1 araujo_db_me_botfmvz.pdf: 249258 bytes, checksum: 539ad5602bdd6df582591ea9174f378e (MD5) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / A utilização de métodos sensíveis e específicos para o diagnóstico da raiva constitui uma importante ferramenta para o controle e profilaxia dessa enfermidade. A Reação em Cadeia pela Polimerase através de Transcriptase-Reversa (RT-PCR) tem sido utilizada com bons resultados no diagnóstico do vírus rábico, mesmo quando as amostras estão em estágio de decomposição. Adicionalmente as técnicas moleculares têm sido utilizadas para estudos epidemiológicos possibilitando um melhor conhecimento da epidemiologia viral. O presente trabalho teve como objetivo avaliar as técnicas de RT-PCR e hnRT-PCR para a detecção do vírus rábico em estudos retrospectivos, para isso foram avaliadas 101 amostras cerebrais de diferentes espécies animais armazenadas por diferentes períodos, recém-descongeladas e mantidas em temperatura ambiente por 72 horas para decomposição. Os resultados das técnicas de RT-PCR e hnRT-PCR foram comparados com resultados prévios da Imunofluorescência Direta (IFD) e Inoculação Intracerebral em Camundongos (IC). Das 50 amostras positivas testadas, 26 (52%) apresentaram resultados positivos para a RT-PCR e 45 (90%) com a associação da hnRT-PCR quando realizadas em amostras recentemente descongeladas. Das amostras em decomposição foram analisadas 48 previamente positivas; onde 17 (34,3%) apresentaram resultado positivo para a RT-PCR e 36 (75%) com a associação da hnRT-PCR. Não foram encontrados resultados falso-positivos nas amostras negativas submetidas às técnicas de biologia molecular. A hnRT-PCR apresentou maior sensibilidade em relação à RT-PCR nas amostras recém-descongeladas e em decomposição. Os resultados sugerem a viabilidade de sua aplicação em estudos retrospectivos em materiais descongelados e decompostos. / The use of methods, both sensitive and specific, for rabies diagnosis are important tools for the control and prophylaxis of the disease. Reverse-Transcriptase Polymerse Chain Reaction (RT-PCR) has been used in rabies diagnosis with good results, even in decomposed materials. Additionally, molecular techniques have been used for epidemiological studies and better knowledge of viral epidemiology. The aim of this work was to evaluate the RT-PCR and hnRT-PCR in rabies virus detection in retrospectives studies. RT-PCR and hnRT-PCR were evaluated in 151 brain samples from different animal species, thawed and left at room temperature for 72 hours for decomposition. The RT-PCR and hnRT-PCR results were compared with preview results from Fluorescent Antibody Test and Mouse Inoculation Test. From the 50 positive fresh samples, 26 (52%) were positive for RT-PCR and 45 (90%) for hnRT-PCR. From the 48 positive decomposed samples, 17 (34, 3%) were positive for RT-PCR and 36 (75%) for hnRT-PCR. No false-positives results were found in the negatives samples submitted to the molecular techniques. These results show that the hnRT-PCR was more sensitive than RT-PCR, and both techniques presented lower sensibility in decomposed samples. The hnRT-PCR presented greater sensibility than the standards techniques (IFD e IC) in decomposed materials for rabies diagnosis. These results suggest the viability of the application of molecular techniques in thawed and decomposed materials for retrospective studies.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-15Bitstream added on 2014-06-13T19:38:40Z : No. of bitstreams: 1 000747736.pdf: 4832841 bytes, checksum: 36ca1dbe22b09d1a7ad396c139c2da5b (MD5) / A raiva é uma doença letal e um grande desafio para a saúde pública do Brasil e em muitos países do mundo é passível de eliminação e prevenção no ciclo urbano por meio de medidas eficientes e intervenção junto ao ser humano e à fonte de infecção. A profilaxia é extremamente importante devendo ser adequada a cada caso após a anamnese e o preenchimento de todos os dados da ficha de notificação. Trata-se de um estudo descritivo quantitativo com o objetivo de analisar os acidentes rábicos quanto ao perfil, conduta adotada e preenchimento das fichas de notificação, em um município do Norte do Paraná. Foram analisados 1.057 casos de acidentes rábicos, sendo que em 70% deles a conduta foi adequada de acordo com o protocolo do Ministério da Saúde e 30% foi inadequada, destas 6,9% não apresentavam informações suficientes para avaliação do caso, 16,1% não garantiam proteção e 7% apesar da conduta ser inadequada, garantiam proteção. A incidência de agressões neste estudo foi de 29,6/10.000 habitantes. O maior risco para os acidentes rábicos encontra-se na faixa etária de 0 a < de dez anos e idosos (5,7/1000 habitantes). Predominaram os acidentes em pessoas da raça branca com o Ensino Fundamental, sem diferença entre o gênero. A maioria dos atendimentos foi realizada por Enfermeiros nas Unidades de Pronto Atendimento (Hospital Municipal e Núcleo Integrado de Saúde III Zona Norte). Os meses em que mais ocorreram os acidentes foram janeiro e agosto, e o tipo de exposição mais frequente foi a mordedura com predomínio das lesões em mãos e pés, ferimentos únicos e superficiais. Em 71,8% dos casos não apresentava antecedente de profilaxia para a raiva. A espécie de animal predominante nos acidentes foi o cão, sadio passível de observação. No presente estudo, 66,9% das pessoas envolvidas em acidentes rábicos foram submetidas à profilaxia antirrábica apesar da maior dos animais serem... / Rabies, a highly lethal disease, is still a great challenge to public health in Brazil and in many countries. Rabies may de eliminated and prevented within the urban area through efficient measures and interventions within the context of the community and the infection source. Its prophylaxis is important and should be adequate to each case after clinical examination and the filling of data on the notification card. Current analysis consists of a descriptive quantitative study to investigate rabies accidents with regard to the disease profile, behavior employed and filling of notification cards in a municipality in the northern region of the state of Paraná, Brazil. Within the 1057 rabies cases investigated, 70% revealed a behavior complying with the Health Ministry protocol, while 30% revealed inadequate behavior. Further, 6.9% of the latter failed to give sufficient information for an evaluation of the case; 16.1% did not warrant any protection; 7% warranted protection although behavior was not adequate. In current study aggression incidences reached 29.6/10,000 inhabitants. Highest risk in rabies accidents occurred in people within the 0 – <10 years and in the elderly (5.7/1000 inhabitants). Accidents against white people with primary schooling, without any gender difference, were prevalent. Most attendances were done by nurses in first aid clinics (Municipal Hospital and Health Nucleus). January and August were the months in which accidents most occurred, featuring bites predominantly on the hands and feet as single and peripheral wounds. Most people (71.8%) did not present any previous rabies prophylaxis. Healthy dogs which could be observed were the predominant animals in rabies accidents. Current investigation shows that 66.9% of people involved in rabies accidents underwent rabies prophylaxis even though most animals could be followed up. A high number of information gaps were found in the ...

Orientador: Luzia Helena Queiroz da Silva / Banca: Wagner André Pedro / Banca: Wilson Uieda / Resumo: A riqueza de espécies da fauna de morcegos e a ocorrência de vírus rábico foram avaliadas em área urbana (municípios da região de Araçatuba) e florestal (fragmento localizado no município de Valparaíso-SP), ambos localizados na região noroeste do Estado de São Paulo. Os morcegos da área urbana foram recebidos diretamente no laboratório de diagnóstico de raiva da UNESP - Campus de Araçatuba no período de 2006 a 2007. Morcegos da área florestal foram capturados mensalmente, no período de um ano de coletas em 2007, resultando em uma baixa diversidade de espécies. As amostras das duas áreas foram submetidas ao exame de diagnóstico de raiva, por meio das técnicas de imunofluorescência direta (IDF) e inoculação intracerebral em camundongos. Foram analisados 968 morcegos pertencentes a quatro famílias, Phyllostomidae, Noctilionidae, Molossidae e Vespertilionidae. Os morcegos observados em ambas as áreas no período de 2007 resultaram em uma similaridade na composição das espécies representada pela família Phyllostomidae. Morcegos da família Molossidae foram registrados na sua maioria em áreas urbanas, observando-se somente uma espécie no fragmento Florestal. A taxa de positividade na área urbana no período de 2006 a 2007 foi de 0,72%, inferior à média registrada em estudos anteriores, sendo os casos positivos em morcegos de hábito alimentar frugívoro e insetívoro. Todos os morcegos da área florestal foram negativos para o diagnóstico da raiva. O estudo pode contribuir para o conhecimento da diversidade de morcegos e a epidemiologia da raiva na região. / Abstract: The species richness of bat fauna and the ocurrence of rabies virus were studied in urban (municipal districts from Araçatuba region) and natural (forest fragment in Valparaiso town) environments, both located in the Northwestern Sao Paulo State. Bats from the natural forest were collected with mist nets in four different areas: forest, boarding areas, natural clearings in the woods and areas close to water and food sources. Urban samples were composed by bats, sent to UNESP Rabies Laboratory, for rabies virus research by fluorescent antibody test (FAT) and mouse inoculation test (MIT). A total of 968 bats belonging to four families, Phyllostomidae, Noctilionidae, Molossidae e Vespertilionidae, were analyzed. The results obtained from both areas showed a closed similarity in the composition of species and some particularities in the distribution of species according to trophic guilds in bats from Phyllostomidae family. Most of bats from the Molossidade family were recorded in urban areas, with only one species in the forest fragment. Considering all samples, 0,72% was rabies positive, a lower index compared to the mean index registered in the last years. All the positive cases occurred in frugivorous and insectivorous bats. This study was important to improve the knowlegment of bat diversity and rabies epidemiology in this specific region. / Mestre

Orientador: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Coorientador: Karina Paes Bürger / Banca: Luciano Melo de Souza / Banca: Ana Paula Rodomilli Grisolio / Resumo: A raiva ainda é considerada uma doença negligenciada e um grave problema de Saúde Pública, responsável por milhares de mortes anualmente, tanto de animais como de seres humanos. No Brasil, o Ministério da Saúde considera os estudantes de Cursos de Medicina Veterinária como grupo com risco de exposição permanente ao vírus da raiva devido às atividades ocupacionais exercidas durante a graduação, incluindo aulas práticas, estágios curriculares e extracurriculares. Atualmente, no Estado de São Paulo, há 43 cursos de Veterinária computados pelo CFMV, os quais estão distribuídos por 32 municípios. Por esse motivo, o presente estudo teve como propósito realizar diagnóstico de situação sobre a PArPrE para estudantes dos cursos de graduação em Medicina Veterinária do Estado de São Paulo, avaliando-se os riscos e elaborando um modelo de programa de imunização pré-exposição que poderá ser utilizado em todos os cursos de Veterinária do Brasil. Para tanto, foram desenvolvidos e aplicados questionários individuais aos responsáveis pela profilaxia dos alunos em 23 instituições de ensino que demonstraram interesse em participar da pesquisa; foram analisadas as matrizes curriculares dos cursos de graduação priorizando as disciplinas práticas relacionadas aos períodos de risco de exposição ao vírus da raiva; foi delineado o perfil epidemiológico da doença no Brasil e no Estado de São Paulo; e foi feita a associação geográfica dos casos positivos com a localização das instituições de ensino. Ob... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Rabies has still considered a neglected disease and a serious Public Health problem, which is responsible for thousands of animals and humans deaths' every year. In Brazil, the Ministry of Health considers students of Veterinary course as a group at risk of permanent exposure to rabies virus, due to occupational activities during graduation, including practical classes, curricular and extracurricular internships. In 2018, the Federal Council of Veterinary Medicine considered, in the State of São Paulo, 43 Veterinary Medicine courses distributed in 32 municipalities. For this reason, the present study aimed to realize a situational diagnosis on pre-exposure prophylaxis of rabies to Veterinary... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Master of Science / Department of Biology / Samantha Wisely / As human populations increase world-wide, land use and land cover are altered to support the rapid anthropogenic expansion. These landscape alterations influence patterns of zoonotic infectious disease emergence and propagation. It is therefore becoming increasingly important to study emerging and re-emerging diseases to predict and manage for future epidemics. Studies of directly-transmitted infectious diseases should consider three components of disease epidemiology: characteristics of the pathogen, ecology of the host, and habitat configuration of the underlying landscape. I studied the influence of both the host ecology of the striped skunk (Mephitis mephitis) and the alteration of the underlying landscape on the epidemiology of rabies virus in the Flint Hills of Kansas. This tall-grass prairie is experiencing woody expansion due to anthropogenic disturbance, altering the landscape on which the rabies virus emerges and spreads. We first studied the behavioral and social ecology of the striped skunk using field and genetic methods. We concluded that 1) striped skunks reached high population densities in anthropogenically disturbed habitats, 2) these individuals were not closely related, and 3) contact rates could be influenced by temperature. Using habitat-specific skunk densities from this initial study, we created spatially-explicit contact networks of skunk populations across the Upper Kansas River Watershed and simulated the emergence and spread of rabies through the system. This modeling approach revealed a threshold of forest habitat beyond which striped skunks became increasingly connected and the rabies virus reached greater extents across the landscape. Based on these findings we recommend fire regimes and land cover alterations to reduce woody encroachment across the Flint Hills and to avoid future disease epidemics in the region.

<p>The mouth, throat, and face contain numerous muscles that participate in a large variety of orofacial behaviors. The jaw and tongue can move independently, and thus require a high degree of coordination among the muscles that move them to prevent self-injury. However, different orofacial behaviors require distinct patterns of coordination between these muscles. The method through which motor control circuitry might coordinate this activity has yet to be determined. Electrophysiological, immunohistochemical, and retrograde tracing studies have attempted to identify populations of premotor neurons which directly send information to orofacial motoneurons in an effort to identify sources of coordination. Yet these studies have not provided a complete picture of the population of neurons which monosynaptically connect to jaw and tongue motoneurons. Additionally, while many of these studies have suggested that premotor neurons projecting to multiple motor pools may play a role in coordination of orofacial muscles, no clear functional roles for these neurons in the coordination of natural orofacial movements has been identified.</p><p>In this dissertation, I took advantage of the recently developed monosynaptic rabies virus to trace the premotor circuits for the jaw-closing masseter muscle and tongue-protruding genioglossus muscle in the neonatal mouse, uncovering novel premotor inputs in the brainstem. Furthermore, these studies identified a set of neurons which form boutons onto motor neurons in multiple motor pools, providing a premotor substrate for orofacial coordination. I then combined a retrogradely traveling lentivirus with a split-intein mediated split-Cre recombinase system to isolate and manipulate a population of neurons which project to both left and right jaw-closing motor nuclei. I found that these bilaterally projecting neurons also innervate multiple other orofacial motor nuclei, premotor regions, and midbrain regions implicated in motor control. I anatomically and physiologically characterized these neurons and used optogenetic and chemicogenetic approaches to assess their role in natural jaw-closing behavior, specifically with reference to bilateral masseter muscle electromyogram (EMG) activity. These studies identified a population of bilaterally projecting neurons in the supratrigeminal nucleus as essential for maintenance of an appropriate level of masseter activation during natural chewing behavior in the freely moving mouse. Moreover, these studies uncovered two distinct roles of supratrigeminal bilaterally projecting neurons in bilaterally synchronized activation of masseter muscles, and active balancing of bilateral masseter muscle tone against an excitatory input. Together, these studies identify neurons which project to multiple motor nuclei as a mechanism by which the brain coordinates orofacial muscles during natural behavior.</p> / Dissertation

Cultivos de células VERO em microcarregadores porosos de celulose (Cytopore) e porosos de gelatina (Cultispher G) com rendimento celular três vezes maior, foram obtidos em relação às culturas em microcarregadores sólidos de DEAE-dextran (Cytodex tipo 1). No Cytopore e Cultispher G atingimos 1.265 e 1.103 células/microcarregador, respectivamente e no Cytodex 1, 256 células/microcarregador. A concentração celular nos suportes porosos Cytopore aumentou 43 vezes o número de células iniciais, 37,5 vezes no Cultispher G e 17 vezes no Cytodex 1. As culturas de células VERO nos microcarregadores porosos foram utilizadas com êxito para a replicação do vírus rábico (PV/VERO), quando infectadas com MOI de 0,05. Títulos de 104,8 FFD50/mL determinados pelo método de inibição de focos fluorescentes (RFFIT) foram obtidos 96 horas após a infecção. Estudos de microscopia óptica e eletrônica de varredura e transmissão para análise da estrutura destes suportes, mostraram boa colonização celular e a eficiência da replicação viral. A padronização de metodologia para cultura e infecção viral de células VERO nos microcarregadores porosos indica a utilidade destes suportes para produção de antígenos e vacinas virais e a potencialidade do sistema para a obtenção de produtos biotecnológicos em geral. / Cultures of VERO cell on porous cellulose-coated microcarriers (Cytopore) and on porous gelatin-coated (Cultispher G) with a cellular yield 3 times higher, was obtained in relation to DEAE-dextran solid microcarriers (Cytodex type 1). In the cultures on Cytopore and Cultispher G we obtained 1.265 and 1.103 cells/microcarrier, respectively and 256 cells/microcarrier on Cytodex 1. The cell concentration for the Cytopore porous suports increased 43 times from the initial cell number, 37,5 times for the Cultispher G and 17 times for the Cytodex 1. The VERO cell cultures on porous microcarriers were efficiently used for the replication of the rabies virus (PV/VERO), when infected with 0,05 MOI. Titers of 104,8 FFD50/mL determined by the fluorescent focus inhibition method (RFFIT) were obtained 96 hours post-infection. Studies on light microscopy and scanning and transmission eletronic microscopy carried out to analyse the suports structure, showed a good cell population and efficiency of virus infection. The standardization of a methodology for culture and virus infection of VERO cells on porous microcarriers indicate the usefulness of these porous supports to the antigens and viral vaccines production and the potenciality of this system for the attainment of biotechnological products.