Com intuito de esclarecer a associação do ganho de peso do feto no ato da tosquia, fato este, que diminui a taxa de mortalidade ao nascer, utilizamos vinte e uma ovelhas da raça merino australiano, divididos em 2 grupos com 10 integrantes cada: um tosquiado (OT) aos 70 dias do período gestacional e um segundo mantido como controle (ONT). Destas fêmeas durante o período final de gestação retirou-se a placenta e o feto através do procedimento cirúrgico segundo técnica cesariana convencional. Para efeito comparativo mensurou-se inicialmente as características morfométricas da placenta e dos fetos. Como caracterização da placenta quantificamos o número de placentônios e suas medidas. As amostras de placenta foram fixadas e processadas para microscopia de luz, com inclusão em parafina. A quantificação do glicogênio foi obtida com a mensuração de 5 campos randômicos de cada lâmina produzida seqüencialmente. As análises foram realizadas por efeito comparativo de diferença de coloração por reação histoquímica de P.A.S. Para análise estatística foi utilizado o teste T normal comparativo entre médias. Os resultados macroscópicos indicaram que o tratamento da tosquia não aumentou significativamente os pesos placentários e fetais, e tão pouco as medidas referentes ao placentônio. Nas análises microscópicas, a quantidade média de glicogênio entre as áreas quantificadas no placentônio não apresentaram diferenças significativas, já no fígado na região da tríade portal e no músculo reto houve diferença entre os animais tosquiados e os não tosquiados. Com isto podemos concluir que a tosquia realizada aos 70 dias do período gestacional influência no acumulo de glicogênio no fígado e no músculo reto femural, podendo ser estes os fatos responsáveis pelo aumento do peso dos fetos ao nascer. / In order to clarify the association of weight increase of the fetus in the act of shorn, and remembered that this fact decreases the rate of mortality at birth we tested twenty Merino australian sheep. Animals were divided into 2 groups with 10 members each: shorn (OT) to 70 days of gestational period and a second kept as control (ONT). The placenta and fetus were removed by a surgical procedure of caesarean, according conventional technique. As characterization of the placenta quantification of the placentome numbers and their measures. Samples of placenta were fixed and routinely processed for the light microscopy, with inclusion in paraffin. The quantification of glycogen was obtained with the measurement of 5 fields in each slides produced sequentially. The tests were conducted by comparative effect of a difference in color between the slides and the area covered by the histochemistry PAS reaction For statistical analysis was used the T test (student) and comparison between normal averages. The macroscopic results indicated that the treatment of shorn not significantly increased the fetal and placental weights, and so little measures regarding placentomes. The microscopic analysis, shows that the average between the areas of glycogen quantified in placentome were not different (P <0.05). Already in the liver at the portal triad region and in the rectus femoris muscle were found a significant increase of glycogen deposits (P <0.05). With this results we can conclude that the shorn done at 70 days of gestational period influence on the accumulation of glycogen in the liver and muscle of the fetuses and thus increase the weight of them at birth.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnológico / O sistema imune infantil é pouco estimulado durante o período fetal e ao nascimento as respostas aos antígenos ambientais diferem das respostas do adulto na medida que seu sistema ainda está em desenvolvimento. No entanto, a imunidade da prole é influenciada pelo sistema imune da mãe através da placenta e do leite materno. Há relatos de que existe uma maior probabilidade de filhos de mães alérgicas apresentarem algum tipo de alergia ao longo da vida. A alergia alimentar é muito comum em crianças e representa uma das mais sérias reações de hipersensibilidade tendo como uma das conseqüências o desenvolvimento de inflamação intestinal crônica (IBD). Nossos objetivos foram avaliar se a inflamação intestinal das mães, causada pela re-exposição ao antígeno específico durante a gestação, influencia a resposta alérgica da prole e interfere na sua sobrevida e/ou mortalidade. Camundongos fêmeas C57Bl/6J, imunes e normais, receberam amendoim ou ração comercial como dieta desafio a partir da 2 semana de gestação. Parte da prole recebeu 10l de extrato protéico de amendoim por via oral durante a 1 semana de vida na tentativa de indução de alergia alimentar. Todos os animais foram imunizados com 100g de extrato protéico de amendoim aos 2 meses de idade. Uma semana após desafio subcutâneo todos receberam uma dieta contendo amendoim por 30 dias. Avaliamos os títulos de IgG total anti-amendoim, altura e largura de ilosidades, número de vilosidades por campo do duodeno, número de enterócitos (Ent) e leucócitos intraepiteliais (IEL), a relação Ent/IEL e Ent/lamina propria (LP), bem como número de células caliciformes e leucócitos na muscular do duodeno. Nossos resultados mostraram que a imunização da mãe bem como a dieta durante a gestação, não influenciou na indução da resposta alérgica de sua prole. Contudo a mortalidade foi significativamente maior em filhos de mães com IBD (p<0,002). A exposição precoce a baixas doses de proteína também não interferiu na resposta imune ao amendoim a partir do desmame. Não houve diferença significativa nos títulos de IgG no pós-desmame e após cada imunização. Essa diferença só foi significativa entre filhos imunizados e normais, independente do tratamento da mãe (p<0,001). Através da histopatologia confirmamos os dados sorológicos e só observamos diferença significativa dos parâmetros histométricos entre filhotes imunizados e normais (p<0,001). Nossas conclusões são que nesse modelo experimental a imunização materna não é decisiva no favorecimento da alergia da prole, mas a IBD aumenta a probabilidade de complicações no período gestacional e perinatal como por exemplo, aborto (reabsorção em camundongos) aumento de mortalidade, e canabalismo da prole. / The neonates immune system is less stimulated during the fetal period than in postnatal life. At birth responses to antigens differ from the adults immune response due to the fact that the neonates immune system is still maturing. However the offsprings immunity is influenced by their mothers immune system via the placenta and breast milk. Reports in medical research indicate that the offspring of allergic mothers are more prone to develop allergy than those born to normal mothers. Food allergy is a common disease in children represented by hypersensitivity reactions and as a consequence may lead to the development of inflammatory bowel disease (IBD). Our aims are to evaluate if mothers IBD, caused by specific antigen reexposure during pregnancy, influences the offsprings allergic response and interferes in her survival and/or mortality. Immune and normal C57Bl/6J mice were given a challenge diet of peanuts or mouse chow as of the 2nd week of pregnancy. Half of the offspring received daily 10l of peanut protein extract by the oral route during the first week of life to induce food allergy. All animals were then imunized with 100g of peanut protein extract at 2 months of age. One week after sc challenge all were given a diet containing peanuts for 30 days. We evaluated total IgG titers, height and width of villi, number of villi in duodenum area, number of enterocytes (Ent), intraepithelial leukocytes (IEL), the Ent/IEL and Ent/lamina propria (LP) ratio of duodenum segments, as well as goblet cells in villosities and leukocytes in muscular layer. Our results show that the mothers immunization as well as the diet during pregnancy did not influence the offspring allergic response. However the mortality was significantly higher in the offspring from allergic mothers (p<0.002). The early exposure to low doses to peanut protein did not interfere in the responses to peanuts as of the weaning. There was no significant difference in the IgG titers in the weaning and after each immunization. These differences just exist between immunized and normal offspring, independently of mothers treatment (p<0.001). The histopathologic analysis confirmed the sorology results and significant differences were observed in these parameters when comparing immunized to normal offspring (p<0.001). We conclude that, in this experimental protocol, the maternal immunization is not decisive in the induction of offsprings food allergy but that IBD rises the probability of complications during the gestational and perinatal periods, as for example the occurrence of abortion (re-absorption in mice), increased mortality and cannibalism of the offspring.

Com intuito de esclarecer a associação do ganho de peso do feto no ato da tosquia, fato este, que diminui a taxa de mortalidade ao nascer, utilizamos vinte e uma ovelhas da raça merino australiano, divididos em 2 grupos com 10 integrantes cada: um tosquiado (OT) aos 70 dias do período gestacional e um segundo mantido como controle (ONT). Destas fêmeas durante o período final de gestação retirou-se a placenta e o feto através do procedimento cirúrgico segundo técnica cesariana convencional. Para efeito comparativo mensurou-se inicialmente as características morfométricas da placenta e dos fetos. Como caracterização da placenta quantificamos o número de placentônios e suas medidas. As amostras de placenta foram fixadas e processadas para microscopia de luz, com inclusão em parafina. A quantificação do glicogênio foi obtida com a mensuração de 5 campos randômicos de cada lâmina produzida seqüencialmente. As análises foram realizadas por efeito comparativo de diferença de coloração por reação histoquímica de P.A.S. Para análise estatística foi utilizado o teste T normal comparativo entre médias. Os resultados macroscópicos indicaram que o tratamento da tosquia não aumentou significativamente os pesos placentários e fetais, e tão pouco as medidas referentes ao placentônio. Nas análises microscópicas, a quantidade média de glicogênio entre as áreas quantificadas no placentônio não apresentaram diferenças significativas, já no fígado na região da tríade portal e no músculo reto houve diferença entre os animais tosquiados e os não tosquiados. Com isto podemos concluir que a tosquia realizada aos 70 dias do período gestacional influência no acumulo de glicogênio no fígado e no músculo reto femural, podendo ser estes os fatos responsáveis pelo aumento do peso dos fetos ao nascer. / In order to clarify the association of weight increase of the fetus in the act of shorn, and remembered that this fact decreases the rate of mortality at birth we tested twenty Merino australian sheep. Animals were divided into 2 groups with 10 members each: shorn (OT) to 70 days of gestational period and a second kept as control (ONT). The placenta and fetus were removed by a surgical procedure of caesarean, according conventional technique. As characterization of the placenta quantification of the placentome numbers and their measures. Samples of placenta were fixed and routinely processed for the light microscopy, with inclusion in paraffin. The quantification of glycogen was obtained with the measurement of 5 fields in each slides produced sequentially. The tests were conducted by comparative effect of a difference in color between the slides and the area covered by the histochemistry PAS reaction For statistical analysis was used the T test (student) and comparison between normal averages. The macroscopic results indicated that the treatment of shorn not significantly increased the fetal and placental weights, and so little measures regarding placentomes. The microscopic analysis, shows that the average between the areas of glycogen quantified in placentome were not different (P <0.05). Already in the liver at the portal triad region and in the rectus femoris muscle were found a significant increase of glycogen deposits (P <0.05). With this results we can conclude that the shorn done at 70 days of gestational period influence on the accumulation of glycogen in the liver and muscle of the fetuses and thus increase the weight of them at birth.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-07-28T13:34:21Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO - Gabriela Calixto - Versão digital.pdf: 1903341 bytes, checksum: 0172917edb1a1f8a1512d8519caed260 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-28T13:34:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO - Gabriela Calixto - Versão digital.pdf: 1903341 bytes, checksum: 0172917edb1a1f8a1512d8519caed260 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / CNPq / Infecções maternas por Schistosoma mansoni modulam a imunidade de descendentes adultos em infecções pós-natais. Avaliou-se separadamente o efeito da amamentação ou gestação neste fenômeno através do grau de fibrose hepática, produção de citocinas Th1, Th2 e regulatórias, frequência de macrófagos produtores de NO e IL-10 e linfócitos T regulatórios em camundongos adultos, descendentes de mães esquistossomóticas, quando submetidos a infecção pós-natal. Para isto, fêmeas Swiss webster foram submetidas a infecção com S. mansoni (20 cercárias), sincronização do estro e acasalamento. Após nascimento, foi realizada a amamentação adotiva, em que descendentes de mães infectadas mamaram nas mães não infectadas (MI) e filhotes de mães não infectadas foram amamentados pelas mães infectadas (AI). Outro grupo de animais nascidos de mães esquistossomóticas permaneceu amamentando nas próprias mães (MIAI). Para grupo CONTROLE utilizou-se animais nascidos e amamentados em mães não infectadas. Descendentes adultos (machos) foram infectados (80 cercárias) e 60 dias pós-infecção, os animais tiveram os esplenócitos cultivados apenas com meio de cultura ou acrescentado de SWAP (12,5 μg/mL) ou ConA (5 μg/ml). Após 24 h e 72 h os sobrenadantes foram dosados para IL-4; IL-5; IL-10; IFN-γ, TGF-β; NO e as células usadas para imunofenotipagem, com anticorpos monoclonais ligados a fluorocromos para CD4+FoxP3, CD16/CD32+NOS2, CD14+IL-10+. O tecido hepático dos animais foi submetido a histomorfometria. Em relação ao Controle, o grupo MI apresentou frequênciaaumentada de CD16/CD32+NOS2+, maior produção de NO, IL-5 e IL-10, com diminuição de IFN- e, em comparação ao grupo MIAI, maior número e tamanho dos granulomas. O grupo AI, em relação ao Controle, obteve maior frequência de CD16/CD32+NOS2+, maiores níveis de TGF-β, menos IL-5, NO e IFN-. Em relação ao MIAI, tamanho maior de granuloma. O grupo MIAI apresentou menor número e tamanho de granulomas com menor produção de IFN- e NO, maior de IL-10 e TGF-β, além de maior frequência de células CD4+/FoxP3+. Não houve diferença nos níveis de células CD14+/IL-10+. Em conclusão, a gestação seguida da amamentação em mães esquistossomóticas proporcionou uma diminuição da reação granulomatosa e, além da produção da IL-10 (dependente da gestação) e de TGF-β (dependente da amamentação), as células T com fenótipo regulatório são requeridas para este fenômeno. / Maternal infections by Schistosoma mansoni modulate adult offspring immunity in postnatal infections. Here, was evaluated separately the effect of breastfeeding and pregnancy in this phenomenon by the degree of hepatic fibrosis, the production of Th1, Th2 and regulatory cytokines, the expression of macrophages producing NO and IL-10, and regulatory T lymphocytes in adult offspring from schistosomotic mothers when subjected to post-natal infection.Swiss webster females were subjected to infection with S. mansoni (20 cercariae), synchronization of estrus and mating. After birth, adoptive breastfeeding was held in which offspring of infected mothers breastfed in uninfected mothers (BIM) and offspring of uninfected mothers were breastfed by infected mothers (SIM). Another group of animals born in schistosomotic mothers breastfeeding remained in their mothers (BSIM). To control group was used animals born and breastfed in uninfected mothers. Male offsprings were infected when adults (80 cercariae) and 60 days post-infection animals splenocytes were cultured with medium alone or added with SWAP (12.5 μg/ml) and ConA (5 μg/ml). After 24 h and 72 h the supernatants were assayed for IL-4; IL-5; IL-10; INF-γ; TGF-β; NO and the cells used for immunophenotyping with monoclonal antibodies bound to fluorochromes for CD4+FoxP3+, CD16/CD32+NOS2+, CD14+IL-10+. The liver tissue were subjected to histomorphometry. Compared to control, the BIM group showed increased frequency of CD16/CD32+NOS2+, increased production of NO, IL-5 and IL-10, a reduction of IFN- and compared to BSIM group, the greater number and size of granulomas. The SIM group compared control, had a higher frequency of CD16/CD32+NOS2+, higher TGF-β levels, less IL-5, NO and IFN-. Regarding BSIM, greater granuloma size. The BSIM group showed smaller number and size of granulomas with lower production of IFN- and NO, increased IL-10 and TGF-β, as well as higher frequency of CD4+/FoxP3+ cells. There was no difference in the levels of CD14+/IL-10+ cells. In conclusion, gestation followed by breastfeeding in schistosomotic mothers provided a reduction in granulomatous reaction, and besides the production of IL-10 (dependent on gestation) and TGF-β (dependent breast feeding) T cells with regulatory phenotype are required to this phenomenon.