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Controle do número de cópias de DNA mitocondrial em células bovinas: um modelo baseado na depleção / Control of mitochondrial DNA copy number in bovine cells: a model based on depletion

Pessôa, Laís Vicari de Figueiredo 10 December 2012 (has links)
As mitocôndrias são organelas semiautonômicas, portadoras do próprio DNA, o mtDNA e responsáveis pela produção de energia celular na forma de ATP, através do processo de fosforilação oxidativa. Atualmente, diferentes tipos de doenças, como distrofias musculares e diversos tipos de câncer, estão associadas à alteração nas moléculas de mtDNA. Na década de 70 um modelo a partir do cultivo celular com brometo de etídio (EtBr) foi desenvolvido com o objetivo de se criar uma linhagem celular depletada de cópias de mtDNA. Desde então os mais variados estudos foram realizados e diversos tipos celulares foram submetidos à depleção do mtDNA. Este projeto teve como objetivos criar um modelo de cultivo celular somático na espécie bovina com depleção de cópias de mtDNA para investigar a resposta da célula a esta condição; avaliar como as células depletadas se comportam na ausência de EtBr, além da utilização destas células no processo de reprogramação celular por indução gênica na tentativa de avaliar o efeito do numero de cópias de mtDNA na indução na espécie bovina. Para tanto foram desenvolvidos três experimentos; Experimento 1- Depleção de mtDNA a partir da utilização do brometo de etídeo; Experimento 2 Repleção do mtDNA; e Experimento 3 Utilização de células bovinas depletadas no sistema de reprogramação nuclear. Todos os experimentos foram avaliados quanto a quantidade de cópias de mtDNA e expressão gênica para os genes Bax, Bcl2 e Tfam. Ademais, os experimentos 1 e 2 foram avaliados quanto a viabilidade celular e apenas o experimento 1 foi avaliado quanto ao crescimento e morfologia celular. O experimento 1 foi avaliado durante o cultivo celular nos períodos D0, D4, D7, D10 e D13, com os grupos experimentais controle (EtBr-C) e tratado com 100 ng/mL de brometo de etídio (EtBr-T), quanto a núero de cópias do mtDNA, o grupo EtBr-T diferiu do grupo EtBr-C (P=0,0459), apresentando menor número de cópias de mtDNA; menor taxa crescimento celular (P<0,05), porém sem alteração na morfologia celular, e na expressão dos genes descritos acima. No experimento da repleção, não houve diferença no número de cópias de mtDNA, entre os grupos EtBr-T e EtBr-R, indicativo de que as células atingiram o estado rho 0 ou que necessitam de mais tempo para ativar a replicação do mtDNA; quanto a viabilidade celular, houve diferença entres os grupos, quanto a expressão gênica, com aumento do Bax e do Bcl-2 para o grupo EtBr-T; O grupo EtBr-R apresentou queda do Bcl-2; para o Tfam houve aumento para o grupo EtBr-T e uma queda para o grupo EtBr-R. Quanto ao experimento 3, não foi possível observar sinais de pluripotência, porém foi detectada uma queda na quantidade de mtDNA dos dois grupos tratados por EtBr (EtBr com e sem Stemcca) e o grupo controle com Stemcca. Para analise de expressão gênica, não houve diferenças entre os grupos em relação ao Tfam. Quanto ao Bax, os grupos controle com Stemcca, controle sem Stemcca e EtBr sem Stemcca não diferiram, e o ultimo também não apresentou diferença quando comparado ao grupo EtBr com Stemcca. Para o Bcl-2, os grupos controle sem Stemcca e EtBr com Stemcca não apresentaram diferenças entre si; o grupo controle sem Stemcca não apresentou diferença quando comparado aos grupos controle com Stemcca e EtBr sem Stemcca. Concluindo, este trabalho no nosso conhecimento, descreve pela primeira vez a produção de células bovinas Rho 0 e discute sobre a relação da função mitocondrial e o processo de reprogramação celular. / Mitochondria are semi autonomic organelles which present their own DNA (mtDNA); are in charge of cell energy production as ATP through oxidative phosphorylation. Currently, different types of diseases like muscular distrofy; different types of cancer are associated to alterations of mtDNA molecules. In the 70\'s a model based on cell culture with ethidium bromide (EtBr) was developed in order to create a cell line depleted of mtDNA. Since then, a variety of studies were realized; diverse cell types were submited to mtDNA depletion. This project had as objective creating a model of somatic cell culture in bovine species with depletion of mtDNA copies, in order to investigate cell response to this condition; to analyze depleted cell behavior in the absence of EtBr, besides using this depleteded cell in a reprogramming cell process by genic induction in order evaluate the effect of the number of mtDNA copies during induction in bovine species. Therefore three experiments were developed: Experiment-1 Depletion of mtDNA using ethidium bromide. Experiment-2 repletion of mtDNA; Experiment-3 usage of depleted bovine cells in reprogramming nuclear system. Cell experiments were analyzed according to the quantity of mtDNA copies; genic expression for Bax, BCl2; Tfam genes. Also, experiments 1; 2 were analyzed on cell viability; only experiment 1 was analyzed regarding cell morphology; growth. Experiment-1 was analyzed during cell culture on periods D0, D4, D7, D10, D13, with control experimental groups (EtBr-C),; treated with 100 ng/mL ethidium bromide (EtBr-T); relating to mtDNA quantification the EtBr-T group differed from EtBr-C (P=0,0459) presenting a smaller number of mtDNA copies; smaller growth rate (P<0,05); although there was no differences on cell morphology as there was also no difference related to genic expression of the previous stated genes. Repletion experiment showed no differences about the number of mtDNA copies between EtBr-T; EtBr-R groups, indicating this cells reached Rho0 state or that they need more time to activate mtDNA replication; about cell viability, there were no differences among the groups; relating to genic expression there was an increase of Bax; BCl-2 for EtBt-T group; EtBr-R group showed decrease of BCl-2; for Tfam there was an increase for EtBr-T group; a decrease for EtBr-R. Relating to Experiment-3 it was impossible to notice signs of pluripotency, but we could see a decrease in the amount of mtDNA in both groups treated with EtBr (EtBr with; without STEMCCA) as in control group with STEMCCA. Genic expression analysis didn\'t show differences related to Tfam. Regarding to BAX, both control groups (with; without STEMCCA); EtBr without STEMCCA didn\'t differ from each other,; the last one also didn\'t show any difference when compared to EtBt with STEMCCA group. For BCl-2, control group without STEMCCA; EtBr with STEMCCA didn\'t show differences among each other; control group without SEMCCA didn\'t show differences when compared to control group with STEMCCA; EtBr without STEMCCA. Concluding, this work, regarding our knowledge, describes for the first time, production of bovine Rho0 cells; debates about the relationship among mitochondrial function; the process of cell reprogramation.
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Controle do número de cópias de DNA mitocondrial em células bovinas: um modelo baseado na depleção / Control of mitochondrial DNA copy number in bovine cells: a model based on depletion

Laís Vicari de Figueiredo Pessôa 10 December 2012 (has links)
As mitocôndrias são organelas semiautonômicas, portadoras do próprio DNA, o mtDNA e responsáveis pela produção de energia celular na forma de ATP, através do processo de fosforilação oxidativa. Atualmente, diferentes tipos de doenças, como distrofias musculares e diversos tipos de câncer, estão associadas à alteração nas moléculas de mtDNA. Na década de 70 um modelo a partir do cultivo celular com brometo de etídio (EtBr) foi desenvolvido com o objetivo de se criar uma linhagem celular depletada de cópias de mtDNA. Desde então os mais variados estudos foram realizados e diversos tipos celulares foram submetidos à depleção do mtDNA. Este projeto teve como objetivos criar um modelo de cultivo celular somático na espécie bovina com depleção de cópias de mtDNA para investigar a resposta da célula a esta condição; avaliar como as células depletadas se comportam na ausência de EtBr, além da utilização destas células no processo de reprogramação celular por indução gênica na tentativa de avaliar o efeito do numero de cópias de mtDNA na indução na espécie bovina. Para tanto foram desenvolvidos três experimentos; Experimento 1- Depleção de mtDNA a partir da utilização do brometo de etídeo; Experimento 2 Repleção do mtDNA; e Experimento 3 Utilização de células bovinas depletadas no sistema de reprogramação nuclear. Todos os experimentos foram avaliados quanto a quantidade de cópias de mtDNA e expressão gênica para os genes Bax, Bcl2 e Tfam. Ademais, os experimentos 1 e 2 foram avaliados quanto a viabilidade celular e apenas o experimento 1 foi avaliado quanto ao crescimento e morfologia celular. O experimento 1 foi avaliado durante o cultivo celular nos períodos D0, D4, D7, D10 e D13, com os grupos experimentais controle (EtBr-C) e tratado com 100 ng/mL de brometo de etídio (EtBr-T), quanto a núero de cópias do mtDNA, o grupo EtBr-T diferiu do grupo EtBr-C (P=0,0459), apresentando menor número de cópias de mtDNA; menor taxa crescimento celular (P<0,05), porém sem alteração na morfologia celular, e na expressão dos genes descritos acima. No experimento da repleção, não houve diferença no número de cópias de mtDNA, entre os grupos EtBr-T e EtBr-R, indicativo de que as células atingiram o estado rho 0 ou que necessitam de mais tempo para ativar a replicação do mtDNA; quanto a viabilidade celular, houve diferença entres os grupos, quanto a expressão gênica, com aumento do Bax e do Bcl-2 para o grupo EtBr-T; O grupo EtBr-R apresentou queda do Bcl-2; para o Tfam houve aumento para o grupo EtBr-T e uma queda para o grupo EtBr-R. Quanto ao experimento 3, não foi possível observar sinais de pluripotência, porém foi detectada uma queda na quantidade de mtDNA dos dois grupos tratados por EtBr (EtBr com e sem Stemcca) e o grupo controle com Stemcca. Para analise de expressão gênica, não houve diferenças entre os grupos em relação ao Tfam. Quanto ao Bax, os grupos controle com Stemcca, controle sem Stemcca e EtBr sem Stemcca não diferiram, e o ultimo também não apresentou diferença quando comparado ao grupo EtBr com Stemcca. Para o Bcl-2, os grupos controle sem Stemcca e EtBr com Stemcca não apresentaram diferenças entre si; o grupo controle sem Stemcca não apresentou diferença quando comparado aos grupos controle com Stemcca e EtBr sem Stemcca. Concluindo, este trabalho no nosso conhecimento, descreve pela primeira vez a produção de células bovinas Rho 0 e discute sobre a relação da função mitocondrial e o processo de reprogramação celular. / Mitochondria are semi autonomic organelles which present their own DNA (mtDNA); are in charge of cell energy production as ATP through oxidative phosphorylation. Currently, different types of diseases like muscular distrofy; different types of cancer are associated to alterations of mtDNA molecules. In the 70\'s a model based on cell culture with ethidium bromide (EtBr) was developed in order to create a cell line depleted of mtDNA. Since then, a variety of studies were realized; diverse cell types were submited to mtDNA depletion. This project had as objective creating a model of somatic cell culture in bovine species with depletion of mtDNA copies, in order to investigate cell response to this condition; to analyze depleted cell behavior in the absence of EtBr, besides using this depleteded cell in a reprogramming cell process by genic induction in order evaluate the effect of the number of mtDNA copies during induction in bovine species. Therefore three experiments were developed: Experiment-1 Depletion of mtDNA using ethidium bromide. Experiment-2 repletion of mtDNA; Experiment-3 usage of depleted bovine cells in reprogramming nuclear system. Cell experiments were analyzed according to the quantity of mtDNA copies; genic expression for Bax, BCl2; Tfam genes. Also, experiments 1; 2 were analyzed on cell viability; only experiment 1 was analyzed regarding cell morphology; growth. Experiment-1 was analyzed during cell culture on periods D0, D4, D7, D10, D13, with control experimental groups (EtBr-C),; treated with 100 ng/mL ethidium bromide (EtBr-T); relating to mtDNA quantification the EtBr-T group differed from EtBr-C (P=0,0459) presenting a smaller number of mtDNA copies; smaller growth rate (P<0,05); although there was no differences on cell morphology as there was also no difference related to genic expression of the previous stated genes. Repletion experiment showed no differences about the number of mtDNA copies between EtBr-T; EtBr-R groups, indicating this cells reached Rho0 state or that they need more time to activate mtDNA replication; about cell viability, there were no differences among the groups; relating to genic expression there was an increase of Bax; BCl-2 for EtBt-T group; EtBr-R group showed decrease of BCl-2; for Tfam there was an increase for EtBr-T group; a decrease for EtBr-R. Relating to Experiment-3 it was impossible to notice signs of pluripotency, but we could see a decrease in the amount of mtDNA in both groups treated with EtBr (EtBr with; without STEMCCA) as in control group with STEMCCA. Genic expression analysis didn\'t show differences related to Tfam. Regarding to BAX, both control groups (with; without STEMCCA); EtBr without STEMCCA didn\'t differ from each other,; the last one also didn\'t show any difference when compared to EtBt with STEMCCA group. For BCl-2, control group without STEMCCA; EtBr with STEMCCA didn\'t show differences among each other; control group without SEMCCA didn\'t show differences when compared to control group with STEMCCA; EtBr without STEMCCA. Concluding, this work, regarding our knowledge, describes for the first time, production of bovine Rho0 cells; debates about the relationship among mitochondrial function; the process of cell reprogramation.
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Biodisponibilidade de ferro em dieta regional de São Paulo / Iron bioavailability in São Paulo regional diet

Colli, Celia 13 April 1988 (has links)
Foi feito um estudo de determinação da biodisponibilidade de ferro em dieta regional de São Paulo, formulada com base no Estudo Nacional de Despesa Familiar (ENDEF). Para tanto, foram utilizados o método de repleção da hemoglobina em ratos anêmicos e o método \"in vitro\" de determinação de ferro dialisável. Paralelamente, avaliou-se as condições de obtenção de anemia em ratos. Concluiu-se que teores de 14 a 19 mg/g de ferro numa ração à base de caseína levam a uma redução de cerca de 40% (de 12,7g/dl para 7g/dl) da concentração de hemoglobina dos animais em períodos de 35 a 40 dias. A biodisponibilidade de ferro, da dieta regional, para ratos anêmicos é de 50% e igual à da caseína com a mesma composição. A porcentagem de ferro dialisável é maior na dieta à base de caseina do que na dieta à base de dieta regional (4,5% e 5,4% respectivamente). Os resultados sugerem uma inadequação dessa dieta quanto ao aporte de ferro. / The hemoglobin repletion technique in anemic rats and an \"in vitro\" method were used to obtain data on iron bioavailability in a regional diet and in a diet based on milk. Previously, optimum condition for obtaining iron deficiency anemia in rats were established. Concentrations of iron from 14 to 19 mg/g in a basal casein diet led to a reduction of about 40% in hemoglobin concentration in a 35 days assay. The percentage of bioavailable iron in both regional and casein diets for anemic rats was similar and averaged 50%. The percentage of dialysable iron in the casein diet was greater than in regional diet (5.4%.compared to 4.5%). The results suggest an inadequaly of the regional diet related to iron.
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Biodisponibilidade de ferro em dieta regional de São Paulo / Iron bioavailability in São Paulo regional diet

Celia Colli 13 April 1988 (has links)
Foi feito um estudo de determinação da biodisponibilidade de ferro em dieta regional de São Paulo, formulada com base no Estudo Nacional de Despesa Familiar (ENDEF). Para tanto, foram utilizados o método de repleção da hemoglobina em ratos anêmicos e o método \"in vitro\" de determinação de ferro dialisável. Paralelamente, avaliou-se as condições de obtenção de anemia em ratos. Concluiu-se que teores de 14 a 19 mg/g de ferro numa ração à base de caseína levam a uma redução de cerca de 40% (de 12,7g/dl para 7g/dl) da concentração de hemoglobina dos animais em períodos de 35 a 40 dias. A biodisponibilidade de ferro, da dieta regional, para ratos anêmicos é de 50% e igual à da caseína com a mesma composição. A porcentagem de ferro dialisável é maior na dieta à base de caseina do que na dieta à base de dieta regional (4,5% e 5,4% respectivamente). Os resultados sugerem uma inadequação dessa dieta quanto ao aporte de ferro. / The hemoglobin repletion technique in anemic rats and an \"in vitro\" method were used to obtain data on iron bioavailability in a regional diet and in a diet based on milk. Previously, optimum condition for obtaining iron deficiency anemia in rats were established. Concentrations of iron from 14 to 19 mg/g in a basal casein diet led to a reduction of about 40% in hemoglobin concentration in a 35 days assay. The percentage of bioavailable iron in both regional and casein diets for anemic rats was similar and averaged 50%. The percentage of dialysable iron in the casein diet was greater than in regional diet (5.4%.compared to 4.5%). The results suggest an inadequaly of the regional diet related to iron.
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Consumo, digestibilidade e dinâmicas de trânsito e degradação da fibra em detergente neutro em bovinos alimentados com forragem tropical de baixa qualidade e compostos nitrogenados / Intake, digestibility and transit and degradation dynamics of neutral detergent fiber in cattle fed low-quality tropical forage and nitrogenous compounds

Lazzarini, Isis 03 July 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:55:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 279216 bytes, checksum: a66e23d65aa8145d75ebfa9db2199407 (MD5) Previous issue date: 2007-07-03 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The objective of this work was to evaluate the effects of supplementation with nitrogenous compounds on intake, digestibility, and transit and degradation dynamics of neutral detergent fiber in cattle fed low-quality tropical forage. Five crossbred heifers, with average live weight of 209 kg and fitted with ruminal cannulae, were used. The animals were fed ad libitum with signal grass (Brachiaria decumbens Stapf.) hay, which had crude protein (CP) content of 5.08% of dry matter (DM). The five treatments were defined according to the increasing level of CP in the diet (0, 3, 5, 7, and 9 percentile points above the CP level of the roughage). The supplement was a mixture of urea, ammonium sulfate, and albumin (4.5:0.5:1.0, respectively). The experiment was carried out according to a 5 x 5 Latin square design, with five experimental periods. The average CP levels in the diets were: 5.28, 8.08, 9.82, 11.87, and 13.63% in DM basis. The intakes of DM, OM, NDF, and NDFom(n) showed a quadratic response according to CP levels in the diet (P<0.10), with maximum responses on 10.83%, 10.78%, 10.43%, and 10.37% of CP, respectively. The digestibility coefficients of OM and NDF showed a linear-response-plateau (LRP) according to CP levels (P<0.10), with plateau beginning (maximum response) on 7.93% and 7.55% of CP, respectively. The average daily concentration of rumen ammonia nitrogen (RAN) was positively related with CP levels (P<0.10). The RAN estimate associated with the maximum DM intake was 15.33 mg/dL. It was observed that intestinal flow of microbial nitrogenous compounds and nitrogen intake become equivalent each other on 7.13% of CP. There was no relationship between CP levels and efficiency of microbial synthesis (P>0.10). The potentially degradable fraction of NDF was linearly increased (P<0.10) according to CP levels in diet until 8.62% CP. From this point, there was stabilization of estimates (47.92% of NDF). On the other hand, the degradation rate of potentially degradable NDF showed a quadratic response (P<0.10) to CP levels, with maximal response on 13.39% of CP. The rumen rate of passage of fibrous particles, the mean retention time in the rumen, and the rumen fill effect of undegradable NDF showed a LRP (P<0.10) according to CP levels in the diet, with plateau beginning on 7.59, 7.68, and 8.00% of CP, respectively. / Objetivou-se avaliar os efeitos de compostos nitrogenados suplementares sobre o consumo, a digestibilidade, a síntese de proteína microbiana e as dinâmicas de trânsito e degradação da fibra em detergente neutro em bovinos alimentados com forragem tropical de baixa qualidade. Foram utilizadas cinco novilhas mestiças Holandês x Zebu, com peso vivo médio inicial de 209 kg, fistuladas no rúmen. A alimentação volumosa basal dos animais foi constituída por feno de capim-braquiária (Brachiaria decumbens Stapf.) (5,08% de PB, com base na MS), fornecido ad libitum. Os cinco tratamentos avaliados foram definidos de acordo com o nível de suplementação protéica (0, 3, 5, 7 e 9 pontos percentuais acima do nível de PB da forragem). Como fonte de compostos nitrogenados empregou-se mistura de uréia, sulfato de amônia e albumina, nas proporções de 4,5:0,5:1,0, respectivamente. O experimento foi constituído de cinco períodos experimentais, segundo delineamento em quadrado latino 5 x 5. Os níveis médios observados de PB nas dietas foram de 5,28, 8,08, 9,82, 11,87 e 13,63%, com base na MS. Verificou-se efeito quadrático (P<0,10) dos níveis de PB na dieta sobre os consumos de MS, MO, FDN e FDNcp (kg/dia), com respostas máximas sobre os níveis de 10,83%, 10,78%, 10,43% e 10,37% de PB, respectivamente. Os coeficientes de digestibilidade da MO e FDN apresentaram relação do tipo linear-response-plateau (LRP) com os níveis de PB na dieta (P<0,10), com início de platô (resposta máxima) em 7,93% e 7,55% de PB, respectivamente. A concentração média diária de nitrogênio amoniacal ruminal apresentou comportamento linear crescente (P<0,10) em função dos níveis de PB da dieta, com valor estimado de 15,33 mg/dL equivalente ao máximo consumo de MS. A avaliação da relação entre consumo de nitrogênio e fluxo intestinal de nitrogênio microbiano indicou que as estimativas destas variáveis tornam-se equivalentes sobre o nível de 7,13% de PB na dieta. Observou-se falta de relação (P>0,10) entre os níveis de PB e a eficiência de síntese de proteína microbiana. Verificou-se elevação linear (P<0,10) da fração potencialmente degradável da FDN até o nível de 8,62% de PB, com platô estimado de 47,92% da FDN. Em contrapartida, verificou-se efeito quadrático (P<0,10) para a taxa de degradação da fração potencialmente degradável da FDN em função dos níveis de PB da dieta, com máxima resposta estimada sobre 13,39% de PB. Em função dos níveis de PB na dieta, o fluxo ruminal de partículas fibrosas, o tempo médio de retenção no rúmen-retículo e o efeito de repleção ruminal atribuído à fração indegradável da FDN apresentaram relação LRP (P<0,10), com pontos críticos para o início do platô localizados sobre os níveis de 7,59%; 7,68% e 8,00% de PB, respectivamente.
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Consumo, digestibilidade e dinâmica ruminal em bovinos alimentados com forragem tropical de baixa qualidade suplementados com compostos nitrogenados / Intake, digestibility, and rumen dynamics in cattle fed low-quality tropical forage and supplemented with nitrogenous compounds

Sampaio, Cláudia Batista 14 March 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:55:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 283092 bytes, checksum: 26a551be6ca2a30c3d887ce7b402e49f (MD5) Previous issue date: 2007-03-14 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The aim of this work was to evaluate the effects of supplementation with nitrogenous compounds on intake, digestibility, nitrogenous compounds balance, efficiency of microbial synthesis, and neutral detergent fiber (NDF) rumen dynamics in cattle fed low-quality forage. Five crossbred heifers, with average live weight of 191 kg and fitted with rumen canullae, were used. The animals were fed ad libitum with signal grass (Brachiaria decumbens Stapf.) hay, which had crude protein (CP) content of 4.86% of dry matter (DM). The five treatments were defined according to the level of CP in the diet (0, 2, 4, 6, and 8 percentile points above the CP level of the roughage). The supplement was a mixture of urea, ammonium sulfate, and albumin (4.5:0.5:1.0, respectively). The experiment was carried out according to a 5 x 5 Latin square design, with five experimental periods. The average CP levels in the diets were: 5.19, 7.11, 8.60, 11.67, and 13.02% in DM basis. The intakes of DM, organic matter (OM), NDF, and NDF corrected for ash and nitrogenous compounds (NDFom(n)) showed a quadratic profile according to CP levels in the diet (P<0.10) with maximum responses on 10.24%, 10.27%, 10.12%, and 10.05% of CP, respectively. The digestibility coefficients of DM and NDFom(n) were not affected by CP levels (P>0.10). The average concentration of rumen ammonia nitrogen (RAN) was linearly increased with CP levels (P<0.10). The RAN estimate associated with the maximum DM intake was 9.64 mg/dL. The microbial nitrogen flow in small intestine was linearly increased with the CP level in the diet (P<0.10). The efficiency of microbial synthesis was not affected by supplementation (P>0.10). The potentially degradable NDF was linearly increased (P<0.10) according to CP levels in diet until 6.97% CP. From this point, there was stabilization of estimates (47.87% of NDF). The degradation rate of potentially degradable NDF has been increased linearly with CP levels in diet (P<0.10). The rumen flow of fibrous particles (L) had a linear response-plateau according to CP levels in the diet (P<0.10). The plateau (maximum) for the estimates has begun on 7.24% of CP. The mean retention time in rumen-reticulum and the rumen fill effect of undegradable NDF was affect by CP levels similarly to (L) (P<0.10), with plateau (minimum) beginning on 6.90 and 6.97% of CP, respectively. / Objetivou-se avaliar os efeitos da suplementação com compostos nitrogenados sobre o consumo, a digestibilidade, o balanço dos compostos nitrogenados, a eficiência de síntese de proteína microbiana e sobre a dinâmica ruminal da fibra em detergente neutro (FDN) em bovinos alimentados com forragem de baixa qualidade. Foram utilizadas cinco novilhas mestiças Holandês x Zebu, com peso vivo médio inicial de 191 kg, fistuladas no rúmen. A alimentação volumosa basal dos animais foi constituída por feno de capim-braquiária (Brachiaria decumbens Stapf.) com 4,86% de proteína bruta (PB) com base na matéria seca (MS), fornecido ad libitum. Os cinco tratamentos avaliados foram definidos de acordo com o nível de suplementação protéica (0, 2, 4, 6 e 8 pontos percentuais acima do nível de PB da forragem). Como fonte de compostos nitrogenados empregou-se mistura de uréia, sulfato de amônia e albumina, nas proporções de 4,5:0,5:1,0, respectivamente. O experimento foi constituído de 5 períodos experimentais, segundo delineamento em quadrado latino 5 x 5. Os níveis médios de PB nas dietas foram de 5,19, 7,11, 8,60, 11,67 e 13,02%, com base na MS. Verificou-se efeito quadrático (P<0,10) dos níveis de PB na dieta sobre os consumos de MS, matéria orgânica (MO), FDN e FDN corrigida para cinzas e proteína (FDNcp) (kg/dia), com respostas máximas sobre os níveis de 10,24%, 10,27%, 10,12% e 10,05% de PB, respectivamente. Os coeficientes de digestibilidade da MS e da FDNcp não foram afetados pelos níveis de PB na dieta (P>0,10). A concentração média diária de nitrogênio amoniacal ruminal apresentou comportamento linear crescente (P<0,10) em função dos níveis de PB na dieta, com valor estimado de 9,64 mg/dL equivalente ao máximo consumo de MS. O fluxo de compostos nitrogenados microbianos no intestino delgado relacionou-se linear e positivamente (P<0,10) com os dos níveis de PB da dieta. Observou-se falta de relação (P>0,10) entre os níveis de PB e a eficiência de síntese de proteína microbiana. Verificou-se elevação linear (P<0,10) da fração potencialmente degradável da FDN até o nível de 6,97% de PB, com platô em 47,87% da FDN. A taxa de degradação da fração potencialmente degradável da FDN elevou-se linearmente (P<0,10) com os níveis de PB da dieta. O fluxo ruminal de partículas fibrosas (L) apresentou relação linear response-plateau (P<0,10), com estabelecimento do platô (máximo) em 7,24% de PB. O tempo médio de retenção no rúmen-retículo e a repleção ruminal da fração indegradável da FDN apresentaram comportamento semelhante a L (P<0,10), com ponto crítico para o início do platô (mínimo) em 6,90 e 6,97% de PB, respectivamente.
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Excesso de peso corporal na adolescência segundo períodos críticos para a gênese da obesidade durante a infância / Excessive body weight during adolescence according to critical periods for the development of obesity in infancy

Nasr, Elizabeth Maria Bismarck 11 May 2012 (has links)
Introdução: Considerando-se a dificuldade e o elevado custo para o tratamento da obesidade, e seu papel como fator de risco para diversas patologias, sua prevenção mostra-se fundamental, por este motivo, a identificação precoce de fatores de risco evitáveis, como a inadequação do estado nutricional em períodos críticos para a gênese da obesidade, representa um interessante campo para investigação científica. Objetivo: Verificar a relação entre o excesso de peso corporal em adolescentes segundo estado nutricional ao nascer e excesso de peso durante o primeiro ano de vida e no período de repleção da adiposidade. Método: Participaram deste estudo alunos de ambos os sexos matriculados nos quintos e sextos anos de Unidades Escolares no Município de São José dos Campos-SP. A coleta de dados ocorreu em três etapas, a primeira consistiu na avaliação nutricional durante a adolescência, considerando-se as medidas de índice de massa corporal (IMC), circunferências abdominal e do braço e soma das pregas cutâneas triciptal e subescapular. Na segunda etapa foram coletadas informações referentes à escolaridade materna, aleitamento materno e estado nutricional ao nascer por meio de questionário respondido pelos pais. As crianças foram classificadas segundo os índices peso ao nascer por idade gestacional, índice ponderal ao nascer e peso ao nascer. Na última etapa foram obtidas informações de peso e estatura durante a infância nos prontuários de atendimento das Unidades Básicas de Saúde (UBS) do Município. Realizou-se análise de regressão logística para verificar associação entre excesso de peso aos 10 anos de idade, considerada variável dependente e, como variáveis independentes, estado nutricional ao nascer, excesso de peso corporal no primeiro ano de vida e no período de repleção da adiposidade (entre os 5 e 7 anos de idade). As análises foram ajustadas para demais variáveis. Resultados: Os estudantes apresentaram média (desvio-padrão) de 131,3 meses (10,99) de idade. Verificou-se elevada correlação entre o peso e comprimento ao nascer informado pelos responsáveis e registrado no prontuário das UBSs (coeficiente de correlação: 0,95 e 0,98, respectivamente). Com relação ao estado nutricional ao nascer, observou-se que o elevado peso ao nascer e o peso ao nascer pequeno para idade gestacional associaram-se ao excesso de peso corporal no início da adolescência. Foi identificado limiar de associação entre excesso de peso corporal no primeiro ano de vida e aos 10 anos de idade. Também foi encontrada associação entre excesso de peso corporal na adolescência e no período de repleção da adiposidade. Conclusão: Os achados mostram consistência com a hipótese de que períodos críticos do crescimento acarretariam em maior predisposição ao excesso de gordura corporal, identificada no presente estudo no início da adolescência / Introduction: Considering that obesity is a major risk for many diseases as well as the difficulties and elevated costs for its treatment, its prevention and the identification of early avoidable health risks, such as nutritional status in critical periods of life, represent important aspects for scientific investigation. Objective: Verify the relationship between excessive body weight during adolescence according to birth nutrition status and excessive body weight during the first year of life and at the period of adiposity rebound. Method: This study was conducted with schoolchildren of both sexes, enrolled in Public Schools in São José dos Campos - SP (SJC-SP). The data was collected in 3 phases, the first consisted of collecting anthropometric information during adolescence, considering body mass index (BMI), arm and abdominal circumferences and the sum of skin fold thickness (triceps and sub scapular). Information about mother´s education, breastfeeding and birth nutritional status was collected in the second phase through a survey which the parents answered. The children were classified according to birth weight for gestational age, ponderal index and birth weight. In the last phase, information about nutritional status during infancy was obtained from medical registers of primary health units in the city. Logistical regression analyses were made to investigate the association between excessive body weight at 10 years of age, considered as dependent variable and, as independent variables, the nutritional status at time of birth, the first year of age and during the period of adiposity rebound (between 5 and 7 years of age). The analyses were adjusted by other variables. Results: The students presented a mean of 131.3 months of age (10.99). An elevated correlation was observed between parents information about birth weight and length and the information registered at the medical documents of primary health units in the city (Correlation coefficient: 0.95 and 0.98, for weight and for length, respectively). An association between elevated birth weight and birth weight small for gestational age and excessive body weight during adolescence was observed. A weak association between excessive body weight during the first year of life and at 10 years of age was identified. It was also verified association in relation to adiposity during the period of adiposity rebound and excessive weight at 10 years of age. Conclusion: These results show consistency in the hypothesis that the critical period for growth development could predispose to future obesity, identified in the present study during early adolescence
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Excesso de peso corporal na adolescência segundo períodos críticos para a gênese da obesidade durante a infância / Excessive body weight during adolescence according to critical periods for the development of obesity in infancy

Elizabeth Maria Bismarck Nasr 11 May 2012 (has links)
Introdução: Considerando-se a dificuldade e o elevado custo para o tratamento da obesidade, e seu papel como fator de risco para diversas patologias, sua prevenção mostra-se fundamental, por este motivo, a identificação precoce de fatores de risco evitáveis, como a inadequação do estado nutricional em períodos críticos para a gênese da obesidade, representa um interessante campo para investigação científica. Objetivo: Verificar a relação entre o excesso de peso corporal em adolescentes segundo estado nutricional ao nascer e excesso de peso durante o primeiro ano de vida e no período de repleção da adiposidade. Método: Participaram deste estudo alunos de ambos os sexos matriculados nos quintos e sextos anos de Unidades Escolares no Município de São José dos Campos-SP. A coleta de dados ocorreu em três etapas, a primeira consistiu na avaliação nutricional durante a adolescência, considerando-se as medidas de índice de massa corporal (IMC), circunferências abdominal e do braço e soma das pregas cutâneas triciptal e subescapular. Na segunda etapa foram coletadas informações referentes à escolaridade materna, aleitamento materno e estado nutricional ao nascer por meio de questionário respondido pelos pais. As crianças foram classificadas segundo os índices peso ao nascer por idade gestacional, índice ponderal ao nascer e peso ao nascer. Na última etapa foram obtidas informações de peso e estatura durante a infância nos prontuários de atendimento das Unidades Básicas de Saúde (UBS) do Município. Realizou-se análise de regressão logística para verificar associação entre excesso de peso aos 10 anos de idade, considerada variável dependente e, como variáveis independentes, estado nutricional ao nascer, excesso de peso corporal no primeiro ano de vida e no período de repleção da adiposidade (entre os 5 e 7 anos de idade). As análises foram ajustadas para demais variáveis. Resultados: Os estudantes apresentaram média (desvio-padrão) de 131,3 meses (10,99) de idade. Verificou-se elevada correlação entre o peso e comprimento ao nascer informado pelos responsáveis e registrado no prontuário das UBSs (coeficiente de correlação: 0,95 e 0,98, respectivamente). Com relação ao estado nutricional ao nascer, observou-se que o elevado peso ao nascer e o peso ao nascer pequeno para idade gestacional associaram-se ao excesso de peso corporal no início da adolescência. Foi identificado limiar de associação entre excesso de peso corporal no primeiro ano de vida e aos 10 anos de idade. Também foi encontrada associação entre excesso de peso corporal na adolescência e no período de repleção da adiposidade. Conclusão: Os achados mostram consistência com a hipótese de que períodos críticos do crescimento acarretariam em maior predisposição ao excesso de gordura corporal, identificada no presente estudo no início da adolescência / Introduction: Considering that obesity is a major risk for many diseases as well as the difficulties and elevated costs for its treatment, its prevention and the identification of early avoidable health risks, such as nutritional status in critical periods of life, represent important aspects for scientific investigation. Objective: Verify the relationship between excessive body weight during adolescence according to birth nutrition status and excessive body weight during the first year of life and at the period of adiposity rebound. Method: This study was conducted with schoolchildren of both sexes, enrolled in Public Schools in São José dos Campos - SP (SJC-SP). The data was collected in 3 phases, the first consisted of collecting anthropometric information during adolescence, considering body mass index (BMI), arm and abdominal circumferences and the sum of skin fold thickness (triceps and sub scapular). Information about mother´s education, breastfeeding and birth nutritional status was collected in the second phase through a survey which the parents answered. The children were classified according to birth weight for gestational age, ponderal index and birth weight. In the last phase, information about nutritional status during infancy was obtained from medical registers of primary health units in the city. Logistical regression analyses were made to investigate the association between excessive body weight at 10 years of age, considered as dependent variable and, as independent variables, the nutritional status at time of birth, the first year of age and during the period of adiposity rebound (between 5 and 7 years of age). The analyses were adjusted by other variables. Results: The students presented a mean of 131.3 months of age (10.99). An elevated correlation was observed between parents information about birth weight and length and the information registered at the medical documents of primary health units in the city (Correlation coefficient: 0.95 and 0.98, for weight and for length, respectively). An association between elevated birth weight and birth weight small for gestational age and excessive body weight during adolescence was observed. A weak association between excessive body weight during the first year of life and at 10 years of age was identified. It was also verified association in relation to adiposity during the period of adiposity rebound and excessive weight at 10 years of age. Conclusion: These results show consistency in the hypothesis that the critical period for growth development could predispose to future obesity, identified in the present study during early adolescence

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