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Avalia??o de diferentes formas de preserva??o e desenvolvimento in situ de fol?culos ovarianos pr?-antrais caprinos

Ferreira, Marcos Antonio Leal 10 September 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarcosALF_TESE_partes_autorizadas.pdf: 135807 bytes, checksum: dc510df8b0af076175b314c7d57e03ba (MD5) Previous issue date: 2010-09-10 / This study evaluated the effect of indole-3-acetic acid (IAA) in the activation of goats preantral follicles (FOPA). Were used four pairs of ovaries of adult mixed breed goats. Each ovarian pair was divided into 23 fragments. One fragment was fixed for histology and other fragment was using to follicular isolation procedure. The remaining fragments were cultured in 1.0 ml of Minimum Essential Medium (MEM) or MEM supplemented with IAA at concentrations of 10, 40, 100, 500 or 1000 ng/mL. The in vitro culture was performed at 39?C in incubator with 5% CO2 for 1, 3 and 5 days. After in vitro culture was evaluated histological integrity and viability of FOPA. The addition of 100 ng/ml of IAA to MEM showed a significant increase in follicles transition in the third day of in vitro culture, characterizing follicular activation. Moreover, this concentration was obtained maintaining the histological integrity of PAF by the fifth day of in vitro culture. The viability test confirmed the results of histology. Thus, we conclude that IAA can promote the activation of goats FOPA / Objetivos: avaliar o efeito do ?cido 3-indol-ac?tico (IAA) na conserva??o de fol?culos pr?-antrais caprinos in situ e isolados; e promover a ativa??o de fol?culos pr?-antrais caprinos em sistemas de cultivo in vitro. M?todo: para alcan?ar os objetivos tra?ados, este projeto foi dividido em duas etapas. Etapa 1- conserva??o de fol?culos pr?-antrais. Nesta etapa foram utilizados 4 pares de ov?rios de cabras adultas sem ra?a definida. De cada par ovariano, um ov?rio foi destinado ao isolamento mec?nico. Uma amostra da suspens?o de fol?culos pr?-antrais isolados obtida foi imediatamente analisada (tratamento 1 controle). O outro ov?rio foi cortado em pequenos fragmentos. Os fol?culos pr?-antrais isolados e os fragmentos ovarianos foram conservados em TCM 199+ ou TCM 199+ + IAA a 4oC, 20oC ou 39oC por 4h, 12h ou 24 h. Ap?s o per?odo de conserva??o, os fragmentos ovarianos foram submetidos ao isolamento folicular. No controle e ap?s o per?odo de conserva??o, a viabilidade folicular foi avaliada com azul de tripan e pela t?cnica fluoresc?ncia. Etapa 2- ativa??o in vitro de fol?culos pr?-antrais. Para esta etapa foram utilizados 4 pares de ov?rios de cabras adultas sem ra?a definida. Cada par ovariano foi dividido em 23 fragmentos. Um deles foi fixado para histologia cl?ssica e outro destinado ao procedimento de isolamento folicular. Os fragmentos restantes foram cultivados em 1,0 mL de Meio Essencial M?nimo (MEM) ou MEM acrescido de IAA nas concentra??es de 10, 40, 100, 500 ou 1000 ng/mL. O cultivo foi realizado a 39?C, em estufa com 5% de CO2, durante 1, 3 e 5 dias. Ap?s o cultivo foi avaliada a integridade histol?gica e a viabilidade dos fol?culos ovarianos pr?-antrais. Resultados: Etapa 1- os fol?culos pr?-antrais conservados isolados a 4oC em TCM 199+ por 4h e em TCM 199+ + IAA por 4h e 12 h; e a 20oC em x TCM 199+ + IAA for 4 h mantiveram a viabilidade folicular semelhante ao controle. Os fol?culos pr?-antrais conservados em pequenos fragmentos de tecido ovariano, preservaram em ambas as solu??es a 4oC por at? 24 h e em TCM 199+ + IAA a 20oC por 4 h, a percentagem de viabilidade similar ao do controle. Etapa 2 - a adi??o de 100 ng/ml de IAA ao MEM possibilitou uma redu??o significativa dos fol?culos primordiais seguida de aumento significativo de fol?culos de transi??o no terceiro dia de cultivo, caracterizando a ativa??o folicular. Al?m disso, nesta concentra??o foi obtida tamb?m a manuten??o da integridade histol?gica dos fol?culos pr?-antrais at? o quinto dia de cultivo. O teste de viabilidade confirmou os resultados da histologia cl?ssica. Conclus?es: este estudo mostrou que o IAA na concentra??o de 100 ng/mL favorece a conserva??o de fol?culos pr?-antrais caprinos in situ ou isolados a 4o e a 20oC e que o IAA pode promove a ativa??o de fol?culos pr?-antrais caprinos cultivados in vitro
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Perfil reprodutivo de homens vasectomizados submetidos ? fertiliza??o in vitro

Sarquiz, Mara 24 March 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-14T13:53:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 423931.pdf: 848269 bytes, checksum: ca6876f67dfa1a1743de1e9a8d88abe1 (MD5) Previous issue date: 2010-03-24 / Introdu??o: Apesar de a vasectomia ser destinada a ser um m?todo definitivo de contracep??o, pelo menos 6% dos homens vasectomizados poder?o requerer a restaura??o de sua fertilidade. At? alguns anos atr?s isto era poss?vel apenas com cirurgia de revers?o. Atualmente s?o realizadas diferentes t?cnicas para recupera??o de espermatozoides, atrav?s de aspira??o no epid?dimo ou test?culo. Objetivos: O objetivo principal deste estudo foi avaliar o perfil de um grupo de homens vasectomizados que buscam a obten??o de gravidez de suas parceiras atrav?s de Fertiliza??o in vitro (FIV) com inje??o intracitoplasm?tica de espermatoz?ides (ICSI), obtidos a partir do epid?dimo ou test?culo. Tamb?m foram avaliadas algumas taxas e rela??es entre par?metros relativos ao ciclo de fertiliza??o. M?todos: Este estudo ? de tipo transversal e retrospectivo e foi realizado na Cl?nica Fertilitat, em Porto Alegre, RS e consiste na revis?o de prontu?rios de pacientes atendidos entre os anos de 1998 e 2009. A amostra foi constitu?da por casais cujos parceiros tinham 40 anos ou mais com vasectomia pr?via, que procuraram a obten??o de gravidez pela t?cnica de ICSI a partir de espermatozoides obtidos do epid?dimo e/ou test?culo, por t?cnicas de PESA, TESA ou TESE. Resultados: O estudo mostrou que fatores como fumo, ?lcool, bem como doen?as do tipo diabetes mellitus, orquite e hipertens?o arterial sist?mica, n?o evidenciaram diferen?as significativas em rela??o ? faixa et?ria dos homens. O tempo de vasectomia mostrou diferen?a significativa nas faixas et?rias estudadas (p< 0,001). A an?lise das taxas de clivagem embrion?ria, implanta??o, gravidez cl?nica e fertiliza??o tamb?m n?o mostraram diferen?as significativas em rela??o ao tipo de t?cnica de obten??o de espermatozoides, mesmo quando associadas (p> 0,05). Conclus?es: Os dados mostraram que as condi??es pr?vias relacionadas a doen?as cr?nicas e a alguns h?bitos de vida, bem como o tempo de vasectomia n?o influenciou nos sucessos dos ciclos. Neste estudo, o tipo de t?cnica para obten??o de espermatozoides n?o mostrou que houve um melhor desfecho quando utilizada a t?cnica de PESA ou associa??es, ficando a escolha desta restrita a crit?rios cl?nicos, cir?rgicos e de progn?stico.

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