Introdução A obesidade está associada a um quadro de inflamação crônica e de baixa intensidade, que predispõe à resistência à ação da insulina e ao desenvolvimento do diabetes mellitus (DM) tipo 2. O aumento da concentração sanguínea de ácidos graxos não esterificados e de citocinas pró-inflamatórias eleva a expressão hepática de quinases (quinase do inibidor do fator nuclear kappa B (IKK)- e a c-jun N-terminal quinase (JNK)) que aumentam a resposta inflamatória e prejudicam a via de sinalização da insulina. A erva-mate (Ilex paraguariensis) contém compostos bioativos que apresentam a capacidade de reduzir a expressão de genes envolvidos na resposta inflamatória. Objetivo Investigar o efeito da ingestão do extrato aquoso de erva-mate (EAEM) sobre a resposta inflamatória e via de sinalização da insulina no fígado de ratos alimentados com ração hiperlipídica (HL). Métodos Ratos Wistar, machos, foram submetidos à dieta controle (CON) (n= 18) ou HL (n= 18) durante 12 semanas. Após esse período, seis animais de cada grupo foram eutanasiados, enquanto o restante dos animais foi distribuído em grupos que receberam, ou não, por gavagem, o EAEM (1 g/kg massa corporal/dia) durante quatro semanas. Após esse período, todos os animais foram eutanasiados e determinou-se as concentrações de glicose, insulina, colesterol total, HDL-colesterol, LDL-colesterol, VLDL-colesterol, triacilgliceróis (TAG), leptina, adiponectina, TNF-, IL-6, inibidor do ativador do plasminogênio-1 (PAI-1) e a MCP-1 e a atividade sérica das enzimas alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST). Foi realizada análise histológica para verificação da infiltração de lipídios. Foi avaliada também a composição corporal dos animais. Para a análise da expressão das proteínas JNK, IKK-, AKT e IRS-1 nas suas formas totais e fosforiladas, e da proteína NF-B, na sua forma fosforilada, um grupo de animais (n = 36) foi submetido ao mesmo protocolo experimental, porém neste foi realizada a infusão de insulina previamente ao momento da eutanásia. Todos os animais foram submetidos ao teste oral de tolerância à glicose (oGTT) e ao teste de tolerância intraperitoneal à insulina (ipITT) na 1 ª, 12 ª e 16 ª semana do protocolo experimental. Resultados Após 12 semanas de protocolo experimental, os animais submetidos à ração HL apresentaram maior consumo alimentar, no entanto, isocalórico em comparação àquele dos animais do grupo CONBL (p < 0,05). O grupo HLBL teve aumento significativo do ganho de peso; do peso coxim adiposo retroperitoneal e do fígado; da glicemia de jejum; da glicemia quando submetidos ao oGTT, em todos os tempos do teste, e ao ipITT no tempo 0, 5, 30 e 40; da concentração sérica de colesterol total, LDL-colesterol, PAI-1 e PCR, em relação ao grupo CONBL (p < 0,05). Apenas 1/3 dos animais HLBL apresentaram degeneração micro e macrogoticular discreta. O consumo da dieta HL diminuiu a fosforilação da AKT em relação aos animais que consumiram a ração CON (p <0,05). No que se refere aos efeitos do EAEM, observou-se que esta intervenção não alterou o consumo alimentar, sendo que os animais submetidos à ração HL, com ou sem a administração do EAEM, ingeriram significantemente menor quantidade em relação aos seus respectivos grupos controles (p < 0,05), todavia, o consumo energético novamente mostrou-se isocalórico (p < 0,05). A administração do EAEM reverteu o quadro de ganho de peso nos grupos que consumiram a ração HL e, ainda, reduziu o percentual de lipídios da carcaça nos animais que consumiram a ração CON, em relação aos respectivos grupos sem a intervenção (p <0,05). O grupo CONEM apresentou aumento do percentual de massa magra e redução da glicemia no ipITT nos tempos após 5 e 10 minutos do início do tese, quando comparado ao seu grupo controle (p <0,05). O EAEM reduziu as concentrações séricas de colesterol total no grupo alimentado com ração HL em relação ao grupo CON (p < 0,05). O grupo HLEM apresentou menor razão da expressão da IKK- fosforilada pela total, fosforilação do NFB, bem como maior razão da expressão da AKT fosforilada pela total em relação ao grupo HL (p < 0,05). Conclusões O consumo de ração HL induziu no fígado perfil pró-inflamatório e quadro de intolerância à glicose Sendo assim, o consumo de ração HL pode ser considerado um fator relevante na etiologia da obesidade e no desenvolvimento das doenças crônicas não-transmissíveis (DCNT), em especial, do DM tipo 2. A intervenção com o EAEM modulou a resposta inflamatória e diminuiu a intolerância à glicose hepática Todos esse fatores, em conjunto, indicam que a erva-mate possa ter um efeito positivo na redução do risco e tratamento das DCNT. / Introduction Obesity is associated with a chronic low-grade inflammation that predisposes to insulin resistance and to the development of type 2 diabetes. The augmentation of plasmatic nonesterified fatty acids and proinflammatory cytokines increases the hepatic expression of some kinases (inhibitor of kappa B kinase (IKK-) and c-jun N-terminal kinase (JNK)) that increases the inflammatory response and impairs the insulin signaling. Yerba mate (Ilex paraguariensis) contains bioactive compounds, which have the ability to reduce the expression of genes involved in inflammatory response. Objective This aim of this project was to investigate the effect of yerba mate aqueous extract (YMAE) intake on the inflammatory response and insulin signaling regulation in the liver of Wistar rats submitted to adjusted high-fat diet (HFD). Methods Male Wistar rats were fed with a control diet (n=18) or a HFD (n=18) for 12 weeks. After this, six animals of each group were euthanized and the rest of the animals were distributed in groups that received, or not, by gavage, YMAE (1g/kg body weight/day) for four weeks. Then, all the animals were euthanized and was determined the glucose, insulin, total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, VLDL-cholesterol, triacylglycerol (TAG), leptin, adiponectin, TNF-, IL-6, C-reactive protein (CPR), plasminogen activator inhibitor (PAI)-1 and MCP-1 concentration, and the alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) plasma activity. Histological analysis was performed for the evaluation of lipid infiltration. The body composition of the animal was also evaluated. To expression evaluation of the JNK, IKK-, NF-B, IRS-1 and AKT, a group of animals (n = 36) underwent the same experimental protocol, however, insulin infusion were done previously to moment of euthanasia. All animal were submitted to the oral glucose tolerance test (oGTT) and the intraperitoneal insulin tolerance test (ipITT) in the first, twelfth and sixteenth weeks of the experimental protocol. Results After 12 weeks of experimental protocol, HLBL group had higher feed intake, however, isocaloric intake when compared to the CONBL group (p < 0,05). The HLBL group had a significant increase of weight gain; retroperitoneal adipose deposit and liver weight; fasting glycaemia; glycaemia when submitted to oGTT in all times of the test and upon ipITT at time 0, 5, 30 and 40; serum total cholesterol, LDLcholesterol; PAI-1 and CRP in relation to CONBL (p < 0.05). Only one third of the HLBL animals presented micro and macrogoticular discrete degeneration. The consumption of HFD decreased the hepatic AKT phosphorylation compared to animals fed with the CON diet (p < 0,05). As regards to the YMAE effects, it was observed that this intervention did not alters food consumption, because the animals submitted to the HFD, with or without YMAE administration, ingested significantly lower quantity in relation to their respective control groups (p < 0.05). However, energy consumption again proved to be isocaloric (p < 0.05). The administration of YMAE reversed the weight gain in the groups fed with HFD and also reduced the percentage of carcass fat in the animals fed with the CON diet in relation to the respective groups without intervention (p < 0.05). The CONEM group presented an increased percentage of lean mass and reduction in blood glucose concentration in the ipITT after 5 and 10 minutes from the beginning of the test when compared to the control group (p < 0.05). The YMAE reduced serum total cholesterol concentration in the group fed with the HFD compared to CON group (p < 0,05). The HLEM group presented lowest ratio of expression of phosphorylated by total IKK-, NFB phosphorylation, as well as the major ratio of the expression of phosphorylated by total AKT than HFD group (p < 0,05). Conclusions HFD intake induced liver proinflammatory profile and glucose intolerance. Thus, HFD intake can be considered a relevant factor in the etiology of obesity and the development of chronic non-comunicable diseases, in particular, the type 2 diabetes. The intervention with YMAE modulates the inflammatory response and decreased glucose intolerance. All these factors together indicate that yerba mate may have a positive effect on risk reduction and treatment of chronic diseases.

Introdução A obesidade está associada a um quadro de inflamação crônica e de baixa intensidade, que predispõe à resistência à ação da insulina e ao desenvolvimento do diabetes mellitus (DM) tipo 2. O aumento da concentração sanguínea de ácidos graxos não esterificados e de citocinas pró-inflamatórias eleva a expressão hepática de quinases (quinase do inibidor do fator nuclear kappa B (IKK)- e a c-jun N-terminal quinase (JNK)) que aumentam a resposta inflamatória e prejudicam a via de sinalização da insulina. A erva-mate (Ilex paraguariensis) contém compostos bioativos que apresentam a capacidade de reduzir a expressão de genes envolvidos na resposta inflamatória. Objetivo Investigar o efeito da ingestão do extrato aquoso de erva-mate (EAEM) sobre a resposta inflamatória e via de sinalização da insulina no fígado de ratos alimentados com ração hiperlipídica (HL). Métodos Ratos Wistar, machos, foram submetidos à dieta controle (CON) (n= 18) ou HL (n= 18) durante 12 semanas. Após esse período, seis animais de cada grupo foram eutanasiados, enquanto o restante dos animais foi distribuído em grupos que receberam, ou não, por gavagem, o EAEM (1 g/kg massa corporal/dia) durante quatro semanas. Após esse período, todos os animais foram eutanasiados e determinou-se as concentrações de glicose, insulina, colesterol total, HDL-colesterol, LDL-colesterol, VLDL-colesterol, triacilgliceróis (TAG), leptina, adiponectina, TNF-, IL-6, inibidor do ativador do plasminogênio-1 (PAI-1) e a MCP-1 e a atividade sérica das enzimas alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST). Foi realizada análise histológica para verificação da infiltração de lipídios. Foi avaliada também a composição corporal dos animais. Para a análise da expressão das proteínas JNK, IKK-, AKT e IRS-1 nas suas formas totais e fosforiladas, e da proteína NF-B, na sua forma fosforilada, um grupo de animais (n = 36) foi submetido ao mesmo protocolo experimental, porém neste foi realizada a infusão de insulina previamente ao momento da eutanásia. Todos os animais foram submetidos ao teste oral de tolerância à glicose (oGTT) e ao teste de tolerância intraperitoneal à insulina (ipITT) na 1 ª, 12 ª e 16 ª semana do protocolo experimental. Resultados Após 12 semanas de protocolo experimental, os animais submetidos à ração HL apresentaram maior consumo alimentar, no entanto, isocalórico em comparação àquele dos animais do grupo CONBL (p < 0,05). O grupo HLBL teve aumento significativo do ganho de peso; do peso coxim adiposo retroperitoneal e do fígado; da glicemia de jejum; da glicemia quando submetidos ao oGTT, em todos os tempos do teste, e ao ipITT no tempo 0, 5, 30 e 40; da concentração sérica de colesterol total, LDL-colesterol, PAI-1 e PCR, em relação ao grupo CONBL (p < 0,05). Apenas 1/3 dos animais HLBL apresentaram degeneração micro e macrogoticular discreta. O consumo da dieta HL diminuiu a fosforilação da AKT em relação aos animais que consumiram a ração CON (p <0,05). No que se refere aos efeitos do EAEM, observou-se que esta intervenção não alterou o consumo alimentar, sendo que os animais submetidos à ração HL, com ou sem a administração do EAEM, ingeriram significantemente menor quantidade em relação aos seus respectivos grupos controles (p < 0,05), todavia, o consumo energético novamente mostrou-se isocalórico (p < 0,05). A administração do EAEM reverteu o quadro de ganho de peso nos grupos que consumiram a ração HL e, ainda, reduziu o percentual de lipídios da carcaça nos animais que consumiram a ração CON, em relação aos respectivos grupos sem a intervenção (p <0,05). O grupo CONEM apresentou aumento do percentual de massa magra e redução da glicemia no ipITT nos tempos após 5 e 10 minutos do início do tese, quando comparado ao seu grupo controle (p <0,05). O EAEM reduziu as concentrações séricas de colesterol total no grupo alimentado com ração HL em relação ao grupo CON (p < 0,05). O grupo HLEM apresentou menor razão da expressão da IKK- fosforilada pela total, fosforilação do NFB, bem como maior razão da expressão da AKT fosforilada pela total em relação ao grupo HL (p < 0,05). Conclusões O consumo de ração HL induziu no fígado perfil pró-inflamatório e quadro de intolerância à glicose Sendo assim, o consumo de ração HL pode ser considerado um fator relevante na etiologia da obesidade e no desenvolvimento das doenças crônicas não-transmissíveis (DCNT), em especial, do DM tipo 2. A intervenção com o EAEM modulou a resposta inflamatória e diminuiu a intolerância à glicose hepática Todos esse fatores, em conjunto, indicam que a erva-mate possa ter um efeito positivo na redução do risco e tratamento das DCNT. / Introduction Obesity is associated with a chronic low-grade inflammation that predisposes to insulin resistance and to the development of type 2 diabetes. The augmentation of plasmatic nonesterified fatty acids and proinflammatory cytokines increases the hepatic expression of some kinases (inhibitor of kappa B kinase (IKK-) and c-jun N-terminal kinase (JNK)) that increases the inflammatory response and impairs the insulin signaling. Yerba mate (Ilex paraguariensis) contains bioactive compounds, which have the ability to reduce the expression of genes involved in inflammatory response. Objective This aim of this project was to investigate the effect of yerba mate aqueous extract (YMAE) intake on the inflammatory response and insulin signaling regulation in the liver of Wistar rats submitted to adjusted high-fat diet (HFD). Methods Male Wistar rats were fed with a control diet (n=18) or a HFD (n=18) for 12 weeks. After this, six animals of each group were euthanized and the rest of the animals were distributed in groups that received, or not, by gavage, YMAE (1g/kg body weight/day) for four weeks. Then, all the animals were euthanized and was determined the glucose, insulin, total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, VLDL-cholesterol, triacylglycerol (TAG), leptin, adiponectin, TNF-, IL-6, C-reactive protein (CPR), plasminogen activator inhibitor (PAI)-1 and MCP-1 concentration, and the alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) plasma activity. Histological analysis was performed for the evaluation of lipid infiltration. The body composition of the animal was also evaluated. To expression evaluation of the JNK, IKK-, NF-B, IRS-1 and AKT, a group of animals (n = 36) underwent the same experimental protocol, however, insulin infusion were done previously to moment of euthanasia. All animal were submitted to the oral glucose tolerance test (oGTT) and the intraperitoneal insulin tolerance test (ipITT) in the first, twelfth and sixteenth weeks of the experimental protocol. Results After 12 weeks of experimental protocol, HLBL group had higher feed intake, however, isocaloric intake when compared to the CONBL group (p < 0,05). The HLBL group had a significant increase of weight gain; retroperitoneal adipose deposit and liver weight; fasting glycaemia; glycaemia when submitted to oGTT in all times of the test and upon ipITT at time 0, 5, 30 and 40; serum total cholesterol, LDLcholesterol; PAI-1 and CRP in relation to CONBL (p < 0.05). Only one third of the HLBL animals presented micro and macrogoticular discrete degeneration. The consumption of HFD decreased the hepatic AKT phosphorylation compared to animals fed with the CON diet (p < 0,05). As regards to the YMAE effects, it was observed that this intervention did not alters food consumption, because the animals submitted to the HFD, with or without YMAE administration, ingested significantly lower quantity in relation to their respective control groups (p < 0.05). However, energy consumption again proved to be isocaloric (p < 0.05). The administration of YMAE reversed the weight gain in the groups fed with HFD and also reduced the percentage of carcass fat in the animals fed with the CON diet in relation to the respective groups without intervention (p < 0.05). The CONEM group presented an increased percentage of lean mass and reduction in blood glucose concentration in the ipITT after 5 and 10 minutes from the beginning of the test when compared to the control group (p < 0.05). The YMAE reduced serum total cholesterol concentration in the group fed with the HFD compared to CON group (p < 0,05). The HLEM group presented lowest ratio of expression of phosphorylated by total IKK-, NFB phosphorylation, as well as the major ratio of the expression of phosphorylated by total AKT than HFD group (p < 0,05). Conclusions HFD intake induced liver proinflammatory profile and glucose intolerance. Thus, HFD intake can be considered a relevant factor in the etiology of obesity and the development of chronic non-comunicable diseases, in particular, the type 2 diabetes. The intervention with YMAE modulates the inflammatory response and decreased glucose intolerance. All these factors together indicate that yerba mate may have a positive effect on risk reduction and treatment of chronic diseases.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Melatonin is hormone regulated by the light/dark cycle. It is considered to be a signaling pathway of the circadian clock located in the hypothalamic suprachiasmatic nucleus. Melatonin also regulates functions involving the energetic and behavioral metabolism of mammals. However, the melatonin synthesis can suffer influence from other hormones, like insulin and other glucocorticoids, in pathological conditions and stress. Studies have shown that glucocorticoids seem to modulate clock genes in peripheral tissues leading to metabolic diseases. The objective of the present study was to evaluate the functionality of the pineal gland and clock genes modulation in rats treated chronically with dexamethasone. Male Wistar rats (200-250g) were divided in to two groups: Control (CON) and Dexamethasone-treated (DEX). Animals from DEX group had 2mg/kg body weigh of dexamethasone administered intraperitoneally for 10 consecutive days and control animals received equal volume of saline solution also intraperitoneally. The circadian profile of blood glucose was evaluated and presented increased points of hyperglycemia during the night (p<0,05). The animals were sacrificed at each time point and had their pineal gland and plasma collected. The obtained data demonstrate a significant hyperinsulinemia in DEX animals (p<0,05). The findings show a reduction in the melationin content (p<0,05) associated with a decrease in the enzymatic activity of AANAT (p<0,05). Also, in these points, DEX animals presented a reduction in the glucose transporter (Glut1) in the pineal gland and insulin receptor (Insr) (p<0,05). The levels of mRNA of the clock genes Bmal1, Per1, Per2, Cry1, Cry2 and Rev-erbα in the isolated pineal glands demonstrated an increase in the gene expression (p<0,05). These results suggest that chronic treatment with dexamethasone is capable of modulating melatonin synthesis, as well as the clock genes. This evidence also suggests the possible presence of a responsive element to the functional glucocorticoid in the promoter region of these genes in the pineal gland. / A melatonina é um hormônio regulado pelo ciclo claro/escuro. Sendo considerado um sinal de saída do relógio circadiano localizado no núcleo supraquiasmático do hipotálamo. A melatonina regula funções envolvendo o metabolismo energético e comportamental em mamíferos. A síntese de melatonina pode ser influenciada por outros hormônios, a exemplo da insulina e dos glicocorticoides em condições patológicas e estresse. Estudos têm demonstrado que os glicocorticoides parecem modular os genes relógio em tecido periférico ocasionando doenças metabólicas. O presente estudo teve como objetivo avaliar a funcionalidade da glândula pineal e a modulação dos genes relógio em ratos tratados cronicamente com dexametasona. Ratos Wistar (200-250g) foram divididos em 2 grupos: Controle (CON) e Tratados com dexametasona (DEX). Os animais DEX receberam 2mg/kg de peso de dexametasona intraperitonial durante 10 dias consecutivos e os animais CON receberam o volume correspondente de solução salina intraperitonialmente. Os animais de ambos os grupos tiveram o perfil de glicose avaliado e apresentaram pontos de hiperglicemia acentuada durante a noite (p<0,05). Os animais de ambos os grupos foram sacrificados nos ZT17 ao ZT22 e tiveram a glândula pineal e o plasma coletados. Os dados obtidos mostram um quadro de hiperinsulinemia nos animais DEX (p<0,05). Os animais do grupo DEX apresentaram uma redução no conteúdo de melatonina total (p<0,05) associada à diminuição da atividade enzimática da AANAT (p<0,05). Nesses mesmos pontos os animais DEX apresentaram uma redução do transportador de glicose (Glut1) na glândula pineal e receptor de insulina (Insr) (p<0,05). Os níveis de RNAm dos genes do relógio Bmal1, Per1, Per2, Cry1, Cry2 e Rev-erbα em pineais isoladas apresentaram aumento da expressão gênica (p<0,05). Estes resultados sugerem que o tratamento crônico com dexametasona é capaz de modular a síntese de melatonina, bem com também os genes relógio, estas evidências sugerem a possível presença de um elemento responsivo ao glicocorticoide funcional na região promotora desses genes na glândula pineal.