Instituto Dr. Josà Frota / A meta da presente pesquisa foi apresentar tÃcnicas cirÃrgicas associadas ou isoladas, na tentativa de, utilizando cirurgias menos traumÃticas e mais eficientes, proporcionar resultados menos estigmatizantes e deformantes para dar aos portadores da neurofibromatose tipo 1 (NF1) uma qualidade de vida mais digna e melhor integraÃÃo social. Estudou-se neste trabalho 30 pacientes portadores de NF1 por um perÃodo de seis anos, durante os quais se comparou a eficiÃncia de diversas tÃcnicas cirÃrgicas em lesÃes localizadas em vÃrias regiÃes anatÃmicas do corpo e cujas ressecÃÃes atingiram dimensÃes que variaram entre 3 e 51cm. A utilizaÃÃo do tratamento cirÃrgico mostrou ser a maneira mais simples, eficaz e rÃpida para a soluÃÃo de afecÃÃo tÃo traumÃtica para os pacientes. Mesmo quando da utilizaÃÃo de retalhos cutÃneos com comprometimento residual da pele o seguimento operatÃrio mostrou que a doenÃa nÃo evoluiu e nÃo houve qualquer sinal de malignizaÃÃo. Das opÃÃes mais empregadas foram os retalhos cutÃneos loco-regionais, as que melhores resultados proporcionaram, quer do ponto de vista funcional como estÃtico, e os que causaram menor nÃmero de seqÃelas. Vinte e um pacientes se beneficiaram de excisÃes e reparaÃÃes com retalhos e os demais com procedimentos mais simples, o que lhes permitiu uma melhor qualidade de vida e melhor aceitaÃÃo social. Os retalhos cutÃneos loco-regionais foram aqueles que possibilitaram o reparo das maiores Ãreas cruentas e a ressecÃÃo dos mais volumosos tumores, com uma mÃdia de 16,4 x 8,1 cm e um peso mÃdio de 373 g. O âSâ itÃlico com uma mÃdia de 8,5 x 5,5 cm e 135 g e a âZâ plÃstia com 8,5 x 4,8 cm e 82,8 g mostraram-se eficazes para a reparaÃÃo de lesÃes de mÃdio porte onde aparecem como uma das opÃÃes para reparaÃÃo imediata das ressecÃÃes da NF1.ExcisÃo e Sutura com 4,9 x 2,8 cm e 33,8 g e pequenos enxertos de pele estÃo indicados nas lesÃes de dimensÃes menores e de localizaÃÃes especiais, como a face e nariz. NÃo foram detectadas malignizaÃÃes nas 52 peÃas encaminhadas ao laboratÃrio de histopatologia.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O efeito protetor do Ãleo-resina de copaÃba (Copaifera langsdorffii Desf.) foi avaliado, utilizando um modelo experimental de isquemia-reperfusÃo de retalho cutÃneo randomizado no dorso de ratos. Setenta e dois ratos, Wistar, jovens, com peso mÃdio de 216,8g, foram distribuÃdos ao acaso, em quatro grupos (GCS - controle salina, GCV â controle veÃculo, GT200 â Ãleo-resina de copaÃba a 200mg/kg, GT400 â Ãleo-resina de copaÃba a 400mg/kg), numericamente iguais e posteriormente redistribuÃdos em trÃs subgrupos (T-0, T-1 e T-2), com seis animais cada. Todos os procedimentos cirÃrgicos foram realizados sob os efeitos de anestesia geral, utilizando-se de uma associaÃÃo do cloridrato de ketamina (90 mg/kg) com xilazina (10mg/kg), administrados por via intra-peritoneal. Os animais receberam as drogas utilizadas nesse estudo por via oral (gavagem), 24, 12 e 2 horas antes do experimento , no tempo T-1, uma dose pÃs-operatÃria e no tempo T-2, seis doses pÃs-operatÃrias. Foram determinadas as concentraÃÃes de substÃncias reativas ao Ãcido tiobarbitÃrico (TBARS) e glutationa reduzida (GSH) no plasma e tecido; bem como, mieloperoxidase (MPO) no tecido. Para determinaÃÃo do padrÃo de distribuiÃÃo das amostras utilizou-se o teste de Kolmorogov-Smirnov. As comparaÃÃes intragrupais e intergrupais foram feitas utilizando-se os testes de ANOVA/Tukey e Kruskal-Wallis/Dunn. Valores iguais ou menores que p<0,05 foram considerados significantes. O Ãleo-resina de copaÃba nas concentraÃÃes de 200mg e 400mg reduziram significantemente as concentraÃÃes de TBARS nos tecidos no tempo T24, nÃo ocorrendo reduÃÃo no plasma. Os nÃveis de TBARS estavam significantemente elevados nos ratos do grupo GCS comparados aos animais do grupo GCV no tempo de isquemia e durante a reperfusÃo, demonstrando o dano adicional decorrente do afluxo de sangue oxigenado (reperfusÃo) ao tecido isquÃmico. As concentraÃÃes de GSH diminuÃram nos ratos tratados com soluÃÃo salina e aumentaram significantemente no plasma de animais tratados com Tween 80 nos tempos T24 e T48, refletindo uma possÃvel aÃÃo anti-oxidante discreta dessa droga. Houve aumento das concentraÃÃes de GSH no plasma, quando administrado Ãleo-resina de copaÃba em 200mg e 400mg, e no tecido, Ãleo-resina de copaÃba a 400mg, evidenciando aÃÃo anti-oxidante e que, no tecido o efeito à dose-dependente. As concentraÃÃes de MPO aumentaram no grupo GCV comparado ao grupo GCS, sugerindo uma atividade prÃ-inflamatÃria do Tween 80. A MPO diminuiu quando foi utilizado o Ãleo-resina de copaÃba nas concentraÃÃes de 200mg e 400mg, comparados aos grupos GCS e GCV,evidenciando aÃÃo anti-inflamatÃria da mesma. Conclui-se que Ãleo-resina de copaÃba exerce discreta atividade anti-lipoperoxidativa e intensa aÃÃo antioxidante durante a isquemia e reperfusÃo de retalho cutÃneo randomizado em ratos / The protective effect of Copaifera langsdorfii (Desf.) resin-oil was evaluated on an experimental model of random skin flap on ratâs dorsum. Seventy-two young Wistar rats, average weight 216,8g, were randomized in 4 equal (n=18) groups (GCS â Saline control, GCV â vehicle control, GT200 - Test 1 and GT400 â Test 2). Each group was redistributed in 3 subgroups, n=6 animals). All surgical procedures were performed under general anesthesia (ketamine 90 mg+Xylasine 10mg/kg, i.p.) Resin-oil and control drugs (saline and Tween 80) were administered by gavage 24, 12 and 2 hours prior to the beginning of the experiment followed by daily doses for the next 7 days. Tissue and blood samples were collected at the end of the surgical procedure (T-0) and 24 (T24)/168 (T168) hours later. Laboratory analyses included plasma and tissue levels of tiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and reduced glutathione (GSH) and tissue levels of myeloperoxidase (MPO). The Kolmorogov-Smirnov test was used for verifying samples homogeneity and comparisons were made using ANOVA/Tukey and Kruskal-Wallis/Dunn tests. P values <0.05 were considered significant. Tissue TBARS levels were significantly increased in T24 time point in rats treated with 200/400mg of resin-oil. Tissue TBARS levels increased and GSH levels decreased significantly in GCS compared with GCV during both ischemia and reperfusion. These findings suggests a possible pro-peroxidative and pro-oxidant effect of the vehicle (Tween 80). Plasma GSH levels increased significantly in T200 and T400 resin-oil treated rats and only in T400 rats tissues. These results point to a dose-dependent anti-oxidative effect of the resin-oil in tissues. MPO levels increased in GCV compared with saline control. This may represent a pro-inflammatory activity of the vehicle used for resin-oil dilution. Anti-inflammatory properties of copaÃba oil were demonstrated as MPO concentrations decreased significantly in resin-oil treated rats compared with GCS and GCV. It is concluded that copaiba resin-oil exerts a discrete anti-lipoperoxidative activity and an intense anti-oxidative activity during ischemia/reperfusion of ratâs dorsum random skin flap

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A lesÃo de reperfusÃo (LR) ocorre em diversos orgÃos e tecidos durante o restabelecimento do fluxo sangÃÃneo apÃs episÃdios de isquemia prolongada. Em diversas Ãreas clÃnicas esta lesÃo à temida pelas complicaÃÃes decorrentes da demora no restabelecimento do fluxo vascular. Nos transplantes de ÃrgÃos, nos retalhos microcirÃrgicos e nas cirurgias de revascularizaÃÃo miocÃrdica, a LR, dependendo de sua intensidade, pode prejudicar o benefÃcio destes procedimentos. Dentre as estratÃgias propostas para atenuar a LR, o prÃ-condicionamento isquÃmico (PCI) consiste na induÃÃo de pequenos perÃodos de isquemia seguidos de reperfusÃo, realizados antes da isquemia prolongada. Este estudo foi avaliar o efeito do PCI da pata posterior na sobrevida de retalhos cutÃneos randomizados em dorso (RCRD) e o efeito antiinflamatÃrio local e sistÃmico deste fenÃmeno. Para tanto o PCI foi induzido atravÃs da isquemia da pata posterior de ratos Wistar por 10 minutos seguida de 30 minutos de reperfusÃo. Diferentes grupos de ratos foram submetidos à confecÃÃo de RCRD, à induÃÃo de edema de pata (EP), ipsilateral (IPS) e contralateral (CON), por carragenina (Cg) ou dextran (Dx), cistite hemorrÃgica (CH) por ifosfamida (IFO) ou lesÃo gÃstrica (LG) por indometacina (INDO). Os grupos controles (C) receberam o mesmo tratamento, porÃm sem PCI. A Ãrea de sobrevida (AS) do RCRD foi calculada pela superfÃcie de tecido viÃvel (cm2), o EP atravÃs da variaÃÃo do volume das patas (ml), o edema vesical (EV) pelo peso Ãmido da bexiga (mg), o aumento da permeabilidade vascular (APV) pelo extravasamento de azul de Evans (&#61549;g), o Ãndice de lesÃo gÃstrica (ILG) pela soma das extensÃes das lesÃes encontradas na mucosa (mm), e a infiltraÃÃo neutrofÃlica (IN) pela atividade da mieloperoxidade (MPO) (U/mg). O PCI foi capaz de aumentar a AS do RCRD (C=4,16Â0,29 e PCI=6,42Â0,14, p<0,01). O EP e o APV induzidos por Cg (100&#61549;g, sc) ou Dx (200&#61549;g, sc), tanto na pata IPS quanto CON, foram reduzidos pelo PCI (EP IPS Cg â C=0,63+0,05 e PCI=0,26+0,02; APV IPS Cg â C=10,03+0,68 e PCI=5,82+1,18; EP IPS Dx â C=1,08+0,11 e PCI=0,54+0,06; APV IPS Dx â C= 24,38+3,02 e PCI=13,51+1,70; EP CON Cg â C=0,63+0,10 e PCI=0,30+0,05; APV CON Cg â C=16,16+2,18 e PCI=9,19+1,12; EP CON Dx â C=0,95+0,10 e PCI=0,49+0,10; APV CON Dx â C=24,09+2,97 e PCI=13,15+1,62; p<0,01). O PCI inibiu o EV e o APV da CH induzida por IFO (200mg/kg, ip) (EV â C=206,6+10,95 e PCI=126+5,66; APV â C=38,55+2,19 e PCI=17,74+2,18; p<0,001). Tanto a LG quanto a IN induzidas por INDO (20mg/kg, vo) foram bloqueadas pelo PCI (ILG â C=20,54+2,05 e PCI=2,00+0,93; IN â C=9,67+2,05 e PCI=3,49+0,83; p<0,001). Os resultados indicam que o PCI aumenta a sobrevida de RCRD e apresenta um efeito antiinflamatÃrio local e sistÃmico em modelos de inflamaÃÃo aguda. O esclarecimento do mecanismo atravÃs do qual o PCI atenua a lesÃo inflamatÃria poderà trazer importantes contribuiÃÃes em situaÃÃes clÃnicas onde esta lesÃo constitui um fator complicador, podendo propiciar o desenvolvimento de novas abordagens profilÃticas e/ou terapÃuticas. / The reperfusion injury (RI) occurs when there is delay in restoring blood flow to organs and tissues. Among the strategies proposed to attenuate the RI is the ischemic preconditioning (IPC), which consists of induction of brief ischemic periods followed by reperfusion performed before the sustained ischemic insult. In the first part, this study aimed to evaluate the role of nitric oxide (NO), cyclic guanosine monophosphate (cGMP) and ATP-sensitive potassium channels (K+ATP) in the inhibitory effect of hind limb IPC on the mice peritoneal cavity neutrophil migration (NM). In the second part, the objective was to evaluate the potential systemic antinociceptive effect of IPC in mechanical plantar hypernociception test (MPH; Von Frey) in rats and to evaluate the involvement of NO, cGMP and K+ATP channels in this event. In the first part, the IPC was induced by hind limb ischemia for 10 min followed by 30 min of reperfusion in wild and knockout mice to inducible NO synthase (iNOS -/-). The leukocyte rolling (LR), leukocyte adhesion (LA) and NM were induced by ip administration of Carrageenan (Cg, 500 &#61549;g/cavity) and results expressed in number of leukocytes/min, number of adherent leukocytes/100 &#61549;m2 cells and number of neutrophils x 106/cavity, respectively. Different groups of animals were treated with saline (SAL), Aminoguanidine (AG, sc, 100mg/kg), ODQ (ip, 8 &#61549;mol/kg) or Glibenclamide (GBC, sc, 20 mg/kg) 30 min before IPC induction. Controls received the same treatment, but without IPC. In the second part, the IPC was induced by hind limb ischemia for 10 min followed by 30 min of reperfusion in male Wistar rats (180-200g). Cg (300 &#61549;g, intraplantar) or Prostaglandin E2 (PGE2 - 400 ng, intraplantar) were used as hypernociceptive stimulus on left paw immediately after induction of IPC in contralateral paw. Different groups of animals were treated 30 min before induction of IPC with AG (100 &#61549;g/kg, intraplantar), LNMMA (50 &#61549;g, intraplantar), ODQ (8 &#61549;g, intraplantar) or GBC (160 &#61549;g, intraplantar). Controls received the same treatments, but without IPC. The quantification of MPH was performed through subtraction strength/pressure (g) required to cause withdrawal of paw in contact with an apparatus of eletronic von Frey mensuread before hypernociceptive stimulus, by measure obtained 3h after administration of Cg or PGE2. The LR, LA and NM induced by Cg in the peritoneal cavity were significantly (p <0,01) inhibited by hind limb IPC of wild animals (LR= 75.94%, LA= 56.51%, NM= 79.01 %), but these effects were not observed in animals iNOS -/-. The treatment of wild animals with AG and ODQ, but not with GBC, abrogated the inhibitory effect of IPC on NM induced by Cg. Treatment of animals with AG, GBC or ODQ did not significantly alter the NM induced by Cg in the peritoneal cavity. We also observed that IPC did not alter the TNF-&#61537;, IL1-&#61538; and CXCL1 chemokine levels induced by Cg in the peritoneal cavity. The mechanical hypernociception induced by Cg or PGE2 in left hind paw was significantly reduced (p <0,01) when IPC was performed in the right paw (55% and 68%). The treatment of animals with AG, LNMMA, ODQ or GBC, before IPC, abrogated the antinociceptive effect of IPC. Treatment of animals with AG, LNMMA, ODQ or GBC did not significantly alter the hypernociception induced by noxious stimulation. Our results show that IPC has an inhibitory effect on remote NM, with NO an important mediator involved in this process, probably through the cGMP pathway. This inhibitory effect of IPC does not depend on the opening of K+ATP channels, or inhibition of synthesis and/or release of pro-inflammatory cytokines. The elucidation of the mechanism by which IPC inhibits the NM may make important contributions to clinical situations where neutrophil infiltration is a complicating factor. The IPC also has a potent inhibitory effect on inflammatory pain, with NO seems to be one important mediator involved in this protective effect of IPC, acting through the cGMP/K+ATP channel pathway. This is the first demonstration described in the literature of systemic antinociceptive effect of IPC, and the elucidation of the mechanisms involved in this process is fundamental for pain management induced by several inflammatory stimuli.