Reproducimos a nivel experimental, utilizando cerdos como animal de experimentación, un trasplante con donante a corazón parado. Se extraen los riñones del donante a corazón parado, se conservan durante 6h-8h en isquemia fría y se practica el implante. El animal se mantiene vivo durante 5 días, al término del cual se procede a la necropsia del animal para analizar el estado del injerto. El animal se mantiene inmunodeprimido durante todo el periodo.Hemos realizado 40 trasplantes renales divididos en grupos de 10 trasplantes:Grupo 0: grupo control. Corazón latiente.Grupo 1: riñones sometidos a 40 minutos de isquemia calienteGrupo 2: riñones sometidos a 40 minutos de isquemia caliente y recirculación extracorpórea durante 30 minutos.Grupo 3: riñones sometidos a 90 minutos de isquemia caliente y recirculación extracorpórea durante 30 minutos.Se han realizado 5 biopsias renales a lo largo del experimento en cada animal determinando el nivel tisular de antioxidantes (superóxido dismutasa, glutation reductasa y glutation peroxidasa)mediante técnica de espectrofotometría Oxis® adaptados al autoanalizador de Cobas Mira (Roche®)y la carga energética, según la fórmula de Atkinson, mediante HPLC.La viabilidad del injerto se ha determinado por una biopsia renal al 5º día (ausencia de necrosis cortical)Por primera vez en la literatura médica se realiza un estudio sobre el nivel tisular de antioxidantes en un trasplante renal de forma evolutiva, añadiendo el efecto de la recirculación y con tiempos diferentes de isquemia caliente prolongados. Conclusiones:1-Viabilidad: 100% en el grupo 0 y en el 2, 66% en el grupo 1,60% en el grupo 32-Patrón de actuación de los antioxidantes en las diferentes fases del trasplante: la SOD disminuye la concentración en las fases de isquemia caliente y fría y aumenta con la recirculación y con la reperfusión. La glutation reductasa aumenta con la isquemia caliente y reperfusión y disminuye con la recirculación y la isquemia fría. La glutation peroxidasa disminuye con la isquemia caliente y recirculación para aumentar con la isquemia fría y con la reperfusión del injerto.3-Utilidad de los antioxidantes y de la carga energética en predecir la viabilidad del injerto. La carga energética puede predecir la viabilidad y los tres antioxidantes también dependiendo de los diferentes momentos del experimento y del grupo.4- Efecto de la recirculación extracorpórea normotérmica durante 30 minutos sobre el nivel de antioxidantes: mejora la concentración de SOD de forma significativa dejando al riñón con mayor concentración de dicha sustancia al momento del implante.5- Efecto del tiempo de isquemia (40 ó 90 minutos) sobre el nivel tisular de antioxidantes: determinar la glutation reductasa durante la fase de recirculación permite observar mayor concentración de este antioxidante en el grupo de 40 minutos de isquemia caliente y muy baja concentración en el grupo de 90 minutos (p<0,05).

Se han empleado multitud de modelos experimentales para estudiar la lesión por isquemia/reperfusión, tanto in vivo como in vitro. De los modelos empleados in vivo el denominador común en ellos es que la isquemia/reperfusión está provocada mediante un procedimiento mecánico, que es lo que a partir de ahora se denominará método físico, para distinguirlo del método farmacológico, que es el modelo que pretendemos estudiar y comparar con el primero, demostrando con ello que se puede producir lesión por isquemia/reperfusión mediada por sustancias químicas, y que en esta última están implicados las especies reactivas derivadas del oxígeno y el óxido nítrico. El objetivo del estudio es desarrollar un modelo en el intestino de rata que permita: - Cuantificar, si se producía, la magnitud de alteraciones propias del síndrome de isquemia/reperfusión provocado por medio de un mecanismo farmacológico, y comparar diferentes aspectos de la lesión: daño tisular y permeabilidad vascular (valorados respectivamente por los niveles de LDH y azul de Evans en el líquido perfundido por la luz del intestino sometido a intervención), en función del método empleado para producirla (físico o farmacológico). - Determinar si factores clásicamente implicados, como las especies reactivas del oxígeno, y el óxido nítrico, que intervienen en la lesión por isquemia/reperfusión producida por un mecanismo físico (pinza hemostática) contribuyen de igual manera en la producción de la lesión por isquemia/reperfusión farmacológica.