O estudo teve como objetivos avaliar a ação antifúngica in vitro e in vivo do óleo essencial do Origanum vulgare (orégano), determinar a composição química dos óleos estudados e verificar a toxicidade em ratos Wistar. Inicialmente, oito amostras de O. vulgare foram extraídas por hidrodestilação e os óleos essenciais analisados por cromatografia gasosa, sendo posteriormente testados in vitro para escolha do óleo para os ensaios in vivo. Os testes in vitro seguiram as normas estabelecidas pelo CLSI-M27-A2, sendo utilizados sete isolados de Sporothrix schenckii e 16 isolados de Candida spp. A toxicidade do O. vulgare foi avaliada em 30 ratos wistar, fêmeas, tratadas via oral e vaginal com óleo a 3%, por 30 dias, através de parâmetros clínicos, hematológicos e histopatológicos. Para o teste in vivo, foram utilizados 48 ratos wistar, machos, distribuídos em quatro grupos: T1:óleo (1,5%); T2:óleo (3%); T3:fluconazol (10mg/Kg/dia); T4:controle negativo (emulsão); os óleos foram emulsionados com 0,001% de Tween 80. Para a reprodução experimental da candidíase sistêmica foi utilizado isolado canino e o inóculo (106céls/mL deC. albicans) foi administrado pela veia lateral da cauda em todos os animais. Os fármacos e o diluente foram administrados diariamente por via oral, com auxílio de sonda oro-gástrica, durante 30 dias. Foi realizada avaliação clínica semanal e pesagem dos animais, e após a necropsia foi realizada análise macroscópica, pesagem dos órgãos e retroisolamento de C. albicans. O óleo essencial do O. vulgare utilizado nos testes in vitro apresentou como componentes majoritários o 4-terpineol, carvacrol, timol e α-terpineol. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) do O. vulgare para S. Schenckii foi de 0,25% (250μL/mL-1) para todos os isolados testados. Para Candida spp. os resultados foram expressos em CIM e CFM (Concentração Fungicida Mínima), obtendo-se CIM de 2,72μL mL-1 e CFM de 5μL mL-1 para C.albicans isolada de animais; CIM de 2,97μL mL-1 e CFM 3,54μL mL-1 para cepas padrões e CIM igual 2,10μL mL-1 e CFM igual 2,97μL -1mL para espécies não-albicans. A utilização do óleo essencial de O. vulgare a 3%, uma vez ao dia, 30 dias, por via oral e vaginal, não causou toxicidade nos ratos wistar. Na candidíase experimental sistêmica, os animais tratados com óleo a 3% e com fluconazol resultaram em menor freqüência de alterações clínicas. Não houve diferenças entre os grupos quanto a alterações macroscópicas nos órgãos, com exceção dos rins, onde o grupo T3 diferiu dos demais grupos (T1,T2,T4) sendo aquele com menor alterações. Quanto ao retroisolamento, foi obtido menor quantidade de Unidades Formadoras de Colônias no grupo T3 e maior no T4. Dessa forma é possível concluir que o óleo essencial do O. vulgare possui atividade in vitro frente ao S. schenckii e Candida spp. e que sua composição química interfere nos resultados. A utilização do óleo à 3%, via oral e vaginal por 30 dias não causou alterações toxicológicas relevantes em ratas Wistar. O uso do óleo a 3% demonstrou bons resultados no tratamento da candidíase experimental sistêmica, porém são necessários maiores estudos que possibilitem introduzir esta substância como opção terapêutica para candidíase. / The aims of this study were to evaluate the in vitro antifungal activity of the essential oil Origanum vulgare (oregano), to determine the chemical composition of the oils tested and to verify their toxicity to rats. Eight samples of Origanum were extracted by hydrodestilation, and the composition of the essential oils was determined by gaseous chromatography. In vitro antifungal sensitivity was performed with CLSI-M27-A2 protocol. Seven isolates of Sporothrix schenckii and 16 isolates of Candida species were tested. The animal model consisted of female wistar rats, which were treated orally and vaginally with 3% oil for 30 days. Animals were analyzed by clinical, hematological and hystopathologic parameters. For the in vivo test, 48 rats wistar were used, distributed in four groups: T1/n=12: oil 1,5%; T2/n=12:oil 3%; T3/n=12: Fluconazole 10mg/Kg; T4/n=12: Control (emulsion); the oils had been emulsified with 0,001% of Tween 80. The experimental disease was carried with one canine isolate, which was prepared with a suspension of C. albicans (106 céls/mL), and inoculated for the lateral vein of the tail. The drugs and diluent had been administered daily orally during 30 days. Weekly clinical evaluation and weighing of the animals were performed, and to at the end of experiment autopsies were done with macroscopic analysis, weighing of the tissues and retro isolation of C. albicans. The O. vulgare essential oil used in the tests in vitro showed 4-terpineol, carvacrol, timol and alfa-terpineol as majority component. The Minimum Inhibitory Concentration (CIM) of the O. vulgare for S. schenckii was 0,25% (250μL/mL), for all the isolates tested. For Candida spp. the results had been express in CIM and CFM (Concentration Fungicidal Minimum), showing CIM 2,72μL mL-1 and CFM 5μL mL-1 for C.albicans isolates from animals; CIM 2,97μL mL-1 and CFM 3,54μL mL-1 for standards strains and CIM 2,10 μL mL-1 and CFM 2,97μL -1mL for species non-albicans. The use of the 3% essential oil, daily for 30 days, orally and vaginally, did not cause toxicity in the rats. In systemic experimental candidiasis, animals treated with 3% oil and fluconazole showed lesser frequency of clinical alterations. Differences between the groups weren’t observed in the organs macroscopic alterations, with exception of the kidneys that presented more lesions in the group T3. The retro isolation was higher in the T4 group and in the group T3 was of minor. Thus, we conclude that the O. vulgare essential oil have activity in vitro against S. schenckii and Candida spp. and its chemical composition intervenes in the results. The use of the 3% oil for 30 days does not cause oral and vaginal significative alterations in wistar rats. The use of the 3% oil demonstrated good results in the treatment of systemic experimental candidiasis, however other studies are necessary to introduce this substance as a therapeutic option for candidiasis.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_franklin_de_moraes_vaz_da_silva.pdf: 964493 bytes, checksum: 4984372f2eaf08c502de40b75e4a01fb (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / Sporotrichosis is a subcutaneous mycosis with worldwide distribution, caused by the fungal species Sporothrix schenckii complex, its endemic in areas with temperatures between 25-28ºC. Cause a chronic infection in humans, with significant economic and social impact, causing direct and indirect losses in population. To study the knowledge of the population in endemic areas, a cross-sectional, population-based between December, 2013 and February, 2014 was conducted in the city of Pelotas - RS, using a structured questionnaire divided into three sections. In the first section, global data such as age , sex, occupation, education, the second section data on the relationship between respondents with pets, and the third section on knowledge and perceptions were collected interviewed about definitions and concepts about mycosis, zoonosis and knowledge of sporotrichosis. 618 interviews, being composed of 40.94% (253/618) men and 59.06% (365/618) of women were conducted. 73.62% (455/618) are owners of pets. Of these, 50.32% (229/455) kept their animals out of home with 21.53% (49/229) of these are cats. In the population that does not have pets, the cat was the species with greater contact between 19.02% (31/163) respondents. Students achieved the best performance on questions about knowledge of ringworm and zoonosis. On knowledge of sporotrichosis least half of the students 44.17% (273/618) and 26.51% (164/618) of health professionals were aware, all other categories were below 5% accuracy. Although the city of Pelotas - RS, is considered an endemic area for sporotrichosis, we found a low level of knowledge about sporotrichosis by population, for this, greater awareness and information about the disease is necessary. / A esporotricose é uma micose subcutânea zoonótica de distribuição mundial, causada por espécies fúngicas do complexo Sporothrix schenckii, endêmica em áreas com temperatura entre 25 a 28ºC. Causa infecção crônica em humanos, com grande impacto econômico e social, provocando perdas diretas e indiretas na população. Para estudar o conhecimento da população em área endêmica, foi realizado um estudo transversal, de base populacional entre dezembro de 2013 e fevereiro de 2014, na cidade de Pelotas RS, utilizando questionário estruturado dividido em três seções. Na primeira seção foram coletados dados globais como idade, sexo, ocupação, escolaridade, a segunda seção foram coletados dados referentes à relação entre os entrevistados com animais domésticos, e a terceira seção referente ao conhecimento e percepção dos entrevistados sobre definições e conceitos sobre micose, zoonose e conhecimento sobre esporotricose. Foram realizadas 618 entrevistas, sendo compostas por 40,94% (253/618) de homens e 59,06% (365/618) de mulheres. 73,62% (455/618) são proprietários de animais de estimação. Destes, 50,32% (229/455) mantinham seus animais em regime semidomiciliado, sendo destes 21,53% (49/229) de gatos. Na população que não possui animais de estimação, o gato foi a espécie com maior contato 19,02% (31/163) entre os entrevistados. Os estudantes obtiveram o melhor desempenho nas questões sobre conhecimento de micose e zoonose. Sobre o conhecimento da esporotricose menos da metade dos estudantes 44,17% (273/618) e dos profissionais da saúde 26,51% (164/618) tinham conhecimento, todas as demais categorias ficaram abaixo dos 5% de acertos. Embora, a cidade de Pelotas RS, seja considerada uma região endêmica para esporotricose, encontramos um baixo índice de conhecimento sobre esporotricose pela população, sendo necessária uma maior divulgação e informação sobre a doença.