O motivo deste estudo foi o percentual elevado de descarte de touros por alterações reprodutivas, precisamente qualidade de sêmen, que se apresenta em determinados sistemas produtivos nos quais estão inseridas as raças sintéticas. Através de cinco experimentos foi permitido observar o comportamento da espermatogênese de touros de raças sintéticas do nível cromossômico ao funcional do epitélio seminífero. O experimento I, avaliou por seis meses as características seminais de 12 touros, seis de uma raça pura e seis de uma sintética, contendo em cada grupo touros aptos e inaptos a reprodução classificados por qualidade de sêmen. Os animais do grupo sintético não apresentaram recuperação das características seminais durante o período de avaliação, como os puros, indicando um quadro degenerativo permanente neste conjunto de indivíduos. O experimento II buscou identificar uma relação entre a morfologia do cromossomo Y e tipos de cruzamentos, com a qualidade seminal de touros de duas raças sintéticas, Braford e Brangus-Ibagé. A relação da morfologia do Y com a condição reprodutiva não foi comprovada, no entanto considerando os tipos de cruzamentos para obtenção de touros 3/8, os cruzamentos que utilizam fêmea ¼ com macho ½ sangue filho de Nelore proporcionam um maior percentual de animais considerados inaptos ao exame de sêmen. Este experimento sugere medidas práticas para evitar o cruzamento que traz maiores prejuízos econômicos. O experimento III foi proposto para a avaliar a intensidade de redução de células espermáticas anômalas ao longo do epidídimo em touros de uma raça sintética. A redução da freqüência de gota citoplasmática proximal foi distinta entre os grupos de touros classificados quanto a morfologia espermática e entre as regiões do epidídimo, sendo portanto um indicador sensível da qualidade espermática e classificação da fertilidade potencial de animais de raças híbridas. O experimento IV avaliou a freqüência dos túbulos seminíferos nos diferentes estádios do ciclo espermatogênico em touros de duas raças sintéticas. Nas fases iniciais do ciclo espermatogênico, todos os touros apresentam gametogênese semelhante. Nas fases em que ocorrem as divisões meióticas, os touros inaptos apresentaram maior freqüência e a na fase de maturação das espermátides os touros aptos apresentaram maior freqüência. Estes resultados indicam que nos touros inaptos ocorre um bloqueio na fase das meioses, diminuindo a freqüência dos estádios de maturação das espermátides. O experimento V identificou a expressão diferencial de um fator de crescimento (transforming growth factor alpha- TGFα) no epitélio seminífero de touros Braford e Brangus-Ibagé, aptos e inaptos à reprodução, e também avaliou a freqüência de células de Sertoli nestes animais, como um estudo inicial do controle parácrino da espermatogênese. A maior freqüência da expressão de TGFα foi observada nos estádios I e III, e também na raça Brangus-Ibagé. O número médio das células de Sertoli foi semelhante entre estádios e raças dos touros. Em todos experimentos em que as raças Braford e Brangus-Ibagé foram confrontadas, os resultados obtidos foram diferentes. As maiores freqüências de alterações na qualidade seminal não podem ser extrapoladas para todas as raças sintéticas, cabendo a prerrogativa para cada raça de um estudo específico e ajustado às suas condições de criação. / The observation that there are animals with semen quality alterations, kept under the same environmental and handling conditions as others in normal reproductive features motivates the development of research work in the field of animal reproduction. By means of five study methodologies the behavior of the spermatogenesis in bulls of synthetic breed was observed, ranging from the chromosome to the functional level of the seminiferous epithelium. Experiment I has evaluated the seminal characteristics of bulls belonging to a pure breed and to a synthetic breed. This longitudinal study has observed that there is a permanent testicular degenerative process among the group of individuals belonging to the synthetic breed. Experiment II has demonstrated no direct association between the individual type of Y chromosome and reproductive soundness, previously estimated through andrological examination. However, in the Braford breed, when 1/4 Nelore females and ½ bulls with father Nelore are used to produce 3/8 bulls, there is a greater percentage of culled bulls due to reproductive problems. Experiment III indicates that bulls with altered spermatogenesis do not have the same capacity of reduce abnormal sperm forms along the epididymis as those bulls considered to have normal spermatogenesis. The dynamics of the frequency of the proximal cytoplasmatic droplet can be a sensitive indicator of spermatic quality. Experiment IV has indicated that spermatogenesis progresses adequately in stage I in synthetic bulls with abnormalt semen quality. During the meiotic and spermatid maturation period, disturbs in the spermatogenesis of the unsound bulls have occurred. Experiment V identified the overexpression of transforming growth factor alpha (TGFα) in seminiferous epithelium of bulls that were sound and unsound for reproduction, and has also evaluated the frequency of Sertoli cells in these animals as an initial study of the paracrinous control of spermatogenesis. In all the experiments in which the Braford and Brangus-Ibagé breed were compared the results obtained were different. The highest frequencies of poor semen quality cannot be extrapolated to all synthetic breeds and a specific study for each breed needs to be adjusted to the different environmental conditions.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-05Bitstream added on 2014-06-13T20:19:12Z : No. of bitstreams: 1 velloso_nm_dr_botfmvz.pdf: 1133143 bytes, checksum: 56ab5aea54c24909c943421f3d719a7f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito da congelação e do meio sobre as características físicas e químicas do sêmen de 10 reprodutores suínos durante o inverno e o verão. No protocolo utilizado para a congelação seminal, 2 diluentes de congelação foram testados em combinação com 2 diluentes de transporte e refrigeração. Os resultados encontrados demonstraram que os parâmetros de integridade de membranas, morfologia e cinética espermática nos momentos que antecederam a congelação não foram influenciados, de forma geral, pela estação do ano. Apesar do número de células espermáticas totais e o volume do ejaculado terem sido superiores no inverno em relação ao verão, a motilidade progressiva pós-descongelação foi melhor no verão do que no inverno na maior parte dos meios de congelação avaliados. A metodologia de congelação aplicada e os diluentes utilizados mostraram índices de viabilidade espermática do sêmen descongelado sem precedentes e superiores aos encontrados na literatura, independentemente do diluente ou da estação do ano avaliada. Em relação ao perfil químico seminal, apenas os níveis de sódio no sêmen e de cálcio no plasma seminal foram mais elevados durante o verão, devido ao menor volume seminal produzido neste período. As temperaturas e umidades foram evidentemente superiores durante o verão e as concentrações de metabólitos fecais de corticosterona mais elevadas nesta mesma estação, porém estes índices não ocasionaram alterações consistentes na viabilidade do sêmen descongelado dos cachaços. Desta forma, os resultados do presente trabalho indicam que os animais encontram-se adaptados ao ambiente, não apresentando alterações marcantes de suas características seminais de acordo com as condições climáticas / This study aimed to evaluate the effect of freezing and environment on physical and chemical characteristics of the semen of 10 breeding pigs during the winter and summer. In the protocol used for the freezing of semen, 2 freezing extenders were tested in combination with 2 diluents for transport and refrigeration. The results show that the parameters of membrane integrity, sperm morphology and kinetics in the moments preceding the freezing were not affected, in general, by the season. Although the number of sperm cells and the total volume of the ejaculate were higher in winter compared to summer, the post-thaw motility was better in summer than in winter in most media tested for freezing. The freezing methodology and the extenders applied showed indices of viability of the thawed sperm unprecedented and higher than those found in the literature, regardless of the diluents or the season assessed. Regarding the chemical seminal profile, only the levels of sodium and calcium in semen in the seminal plasma were higher during the summer due to lower volume seminal produced in this period. Temperatures and humidities were clearly higher during the summer and the concentrations of fecal corticosterone metabolites higher in the same season, but these rates did not cause consistent changes in the viability of frozen-thawed semen of boars. Thus, the present results indicate that the animals are adapted to the environment, showing no marked changes in their semen characteristics according to the season

Orientador: Marion Burkhardt de Koivisto / Banca: Lúcia Helena Rodrigues / Banca: Sony Dimas Bicudo / Banca: César Roberto Esper / Banca: Paulo Henrique Franceschini / Resumo: Os objetivos deste projeto de pesquisa foram testar se a qualidade espermática, e a integridade da cromatina são diferentes em um grupo de touros Nelore jovens, adultos e senis. Três ejaculados, de 40 touros Nelore foram subdivididos em três faixas etárias: de 1,8 a 2 anos - Grupo Jovens, de 3,5 a 7 anos - Grupo Adultos e de 8 a 14,3 anos - Grupo Senis. As amostras foram avaliadas quanto à motilidade, o vigor, teste de termoresistência lento (TTL), análise computadorizada do movimento espermático (CASA), avaliação simultânea da integridade da membrana plasmática e do acrossoma, potencial mitocondrial, protaminação espermática, danos de DNA causados por radicais livres, suscetibilidade a denaturação da cromatina, pelos testes "Sperm Cromatin Structure Assay" (SCSA) e laranja de acridina (AOT), e danos na cromatina com a técnica TUNEL. Os animais jovens apresentaram valores superiores de motilidade e vigor antes e após o TTL, e maior porcentagem de células com alterações morfológicas, assim como maior porcentagem de espermatozóides com membrana e acrossoma íntegros e com alto potencial mitocondrial, estes parâmetros tiveram os menores índices nos animais senis (P<0,05). Nas avaliações da integridade do DNA, os touros jovens apresentaram maior porcentagem de deficiência de protaminação, enquanto os senis danos por oxidação. No teste SCSA os touros mais jovens e mais idosos apresentaram maiores índices de danos na cromatina, diferindo dos demais (P<0,05). O teste de TUNEL não apresentou resultados satisfatórios. Estes resultados permitem concluir que touros jovens apresentam qualidade espermática superior, seguidos pelo grupo de animais adultos, e finalmente um declínio na qualidade nos diversos parâmetros estudados para o grupo de animais senis. Quanto à integridade... (Complete abstract click electronic access below) / Abstract: The aims of this study were to test if sperm quality and chromatin integrity are different in young, adult and senile Nelore Bull cryopreserved semen samples. Three ejaculates from 40 Nelore bulls were divided by age in three groups: 1,8 to 2 years - Young Bulls, from 3,5 to 7 years - Adult Bulls and from 8 to 14,3 years - Senile Bulls. Samples were evaluated for: motility, vigor, slow termoresistance test (TTL), computadorized sperm movment analyses (CASA), simultaneous evaluation of plasmatic membrane and acrosome integrity, mitochondrial potential, sperm protamination, DNA oxidation damages, Sperm Cromatin Structure Assay (SCSA) and acridine orange test (AOT), and TUNEL. Young animals presented better values for motility and vigor before and after TTR , intact membrane and acrosome and high mitochondrial potential, but higher values for sperm defects, (P<0.05). On DNA integrity evaluations, Young Bulls presented more protamination problems while senile bulls guanine oxidation defects, both groups were more susceptible to DNA denaturation on SCSA (P<0.05). TUNEL results were not satisfatory. The results indicates that Young bulls may have a high quality sperm sample after freezing, followed by the adults and finally there is a decrease in quality on senile bulls group, nevertheless the results would probably not compromised the samples approval for commercial use. Regarding DNA integrity, Young and senile bulls are more susceptible to DNA damage, nevertheless the etiology of the damage seems to be different, by protamine deficiency in Young bulls and by oxidation in senile animals / Doutor

O motivo deste estudo foi o percentual elevado de descarte de touros por alterações reprodutivas, precisamente qualidade de sêmen, que se apresenta em determinados sistemas produtivos nos quais estão inseridas as raças sintéticas. Através de cinco experimentos foi permitido observar o comportamento da espermatogênese de touros de raças sintéticas do nível cromossômico ao funcional do epitélio seminífero. O experimento I, avaliou por seis meses as características seminais de 12 touros, seis de uma raça pura e seis de uma sintética, contendo em cada grupo touros aptos e inaptos a reprodução classificados por qualidade de sêmen. Os animais do grupo sintético não apresentaram recuperação das características seminais durante o período de avaliação, como os puros, indicando um quadro degenerativo permanente neste conjunto de indivíduos. O experimento II buscou identificar uma relação entre a morfologia do cromossomo Y e tipos de cruzamentos, com a qualidade seminal de touros de duas raças sintéticas, Braford e Brangus-Ibagé. A relação da morfologia do Y com a condição reprodutiva não foi comprovada, no entanto considerando os tipos de cruzamentos para obtenção de touros 3/8, os cruzamentos que utilizam fêmea ¼ com macho ½ sangue filho de Nelore proporcionam um maior percentual de animais considerados inaptos ao exame de sêmen. Este experimento sugere medidas práticas para evitar o cruzamento que traz maiores prejuízos econômicos. O experimento III foi proposto para a avaliar a intensidade de redução de células espermáticas anômalas ao longo do epidídimo em touros de uma raça sintética. A redução da freqüência de gota citoplasmática proximal foi distinta entre os grupos de touros classificados quanto a morfologia espermática e entre as regiões do epidídimo, sendo portanto um indicador sensível da qualidade espermática e classificação da fertilidade potencial de animais de raças híbridas. O experimento IV avaliou a freqüência dos túbulos seminíferos nos diferentes estádios do ciclo espermatogênico em touros de duas raças sintéticas. Nas fases iniciais do ciclo espermatogênico, todos os touros apresentam gametogênese semelhante. Nas fases em que ocorrem as divisões meióticas, os touros inaptos apresentaram maior freqüência e a na fase de maturação das espermátides os touros aptos apresentaram maior freqüência. Estes resultados indicam que nos touros inaptos ocorre um bloqueio na fase das meioses, diminuindo a freqüência dos estádios de maturação das espermátides. O experimento V identificou a expressão diferencial de um fator de crescimento (transforming growth factor alpha- TGFα) no epitélio seminífero de touros Braford e Brangus-Ibagé, aptos e inaptos à reprodução, e também avaliou a freqüência de células de Sertoli nestes animais, como um estudo inicial do controle parácrino da espermatogênese. A maior freqüência da expressão de TGFα foi observada nos estádios I e III, e também na raça Brangus-Ibagé. O número médio das células de Sertoli foi semelhante entre estádios e raças dos touros. Em todos experimentos em que as raças Braford e Brangus-Ibagé foram confrontadas, os resultados obtidos foram diferentes. As maiores freqüências de alterações na qualidade seminal não podem ser extrapoladas para todas as raças sintéticas, cabendo a prerrogativa para cada raça de um estudo específico e ajustado às suas condições de criação. / The observation that there are animals with semen quality alterations, kept under the same environmental and handling conditions as others in normal reproductive features motivates the development of research work in the field of animal reproduction. By means of five study methodologies the behavior of the spermatogenesis in bulls of synthetic breed was observed, ranging from the chromosome to the functional level of the seminiferous epithelium. Experiment I has evaluated the seminal characteristics of bulls belonging to a pure breed and to a synthetic breed. This longitudinal study has observed that there is a permanent testicular degenerative process among the group of individuals belonging to the synthetic breed. Experiment II has demonstrated no direct association between the individual type of Y chromosome and reproductive soundness, previously estimated through andrological examination. However, in the Braford breed, when 1/4 Nelore females and ½ bulls with father Nelore are used to produce 3/8 bulls, there is a greater percentage of culled bulls due to reproductive problems. Experiment III indicates that bulls with altered spermatogenesis do not have the same capacity of reduce abnormal sperm forms along the epididymis as those bulls considered to have normal spermatogenesis. The dynamics of the frequency of the proximal cytoplasmatic droplet can be a sensitive indicator of spermatic quality. Experiment IV has indicated that spermatogenesis progresses adequately in stage I in synthetic bulls with abnormalt semen quality. During the meiotic and spermatid maturation period, disturbs in the spermatogenesis of the unsound bulls have occurred. Experiment V identified the overexpression of transforming growth factor alpha (TGFα) in seminiferous epithelium of bulls that were sound and unsound for reproduction, and has also evaluated the frequency of Sertoli cells in these animals as an initial study of the paracrinous control of spermatogenesis. In all the experiments in which the Braford and Brangus-Ibagé breed were compared the results obtained were different. The highest frequencies of poor semen quality cannot be extrapolated to all synthetic breeds and a specific study for each breed needs to be adjusted to the different environmental conditions.

O presente trabalho constou de três experimentos. O primeiro objetivou verificar a influência de diferentes concentrações de plasma seminal e de dois diluentes na motilidade e na integridade e funcionalidade da membrana plasmática de espermatozóides eqüinos resfriados. Para tanto, foram utilizados 4 garanhões, comprovadamente férteis e em atividade sexual. Imediatamente após a coleta, o sêmen foi avaliado, diluído 1:2 com EDTA-glicose, dividido em oito alíquotas e centrifugado a 600g, por 10 minutos, para remoção do plasma seminal. O pellet de cada alíquota foi ressuspendido com um determinado volume do plasma seminal, previamente removido e acrescido de um determinado volume de um dos dois diluente (leite desnatado UHT ou leite desnatado-glicose) até atingir uma concentração final entre 40 e 50x106 espermatozóides/ml, contendo as seguintes concentrações finais de plasma seminal: 0%, 2,5%, 5% e 10%. Imediatamente após a diluição, o sêmen foi avaliado quanto à motilidade progressiva e total e funcionalidade e integridade da membrana plasmática. A seguir, os oito frascos contendo o sêmen, com um volume aproximado de 12 ml cada, foram resfriados em câmara a +4ºC a uma taxa de resfriamento de 0,3º C/min, sendo o sêmen novamente avaliado às 24, 48 e 72 horas.

No Abstract provided. Please read Chapter 5: "Conclusions and recommendations" / Dissertation (MInst Agrar (Animal Production Management))--University of Pretoria, 2006. / Animal and Wildlife Sciences / unrestricted

Over the past decade long distance marathon running has become an important recreational activity. There is evidence that males with high levels of physical activity have some impairment of fertility. In order to investigate this further, 24 male marathon runners were studied over a period of a year. Each runner was assessed at regular intervals using hormonal profiles, anthropomorphic indices and semen evaluation. The training time and distance run increased progressively over the first five months of the study as the runners prepared for the Two Oceans marathon. Analysis of the serum hormonal profiles in this longitudinal study showed that the prolactin level increased when comparing the initial study month with the rest of the year and the progesterone level decreased. However the luteinizing hormone (LH), follicle stimulating hormone (FSH), testosterone and estradiol (E2) levels remained unchanged. When the runners were divided into a high and low training group according to the distance run in the preceding week, the only significant difference was the lower mean serum FSH level in the high training group. A decrease in semen volume was demonstrated as the training time increased. This trend was reversed as the runners' training decreased after the Two Oceans marathon. The percentage of morphologically normal spermatozoa showed an initial significant decrease in the first month of training. However, no significant difference was observed throughout the rest of year. An overall downward trend in semen motility in the first 5 months of the study was shown but this was only significant if the first and fifth study months were compared. The decrease in semen motility coincided with the period of maximum training. Since patients with an adequate sperm count but decreased motility have impaired fertility this finding is of considerable importance. In addition to the decrease in motility, there was a decrease in the percentage of morphologically normal spermatozoa when the initial month of low physical activity (December) was compared to all of the subsequent months analysed. This, too, is an important finding as the percentage of morphologically normal spermatozoa correlates directly with fertilisation and pregnancy rates. When the results were analysed in the high and low training months there was a significant difference in mean semen count and semen morphology. The mean count was higher in the high training group and this group also had a significantly higher normal morphology. However, there was no significant difference in semen volume and motility in the high and low training groups.

The aim of this diploma thesis is assessing the determination and evaluation of pathogens species spectrum in carrot (Daucus carota), parsley (Petroselinum crispum) and pepper (Capsicum annum) seeds. The microflora was determined in laboratory conditions. The surface disinfected seeds and non-disinfected seeds were cultivated on culture medium PDA and filter paper. The level of bacterial and yeast contamination was low. The major part of pathogenswere fungi pathogens. The most often found pathogens were species from Alternaria and Cladosporium genus. The species spectrum was not different between individual varieties of carrot, parsley and pepper. In most cases, non-disinfected seeds had significantly higher amount of pathogens than the disinfected seeds.

No description available.

Sexual assault evidence composes a large portion of the evidence analyzed by forensic serologists. Key to the processing of sexual assault evidence is the screening of the evidence items for the presence of semen. Due to the intimate nature of a sexual assault, it is very possible that semen is mixed with other body fluids when it is deposited on an item of evidence. One of the body fluids that semen can easily come into contact with during a sexual assault is saliva. Saliva functions as the first step in the human body’s digestive system. Due to the digestive system’s purpose of breaking down nutrients, it stands to reason that saliva could play a role in breaking down seminal components. To detect semen, specific components of semen are tested for in forensic laboratories. These components are often acid phosphatase, prostate specific antigen, semenogelin, and spermatozoa. This experiment combined semen from one donor with saliva of seven other donors in a two part survey. In part one, semen was mixed with the saliva of Donors A, B, C, and D at three different ratios of 1:1, 1:2, and 1:10 semen-saliva. Twenty-microliter stains were pipetted onto one inch by one inch squares on twelve cotton swatches to test for acid phosphatase, prostate specific antigen, semenogelin, and spermatozoa. One set of six swatches was allowed to dry and the other set was kept damp. The stains were tested at six timepoints: day zero, day one, week one, week two, week three, and week four. Part two involved incubating the semen with saliva from Donors X, Y, and Z at body temperature for up to twenty-four hours. The same three ratios used in part one were repeated with the saliva from Donors X, Y, and Z in part two. A twenty microliter stain was pipetted onto a cotton swatch at each of the five timepoints from the start of the incubation period: zero minutes, one hour, five hours, eight hours, and twenty-four hours. Each stain was tested for acid phosphatase, prostate specific antigen, and semenogelin. The results of part one showed that semen samples that are mixed with saliva but allowed to dry are effectively unaffected by the presence of saliva. On the dry swatches, the stains tested positive for every component of semen at every timepoint for every donor except for Donor D’s 1:10 semen-saliva mixture stain, which tested negative for spermatozoa at week 1, but positive for spermatozoa in the subsequent timepoints. The results of the damp swatches suggests that damp environmental factors can prevent the detection of seminal components. By week two, the detection of spermatozoa had completely dropped out in the mixture stains and in the neat semen control stains. Detection of prostate specific antigen ceased in the control by week 3 and had also stopped in all 1:1 semen-saliva mixture stains by week 4. The detection of prostate specific antigen had stopped at week 3 for all donors in the 1:10 semen-saliva mixture stains. Semenogelin was still detectable in the control sample for the duration of the experiment, and it was detected for all donors at week 4 in the 1:1 and 1:2 semen-saliva mixture stains. Detection of semenogelin ceased in Donors B and D in the 1:10 semen-saliva mixture stains by week two. The results of part two suggested that the detection of acid phosphatase could be affected when semen and saliva have been incubating together at body temperature. Acid phosphatase was detected at all the timepoints in the neat semen control, but after eight hours, it was no longer detectable in all the mixture ratios of Donors X and Z. Acid phosphatase was no longer detectable in the 1:1 semen-saliva mixture stain of donor Y at eight hours and in the 1:2 semen-saliva mixture stain of Donor Y at twenty-four hours. Acid phosphatase did remain detectable in the 1:10 semen-saliva mixture stain of Donor Y through the twenty-four hour experimental period. Prostate specific antigen and semenogelin remained detectable in all the donors at all three ratios for the duration of the experiment.