<p>Inom gemenskapen pågår idag ett harmoniseringsarbete beträffande både de nationella bolagsstiftningarna, men även vad gäller utvecklingen av överstatliga bolagsformer, där ibland det liggande förslaget om SPE-bolag. I det gemenskapsrättsliga fördraget regleras genom art. 49 samt 54 EUF den grundläggande etableringsfriheten. Denna har under ett flertal år varit uppe för diskussion då det är oklart hur långtgående denna frihet skyddas av fördraget.</p><p>Inom gemenskapen bygger medlemsstaterna idag sina bolagsstiftningar antingen på inkorporations- eller sätesprincipen. Det är skillnaden vid dessa principers tillämpning som har givet upphov till problematiken på området. Problemen rör huruvida ett bolag ska få separera sitt registrerade- och faktiska säte med bibehållande av rättslig status. Vid sidan av detta problem har även en annan problematik uppkommit som rör <em>forum shopping</em>. Vilken innebär att regelkonkurrens har skapats mellan medlemsstaternas lagstiftningar, som en följd av att det råder valfrihet för bolag att inkorporera sig under den medlemsstats nationella lagstiftning vilken de finner förmånligast.</p><p>Det liggande förslaget om SPE-bolagsförordning rör införandet av överstatlig bolagsform som kommer, vid ett eventuellt införande, verka som ett alternativ till de inhemska bolagsformerna. Bolaget har formen av ett aktiebolag och riktar sig mot de små och medelstora bolagen, det vill säga SMEs. Bolagsformen har till syfte att verka för att SMEs ska bli mer aktiva på den inre marknaden och därför är en viktig del i förslaget reglerna som berör bolagets etableringsmöjligheter.</p><p>Förslaget om SPE-bolag bereder bestämmelser som gäller dess bildande, men även vad gäller bolagets verksamhet. För att göra denna bolagsform mer attraktiv har bl.a. kapitalkravet endast satts till 1€. Då förslaget inte omfattar alla relevanta rättsliga områden kommer dessa även fortsättningsvis regleras av den nationella lagstiftning där bolagets säte är beläget, däribland skattelagstiftning. Förslaget bereder även bolaget med förflyttningsrätt inom gemenskapen, hur långtgående denna skyddas av den förslagna förordningen förefaller vara tvetydigt ur dess ordalydelse. Det finns dock starka indikationer på att denna förflyttningsrätt måste anses gå i linje med inkorporationsprincipen.</p><p>Huruvida ett eventuellt införande av SPE-bolagsförordningen skulle kunna lösa den problematik som finns på etableringsfrihetens område är diskuterbart. Den problematik som föreligger vid tillämpningen av inkorporations- och sätesprincipen kommer på ett rent teoretiskt plan kunna lösas genom ett sådant införande. Vad gäller problematiken med <em>forum shopping</em> kommer denna i viss mån endast kunna komma att begränsas genom ett sådant införande.</p><p>Förordningen är således endast en teoretisk lösning, men den är även alternativ till sin utformning, vilket innebär att den endast presenterar sig som ett alternativ till de inhemska bolagsformerna. Jag tror inte att förordningen vid ett införande, på ett praktiskt plan, skulle kunna få tillräcklig genomslagskraft för att lösa problematiken på etableringsfrihetens område. Det krävs andra åtgärder av mer direkt natur för att lösa dessa.</p>

Inom gemenskapen pågår idag ett harmoniseringsarbete beträffande både de nationella bolagsstiftningarna, men även vad gäller utvecklingen av överstatliga bolagsformer, där ibland det liggande förslaget om SPE-bolag. I det gemenskapsrättsliga fördraget regleras genom art. 49 samt 54 EUF den grundläggande etableringsfriheten. Denna har under ett flertal år varit uppe för diskussion då det är oklart hur långtgående denna frihet skyddas av fördraget. Inom gemenskapen bygger medlemsstaterna idag sina bolagsstiftningar antingen på inkorporations- eller sätesprincipen. Det är skillnaden vid dessa principers tillämpning som har givet upphov till problematiken på området. Problemen rör huruvida ett bolag ska få separera sitt registrerade- och faktiska säte med bibehållande av rättslig status. Vid sidan av detta problem har även en annan problematik uppkommit som rör forum shopping. Vilken innebär att regelkonkurrens har skapats mellan medlemsstaternas lagstiftningar, som en följd av att det råder valfrihet för bolag att inkorporera sig under den medlemsstats nationella lagstiftning vilken de finner förmånligast. Det liggande förslaget om SPE-bolagsförordning rör införandet av överstatlig bolagsform som kommer, vid ett eventuellt införande, verka som ett alternativ till de inhemska bolagsformerna. Bolaget har formen av ett aktiebolag och riktar sig mot de små och medelstora bolagen, det vill säga SMEs. Bolagsformen har till syfte att verka för att SMEs ska bli mer aktiva på den inre marknaden och därför är en viktig del i förslaget reglerna som berör bolagets etableringsmöjligheter. Förslaget om SPE-bolag bereder bestämmelser som gäller dess bildande, men även vad gäller bolagets verksamhet. För att göra denna bolagsform mer attraktiv har bl.a. kapitalkravet endast satts till 1€. Då förslaget inte omfattar alla relevanta rättsliga områden kommer dessa även fortsättningsvis regleras av den nationella lagstiftning där bolagets säte är beläget, däribland skattelagstiftning. Förslaget bereder även bolaget med förflyttningsrätt inom gemenskapen, hur långtgående denna skyddas av den förslagna förordningen förefaller vara tvetydigt ur dess ordalydelse. Det finns dock starka indikationer på att denna förflyttningsrätt måste anses gå i linje med inkorporationsprincipen. Huruvida ett eventuellt införande av SPE-bolagsförordningen skulle kunna lösa den problematik som finns på etableringsfrihetens område är diskuterbart. Den problematik som föreligger vid tillämpningen av inkorporations- och sätesprincipen kommer på ett rent teoretiskt plan kunna lösas genom ett sådant införande. Vad gäller problematiken med forum shopping kommer denna i viss mån endast kunna komma att begränsas genom ett sådant införande. Förordningen är således endast en teoretisk lösning, men den är även alternativ till sin utformning, vilket innebär att den endast presenterar sig som ett alternativ till de inhemska bolagsformerna. Jag tror inte att förordningen vid ett införande, på ett praktiskt plan, skulle kunna få tillräcklig genomslagskraft för att lösa problematiken på etableringsfrihetens område. Det krävs andra åtgärder av mer direkt natur för att lösa dessa.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Poluentes orgÃnicos emergentes (POEs) ou simplesmente contaminantes emergentes referem-se a qualquer composto quÃmico presente numa variedade de produtos comerciais como medicamentos, produtos de uso veterinÃrio, embalagens de alimentos, produtos de higiene, agrotÃxicos, ou alguns microrganismo. Os POEs podem ser encontrados em matrizes ambientais e biolÃgicas, nÃo sÃo usualmente monitorados ou ainda nÃo possuem legislaÃÃo regulatÃria correspondente, e apresentam risco potencial à saÃde humana e ao meio ambiente. Neste trabalho, foi desenvolvido e validado um mÃtodo para a determinaÃÃo de cafeÃna, ciprofloxacina, 17&#946;-estradiol, 17&#945;-etinilestradiol e dietilestilbestrol, considerados interferentes endÃcrinos. O mÃtodo desenvolvido utilizou extraÃÃo em fase sÃlida (SPE) e cromatografia lÃquida de alta eficiÃncia acoplada a um detector de arranjo de diodos. Foram estabelecidas condiÃÃes cromatogrÃficas com eluiÃÃo por gradiente utilizando acetonitrila e Ãgua ultrapura pH 2,0. O planejamento fatorial realizado por SPE indicou que melhores respostas sÃo alcanÃadas quando utiliza-se o cartucho C18, 500 mL de volume de amostra, pH 3,0 e volume de eluiÃÃo igual a 2,0 mL de metanol 100%. As figuras de mÃrito de validaÃÃo do mÃtodo indicaram seletividade, sensibilidade, linearidade, precisÃo, exatidÃo e robustez satisfatÃrias para a maioria dos compostos estudados. Os limites de detecÃÃo (LD) variaram entre 0,283 e 1,543 &#956;g/L (ppb) e os limites de quantificaÃÃo (LQ) variaram entre 0,944 e 5,142 &#956;g/L (ppb). Foi proposta uma nova estratÃgia de controle de qualidade utilizando padrÃo surrogate, e estabelecido um fator de relaÃÃo (FR) a fim de corrigir as concentraÃÃes dos compostos de interesse em amostras reais. O mÃtodo validado foi aplicado nas anÃlises de Ãgua superficial dos aÃudes que fazem parte do abastecimento de Ãgua da RegiÃo Metropolitana de Fortaleza/CE. Os compostos 17&#946;-estradiol, 17&#945;-etinilestradiol foram detectados numa concentraÃÃo mÃxima de 989 e 980 ng/L, respectivamente. / Emerging organic pollutants (EOP), or Emerging Contaminants, is a term that is used to refer any chemical compound insert in variety of comercial products such as medicines, veterinary products, food packaging, pesticides, or any microorganism. The EOP can be found in environmental and ecological arrays not usually monitore or government unregulated, and poses risks to human health na environment. The methodological approach of this thesis included a developed and validated method to determine caffeine, ciprofloxacin, 17&#946;-estradiol, 17&#945;-ethinylestradiol and diethylstilbestrol, considered endocrine disruptors. The method uses a Solid-Phase Extraction (SPE) and high performance liquid cromatography coupled to a diode array detector. Chromatografic conditions were established by gradiente elution using acetonitrile and ultrapure water (pH = 2). The experimental design performed by SPE showed that better responses are achieved when it is used the cartridge C18, 500 mL sample volume, pH 3,0 and 2,0 mL 100% methanol elution volume. The method validation parameters indicated satisfatory selectivity, sensitivity, linearity, precision, accuracy and robustness. Detection limits (DL) ranged from 0,283 to 1,543 &#956;g/L (ppb) and quantification limits (QL) ranged from 0,944 e 5,142 &#956;g/L (ppb). A new quality control strategy using surrogate standard was proposed, and a relation factors (RF) was established to correct of concentrations of compounds of interest in real samples. The validated method was applied to the analysis of surface waters reservoirs from water supply system in metropolitan region of Fortaleza. The compounds 17&#946;-estradiol, 17&#945;-ethynyl estradiol was detected in a maximum concentration of 989 to 980 ng / L, respectively.

Biochar is a material whose properties, composition and impact on the environment are often discussed nowadays. The reason is its application as a soil conditioner. This leads to the need for qualitative as well as quantitative knowledge of its composition. This diploma thesis focuses on the qualitative analysis of biochar leachates processed by various extraction techniques. To approximate the real conditions, six aqueous mediums with different pH values is used, which a solid sample of biochar is exposed to. The prepared leachates are after that processed by extraction techniques, which are solid phase microextraction (SPME), single drop microextraction (HS-SDME), solid phase extraction (SPE) and liquid-liquid extraction (LLE). Analysis of the extracts was performed by gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS). The measurements showed that the HS-SDME technique did not show a response. SPE was a rapid technique, but compared to other techniques, it acquired a smaller range of substances. Liquid-liquid extraction, a time-consuming technique, did not obtain as much analytes as SPME. By comparing these applied techniques, the SPME technique is the best choice. The most common determined analytes were those from the group of ketones and carboxylic acids and their derivatives.

This master´s thesis deals with optimization and validation of method for determination of free fatty acids. The theoretical part is focused on possibilities of extraction, extract separation, esterification, gas chromatography determination and brief description of the most important validation parameters. All with main emphasis on applying on free fatty acids. The experimental part describes the selection and procedure of optimizing individual steps of the method. Extraction of lipids was performed by solvent mixture (diethylether/petroleumether), based on the standard ČSN EN ISO 1735, for the extraction of free fatty acid solid phase extraction was tested. The acid catalyzed esterification based on ČSN EN ISO 5509 using methanolic solution BF3 was used for derivatization of free fatty acids and a gas chromatograph with a flame ionization detector was used for their determination. Subsequently, selected validation parameters of the method were verified: repeatability, reproducibility, linearity, limits of detection and quantitation. Sunflower oil and emmental type cheese, bought in common food market, were used as model samples for selection and optimatization of the method.

The aim of this diploma thesis was to determine the rutin content in springs and leaves of 19 elderberry species (Sambucus nigra L.) with use of liquid chromatography. Furthermore the rutin content was determined in its significant sources – rue and buckwheat. The observed values were compared in order to answer the question whether it is useful to use the elderberry spring and leaves as a new source of rutin. Theoretical part of the thesis describes elderberry in general, its chemical composition and its usage in medicine. Following part concentrates on important substances contained in elderberry – flavonoids. Also principles of extraction techniques and HPLC are discussed. In practice the rutin was gained from plant matrix with use of pressurized hot water extraction (PHWE) which was performed in three five minutes long cycles. Conditions during the PHWE were set up to 80 °C and 150 bars. Obtained extract was purified with use of SPE columns and analyzed by HPLC with DAD detector (wave length – 360 nm). HPLC was performed with SUPELCOSILTMLC-8DB column. The mobile phase was composed of MeOH, H2O, and HCOOH in ration of 36:61,5:2,5. The set up flow of mobile phase was 1 ml/min. In the leaves the highest rutin content was determined in Pregarten – 26,34 ± 0,50 mg/g. On the other hand the lowest rutin content in leaves was determined in Körsör – 3,74 ± 0,13 mg/g. In springs the obtained results were as follow. The highest content was determined in Samyl – 4,87 ± 0,01 mg/g and the lowest content was determined in Heidegg 13 springs – 0,56 ± 0,01 mg/g. Also the HPLC detection limit – 6,3 . 10-5 mg/ml and quantitation limit – 2,1 . 10-4 mg/ml were determined for rutin.

This thesis deals with the determination of free fatty acids in natural and processed cheese. In the theoretical part the possibilities of extraction, fractionation and determination of lipid fractions, characterization of fatty acids and various methods of their determination are described, including the determination of free fatty acids. In the experimental part the selected method for determination of free fatty acids was optimized and partly validated; this method was then applied to samples of processed cheese analogues and natural Gouda type cheese. For extraction of lipids from the sample the method according to ČSN 0107 was selected, solid phase extraction (SPE) was used for separation of free fatty acids. The method according to ČSN EN ISO 5509, using methanol solution of potassium hydroxide, was applied for esterification, fatty acids methyl esters were determined by gas chromatography with FID detection.

While ketamine is traditionally administered for anesthesia or pain management, illicit usage is often seen in forensic cases either as a recreational drug or as a tool in drug-facilitated sexual assault. Xylazine is an anesthetic agent used in veterinary medicine and does not have FDA approval for use in humans. However, it has recently been observed as a cutting agent in heroin. Post-mortem specimens present many challenges when it comes to toxicological analysis. Due to compound degradation and decomposition factors, analytes present at trace levels may be missed in blood and urine. Hair, bone, and insects have recently been investigated as alternative matrices for postmortem analysis due to their increased durability compared to more traditional matrices. However, this durability increases the difficulties in extracting and isolating compounds of interest from these matrices via traditional extraction and chromatography methods. These methods require lengthy extraction times and extensive cleanup steps in order to obtain samples suitable for analysis. Utilizing multiple instrumentation combinations, analysts are able to detect compounds at trace levels. Through the use of multidimensional chromatography, several time-consuming extraction steps can be eliminated while still retaining the ability of trace level detection and quantitation. Using Waters Oasis® HLB PRiME solid phase extraction cartridges using a methanol pH10 loading and an acetonitrile pH3 elution, a solvent extraction yielded linear dynamic ranges of 2pg/mL-1ng/mL and 5pg/mL-1ng/mL for xylazine and ketamine respectively. Rat specimens utilized in this project were treated as per an Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) protocol. The test rodents received an acute dosage of 2mg/mL of xylazine and 24mg/mL of ketamine approximately half an hour prior to death. The 14 test samples were placed outside directly on the ground at the Boston University Forensic Anthropology Outdoor Research Facility (Holliston, MA, U.S.A.) for a period of 6 months. A 15th rat was kept in -20°C until analysis to serve as a Time=0 sample. The outdoor samples were recovered and de-fleshed along with the Time=0 sample manually. Drug-free hair samples were donated anonymously as per Internal Review Board (IRB) protocols.

Tidigare studier har visat att äggläggande malariavektorer attraheras till vissa flyktiga organiska ämnen (VOC) som finns i olika gräsarter. Syftet med den här studien var att verifiera att flyktiga organiska ämnen finns i fyra olika gräsarter från Kenya; Panicum repens,Cynodon dactylon och Cyperus papyrus med Pennisetum setaceum rubrum som kontroll förde andra gräsarterna. För att analysera de flyktiga organiska ämnena extraherades gräset medhjälp av ultraljudsextraktion (UAE) och fastfasextraktion (SPE). De flyktiga organiska ämnena analyserades med gaskromatografi- masspektrometri (GC-MS). På grund av utbrottet av COVID-19 så analyserades istället resultat från en tidigare studie som använde samma metod. Det visades att Cyperus rotundus innehöll flera olika terpener och det antogs att Cyperus papyrus också innehåller några av dess föreningar. Det drogs också slutsatsen attbåde UAE och SPE ska användas för att ge bästa resultat med avseende på mängden analytersom extraherats. Fortsättningsvis så drogs slutsatsen att då UAE ska användas så är acetonitril att föredra över metanol som lösningsmedel. Den här studien är en översikt av den tidigare nämnda metodiken.

Solid phase extraction (SPE) has become a popular sample preparation method for the extraction of analytes from complex matrices. Solid phase extraction overcomes such disadvantages as large solvent usage and waste, large amounts of time spent in sample preparation and labor intensive methods with little hope of automation. In this report, SPEC®⋅ Microcolumns are evaluated for the extraction of Zantac® (ranitidine hydrochloride) from urine for high performance liquid chromatography (HPLC) analysis. SPEC®⋅Microcolumns are rigid disc structures with glass fiber impregnated with silica gel. These microcolumns look like packed-bed SPE cartridges but have the advantages of low void volumes and low bed mass that give clean extracts with the use of small amounts of solvents. An SPE method was developed and evaluated for the recovery of Zantac® from water and spiked urine. Percent recoveries and matrix interferences are reported. The limit of detection and analytical range tor the HPLC method of analysis with ultraviolet detection will be presented. / Master of Science