Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-04-23T13:12:37Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Maria Augusta Alves Silva - 2014.pdf: 3616508 bytes, checksum: ff3549d426c3e4da5a2e979383c5aa23 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-04-23T13:15:41Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Maria Augusta Alves Silva - 2014.pdf: 3616508 bytes, checksum: ff3549d426c3e4da5a2e979383c5aa23 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-23T13:15:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Maria Augusta Alves Silva - 2014.pdf: 3616508 bytes, checksum: ff3549d426c3e4da5a2e979383c5aa23 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-02-12 / The toxicological analyzes on various samples are extremely important and can be used for multiple purposes, such as monitoring of drug addicts, forensic analysis, doping control, therapeutic monitoring, analyses of environmental contaminants, etc. The objective of this study was to analyze post - mortem blood samples of the Instituto de Criminalística de Goiás (IC) by immunochromatography and systematic toxicological analysis HPLC - PDA to check the presence or absence of toxic agents. The chromatographic conditions of the method were: mobile phase monobasic potassium phosphate buffer pH 2.3 and acetonitrile, flow rate 1 ml / min, Lichrospher RP8 column, 5μm, 250 x 4.0 mm, scanning range 200-380 nm, the calibration standards were MPPH system, caffeine, benzene and histamine. It was used the database proposed by UVTOX Pragst et al (2001). As part of the partial validation the matrix effect was evaluated by liquid-liquid extraction of whole blood samples contaminated with 8 standards in known concentration. The whole blood samples were extracted at different pH values and analyzed by HPLC -PDA. Through the areas obtained from each standard, it was calculated the standardized factor matrix which showed a coefficient of variation less than 10 %. In order to compare two screening techniques for detection of drugs of abuse, post-mortem blood samples from the IC (n = 35) were also analyzed by immunochromatography, yielding 10 samples positive for amphetamine, 3 for benzoylecgonine and 1 for Δ9THC. The ATS by HPLC – PDA analyses showed only 1 sample positive for benzoylecgonine, 2 samples for amphetamines, and 3 benzodiazepines. In the other samples, no substance toxicological interest was detected. Both immunochromatography as systematic toxicological analysis proved useful tools in screening post-mortem blood. / As análises toxicológicas em diversas amostras são de extrema importância e podem ter várias finalidades, como por exemplo, o monitoramento de dependentes químicos, análises forense, controle de doping, monitoramento terapêutico, análise de contaminantes ambientais dentre outras. O objetivo deste trabalho foi analisar amostras de sangue post-mortem do Instituto de Criminalística de Goiás (IC) através de imunocromatografia e análise toxicológica sistemática por HPLC-PDA para a verificação da presença ou ausência de agentes tóxicos. As condições cromatográficas do método foram: fase móvel tampão fosfato de potássio monobásico pH 2,3 e acetonitrila, fluxo de 1 mL/min, coluna Lichrospher RP8, 5μm, 250 x 4,0mm, faixa de varredura de 200 a 380 nm. Os padrões de calibração utilizados foram MPPH, cafeína, benzeno e histamina. A base de dados utilizada foi a UVTOX proposta por Pragst e colaboradores (2001). Na validação parcial foi avaliado o efeito matriz através da extração líquido-líquido de amostras de sangue total contaminada com padrões de hidroclorotiazida, furosemida, flunitrazepam, flurazepam, amitriptilina, clordiazepóxido, nitrazepam e diazepam, na concentração de de 10 g/mL. As amostras de sangue total foram extraídas em diferentes valores de pH e analisadas por HPLC-PDA. Através das áreas obtidas de cada padrão, calculou-se o fator de matriz normalizado que apresentou coeficiente de variação inferior a 10%. Com o intuito de comparar duas técnicas de triagem para detecção de drogas de abuso, amostras de sangue post-mortem do IC (n=35) foram analisadas também por imunocromatografia, obtendo-se 10 amostras positivas para anfetamina, 3 para benzoilecgonina e 1 para Δ9THC. Por outro lado, na ATS por HPLC-PDA apenas 1 amostra foi positiva para benzoilecgonina, 2 anfetaminas, e outras 3 para benzodiazepínicos. Nas demais amostras não foi detectada nenhuma substância de interesse toxicológico. Tanto a imunocromatografia quanto a análise toxicológica sistemática se mostraram ferramentas úteis na triagem de sangue post-mortem.

Estima-se atualmente que mais de 5% da população mundial vem fazendo uso recreativo de algum tipo de substância psicoativa, sendo que o direito a esse uso é tema recorrente da sociedade contemporânea. Por apresentar riscos associados à saúde e a segurança das populações, o uso abusivo dessas substâncias tem instigado a toxicologia social na busca de respostas, com as quais se possa caracterizar, analisar e gerenciar esses riscos. Drogas de grande consumo no Brasil são a anfetamina, cocaína e Cannabis sativa. Esta tese desenvolveu uma nova metodologia para detectar e quantificar anfetamina, cocaína e tetrahidrocanabinol em sangue total, com uso de microextração em fase líquida via fibra de polipropileno (HF-LPME), seguida de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (GC-MS). Trata-se de uma técnica que apresenta vantagens sobre as tradicionais, uma vez que demanda quantidades menores de solvente orgânico, diminuindo riscos e custos de processo. Também propôs um estudo com a aplicação dos métodos em 69 amostras de sangue de vivos e de post mortem, as quais foram obtidas por convênio com a superintendência da polícia técnica científica de São Paulo (SPTC/SP). Os métodos desenvolvidos foram validados de acordo com diretrizes internacionais de interesse forense. Como resultado da validação, os métodos desenvolvidos se mostraram precisos e exatos para anfetamina e cocaína. O limite de detecção da cocaína foi de 5 ng . mL-1 e o limite de quantificação de 10 ng . mL-1. Quanto a anfetamina, os limites de detecção e de quantificação foram de 5 ng . mL-1. A técnica de HF-LPME não foi aplicável ao tetraidrocanabinol (Δ9-THC). Como resultado da análise das amostras, 40% delas apresentaram resultados positivos para cocaína. Desses positivos, 35% foram oriundos das matrizes de sangue de vivos e 64% oriundos de sangue post mortem. Nenhuma delas apresentou resultado quantificável para anfetamina. / It is currently estimated that more than 5% of the world\'s population has been doing recreational use of some kind of psychoactive substances and the legal right to such use is a recurring theme debated by contemporary society. Due to the risks associated with populations health and safety, the abusive use of these substances has been instigating by social toxicology to search for answers to characterize, analyze and manage these risks. Drugs of great consumption in Brazil are, amphetamine cocaine and marijuana. This thesis proposes to develop a new methodology to detect and quantify psychoactive drugs in whole blood with the use of liquid phase microextraction by polypropylene fiber (HFLPME), followed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). It is a technique that presents advantages compared with traditional ones, because of the smaller amounts demands of organic solvent, reducing risks and process costs. It also proposes a study with 69 blood samples taken from living persons and post mortem blood samples, which were obtained by agreement with the Superintendency of São Paulo Scientific Technical Police (SPTC / SP). The methods developed were validated according to international guidelines of forensic interest. As a result of the validation, the methods developed were precise and accurate for amphetamine and cocaine. The limit of cocaine detection was 5 ng . mL-1 and the limit of quantification was 10 ng . mL-1. As for amphetamine, the limits of detection and quantification were 5 ng . mL-1. The HF-LPME technique was not applicable to tetrahydrocannabinol (Δ9-THC). As a result of the sample analysis, 40% of them presented positive results for cocaine. Of these, 35% were from blood samples taken from living persons and 64% from the post mortem blood samples. None of the samples presented quantifiable results for amphetamine.

Estima-se atualmente que mais de 5% da população mundial vem fazendo uso recreativo de algum tipo de substância psicoativa, sendo que o direito a esse uso é tema recorrente da sociedade contemporânea. Por apresentar riscos associados à saúde e a segurança das populações, o uso abusivo dessas substâncias tem instigado a toxicologia social na busca de respostas, com as quais se possa caracterizar, analisar e gerenciar esses riscos. Drogas de grande consumo no Brasil são a anfetamina, cocaína e Cannabis sativa. Esta tese desenvolveu uma nova metodologia para detectar e quantificar anfetamina, cocaína e tetrahidrocanabinol em sangue total, com uso de microextração em fase líquida via fibra de polipropileno (HF-LPME), seguida de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (GC-MS). Trata-se de uma técnica que apresenta vantagens sobre as tradicionais, uma vez que demanda quantidades menores de solvente orgânico, diminuindo riscos e custos de processo. Também propôs um estudo com a aplicação dos métodos em 69 amostras de sangue de vivos e de post mortem, as quais foram obtidas por convênio com a superintendência da polícia técnica científica de São Paulo (SPTC/SP). Os métodos desenvolvidos foram validados de acordo com diretrizes internacionais de interesse forense. Como resultado da validação, os métodos desenvolvidos se mostraram precisos e exatos para anfetamina e cocaína. O limite de detecção da cocaína foi de 5 ng . mL-1 e o limite de quantificação de 10 ng . mL-1. Quanto a anfetamina, os limites de detecção e de quantificação foram de 5 ng . mL-1. A técnica de HF-LPME não foi aplicável ao tetraidrocanabinol (Δ9-THC). Como resultado da análise das amostras, 40% delas apresentaram resultados positivos para cocaína. Desses positivos, 35% foram oriundos das matrizes de sangue de vivos e 64% oriundos de sangue post mortem. Nenhuma delas apresentou resultado quantificável para anfetamina. / It is currently estimated that more than 5% of the world\'s population has been doing recreational use of some kind of psychoactive substances and the legal right to such use is a recurring theme debated by contemporary society. Due to the risks associated with populations health and safety, the abusive use of these substances has been instigating by social toxicology to search for answers to characterize, analyze and manage these risks. Drugs of great consumption in Brazil are, amphetamine cocaine and marijuana. This thesis proposes to develop a new methodology to detect and quantify psychoactive drugs in whole blood with the use of liquid phase microextraction by polypropylene fiber (HFLPME), followed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). It is a technique that presents advantages compared with traditional ones, because of the smaller amounts demands of organic solvent, reducing risks and process costs. It also proposes a study with 69 blood samples taken from living persons and post mortem blood samples, which were obtained by agreement with the Superintendency of São Paulo Scientific Technical Police (SPTC / SP). The methods developed were validated according to international guidelines of forensic interest. As a result of the validation, the methods developed were precise and accurate for amphetamine and cocaine. The limit of cocaine detection was 5 ng . mL-1 and the limit of quantification was 10 ng . mL-1. As for amphetamine, the limits of detection and quantification were 5 ng . mL-1. The HF-LPME technique was not applicable to tetrahydrocannabinol (Δ9-THC). As a result of the sample analysis, 40% of them presented positive results for cocaine. Of these, 35% were from blood samples taken from living persons and 64% from the post mortem blood samples. None of the samples presented quantifiable results for amphetamine.