Neste trabalho, a irradiação por feixe de elétrons foi estudada como uma ferramenta para a reticulação do tecido de pericárdio bovino (PB). A conjugação de quitosana e fibroína de seda no tecido de PB liofilizado também foi objeto de estudo deste trabalho. Para isto, amostras de PB foram liofilizadas e irradiadas em um acelerador de elétrons utilizando-se diferentes doses e taxas de dose. Essas amostras foram analisadas por calorimetria exploratória diferencial (DSC), análises termogravimétricas (TGA), espectroscopia Raman, teste de intumescimento, microscopia eletrônica de varredura (MEV), microscopia eletrônica de transmissão (MET), testes de tração e quanto sua biofuncionalidade. Após as análises foi possível concluir que a irradiação do tecido na ausência de oxigênio favorece a reticulação das fibras de colágeno, enquanto na presença de oxigênio observou-se preferencialmente a cisão das fibras de colágeno. Ambas as amostras apresentaram diminuição de suas propriedades mecânicas. Também pôde-se concluir que a irradiação tanto na ausência quanto na presença de oxigênio produz um novo biomaterial cuja adesão e proliferação de células endoteliais é favorecida ao longo do tecido. Na segunda etapa deste trabalho amostras de PB liofilizadas foram incorporadas em soluções de quitosana, fibroína de seda e suas misturas (1:3, 1:1, 3:1). Depois de modificadas, as amostras foram novamente liofilizadas e submetidas à irradiação. Estas amostras foram caracterizadas por espectroscopia Raman, e avaliadas quanto sua citotoxicidade, biofuncionalidade e potencial de calcificação. Após lavagens das amostras de biomaterial com solução aquosa (NaCl 0,9%), as mesmas não apresentaram toxicidade. O teste de biofuncionalidade mostrou que as amostras de PQSFI (todas as proporções) favoreceram a adesão e crescimento das células endoteliais. Todas as amostras induziram a calcificação, entretanto apresentaram uma relação Ca/P menor do que a da hidroxiapatita. / In this work, electron beam irradiation was studied as a crosslinker of bovine pericardium tissue (BP). The treatment of BP with chitosan and silk fibroin was also the goal of this study. Samples of BP were freeze-dried and irradiated in an electron beam accelerator using different doses and dose rates. Samples were analyzed by differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetric analysis (TGA), Raman spectroscopy, water uptake tests, scanning electron microscopy (SEM), transmission electron microscopy (TEM), tensile tests and evaluation as biofunctionality. After analysis, it was concluded that irradiation of the tissue in the absence of oxygen promotes crosslinking of collagen fibers. On the other hand, in the presence of oxygen the chain scission of the collagen fibers was observed, and both samples suffered a decrease in their mechanical properties. It was also concluded that irradiation, both in the absence or presence of oxygen, promotes the adhesion and proliferation of endothelial cells throughout the tissue. In the second part of this work, lyophilized BP were incorporated into chitosan, silk fibroin solutions and mixtures of chitosan/silk fibroin in the ratio of 1:3, 1:1, 3:1. Then, the samples were again lyophilized and submitted to irradiation. These samples were characterized by Raman spectroscopy, and tested for their cytotoxicity, biofunctionality, and calcification. After washing the biomaterial with aqueous solution (NaCl 0.9%), the samples did not show cytotoxicity. Biofunctionality test showed that PQSFI samples (all proportions) promoted the adhesion and growth of endothelial cells. All samples induced calcification, but they exhibited a Ca/P ratio lower than hydroxyapatite.

A fibroína da seda (SF) é uma proteína fibrosa, com caráter hidrofóbico, produzida pelo bicho-da-seda (Bombyx mori L.), cuja produção e armazenamento ocorre em glândulas especializadas antes do processo de fiação em fibras. Recentemente, soluções de fibroína de seda regenerada (RSF) têm sido utilizadas para formar diferentes materiais tais como géis, membranas, filmes e esponjas, para aplicações médicas (Medicina Regenerativa) e em sistemas de liberação de fármacos. Neste trabalho, procuramos estudar o comportamento da solução RSF 2% com adição de 0,25, 0,5 e 1% de PVA (polímero sintético e hidrofílico) por meio de ensaios de reologia dos géis obtidos (SF:PVA), e caracterização das membranas obtidas por meio da secagem em moldes dos géis. Os ensaios de reologia mostraram uma inversão de módulos, com transição de caráter elástico (G\') para viscoso (G\") para SF1 a 3%, entre 230 e 900% de deformação (\'gama\'); transição de caráter viscoso para elástico para as blendas SF:PVA 0,5 e 1% em ensaio de frequência (\'ômega\'). Com o aumento de temperatura, todas as blendas mantiveram seus comportamentos elástico (SF:PVA 0,25%) e viscoso (SF:PVA 0,5 e 1%) até 49 - 51°C, com transição líquido-gel; o aumento dos módulos G\' e G\"com o resfriamento das amostras ocorreu em todas as blendas. As membranas obtidas das blendas SF:PVA tiveram maior absorção de tampão fosfato salino (PBS) após 5 min de ensaio, no qual a blenda SF:PVA apresentou maiores valores de absorção. A caracterização das membranas por FT-IR ATR e DRX mostrou que ocorreu uma transição de conformação aleatória e hélice \'alfa\' para folha \'beta\', para todas as membranas, indicando que a adição do PVA nas blendas promoveu transições silk I para silk II. Deslocamentos de modo vibracional de 1.637/cm (amida I) para 1.616/cm (amida I) com modo centrado em 1.512/cm (amida II) foram vistos em todas as blendas no FT-IR ATR, e difratogramas apresentaram picos característicos às estruturas silk I (2\'teta\' = 10,12º, 2\'teta\' = 12,2° e 2\'teta\' = 28,2º) e silk II (2\'teta\' = 20 - 21 °1). TGA e DSC mostraram uma interação entre as cadeias de RSF c PVA, pela presença de uma temperatura única ele transição vítrea (Tg) entre RSF e PVA. Imagens AFM das blendas mostraram a presença de estruturas nanofibrilares, em formato de ilhas compactas e ramos, confirmando a transição da fase amorfa de SF 2% para hélice \'alfa\' e folha \'beta\', com a adição do PVA. / Silk fibroin (SF) is a fibrous hydrophobic protein produced by silkworms (Bombyx mori L.), which production and storage occur into specialized glands previously fiber formation. Lately, regenerated silk fibroin (RSF) solutions have been used to produce different materials such as gels, membranes, films and sponges, for medical applications and drug delivery systems. In this study, the RSF with 0.25, 0.5 anel 1% PVA (synthetic and hydrophilic polymer) blends were characterized by rheological tests of the gels (SF:PVA), also membranes produced by casting process were characterized as well. Rheological tests showed moduli inversion with elastic to viscous behavior transition for SF 1 to 3%, between 230 anel 900% of strain (\'gama\'); a transition fram viscous to elastic behavior to SF:PVA 0.5 to 1% blends into frequency sweep tests was observed. With the temperature increment, all blends have kept their viscous anel elastic behavior until 49 - 51°C, and a liquid-gel transition occurred in the SF:PVA 0.5 and 1% blends, as well as all moduli have increased with the cooling stage of the samples. All membranes had the highest buffer absorption after 5 min of test, in which SF:PVA 0.5% blend presented high absorption values. FT-IR spectra and XRD diffractograms showed a transition from random and \'alfa\'-helix to \'beta\'-sheet, for all blends, indicating that PVA addition promotes silk I to silk II transition. Modal shifts were observed from 1.637/cm (amide I) to 1.616/cm (amide I) with a central mode in 1.512/cm (amide II) in all blends in the FT-IR ATR spectra. XRD diffractograms showed characteristic peaks of silk I structures (2\'teta\' = 10,12°, 2\'teta\' = 12,2° e 2\'teta\' = 28,2°) and silk II structures (2\'teta\' = 20 - 21 °1). TGA and DSC studies showed the possibility of interaction between SF and PVA chains by acquirement of mobility at once, at an intermediate temperature between SF anel PVA glass transition (Tg). AFM images exhibited different phases for all membranes, with the presence of nanofibers, wires, rods and branch islands, suggesting the formation of more organized structures, such as and \'alfa\'-helix and \'beta\'-sheet, with PVA addition.

Biomateriais que promovem e auxiliam a regeneração óssea vêm ganhando grande visibilidade em pesquisas na área de engenharia tecidual, em destaque os biocompósitos a partir de cerâmicas e polímeros. Muitos desafios abrangem essa área de pesquisa, sendo o principal, criar um material que mais se assemelha ao osso, não só em sua resistência mecânica, mas também em sua bioatividade e porosidade. Esse projeto tem como foco o desenvolvimento e processamento de blocos de biocompósito formados a partir de hidroxiapatita (HAp) e fibroína de seda (FS). A fibroína de seda, obtida a partir dos casulos do bicho-da-seda, foi lavada em solução de carbonato de sódio com concentração de 5% por 30 minutos. Sua dissolução foi realizada através de solução ternária contendo cloreto de cálcio, etanol e água, na proporção molar de 1:2:8. A HAp foi co-precipitada na FS dissolvida em solução ternária através de solução de fosfato (Na2HPO4) sob agitação constante. Os blocos foram prensados manualmente e avaliou-se sua morfologia, relação Ca/P e absorção de líquido definindo a melhor proporção de %HAp e %FS. Após a determinação da proporção 75%HAp e 25% FS, os blocos foram conformados em prensa hidráulica com pressões fixas de 50 e 100 MPa. As características morfológicas foram avaliadas através de análises de MEV, porosidade, absorção de líquidos, microtomografia computadorizada (?-CT) e medição da área superficial específica (BET). As características químicas e estruturais foram analisadas por EDS, FTIR, TGA e DRX. Além disso, avaliou-se a resistência à compressão, a bioatividade e a citotoxicidade do biocompósito. Os resultados mostram que o biocompósito estudado apresenta características químicas e estruturais próxima ao osso trabecular, resistência à compressão entre 2 e 10 MPa e porosidade entre 30% e 70%, é biocompatível e possui capacidade de formação de apatita. O biomaterial em estudo apresenta-se como uma boa perspectiva na área de engenharia tecidual óssea. / Biomaterials that promote and aid bone regeneration have gained great visibility in tissue engineering research, with emphasis on biocomposites from ceramics and polymers. Many challenges cover this area, the main is being to create a material similar to bone, not only in its mechanical strength but also in its bioactivity and porosity. This project focuses on the development and processing of biocomposite blocks formed by hydroxyapatite (HAp) and silk fibroin (SF). The silk fibroin, obtained from the cocoons of the silkworm, was washed in 5% sodium carbonate solution for 30 minutes. Its dissolution was carried out through a ternary solution containing calcium chloride, ethanol and water, in a molar ratio of 1: 2: 8. The HAp was co-precipitated in SF dissolved in ternary solution through phosphate solution (Na2HPO4) under constant stirring. The blocks were manually pressed and their morphology, Ca/P ratio and liquid absorption were evaluated to determine the best HAp/FS ratio. After defined the best ratio, 75%HAp and 25% FS, blocks were formed in a hydraulic press with fixed pressures (50 and 100 MPa). The morphological characteristics were evaluated by SEM, Porosity, Liquid Absorption, Computerized Microtomography (?-CT) and specific surface area (BET). The chemical and structural characteristics were analyzed by EDS, FTIR, TGA and XRD. In addition, the compressive strength, bioactivity and cytotoxicity of the composite were evaluated. The results show a biocomposite with chemical and structural characteristics close to the trabecular bone, mechanical resistance between 2 and 10 MPa and porosity between 30% and 70%, it is biocompatible and with apatite formation capacity. The biomaterial studied presents a good perspective in the field of bone tissue engineering.

Neste trabalho, a irradiação por feixe de elétrons foi estudada como uma ferramenta para a reticulação do tecido de pericárdio bovino (PB). A conjugação de quitosana e fibroína de seda no tecido de PB liofilizado também foi objeto de estudo deste trabalho. Para isto, amostras de PB foram liofilizadas e irradiadas em um acelerador de elétrons utilizando-se diferentes doses e taxas de dose. Essas amostras foram analisadas por calorimetria exploratória diferencial (DSC), análises termogravimétricas (TGA), espectroscopia Raman, teste de intumescimento, microscopia eletrônica de varredura (MEV), microscopia eletrônica de transmissão (MET), testes de tração e quanto sua biofuncionalidade. Após as análises foi possível concluir que a irradiação do tecido na ausência de oxigênio favorece a reticulação das fibras de colágeno, enquanto na presença de oxigênio observou-se preferencialmente a cisão das fibras de colágeno. Ambas as amostras apresentaram diminuição de suas propriedades mecânicas. Também pôde-se concluir que a irradiação tanto na ausência quanto na presença de oxigênio produz um novo biomaterial cuja adesão e proliferação de células endoteliais é favorecida ao longo do tecido. Na segunda etapa deste trabalho amostras de PB liofilizadas foram incorporadas em soluções de quitosana, fibroína de seda e suas misturas (1:3, 1:1, 3:1). Depois de modificadas, as amostras foram novamente liofilizadas e submetidas à irradiação. Estas amostras foram caracterizadas por espectroscopia Raman, e avaliadas quanto sua citotoxicidade, biofuncionalidade e potencial de calcificação. Após lavagens das amostras de biomaterial com solução aquosa (NaCl 0,9%), as mesmas não apresentaram toxicidade. O teste de biofuncionalidade mostrou que as amostras de PQSFI (todas as proporções) favoreceram a adesão e crescimento das células endoteliais. Todas as amostras induziram a calcificação, entretanto apresentaram uma relação Ca/P menor do que a da hidroxiapatita. / In this work, electron beam irradiation was studied as a crosslinker of bovine pericardium tissue (BP). The treatment of BP with chitosan and silk fibroin was also the goal of this study. Samples of BP were freeze-dried and irradiated in an electron beam accelerator using different doses and dose rates. Samples were analyzed by differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetric analysis (TGA), Raman spectroscopy, water uptake tests, scanning electron microscopy (SEM), transmission electron microscopy (TEM), tensile tests and evaluation as biofunctionality. After analysis, it was concluded that irradiation of the tissue in the absence of oxygen promotes crosslinking of collagen fibers. On the other hand, in the presence of oxygen the chain scission of the collagen fibers was observed, and both samples suffered a decrease in their mechanical properties. It was also concluded that irradiation, both in the absence or presence of oxygen, promotes the adhesion and proliferation of endothelial cells throughout the tissue. In the second part of this work, lyophilized BP were incorporated into chitosan, silk fibroin solutions and mixtures of chitosan/silk fibroin in the ratio of 1:3, 1:1, 3:1. Then, the samples were again lyophilized and submitted to irradiation. These samples were characterized by Raman spectroscopy, and tested for their cytotoxicity, biofunctionality, and calcification. After washing the biomaterial with aqueous solution (NaCl 0.9%), the samples did not show cytotoxicity. Biofunctionality test showed that PQSFI samples (all proportions) promoted the adhesion and growth of endothelial cells. All samples induced calcification, but they exhibited a Ca/P ratio lower than hydroxyapatite.

Blendas poliméricas de biopolímeros, além de apresentarem uma melhora das propriedades do material, ainda possuem as vantagens de serem biocompatíveis, biodegradáveis e apresentar baixa toxicicidade, como no caso de blendas de alginato de sódio e fibroína de seda. Membranas confeccionadas a partir desta mistura apresentam grande potencial no desenvolvimento de curativos de alto desempenho, proporcionando condições ótimas de cicatrização. Entretanto, o processo de mistura destes biopolímeros é bastante complexo e resulta na separação de fases, processo que ainda não foi muito explorado. Este trabalho buscou explorar experimentalmente o comportamento do equilíbrio de fases dos sistemas aquosos contendo fibroína de seda e alginato de sódio em diversos valores de pH. Soluções aquosas de fibroína foram previamente preparadas por meio de processo de diálise, e soluções de alginato, por meio de dissolução direta em água. Ambas as soluções eram misturadas em concentrações em que se desejava avaliar o comportamento de fases. Após a separação de fases, a fase líquida sobrenadante era coletada, a fibroína quantificada via espectrofotometria e o alginato, via calcinação. Observou-se que a região monofásica do diagrama de fases é pequena, e a separação de uma segunda fase ocorre em concentrações baixas dos dois biopolímeros. A separação de fases pôde ser descrita como a precipitação da fibroína pela adição de alginato, e a solubilidade da fibroína pôde ser descrita por meio da equação de Cohn. As curvas de solubilidade obtidas não apresentaram diferenças significativas em função do pH. Medidas do potencial Zeta de soluções de alginato e fibroína em diversas faixas de pH não mostraram diferenças significativas quanto à carga superficial das moléculas, o que é compatível com a ausência de influência do pH no equilíbrio de fases. / Polymer blends formed by biopolymers may show an improvement of material properties (compared to the pure biopolymers), and present advantages such as biocompatibility, biodegradability and low toxicity. An interesting biopolymer blend is that formed by sodium alginate and silk fibroin. Membranes prepared with this mixture show great potential in the development of high-performance wound dressing, since it provides optimum healing conditions. However, the mixing process of these two biopolymers is complex and has not been extensively explored. In this work the phase equilibrium behavior of aqueous systems containing silk fibroin and sodium alginate was experimentally studied at different pH values. Fibroin aqueous solutions were previously prepared through dialysis, and alginate solutions were prepared by direct dissolution in water. Both solutions were mixed at the concentration range in which the phase behavior of the system was to be assessed. After phase separation, the supernatant liquid phase was separated, the fibroin was quantified through spectrophotometry. and the alginate was quantified through calcination. The single-phase region of the phase diagram is small, and the separation of a second phase occurs at low concentrations of both biopolymers. The phase separation could be described as the precipitation of fibroin due to the addition of alginate, and the solubility of fibroin was described by the Cohn equation. The solubility was not significantly affected by the pH. The Zeta potential of either alginate or fibroin, measured in solutions of different pH values, did not present any significant difference concerning the surface charges of these macromolecules. This finding agrees with the absence of pH influence upon the phase equilibrium.

Blendas poliméricas de biopolímeros, além de apresentarem uma melhora das propriedades do material, ainda possuem as vantagens de serem biocompatíveis, biodegradáveis e apresentar baixa toxicicidade, como no caso de blendas de alginato de sódio e fibroína de seda. Membranas confeccionadas a partir desta mistura apresentam grande potencial no desenvolvimento de curativos de alto desempenho, proporcionando condições ótimas de cicatrização. Entretanto, o processo de mistura destes biopolímeros é bastante complexo e resulta na separação de fases, processo que ainda não foi muito explorado. Este trabalho buscou explorar experimentalmente o comportamento do equilíbrio de fases dos sistemas aquosos contendo fibroína de seda e alginato de sódio em diversos valores de pH. Soluções aquosas de fibroína foram previamente preparadas por meio de processo de diálise, e soluções de alginato, por meio de dissolução direta em água. Ambas as soluções eram misturadas em concentrações em que se desejava avaliar o comportamento de fases. Após a separação de fases, a fase líquida sobrenadante era coletada, a fibroína quantificada via espectrofotometria e o alginato, via calcinação. Observou-se que a região monofásica do diagrama de fases é pequena, e a separação de uma segunda fase ocorre em concentrações baixas dos dois biopolímeros. A separação de fases pôde ser descrita como a precipitação da fibroína pela adição de alginato, e a solubilidade da fibroína pôde ser descrita por meio da equação de Cohn. As curvas de solubilidade obtidas não apresentaram diferenças significativas em função do pH. Medidas do potencial Zeta de soluções de alginato e fibroína em diversas faixas de pH não mostraram diferenças significativas quanto à carga superficial das moléculas, o que é compatível com a ausência de influência do pH no equilíbrio de fases. / Polymer blends formed by biopolymers may show an improvement of material properties (compared to the pure biopolymers), and present advantages such as biocompatibility, biodegradability and low toxicity. An interesting biopolymer blend is that formed by sodium alginate and silk fibroin. Membranes prepared with this mixture show great potential in the development of high-performance wound dressing, since it provides optimum healing conditions. However, the mixing process of these two biopolymers is complex and has not been extensively explored. In this work the phase equilibrium behavior of aqueous systems containing silk fibroin and sodium alginate was experimentally studied at different pH values. Fibroin aqueous solutions were previously prepared through dialysis, and alginate solutions were prepared by direct dissolution in water. Both solutions were mixed at the concentration range in which the phase behavior of the system was to be assessed. After phase separation, the supernatant liquid phase was separated, the fibroin was quantified through spectrophotometry. and the alginate was quantified through calcination. The single-phase region of the phase diagram is small, and the separation of a second phase occurs at low concentrations of both biopolymers. The phase separation could be described as the precipitation of fibroin due to the addition of alginate, and the solubility of fibroin was described by the Cohn equation. The solubility was not significantly affected by the pH. The Zeta potential of either alginate or fibroin, measured in solutions of different pH values, did not present any significant difference concerning the surface charges of these macromolecules. This finding agrees with the absence of pH influence upon the phase equilibrium.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009 - Maurilia Rosa.pdf: 1267730 bytes, checksum: 83f63cab4df91abac0ab57c414b16bd6 (MD5) Previous issue date: 2009-07-24 / Ocular eye and adnexa examination is a routine in Veterinary practice. Diagnostic and treat diseases that affect domestic animals site is the main goal of these procedures. The importance of this research was the electrophysiology study of equine retina thru an FullField ERG examination in standing horses intravenouslly sedated, with auriculopalpebral nerve block and corneal topical anesthesia. Protocols and procedures used in clinical ERG were according International Society of Clinical Electrophysiology of Vision (ISCEV) standards. In this study, forty healthy horses were evaluated by FullField ERG. In the present study, 15 males and 25 mares, aging between 2 months to 18 years (m?dian age 4,6 years). Horses were randomly allocated into eight groups according sedative drugs as Xylazine, Romifidine, Detomidine, Medetomidine and corneal electrode ERG-Jet Electrode (ERG-jet), Dowson Trick Litzkow (DTL-plus) types. Group 1 was GXDTL, Group 2 GDDTL, Group 3 GRDTL, Group 4 GMDTL, Group 5 GXERG, Group 6 GDERG, Group7 GRERG, and Group 8 GMERG. In all groups a-b complex amplitude and implicit times were investigated and compared for both eyes. Quality and costs of sedation drugs were estimated. This research leads to the conclusion that was differences between corneal electrodes and ERG-jet showed safer and more practical during ERG examination. There were no difference between drugs sedation effect but Detomidine and Medetomidine showed better results to promote sedation during examination than Romifidine and Xylazine. The sedation protocol using Romifidine showed the lowest cost. / O exame oft?lmico ? uma pr?tica rotineira na Medicina Veterin?ria que objetiva identificar e tratar as afec??es do globo ocular e anexos dos animais dom?sticos. Neste trabalho estudamos a eletrofisiologia da vis?o do eq?ino, atrav?s do exame de eletrorretinografia de campo total, com o uso de seda??o e bloqueio anest?sico, com o animal na posi??o quadr?pede. Para execu??o dos exames, estabeleceu-se um protocolo b?sico de acordo com as normas e recomenda??es do International Society for Clinical Eletrophysiology of Vision (ISCEV), Foram avaliados 40 equinos considerados normais ap?s exame oft?lmico, sendo 15 machos e 25 f?meas, com idade variando entre dois meses a 18 anos (m?dia de 4,6 anos) pelo de exame de Eletrorreninografia de Campo Total e na posi??o qudr?pede. Os animais foram divididos em oito grupos em fun??o do f?rmaco sedativo (Xilazina, Romifidina, Detomidina e Medetomidina), e do tipo de eletrodo utilizados ERG - Jet Electrode (ERG-Jet) e Dowson Trick Litzkow (DTL). Foram ent?o assim denominados; o Grupo 1: GXDTL, Grupo 2: GDDTL, Grupo3: GRDTL, Grupo4: GMDTL, Grupo5: GXERG, Grupo 6: GDERG, Grupo 7: GRERG e o Grupo 8: GMERG. Em todos os grupos mensuraram-se os valores das amplitudes de pico das ondas a e b , seus implicit time , para os olhos direito e esquerdo. Tamb?m foram avaliados o tempo, a qualidade e o custo da seda??o. Conclu?mos que houve diferen?a entre os eletrodos avaliados, e que o eletrodo ERG-jet mostrou-se mais adequado em raz?o da sua seguran?a e praticidade de utiliza??o. As drogas estudadas n?o diferiram entre si quanto aos resultados do eletrorretinograma, por?m a Detomidina e Medetomidina apresentaram um desempenho superior em rela??o ? Romifidina e ? Xilazina na efici?ncia de conten??o e facilita??o do exame. A seda??o com Romifidina foi a que representou menor custo de execu??o.

Made available in DSpace on 2017-07-10T14:17:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AMPOLA DOS _ MALPIGHI DE Bombyx mori PELO ALPHABACULOVIRUS.pdf: 2176663 bytes, checksum: 866566cf54573cb621db0597bbb30516 (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Bombyx mori nucleopolyhedrovirus (BmNPV) is an entomopathogenic virus Baculoviridae family, Alphabaculovirus genre, which infects the silkworm, Bombyx mori and causes nuclear polyhedrosis disease. A viral geographic isolated from BmNPV was identified in the state of Paraná, Brazil, and a number of organs and target tissues were identified, but there is no information about the infection of Malpighian tubules (MT). MT make up the excretory system of B. mori, acting in the elimination of toxic substances and electrolyte homeostasis. This study aimed to analyze the behavior on the susceptibility and cytopathology of MT B. mori to BmNPV. Therefore, hybrid B.mori caterpillars at 5º instar, were inoculated experimentally with a viral suspension of BmNPV. On different days post-inoculation (dpi), the 4° to 9° dpi, MT segments were collected, divided in regions of the ampullae, proximal, medial and distal; following the processing for light and electron microscopy transmission. Material control followed the same process that the inoculated. The results showed that B. mori MT showed variations in their morphology and susceptibility to BmNPV according to the analyzed region. Thus, the region of the ampullae in its transition area to the proximal, appeared susceptible to BmNPV, from 6° dpi, while other regions showed no evidence of infection by the pathogen. The transition area is a small region which is located at the end of the ampullae and the beginning of the proximal region of MT. The cellular morphology of simple lining epithelium showed continuous variation of pavement, characteristic of the ampullae, the cylindrical, in the transition area; already continuous with the proximal region of MT, this morphological change was abruptly. The cytopathology revealed in hypertrophic nucleus, viroplasm containing the nucleocapsid and viral polyhedra. At the end of the infectious cycle was observed cytolysis of infected cells, releasing polyhedra in the extracellular medium, both in hemocele as in MT lumen, a factor that may favor the transmission of the disease. Thus, infection of the ampullae in its transition area to the proximal region, will contribute to greater scientific knowledge of cytopathology aspects and targets of infection from this virus isolated geographical, for the establishment of its infectious cycle of the insect's body BmNPV / Bombyx mori nucleopolyhedrovirus (BmNPV) é um vírus entomopatogênico da família Baculoviridae, gênero Alphabaculovirus, que infecta o bicho-da-seda, Bombyx mori (Lepidoptera: Bombycidae) e causa a doença poliedrose nuclear. Um isolado geográfico viral do BmNPV foi identificado no estado do Paraná, Brasil, e uma série de órgãos e tecidos alvos foram identificados, porém não há informações sobre a infecção dos túbulos de Malpighi (TM). Os TM compõem o sistema excretor de B. mori, atuando na eliminação de substâncias tóxicas e na homeostase hidroeletrolítica. Assim, este estudo objetivou analisar o comportamento referente à susceptibilidade e citopatologia dos TM de B. mori ao BmNPV. Para tanto, lagartas híbridas de B. mori, 5° instar, foram inoculadas experimentalmente com uma suspensão viral de BmNPV. Em diferentes dias pós-inoculação (dpi), do 4° ao 9° dpi, segmentos dos TM foram coletados, subdivididos nas regiões da ampola, proximal, média e distal; seguindo o processamento para as microscopias de luz e eletrônica de transmissão. Material controle seguiu o mesmo processamento que o inoculado. Os resultados demonstraram que os TM de B. mori, apresentaram variação na sua morfologia e susceptibilidade ao BmNPV de acordo com a região analisada. Assim, a região da ampola, na sua área de transição com a proximal, se apresentou susceptível ao BmNPV, a partir do 6° dpi, enquanto as demais regiões não evidenciaram indícios de infecção pelo patógeno. A área de transição é uma pequena região que se localiza ao término da ampola e inicio da região proximal do TM. A morfologia celular do epitélio de revestimento simples apresentou variação continua de pavimentoso, característico da ampola, a cilíndrico, na sua área de transição; já na continuidade com a região proximal do TM, esta variação morfológica foi abrupta. A citopatologia revelou no núcleo hipertrófico, o viroplasma, contendo os nucleocapsídeos e os poliedros virais. Ao final do ciclo infeccioso foi verificado a citólise de células infectadas, liberando poliedros no meio extracelular, tanto na hemocele como no lúmen do TM, fator que pode favorecer a transmissão da doença. Assim, a infecção da ampola, na sua área de transição com a região proximal, irá contribuir com um maior conhecimento científico dos aspectos citopatológicos e dos alvos de infecção deste isolado geográfico viral, visando o estabelecimento do seu ciclo infeccioso do BmNPV no corpo do inseto.

Orientador: Marco Antonio Martin Biaggioni / Banca: Sergio A. Lunardelli Furchi / Banca: Angelo Cataneo / Resumo: O objetivo deste trabalho foi realizar uma avaliação econômica e energética para o uso de lenha e cavaco de madeira na produção de energia em caldeira de agroindústria seropédica. Utilizou-se, para o estudo, a caldeira de uma fiação de seda localizada na cidade de Duartina, interior do estado de São Paulo, que atualmente emprega como combustível a lenha de eucalipto para gerar o vapor de água, que é utilizado na produção do fio da seda. Buscando a otimização do custo de produção do vapor, analisou-se, economicamente, através de simulações, a substituição da lenha pelo cavaco de madeira como combustível na caldeira, bem como alternativas mistas de diversas percentagens desses combustíveis, utilizando-se como referência o consumo médio mensal da lenha na caldeira e o Poder Calorífico Inferior (PCI) de cada combustível a um mesmo teor de umidade. Na construção da estrutura de dispêndio energético do sistema de aproveitamento dos combustíveis em estudo, para a análise energética, considerou-se a entrada de energia por tipo, fonte e forma, em Megajoule (MJ), envolvida nas diversas operações do itinerário técnico da lenha, bem como nas operações do itinerário do cavaco. A partir dessa estrutura, realizou-se uma análise comparativa das entradas de energia da participação da lenha e do cavaco, em Megajoule por hora (MJ . h-1), para produzir 2.968,80 kg.h-1 de vapor, média da produção na caldeira, nos anos de 2004, 2005 e 2006.Os resultados da análise energética revelam ser viável a substituição da lenha de eucalipto pelo cavaco de madeira na caldeira. Nas condições propostas neste estudo e utilizando preços médios, do período 2004 a 2006, a produção de vapor na caldeira, com 100% de cavaco de madeira é a alternativa econômica que otimiza o custo / Abstract: The aim of this piece of work was to perform an economical and energy evaluation of firewood and woodshaving use for energy generation on seropedicae agroindustry boiler. For this study, we used a boiler from a silk spinning factory located in the city of Duartina, São Paulo, Brazil, that uses nowadays eucalyptus firewood as fuel to generate water vapour used in the production of silk thread. Aiming at vapour production cost optimization, the substitution of firewood for woodshaving as boiler fuel was economically analyzed, through simulations, as well as these fuels several percentages mixed alternatives, using as a reference the average monthly consumption of firewood in the boiler and each fuel Lower Calorific Power at the same moisture content. For the energy analysis, on the construction of the studied fuels utilization system energy expenditure structure, we considered energy entrance by type, source and form, in Megajoule (MJ), involved in the several operations of firewood technical itinerary, as well as in the operations of woodshaving itinerary. From that structure, a firewood and woodshaving participation energy entrance comparative analysis was carried on, in Megajoule per hour (MJ. h-1), to produce 2.968,80 kg.h-1 of vapour, the boiler average production, during the years of 2004, 2005, and 2006. The results of the energy analysis reveal that eucalyptus firewood substitution for woodshaving is viable in the boiler.Under the conditions proposed in this study and using average prices, from 2004 to 2006, it was concluded that vapour production in the boiler, with 100% of woodshaving, is the economical alternative that optimizes the cost / Mestre

A pesquisa e o desenvolvimento de novas tecnologias na área de materiais e de processos químicos tem sido objeto de muitos trabalhos científicos que buscam inovações. O uso de materiais poliméricos para aplicação na área biomédica está em constante ascensão, e possuem importantes aplicações como sistema controlado de liberação de drogas, encapsulamento de células, regeneração de tecidos musculares e blendas para uso tópico. Os polímeros podem ser sintéticos como os álcool poli (vinílico)(PVA) e naturais também chamados de biopolímeros como a sericina (SER) formada pelo Bombyx mori. Para a utilização de biopolímeros é extremamente importante à avaliação de algumas características como dos agentes plastificantes e/ou reticulantes, a fim de, produzir blendas com melhores propriedades ao fim destinado. Dentro desse contexto, o estudo teve como objetivo avaliar o efeito do gluconato de cálcio (GLU) em blendas poliméricas SER/PVA visando uma possível aplicação em materiais com liberação controlada de fármacos, elaborar filmes poliméricos da blenda SER/PVA com glicerol (GLI) e gluconato de cálcio e composições e caracterizar sistemas esses filmes quanto ao teor de umidade, espectroscopia no infravermelho em módulo de refletância total atenuada com transformada de Fourier, análises termogravimétrica, microscopia eletrônica de varredura, ensaios de tração e monitorar o teor de cálcio em solução proveniente da liberação do gluconato de cálcio presente nos filmes da blenda SER/PVA por espectroscopia de absorção atômica. Observou-se maior estabilidade térmica nos filmes com GLU como aditivo devido ao seu possível efeito reticulante relacionado aos íons Ca2+ presentes na blenda, com teor de umidade maior quando a GLY é utilizada, Nos estudos de FTIR-ATR pode ser observado que o GLU causa alteração do perfil espectroscópico do filme entre 50% e 60% do teor de SER diferentemente do que ocorre com a GLY (40% - 50%) Nos estudos de morfologia observou-se uma separação de fase em ambos os filmes com GLY e GLU, nos resultados de tração o GLY apresentou a plasticidade esperada já o GLU elimina a plasticidade do filme SER/PVA porém aumento significativamente a resistência do material, consequência clara de interações mais intensas no interior do material. Apresentou também um perfil de liberação positivo que pode ser modulado em composições de SER/PVA, esses resultados demonstram a viabilidade do filme como um material de liberação. Assim o GLU possui uma função múltipla na blenda polimérica proposta além de atuar como reticulante também pode atuar como fármaco. / The research and development of new technologies in the field of chemical materials and processes has been the subject of many scientific works that seek innovations. The use of polymer materials for application in the biomedical area is constantly increasing, and they have important applications as controlled system of drug release, cell encapsulation, regeneration of muscle tissues and blends for topical use. The polymers may be synthetic such as poly (vinyl alcohol) (PVA) and natural also called biopolymers such as sericin (SER) formed by Bombyx mori. For the use of biopolymers it is extremely important to evaluate some characteristics such as plasticizers and / or crosslinking agents in order to produce blends with better properties to the intended purpose. The objective of this study was to evaluate the effect of calcium gluconate (GLU) on SER / PVA polymer blends aiming at a possible application in materials with controlled release of drugs, to prepare SER / PVA polymer blends with glycerol (GLI) And calcium gluconate and compositions and characterize systems such films for moisture content, infrared spectroscopy in Fourier transform attenuated total reflectance module, thermogravimetric analysis, scanning electron microscopy, tensile tests and monitor calcium content in solution Resulting from the release of the calcium gluconate present in the SER / PVA blends films by atomic absorption spectroscopy. It was observed higher thermal stability in GLU films as an additive due to its possible crosslinking effect related to the Ca2+ ions present in the blends, with a higher moisture content when GLY is used. In the FTIR-ATR studies it can be observed that GLU causes Alteration of the spectroscopic profile of the film between 50% and 60% of the SER content differently than occurs with GLY (40% - 50%) In the morphology studies a phase separation was observed in both GLY and GLU films, In the traction results the GLY presented the expected plasticity since the GLU eliminates the plasticity of the SER / PVA film but significantly increases the resistance of the material, a clear consequence of more intense interactions inside the material. It also showed a positive release profile that can be modulated in SER / PVA compositions, these results demonstrating the viability of the film as a release material. Thus, GLU has a multiple function in the proposed polymer blend as well as acting as a crosslinker can also act as a drug.