Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-29Bitstream added on 2014-06-13T19:02:34Z : No. of bitstreams: 1 bonjovani_mr_dr_botib.pdf: 1450506 bytes, checksum: bbb65e5c722f4575e52cd2fd2d48cdd3 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O elevado metabolismo das sementes recalcitrantes de Inga vera Willd. subsp. affinis (DC.) T.D. Pennington, é um dos principais fatores que dificultam sua conservação. Uma forma de diminuir os efeitos do intenso metabolismo dessas sementes poderia ser a redução da temperatura do ambiente, pois a temperatura determina a velocidade das reações enzimáticas, afetando as taxas respiratórias. Contudo, as sementes recalcitrantes são intolerantes à dessecação e frequentemente não podem ter seu teor de água reduzido até níveis que permitam a redução da temperatura sem que ocorram danos pelo congelamento da água. Devido à falta de informações sobre o metabolismo respiratório dessas sementes em diferentes condições de estresse, o presente trabalho teve como objetivo verificar as taxas respiratórias desses embriões com diferentes níveis de hidratação e após aplicação de ácido abscísico e estresse osmótico em diferentes temperaturas. Os resultados possibilitaram observar a presença de reações oxidativas que não às da respiração, devido ao consumo elevado de oxigênio, e que as alterações nos níveis de hidratação e temperatura de incubação assim como a aplicação de ácido abscísico e estresse osmótico promoveram alterações nesse metabolismo oxidativo. Os resultados obtidos trazem novas perspectivas para a conservação das sementes recalcitrantes / The high metabolism of recalcitrant seeds of Inga vera Willd. subsp. affinis (DC.) T.D. Pennington is one of the main factors that complicate their conservation. One way to lessen the effects of the intense metabolism of these seeds could be the reduction of temperature of the environment, because temperature determines the speed of enzymatic reactions, affecting respiration rates. However, recalcitrant seeds are desiccation intolerant and often can not have their water content reduced to levels that allow a reduction in temperature without damage by the freezing of water. Due to lack of information on the respiratory metabolism of these seeds in different conditions of stress this study aimed to determine respiration rates of embryos with different levels of hydration and after application of abscisic acid and osmotic stress at different temperatures. The results allowed to observe the presence of oxidative reactions than those of breath due to high consumption of oxigen, and that changes in moisture levels and incubation temperature as well as the application of abscisic acid and osmotic stress promoted changes in oxidative metabolism. The results provide new perspectives for the conservation of recalcitrant seeds

Submitted by JÚLIO HEBER SILVA (julioheber@yahoo.com.br) on 2017-06-20T17:18:55Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Jênifer Silva Nogueira - 2012.pdf: 819242 bytes, checksum: c99621341b15cbae737895fd81e386e3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2017-07-07T19:45:30Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Jênifer Silva Nogueira - 2012.pdf: 819242 bytes, checksum: c99621341b15cbae737895fd81e386e3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-07T19:45:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Jênifer Silva Nogueira - 2012.pdf: 819242 bytes, checksum: c99621341b15cbae737895fd81e386e3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2012-04-13 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The genus Campomanesia spp. has great economic potential unexploed. How its seeds not tolerate desiccation its propagations has been made by seeds extraction, when they are in germinate at appropriate physiological conditions. Several problems such as dormancy, recalcitrance, seasonality, difficulty of propagation has difficult he rational exploration of various species. Environmental conditions appropriate for the germination process may be provided in laboratories by in vitro multiplication. In this work techniques were applied to study some factors that affect ex vitro and in vitro germination of gabirobeira seeds and anther and ovaries culture through micropropagation. The results indicated that ex vitro germination the test substrates (Sand, Bioplant®, Tri-mix®, Bioplant®+Sand (1:1 v/v), Tri-mix®+Sand) for all substrates were superior to Tri-mix® substrate for germination percentage and for emergency speed of index. For the in vitro germination was found that all the culture medium tested in the absence of sucrose had a satisfactory germination rate. Evaluating the effects of accelerated aging and GA3 in the in vitro germination conclude that premature aging interfered the gabirobeira seeds ability of germination and GA3 is unnecessary for the germination stage. In the anthers and ovaries of culture, no callus formation in any of the treatments. However, the PVP was effective as an antioxidant. Keywords: sucrose, / A gabirobeira pertence ao gênero Campomanesia spp. possui grande potencial econômico não explorado. Como suas sementes não toleram a dessecação, sua propagação tem sido realizada logo após a extração, quando estas estão em condições fisiológicas apropriadas para germinar. Vários problemas como dormência, recalcitrância, sazonalidade e dificuldades de propagação têm inviabilizado a exploração econômica racional de várias espécies. Condições ambientais apropriadas para o processo de germinação podem ser fornecidas em laboratórios por meio da multiplicação in vitro. Neste trabalho, foram aplicadas técnicas para estudar alguns fatores que interferem na germinação ex vitro e in vitro de sementes de gabiroba e na micropropagação através da cultura de anteras e ovários. Os resultados indicaram que ao testar os substratos (Areia, Bioplant®, Tri-mix®, Bioplant®+Areia (1:1 v/v), Trimix ®+Areia)todos os substratos foram superiores ao substrato Tri-mix® para a porcentagem de germinação e vigor. Para a germinação in vitro verificou-se que todos os meios de cultura testados (MS, MS meia força, WPM e WPM meia força) na ausência de sacarose tiveram uma taxa de germinação satisfatória. Avaliando os efeitos do envelhecimento acelerado e de GA3 na germinação in vitro, o envelhecimento acelerado interferiu na capacidade germinativa das sementes de gabiroba e verificou-se que a aplicação de GA3 exógeno é desnecessária para a etapa de germinação. Na cultura de anteras e ovários, não houve calogênese em nenhum dos tratamentos testados. No entanto, o PVP foi eficiente como antioxidante.

Ocotea odorifera é uma espécie nativa da Mata Atlântica, com características recalcitrantes, que se encontra em risco de extinção devido a sua exploração econômica. Técnicas baseadas na biotecnologia podem ser utilizadas para o processo de conservação e reintrodução no seu ambiente natural de espécies ameaçadas de extinção. Dentre as técnicas biotecnológicas, a embriogênese somática (ES) vem sendo utilizada com bastante sucesso em programas de melhoramento genético e conservação de germoplasma de espécies arbóreas. Contudo, para o estabelecimento de protocolos eficientes de ES são necessários estudos básicos de fisiologia e bioquímica do desenvolvimento da semente e da germinação, para que as condições in vivo possam ser recriadas de forma eficiente in vitro. O objetivo deste trabalho foi avaliar as variações no conteúdo endógeno de aminoácidos, PAs, AIA, ABA e estabelecer marcadores protéicos durante a germinação de sementes de O. odorifera. As sementes foram germinadas em substrato de vermiculita em fotoperíodo de 16h a 27°C. A seguir, coletadas após 0, 15, 30 e 45 dias de semeadura. Foi observado que: a) o conteúdo de aminoácidos aumentou durante o processo germinativo. A asparagina foi observada em maior quantidade e predominou durante todo o período analisado. A metionina e a ornitina, precursores das PAs, e o triptofano, precursor do AIA, aumentaram ao longo do processo germinativo; b) o conteúdo total de PAs decresceu nos últimos 15 dias de avaliação. Neste período, as poliaminas conjugadas apresentaram aumento indicando possível relação entre conjugação e disponibilidade de PAs nas células; c) a relação Put/(Spm+Spd) diminui ao final do período analisado enquanto no mesmo período a Spm foi a PA livre mais abundante indicando relação entre Spm e alongamento celular; d) O AIA apresentou aumento ao logo do processo germinativo, ao mesmo tempo em que a queda no conteúdo de ABA pode ser observada; e) o conteúdo de proteínas decresceu ao longo do processo germinativo. Os perfis protéicos diferiram pouco entre os estádios analisados. Entretanto, foi observada variação significativa na abundância (% de volume) em 39 spots, que foram definidos como marcadores do processo germinativo. Dentre esses spots incluem-se 26 que reduziram e 2 spots que aumentaram suas abundâncias ao longo do processo germinativo, 10 que apresentaram tanto aumento quanto diminuição durante o período observado e apenas 1 exclusivo da semente madura. Estes resultados abrem perspectivas para a avaliação de parâmetros fundamentais para a otimização de protocolos de ES e permitiram uma maior compreensão das variações endógenas dos diferentes compostos citados no processo germinativo das sementes de O. odorifera. / Ocotea odorifera is a native tree from the Atlantic Forest with recalcitrant features that is in risk of extinction because its economical exploration. Techniques based on biotecnology can be used for the conservation and reintroduction process of species in risk of extinction in their natural environment. Between these biotecnologycal techniques, the somatic embryogenesis (SE) have been used sucessfully in programs of genetic breeding and tree germoplasm conservation. However, basic studies of physiology and biochymical of the seed development and germination are necessary for the establishment of efficient protocols of SE. Thus, these condictions in vivo can be recriated in vitro. The aim of this work was to evaluate the variations in the endogenous content of amino acids, polyamines, IAA, ABA and protein markers throughout the seed germination of O. odorifera seeds. The seeds were germinated on vermiculite substrate at 27°C and 16h of photoperiod and collected after 0, 15, 30 e 45 days of sowing. It was observed that: a) the amino acids content increased troughout the germination process. Asparagine was the highest content sighted and prevailed during the period studied. Methionine and ornithine, polyamines precursors, and tryptophan, IAA precursor, increased troughout germination process; b) the total PAs content decreased in the last 15 days of evaluation. At the same period, conjugated PAs showed an increase, indicating a relation between conjugation and avalability of polyamines inside the cells; c) the Put/(Spm+Spd) relation decreased while the Spm was the most abundant free PA observed at the end of the period analyzed indicating a relation between Spm and celular elongation; d) IAA increased during all the process while a decrease of ABA was sigthed; e) protein content decreased troughout the period observed. The proteic profile didnt change a lot between the stages. Os perfis protéicos diferiram pouco entre os estádios analisados. Entretanto, foi observada variação significativa na abundância (% de volume) em 39 spots, que foram definidos como marcadores do processo germinativo. Among them, could be include 26 that decreased and 2 that decreased its abundances troughout the germinative process, 10 that both increased and decreased throughout the period analyzed and just 1 exclusive from mature seed. These results open perspectives to avaliation of fundamentals parameters to optmization of ES protocols and allow a better comprehension about the edogenous variation of the differents compounds citeds in the process of O. odorifera seeds germination.

Ocotea odorifera é uma espécie nativa da Mata Atlântica, com características recalcitrantes, que se encontra em risco de extinção devido a sua exploração econômica. Técnicas baseadas na biotecnologia podem ser utilizadas para o processo de conservação e reintrodução no seu ambiente natural de espécies ameaçadas de extinção. Dentre as técnicas biotecnológicas, a embriogênese somática (ES) vem sendo utilizada com bastante sucesso em programas de melhoramento genético e conservação de germoplasma de espécies arbóreas. Contudo, para o estabelecimento de protocolos eficientes de ES são necessários estudos básicos de fisiologia e bioquímica do desenvolvimento da semente e da germinação, para que as condições in vivo possam ser recriadas de forma eficiente in vitro. O objetivo deste trabalho foi avaliar as variações no conteúdo endógeno de aminoácidos, PAs, AIA, ABA e estabelecer marcadores protéicos durante a germinação de sementes de O. odorifera. As sementes foram germinadas em substrato de vermiculita em fotoperíodo de 16h a 27°C. A seguir, coletadas após 0, 15, 30 e 45 dias de semeadura. Foi observado que: a) o conteúdo de aminoácidos aumentou durante o processo germinativo. A asparagina foi observada em maior quantidade e predominou durante todo o período analisado. A metionina e a ornitina, precursores das PAs, e o triptofano, precursor do AIA, aumentaram ao longo do processo germinativo; b) o conteúdo total de PAs decresceu nos últimos 15 dias de avaliação. Neste período, as poliaminas conjugadas apresentaram aumento indicando possível relação entre conjugação e disponibilidade de PAs nas células; c) a relação Put/(Spm+Spd) diminui ao final do período analisado enquanto no mesmo período a Spm foi a PA livre mais abundante indicando relação entre Spm e alongamento celular; d) O AIA apresentou aumento ao logo do processo germinativo, ao mesmo tempo em que a queda no conteúdo de ABA pode ser observada; e) o conteúdo de proteínas decresceu ao longo do processo germinativo. Os perfis protéicos diferiram pouco entre os estádios analisados. Entretanto, foi observada variação significativa na abundância (% de volume) em 39 spots, que foram definidos como marcadores do processo germinativo. Dentre esses spots incluem-se 26 que reduziram e 2 spots que aumentaram suas abundâncias ao longo do processo germinativo, 10 que apresentaram tanto aumento quanto diminuição durante o período observado e apenas 1 exclusivo da semente madura. Estes resultados abrem perspectivas para a avaliação de parâmetros fundamentais para a otimização de protocolos de ES e permitiram uma maior compreensão das variações endógenas dos diferentes compostos citados no processo germinativo das sementes de O. odorifera. / Ocotea odorifera is a native tree from the Atlantic Forest with recalcitrant features that is in risk of extinction because its economical exploration. Techniques based on biotecnology can be used for the conservation and reintroduction process of species in risk of extinction in their natural environment. Between these biotecnologycal techniques, the somatic embryogenesis (SE) have been used sucessfully in programs of genetic breeding and tree germoplasm conservation. However, basic studies of physiology and biochymical of the seed development and germination are necessary for the establishment of efficient protocols of SE. Thus, these condictions in vivo can be recriated in vitro. The aim of this work was to evaluate the variations in the endogenous content of amino acids, polyamines, IAA, ABA and protein markers throughout the seed germination of O. odorifera seeds. The seeds were germinated on vermiculite substrate at 27°C and 16h of photoperiod and collected after 0, 15, 30 e 45 days of sowing. It was observed that: a) the amino acids content increased troughout the germination process. Asparagine was the highest content sighted and prevailed during the period studied. Methionine and ornithine, polyamines precursors, and tryptophan, IAA precursor, increased troughout germination process; b) the total PAs content decreased in the last 15 days of evaluation. At the same period, conjugated PAs showed an increase, indicating a relation between conjugation and avalability of polyamines inside the cells; c) the Put/(Spm+Spd) relation decreased while the Spm was the most abundant free PA observed at the end of the period analyzed indicating a relation between Spm and celular elongation; d) IAA increased during all the process while a decrease of ABA was sigthed; e) protein content decreased troughout the period observed. The proteic profile didnt change a lot between the stages. Os perfis protéicos diferiram pouco entre os estádios analisados. Entretanto, foi observada variação significativa na abundância (% de volume) em 39 spots, que foram definidos como marcadores do processo germinativo. Among them, could be include 26 that decreased and 2 that decreased its abundances troughout the germinative process, 10 that both increased and decreased throughout the period analyzed and just 1 exclusive from mature seed. These results open perspectives to avaliation of fundamentals parameters to optmization of ES protocols and allow a better comprehension about the edogenous variation of the differents compounds citeds in the process of O. odorifera seeds germination.