Introdução: O diagnóstico precoce do câncer de mama tem tornado a biópsia do linfonodo sentinela (BLS) um método cada vez mais preconizado. Radiofármacos são usados para pesquisa e posterior BLS, porém ainda não existe um método padronizado. Uma das divergências refere-se ao tempo ideal da realização da injeção do material radioativo, que pode ser realizado no intra ou no pré-operatório. Objetivos: Comparar os resultados da BLS dos pacientes com câncer de mama submetidos à injeção intraoperatória de 99mTc-Dextran-500 em relação aos pacientes que realizaram injeção pré-operatória deste mesmo radiofármaco. Métodos: Estudo retrospectivo por meio da revisão dos prontuários de pacientes com câncer de mama invasivo que realizaram BLS com uso de 99mTc-Dextran-500, de janeiro de 2008 a agosto de 2012, em uma única instituição. Os pacientes foram divididos segundo o momento de injeção do radiofármaco na mama acometida em grupo pré-operatório (PO) e grupo intraoperatório (IO). Os pacientes que recebiam injeção pré-operatória realizavam o mapeamento linfático por linfocintilografia. Nos dois grupos, era realizada análise da axila com auxílio do gamma probe durante o ato cirúrgico. Os grupos foram analisados quanto ao estadiamento tumoral clínico, número de focos do tumor primário, invasão vascular peritumoral, presença de receptores hormonais, resultado histológico e anatomopatológico e quantidade de linfonodos (LFs) retirados. Resultados: Foram incluídos 221 pacientes (PO=81 e IO=140). O estadiamento e a histologia tumorais, o número de focos, a invasão vascular peritumoral, bem como a idade dos pacientes eram semelhantes nos dois grupos. A média de LFs retirados foi 2,07 (+-1,33) no PO e 2,20 (+-1,13) no IO. O sucesso de identificação do LS no ato cirúrgico ocorreu em 92,59% dos casos PO e 96,42% dos casos IO. A taxa de falso negativo foi 11,1% no PO e foi 7,2% no grupo IO. A comparação destes dados não mostrou diferença significativa (considerando um nível de significância de 5%). Conclusão: Não há diferença nos resultados da BLS com uso de 99mTc-Dextran-500 no tempo pré-operatório em relação ao intraoperatório. Os dois métodos apresentaram-se eficazes e seguros. A utilização das imagens linfocintilográficas não parece ter influenciado o resultado final do exame. A injeção intraoperatória apresenta melhor logística, custo financeiro menor e extingue a dor e ansiedade do paciente. Logo, esta técnica deve ser preconizada. / Background: Early diagnosis of breast cancer has turned the sentinel node biopsy (SNB) into an increasingly advocated method. Radiopharmaceuticals are used for research and subsequent SNB, but there is still no standardized method. The time of injection, for example, can be intraoperative or preoperative. Objective: Compare the results of SNB of patients with breast cancer undergone intraoperative injection of 99mTc-Dextran-500 with patients underwent preoperative injection of the same radiopharmaceutical. Methods: Retrospective study through reviewing the medical records of patients with invasive breast cancer undergone SNB using 99mTc-Dextran-500, from January 2008 to August 2012, in a single institution. Patients were divided by the type of radiopharmaceutical injection: preoperative with lymphoscintigraphy (PO) or intraoperative (IO). All were subjected to analysis of the axilla with the aid of gamma probe during surgery. We analyzed clinical tumor staging, number of foci, peritumoral vascular invasion, pathological and histological results, number of lymph nodes removed and the presence of hormone receptors. Results: 221 patients included (IO group = 140; PO group = 81). The two groups had similar pathophysiological and etiological characteristics. The average number of lymph nodes removed was IO 2.20 (+ -1.13) and PO 2.07 (+ -1.33). The sentinel limph node (SLN) was positive for metastasis in 36% of IO and 35.8% of the PO. The successful identification of SLN during surgery was 96.42% in IO and 92.59% in PO. The false negative rate was 7.2% in the IO group and 11.1% in the PO. There was no significant difference between the two groups. Conclusion: There is no difference in results between SNB using 99mTc-Dextran-500 intraoperative and preoperative. The use of intraoperative injection is effective and safe, and extinguishes the patient's pain and anxiety, improves logistics issue and costs less. Therefore, this technique can be envisaged.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Laparoscopic pelvic lymphadenectomy has been performed routinely in medicine, using injectable lymphatic markers for delineation of lymphatic tissue and promoting free surgical margins of resection in tumor tissues. This practice also has therapeutic and diagnostic purposes when the pelvic lymph nodes are tumor-chain, resulting in a better prognosis for patients with certain types of cancer. Lymphadenectomy also aids in the diagnosis of regional metastases in other organs as well as in establishing the type of therapy to be adopted in the immediate postoperative period. However, this procedure is seldom performed in veterinary medicine, and practically not applied in combination with laparoscopy. This work consists of three scientific papers, with the first two showing the authors' experience with the techniques of marking and lymphatic resection associated with breast neoplasms in clinical cases. The last document involves research with healthy animals without mammary neoplasms. The results allowed us to check the effectiveness of the technique of lymphatic markup for the chain of pelvic lymph nodes using the dyes (methylene blue and indocyanine green) in dogs, allowing the observation of lymph node regions on both sides to deep iliac vessels excised via laparoscopic lymphadenectomy and the effectiveness and safety of the surgical technique. We conclude that it is still necessary to conduct further studies aiming to delineate string pelvic lymph nodes of healthy animals and presenting breast neoplasms, to achieve the best results in relation to the technique of lymphatic marking the mammary glands of female dogs / A linfadenectomia pélvica videolaparoscópica vem sendo realizada de forma rotineira na medicina, utilizando-se marcadores linfáticos injetáveis para delimitação do tecido linfático e promoção de margens cirúrgicas livres de tecidos tumorais em ressecções. Tal prática possui ainda finalidade terapêutica e diagnóstica quando os linfonodos da cadeia pélvica encontram-se tumorais, propiciando melhor prognóstico aos pacientes com determinados tipos de câncer. A linfadenectomia auxilia também no diagnóstico de metástases regionais em órgãos alvo bem como no estabelecimento do tipo de terapia a ser adotada no pós-operatório imediato. Contudo, na medicina veterinária esse procedimento é pouco realizado, e praticamente não aplicado em associação com a videocirurgia. Este trabalho consiste em três documentos científicos, sendo os dois primeiros demonstrando a experiência dos autores com as técnicas de marcação e ressecção linfática associada à neoplasmas mamários em casos clínicos. O último documento envolve pesquisa com animais hígidos sem neoplasmas mamários. Os resultados permitiram a verificação da eficácia da técnica de marcação linfática para a cadeia de linfonodos pélvicos utilizando os corantes (azul de metileno e verde de indocianina) em cães, permitindo a observação de linfonodos nas duas regiões laterais aos vasos ilíacos profundos extirpados via linfadenectomia videolaparoscópica e a efetividade e segurança da técnica cirúrgica empregada. Conclui-se que ainda se faz necessário a realização de novos estudos visando delimitar a cadeia de linfonodos pélvicos de animais sadios e apresentando neoplasmas mamários, para que consiga-se resultados melhores em relação à técnica de marcação linfática das glândulas mamárias de cadelas.

Introdução: O diagnóstico precoce do câncer de mama tem tornado a biópsia do linfonodo sentinela (BLS) um método cada vez mais preconizado. Radiofármacos são usados para pesquisa e posterior BLS, porém ainda não existe um método padronizado. Uma das divergências refere-se ao tempo ideal da realização da injeção do material radioativo, que pode ser realizado no intra ou no pré-operatório. Objetivos: Comparar os resultados da BLS dos pacientes com câncer de mama submetidos à injeção intraoperatória de 99mTc-Dextran-500 em relação aos pacientes que realizaram injeção pré-operatória deste mesmo radiofármaco. Métodos: Estudo retrospectivo por meio da revisão dos prontuários de pacientes com câncer de mama invasivo que realizaram BLS com uso de 99mTc-Dextran-500, de janeiro de 2008 a agosto de 2012, em uma única instituição. Os pacientes foram divididos segundo o momento de injeção do radiofármaco na mama acometida em grupo pré-operatório (PO) e grupo intraoperatório (IO). Os pacientes que recebiam injeção pré-operatória realizavam o mapeamento linfático por linfocintilografia. Nos dois grupos, era realizada análise da axila com auxílio do gamma probe durante o ato cirúrgico. Os grupos foram analisados quanto ao estadiamento tumoral clínico, número de focos do tumor primário, invasão vascular peritumoral, presença de receptores hormonais, resultado histológico e anatomopatológico e quantidade de linfonodos (LFs) retirados. Resultados: Foram incluídos 221 pacientes (PO=81 e IO=140). O estadiamento e a histologia tumorais, o número de focos, a invasão vascular peritumoral, bem como a idade dos pacientes eram semelhantes nos dois grupos. A média de LFs retirados foi 2,07 (+-1,33) no PO e 2,20 (+-1,13) no IO. O sucesso de identificação do LS no ato cirúrgico ocorreu em 92,59% dos casos PO e 96,42% dos casos IO. A taxa de falso negativo foi 11,1% no PO e foi 7,2% no grupo IO. A comparação destes dados não mostrou diferença significativa (considerando um nível de significância de 5%). Conclusão: Não há diferença nos resultados da BLS com uso de 99mTc-Dextran-500 no tempo pré-operatório em relação ao intraoperatório. Os dois métodos apresentaram-se eficazes e seguros. A utilização das imagens linfocintilográficas não parece ter influenciado o resultado final do exame. A injeção intraoperatória apresenta melhor logística, custo financeiro menor e extingue a dor e ansiedade do paciente. Logo, esta técnica deve ser preconizada. / Background: Early diagnosis of breast cancer has turned the sentinel node biopsy (SNB) into an increasingly advocated method. Radiopharmaceuticals are used for research and subsequent SNB, but there is still no standardized method. The time of injection, for example, can be intraoperative or preoperative. Objective: Compare the results of SNB of patients with breast cancer undergone intraoperative injection of 99mTc-Dextran-500 with patients underwent preoperative injection of the same radiopharmaceutical. Methods: Retrospective study through reviewing the medical records of patients with invasive breast cancer undergone SNB using 99mTc-Dextran-500, from January 2008 to August 2012, in a single institution. Patients were divided by the type of radiopharmaceutical injection: preoperative with lymphoscintigraphy (PO) or intraoperative (IO). All were subjected to analysis of the axilla with the aid of gamma probe during surgery. We analyzed clinical tumor staging, number of foci, peritumoral vascular invasion, pathological and histological results, number of lymph nodes removed and the presence of hormone receptors. Results: 221 patients included (IO group = 140; PO group = 81). The two groups had similar pathophysiological and etiological characteristics. The average number of lymph nodes removed was IO 2.20 (+ -1.13) and PO 2.07 (+ -1.33). The sentinel limph node (SLN) was positive for metastasis in 36% of IO and 35.8% of the PO. The successful identification of SLN during surgery was 96.42% in IO and 92.59% in PO. The false negative rate was 7.2% in the IO group and 11.1% in the PO. There was no significant difference between the two groups. Conclusion: There is no difference in results between SNB using 99mTc-Dextran-500 intraoperative and preoperative. The use of intraoperative injection is effective and safe, and extinguishes the patient's pain and anxiety, improves logistics issue and costs less. Therefore, this technique can be envisaged.

Introdução: O diagnóstico precoce do câncer de mama tem tornado a biópsia do linfonodo sentinela (BLS) um método cada vez mais preconizado. Radiofármacos são usados para pesquisa e posterior BLS, porém ainda não existe um método padronizado. Uma das divergências refere-se ao tempo ideal da realização da injeção do material radioativo, que pode ser realizado no intra ou no pré-operatório. Objetivos: Comparar os resultados da BLS dos pacientes com câncer de mama submetidos à injeção intraoperatória de 99mTc-Dextran-500 em relação aos pacientes que realizaram injeção pré-operatória deste mesmo radiofármaco. Métodos: Estudo retrospectivo por meio da revisão dos prontuários de pacientes com câncer de mama invasivo que realizaram BLS com uso de 99mTc-Dextran-500, de janeiro de 2008 a agosto de 2012, em uma única instituição. Os pacientes foram divididos segundo o momento de injeção do radiofármaco na mama acometida em grupo pré-operatório (PO) e grupo intraoperatório (IO). Os pacientes que recebiam injeção pré-operatória realizavam o mapeamento linfático por linfocintilografia. Nos dois grupos, era realizada análise da axila com auxílio do gamma probe durante o ato cirúrgico. Os grupos foram analisados quanto ao estadiamento tumoral clínico, número de focos do tumor primário, invasão vascular peritumoral, presença de receptores hormonais, resultado histológico e anatomopatológico e quantidade de linfonodos (LFs) retirados. Resultados: Foram incluídos 221 pacientes (PO=81 e IO=140). O estadiamento e a histologia tumorais, o número de focos, a invasão vascular peritumoral, bem como a idade dos pacientes eram semelhantes nos dois grupos. A média de LFs retirados foi 2,07 (+-1,33) no PO e 2,20 (+-1,13) no IO. O sucesso de identificação do LS no ato cirúrgico ocorreu em 92,59% dos casos PO e 96,42% dos casos IO. A taxa de falso negativo foi 11,1% no PO e foi 7,2% no grupo IO. A comparação destes dados não mostrou diferença significativa (considerando um nível de significância de 5%). Conclusão: Não há diferença nos resultados da BLS com uso de 99mTc-Dextran-500 no tempo pré-operatório em relação ao intraoperatório. Os dois métodos apresentaram-se eficazes e seguros. A utilização das imagens linfocintilográficas não parece ter influenciado o resultado final do exame. A injeção intraoperatória apresenta melhor logística, custo financeiro menor e extingue a dor e ansiedade do paciente. Logo, esta técnica deve ser preconizada. / Background: Early diagnosis of breast cancer has turned the sentinel node biopsy (SNB) into an increasingly advocated method. Radiopharmaceuticals are used for research and subsequent SNB, but there is still no standardized method. The time of injection, for example, can be intraoperative or preoperative. Objective: Compare the results of SNB of patients with breast cancer undergone intraoperative injection of 99mTc-Dextran-500 with patients underwent preoperative injection of the same radiopharmaceutical. Methods: Retrospective study through reviewing the medical records of patients with invasive breast cancer undergone SNB using 99mTc-Dextran-500, from January 2008 to August 2012, in a single institution. Patients were divided by the type of radiopharmaceutical injection: preoperative with lymphoscintigraphy (PO) or intraoperative (IO). All were subjected to analysis of the axilla with the aid of gamma probe during surgery. We analyzed clinical tumor staging, number of foci, peritumoral vascular invasion, pathological and histological results, number of lymph nodes removed and the presence of hormone receptors. Results: 221 patients included (IO group = 140; PO group = 81). The two groups had similar pathophysiological and etiological characteristics. The average number of lymph nodes removed was IO 2.20 (+ -1.13) and PO 2.07 (+ -1.33). The sentinel limph node (SLN) was positive for metastasis in 36% of IO and 35.8% of the PO. The successful identification of SLN during surgery was 96.42% in IO and 92.59% in PO. The false negative rate was 7.2% in the IO group and 11.1% in the PO. There was no significant difference between the two groups. Conclusion: There is no difference in results between SNB using 99mTc-Dextran-500 intraoperative and preoperative. The use of intraoperative injection is effective and safe, and extinguishes the patient's pain and anxiety, improves logistics issue and costs less. Therefore, this technique can be envisaged.

The thesis evaluates the results of experimental protocol involving the fertility sparing treatment procedure in early stage cervical carcinoma (LAP I protocol). Sentinel lymph node detection and experimental extirpation of afferent channels using laparoscopy and its technical aspects were analysed in prospective group of 85 women. The oncologic results and early/late morbidity show that established surgical procedures can be considered safe with minimal morbidity, provided that the indication criteria are met. The second part analyses the results of 148 women with no further pregnancy plans suffering from cervical tumors less than 2 cm in size with invasion less than half of the stroma (LAP II protocol). The oncological results in our defined group are very good and comparable to 'standard' procedure of modified radical hysterectomy type B or C with lower morbidity. In the separate section the thesis analyses the possibilities of laparoscopy in endometrial cancer treatment including the potentials of use of sentinel lymph node detection and technical aspects of laparoscopy in obese women. Currently the biggest controversy is the use of laparoscopy in malignant ovarian tumors. Our oncogynaecological study group at FN Motol prefers the laparotomic approach and we chose to include the set of advanced...

Nanodiamanty (250 nm) boli podrobené oxidácií, a tiež separované podľa veľkosti. Následne bola na povrch nanodiamantov adsorbovaná rozvetvená vrstva polyglycerolu. Táto vrstva vzniká kyslo katalyzovanou ,,ring opening“ polymeráciou glycidolu s hydroxylovými a karboxylovými skupinami povrchu nanodiamantov. Vzniknutá polyglycerolová vrstva zvyšuje stabilitu a biokompatibilitu nanodiamantov. Po vytvorení polyglycerolovej vrstvy bol do reakcie pridaný glycidyl propargyl éter, čím došlo k terminácií polymerácie, v dôsledku zavedenia propargylu do reakcie. Prítomná trojná väzba umožňuje nové modifikácie povrchu, napr. prostredníctvom CuAAC reakcie. S využitím CuAAC reakcie je možné na povrch fluorescenčných nanodiamantov pripojiť manózu (so spojkou obsahujúcou azidoskupinu). Pripravené nanočastice boli charakterizované použitím fyzikálno chemických metód. Distribúcia veľkosti častíc bola meraná pomocou dynamického rozptylu svetla (DLS), a taktiež bola potvrdená obrazovou analýzou mikrografov z elektrónového transmisného mikroskopu (TEM). Vyhodnotené bolo aj správanie sa nanodiamantov v biologických podmienkach (stabilitné testy v 1xPBS, 10xPBS a 100 % FBS) a bol meraný aj zeta potenciál. Nakoniec boli pripravené fluorescenčné diamanty (250 nm) s naviazanou manózou. Vzhľadom k výsledkom termogravimetrie, meraniam DLS a pozorovania pomocou TEM môžeme povedať, pripravené nanodiamanty sú pokryté tenkou vrstvou polyglycerolu. Prítomnosť manózy bola zistená na základe FTIR spektier. Nami pripravené fluorescenčné nanodiamanty obalené vrstvou polyglycerolu sú vhodné pre ďalšie testovanie in vitro a in vivo vďaka ich stabilite v médiách s vysokým obsahom solí ako napr. fosfátový pufor (PBS) a nízkemu viazaniu proteínov vo fetalnom bovinnom sere (FBS).

In den letzten Jahren wurde die Sentinel Node Biopsie in Studien zur Diagnostik und Behandlung des N0-Halses als Stagingverfahren untersucht. Ziel der vorliegenden Studie war der Vergleich der postoperativen Lebensqualität und des funktionellen Status bei Patienten mit oralen und oropharyngealen Karzinomen, die sich einer Sentinelbiopsie, bzw. einer selektiven Neck Dissection bei N0-Hals unterzogen haben. 57 Patienten mit primär operativ behandeltem Karzinom wurden im Rahmen der Studie untersucht, 29 nach Sentinel Node Biopsie und 28 nach selektiver Neck Dissection. Es wurde die postoperative gesundheitsbezogene (EORTC QLQ-C30) und krankheitsspezifische Lebensqualität (EORTC QLQ-H&N35) erfasst. Patientenbezogene psychosoziale Variablen wurden anhand der „Hospital Anxiety and Depression Scale“ (HADS) und der Kurzform des „Progredienzangst-Fragebogens“ (PA-F-KF) ermittelt. Die Erhebung des klinischen Gesundheitszustandes erfolgte unter besonderer Berücksichtigung des funktionellen Status nach zervikaler Lymphknotendissektion. Bezüglich der gesundheitsbezogenen Lebensqualität sowie der Angst und Depression existierten keine signifikanten Unterschiede. Hinsichtlich der krankheitsspezifischen Lebensqualität zeigte sich, dass die Patienten nach Sentinel Node Biopsie weniger Schluckbeschwerden angaben (p=0,037). Ebenso zeigte sich bei der klinischen Untersuchung eine geringere Beeinträchtigung durch die zervikalen Narben. Die Sentinel Node Biopsie bietet, neben dem geringeren operativen Aufwand, der schnelleren Rekonvaleszenz und der geringeren funktionellen Minderung der Patienten, eine tendenzielle Verbesserung der krankheitsspezifischen Lebensqualität. Als Grund für die subjektiv weniger beeinträchtigte Schluckfunktion kann die fehlende Präparation der suprahyoidalen Muskulatur und der entsprechend innervierenden Nerven in Erwägung gezogen werden.

The thesis evaluates the results of experimental protocol involving the fertility sparing treatment procedure in early stage cervical carcinoma (LAP I protocol). Sentinel lymph node detection and experimental extirpation of afferent channels using laparoscopy and its technical aspects were analysed in prospective group of 85 women. The oncologic results and early/late morbidity show that established surgical procedures can be considered safe with minimal morbidity, provided that the indication criteria are met. The second part analyses the results of 148 women with no further pregnancy plans suffering from cervical tumors less than 2 cm in size with invasion less than half of the stroma (LAP II protocol). The oncological results in our defined group are very good and comparable to 'standard' procedure of modified radical hysterectomy type B or C with lower morbidity. In the separate section the thesis analyses the possibilities of laparoscopy in endometrial cancer treatment including the potentials of use of sentinel lymph node detection and technical aspects of laparoscopy in obese women. Currently the biggest controversy is the use of laparoscopy in malignant ovarian tumors. Our oncogynaecological study group at FN Motol prefers the laparotomic approach and we chose to include the set of advanced...