ROCHA, Larissa Queiroz. Interferência do óleo essencial de folhas do quimiotipo II de Lippia alba (MILL.) N.E. BROWN na atividade antimicrobiana da oxacilina sobre staphylacoccus aureus oxacilina-resistente. 2012. 127 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-12-18T13:16:59Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_lqrocha.pdf: 2745707 bytes, checksum: 60b387e994f6750bbaade0f510d1ef50 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2012-12-19T13:37:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_lqrocha.pdf: 2745707 bytes, checksum: 60b387e994f6750bbaade0f510d1ef50 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-19T13:37:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_lqrocha.pdf: 2745707 bytes, checksum: 60b387e994f6750bbaade0f510d1ef50 (MD5) Previous issue date: 2012 / The Lippia alba (Mill.) N. E. Brown species inhabits almost all regions of Brazil, which is plenty used in popular medicine. Studies show that between the Brazilian Northeast three chemotypes of L. alba, the chemotype II (OELaII), produces in its leaves, essential oil with the largest and broadest antimicrobial potential. The objective of this study was to evaluate the interference of the OELaII in the Oxacillin activity and its mechanism of action against Staphylococcus aureus. The antimicrobial activity was performed by determining the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) by broth microdilution methods of culture and spreading on the surface of agar Plate-Count, respectively. The evaluation of the OELaII interference on antimicrobial oxacillin activity and other antibiotics was performed by using methodology changed disk diffusion. The checkerboard method, calculation of Fractional Inhibitory Concentration Indices and graphing Isobologramas was used to assess the interference OELaII the antimicrobial activity oxacillin. The study of the OELaII mechanism of action on strains of S. aureus was performed by evaluating the OE antimicrobial activity in the phases of exponential growth and stationary as well as by the action of chloramphenicol on the exponential growth. The effect of OELaII, oxacillin and OELaII-OXA exposure time, on strains of S. aureus was observed by tracing curves time of death, was considered synergistic association was found that a reduction in the number of viable cells after 24-48 hours when compared to each compound alone. The results revealed that the MIC and MBC OELaII to the strains of S. aureus oxacillin resistant (ORSA) are equal or very close to those observed for susceptible strains (UR) ranging from 0.312 to 1.25 mg / ml and 1.25 to 5.0 mg / mL for the first, and 0.312 -0.625 mg / mL and 0.625 to 2.5 mg / mL for the second. Oxacillin to the values obtained were 6.25 to 200 mg / ml and 25 and 400 mg / mL and 0.390 to 3.12 for ORSA mg / mL and 0.781 to 6.25 mg / mL for the UR. The study of the evaluation of synergism using the Kirby-Bauer method and checkerboad showed that the interference exerted by the essential oil on the antimicrobial action vary with the type of antibiotic and the type of strain tested. Isobologram charts obtained by checkerboard method suggests a synergism between good and OELaII Oxacillin for all the microorganisms tested. The study of the mechanism of action on inhibition OELaII /death ORSA strains, it was found that the OELaII reduced the number of viable cells in any growth stage. The same was not observed when cell division was halted by the presence of chloramphenicol, suggesting that OE acts mainly in the exponential growth phase (intense cell division). The death curve by microbial activity and OELaII Oxacillin showed a synergistic effect for the association OELaII-OXA, with a logarithmic decrease significantly when compared to treatment done alone. Given this biological potential, this study suggests that the Lippia alba can be used as a pharmaceutical ingredient in preparations of association with antimicrobial drugs in order to diminish the toxicity and increase its spectrum. However, there is the importance of studies on the elucidation of the different molecular targets through knowledge of its mechanism of action and toxicity testing in vitro, thus providing the safety and therapeutic efficacy of this important plant species users. / A espécie Lippia alba (Mill.) N. E. Brown habita praticamente todas as regiões do Brasil, onde é muito empregada na medicina popular. Estudos mostram que, entre os três quimiotipos de L. alba do Nordeste Brasileiro, o quimiotipo II (OELaII), produz, em suas folhas, o óleo essencial com o maior e mais amplo potencial antimicrobiano. O objetivo deste estudo foi avaliar a interferência do OELaII na atividade de Oxacilina e o seu mecanismo de ação frente a cepas de Staphylococcus aureus. A avaliação da atividade antimicrobiana foi realizada pela determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM), pelos métodos de microdiluição em caldo de cultura e espalhamento na superfície do ágar Plate-Count, respectivamente. A avaliação da interferência do OELaII na atividade antimicrobiana da Oxacilina e outros antibióticos de uso foi realizada pela metodologia de disco-difusão modificado. O método de Checkerboard, cálculo dos Indices da Concentração Inibitória Fracionada e construção de gráficos Isobologramas foi utilizado na avaliação da interferência do OELaII na atividade antimicrobiana da Oxacilina. O estudo do mecanismo de ação do OELaII sobre cepas de S. aureus foi realizado pela avaliação da atividade antimicrobiana do OE nas fases de crescimento exponencial e estacionário, bem como pela ação do cloranfenicol sobre o crescimento exponencial. O efeito do tempo de exposição ao OELaII, Oxacilina e OELaII-OXA sobre cepas de S. aureus foi verificado pelo traçado das curvas de tempo de morte, sendo considerado sinergismo as associações em que foi verificado uma redução do número de células viáveis, após 24-48 horas quando comparado a cada composto isoladamente. Os resultados obtidos revelaram que a CIM e CBM do OELaII para cepas de S. aureus oxacilina-resistente (ORSA) são iguais ou muito próximas àquelas constatadas para as cepas sensíveis (OSSA), variando de 0,312-1,25 mg/mL e 1,25-5,0 mg/mL para a primeira; e 0,312-0,625 mg/mL e 0,625-2,5 mg/mL para a segunda. Para a Oxacilina os valores encontrados foram de 6,25-200 mg/mL e 25 e 400 mg/mL para as ORSA e 0,390-3,12 mg/mL e 0,781-6,25 mg/mL para as OSSA. O estudo da avaliação do sinergismo, pelo método de Kirby-Bauer e por checkerboad, mostrou que a interferência exercida pelo óleo essencial sobre a ação dos antimicrobianos varia de acordo com o tipo de antibiótico e o tipo de cepa testada. Os gráficos de isobolograma obtidos pelo método de checkerboard sugerem um bom sinergismo entre o OELaII e a Oxacilina para todos os micro-organismos testados. Pelo estudo do mecanismo de ação do OELaII na inibição/morte de cepas ORSA, verificou-se que o OELaII reduziu o número de células viáveis em qualquer estágio de crescimento. O mesmo não foi verificado quando a divisão celular foi interrompida pela presença de cloranfenicol, sugerindo que o OE age, principalmente, na fase exponencial de crescimento (intensa divisão celular). A curva de morte microbiana pela atividade do OELaII e Oxacilina, mostrou um efeito sinérgico para a associação OELaII-OXA, com uma redução logarítima significativa, quando comparado ao tratamento feito isoladamente. Diante desse importante potencial biológico, este estudo sugere que a Lippia alba possa ser utilizado como insumo farmacêutico em preparações de associação com medicamentos antimicrobianos visando a diminuir a toxicidade e aumentar o seu espectro de ação. Todavia, surge a importância de estudos sobre a elucidação dos diferentes alvos moleculares através do conhecimento do seu mecanismo de ação, bem como testes de toxicidade in vitro, oferecendo assim, segurança e eficácia terapêutica aos usuários dessa importantes espécie vegetal.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-05T20:18:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Renata Alexandre Ramos da Silva.pdf: 1250884 bytes, checksum: 0a138f281b993d44165f8bf1bdd9aa3e (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-14T19:48:59Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Renata Alexandre Ramos da Silva.pdf: 1250884 bytes, checksum: 0a138f281b993d44165f8bf1bdd9aa3e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-14T19:48:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Renata Alexandre Ramos da Silva.pdf: 1250884 bytes, checksum: 0a138f281b993d44165f8bf1bdd9aa3e (MD5) Previous issue date: 2014-02-20 / CAPES / O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana do citral, linalol e quatro antimicrobianos (ampicilina, gentamicina, linezolida e vancomicina) frente à dez cepas de Enterococcus faecalis cujo fenótipo de resistência fora previamente determinado pelo método de difusão em disco. Quatro cepas de Enterococcus faecalis (EF 07, EF 11, EF 13 e ATCC 51299) apresentaram resistência à vancomicina e foram selecionadas para o estudo de interação entre o citral e os quatros antimicrobianos o qual foi realizado pelo método checkerboard. Os critérios utilizados para avaliar a atividade sinérgica foram definidos pelo Índice de Concentração Inibitória Fracionada (FIC index). O citral foi o mais eficaz frente as cepas de Enterococcus faecalis avaliadas quando comparado ao linalol. Os valores do FIC index variaram de 0,5 a 0,125 sugerindo uma interação sinérgica para todas as associações exceto com gentamicina a qual se mostrou indiferente. Este estudo demonstrou que o citral associado à vancomicina foi capaz de reduzir os valores da concentração inibitória mínima deste último em 93,75%. Antimicrobianos beta lactâmicos e glicopeptídeos agem sinergicamente quando associados ao citral inibindo cepas de Enterococcus faecalis multirresistentes. / The purpose of this work has been to evaluate the antimicrobial activity of citral, linalol and four antimicrobials (ampicillin, gentamicin, vancomycin and linezolid) against ten Enterococcus faecalis strains whose resistance phenotype was previously determined by disc diffusion method. Four Enterococcus faecalis strains (EF 07, EF 11, EF 13 e ATCC 51299) present resistance to vancomycin, and they were selected to the interaction study between the citral and the four antimicrobials which was realized by checkerboard method. The criteria used to evaluate the synergistic activity were defined by fractional inhibitory concentration index (FIC index). The citral was the most effective against the Enterococcus faecalis strains evaluated when it was compared to linalol. The value of FIC index ranged from 0.5 to 0.125 suggesting a synergistic interaction to all associations except with gentamicin which showed indifferent. This study has demonstrated that the citral associated with vancomycin was able to reduce the values of the minimum inhibitory concentration of this latter in 93.75%. Beta lactam antimicrobials and glycopeptides act synergistically when combined with citral inhibiting multidrug-resistant Enterococcus faecalis strains.

MOTA, A. P. P. Atividade antimicobacteriana do óleo essencial da casca de Cinnamomum zeylanicum e do trans-cinamaldeído e suas associações com rifampicina e isoniazida. 2017. 80 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-03-22T11:57:20Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_appmota.pdf: 2911137 bytes, checksum: 560bee89cb214ddef450e401f61fb281 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-03-22T11:57:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_appmota.pdf: 2911137 bytes, checksum: 560bee89cb214ddef450e401f61fb281 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-22T11:57:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_appmota.pdf: 2911137 bytes, checksum: 560bee89cb214ddef450e401f61fb281 (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / The World Health Organization (WHO) has estimated that 10.4 million new cases of tuberculosis (TB) occurred worldwide in 2015, with a steady increase in resistance cases. Considering TB control difficulties, it is necessary to discover new drugs, especially for resistant strains, and it is believed that medicinal plants, through their essential oils (EOs), are one of the alternatives for bioprospecting active substances, such as the EO extracted from the bark of Cinnamomum zeylanicum (EOCzey), popularly known as cinnamon, and trans-cinnamaldehyde (TCin), its compound, which has several therapeutic properties, such as antimicrobial, anti-inflammatory, and hypoglycemic action, among others. In this context, the present study evaluated the antimycobacterial action of EOCzey and TCin on sensitive and resistant clinical isolates (CI) of M. tuberculosis, as well as the effects of the associations between EOCzey and TCin and the drugs rifampicin (RIF) and isoniazid (INH) on the standard M. tuberculosis H37Rv strain. The Resazurin Microtiter Assay (REMA) technique was used to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of the compounds tested on nine M. tuberculosis CIs. The effects of the EOCzey / RIF, EOCzey / INH, TCin / RIF and TCin / INH associations on the standard M. tuberculosis H37Rv strain were evaluated according to the checkerboard method, determining the Fraction Inhibitory Concentration Index (FICi), in which the synergistic effect was observed with FICi values ≤ 0.5, additive effect with FICi >0.5 and ≤ 1 and antagonism with FICi >1.0. It was observed that EOCzey and TCin were able to inhibit the growth of all nine sensitive and resistant CIs with MIC values ranging from 9.75 μg / mL to 39 μg / mL. All four associations tested resulted in synergistic and additive effects, with no antagonistic effect. Both EOCzey / RIF and EOCzey / INH associations showed FICi values of 0.375 and 0.5, whereas the TCin / RIF and TCin / INH associations showed FICi values of 0.31, 0.375 and 0.5. / A Organização Mundial de Saúde (OMS) estimou a ocorrência de 10,4 milhões casos novos de tuberculose (TB) no mundo em 2015 com um aumento contínuo dos casos de resistência. Com a difilcudade de controle TB, existe a necessidade da descoberta de novos fármacos, especialmente sobre cepas resistentes e acredita-se que as plantas medicinais, através dos óleos essenciais (OEs), sejam uma das alternativas para bioprospecção de substâncias ativas, como o OE extraído da casca de Cinnamomum zeylanicum (OECzey), popularmente conhecida com canela, e o trans-cinamaldeído (TCin), seu composto, que possuem diversas propriedades terapêuticas, como ação antimicrobiana, anti-inflamatória, hipoglicemiante, entre outras. Nesse contexto, o presente estudo avaliou a ação antimicobacteriana do OECzey e do TCin sobre isolados clínicos (ICs) de M. tuberculosis, sensíveis e resistentes, como também os efeitos das associações entre o OECzey e TCin com os fármacos rifampicina (RIF) e isoniazida (INH) sob a cepa padrão M. tuberculosis H37Rv. Utilizou-se a técnica Resazurin Microtiter Assay (REMA) para determinação da concentração inibitória mínima (CIM) dos compostos testados sobre nove ICs de M. tuberculosis. Os efeitos das associações OECzey/RIF, OECzey/INH, TCin/RIF e TCin/INH sobre a cepa padrão M. tuberculosis H37Rv foram avaliadas de acordo com método Checkerboard, determinando-se o Índice de Concentração Inibitória Fracionada (IFIC), no qual efeito sinérgico foi observador com valores de IFIC ≤ 0,5, efeito aditivo com IFIC > 0,5 e ≤ 1 e antagonismo com IFIC > 1,0. Observou-se que OECzey e o TCin foram capazes de inibir o crescimento de todos os nove ICs, sensíveis e resistentes, com valores de CIM variando entre 9,75 μg/mL a 39 μg/mL. Todas as quatro associações testadas resultaram em efeito sinérgico e aditivo, com ausência efeito antagônico. Ambas associações OECzey/RIF e OECzey/INH apresentaram valores de ICIF de 0,375 e 0,5, enquanto que nas associações TCin/RIF e TCin/INH os valores de IFIC foram 0,31, 0,375 e 0,5.

DODOU, H. V. Atividade antimicrobiana da violaceína sobre Staphylococcus epidermidis. 2017. 95 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-04-06T16:04:54Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_hvdodou.pdf: 1913254 bytes, checksum: c2a123515261efe9f3fff2287481db0d (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-04-06T16:05:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_hvdodou.pdf: 1913254 bytes, checksum: c2a123515261efe9f3fff2287481db0d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-06T16:05:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_hvdodou.pdf: 1913254 bytes, checksum: c2a123515261efe9f3fff2287481db0d (MD5) Previous issue date: 2017-02-15 / Staphylococcus epidermidis is part of the human’s natural microbiota, but has pathogenic potential when it comes to infections related to medical devices. The emergence of strains resistant to several antimicrobials has created challenges in the choice of therapy. Given this scenario, it is very important to investigate new substances with antimicrobial potential. Violacein is a metabolite produced by bacteria of different species, especially Chromobacterium violaceum, which has potential antimicrobial activity on Gram-positive microorganisms. The aim of the study was to evaluate the antimicrobial activity of violacein on strains of S. epidermidis forming and non-forming biofilm, as well as to evaluate its ability to act synergistically with antimicrobial drugs already marketed. VIO demonstrated excellent antimicrobial action on S. epidermidis ATCC 12228 and ATCC 35984, presenting bacteriostatic action (MIC = 10 μg / mL and 20 μg / mL for S. epidermidis ATCC 12228 and 35984, respectively) and bactericidal action (MBC = 20μg / mL for both strains). In addition, the bactericidal action was observed with short exposure times (2-3 hours). Violacein was also capable of synergistically modulating the action of several antimicrobial agents, like amikacin, gentamicin, ciprofloxacin, cefepime, ceftazidime, vancomycin, meropenem, ceftriaxone, cephalothin e oxacilin, on S. epidermidis, reducing MIC values for these microorganisms by up to 16 times. VIO was able to inhibit the formation of microbial biofilms at the same concentration that inhibited growth in planktonic cells and eradicated already-formed biofilm at 8-fold higher concentration (MBEC = 160 μg / mL). Its action on biofilm already formed was potentiated when associated with antimicrobial drugs already marketed, being able to completely eradicate the biofilm when associated with ciprofloxacin, in concentrations equivalent to ½ MBEC. These results show that VIO is a promising substance for the development of a new antimicrobial drug with action on this pathogen, including its biofilm, or even to be associated with already commercialized antibiotics. / Staphylococcus epidermidis faz parte da microbiota natural do homem, mas apresenta potencial patogênico quando se trata de infecções relacionadas a dispositivos médicos. O surgimento de cepas resistente a diversos antimicrobianos vem criando desafios na escolha da terapêutica. Diante desse cenário, tornam-se muito importantes estudos que investiguem novas substâncias com potencial antimicrobiano. A violaceína (VIO) é um metabólito produzido por bactérias de diferentes espécies, com destaque para Chromobacterium violaceum, que apresenta potencial atividade antimicrobiana sobre microrganismos Gram-positivo. O estudo visou avaliar a atividade antimicrobiana da VIO sobre cepas de S. epidermidis formadoras e não formadoras de biofilme, assim como avaliar sua capacidade de agir sinergicamente com fármacos antimicrobianos já comercializados. A VIO demonstrou excelente ação antimicrobiana sobre S. epidermidis ATCC 12228 e ATCC 35984, apresentando, em baixas concentrações, ação bacteriostática (CIM = 10µg/mL e 20µg/mL para S. epidermidis ATCC 12228 e 35984, respectivamente) e bactericida (CLM = 20µg/mL para ambas as cepas). Além disso, a ação bactericida foi observada com curtos tempos de exposição (2-3horas). A VIO também foi capaz de modular sinergicamente a ação de diversos antimicrobianos, como amicacina, gentamicina, ciprofloxacino, cefepime, ceftazidima, vancomicina, meropenem, ceftriaxona, cefalotina e oxacilina sobre S. epidermidis, reduzindo os valores de CIM em até 16 vezes. A VIO foi capaz de inibir a formação de biofilme microbiano na mesma concentração que inibiu o crescimento em células planctônicas (CIMB=20µg/mL) e erradicou biofilme já formado em concentração 8 vezes maior (CMEB=160µg/mL). Sua ação sobre biofilme já formado foi potencializada quando associada aos fármacos cefepime, ciprofloxacino, vancomicina e meropenem, sendo capaz de erradicar completamente o biofilme na associação com ciprofloxacino, em concentrações equivalents a ½ CMEB. Estes resultados mostram que a VIO é uma substância promissora para o desenvolvimento de um novo fármaco antimicrobiano com ação sobre este patógeno, inclusive sobre seu biofilme, ou mesmo para ser associada a antibióticos já comercializados.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:45:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012 / O Men-Tsee-Khang (TMAI - Tibetan Medical and Astrological Institute), Dharamsala, India, e um instituto de ensino e pratica da medicina tibetana, que emprega plantas, contidas em formulas multi-ingredientes, na sua terapeutica. Objetivo: Realizar um levantamento das formulas utilizadas pelo Men-Tsee-Khang, focando nos transtornos neuropsiquiatricos, e comparar as indicacoes das plantas com dados farmacologicos da literatura cientifica. Metodologia: A partir de tecnicas e metodos da etnografia, como entrevistas e observacoes, selecionou-se cinco medicos que foram entrevistados entre julho de 2010 e janeiro de 2011. Ainda, a literatura cientifica foi consultada a respeito das acoes biologicas dos ingredientes contidos nas formulas indicadas.Resultados: Observou-se uma relacao entre os transtornos do sistema nervoso central e o humor rLung (um dos tres humores desta medicina), sendo 10 as formulas indicadas para tratar o desequilibrio deste humor, compreendendo 61 ingredientes (sais, produtos animais e plantas). Cada formula trata diversos sintomas relacionados ao desequilibrio do rLung, logo os ingredientes podem possuir indicacoes terapeuticas distintas daquela da formula a qual pertence. Para os produtos animais com identificacao ate especie, nao foram encontrados estudos de atividade farmacologica. As 48 especies vegetais presentes nas formulas sao classicas nesta medicina e constam no herbario do Men-Tsee-Khang. Os dados da literatura cientifica mostram que todas as formulas possuem ingredientes com acoes neuropsiquiatricas, e corroboram as indicacoes terapeuticas de 75,6% das plantas. Conclusao: Observou-se uma congruencia entre os usos das plantas nas medicinas tibetana e ocidental / BV UNIFESP: Teses e dissertações

SILVA, Cecília Rocha da. Efeito da combinação de amiodarona com fluconazol, in vitro, frente a isolados de C. tropicalis resistentes ao fluconazol : novos olhares para antigos fármacos. 2012. 88 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-07-23T15:28:48Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_crsilva.pdf: 1205725 bytes, checksum: c2595207f40718543809683053127039 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-08-06T11:50:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_crsilva.pdf: 1205725 bytes, checksum: c2595207f40718543809683053127039 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-08-06T11:50:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_crsilva.pdf: 1205725 bytes, checksum: c2595207f40718543809683053127039 (MD5) Previous issue date: 2012 / Candida tropicalis is a diploid yeast causing superficial infections and / or systemic, which can be acquired endogenously or exogenously and can affect several organs. In Brazil, among the species of Candida spp. The C.tropicalis is the second most common species isolated in Ceará and is rarely studied. Nowadays, we have experienced a significant increase in invasive fungal infections. But antifungal drugs on the market are restricted to a small number when compared to the antibacterial. Therefore, this fact coupled with the increased frequency of cross-resistance is necessary to search for new therapeutic strategies. Amiodarone (AMD) is traditionally used to treat patients with arrhythmia. Recent studies have shown a broad antifungal activity of this drug when combined with fluconazole (FLC). In the present study we induced resistance in seven strains of Candida tropicalis and evaluate a possible synergism between FLC and AMD. The evaluation of the interaction of the drugs was determined by calculating the Fractionary Inhibitory Concentration (FICI) and by flow cytometry, where we also evaluated the likely mechanism of action of this synergism. The isolates used in this study belong to the Laboratory of Experimental Bioprospecting in yeast (LABEL) the UFC. For the fulfillment of the methodology, the strains were recovered from stock and identified by molecular biology. The induction was carried out adapting the protocol of Pinto and Silva (2009). Sensitivity tests were performed using the broth microdilution test standardized by the CLSI, the document M27-A3. To evaluate the synergism used the technique of checkboard. Finally, to determine the possible mechanism of action of synergism, we determine the membrane integrity, mitochondrial transmembrane potential, formation of reactive oxygen species (ROS), comet assay, analysis of the oxidation of purine bases and caspases. Strains C.tropicalis after ~ 100 days reached an MIC> 64μg/mL. The sensitivity tests were MIC> 64μg/mL both the FLC as AMD. Of the strains tested, six showed synergism. The treatment changed the FLC + AMD plasma membrane integrity and mitochondrial increased levels of intracellular ROS, cause DNA damage and therefore led cell death by apoptosis. / Candida tropicalis é uma levedura diplóide causadora de infecções superficiais e/ou sistêmicas, as quais podem ser adquiridas de maneira endógena ou exógena e podem acometer diversos órgãos. No Brasil, dentre as espécies de Candida spp., a C.tropicalis é a segunda espécie mais comumente isolada e no Ceará é pouco estudada. Nos dias atuais, temos vivenciado um aumento significativo das infecções fúngicas invasivas. Porém as drogas antifúngicas disponíveis no mercado são restritas a um pequeno número quando comparadas as antibacterianas. Logo, este fato unido ao aumento da frequência de resistência cruzada faz necessária a busca por novas estratégias terapêuticas. A amiodarona (AMD) é usada classicamente para tratar pacientes com arritmia. Trabalhos recentes têm demonstrado uma ampla atividade antifúngica desta droga quando associado ao fluconazol (FLC). No presente estudo induzimos resistência em sete cepas de Candida tropicalis e avaliamos um eventual sinergismo entre FLC e AMD. A avaliação da interação das drogas foi determinada através do cálculo da Fractionary Inhibitory Concentration (FICI) e por meio da técnica de citometria de fluxo, onde também avaliamos o provável mecanismo de ação desse sinergismo. Os isolados utilizados no estudo pertencem ao Laboratório de Bioprospecção Experimental em Leveduras (LABEL) da UFC. Para o cumprimento da metodologia, as cepas foram recuperadas do estoque e identificadas por biologia molecular. A indução foi realizada adaptando-se o protocolo de Pinto e Silva (2009). Os testes de sensibilidade foram realizados utilizando-se o teste de microdiluição em caldo padronizado pelo CLSI, segundo o documento M27-A3. Para avaliar o sinergismo utilizou-se a técnica do checkboard. Por fim, para verificar o possível mecanismo de ação do sinergismo, determinamos a integridade de membrana, potencial transmembrana mitocondrial, formação de espécies reativas de oxigênio (ROS), teste do cometa, análise da oxidação de bases purinas e caspases. As cepas de C.tropicalis após ~100 dias atingiram um CIM > 64µg/mL. Os testes de sensibilidade apresentaram CIM > 64µg/mL tanto para o FLC como para AMD. Das cepas testadas, seis apresentaram sinergismo. O tratamento FLC+AMD alterou a integridade da membrana plasmática e mitocondrial, aumentou os níveis de ROS intracelularmente, causou danos ao DNA e, consequentemente, conduziu morte celular por apoptose.

Submitted by Lucelia Lucena (lucelia.lucena@ufpe.br) on 2015-03-10T18:14:26Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO_Jossana Pereira de Sousa.pdf: 2333444 bytes, checksum: 07238084c9e55d4782c66f5d6bb0ac60 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T18:14:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO_Jossana Pereira de Sousa.pdf: 2333444 bytes, checksum: 07238084c9e55d4782c66f5d6bb0ac60 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-02-03 / CNPq / O consumo de hortaliças minimamente processadas tem aumentado em âmbito mundial nas ultimas décadas, mas quando processadas sob condições higiênico-sanitárias insatisfatórias representam risco microbiológico e por isso a sanitização torna-se etapa crítica do processamento. No entanto, os produtos permitidos para uso em vegetais têm sido citados como responsáveis por efeitos indesejáveis. Como alternativa natural surge os óleos essenciais de plantas, cujo potencial antimicrobiano é atribuído principalmente aos seus compostos terpênicos majoritários. Diante deste contexto, este estudo objetivou avaliar o potencial de aplicação dos fitoconstituintes carvacrol e 1,8-cineol como sanitizantes naturais em hortaliças folhosas minimamente processadas. Foram determinadas as Concentrações Inibitórias Mínimas (CIM) dos compostos para os micro-organismos teste (Listeria monocytogenes ATCC 7644, Aeromonas hydrophila INCQS 7966 e Pseudomonas fluorescens ATCC 11253), a Concentração Inibitória Fracional (CIF) e a influência de sua aplicação na inibição do crescimento e sobrevivência de bactérias contaminantes de hortaliças minimamente processadas. Além disso, realizou-se avaliação sensorial das hortaliças tratadas com os compostos e investigação dos possíveis danos causados à célula bacteriana. Em todos os ensaios, frascos isentos dos fitoconstituintes foram utilizados como controle. Os valores de CIM do carvacrol e do 1,8-cineol variaram de 0,6 a 2,5 e 5 a 20 μL/mL, respectivamente. Os índices de CIF foram 0,25, sugerindo uma interação sinérgica. No ensaio de viabilidade das cepas em caldo vegetal verificou-se diferença significativa (p < 0,05) entre os tratamentos e o frasco controle ao longo de 24 h. A exposição das hortaliças aos fitoconstituintes por apenas 5 min provocou redução significativa (p < 0,05) nas contagens de micro-organismos pertencentes a microbiota das hortaliças. Estes resultados mostram considerável poder de inibição do crescimento e sobrevivência de bactérias associadas a hortaliças minimamente processadas. Quanto aos aspectos sensoriais, as hortaliças tratadas com a combinação dos fitoconstituintes, em concentrações subinibitórias, obtiveram notas superiores (p < 0,05) para os atributos aparência, sabor e percepção geral, após 48 h de armazenamento refrigerado. As observações da morfologia da célula bacteriana sugerem ainda que os compostos carvacrol e 1,8-cineol, isolados e combinados em concentrações subinibitórias, ocasionam danos à membrana citoplasmática e à parede celular da bactéria, o que pode causar lise e morte celular, inclusive em concentrações subinibitórias. Estes achados reforçam a idéia de que quando aplicados em combinação constituintes de óleos essenciais podem substituir sanitizantes sintéticos clássicos alcançando equilíbrio entre a demanda pela segurança microbiológica e a aceitabilidade organoléptica de hortaliças minimamente processadas.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:04:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9591_1.pdf: 2328932 bytes, checksum: 01006dd909889c0c6b8409ac75ede7f5 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / O consumo de hortaliças minimamente processadas tem aumentado em âmbito mundial nas ultimas décadas, mas quando processadas sob condições higiênico-sanitárias insatisfatórias representam risco microbiológico e por isso a sanitização torna-se etapa crítica do processamento. No entanto, os produtos permitidos para uso em vegetais têm sido citados como responsáveis por efeitos indesejáveis. Como alternativa natural surge os óleos essenciais de plantas, cujo potencial antimicrobiano é atribuído principalmente aos seus compostos terpênicos majoritários. Diante deste contexto, este estudo objetivou avaliar o potencial de aplicação dos fitoconstituintes carvacrol e 1,8-cineol como sanitizantes naturais em hortaliças folhosas minimamente processadas. Foram determinadas as Concentrações Inibitórias Mínimas (CIM) dos compostos para os micro-organismos teste (Listeria monocytogenes ATCC 7644, Aeromonas hydrophila INCQS 7966 e Pseudomonas fluorescens ATCC 11253), a Concentração Inibitória Fracional (CIF) e a influência de sua aplicação na inibição do crescimento e sobrevivência de bactérias contaminantes de hortaliças minimamente processadas. Além disso, realizou-se avaliação sensorial das hortaliças tratadas com os compostos e investigação dos possíveis danos causados à célula bacteriana. Em todos os ensaios, frascos isentos dos fitoconstituintes foram utilizados como controle. Os valores de CIM do carvacrol e do 1,8-cineol variaram de 0,6 a 2,5 e 5 a 20 &#956;L/mL, respectivamente. Os índices de CIF foram 0,25, sugerindo uma interação sinérgica. No ensaio de viabilidade das cepas em caldo vegetal verificou-se diferença significativa (p < 0,05) entre os tratamentos e o frasco controle ao longo de 24 h. A exposição das hortaliças aos fitoconstituintes por apenas 5 min provocou redução significativa (p < 0,05) nas contagens de micro-organismos pertencentes a microbiota das hortaliças. Estes resultados mostram considerável poder de inibição do crescimento e sobrevivência de bactérias associadas a hortaliças minimamente processadas. Quanto aos aspectos sensoriais, as hortaliças tratadas com a combinação dos fitoconstituintes, em concentrações subinibitórias, obtiveram notas superiores (p < 0,05) para os atributos aparência, sabor e percepção geral, após 48 h de armazenamento refrigerado. As observações da morfologia da célula bacteriana sugerem ainda que os compostos carvacrol e 1,8-cineol, isolados e combinados em concentrações subinibitórias, ocasionam danos à membrana citoplasmática e à parede celular da bactéria, o que pode causar lise e morte celular, inclusive em concentrações subinibitórias. Estes achados reforçam a idéia de que quando aplicados em combinação constituintes de óleos essenciais podem substituir sanitizantes sintéticos clássicos alcançando equilíbrio entre a demanda pela segurança microbiológica e a aceitabilidade organoléptica de hortaliças minimamente processadas

Diante do aumento global da resistência microbiana, cada vez mais as combinações de antimicrobianos são utilizadas na tentativa de obter uma atividade sinérgica eficaz que possa ser utilizada na prática clínica. O objetivo deste trabalho foi comparar a atividade de polimixina B isoladamente e em combinação com tigeciclina e carbapenêmicos (ertapenem e meropenem), frente a isolados de Enterobacter sp. resistentes aos carbapenêmicos. Foram selecionados quatro isolados de Enterobacter sp. resistentes aos carbapenêmicos, sendo três isolados produtores de carbapenemases (KPC, NDM, OXA-48-like) e um não produtor de carbapenemases (NPC). A avaliação da atividade sinérgica antimicrobiana foi realizada por ensaio de time-kill com as seguintes concentrações de cada antimicrobiano: tigeciclina 1mg/L, meropenem 1mg/L e ertapenem 0,5mg/L, que correspondem aos pontos de corte de sensibilidade do CLSI (2016). Para polimixina B, foram utilizadas diferentes concentrações de acordo com o perfil de susceptibilidade do isolado: para os isolados sensíveis, utilizou-se 0,5x; 1x e 2x a CIM do isolado; para o isolado resistente, foram utilizados 0,5x; 1x e 2x o ponto de corte de sensibilidade do CLSI (2 mg/L). Foi considerada sinérgica a combinação com redução ≥ 2 logs do inoculo inicial em comparação ao antimicrobiano sozinho mais ativo. As combinações de polimixina B em diferentes concentrações (0,5; 1 e 2mg/L) com meropenem apresentaram atividade sinérgica para a cepa produtora de NDM (CIM polimixina B 1 mg/L; CIM meropenem 8 mg/L) As combinações de polimixina B com tigeciclina foram sinérgicas apenas na concentração de polimixina B de 0,125 mg/L para cepa produtora de OXA-48-like (CIM polimixina B 0,25 mg/L; CIM tigeciclina 2 mg/L) e na concentração de 1 mg/L para a cepa produtora de NDM. Para a cepa NPC (CIM polimixina B 0,5 mg/L; CIM tigeciclina 4 mg/L; CIM meropenem 4 mg/L), apenas a tripla combinação com polimixina B (1 mg/L), tigeciclina e meropenem apresentou atividade sinérgica. A combinação de dois carbapenêmicos não apresentou atividade sinérgica para nenhum isolado, porém, quando acrescentado tigeciclina ao esquema, observou-se sinergismo no isolado produtor de OXA-48-like, o que leva ao questionamento da efetividade da terapia “carbapenem suicida”. Para o isolado produtor de KPC e com padrão de resistência a polimixina B, nenhuma das combinações testadas apresentou sinergismo. Esta situação é bastante preocupante devido à alta prevalência de infecções por bactérias produtoras de KPC nos hospitais brasileiros, juntamente com as crescentes taxas de resistência as polimixinas. / Due to the increase in microbial resistance, combinations of antimicrobials are increasingly being used to improve the therapeutic response. The objective of this study was to compare the activity of polymyxin B alone and in combination with tigecycline and carbapenem (ertapenem and meropenem) against to carbapenem-resistant Enterobacter sp isolates. Four isolates were selected, three were carbapenemase-producing (KPC, NDM, OXA-48-like) and a non-carbapenemase-producing (NCP). The evaluation of synergistic antimicrobial activity was performed by time-kill assay with the following concentrations of each antimicrobial: tigecycline 1mg/L, meropenem 1mg/L and ertapenem 0.5mg/L, which correspond to the breakpoints of CLSI (2016). For polymyxin B, different concentrations were used according to the susceptibility profile of the isolate: for susceptible isolates, it was used 0.5x; 1x and 2x the MIC of the isolate, for the resistant isolates it was used 0.5x; 1x and 2x the breakpoint of CLSI (2 mg/L). The combination with reduction ≥ 2 logs of the initial inoculum compared to the most active antimicrobial alone was considered synergies. Combinations of polymyxin B at different concentrations (0.5; 1 and 2 mg/L) with meropenem showed synergistic activity for the NDM-producing isolate (MIC polymyxin B 1 mg/L, MIC meropenem 8 mg/L) Combinations of polymyxin B with tigecycline were synergistic only at the concentration of polymyxin B of 0.125 mg/L for the OXA-48-like-producing isolate (MIC polymyxin B 0.25 mg/L, MIC tigecycline 2 mg/L) and at the concentration of 1 mg/L for the NDM-producing isolate. For the NCP isolate (MIC polymyxin B 0.5 mg/L; MIC tigecycline 4 mg/L; MIC meropenem 4 mg/L), only the triple combination of polymyxin B (1 mg/L) plus tigecycline and meropenem presented synergistic activity. The combination of two carbapenems was not synergic for the four isolates; however, when tigecycline was added to the regimen, synergies for the OXA-48-like-producing isolate were observed. Therefore, the so called, "carbapenem suicide" therapy was not effective in vitro against our isolates. For the KPC-producing isolate that it is polymyxin B resistant, none of the combinations tested showed synergies. This situation is very worrisome due to high prevalence of infections by KPC-producing in the Brazilian hospitals, associate with the increasing rates of polymyxins resistance.

A.baumannii é um importante patógeno em infecções nosocomiais principalmente por sua capacidade de se tornar resistente aos antimicrobianos. Surtos de A.baumannii resistente aos carbapenêmicos (ABRC) têm sido descritos em todo mundo. Devido à emergência de resistência aos antimicrobianos e ausência de novas opções de tratamento, as polimixinas reemergiram como opção de terapia contra infecções causadas por A.baumannii. O uso de polimixina é associado a maior mortalidade e menor eficácia comparada a outros antimicrobianos. Alguns estudos in vitro têm avaliado a combinação de polimixina com outros antimicrobianos a fim de aumentar a eficácia dos tratamentos. O objetivo deste estudo foi avaliar o sinergismo entre a polimixina B com outros antimicrobianos em isolados de ABRC, pelo método de Curvas Tempo-Morte bacteriana (Time- Kill Curves). Os isolados foram provenientes de banco de amostras e foram avaliadas as combinações de polimixina B com carbapenêmicos (imipenem e meropenem), tigeciclina, rifampicina, amicacina e ceftazidima. As combinações foram testadas nos tempo 0, 30’, 1,4,12 e 24 h. Sinergismo entre polimixina B foi demonstrado contra todos antimicrobianos para ambos isolados, exceto para ceftazidima e imipenem no isolado 1. Nosso estudo mostrou que tigeciclina, amicacina e rifampicina são agentes mais ativos combinados com polimixina B, sendo assim estes agentes podem apresentar efeito benéfico em combinação com a polimixina no tratamento de ABRC. / A.baumannii is an important pathogen in nosocomial infections primarily for its ability to become resistant to antimicrobials. Outbreaks carbapenem- resistant A.baumannii (CRAB) has been described worldwide. Due to the emergence of antimicrobial resistance and the absence of new treatment options, the polymyxins reemerged as an option therapy against infections caused by A.baumannii. The use of polymyxin is associated with higher mortality and lower effectiveness compared to other antimicrobials. In vitro studies have evaluated the combination of polymyxin with other antimicrobial agents to enhance the effectiveness of the treatments. This study was to evaluate the synergy between polymyxin B with other antimicrobials in isolates from ABRC, by Time-Kill Curves. The isolates were from stool samples and were evaluated combinations of polymyxin B with carbapenems (imipenem and meropenem), tigecycline, rifampin, amikacin and ceftazidime. The combinations were tested at time 0, 30 ', 1,4,12 and 24 h. Synergism between polymyxin B was demonstrated against all antimicrobials for both isolates, except for ceftazidime and imipenem in isolated 2. Our study showed that tigecycline, amikacin and rifampicin more active agents are combined with polymyxin B, and thus these agents may have a beneficial effect in combination with a polymyxin in treating CRAB.