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Resistência a Sclerotinia sclerotiorum em plantas de soja geneticamente modificadas para expressar o gene da oxalato descarboxilase de Flammulina velutipes

Cunha, Welcimar Gonçalves da 06 May 2010 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2010. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2012-06-26T22:46:49Z No. of bitstreams: 1 2010_WelcimarGoncalvesCunha.pdf: 2975091 bytes, checksum: 539028d8614ac1d1f4d4b204dd2e7de4 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-06-27T14:27:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_WelcimarGoncalvesCunha.pdf: 2975091 bytes, checksum: 539028d8614ac1d1f4d4b204dd2e7de4 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-27T14:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_WelcimarGoncalvesCunha.pdf: 2975091 bytes, checksum: 539028d8614ac1d1f4d4b204dd2e7de4 (MD5) / O mofo branco, causado pelo fungo Sclerotinia sclerotiorum, é hoje um dos principais problemas da cultura da soja e afeta diretamente a economia dos principais países produtores. A incidência desse patógeno acarreta em danos expressivos na produção e qualidade dos grãos, podendo atingir perdas em torno de 80%. O ácido oxálico, produzido pelo fungo durante o processo de infecção, é considerado o principal fator de patogenicidade do fungo S. sclerotiorum. A expressão de enzimas que degradam o ácido oxálico em plantas transgênicas tem sido utilizada em diversas culturas visando o desenvolvimento de cultivares resistentes. No presente trabalho, o gene oxdc que codifica para a enzima oxalato descarboxilase, isolado do fungo Flammulina velutipes, foi inserido via biobalística no genoma da soja. Dezesseis eventos T2 foram avaliados via inoculação de discos de micélio do fungo S. sclerotiorum em folhas destacadas. A análise da curva de progresso da doença revelou que todos os eventos transgênicos apresentaram atraso no desenvolvimento dos sintomas quando comparados com o controle não transgênico. A área abaixo da curva de progresso da doença foi utilizada para sumarizar a severidade da doença em cada evento transgênico e no controle. O teste de Kruskal-Wallis revelou que houve diferença significativa (P ≤ 0,05) entre os tratamentos. Os eventos OXDC.9.21 e OXDC.8.18 tiveram os menores índices de severidade. Tais eventos apresentaram respectivamente, índices de severidade 96% e 93% menor que o apurado para o controle. Os resultados impetrados a partir da curva de progresso da doença e da severidade da doença utilizando o teste de inoculação da folha destacada com o fungo S. sclerotiorum sugerem que a expressão do gene da oxdc em soja confere aumento do nível de resistência das plantas ao patógeno.
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Caracterização de resistência de genótipos de soja a Bemisia tabaci biótipo B (hemiptera: aleyrodidae) /

Cruz, Patrícia Leite, 1987. January 2015 (has links)
Orientador: Edson Luiz Lopes Baldin / Banca: Carlos Frederico Wilcken / Banca: José Djair Vendramim / Banca: André Luiz Lourenção / Banca: Arlindo Leal Boica Junior / Resumo: A soja, Glycine max (L.) Merrill, é uma das culturas mais importantes para o Brasil, com elevada produtividade e forte participação nas exportações. Essa leguminosa representa uma importante fonte nutricional para o homem e seus derivados podem ser utilizados na nutrição animal ou mesmo na produção de energia renovável, na forma de biodiesel. Embora a cultura apresente elevado potencial, o ataque de pragas, como o da mosca-branca, Bemisia tabaci (Gennadius) biótipo B (Hemiptera: Aleyrodidae), compromete uma parcela significativa do volume produzido. Esse inseto tornou-se praga de importância econômica para a cultura da soja devido às infestações crescentes e dificuldades de manejo. O controle desse hemíptero é feito principalmente através de aplicações de inseticidas sintéticos, os quais são geralmente utilizados de forma abusiva, impactando sobre a saúde do homem e o meio ambiente. Esse quadro estimula o estudo de alternativas menos agressivas e mais eficientes, alinhadas ao manejo integrado de pragas (MIP). Nesse sentido, o uso de cultivares resistentes é considerada uma valiosa ferramenta, podendo reduzir a população das pragas abaixo do nível de dano econômico, sem prejuízos sócioambientais. Neste trabalho, 15 genótipos de soja foram avaliados sob o ataque de B. tabaci biótipo B, visando caracterizar possíveis tipos de resistência (antixenose, antibiose e tolerância) contra o inseto. Inicialmente, foram realizados ensaios de antixenose (com e sem chance de escolha). A evolução da colonização do inseto confinado aos genótipos e a configuração dos tricomas das plantas também foram avaliados. Em adição, foram realizados ensaios de desempenho ... / Abstract: Soybean, Glycine max (L.) Merrill, is one of the most important crops in Brazil with high productivity and expressive participation in exports. This leguminous is an important nutritional source for human and their derivatives may be used in animal feed or in the production of renewable energy as biodiesel. Although it has high production potential, the pest attack such as silverleaf whitefly, Bemisia tabaci (Gennadius) biotype B (Hemiptera: Aleyrodidae), undertakes a significant amount of the volume produced. This insect has become pest of economic importance to the soybean crop due to the increasing infestations and difficulties of management. The control of this hemipteran is made mainly through applications of synthetic insecticides, which are often overly utilized, having an impact on human and the environmental health. This situation encourages the study of less aggressive and more efficient alternatives, suitable to the integrated pest management (IPM). In this sense, the use of resistant genotype is considered a valuable tool, which can reduce the population of pests below the economic injury level without socio-environmental damage. In this work, 15 soybean genotypes were evaluated under attack of B. tabaci biotype B to characterize possible types of resistance (antixenosis, antibiosis and tolerance) against this insect. Initially, antixenosis assays were performed (free and no choice). The raise of the colonization of this insect confined to the genotypes and the characteristics of trichomes were also evaluated. In addition, biological performance tests were conducted to characterize the occurrence of antibiosis. In the last step, tolerance tests were conducted ... / Doutor
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Isolamento e caracterização de sequências expressas similares a genes de resposta de defesa a patógenos em soja / Isolation and characterization of expressed sequences similar to defense response genes to pathogens in soybean

Andrade, Viviane Aguiar 29 July 2005 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-10-07T17:22:47Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 563823 bytes, checksum: 2c66f83b8501ad88309e6fc9cd513ad6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-07T17:22:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 563823 bytes, checksum: 2c66f83b8501ad88309e6fc9cd513ad6 (MD5) Previous issue date: 2005-07-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Devido à grande importância que a soja representa para a agricultura mundial, avanços vêm ocorrendo nas técnicas voltadas para o desenvolvimento genético, molecular e genômico desta leguminosa a fim de assegurar produção suficiente para a comercialização dos grãos e de seus derivados. As principais perdas no cultivo da soja são decorrentes de doenças. Entender as interações entre hospedeiro-patógeno e os mecanismos de resistência envolvidos nessa relação são importantes para possibilitar o controle de grandes epidemias em culturas agrícolas, bem como elucidar mecanismos de sinalização ativados em resposta ao patógeno. Dentro deste cenário, este trabalho objetivou a identificação de genes envolvidos na resposta de resistência a doenças da soja. Por meio do screening de uma biblioteca de cDNA do cultivar FT-Cristalina, clones positivos foram isolados utilizando o fragmento de RFLP A53-09 como sonda. Este fragmento possui 1019 pb e apresenta homologia a genes de resistência. Três clones foram obtidos a partir da análise de 5 x10 5 placas de lise de fagos recombinantes hibridizados à sonda, os quais foram denominados: A5309-47, A5309-71 e A5309-72. O tamanho estimado de cada um foi de 2,0; 1,3 e 1,12 kb, respectivamente. Estes clones foram seqüenciados e suas seqüências nucleotídicas foram submetidas à análise de similaridade com outras seqüências existentes no banco de dados GenBank, com o auxílio do programa BLASTX. O alinhamento entre as seqüências nucleotídicas dos clones isolados com a sonda A53-09 mostrou uma identidade de nucleotídeos variando entre 41 e 45%. O clone A5309-47 foi parcialmente seqüenciado, obtendo-se uma sequência de 963 pb com uma ORF putativa correspondente a 78 resíduos de aminoácidos, homóloga à enzima lipoxigenase (LOX) de Glycine max, com 85% de identidade. O clone A5309-71 foi totalmente seqüenciado; contém 1587 pb com uma ORF correspondente a 306 resíduos de aminoácidos. A análise de similaridade revelou que há 75% de identidade deste clone com a proteína estearoil-acil dessaturase de Arabidopsis thaliana. O clone A5309-72 também foi totalmente seqüenciado, apresentando 1263 pb, com uma ORF correspondente a 124 resíduos de aminoácidos com identidade de 43% a uma peroxidase de Glycine max. Todos os clones isolados apresentaram similaridades com enzimas chaves para a ativação de várias vias de respostas de defesa, por meio de mecanismos que alteram todo o metabolismo da planta. Sendo assim, todas as seqüências de DNA obtidas correspondem a proteínas que estão potencialmente envolvidas na defesa da planta. / The great importance of soybean to world agriculture has brought advancements in techniques for the genetic, molecular and genomic development of this legume in order to assure enough production for the commercialization of grains and byproducts. The main losses in soybean crop are due to diseases. Understanding host-pathogen interactions and the resistance mechanisms involved in this relationship is important in making it possible to control major epidemics in crops, as well as to elucidate signaling mechanisms activated in response to pathogens. In this context, the objective of this work was to identify genes involved in the resistance response to soybean diseases. By screening a cDNA library of cultivar FT-Cristalina, positive clones were isolated using the A53-09 fragment as an RFLP probe. This 1019-pb fragment shows resistance gene homology. Three clones were obtained from the analysis of 5x10 5 lysis plates of recombinant phages hybridized to the probe, which were named: A5309-47, A5309-71 and A5309-72. The estimated size of each one was of 2,0, 1.3, and 112 kb respectively. These clones were sequenced and their nucleotide sequences were analyzed for similarity to sequences in GenBank database, using the BLASTX software. The alignment between the nucleotide sequences of the clones isolated with the A53-09 probe showed a nucleotide identity varying between 41 and 45%. The clone A5309-47 was partially sequenced, resulting in a 963-pb sequence with a putative ORF corresponding to 78 amino acid residues, homologous to Glycine max lipoxigenase enzyme (LOX), with 85% identity. The clone A5309-71 was totally sequenced; it contains 1587 pb with ORF corresponding to 306 amino acid residues. The similarity analysis revealed 75% identity of this clone with the protein estearoil-acyl desaturase of Arabidopsis thaliana. The clone A5309-72 was also totally sequenced, giving 1263 pb, with ORF corresponding to 124 amino acid residues with 43% identity to a Glycine max peroxidase. All isolated clones showed high similarities with key enzymes for the activation of several defense-response pathways, through mechanisms which modify the whole plant metabolism. Therefore, all DNA obtained sequences correspond to proteins potentially involved in plant defense. / Dissertação importada do Alexandria.
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Estudo de variáveis ecológicas de Pratylenchus brachyurus em soja e elaboração de uma escala de notas para seleção de genótipos a campo

Figueiredo, Adriana [UNESP] 08 January 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-08Bitstream added on 2014-06-13T19:02:19Z : No. of bitstreams: 1 figueiredo_a_dr_jabo.pdf: 654296 bytes, checksum: 4ff0f4b32c18feebe1060e5d862ef25f (MD5) / Nos últimos anos, as perdas causadas por Pratylenchus brachyurus em soja, no Brasil, são alarmantes, e reduções de produtividades de até 21% já foram assinaladas. A utilização de variedades resistentes de alto potencial produtivo seria a alternativa mais eficaz e mais vantajosa de manejo dessa praga. Nas avaliações usuais de resistência de genótipos, o sistema radicular das plantas é processado individualmente em laboratório para a determinação do fator de reprodução, tornando-se uma prática inviável para os programas de melhoramento das grandes empresas em função do elevado número de genótipos avaliados anualmente. Uma escala de notas para avaliação da resistência de genótipos a campo foi desenvolvida no presente estudo e adapta-se a esses casos. A escala contém seis graus de infecção variando de 0 (zero) a 5 com base na percentagem da área do sistema radicular lesionada. Também foram conduzidos ensaios com o objetivo de se estudar a influência da textura do substrato, densidade inicial do inóculo, duração do ensaio e fases do ano na reprodução de P. brachyurus em soja, tendo em vista a escolha das condições adequadas para a avaliação da resistência de genótipos a este nematoide. Este estudo foi conduzido em casa de vegetação da Estação Experimental da Monsanto do Brasil, em Morrinhos-GO, durante a safra de 2010/2011. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, seguindo o esquema fatorial 4 x 4 x 3 x 3 x 2 (4 texturas do substrato x 4 densidades iniciais do inóculo x 3 períodos... / In recent years the losses caused by Pratylenchus brachyurus on soybean in Brazil are alarming and yield reductions of up to 21% have been reported. The appropriate management of this pest using resistant materials is a relevant tool. For the evaluation of resistance root system genotypes of individual plants, samples are processed individually in laboratory for determining the reproduction factor, making it a very laborious and unviable practice improvement for large companies programs due to the high number of genotypes evaluated annually. A rating scale for assessing the strength of the field was developed for genotypes in this study and to suit these cases. The scale has six degrees of infection, ranging from 0 (zero) to 5 based on the percentage of the area of damaged root system. Also, tests were conducted with the objective of studying the influence of the texture of the substrate, the initial inoculum density, and duration of the test phase of the year in the reproduction of P. brachyurus in soybean in order to choose the conditions suitable for assessing the genotype resistance to this nematode. This study was conducted in a greenhouse at the Experimental Station of Monsanto Brazil in Morrinhos-GO, during the 2010/2011 season. The experimental design was completely randomized factorial following the 4 x 4 x 3 x 3 x 2 (4 x 4 textures substrate initial inoculum densities x 3 periods of the trial x 3 x 2 hosts stages of the year) with five replicates...(Complete abstract click electronic access below)
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Resistência da soja à ferrugem asiática e ao oídio: herança de caracteres quali-quantitativos e mapeamento genético

Catelli, Lizandra Lucy [UNESP] 17 February 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-17Bitstream added on 2014-06-13T21:03:51Z : No. of bitstreams: 1 catelli_ll_dr_jabo.pdf: 365148 bytes, checksum: 08d9d16fd7bd7a58dff2a344f86ecfe6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os fungos patogênicos Phakopsora pachyrhizi e Erysiphe diffusa causam a ferrugem asiática e oídio, respectivamente, em soja, e são responsáveis por grandes perdas nas áreas sojícolas de muitos países. O objetivo deste trabalho foi estudar a herança de caracteres qualitativos e quantitativos e mapear genes de resistência dessas doenças, utilizando populações de plantas F2 e F2:3 derivados dos cruzamentos entre os genótipos resistentes à ferrugem asiática PI 200487 e PI 200526 com o genótipo suscetível BRI98-641. Ambos os genótipos apresentaram um gene dominante para a resistência, os quais foram mapeados no mesmo grupo de ligação da soja (GL-N). Adicionalmente, as análises quantitativas demonstraram que o modelo aditivo-dominante foi suficiente para explicar a herança dos dois caracteres, número de urédias e severidade, mostrando que alguns genes adicionais de efeito menores podem contribuir para a resposta da severidade da ferrugem asiática nas duas populações. No entanto, o número de urédias demonstrou ser menos influenciado pelas condições ambientais, indicando que os genes podem estar concentrados apenas nos parentais resistentes, evidenciando o caráter de resistência. A severidade continua sendo importante na seleção, pois demonstra melhor o caráter seletivo e pela facilidade de avaliação. Para oídio da soja o gene de resistência foi mapeado em uma população F2:3, derivada do cruzamento entre os genótipos BR01-22106 (resistente) e PI 200487 (suscetível). A resistência ao oídio nesta população foi determinada por um único gene dominante e permitiu o mapeamento de um loco red no grupo de ligação C2 da soja. Os marcadores associados ao Rpp e Red identificados neste trabalho mostraram-se potencialmente úteis na seleção assistida de plantas resistência para o desenvolvimento de cultivares elites carregando estes genes e para manter... / The pathogenic fungi Phakopsora pachyrhizi and Erysiphe diffusa cause the Asian rust and powdery mildew diseases, respectively, in soybean and are responsible for severe yield reduction around the world. The aim of this work was to study the inheritance of qualitative and quantitative resistance characters and to map disease resistance genes in F2 e F2:3 soybean populations, derived from the crosses between Asian rust resistance genotypes, PI 200487 and PI 200526, with the susceptible genotype BRI98-641. Both genotypes revealed a dominant resistance gene that was mapped in the same soybean linkage group (LG-N). In addition, quantitative analysis demonstrated that the additivedominant model was sufficient to explain the inheritance of both characters, number of uredinia and severity, showing that some additional genes can contributed to soybean response to Asian rust severity in the two populations. However, the number of uredinia showed to be less influenced by environmental conditions, demonstrating that gene could be concentrated the in PI 200487 and PI 200526 and be evidence for resistance character. The severity remains important in the selection process because showing the best selective character and the available to evaluation. For powdery mildew, the resistance gene was mapped on linkage group C2 in a F2:3 populations derived from the cross between BR01-22106 (resistant) and PI 200487 (susceptible) genotypes. The powdery mildew resistance was determined by one dominant gene, mapped on linkage group C2 of soybean. The associate markers to Rpp and Red genes will be very useful to assist the selection of resistant plants on the development of elite cultivars carrying these genes and keep the competitiveness and sustainability of soybean Brazilian agribusiness.
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Caracterização de Rhizoctonia solani Kühn, agente causal da mela da soja (Glycine max (L.) Merrill), seleção de genótipos e controle químico

Meyer, Maurício Conrado [UNESP] 02 1900 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-02Bitstream added on 2014-06-13T20:06:03Z : No. of bitstreams: 1 meyer_mc_dr_botfca.pdf: 871879 bytes, checksum: 19c7529e77cff6ad15a7c03041da99d7 (MD5) / A mela da soja ocorre em várias regiões tropicais e subtropicais no mundo, sendo responsável por reduções de produtividade de até 50% nos EUA e de 31% no Brasil. A doença é causada pelo fungo Rhizoctonia solani AG1-IA e AG1-IB, com relatos do AG2-3 somente no Japão. No Brasil há incidência de mela nas regiões Norte, Nordeste e Centro Oeste. A caracterização do patógeno é fundamental para o estabelecimento de estratégias de controle e direcionamento de programas de melhoramento na busca de resistência genética. O controle químico representa a única alternativa após a instalação da doença, cuja eficiência varia em função das condições ambientais. O objetivo deste trabalho foi caracterizar o agente causal da mela da soja no Brasil, bem como desenvolver metodologia de seleção e avaliar a variabilidade genética em germoplasma de soja para resistência à doença, e o efeito de fungicidas e indutores de resistência sobre o patógeno e a doença. Isolados de R. solani provenientes do Mato Grosso, Maranhão, Roraima e Tocantins, foram analisados quanto às características citológicas, morfológicas, culturais e fusão de hifas para determinação do grupamento de anastomose... / Rhizoctonia foliar blight (RFB) of soybean occur on some world tropical and subtropical regions, causing yield reductions of 50% in USA and of 31% in Brazil. The disease is caused by Rhizoctonia solani AG1-IA and AG1-IB, and by AG2-3 only in Japan. The RFB occurs in Brazil in the North, Northeast and Mid-West regions of the country. The characterization of the pathogen is important for the establishment of disease control strategies and breeding for genetic resistance. Chemical control remains the only measure for controlling RFB after its incidence in a field, but its efficiency depends on the environmental conditions. The objectives of the present work were: characterization of Brazilian RFB isolates, screening methodologies and evaluation of soybean germplasm for genetic resistance, evaluation of fungicides and activators for their effects upon systemic acquired resistance on the R. solani and RFB. Isolates from the states of Mato Grosso, Maranhão, Roraima and Tocantins were analyzed for cytological, morphological, cultural and hyphal fusion characteristics. These isolates were also compared by Random Amplified Polimorfic DNA (RAPD) and by homology of rDNA-ITS sequence regions in order to define anastomosis group (AG) and Intraspecific Group (ISG) of the pathogen. Germplasm evaluation methodologies for resistance to RFB were compared by different inoculation methods. The effect of fungicides and activators of plant resistance were tested in vitro and in vivo...(Complete abstract, click electronic access below)
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Efeito de lodo de esgoto sobre a nutrição, nodulação e controle de doenças da soja

Araújo, Fabio Fernando de [UNESP] 10 1900 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003-10Bitstream added on 2014-06-13T21:07:00Z : No. of bitstreams: 1 araujo_ff_dr_botfca.pdf: 297636 bytes, checksum: 3d3def5397e1d42329507fdbdad9162a (MD5) / O lodo de esgoto, atendendo as exigências ambientais, apresenta grande potencial para utilização no manejo de solos na agricultura, onde vem sendo amplamente disposto. Sua utilização altera propriedades químicas, físicas e biológicas do solo devido à sua composição em macro e micronutrientes e matéria orgânica. Estas alterações podem proporcionar benefícios como aumento da disponibilidade nutricional às culturas, indução de supressividade aos fitopatógenos veiculados pelo solo e resistência às doenças da parte aérea. Por outro lado, pode influenciar negativamente o equilíbrio biológico e químico no solo, devido à presença de concentrações consideráveis de N disponível, sais solúveis e metais pesados. Com o objetivo de avaliar os efeitos da incorporação de lodo de esgoto ao solo sobre a nodulação, a indução de supressividade a fitopatógenos veiculados pelo solo e resistência às doenças da parte aérea da soja (Glycine max), foram realizados diversos experimentos em laboratório e casa de vegetação utilizando-se solo coletado, no período de 2001 a 2003, de área experimental da Embrapa Meio Ambiente, Jaguariúna, SP. Esta área recebeu aplicações sucessivas de lodos de esgotos, originários das Estações de Tratamento de Esgoto de Barueri e de Franca, no Estado de S. Paulo, durante cinco anos (1998-2002). A incorporação de lodo ao solo resultou em aumento da atividade microbiana (avaliada pela atividade da enzima desidrogenase e hidrólise de diacetato de fluoresceína – FDA) e elicitação de fitoalexinas em cotilédones de soja. A avaliação do efeito do lodo sobre a nodulação e desenvolvimento da soja, no primeiro experimento realizado com a coleta de solo após a quarta aplicação anual do lodo na área, foi positiva, entretanto na segunda avaliação, após a quinta aplicação do lodo, observou-se que as maiores concentrações de... . / Sewage sludge, had been shown great potential for use in the agriculture, where it comes being widely used. There are some modifications on chemical, physical and biological in the soil properties due to its composition of macro and micronutrients and organic substances. These alterations can provide benefits as an increase to the availability of nutrients to the plants, suppressiveness induction of soilborne plant pathogens and resistance to foliar diseases. However, it may influence negatively the biological and chemical balance in the soil, due to presence of considerable amounts of available N, soluble salts and heavy metals. The aim of this work was to evaluate the effect of sewage sludge incorporation into the soil on the nodulation, suppressiveness induction of soilborne plant pathogens and foliar resistance to diseases in soybean (Glycine max). Experiments were realized in the laboratory and in the greenhouse using collected soil during the period between 2001 and 2003 in an experimental area of the Embrapa Meio Ambiente, Jaguariúna, SP. This area received successive applications from sewage sludge, originary from the sewage stations treatment of Barueri and Franca, in the São Paulo State, Brazil, during five years (1998-2002). The incorporation of sludge into the soil resulted in an increase of the microbial activity (evaluated by the activity of the enzyme dehydrogenase and fluorescein diacetate (FDA) hydrolysis) and phytoalexin accumulation in soybean cotyledons. The evaluation of the effect of the sludge on the nodulation and soybean development. The first experiment was carried out with soil from the experimental area, after the fourth annual application of the sludge and it was positive. However, in the second evaluation, after the fifth application of the sludge, it was observed that high concentrations of had reduced the nodulation and the development in... (Complete abstract, click electronic address below).
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Caracterização de resistência de genótipos de soja a Bemisia tabaci biótipo B (hemiptera: aleyrodidae) / Characterization of soybean resistance to bemisia tabaci biotype b (hemiptera: aleyrodidae)

Cruz, Patrícia Leite [UNESP] 26 March 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-26Bitstream added on 2015-05-14T16:58:39Z : No. of bitstreams: 1 000829381.pdf: 1477678 bytes, checksum: d692e9d2dcfd4466581300cd94be73de (MD5) / A soja, Glycine max (L.) Merrill, é uma das culturas mais importantes para o Brasil, com elevada produtividade e forte participação nas exportações. Essa leguminosa representa uma importante fonte nutricional para o homem e seus derivados podem ser utilizados na nutrição animal ou mesmo na produção de energia renovável, na forma de biodiesel. Embora a cultura apresente elevado potencial, o ataque de pragas, como o da mosca-branca, Bemisia tabaci (Gennadius) biótipo B (Hemiptera: Aleyrodidae), compromete uma parcela significativa do volume produzido. Esse inseto tornou-se praga de importância econômica para a cultura da soja devido às infestações crescentes e dificuldades de manejo. O controle desse hemíptero é feito principalmente através de aplicações de inseticidas sintéticos, os quais são geralmente utilizados de forma abusiva, impactando sobre a saúde do homem e o meio ambiente. Esse quadro estimula o estudo de alternativas menos agressivas e mais eficientes, alinhadas ao manejo integrado de pragas (MIP). Nesse sentido, o uso de cultivares resistentes é considerada uma valiosa ferramenta, podendo reduzir a população das pragas abaixo do nível de dano econômico, sem prejuízos sócioambientais. Neste trabalho, 15 genótipos de soja foram avaliados sob o ataque de B. tabaci biótipo B, visando caracterizar possíveis tipos de resistência (antixenose, antibiose e tolerância) contra o inseto. Inicialmente, foram realizados ensaios de antixenose (com e sem chance de escolha). A evolução da colonização do inseto confinado aos genótipos e a configuração dos tricomas das plantas também foram avaliados. Em adição, foram realizados ensaios de desempenho ... / Soybean, Glycine max (L.) Merrill, is one of the most important crops in Brazil with high productivity and expressive participation in exports. This leguminous is an important nutritional source for human and their derivatives may be used in animal feed or in the production of renewable energy as biodiesel. Although it has high production potential, the pest attack such as silverleaf whitefly, Bemisia tabaci (Gennadius) biotype B (Hemiptera: Aleyrodidae), undertakes a significant amount of the volume produced. This insect has become pest of economic importance to the soybean crop due to the increasing infestations and difficulties of management. The control of this hemipteran is made mainly through applications of synthetic insecticides, which are often overly utilized, having an impact on human and the environmental health. This situation encourages the study of less aggressive and more efficient alternatives, suitable to the integrated pest management (IPM). In this sense, the use of resistant genotype is considered a valuable tool, which can reduce the population of pests below the economic injury level without socio-environmental damage. In this work, 15 soybean genotypes were evaluated under attack of B. tabaci biotype B to characterize possible types of resistance (antixenosis, antibiosis and tolerance) against this insect. Initially, antixenosis assays were performed (free and no choice). The raise of the colonization of this insect confined to the genotypes and the characteristics of trichomes were also evaluated. In addition, biological performance tests were conducted to characterize the occurrence of antibiosis. In the last step, tolerance tests were conducted ...
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Análise da superexpressão de genes candidatos à resistência a Meloidogyne spp. em raízes transgênicas de amendoim e soja

Pereira, Bruna Medeiros 23 February 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-06-21T18:23:47Z No. of bitstreams: 1 2017_BrunaMedeirosPereira.pdf: 1736742 bytes, checksum: 9592066ccb7e0557f4389f7dcac8a258 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-08-17T16:47:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_BrunaMedeirosPereira.pdf: 1736742 bytes, checksum: 9592066ccb7e0557f4389f7dcac8a258 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-17T16:47:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_BrunaMedeirosPereira.pdf: 1736742 bytes, checksum: 9592066ccb7e0557f4389f7dcac8a258 (MD5) Previous issue date: 2017-09-17 / O amendoim cultivado (Arachis hypogaea L.) possui alta qualidade nutricional, sendo caracterizado como uma rica fonte de energia e aminoácidos. Sua produtividade é limitada por vários fatores, dentre eles a suscetibilidade ao nematoide das galhas (Meloidogyne arenaria). Em contrapartida, os parentes silvestres do amendoim (Arachis spp.) apresentam uma grande variabilidade genética, sendo uma fonte potencial de alelos de resistência para programas de melhoramento genético. Estudos do transcritoma da interação de M. areanaria com espécies silvestres de amendoim resistentes, como, A. duranensis e A. stenosperma, têm apontado alguns genes candidatos potencialmente envolvidos na resistência ao ataque deste patógeno. A partir desses estudos, diversos genes candidatos foram selecionados e sua expressão diferencial durante a interação foi posteriormente validada. O objetivo do presente trabalho é compreender o papel biológico dos genes candidatos AdEXLB8, AsDUF e AsLIP, oriundos de espécies silvestres, na resistência ao nematoide das galhas (Meloidogyne spp), por meio de sua superexpressão em raízes transgênicas de amendoim e soja (Glycine max), espécies suscetíveis. Para tanto, as ORFs (Quadro de Leitura Aberta) desses genes foram clonadas no vetor binário pPZP-201BK-EGFP sob o controle do promotor de actina e introduzidas no pecíolo de folhas de amendoim ou no hipocótilo de soja, por meio de transformação com uma linhagem silvestre de Agrobacterium rhizogenes. Raízes transgênicas de amendoim e soja foram posteriormente inoculadas com M. arenaria e M. incognita, respectivamente, e avaliadas 60 dias após a inoculação quanto ao desenvolvimento da doença. Raízes superexpressando cada um dos três genes candidatos demonstraram, tanto em amendoim como em soja, uma redução significativa no número de galhas e formação de ovos quando comparadas com raízes transformadas somente com o vetor vazio. A análise funcional in planta dos efeitos fenotípicos da superexpressão de AdEXLB8, AsDUF e AsLIP, em raízes transgênicas de amendoim e de soja infectadas com diferentes espécies de Meloidogyne, indicam um envolvimento desses genes na resistência ao nematoide das galhas. / Cultivated peanut (Arachis hypogaea L.) has high nutritional quality, being a source of energy and amino acids. Peanut productivity is limited by several constraints, including susceptibility to the root-knot nematode (Meloidogyne arenaria). Conversely, peanut wild relatives (Arachis spp.) has high genetic variability, being a potential source of resistance alleles for breeding programs. Previous transcriptome studies of the interaction between M. areanaria and resistant wild peanut species, such as A. duranensis and A. stenosperma, revealed putative candidate genes involved in the resistance to M. arenaria. From these studies, several genes were selected and their differential expression during the interaction was further validated by qRT-PCR. The aim of the present work was to understanding the biological function of three candidate genes (AdEXLB8, AsDUF e AsLIP), isolated from wild species, in the resistance to the root-knot nematode (Meloidogyne spp.), through its overexpression in transgenic roots of two susceptible species, peanut and soybean (Glycine max). For that, the ORFs (Open Read Frames) of the genes were cloned into the binary vector pPZP-201BK-EGFP under the control of the actin promoter and introduced into the petiole of peanut leaves or into the soybean hypocotyls, via transformation with a wild Agrobacterium rhizogenes strain. Transgenic roots of peanut and soybean were subsequently inoculated with M. arenaria and M. incognita, respectively, and evaluated 60 days after inoculation according the disease development. Roots overexpressing each of the three candidate genes showed, in both peanut and soybean, a significant reduction in the number of galls and egg formation when compared to control roots transformed with the empty vector. Functional in plant analysis of the phenotypic effects of AdEXLB8, AsDUF and AsLIP overexpression in transgenic peanut and soybean roots after infection with different Meloidogyne species indicated that these genes are involved in root-knot nematode resistance.
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Caracterização agronômica de progênies de soja contendo alelos para tolerância a herbicidas das sulfoniluréias

Mantovani, Éder Eduardo 25 August 2017 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-12-08T19:34:17Z No. of bitstreams: 1 2017_ÉderEduardoMantovani.pdf: 3430138 bytes, checksum: ba55a335238ddd1f5c485fb9c3458b5b (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-01-04T20:18:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_ÉderEduardoMantovani.pdf: 3430138 bytes, checksum: ba55a335238ddd1f5c485fb9c3458b5b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-04T20:18:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_ÉderEduardoMantovani.pdf: 3430138 bytes, checksum: ba55a335238ddd1f5c485fb9c3458b5b (MD5) Previous issue date: 2018-01-04 / As sulfoniluréias estão classificadas no grupo de herbicidas que atuam bloqueando a síntese de aminoácidos essenciais através da inibição da enzima acetolactato sintase (ALS). A inibição dessa enzima interrompe a produção de proteínas, interferindo no crescimento celular e, consequentemente, ocasionando a morte da planta. Com o desenvolvimento de cultivares de soja contendo os alelos Als1 e Als2 que conferem tolerância a diferentes princípios ativos do grupo das sulfoniluréias, esse estudo teve como objetivos testar progênies de soja quanto à presença/ausência dos alelos Als1 e Als2 e avaliar o impacto agronômico da adição desses alelos em campo sem a aplicação de herbicida do grupo das sulfoniluréias, e em um segundo experimento avaliar os efeitos da aplicação em pré-emergência do herbicida do grupo das sulfoniluréias em progênies de soja contendo os alelos Als1 e Als1+Als2 e comparar sua seletividade a progênies sem os alelos. Esses experimentos foram conduzidos nas estações experimentais da DuPont Pioneer de Planaltina, DF, safras 2014/2015 e 2015/2016, e de Sorriso, MT, safra 2014/2015. Foram avaliadas populações de soja com diferentes classes genotípicas quanto a presença/ausência dos alelos Als1 e Als2. A comparação entre as classes foi feita através do uso de diversas características agronômicas em campo com e sem a aplicação do herbicida das sulfoniluréias. Nos ensaios sem o uso do herbicida, as médias de produtividade em Planaltina e Sorriso safra 2014/2015 e em Planaltina 2015/2016 foram 2896, 2537 e 3264 kg ha-1, respectivamente. A produtividade de grãos para as classes genotípicas nula, Als1, Als2 e Als1+Als2 foram 2826, 2837, 2685 e 2835 kg ha-1, respectivamente e não diferiram estatisticamente entre si. As demais características também apresentaram comportamento semelhante entre as classes. Nas progênies avaliadas, a adição dos alelos Als1 e/ou Als2 não ocasionou alterações significativas nas características agronômicas avaliadas. No experimento com o uso do herbicida, a média de produtividade das classes Als1 e Als1+Als2, 3692 e 3745 kg ha-1, respectivamente, foram significativamente superiores à classe nula, 3554 kg ha-1, com diferença significativa entre as classes para todas as características, exceto avaliação da parcela. Isso indica a importância e a necessidade da presença dos alelos que conferem resistência, pois sob uso do herbicida as progênies que continham os alelos de resistência a sulfoniluréia foram estatisticamente superiores as progênies sem os alelos. Portanto, concluiu-se nesses experimentos que sem o uso do herbicida, o desempenho entre as classes do gene é semelhante e a adição dos alelos mutantes não altera o fenótipo das progênies de soja enquanto que sob uso do herbicida a presença dos alelos se torna crucial para o melhor desempenho da soja. / Sulfonylureas are classified in the herbicide group that acts by blocking the synthesis of essential amino acids by inhibiting acetolactate synthase enzyme (ALS). The inhibition of this enzyme disrupts the production of proteins, interfering with cell growth and consequently resulting in the death of the plant. With the development of soybean cultivars containing Als1 and Als2 alleles that confer tolerance to different active ingredients of sulfonylurea group, this study aimed to test different soybean progenies for the presence/absence of Als1 and Als2 alleles and evaluate the agronomic impact of these alleles addition in the field without sulfonylurea herbicide application, also in a second experiment, to evaluate the effects of pre-emergence sulfonylurea herbicide application in soybean progenies containing Als1 and Als1+Als2 alleles and compare their selectivity to progenies without the alleles. These experiments were conducted in experimental stations of DuPont Pioneer at Planaltina, DF, 2014/2015 and 2015/2016 seasons and at Sorriso, MT, 2014/2015 season. Soybean populations with different genotypic classes were evaluated for presence/absence of the Als1 and Als2 alleles. The comparison among classes were made using several agronomic traits in the field with and without sulfonylurea herbicide application. In the experiments without herbicide, the grain yield average at Planaltina and Sorriso 2014/2015 season and at Planaltina 2015/2016 were 2896, 2537 and 3264 kg ha-1, respectively. Yield for the genotypic classes null, Als1, Als2 and Als1+Als2 were 2826, 2837, 2685 and 2835 kg ha-1, respectively, and they were not statistically different from each other. Also, the other traits indicated similar behavior among classes. In the studied progenies, the addition of Als1 and/or Als2 alleles did not cause significant differences in the evaluated traits. While, in the experiment with herbicide application, the yield average of Als1 and Als1+Als2 classes, 3692 and 3745 kg ha-1, respectively, were significantly higher than the null class, 3554 kg ha-1, with significant difference among classes for all traits, except plot evaluation. This fact indicates the importance and necessity of alleles presence that confer resistance, since under herbicide application the progenies with the sulfonylurea resistant alleles were statistically superior than the progenies without the alleles. Therefore, it was concluded in these experiments that without the use of the herbicide, the performance among the gene classes is similar and the addition of the mutant alleles do not alter the phenotype in the soybean progenies, whereas under the herbicide application, the presence of the alleles becomes crucial for the soybean best performance.

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