Orientador: Nelson Moreira de Carvalho. / Resumo: Plantas de soja das cultivares Santa Rosa e 1AC-2 foram tratadas em diferentes épocas após o início do florescimento, com o dessecante paraquat na dose de 2 l/ha do produto comercial. Objctivou-se avaliar os possíveis efeitos sobre a produção de grãos, peso ele 1. 000 sementes, germinação e vigor das sementes, conteúdos protéico, lipídico e ele cinzas e infecção das sementes por microrganismos prejudiciaisa sua qualidade. Além disso realizam-se análises de resíduo dlo paraquat nas sementes colhidas. As aplicações dlo produto foram feitas semanalmente a partir dos 72e 75 dias após o início do florescimento, para as cultivares IAC- 2 e Santa Rosa, respectivamente. Para todas as épocas tratadas, existiam as suas respectivas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Summary: (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2012. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2012-06-06T14:50:44Z No. of bitstreams: 1 2012_RenataHenriqueSantana_Parcial.pdf: 2120476 bytes, checksum: 2586d1a4cfdd137b3464b1a681461c69 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-06-25T10:58:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_RenataHenriqueSantana_Parcial.pdf: 2120476 bytes, checksum: 2586d1a4cfdd137b3464b1a681461c69 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-25T10:58:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_RenataHenriqueSantana_Parcial.pdf: 2120476 bytes, checksum: 2586d1a4cfdd137b3464b1a681461c69 (MD5) / A planta de soja (Glycine max [L.] Merr) destaca-se mundialmente pela diversidade de produtos que proporciona para uso animal e humano. No Brasil, a soja é o produto que mais gera divisas cambiais atualmente. No entanto, a produtividade dessa cultura é afetada por diversos fatores bióticos e abióticos. No melhoramento da soja, a engenharia genética tem sido utilizada como ferramenta para geração de novos cultivares capazes de superar essas adversidades. Nessa técnica, o uso de promotores órgão-específicos em detrimento de promotores constitutivos para expressar transgenes restringe sua expressão temporal e espacialmente, aumentando a biossegurança e estabilidade do sistema. Neste trabalho utilizamos dados transcriptômicos e genômicos de domínio público para identificar genes órgão-específicos de soja, isolar e caracterizar suas regiões promotoras. Os genes GmSulfT1 e GmCit1 foram identificados por meio de análises in silico em três bancos de ESTs de soja: GenoSoja, Unigene e da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Esses genes foram selecionados para validação biológica por apresentarem o perfil de EST órgão-específico em pelo menos dois dos bancos citados e pelo ineditismo. Seus perfis de expressão foram avaliados por RT-PCR semiquantitativa e Northern blot. O GmSulfT1 apresentou expressão preferencial em raiz e semente e o GmCit1, por sua vez, em folha de plantas de soja. As regiões promotoras desses genes foram identificadas no genoma da soja cv. Williams 82 e analisadas in silico para identificação de motivos putativos de elementos cis regulatórios. Iniciadores desenhados baseados nessas sequências foram capazes de amplificar fragmentos dessas regiões do genoma da soja cv. Conquista por PCR. Os promotores derivados de deleções da região promotora de GmSulfT1, PSulft0,5 e PCit0,4, PCit0,8 e PCit1,9, de GmCit1, foram clonados a montante do gene repórter gus em vetor binário utilizando o sistema Gateway®. Plantas de fumo (Nicotiana tabacum) foram transformadas para caracterização in vivo dos promotores. No ensaio histoquímico, o gene gus sob regulação dos promotores PSulfT0,5, PCit0,8 e PCit1,9 apresentou altos níveis de expressão em raízes e folhas, enquanto o PCit0,4 preferencialmente em folha. PCit0,4 isolado no presente trabalho poderá ser utilizado futuramente para conferir expressão preferencial em folhas de transgênicos. O caráter de alta expressão de gus em mais de um órgão atribuído por PSulfT0,5, PCit0,8 e PCit1,9, pode, da mesma forma, ser explorado para expressão de transgenes em plantas. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The soybean plant (Glycine max [L.] Merr) is a worldwide important crop due to the diversity of products that it provides for animals and humans. In Brazil, the soybean is currently the commodity that generates most of its foreign-exchange reserves. However, the productivity of this crop is reduced by several biotic and abiotic factors. In soybean breeding, genetic engineering has been successfully applied to generating new cultivars able to overcome these adversities. In this technique, the use of organ-specific instead of constitutive promoters restricts the transgene expression temporally and spatially, increasing biosafety and the stability of the system. In this work we used transcriptomic and genomic data of public domain to identify soybean organ-specific genes, isolate and characterize their promoter region. Genes GmSulfT1 and GmCit1, were in silico identified in three ESTs databases, GenoSoja, Unigene and from Embrapa Genetic Resources and Biotechnology. These genes were selected for further analysis due to their organ specific EST profile in at least two of the mentioned database, and novelty criteria. Their expression profiles were biologically validated by semiquantitative RT-PCR and Northern blot assays. GmSulfT1 was preferentially expressed in roots and seeds and GmCit1 in leaves of soybean plants. The promoter regions of these two genes were identified in the soybean cv. Williams 82 genome sequence and in silico analyzed to detect putative motifs of cis regulatory elements. Primers designed based in those sequences were able to amplify fragments of the promoter regions of GmSulfT1 and of GmCit1 by PCR with soybean cv. Conquista genomic DNA. The deleted promoters derived from GmSulfT1 promoter region, PSulft0.5, and from GmCit1, PCit0.4, PCit0.8 and PCit1.9, were fused with the reporter gene gus in a binary vector using the Gateway® System. Tobacco plants were transformed in order to in vivo characterizing these promoters. Histochemical assay showed high gus expression in roots and leaves under control of PSulfT0.5, PCit0.8 and PCit1.9, and under control of PCit0.4, more in leaves. PCit0.4, isolated in the present work, can be used hereafter to activate transgene expression preferentially in leaves. The high expression levels in more than one organ obtained using the other promoters isolated in this work can also be explored to express transgenes in plants.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1979-07-20Bitstream added on 2014-06-13T19:58:05Z : No. of bitstreams: 1 durigan_jc_me_jabo.pdf: 2849754 bytes, checksum: c045ad09414b368901dab452656b2ff2 (MD5) / Plantas de soja das cultivares Santa Rosa e 1AC-2 foram tratadas em diferentes épocas após o início do florescimento, com o dessecante paraquat na dose de 2 l/ha do produto comercial. Objctivou-se avaliar os possíveis efeitos sobre a produção de grãos, peso ele 1. 000 sementes, germinação e vigor das sementes, conteúdos protéico, lipídico e ele cinzas e infecção das sementes por microrganismos prejudiciaisa sua qualidade. Além disso realizam-se análises de resíduo dlo paraquat nas sementes colhidas. As aplicações dlo produto foram feitas semanalmente a partir dos 72e 75 dias após o início do florescimento, para as cultivares IAC- 2 e Santa Rosa, respectivamente. Para todas as épocas tratadas, existiam as suas respectivas...

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Química, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-09-18T14:35:58Z No. of bitstreams: 1 2012_JonatasGomesdaSilva.pdf: 20199778 bytes, checksum: 69dd51eef24804d4159b389b76e8b9fc (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2012-09-19T13:01:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_JonatasGomesdaSilva.pdf: 20199778 bytes, checksum: 69dd51eef24804d4159b389b76e8b9fc (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-19T13:01:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_JonatasGomesdaSilva.pdf: 20199778 bytes, checksum: 69dd51eef24804d4159b389b76e8b9fc (MD5) / A voltametria cíclica (CV) foi utilizada para estudar o processo de oxidação/redução de metabólitos secundários da soja, na forma livre ou complexada com o Cu(II), nos eletrodos de carbono vítreo (GC) e de mercúrio de gota pendente (HMDE). Três eletrodos (HMDE, eletrodos sólidos de GC e grafite) e três diferentes técnicas voltamétricas (voltametria adsortiva de redissolução catódica (CAdSV), voltametria adsortiva de redissolução (AdSV) e voltametria de pulso diferencial (DPV)) foram utilizados no desenvolvimento de dez métodos de análise de metabólitos secundários de soja. Dois destes métodos desenvolvidos foram selecionados para a análise de comprimidos à base de extrato de soja, quatro amostras preparadas de isoflavonas e folhas e grãos de soja de cinco cultivares. No estudo do processo de oxidação/redução das isoflavonas no eletrodo de GC foram observados picos irreversíveis, correspondentes a oxidação do 4’-hidróxi do anel B. Para a rutina no eletrodo de GC, observou-se um pico reversível, correspondente à oxidação do 3’,4’- dihidróxi do anel B e um pico irreversível correspondente à oxidação do 5,7-dihidróxi do anel A. No estudo do processo de oxidação/redução do complexo Cu(II)-rutina no HMDE foi observado um pico de redução quasi-reversível. O primeiro método voltamétrico desenvolvido e selecionado para as análises, baseado na acumulação do complexo Cu(II)-rutina no HMDE, utilizando-se a CAdSV, apresentou limite de detecção da ordem de 10-9 mol L-1 e foi aplicado na determinação de rutina em grãos e folhas de soja. Nos grãos das cultivares P98R62, BRQ 96-3065 e Dowling e nas folhas da cultivar Dowling não foi detectada rutina. No entanto, para as folhas da cultivar IAC 100, este flavonóide foi detectado com concentração média de 0,197 mg g-1. A recuperação de rutina adicionada variou de 94 a 105%, indicando ausência de efeito de matriz. O segundo método voltamétrico desenvolvido e selecionado para as análises, baseado na oxidação das isoflavonas no eletrodo de GC, utilizando-se a DPV, apresentou limite de detecção da ordem de 10-7 mol L-1 e foi aplicado na determinação de isoflavonas totais em: quatro amostras preparadas de isoflavonas, comprimidos a base de extrato soja e grãos da cultivar Flora. Nas análises das amostras preparadas, observou-se que os menores valores de erros relativos foram obtidos na amostra de composição semelhante aos produtos à base de soja fermentados. Estes resultados indicam a necessidade do processo de hidrólise ácida na preparação das amostras de grãos de soja, com o objetivo de minimizar a interferência das formas glicosiladas na quantificação de isoflavonas totais. A concentração média de isoflavonas totais no comprimido à base de extrato de soja foi 31,44 mg comprimido-1, com erro relativo menor que 10% em relação ao indicado no rótulo. Na determinação de isoflavonas totais em grãos de soja da cultivar Flora, foi realizada uma extração em fase sólida para a remoção dos interferentes, e foi obtida uma concentração média de isoflavonas totais de 0,184 mg g-1. Este valor é próximo ao encontrado em grãos de soja de três genótipos cultivados em Londrina (PR). A recuperação de daidzeína ou genisteína adicionada indica ausência de efeito de matriz. Os estudos realizados com o primeiro método, quanto à concentração de rutina, e com o segundo método, quanto à identificação e quantificação de isoflavonas totais, em cultivares de soja, poderão ser aplicados no manejo integrado de pragas e em programas de melhoramento genético; contribuindo para a sustentabilidade de sistemas agrícolas baseados na produção de soja. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Cyclic voltammetry (CV) was used to study the oxidation/reduction process of soybean secondary metabolites, free or complexed with Cu (II), at a hanging mercury drop electrode (HMDE) and at a glassy carbon electrode (GC). Three electrodes (HMDE, GC and graphite electrodes) and three different voltammetric techniques (adsorptive cathodic stripping voltammetry (CAdSV), adsorptive stripping voltammetric (AdSV) and differential pulse voltammetry (DPV)) were used to develop ten methods of soybean secondary metabolities analysis. Two of these developed methods were used to analyze a soybean pharmaceutical formulation, four isoflavone known samples and leaves and seeds of four soybean cultivars. In the study of the oxidation/reduction process of isoflavones at GC electrode, irreverible peaks, which correspond to the oxidation of 4’-hydroxy group of B ring, were observed. For rutin, two peaks were observed at GC electrode, a reversible one which corresponds to the oxidation of 3’, 4’-dihydroxy group of B ring and a irreversible one which corresponds the 5,7-dihydroxy group of A ring. A quasireversible reduction peak was observed in the study of the oxidation/reduction process of Cu2+-rutin complex at HMDE. The first developed method, which is based on the accumulation of the Cu(II)-rutin complex at HMDE, presented a detection limit in the order of 10-9 mol L-1 and it was applied on the determination of rutin in seeds and leaves of four soybean cultivars. Rutin was not detected in the seeds of P98R62, BRQ 96-3065 and Dowling and in the leaves of Downling. However, for IAC 100 soybean cultivar, this flavonoid was detected with a concentration value of 0.197 mg g-1. The recovery of added rutin ranged from 94 to 105%, indicating the absence of matrix effect. The second developed method, which is based on the oxidation of isoflavones at GC electrode, presented a detection limit in the order of 10-7 mol L-1 and it was applied on the determination of total isoflavones in four known samples, in a soybean pharmaceutical formulation and in the seeds of a soybean cultivar (Flora). For known samples, the smallest error was obtained for those in with isoflavone composition are similar to soybean fermented products. These results indicate that it is necessary to have an acid hydrolysis process during the preparation of soybean samples, in order to minimize the interference of glycosylated forms. The total concentration of isoflavones in pharmaceutical soy 31.44 mg tablet-1, with relative error of less than 10% when compared to the label value. In the determination of total isoflavones in Flora, a solid phase extraction was performed in order to remove interfering compounds and an average concentration of total isoflavones was found to be 0.184 mg g-1. This obtained value is close to that found for three soybean genotypes which were grown in Londrina (PR).The recovery of added daidzein or genistein indicates the absence of matrix effect. The results obtained in the determination of rutin and total isoflavones in soybean cultivars using the developed voltammetric methods may be applied in integrated pest management and breeding programs, contributing for the sustainability of agricultural systems based on soybean production.

Dissertação (mestrado)-Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2008. / Submitted by Fernanda Weschenfelder (nandaweschenfelder@gmail.com) on 2009-09-28T20:00:26Z No. of bitstreams: 1 2008_ViniciusFrancaSantaCruz.pdf: 3525437 bytes, checksum: b9cf47ea23047e96845528cfc5dd2958 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2011-01-03T19:34:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_ViniciusFrancaSantaCruz.pdf: 3525437 bytes, checksum: b9cf47ea23047e96845528cfc5dd2958 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-01-03T19:34:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_ViniciusFrancaSantaCruz.pdf: 3525437 bytes, checksum: b9cf47ea23047e96845528cfc5dd2958 (MD5) Previous issue date: 2008-06 / O trabalho teve como objetivo avaliar a resposta de cultivares de soja aos diferentes arranjos espaciais, variando espaçamento entre linhas e densidades em três cultivares trangênicos com características morfológicas diferentes. Os experimentos foram conduzidos na safra 2006/2007 na fazenda Primavera, distante 60 Km de Brasília-DF. Quatro espaçamentos entre linhas (20, 40, 50, 60 cm) foram combinados com três densidades de plantio em três experimentos isolados, cada um com um cultivar. Para o cultivar 98Y11 as densidades foram (336.000, 280.000, 224.000 /ha) para o cultivar 98Y51 as densidades foram (300.000, 250.000, 200.000/ha) e para o cultivar 99R01 as densidades foram (264.000, 220.000, 176. 000/ha) totalizando 12 tratamentos em parcelas subdivididas com quatro repetições cada. Os componentes de produção avaliados foram o rendimento estimado, altura das plantas, altura de inserção da primeira vagem, sanidade, e peso de 100 sementes. Os cultivares de soja P98Y51 e P99R01 podem ser semeados em espaçamentos entre linhas compreendidos no intervalo de 20 ate 60 cm sem que haja comprometimento da produtividade. No cultivar de soja P98Y11 a modificação dos espaçamentos entre linhas convencionais de semeadura (40 e 50 cm) diminuiu a produtividade, aumentou o índice de acamamento de plantas e reduziu a altura das plantas. Para os cultivares de soja P98Y11, P98Y51 E P99R01 variações de 20 % nas densidades testadas não comprometeram os resultados de produtividade obtidos. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The experiment was conducted to avaluate the soybean response to spacial arrangements row spacing and density. Were test in three cultivars of different maturity cycle, and morphologic characteristics. Were tested in 2006/2007 the Primavera farm, 60 Km away from Brasília State - DF. Treatments consisted of combining four spacing between lines (20, 40, 50 and 60 cm) and three sowing densities. The cultivar 98Y11 the densities were (336,000, 280,000, 224,000/ha) for the cultivar 98Y51 the densities were (300,000, 250,000, 200,000/ha) and 99R01 the densities were (264,000, 220,000, 176,000/ha) total of 12 treatments subdivided in plots with 4 replications each. The parameters evaluated were productivity, height of the plants, elevation of insertion of the first pod, health, and weight of 100 seed. The varieties of soybean P98Y51 and P99R01 can be sown on spacing between lines included in the range 20 to 60 cm without any change in productivity and its components of production: number of pods, height and insertion of the first pod, for health White mold, weight of 100 seeds and lodging. In grow soy P98Y11 modifying the spacing between lines of conventional sowing (40 and 50 cm) decreased productivity, increased the index for lodging and reduced the height of the plants. For cultivars of soybean P98Y11, P98Y51 and P99R01 variations of 20% in densities tested not committed the results obtained in productivity.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2007. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2009-10-05T19:44:57Z No. of bitstreams: 1 Dissert_GilAmaroSilva.pdf: 1315690 bytes, checksum: 66d23a16f1094e97923ce1de904317a8 (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2009-10-19T15:21:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissert_GilAmaroSilva.pdf: 1315690 bytes, checksum: 66d23a16f1094e97923ce1de904317a8 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-10-19T15:21:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissert_GilAmaroSilva.pdf: 1315690 bytes, checksum: 66d23a16f1094e97923ce1de904317a8 (MD5) Previous issue date: 2007-07 / Uma das principais características da soja como alimento, é o seu alto teor de proteínas. Todavia a soja e, consequentemente, seus derivados, apresentam carboidratos (oligossacarídeos de rafinose: RO) que limitam seu consumo, causando restrições quanto ao seu uso na alimentação em função dos sintomas desagradáveis. Tais açúcares são, portanto, considerados fatores anti-nutricionais. A redução dos teores desses açúcares não digeríveis é de grande importância para a ampliação da utilização da soja. A redução dos teores dos RO poderá ser conseguida por meio da adição das enzimas α-galactosidases [α-D-galactosil galactohidrolases (E.C. 3.21.22)] ao processamento dos derivados de soja. Essas enzimas, hidrolisam a ligação α-1,6 que une o resíduo de galactose ao de glicose, produzindo galactose e sacarose livres, açúcares facilmente hidrolisados in vivo e absorvidos. Alfa-galactosidases são produzidas por diferentes organismos, entre estes estão leguminosas que produzem alfa-galactosidades durante a germinação das sementes para mobilizar o material de reserva contido no cotilédone. A alfa-galactosidase da semente de Guapuruvu, uma planta nativa da mata atlântica, foi parcialmente purificada com índice de purificação de 148 vezes e rendimento de 1,4%. A atividade máxima da alfagalactosidase foi detectada em pH 5,5 e 45°C. A enzima manteve 50% da atividade original após incubação por 150 minutos a 40°C. O KM para pNPGal foi de 1,68 mM e o VMAX foi de 0,18 μmol.min-1.mL-1. A atividade enzimática desta enzima foi inibida por FeCl3 ZnSO4, CuSO4, CaCl2, SDS, MnCl2, AlCl3, HgCl2, CuCl2, CoCl2 e AgNO3. A enzima não apresenta atividade de transglicosilação. Espectrometria de massa foi utilizada para determinar a massa molecular da enzima. Populações de proteína com valores de massa molecular de 20.179 kDa e 11.543 kDa foram encontrados, além de um possível peptídeo com massa molecular de 6.724 kDa. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / One of the main characteristics of the soy as food, is its high protein content. However the soy and, consequently, its derivatives, present carbohydrates (raffinose oligosaccharides: RO) that limit its consumption, causing restrictions to its use in the feeding in function of undesirable symptom, like the flatulence following ingestion of these soybean sugars. Due to the absence of α1-,6 galactosidase in the intestinal mucose which is required to hydrolyze the undesirable sugar. Such sugars also known as raffinoseoligosaccharides (ROs) are therefore, considered as anti-nutrient factors. The reduction of amount of these indigestible sugars is of great importance to increase the use of soybean. The reduction of RO in soybean and in its derivatives may be obtained by means of the addition of α-galactosidases enzymes [α-D-galactosil galactohidrolases (E.C. 3.21.22)] to the soybean derivatives preparation. These enzymes, hydrolise the α- 1,6 linkages that join the residue of galactose to the glucose present in the ROs, producing free galactose and sacarose, sugars that are easily hydrolyzed in vivo and absorbed. Alpha-galactosidase is produced by different organisms, among them, appears those plants that produces alpha-galactosidades during the germination of the seeds which is required to mobilize the material of reserve contained in the cotyledon. The alpha-galactosidase in the seed of a native plant of the Atlantic Forest, Guapuruvu, was partially purified with a purification factor of 148 times and yelding of 1,4%. Maximal activity of the alpha-galactosidase were detected at pH 5,5 and 45°C. The partially purified enzyme retained about 50% of the original activity after incubation for 150 minutes ate 40°C. KM values of 1,68 mM and VMAX values of 0,18 μmol.min-1.mL-1 were determined for conversion of pNPGal by algorithm for determination for non linear parameters. The alpha-galactosidase activity was substancially inhibited by FeCl3 ZnSO4, CuSO4, CaCl2, SDS, MnCl2, AlCl3, HgCl2, CuCl2, CoCl2 and AgNO3. The enzyme did not show, transglicosilation activity. Mass spectrometry was performed to determine the molecular mass. The partially purified alpha-galactosidase preparation contain at least 3 proteins with molecular mass of 20,179 kDa e 11,543 kDa and 6,724 kDa.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, 2005. / Submitted by Alexandre Marinho Pimenta (alexmpsin@hotmail.com) on 2009-10-14T23:21:24Z No. of bitstreams: 1 2005_Carolina da Silva Pinto.pdf: 1594402 bytes, checksum: 837dd974d1a1b75cc1c3e28c2a3954ef (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2009-11-17T14:55:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2005_Carolina da Silva Pinto.pdf: 1594402 bytes, checksum: 837dd974d1a1b75cc1c3e28c2a3954ef (MD5) / Made available in DSpace on 2009-11-17T14:55:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005_Carolina da Silva Pinto.pdf: 1594402 bytes, checksum: 837dd974d1a1b75cc1c3e28c2a3954ef (MD5) Previous issue date: 2005-07-11 / Devido à sua recente detecção no Brasil, pouco se conhece da reação das linhagens e variedades de soja (Glycine max (L.) Merril) à murcha-de-Curtobacterium causada por Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens provenientes de feijoeiro (Phaseolus vulgaris). A soja é uma planta usada na rotação de cultura com o feijão onde foi primeiramente detectada a bactéria. O presente trabalho teve como objetivo principal avaliar a reação das linhagens e variedades de soja, fornecidas pela empresa Genética Tropical, a um isolado de C. flaccumfaciens pv.flaccumfaciens, proveniente de feijão em casa de vegetação. Foi realizada também a observação semanal do comportamento da bactéria após a inoculação desta em diferentes estádios de desenvolvimento da planta e, por último, a observação e determinação das vias de penetração. Os resultados foram analisados conforme as percentagens (%) de folhas com sintomas visíveis de murcha-de-Curtobacterium , em relação ao total de folhas na planta (avaliação aos 10 e 20 dias após inoculação), obtendo-se um percentual médio. De acordo com os dados coletados nas duas avaliações, pode-se constatar que todas as variedades testadas foram suscetíveis, apresentando-se no nível de baixa suscetibilidade. A variedade Msoy 9001 (9,42 a 18,43% das folhas afetadas), proporcionalmente foi a que maior susceptibilidade apresentou, seguidas pelas variedades Msoy 8001 (1,69 a 15,6% das folhas afetadas), Conquista (1,22% a 6,33% das folhas afetadas) e Msoy 8329 (0,69% das folhas afetadas). As linhagens apresentaram diferentes níveis de suscetibilidade, sendo classificadas em: alta (41,30 a 59,02% das folhas afetadas), média (20,15 a 39,00 das folhas afetadas) e baixa (0,69 a 19,91 das folhas afetadas). Sendo que 23,73% das linhagens foram alocadas no grupo de média suscetibilidade (SS) e 74,82% das linhagens e variedades foram alocadas no grupo de baixa susceptibilidade (S). As linhagens 1696 (GT01-366), 1697 (GT01-343) e 1683 (GT01-368) foram resistentes à estirpe de C. flaccumfaciens pv. flaccumfaciens, com 0% das folhas afetadas. Os dados da observação semanal do comportamento da bactéria após a inoculação desta aos 10 dias após o plantio mostraram que em todas as variedades e linhagens avaliadas houve um aumento da quantidade de células (expressas em UFC) inoculada, que foi de 1,613 x106, já em relação à primeira semana de avaliação. Nas variedades 1042 (Mxiv SOY 9001) e 1218 (M-SOY 8001), que pertencem ao grupo de baixa suscetibilidade, e na linhagem 979 (GT01- 354), que pertence ao de média suscetibilidade, ocorreu uma acentuada queda na quantidade de UFC, no decorrer de seis semanas. Já nas linhagens 963 (GT01- 450), 1126 (GT01- 290), 975 (GT01- 28), 1127 (GT01- 414) e 887 (GT01- 287) ocorreu uma leve diminuição da média de UFC, e o mesmo não ocorreu com a percentagem de folhas com sintomas, sendo que as linhagens 963, 1126 e 975 foram classificadas no grupo de alta suscetibilidade. Nas linhagens 1137 (GT01- 304), 1204 (GT01- 304) e 890 (GT01- 452), não foi observada nenhuma variação da média de UFC no decorrer das semanas avaliadas, permanecendo esta constante. As últimas linhagens avaliadas neste experimento foram as 974 (GT01-372), 1205 (GT01-249), 1046 (GT01-87), 1136 (GT01- 456) e a 1203 (GT01-327). Estas apresentaram um aumento da média de UFC no transcorrer das semanas avaliadas. Na análise semanal do comportamento da bactéria após a inoculação desta em diferentes estádios de desenvolvimento da planta, foi observado que na época 10 (inoculação aos 10 dias após o plantio), em todas as linhagens e variedades, ocorreu uma queda da quantidade de UFC, se compararmos à primeira semana com a última semana de avaliação, mas mesmo com esta diminuição da quantidade de UFC, as plantas das linhagens e variedades avaliadas não conseguiram se recuperar. Já nas épocas 20 (inoculação aos 20 dias após o plantio) e 30 (inoculação aos 30 dias após o plantio), não ocorreu um aumento do número de células UFC inoculada. Nestas duas épocas (20 e 30), ocorreu uma variação entre as variedades e linhagens no decorrer das avaliações, pois em algumas ocorreu um aumento e em outras uma diminuição da quantidade de UFC. Contudo este aumento não chegou a ser tão alto e a causar sintomas tão severos quanto aqueles causados na época. No experimento de análise das vias de penetração nas linhagens e variedades inoculadas na folha, a bactéria foi detectada somente nas variedades 7114 e 1522, e nas linhagens 1694 e 1529. Na inoculação no solo sem ferimentos prévios na raiz, foi verificada a presença da bactéria na linhagem 1683 e nas variedades 1698 e 1522, já na inoculação no solo com ferimentos nas raízes, a bactéria foi observada na variedade 1540 e na linhagem 1694.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, 2008. / Submitted by Thaíza da Silva Santos (thaiza28@hotmail.com) on 2010-02-27T04:02:36Z No. of bitstreams: 1 2008_LeticiaSimoneGuimaraes.pdf: 3862333 bytes, checksum: 6787acccfa901bc99df10ba6498a171c (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-03-01T22:53:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_LeticiaSimoneGuimaraes.pdf: 3862333 bytes, checksum: 6787acccfa901bc99df10ba6498a171c (MD5) / Made available in DSpace on 2010-03-01T22:53:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_LeticiaSimoneGuimaraes.pdf: 3862333 bytes, checksum: 6787acccfa901bc99df10ba6498a171c (MD5) Previous issue date: 2008-04-17 / A soja (Glycine max), percentualmente, foi a cultura que mais cresceu nos últimos anos. A produção (26%) brasileira é a segunda maior do mundo, ficando atrás somente dos EUA (37%). O potencial produtivo da soja poderia ser maior se não fosse os danos causados pelas doenças nesta cultura. A mancha parda ou septoriose (Septoria glycines), uma das principais “doenças de final de ciclo”, tem provocado danos em lavouras comerciais de diversas regiões brasileiras, podendo reduzir o rendimento em mais de 30%. A busca para encontrar cultivares de soja resistentes a S. glycines vem de três a quatro décadas atrás, porém até os dias atuais ainda não foram encontradas cultivares com resistência satisfatória à doença. Assim sendo, o controle desta doença é baseado na aplicação de fungicidas. Diante da importância da cultura e da doença os objetivos deste trabalho foram: (a) avaliar em campo a reação de genótipos convencionais e transgênicos à doença e o efeito da época e do local de plantio; (b) avaliar o efeito de fungicidas no controle da mancha parda. Os experimentos foram conduzidos no campo (Cristalina, GO) durante as safras 2004/2005 e 2005/2006 e em casa de vegetação (Brasília, DF) e laboratório nos anos de 2006 a 2008. Em uma primeira etapa foram testados 16 genótipos, três épocas de semeadura e quatro tratamentos com fungicidas. Os resultados indicaram que dos genótipos avaliados, a menor quantidade da doença e maior produtividade foram apresentados pelos genótipos Msoy8411 e GT01-308, e conforme foi se atrasando o plantio, de outubro para dezembro, a intendidade da mancha parda foi aumentado. Na segunda etapa do trabalho avaliou-se a reação de 92 genótipos de soja à mancha parda, entre estes genótipos existiam cultivares de ciclo precoce, médio e tardio. Entre os genótipos avaliados observou-se existir uma variação nos níveis de susceptibilidade, 43,4% apresentaram menores valores de severidade quando comparados ao genótipo padrão (Msoy8001). Na análise da severidade da doença, AACPD e produtividade em relação aos ciclos das culturas, observou-se que as cultivares precoces apresentaram maiores valores de severidade e AACPD e menores valores de produtividade. Em uma terceira etapa do trabalho avaliou-se a reação à mancha parda de genótipos de soja transgênica e convencional. Não foram observadas diferenças de severidade de doença entre soja transgênica e convencional. Houve variação na susceptibilidade à doença entre os genótipos, porém não houve nenhum com resistência. Na quarta etapa do estudo analisou-se a resposta de genótipos de soja à mancha parda em diferentes localidades. Neste experimento foram semeados 58 genótipos em quatro localidades (Cristalina, Orizona, Morrinhos e Piracanjuba/ GO). Dos 58 genótipos avaliados, 31 apresentaram severidade semelhante ao padrão Msoy8001, considerado moderadamente suscetível. Os genótipos restantes mostraram maiores valores de severidade. Em todos os locais avaliados observaram-se diferenças entre produtividade. Durante a terceira etapa do trabalho, subdividiu-se o estudo em dois: (a) o primeiro trata da avaliação de fungicidas e da época de aplicação sobre a mancha parda da soja, e o segundo; (b) estudou-se a resposta do uso de fungicidas (tetraconazol) e fitorreguladores (ácido índolbutírico 0,005%, cinetina 0,009% e ácido giberélíco, como GA3 0,005%) na intensidade da mancha parda. Na primeira sub-etapa (a), conclui-se que dos dez produtos testados, Chlorotalonil (500g i.a./L) + Tetraconazole (20g i.a./L) na dose de 1,75 L/ha foi eficiente na redução da mancha parda. Na sub-etapa (b) não houve redução na doença, nem incremento na produtividade da soja devido aos tratamentos. Finalmente, um estudo foi realizado com a finalidade de padronizar o meio de cultura e temperatura para a obtenção de inoculo de S. glycines. Testaram-se cinco meios de cultura e três temperaturas de incubação. O meio mais adequado para a produção de conídios (1,53 x 107conídios / ml) foi o de extrato de folha de soja ágar (Folha de soja 200g; sacarose 10g; ágar 15g; 1l água destilada) a 20°C de incubação. Em seguida procurou-se definir um protocolo para o uso do “método da folha destacada” para avaliar sintomas da mancha parda. Após a análise dos resultados dos experimentos, verificou-se que a técnica de pincelamento de conídios foi mais prática do que a da pulverização. Concentrações acima de 1 x 105 conídios/ml foram eficientes na produção de sintomas. O estádio foliar mais adequado para inoculação foi o V2. Todas as temperaturas (20 a 30°C) incitaram a manifestação dos sintomas e não foram observadas diferenças de severidade da doença entre inoculações feitas na face adaxial ou abaxial das folhas. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / In recent years, soybean (Glycine max) had one of the greatest production increase among the cultivated crops. Brazil is the second largest soybean world producer (26%), staying only behind of the United States of America (37%). The incidence of diseases reduces the potential production of soybean. The brown spot (Septoria glycines) is one of the diseases that cause reduction on soybean yield. The Brazil’s soybean yield reduction due to brown spot might reach losses higher than 30%. From the last three to four decades, the search for brown spot resistant soybean cultivars was not satisfactorily successful. Therefore, the major brown spot control method is the application of fungicides. Based on above information the objectives of this study were: (a) assess the reaction to brown spot of conventional and transgenic soybean on different time of and different planting locations, and; (b) evaluate the effect of fungicide application brown spot. The experiments were performed in the field (Cristalina, GO, Brazil) during the growing seasons of 2004/2005 and 2005/2006, and in greenhouse (Brasília, DF, Brazil) and laboratory in 2006 to 2008. In the first part of the study were tested 16 soybean genotypes, three planting times, and four different treatments with fungicides. The results indicated that Msoy8411 and GT01-308 genotypes presented lowest amount of brown spot and the highest yield. In addition, the December planting time favored the increase of disease (severity and incidence) if compared to October and November planting time. In the second part of the study a brown spot reaction evaluation of 92 soybean genotypes with contrasting growing response was conducted. Among these genotypes, 43.4% of then presented lower disease ratings than the traditional standard genotype (Msoy8001). The cultivars with smaller growing cycles presented higher disease severity, lower yield than the ones with longer cycles. In the third part of the study is the reaction to brown spot of transgenic and conventional soybean genotypes was evaluated. There were no significant disease differences between transgenic and conventional soybeans. There were degrees of susceptibility to brown spot among the genotypes, but no resistant genotypes. In the fourth stage of the study, 58 genotypes were planted in four localities (Cristalina, Orizona, Morrinhos, and Piracanjuba, GO, Brazil). From these genotypes, 31 showed similar disease severity to the standard genotype (Msoy8001) considered moderately susceptible. The remaining genotypes showed higher values of severity. In all four evaluated places there were differences on genotype yield. In addition, during the third part stage this study, two evaluations were made: (a) evaluation of different fungicides and timing of application on brown spot, and; (b) evaluation of fungicide (tetraconazole) and growth regulators (IBA 0005% 0009% kinetin and gibberellic acid, GA3 as 0005%) on brown spot intensity. From these tests, Chlorotalonil (500g ai / L) + tetraconazole (20g ai / L) at a dose of 1.75 L / ha was effective to reduce brown spot. In the second sub-step (b) no differences on soybean disease and yield due to treatments. Finally, a study was carried out to standardize a culture media and temperature to satisfactorally produce S. glycines conidia. Five culture media and three incubation temperatures were tested.The media considered more suitable for the production of conidia (1.53 x 107 conidia / ml) was the extract of soybean leaves agar (Soybean Leaf 200g, sucrose 10g, agar 15g, 1l distilled water) at 20° C of incubation. Also, a protocol to induce brown spot symptoms, using the "method of detached leaf”, was studie After seven experiments were performed the analysis of the results showed: (a) the technique of brushing conidia suspension on leaves was more practical than spraying. Concentrations above 1 x 105 conidia / ml were effective in producing symptoms. The best leaf phonological stage for inoculation was V2. All tested (20 to 30°C) temperatures that were used to incubate the inoculated leaves showed symptoms, and no disease differences were observed between inoculations made on above and under side of leaves.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Biologia Microbiana, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, Pós-Graduação em Biologia Microbiana, 2014. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-05-21T13:16:22Z No. of bitstreams: 1 2014_JulianadaConceicaoInfantedeMarco.pdf: 1384831 bytes, checksum: 19d29fa75a797640daf649cbf9f9b262 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-05-21T14:44:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_JulianadaConceicaoInfantedeMarco.pdf: 1384831 bytes, checksum: 19d29fa75a797640daf649cbf9f9b262 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-21T14:44:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_JulianadaConceicaoInfantedeMarco.pdf: 1384831 bytes, checksum: 19d29fa75a797640daf649cbf9f9b262 (MD5) / A casca do grão da soja, um resíduo agroindustrial que possui em sua estrutura elevado teor de manana, foi utilizada no cultivo do fungo Aspergillus foetidus para a produção de mananases. A curva de indução enzimática demonstrou um aumento progressivo na produção de mananase, chegando ao máximo no 15° dia de cultivo, com atividade de 1,987 UI.mL-1 quando o fungo foi cultivado em casca do grão da soja. O concentrado, obtido pelo procedimento de ultrafiltração, quando incubado a 60°C em tampão acetato de sódio 50 mM pH 4,0 apresentou atividade de mananase de 6,392 UI.mL-1 e termoestabilidade a 60°C com atividade de 6,448 UI.mL-1 no 2° dia de incubação, perdendo 50% de atividade no 12º dia. O concentrado foi aplicado em coluna de filtração em gel do tipo Sephacryl S-100, e as frações apresentando atividade de mananase (58-65) foram submetidas à eletroforese em condições desnaturantes e análise por zimografia. A fração 58, denominada man 58, apresentou maior atividade de mananase, sendo selecionada para posteriores passos de caracterização. Man 58 foi mais ativa em tampão acetato de sódio 50 mM pH 4,0 a 60°C, atingindo maior atividade no 1° dia de incubação (1,015 UI.mL-1) e mantendo-se estável durante os 11 dias nos quais sua estabilidade à temperatura foi avaliada. Os valores de KM e Vmax de man 58 foram 3,29 mg/mL e 1,76 UI.mL-1, respectivamente. Man 58 foi ativada na presença de CaCl2, FeSO4 e NaCl, mas foi inibida por AgNO3, CoCl2, MgSO4, FeCl3, CuSO4, MgCl2, ZnCl2, ZnSO4, CuCl2, KCl, e EDTA. Os seis compostos fenólicos testados não apresentaram efeito inibitório significativo em man 58. Os licores de auto-hidrólise inibiram man 58. Quando avaliada por espalhamento de luz dinâmico (ELD), observou-se a presença de outras enzimas agregadas à man 58. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The soybean husk is an agricultural residue presenting in its structure a high level of mannan. It was used as carbon source in the cultivation of Aspergillus foetidus aiming the production of mannanase. The curve of enzyme induction showed a progressive production of mannanase, reaching a maximum on the 15th day of cultivation, on soybean husk. The concentrate obtained by ultrafiltration when incubated at 60°C in sodium acetate buffer pH 4.0 50 mM showed activity of mannanase of 6,392 UI.mL-1 and thermostability at 60°C with activity of 6,448 UI.mL-1 on the 2nd day of incubation, losing 50% activity on the 12th day. The concentrate was submitted to chromatography on Sephacryl S-100 gel filtration column, and the fractions showing the activity of mannanase (58-65) were submitted to electrophoresis under denaturing conditions and zymography analysis. The fraction 58 showed better activity of mannanase, called man 58, being selected for further characterization steps. Man 58 was most active at 50 mM sodium acetate buffer pH 4.0 50 mM at 60°C, reaching higher activity on 1st day of incubation (1.015 UI.mL-1) and remained stable during the 11 days when their temperature stability was evaluated. The KM and Vmax values were 3.29 mg/mL and 1.76 IU.mL-1, respectively. Man 58 was activated in the presence of CaCl2, FeSO4 and NaCl, but it was inhibited by AgNO3, CoCl2, MgSO4, FeCl3, CuSO4, MgCl2, ZnCl2, ZnSO4, CuCl2, KCl and EDTA. The six phenolic compounds tested showed little inhibitory effect on man 58. The auto-hydrolysis liquors inhibited man 58. When evaluated by dynamic light scattering (DLS), it was observed the presence of other enzymes aggregated with man 58.

Orientador: Benedito Carlos Benedetti / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-25T00:02:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RochaJunior_LaercioSoares_M.pdf: 526261 bytes, checksum: 475d9bfd13b3e846b31e7c24da3c248c (MD5) Previous issue date: 1999 / Mestrado