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Otimiza??o da extra??o de polissacar?deos sulfatados da alga vermelha Gracilaria birdiae e an?lise da atividade anticoagulante e antioxidanteFidelis, Gabriel Pereira 12 December 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-12-12 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Polissacar?deos sulfatados (PS) da alga vermelha comest?vel Gracilaria birdiae
foram obtidos atrav?s de cinco diferentes condi??es de extra??o (GB1: ?gua;
GB1p: ?gua/prote?lise; GB1s: ?gua/sonica??o; GB1sp:
?gua/sonica??o/prote?lise; GB2s: NaOH/sonica??o; GB2sp:
NaOH/sonica??o/prote?lise). O rendimento em massa seca (g) das extra??es
aumentou na seguinte ordem: GB2sp>GB1sp>GB1p>GB2s>GB1s>GB1. A
quantidade de PS extra?dos por cada condi??o, em contrapartida, aumentou
em sequencia diferente: GB2sp>GB1p>GB1>GB1sp>GB1s>GB2s.
Espectroscopia de infravermelho e eletroforese em gel de poliacrilamida em
agarose demonstram que todas as condi??es extra?ram o mesmo
polissacar?deo sulfatado. Al?m disso, com base nos dados referentes ?
composi??o monossacar?dica de cada condi??o de extra??o pode-se pressupor
que o uso de sonica??o fez com que se obtivesse outros polissacar?deos al?m
dos PS. No teste de tempo de protrombina (PT), o qual avalia a via extr?nseca
da cascata de coagula??o, nenhuma das amostras apresentou atividade
anticoagulante at? uma concentra??o m?xima de 0,1 mg/mL. Por outro lado, no
teste de tempo de tromboplastina parcial ativada (aPTT), cuja via da cascata de
coagula??o avaliada ? a intr?nseca, todas os extratos de PS tiveram atividade
positiva, com exce??o da condi??o GB2sp. A atividade anticoagulante no teste
de aPTT diminuiu na seguinte sequencia:
GB1sp>GB2sp>GB1p>GB1>GB1s>GB2s. O teste de capacidade antioxidante
total (CAT) dos polissacar?deos sulfatados tamb?m sofreu influ?ncia das
varia??es de acordo com condi??o de extra??o, visto que com Gb2s e Gb1
foram obtidos os menores valores de atividade quando comparado ?s demais
condi??es de extra??o. No presente trabalho, conclui-se que as condi??es de
extra??o de PS influenciam as atividades biol?gicas e na composi??o qu?mica
dos PS obtidos e que portanto, o uso de uma condi??o em especial pode
favorecer a obten??o de PS com uma atividade que se deseja em detrimento
de outras. De acordo com os dados obtidos pode-se afirmar que
NaOH/sonica??o/prote?lise foi a melhor condi??o para obter PS com atividade
anticoagulante e antioxidante em Gracilaria birdiae / The sulfated polysaccharides (SP) from the edible red seaweed Gracilaria
birdiae were obtained using five different condition extraction (GB1: Water;
GB1p: Water/proteolysis; GB1s: Water/sonication; GB1sp:
Water/sonication/proteolysis; GB2s: NaOH/sonication; GB2sp:
NaOH/sonication/proteolysis. The yield (g) increased in the following order
GB2sp>GB1sp>GB1p>GB2s>GB1s>GB1. However, the amount of SP
extracted increased in different way GB2sp>GB1p>GB1>GB1sp>GB1s>GB2s.
Infrared and electrophoresis analysis showed that all conditions extracted the
same SP. In addition, monosaccharide composition showed that ultrasound
promotes the extraction of other polysaccharides than SP. In the prothrombin
time (PT) test, which evaluates the extrinsic coagulation pathway, none of the
samples showed anticoagulant activity. While in the activated partial
thromboplastin time (aPTT) test, which evaluates the intrinsic coagulation
pathway, all samples showed anticoagulant activity, except GB2s. The aPTT
activity decreased in the order of GB1sp>GB2sp>GB1p>GB1>GB1s>GB2s.
Total capacity antioxidant (TCA) of the SP was also affected by condition
extraction, since GB2s and GB1 showed lower activity in comparison to the
other conditions. In conclusion, the conditions of SP extraction influence their
biological activities and chemical composition. The data showed
NaOH/sonication/proteolysis was the best condition to extract anticoagulant and
antioxidant SPs from Gracilaria birdiae.
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