Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aqüicultura, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:52:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 331640.pdf: 924954 bytes, checksum: eb0e9200591eb8f127b05e63797b14e5 (MD5) Previous issue date: 2014 / Estudos em Santa Catarina demonstraram a viabilidade do cultivo da macroalga Kappaphycus alvarezii (Rhodophyta, Gigartinales) em águas subtropicais, entretanto as temperaturas do inverno são limitantes para a sobrevivência da espécie. O cultivo em tanques nos períodos de baixas temperaturas pode ser considerado como solução para esse entrave. Esse trabalho teve como objetivos: estabelecer um método de aclimatação e regime de pulso de nutrientes para o cultivo em tanques de K. alvarezii por meio de ensaios in vitro e determinar o melhor método de movimentação de água para o cultivo em tanques circulares da espécie com o uso de aeração constante por meio de ar difuso ou air lift. Para o primeiro objetivo, aproximadamente 12 g de tetrasporófito verde foram aclimatados por uma semana, sendo que metade da biomassa foi aclimatada em ausência de luz (AL) e a outra metade em presença de luz (PL). Posteriormente à aclimatação, foi realizado um pulso de nutrientes de 1 hora com solução von Stosch a 50 % (VS50) e como controle foi realizado o mesmo pulso apenas com água do mar esterilizada. Após esse período, as algas foram cultivadas por 42 dias sem adição de nutrientes. No tratamento VS50, algas aclimatadas com AL apresentaram taxa de crescimento média de 2,20 % dia-1 significativamente maior que as algas aclimatadas com PL, que apresentaram taxa de crescimento de 1,54 % dia-1. No controle, não foram observadas diferenças significativas. Os ensaios in vitro mostraram que a aclimatação por uma semana em ausência de luz e com pulso de 1h em VS50 é o melhor tratamento para a manutenção de linhagens. Para o segundo objetivo, exemplares de tetrasporófito verde de K. alvarezii foram aclimatados conforme a metodologia escolhida no primeiro objetivo. O cultivo foi realizado em tanques circulares de 100 L, em fotoperíodo natural, temperatura de 22±0,3 °C, em densidade de 5 g L-1 por 28 dias. Semanalmente as algas eram pesadas e havia renovação de 20 % da água do mar. Temperatura, salinidade e oxigênio dissolvido foram medidos duas vezes por dia, três vezes por semana. Dois tratamentos foram testados para a circulação da água nos tanques: aeração constante por meio de ar difuso (AD) e air lift (AL). Como controle (C) foi realizado o cultivo das algas sem aeração. Cada tratamento e controle possuíam três réplicas. Em todo período de cultivo foi observado ganho de biomassa, porém não foram observadas diferenças significativas entre os tratamentos e o controle. A taxa de crescimento foi de 0,47±0,1 % dia-1; 0,41±0,1 % dia-1; 0,30±0,1 % dia-1 nos tratamentos de AD, AL e controle, respectivamente. No controle ocorreram maiores alterações nas concentrações de oxigênio dissolvido, enquanto nos tratamentos AD e AL não foram observados variações expressivas no período de tempo estudado. A salinidade se manteve na faixa dos 35,5Â 35,8 Â em todos os tratamentos. Foi observado que no controle as algas começaram a apresentar sinais da enfermidade ice-ice em algumas regiões do talo. As algas cultivadas no tratamento AL apresentaram despigmentação nas extremidades e no tratamento AD mantiveram a coloração padrão da linhagem verde. Mesmo não havendo diferenças significativas nas taxas de crescimento entre os tratamentos e controle, no sistema de ar difuso (AD) as algas aparentaram estar mais saudáveis, sendo esse o sistema escolhido para o cultivo em tanques circulares para manutenção de matrizes de K. alvarezii. Com base nos resultados obtidos no presente trabalho, foi possível concluir que a aclimatação no escuro por uma semana, seguida de pulso de nutrientes de 1h em solução VS50 e posterior cultivo em tanques circulares com circulação de água proveniente de sistema de ar difuso foram adequadas para a manutenção da espécie em épocas desfavoráveis ao cultivo no mar, embora não sejam adequados para o cultivo massivo em tanques.

Dissertação (Mestrado) - Curso de Pos-Graduação em Ciencia dos Alimentos, Centro de Ciencias Agrarias, Universidade Federal de Santa Catarina / Made available in DSpace on 2012-10-16T23:52:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0

Orientador : Prof. Dr. Diogo R. Bazan Ducatti / Co-orientador : Prof. Dr. Alan Guilherme Gonçalves / Co-orientadora : Profª. Drª. Maria Eugênia Duarte Noseda / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 25/03/2015 / Inclui referências / Resumo: Polissacarídeos de algas vermelhas (agaranas e carragenanas) têm atraído muita atenção devido à suas diversas aplicações e abundante estoque marinho. O objetivo deste trabalho foi realizar a modificação seletiva de C6 da unidade de ?-D-Galp para a síntese do derivado amino carboxilado da agarose, através de uma síntese em quatro etapas. Para isso, foi realizada a inserção dos grupamentos tosil, azido, amino e carboxila nesta posição do polissacarídeo gerando derivados da agarose que possuem potencial no desenvolvimento de materiais com aplicação tecnológica e farmacêutica, tais como na área biotecnológica, como suporte para imobilização de enzimas, na indústria química em síntese orgânica e na área biomédica na confecção de biomateriais. Além disso, foi realizada a caracterização química de todos os derivados sintetizados. A primeira reação da síntese foi a reação de tosilação. Esta reação foi realizada em meio básico, assim, primeiramente a agarose foi submetida à reação com NaBH4 para redução de seus terminais redutores. As reações preparativas de tosilação, em condições otimizadas, geraram dois derivados tosil da agarose com grau de substituição por grupo tosila de 0,25 e 0,91 (frações 2a e 2b), respectivamente e rendimentos de 97% para ambos os derivados. O derivado 2b apresentou preferência para a posição C6 da unidade de ?-D-Galp, apresentando um grau de substituição de 0,57 para esta posição. Os derivados azido da agarose foram sintetizados, em escala preparativa, em condições otimizadas, com um rendimento de 84% e 52% (frações 3a e 3b). Para a amostra 3b o grau de substituição pelo grupo azido foi de 0,50 para a posição C6 da unidade de ?-D-Galp. Os derivados amino foram sintetizados através da reação de Staudinger, utilizando trifenilfosfina e água. O derivado amino 4a e o derivado 4b apresentaram um rendimento de 76% e de 52%, respectivamente, após purificação em sohxlet para remoção do excesso trifenilfosfina e do subproduto óxido de trifenilfosfina. O grau de substituição para o grupo amino para o derivado 4b foi de 0,28. Os derivados carboxilados, foram sintetizado com os reagentes TEMPO/TCCA promovendo a oxidação seletiva das hidroxilas de C6 da unidade de ?-D-Galp não substituídas por amino. Os resultados indicaram 100% de oxidação das hidroxilas nas frações 4a e 4b e os rendimentos foram de aproximadamente 50% para ambas as frações. Dessa forma, a rota de síntese utilizada se mostrou eficiente, sendo produzido, na maioria das reações, produtos na escala de gramas e as análises dos espectros de ressonância magnética nuclear (RMN) indicaram que a substituição do grupo tosila por azido e a redução deste a amino foi preferencial em C6 da unidade de ?-D-Galp da agarose. Palavras-chave: Polissacarídeos. Agarose. Modificação química. Derivados da Agarose. / Abstract: Polysaccharides of red algae (agaranas and carrageenan) have attracted much attention due to its various applications and abundant marine stock. The objective of this work was the selective modification of C6 of ?-D-Galp unit for the synthesis of amino carboxylate of agarose, through a synthesis of four steps. For this, was inserted tosyl, azide, amino and carboxyl groups in this position of the polysaccharide, generating agarose derivatives that show potential in the development of materials technology and pharmaceutical applications, such as in the biotechnology area, as support for the immobilization of enzymes, in chemical industry in organic synthesis and in the biomedical field in the production of biomaterials. Furthermore, was realized the chemical characterization of all synthesized products. The first reaction of the synthesis was the tosylation. This reaction was carried out in basic medium, therefore, it was first performed the reaction of agarose with NaBH4 to reduction the polysaccharide reducing terminals. The preparative tosylation reactions, under optimized conditions, generated two tosyl derivative from agarose with a degree of substitution of tosyl group of 0.25 and 0.91 (fractions 2a and 2b), respectively, and 97% yields for both derivatives. The derivative 2b show preference for the C6 position of the ?-D-Galp unit, having a degree of substitution of 0.57 for this position. The azido derivatives of agarose were synthesized in preparative scale in optimal conditions, with a yield of 84% and 52% (fractions 3a and 3b). For the sample 3b the degree of substitution by azido group was 0.50 for the C6 position of the ?-D-Galp unit. The amino derivatives were synthesized via the Staudinger reaction using triphenylphosphine and water. The amino derivative 4a and 4b show a yield of 76% and 52%, respectively, after purification in sohxlet to remove the excess of triphenylphosphine and triphenylphosphine oxyde byproduct. The degree of substitution for the amino group to the derivative 4b was 0.28. The carboxylated derivatives were synthesized with reagents TEMPO / TCCA promoting the selective oxidation of the C6 hydroxyl of the ?-D-Galp unit unsubstituted amino. The results showed 100% oxidation of the hydroxyl fractions 4a and 4b and the yields were approximately 50% for both fractions. Thus, the synthesis route used is efficient, agarose derivatives was produced in gram scale, in most of the reactions and the analysis by nuclear magnetic resonance (NMR) indicated that the substitution of the tosyl group by azide and reduction of this to amine was preferential in C6 of ?-D-Galp unit of agarose. Keywords: Polysaccharides. Agarose. Chemical modification. Derivatives of Agarose.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-04Bitstream added on 2014-06-13T18:55:59Z : No. of bitstreams: 1 paiano_mo_me_sjrp.pdf: 330319 bytes, checksum: 590f9e7db17c9373e55eb15ce9bdbfd8 (MD5) / Batrachospermum helminthosum Bory e Sirodotia delicatula Skuja são duas espécies da ordem Batrachospermales amplamente distribuídas no Brasil. As variações genéticas intra e interespecífica destas duas espécies foram investigadas com a utilização de dois marcadores mitocondriais, cox2-3 (região espaçadora entre os genes que codificam as subunidades 2 e 3 da enzima citocromo c oxidase) e região de “barcode” do gene cox1 (que codifica a subunidade 1 da enzima citocromo c oxidase). Sessenta e três indivíduos de seis localidades foram amostrados para B. helminthosum, abrangendo a área do Rio Grande do Sul ao Espírito Santo (20º24’49”-29º10’44”S). Foram detectados sete haplótipos para a região espaçadora cox2-3, com comprimento de 376 pares de base (pb), os quais variaram entre 1 a 9 pb (0,3-2,4%). Estes haplótipos revelaram uma nítida tendência de variação do sul em direção ao norte do país e mostraram padrão essencialmente similar em relação aos haplótipos encontrados para a região de “barcode” do gene cox1, que apresentou comprimento de 664 pb e teve uma variação de 3 a 11 pb (0,4 a 1,6%) entre os seis haplótipos encontrados. A variação encontrada para S. delicatula foi maior, entre os 115 indivíduos analisados, com sete haplótipos para a região espaçadora cox2-3, em 13 localidades amostradas, do Estado de São Paulo até Mato Grosso (11º32’20’’-23º33’48’’S). A divergência entre estes haplótipos foi de 1 a 20 pb (0,3 a 5,4%) também com comprimento de 376 pb. As sequências de cox1 apresentaram variação de 1 a 56 pb (0,1 a 8,5%) para os oito haplótipos detectados, com comprimento de 664 pb. Os haplótipos com maior divergência em relação ao ancestral foram os de Mato Grosso e Goiás... / Batrachospermum helminthosum Bory and Sirodotia delicatula Skuja are two widespread species of Batrachospermales in Brazil. Intra- and inter-specific genetic variation of these two species were investigated using two mitochondrial markers - cox2-3 (spacer region between the genes encoding sub-units 2 and 3 of the cytochrome c oxidase enzyme) and the barcode region of the gene cox1 (encoding sub-unity 1 of the cytochrome c oxidase). Sixty-three individuals from six localities were sampled for B. helminthosum comprising a region from Rio Grande do Sul through Espírito Santo (20º24’49”-29º10’44”S). Seven haplotypes were found for the cox2-3 spacer region, with the length of 376 base pairs (bp), which ranged from 1 to 9 bp (0.3-2.4%). These haplotypes revealed a clear trend of variation from the south towards the north of the country and showed an essentially similar pattern of the haplotypes found for the barcode region of cox1, which had 664 bp in length and exhibited a divergence of 3 to 11 pb (0.4 to 1.6%) among the six haplotypes found. The variation found for S. delicatula was relatively higher among the 115 individuals analyzed, with seven haplotypes for the spacer region cox2-3, from 13 localities samples, from States of São Paulo through Mato Grosso (11º32’20’’-23º33’48’’S). The divergence among these haplotypes ranged from 1 to 20 bp (0.3 a 5.4%) in sequences with 376 bp in length. The cox1 sequences had a variation of 1 to 56 bp (0.1 to 8.5%) for the eight haplotypes found, all with 664 bp in length. The haplotypes with higher divergences in comparison to the ancestral were those from States of Goiás and Mato Grosso, but with a lower variation between them. Results for both markers suggest that the dispersion of this species in Brazil initiated from... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Orlando Necchi Jr. / Banca: Ciro Cesar Zanini Branco / Banca: Valéria Cassano / Resumo: Batrachospermum helminthosum Bory e Sirodotia delicatula Skuja são duas espécies da ordem Batrachospermales amplamente distribuídas no Brasil. As variações genéticas intra e interespecífica destas duas espécies foram investigadas com a utilização de dois marcadores mitocondriais, cox2-3 (região espaçadora entre os genes que codificam as subunidades 2 e 3 da enzima citocromo c oxidase) e região de "barcode" do gene cox1 (que codifica a subunidade 1 da enzima citocromo c oxidase). Sessenta e três indivíduos de seis localidades foram amostrados para B. helminthosum, abrangendo a área do Rio Grande do Sul ao Espírito Santo (20º24'49"-29º10'44"S). Foram detectados sete haplótipos para a região espaçadora cox2-3, com comprimento de 376 pares de base (pb), os quais variaram entre 1 a 9 pb (0,3-2,4%). Estes haplótipos revelaram uma nítida tendência de variação do sul em direção ao norte do país e mostraram padrão essencialmente similar em relação aos haplótipos encontrados para a região de "barcode" do gene cox1, que apresentou comprimento de 664 pb e teve uma variação de 3 a 11 pb (0,4 a 1,6%) entre os seis haplótipos encontrados. A variação encontrada para S. delicatula foi maior, entre os 115 indivíduos analisados, com sete haplótipos para a região espaçadora cox2-3, em 13 localidades amostradas, do Estado de São Paulo até Mato Grosso (11º32'20''-23º33'48''S). A divergência entre estes haplótipos foi de 1 a 20 pb (0,3 a 5,4%) também com comprimento de 376 pb. As sequências de cox1 apresentaram variação de 1 a 56 pb (0,1 a 8,5%) para os oito haplótipos detectados, com comprimento de 664 pb. Os haplótipos com maior divergência em relação ao ancestral foram os de Mato Grosso e Goiás... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Batrachospermum helminthosum Bory and Sirodotia delicatula Skuja are two widespread species of Batrachospermales in Brazil. Intra- and inter-specific genetic variation of these two species were investigated using two mitochondrial markers - cox2-3 (spacer region between the genes encoding sub-units 2 and 3 of the cytochrome c oxidase enzyme) and the barcode region of the gene cox1 (encoding sub-unity 1 of the cytochrome c oxidase). Sixty-three individuals from six localities were sampled for B. helminthosum comprising a region from Rio Grande do Sul through Espírito Santo (20º24'49"-29º10'44"S). Seven haplotypes were found for the cox2-3 spacer region, with the length of 376 base pairs (bp), which ranged from 1 to 9 bp (0.3-2.4%). These haplotypes revealed a clear trend of variation from the south towards the north of the country and showed an essentially similar pattern of the haplotypes found for the barcode region of cox1, which had 664 bp in length and exhibited a divergence of 3 to 11 pb (0.4 to 1.6%) among the six haplotypes found. The variation found for S. delicatula was relatively higher among the 115 individuals analyzed, with seven haplotypes for the spacer region cox2-3, from 13 localities samples, from States of São Paulo through Mato Grosso (11º32'20''-23º33'48''S). The divergence among these haplotypes ranged from 1 to 20 bp (0.3 a 5.4%) in sequences with 376 bp in length. The cox1 sequences had a variation of 1 to 56 bp (0.1 to 8.5%) for the eight haplotypes found, all with 664 bp in length. The haplotypes with higher divergences in comparison to the ancestral were those from States of Goiás and Mato Grosso, but with a lower variation between them. Results for both markers suggest that the dispersion of this species in Brazil initiated from... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:13:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 328646.pdf: 3208248 bytes, checksum: 67c80ae89c45fc7d821245f62a795cd4 (MD5) Previous issue date: 2014 / Gelidium floridanum W.R. Taylor é uma alga vermelha de grande importância comercial por ser fonte de ágar com melhor qualidade. Este estudo teve como objetivo ampliar os conhecimentos sobre a germinação de tetrásporos e os efeitos da radiação ultravioleta e do metal pesado cádmio (Cd) nos gametófitos jovens de G. floridanum. Para a análise dos mecanismos reguladores da polarização e germinação, os tetrásporos foram cultivados com brefeldina A (BFA), colchicina e citocalasina, sendo analisados por microscopia de luz (ML), fluorescência e eletrônica de trasmissão (MET). Com a utilização da BFA, a germinação dos esporos não ocorreu, a BFA levou a uma desmontagem das cisternas do Golgi com formação de regiões vesiculares no citoplasma, bloqueando a secreção do Golgi para a formação do tubo germinativo e deposição da parede celular. O tubo germinativo, nas amostras controle, é formado pela incorporação de vesículas derivadas do Golgi, a secreção das vesículas e organização dos corpos de Golgi são processos básicos e essenciais na adesão e formação do tubo. A BFA bloqueou a secreção de proteínas e de polissacarídeos amorfos da matriz, impedindo a germinação dos tetrásporos. Com os inibidores do citoesqueleto, citocalasina e colchicina, a germinação de tetrásporos de G. floridanum também foi afetada. Estes agentes causaram diminuição das taxas de germinação além da malformação dos tubos germinativos e no caso da citocalasina alteração no formato dos cloroplastos. Pode-se sugerir que tanto os microtúbulos quanto os filamentos de actina são reguladores dos processos de polarização e germinação de tetrásporos de G. floridanum. Para os efeitos da radiação ultravioleta, gametófitos jovens de G. floridanum foram cultivados em laboratório e expostos a radiação fotossinteticamente ativa (PAR) de 80µmol fótons m-2 s-1 e PAR+UVA+UVB durante 3 h por dia, por um período de 3 dias. As amostras foram processadas para ML e MET para análise ultraestrutural, bem como análise das taxas de crescimento, teor de pigmentos fotossintéticos, identificação dos carotenóides e avaliação do desempenho fotossintético. PAR + UVA + UVB promoveu aumento da espessura da parede celular, acúmulo de grãos de amido das florídeas no citoplasma e rompimento da organização interna do cloroplasto. As amostras expostas a PAR + UVA + UVB mostraram uma redução na taxa de crescimento de 97%, aumento dos carotenóides, diminuição dos pigmentos fotossintetizantes, em particular, a ficoeritrina e aviiialoficocianina, e consequente diminuição do desempenho fotossintético observados pela redução da taxa de tranporte de elétrons (ETR) e ETRmax. Para os efeitos do Cd, gametófitos jovens foram cultivados durante 7 dias com concentrações de 7,5 e 15 µM do Cd. Após o período experimental, foram realizadas análises de ML, confocal e eletrônica de varredura (MEV), taxas de crescimento, quantificação dos pigmentos fotossintetizantes, carotenóides e a fluorescência da clorofila a. As amostras tratadas apresentaram diminuição das taxas de crescimento, com despigmentação dos talos, redução dos pigmentos fotossintetizantes, resultando num descréscimo da taxa de transporte de elétrons e da autofluorescência dos cloroplastos. Além disso, o Cd aumentou a quantidade de grãos de amido das florídeas e afetou a distribuição do conteúdo proteico no citoplasma. O metal cádmio é altamente tóxico, causando fotoinibição crônica para a espécie. Pode-se concluir que tanto os corpos de Golgi como o citoesqueleto, filamentos de actina e microtúbulos, estão envolvidos nos processos de polarização e formação do tubo germinativo durante a germinaçãos de tetrásporos e, que gametófitos jovens de G. floridanum quando expostos tanto a radiação quanto ao Cd apresentam alterações no metabolismo e na estrutura celular que afetam seu desenvolvimento.<br> / Abstract : Gelidium floridanum W. R. Taylor is a red alga of great commercial importance as a source of high-quality agar. This study aimed to examine the germination of tetraspores and the effects of ultraviolet radiation (UVR) and heavy metal cadmium (Cd) on young gametophytes of G. floridanum. To analyze the regulatory mechanisms of polarization and germination, the tetraspores were cultured with brefeldin A (BFA), colchicine and cytochalasin, followed by analysis under light (LM), fluorescence and transmission electron microscopy (TEM). The use of BFA blocked the secretion of protein and amorphous matrix polysaccharides. It also blocked secretion from Golgi bodies, affecting germ-tube formation, as well as, cell wall deposition, and leading to the disassembly of the Golgi cisternae with regions of vesicular formation in the cytoplasm. These events effectively prevented tetraspore germination. Tetraspore germination was also affected by the use of cytochalasin and colchicine, which are inhibitors of cytoskeleton. These agents caused a decrease in germination rates and, in high concentrations, complete inhibition of germination. In addition, the germ tube becames malformed and, in the case of cytochalasin, the shape of chloroplasts was altered. It can be suggested that both microtubule and actin are regulators of polarization and germination in tetraspores of G. floridanum. Next, to assess the effects of UVR, young gametophytes were cultivated under laboratory conditions and exposed to photosynthetically active radiation (PAR) at 80 µmol photons m-2 s-1 and PAR+UVA +UVB for 3 h per day, during three days. The samples were processed for LM and MET to carry out analyses of ultrastructure, growth rates, and content of photosynthetic pigments, as well as, identify carotenoids and evaluate photosynthetic performance. PAR + UVA + UVB caused an increase in cell wall thickness, accumulation of floridean starch grains and changes in the internal organization of the chloroplast. Samples exposed to PAR + UVA + UVB showed a reduction in growth rate of 97%, increased of carotenoids, decreased photosynthetic pigments, in particular, phycoerythrin and allophycocyanin, and a resulting reduction in photosynthetic performance, as observed by the reduction of transport electron (ETR) and ETRmax. Finally, to test the effects of the Cd, young gametophytes of G floridanum were cultured for 7 days with concentrations of 7.5 and 15µM Cd. After the experimental period, LM, confocal and scanning electron microscopy (SEM) were employed toxanalyze growth rates and quantify the content of photosynthetic pigments, carotenoids and chlorophyll a. The treated samples showed a decrease in growth rates, with depigmentation of the thallus and reduction of photosynthetic pigments, resulting in a decrease in the rate of electron transport and autofluorescence of chloroplasts. Furthermore, exposure to Cd proved to be highly toxic, causing chronic photoinhibition, increasing the amount of starch grains, and altering the distribution of protein content in the cytoplasm. It can be concluded that both the Golgi bodies such as the cytoskeletal actin and microtubules are involved in the processes of polarization and germ tube formation during germination tetraspores and that youngs gametophytes of G. floridanum when exposed to both radiation as to the Cd present alterations in metabolism and cellular structure that affect its development.

Tese (Doutorado) - Universidade de São Paulo, Instituto de Biociências. / Made available in DSpace on 2013-12-05T20:43:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1999

Orientador: Orlando Necchi Junior / Banca: Luis Henrique Zanini Branco / Banca: Valéria Cassano / Resumo: A seção Setacea foi reconhecida como grupo monofilético na revisão recente da ordem Batrachospermales. Porém, seu status taxonômico não pode ser determinado, porque posicionou-se dentro do grupo denominado Australasica, composto por táxons da Austrália e Nova Zelândia. Estudos anteriores combinando dados moleculares e morfológicos enfocaram apenas as relações filogenéticas entre os grupos maiores (gêneros ou seções) e abordagens visando avaliar o número de espécies só foram iniciadas muito recentemente e são ainda escassas e baseadas em poucas amostras. Dessa maneira, as seguintes hipóteses foram testadas neste estudo: 1) a seção Setacea do gênero Batrachospermum constitui grupo monofilético dentro da ordem Batrachospermales; o reconhecimento desse grupo associado ao fato de Batrachospermum ser parafilético poderá resultar na elevação desta seção para um nível superior (possivelmente um gênero); 2) as espécies atualmente reconhecidas na seção com base em caracteres morfológicos serão confirmadas pelos dados moleculares; além dessas espécies, outras (particularmente espécies crípticas) deverão ser encontradas e reconhecidas dentro da seção. Este estudo teve como objetivos: 1) inferir as relações filogenéticas da seção Setacea com os outros grupos (gêneros e seções) da ordem Batrachospermales, bem como os limites de variação inter e intra-específica das espécies dentro da seção, com base na análise das sequências do gene rbcL e da região de "barcode" do gene cox1; 2) elaborar estudo de revisão para a seção Setacea por meio da reavaliação dos caracteres taxonômicos diagnósticos para espécies deste grupo, à luz dos novos dados moleculares. Foram analisadas 15 amostras, sendo 13 provenientes das regiões sul e sudeste do Brasil, uma do Japão e outra da Espanha. Os espécimes foram coletados em águas com temperaturas baixas a moderadas, ligeiramente ácidas a neutras,... / Abstract: Section Setacea of the genus Batrachospermum was recognized as a monophyletic group in a recent revision of the order Batrachospermales. However, its taxonomic status was not clearly determined because it was positioned within a group named Australasica composed by taxa from Australia and New Zealand. Previous studies combining molecular and morphological data focused only on the phylogenetic relationships among the major groups (genera or sections), whereas approches aiming to evaluate the number of species were initiated just recently and are still scarce and poorly sampled. Based on this background, the following hypotheses were tested in this study: 1) the section Setacea represents a monophyletic group within the order Batrachospermales; the recognition of the group associated to the fact that the genus Batrachospermum is paraphyletic could result in the raising of the section to a higher taxonomic level (possibly genus); 2) the species presently recognized in the section based on morphological characters will be confirmed by molecular evidence; in addition, other species (particularly cryptic species) are expected to be found and recognized within the section.This study aimed to: 1) infer the phylogenetic relationships of section Setacea with other groups (genera and sections) of the Batrachospermales, as well as the inter and intra-specific limits of variation for the species within the section based on sequence analysis for the rbcL and cox1 barcode region: 2) elaborate a revisionary study by reevaluating the diagnostic taxonomic characters for the species of the sectionin the light of the new molecular data. Fifteen samples were analyzed, thirteen from southern and southeastern Brazil and two from other continents (Asia - Japan; Europe - Spain). The specimens were collected in waters with low to moderate temperatures, slightly acidic, turbulent and mean to moderate oxygen concentrations (oligotrophic and oligosaprobic... / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-12-10Bitstream added on 2014-06-13T19:58:56Z : No. of bitstreams: 1 valadao_ib_me_araiq_parcial.pdf: 494280 bytes, checksum: f71a3fc25bfa0b073162ad9acbc99940 (MD5) Bitstreams deleted on 2014-11-14T12:16:52Z: valadao_ib_me_araiq_parcial.pdf,Bitstream added on 2014-11-14T12:17:42Z : No. of bitstreams: 1 000713243.pdf: 1355332 bytes, checksum: 8d17f83281f9a02e2ab6dbfd4fd13b99 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho teve como objetivo principal a obtenção de substâncias bioativas apartir do estudo químico/biológico do extrato bruto produzido pelo fungo endofíticoHypoxylonsp., isolado dos talos da alga vermelhaDichotomariamarginata. Este fungofoi cultivado em meio sólido (arroz) fornecendo o extrato bruto em AcOEt, após maceração, filtração a vácuo e evaporação do solvente. Neste avaliou-se a produção metabólica em CCDC, CLAE-DAD e RMN de 1H e foi submetidoabioensaios para avaliar a seu potencial antifúngico in vitro contra patógenos humanos e fitopatógenos, onde demonstrou ser promissor. Fracionamento em coluna de sílica gel de fase reversa (C-18) resultou no isolamento de três substâncias da classe das antraquinonas: 1,5-dimetoxi-2,6- dihidroxi-antraquinona, 1,5,6-trimetoxi-2-hidroxi-antraquinona, 1,2,5,6-tetrametoxiantraquinona, sendo este o primeiro relato de antraquinonas isoladas do fungo Hypoxylon sp.. O extrato bruto do fungo endofíticoHypoxylonsp. apresentoumoderada atividade antifúngica frente ao patógeno humano Cryptococcusneoformans e frente ao fitopatógenoCladosporiumsphaerospermum. Os resultados do trabalho reforçam a importância do estudo de microrganismo como fonte de metabolitos secundários / The present work main objective is to obtain bioactive substances from the chemical/biological study of crude extract produced by the endophytic fungus Hypoxylon sp., isolated from the stems of the seaweed Dichotomariamarginata. This endophyte was cultivated in solid medium(rice) providing the crude extract in AcOEt, after vacuum filtration and solvent evaporation. The metabolic production of this extracts was evaluated in CCDC, HPLC-DAD and 1H-NMR and the extracts were subjected to bioassays to evaluation the antifungal potential against human pathogens and phytopathogens, which proved to be promising. The crude extract was fractionated on a column of silica gel reverse phase (C-18) resulting in the isolation of three substances, 1,5-dimethoxy-2,6-dihydroxy-anthraquinone, 1,5,6-trimethoxy-2-hydroxy-anthraquinone, 1,2,5,6-tetramethoxy-anthraquinone. This was the first report of isolated anthraquinones from Hypoxylon sp.The crude extract of endophytic fungus Hypoxylon sp. showed moderate antifungal activity against the human pathogen Cryptococcus neoformans and against the phytopathogensCladosporiumsphaerospermum. The results of the study reinforce the importance of the study of microorganisms as a source of secondary metabolites

Orientador: Marcia Nasser Lopes / Banca: Vera Lucia Garcia Rehder / Banca: Sandra Imaculada Maintinguer / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo principal a obtenção de substâncias bioativas apartir do estudo químico/biológico do extrato bruto produzido pelo fungo endofíticoHypoxylonsp., isolado dos talos da alga vermelhaDichotomariamarginata. Este fungofoi cultivado em meio sólido (arroz) fornecendo o extrato bruto em AcOEt, após maceração, filtração a vácuo e evaporação do solvente. Neste avaliou-se a produção metabólica em CCDC, CLAE-DAD e RMN de 1H e foi submetidoabioensaios para avaliar a seu potencial antifúngico in vitro contra patógenos humanos e fitopatógenos, onde demonstrou ser promissor. Fracionamento em coluna de sílica gel de fase reversa (C-18) resultou no isolamento de três substâncias da classe das antraquinonas: 1,5-dimetoxi-2,6- dihidroxi-antraquinona, 1,5,6-trimetoxi-2-hidroxi-antraquinona, 1,2,5,6-tetrametoxiantraquinona, sendo este o primeiro relato de antraquinonas isoladas do fungo Hypoxylon sp.. O extrato bruto do fungo endofíticoHypoxylonsp. apresentoumoderada atividade antifúngica frente ao patógeno humano Cryptococcusneoformans e frente ao fitopatógenoCladosporiumsphaerospermum. Os resultados do trabalho reforçam a importância do estudo de microrganismo como fonte de metabolitos secundários / Abstract: The present work main objective is to obtain bioactive substances from the chemical/biological study of crude extract produced by the endophytic fungus Hypoxylon sp., isolated from the stems of the seaweed Dichotomariamarginata. This endophyte was cultivated in solid medium(rice) providing the crude extract in AcOEt, after vacuum filtration and solvent evaporation. The metabolic production of this extracts was evaluated in CCDC, HPLC-DAD and 1H-NMR and the extracts were subjected to bioassays to evaluation the antifungal potential against human pathogens and phytopathogens, which proved to be promising. The crude extract was fractionated on a column of silica gel reverse phase (C-18) resulting in the isolation of three substances, 1,5-dimethoxy-2,6-dihydroxy-anthraquinone, 1,5,6-trimethoxy-2-hydroxy-anthraquinone, 1,2,5,6-tetramethoxy-anthraquinone. This was the first report of isolated anthraquinones from Hypoxylon sp.The crude extract of endophytic fungus Hypoxylon sp. showed moderate antifungal activity against the human pathogen Cryptococcus neoformans and against the phytopathogensCladosporiumsphaerospermum. The results of the study reinforce the importance of the study of microorganisms as a source of secondary metabolites / Mestre