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Reestruturação produtiva e emprego industrial na região de Campinas-SP: um estudo para as indústrias petroquímica e metal-mecânica

Gusmão, Maristela da Silva [UNESP] 29 November 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-11-29Bitstream added on 2014-06-13T19:10:43Z : No. of bitstreams: 1 gusmao_ms_me_arafcl.pdf: 218115 bytes, checksum: f382716721239621a70cdf4412f9d67b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste trabalho é discutir o impacto das inovações tecnológicas recentes sobre o emprego industrial na região de Campinas – SP nas indústrias de processo contínuo e metal-mecânica. Neste trabalho expomos de forma geral a questão dos efeitos das mudanças tecnológicas sobre o emprego da força de trabalho, recorrendo a David Ricardo e Karl Marx, e colocamos uma questão para discussão: como é possível ainda, no final do século XX e início do século XXI, dizer-se que são as inovações tecnológicas que expulsam o trabalhador da fábrica? Para tratamento dessa questão passamos pela caracterização do taylorismo/fordismo e também pelo próprio processo de reestruturação produtiva do final do século XX. Verificam-se as relações entre tecnologia e trabalho nas indústrias de processo contínuo e metal-mecânica, procurando elementos que possam esclarecer os possíveis impactos da reestruturação produtiva sobre o emprego da força de trabalho. Faz-se, finalmente, um levantamento empírico para os casos das indústrias de processo contínuo (com ênfase na petroquímica) e da indústria metal-mecânica na região de Campinas – SP, com o objetivo de verificar empiricamente a relação entre reestruturação produtiva e emprego. / The objective of this academic work is to discuss the impact of the recent technological innovations over the employment in the Campinas Region of São Paulo State in continous process industries and the Metal- Mechanics sector. In this Dissertation we show, in a general way, the issue of the effect of the technological changes on the empolyment of the work force, referring to the works of David Ricardo and Karl Marx. We also put forward a question for debate: How is it still possible, at the end of the twentieth century and the beginning of the twenty - first century, to say that it is technological innovations that are expelling workers from the plant? To address this question we go through the characterization of the Taylorism/Fordismo models of production as well as production reorganization at the end of the twentieth century. The functional relationship between technology and employment in the continous process industry and in the Metal-Mechanics one are verified while looking for elements that can clarify the possible impacts of the productive reorganization on the employment of the labour force. Finally, an empirical survey for the cases of the continous process industry (with emphasis on the Petrochemical one) and the Metal-Mechanics industry in the region of Campinas in São Paulo State, with the objective of verifying empirically the functional relationship between Production reorganization and employment.
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Impactos do FUNDEF na educação infantil no município de Franca

Cunha, Elizangela Lélis da [UNESP] 05 March 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-03-05Bitstream added on 2014-06-13T20:31:43Z : No. of bitstreams: 1 cunha_el_me_arafcl.pdf: 1082736 bytes, checksum: 35397049664f78d6d02dbf1b823f40c2 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho versa sobre os impactos do Fundo de Manutenção e Desenvolvimento do Ensino Fundamental e Valorização do Magistério (FUNDEF) na educação municipal de Franca, SP, principalmente na educação infantil, após a implantação deste pelo Governo Federal. A vinculação automática de 15% do total dos recursos arrecadados neste Fundo, para investimento apenas no ensino fundamental, provoca profundas mudanças nas responsabilidades educacionais dos municípios paulistas, uma vez que o ensino fundamental era oferecido principalmente pelo Governo Estadual. A destinação dos recursos do Fundo adota como critério o número de alunos matriculados na rede de ensino fundamental de cada ente federativo, contabilizados pelo censo escolar do ano anterior. Tal processo desencadeou a municipalização, via convênio Estado/Município ou por intermédio da criação de rede própria de ensino fundamental, com passagem gradual do atendimento desta etapa de ensino para o município. Em Franca, o governo municipal da época optou por criar rede própria e não assinar o convênio Estado/Município, que transferia para responsabilidade do município as escolas de ensino fundamental estaduais. A pesquisa procura entender a municipalização do ensino, no caso específico de Franca/SP, e evidencia o financiamento e atendimento da educação neste município, antes e após a implantação do FUNDEF. O estudo realizado em Franca nos mostra a organização e aplicação dos recursos educacionais, no período em análise, e seus impactos para a educação infantil, com destaque para a existência de uma grande demanda reprimida, no atendimento educacional de crianças de 0 a 3 anos. / Ce travail traite les impacts du FUNDEF sur l'éducation municipal de Franca - SP , notamment sur l'éducation des enfants, après l'implantation de celui-ci par le gouvernement fédéral. L'attachement automatique de 15% du total des recours déposés dans ce Fonds pour l'investissement seulement dans l'enseignement élémentaire, entraîne des changements profonds auprès d l'Administration de l'éducation des municipes de l'Etat de Sào Paulo, une fois l'enseignement élémentaire était offert notamment par le gouvernement de l'Etat. La destination des recours du Fonds adopte tandis que critère le nombre d'élèves inscripts dans le système d'enseignement élémentaire de chaque organisme fédératif, comptés par le cens scolaire de l'année précédent. Tel procès a declencé la municipalisation, à travers une convention Etat/municipe ou la création d'un système propre d'enseignement élémentaire, à travers le passage gradué de cette étape d'enseignement vers le municipe. À Franca, le gouvernement municipal de l'époque a opté pour la création d'un système propre et la non signature de la convention Etat/municipe, qui transférait au municipe la responsabilité des écoles d'enseignement élémentaire de l'Etat. Cette recherche envisage coomprendre la municipalisation de l'enseignement, dans le cas spécifique de Franca, et montre le financement et accueil de l'éducation dans ce municipe, avant et après l'implantation du FUNDEF. L'étude réalisé à Franca manifeste l'organisation et application des recours éducationnels dans la période analisée et ses impacts sur l'éducation des enfants, en soulignant l'existence d'une grande demande réprimée en ce qui concerne l'accueil à l'éducation des enfants de 0 à 3 ans.
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Os sentidos da casa própria : condomínios horizontais populares fechados e novas práticas espaciais em Presidente Prudente e São Carlos /

Oliveira, Viviane Fernanda de. January 2014 (has links)
Orientador: Eda Maria Góes / Banca: Maria Encarnação Beltrão Sposito / Banca: Maria Angélica de Oliveira Magrini / Resumo: A expansão urbana experimentada pelas cidades brasileiras vem ocorrendo em descontinuidade, com a implantação de espaços residenciais fechados de alto padrão em áreas distantes da malha urbana compactada, mas também de condomínios horizontais populares fechados, aos quais voltamos nossa atenção nessa dissertação, que procura compreender como essas novas formas de morar são influenciadas e influenciam a produção do espaço urbano de cidades médias, como Presidente Prudente e São Carlos. A perspectiva metodológica adotada é a do cotidiano dos seus moradores, em sua relação com os espaços urbanos, e as práticas dos moradores de um espaço residencial popular aberto em cada uma dessas cidades também foram analisadas, como forma de identificar contrapontos e semelhanças. Com as entrevistas, constatamos que a opção pela tipologia fechada, pelos agentes imobiliários, visa reverter desvantagens locacionais e superexplorar espaços internos, enquanto que, para os moradores, ela é estratégica na evitação dos estigmas próprios das periferias nas quais estão localizados os condomínios pesquisados. Embora convivam com processos que não são novos de produção desses espaços periféricos, as novas barreiras (físicas e simbólicas) contribuem para que novos sentidos da casa própria sejam difundidos, ao mesmo tempo em que acentuam a tendência à privatização, em curso nessas cidades. / Abstract: Urban expansion experienced by Brazilian cities has been occurring in discontinuity with the implementation of closed residential spaces of high standard in remote areas of compacted urban area, but also popular horizontal condominiums, to which we turn our attention in this dissertation, which seeks to understand how these new forms of living are influenced and influence the production of urban space in medium-sized cities, as Presidente Prudente and São Carlos. The methodological approach adopted is the daily life of its residents, in their relationship with urban spaces and practices of the inhabitants of an opened popular residential space in each of these cities were analyzed, in order to identify similarities and counterpoints. With the interviews, we found that the choice of closed type, by real estate agents, aims to reverse locational disadvantages and overexploit internal spaces, while for the residents, it is the strategic avoidance of the peripheries own stigmas in which surveyed condominiums are located. Although coexist with processes that are not new production of these peripheral spaces, new barriers (physical and symbolic) that contribute to new meanings of home ownership is diffused, while accentuating the trend toward privatization underway in these cities. / Mestre
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Vulnerabilidade ambiental ao óleo em ambiente fluvial : estudo de caso rio Tietê/Reservatório de Barra Bonita /

Beneditti, Cristina Aparecida. January 2015 (has links)
Orientador: Paulina Setti Riedel / Coorientador: João Carlos Carvalho Milanelli / Banca: Cenira Maria Lupinacci / Banca: Gilberto Garcia / Banca: Rosane Freire Boina / Banca: Maria José Brollo / Resumo: Acidentes envolvendo derramamento de óleo são extremamente preocupantes, pois provocam severos danos ao meio ambiente, seja aquático ou terrestre, causando impactos a fauna, flora e também a população que depende dos recursos naturais direta ou indiretamente. Porém, apenas na década de 80, após grave acidente ocorrido no Alasca é que estabeleceu-se medidas mais rigorosas para o transporte, armazenamento de óleo e planos de respostas aos acidentes. No entanto, os eventos de maior magnitude e que envolvem grandes volumes derramados ocorrem na área costeira e por isso, para este ambiente, já possuem regras e metodologia de análise da sensibilidade e vulnerabilidade ambiental ao óleo mais consolidados. O mesmo não ocorre para o ambiente fluvial. Porém há uma previsão do aumento de embarcações nas hidrovias do Brasil transportando grãos, açúcar e etanol, o que eleva a possibilidade de ocorrerem acidentes com derramamento de óleo diesel, tanto diretamente dos comboios quanto nos pontos de abastecimento. Na ocorrência desse tipo acidente, é importante que se saiba qual é o caminho que o óleo percorrerá no canal do rio, bem como quando e em que proporções atingirá áreas ambientalmente mais sensíveis, para que se possa tomar medidas de contenção do óleo. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi elaborar cenário de vulnerabilidade ambiental ao óleo para ambiente fluvial, em especial para trecho do rio Tietê e para o reservatório de Barra Bonita-SP. Para tanto, foi realizado o mapeamento dos índices de sensibilidade ambiental ao óleo (ISF) na área de estudo, considerando as características da geomorfologia fluvial. Também foi realizada a simulação de um acidente no porto intermodal, localizado em Anhembi, considerando as características típicas de vento e precipitação para os meses de cheia (maio) e vazante (novembro) do reservatório. Com a utilização do software SisBaHiA, foram elaborados cenários... / Abstract: Accidents involving oil spills are extremely worrying, as they cause severe damage to the environment, whether water or land, impacting the fauna, flora and also the population directly or indirectly depends on natural resources. But only in the 80s, after serious accident in Alaska is that it was established more stringent measures for transportation, oil storage and response plans to accidents. However, larger magnitude of events involving large volumes and poured occurs in the coastal area and therefore, for this environment, already have rules and methodology of analysis of the sensitivity and environmental vulnerability to further consolidated oil. Not so for the riverine environment. But there is a forecast increase of vessels in the waterways of Brazil carrying grain, sugar and ethanol, which increases the possibility of accidents with diesel oil spill, either directly train as the supply points. In case this kind of accident occurs, it is important to know which is the oil course on the riverdyke, as well as when and in which magnitude it will reach environmentally sensitivity areas. Thus, the main aim of this thesis was to elaborate a vulnerability environmental scenery to oil in fluvial environment, more specifically on the river Tietê stretch and reservoir of Barra Bonita in São Paulo state. For both, a mapping of the fluvial sensitive environmental index to oil (ISF) to the study areas was carried out, considering the geomorphology of the river. Also was carried out a simulation of an accident in an inter-modal harbor, located in Anhembi, which have considered typical characteristics of wind and rainfall to the flood (May) and ebb (November) period in there reservoir. Using the software SisBaHiA, were elaborated scenery to 12h, 36h, 60h e 72h after the overflow have started, to follow the displacement of the spot contamination. The simulation results were divided in three classes, according to the oil permanency time: no ... / Doutor
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Representações políticas no Primeiro Império : a relação das Câmaras Municipais de Itu e Franca com o Governo Provincial /

Rodrigues, Rejane Maria Freitas. January 2005 (has links)
Orientador: Marisa Saenz Leme / Banca: Gunter Axt / Banca: Ida Lewkowicz / Mestre
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Caracterização e análise do sistema de abastecimento de água potável no município de Botucatu, SP /

Herrera, Ozana Maria, 1956- January 1996 (has links)
Orientador: Paulo Rodolfo Leopoldo. / Resumo: O conhecimento do sistema de abastecimento de água potável de uma comunidade, é de grande utilidade para o planejamento do uso destes recursos, nos diversos setores em que os mesmos são requeridos. Com o objetivo de caracterizar o sistema de abastecimento público de água potável no município de Botucatu-SP, utilizou-se as séries históricas dos volumes de água captados, produzidos e consumidos nos setores residencial, comercial, industrial e outros, obtidos junto à SABESP(Companhia de Saneamento Básico do Estado de São Paulo) e os dados da população do município, coletados no IBGE(Fundação Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística), agência Botucatu-SP, correspondentes ao período de 1980 a 1995. Avaliando-se os dados da produção, consumo e população obteve-se a demanda de 260 l.dia-1 "per capita", o consumo de 164,87 l.dia-1 "per capita" e um índice de perdas de 36,59% do total de água produzido. Determinou-se a equação do crescimento da população, através de análise de regressão e, ajustando-se esta equação em função do tempo obteve-se a previsão do crescimento populacional. Calculou-se as previsões dos consumos e das demandas futuras em função da população prevista, para o período de 1996 a 2020. Através desses resultados, concluiu-se que a capacidade instalada para tratamento e a capacidade atual de reservação de água potável atingirão seus limites máximos de utilização entre os anos 2000 e 2001, se a população, a produção, a demanda, as perdas e o consumo se mantiverem de acordo as previsões realizadas. / Abstract:Knowing the water supplying system in a community is very useful for planing the use of these resources in the different areas in which they are required. The purpose of this work was characterizing the public water supplying system in Botucatu-SP city. The time series data of the collected, produced and consumed volumes in residential, comercial, industrial areas and others, were obtained from SABESP(Basic Sanitation Company of São Paulo State) and the city population data were obtained from IBGE(Geography and Statistics Brazilian Institute Fundation), agency from Botucatu-SP, corresponding to the period from 1980 to 1995. By evaluating the population, the production and the consumption, the demand of 260 l.day-1 "per capita", the consumption of 164,87 l.day-1 "per capita" and the rate of treated water wastage, that is 36,59% of the total produced volume, were obtained. The population growth equation was determined through regression analysis and a preview of the populational growth was obtained by fitting that equation in time function. The future consumption and demand were calculated in function of the population previewed for the period from 1996 to 2020. Through these results were concluded that the installed capacity for water treatment and the present capacity of treated water reservation will reach their maximum utilization limits between the years 2000 and 2001 if the population, the production, the demand, the wastage and the consumption are kept according to the obtained previews.
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Distribuição ecológica e dinâmica populacional do camarão sete-barbas Xiphopenaeus kroyeri(Heller, 1862) (Crustacea: Decapoda) no complexo Baia/Estuário de Santas e Sâo Vicente, SP /

Heckler, Gisele Salgado. January 2010 (has links)
Orientador: Rogério Caetano da Costa / Banca: Roberto Munehisa Shimizu / Banca: Antônio Leão Castilho / Resumo: o presente estudo teve como objetivo averiguar a abundância do camarão sete-barbas, Xiphopenaeus kroyeri, e a influência de fatores ambientais como temperatura e salinidade da água de fundo e textura e porcentagem de matéria orgânica do sedimento, na distribuição espaçotemporal da espécie ao longo do complexo Baía/Estuário de Santos e São Vicente. As amostragens foram realizadas mensalmente de junho de 2008 a maio de 2009 em quatro pontos no Estuário de São Vicente e quatro na Baía de Santos em profundidades que variaram de 3 a 15 metros, aproximadamente. As amostras de água de fundo foram obtidas para se determinar a temperatura e a salinidade e as amostras de sedimento foram utilizadas para análise da fração granulométrica e da porcentagem de matéria orgânica de cada ponto. Os valores da salinidade média no estuário variaram de 24,5 Uulho) a 32,5 psu (outubro) e na baía, de 32,5 Uulho) a 39,5 psu (setembro). Foi observada uma menor amplitude de variação nos valores de temperatura no estuário, entre 21,7°C Uulho) e 29,5°C (março), quando comparada com a baía, entre 18,2 (dezembro) e 28,O°C (fevereiro). Em todos os pontos da baía, a fração granulométrica que prevaleceu foi de areia muito fina e no estuário, houve uma variação de silte e argila a areia fina. Com exceção de um dos pontos do estuário, a porcentagem de matéria orgânica foi sempre menor que 3. Dos 60.274 indivíduos coletados, nenhum foi capturado no estuário e este fato pode estar relacionado à baixa salinidade observada no local. Desse modo, a espécie deve ser incluída no ciclo de vida tipo 111, ou seja, o ciclo de vida completa-se em regiões costeiras marinhas. Já a temperatura... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the present study was to analyze the abundance of the seabob shrimp, Xiphopenaeus kroyeri, and the influence of environmental factors as temperature and salinity (bottom water), organic matter content and grain size of sediments, in the spatial-temporal distribution of the species along the complex Bay/Estuary of Santos and São Vicente. Samples were taken monthly between June 2008 and May 2009 in four sites in São Vicente Estuary and four sites in Santos Bay in depths from 3 to 15m. The bottom water samples were obtained to determine the temperature and salinity and the sediment samples to analyze the grain size and organic matter content of each site. The mean values of salinity varied in the estuary from 25.5 (July) to 32.5 psu (October) and, in the bay, from 32.5 (July) to 39.5 psu (September). It was observed lower amplitude of variation in temperature values in the estuary, between 21.7 (July) and 29.5°C (March) when compared with the bay, between 18.2 (December) and 28.0°C (February). In ali sites in the bay, it was observed predominance of very fine sand and, in the estuary, there was a variation from silt and clay and fine sand. Excepting one site in the estuary, the percentage of organic matter content was always lower than 3. In a total of 60,274 individuais obtained, none of them was caught in the estuary and this fact can be related with low values of salinity observed in the local. Thus the species has to be included in the life cycle type 3, which is completed from the inshore to offshore areas. High values of temperature were determinants when associated with adult males and matured females. The species remained in the region ali year round and low temperatures have forced a population migration to lower depths... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Distribuição ecológica e dinâmica populacional do camarão sete-barbas Xiphopenaeus kroyeri(Heller, 1862) (Crustacea: Decapoda) no complexo Baia/Estuário de Santas e Sâo Vicente, SP

Heckler, Gisele Salgado [UNESP] 19 February 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-19Bitstream added on 2014-06-13T21:00:32Z : No. of bitstreams: 1 heckler_gs_me_botib.pdf: 885060 bytes, checksum: 0aad2d1acde396306968425b40eb5ccd (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / o presente estudo teve como objetivo averiguar a abundância do camarão sete-barbas, Xiphopenaeus kroyeri, e a influência de fatores ambientais como temperatura e salinidade da água de fundo e textura e porcentagem de matéria orgânica do sedimento, na distribuição espaçotemporal da espécie ao longo do complexo Baía/Estuário de Santos e São Vicente. As amostragens foram realizadas mensalmente de junho de 2008 a maio de 2009 em quatro pontos no Estuário de São Vicente e quatro na Baía de Santos em profundidades que variaram de 3 a 15 metros, aproximadamente. As amostras de água de fundo foram obtidas para se determinar a temperatura e a salinidade e as amostras de sedimento foram utilizadas para análise da fração granulométrica e da porcentagem de matéria orgânica de cada ponto. Os valores da salinidade média no estuário variaram de 24,5 Uulho) a 32,5 psu (outubro) e na baía, de 32,5 Uulho) a 39,5 psu (setembro). Foi observada uma menor amplitude de variação nos valores de temperatura no estuário, entre 21,7°C Uulho) e 29,5°C (março), quando comparada com a baía, entre 18,2 (dezembro) e 28,O°C (fevereiro). Em todos os pontos da baía, a fração granulométrica que prevaleceu foi de areia muito fina e no estuário, houve uma variação de silte e argila a areia fina. Com exceção de um dos pontos do estuário, a porcentagem de matéria orgânica foi sempre menor que 3. Dos 60.274 indivíduos coletados, nenhum foi capturado no estuário e este fato pode estar relacionado à baixa salinidade observada no local. Desse modo, a espécie deve ser incluída no ciclo de vida tipo 111, ou seja, o ciclo de vida completa-se em regiões costeiras marinhas. Já a temperatura... / The aim of the present study was to analyze the abundance of the seabob shrimp, Xiphopenaeus kroyeri, and the influence of environmental factors as temperature and salinity (bottom water), organic matter content and grain size of sediments, in the spatial-temporal distribution of the species along the complex Bay/Estuary of Santos and São Vicente. Samples were taken monthly between June 2008 and May 2009 in four sites in São Vicente Estuary and four sites in Santos Bay in depths from 3 to 15m. The bottom water samples were obtained to determine the temperature and salinity and the sediment samples to analyze the grain size and organic matter content of each site. The mean values of salinity varied in the estuary from 25.5 (July) to 32.5 psu (October) and, in the bay, from 32.5 (July) to 39.5 psu (September). It was observed lower amplitude of variation in temperature values in the estuary, between 21.7 (July) and 29.5°C (March) when compared with the bay, between 18.2 (December) and 28.0°C (February). In ali sites in the bay, it was observed predominance of very fine sand and, in the estuary, there was a variation from silt and clay and fine sand. Excepting one site in the estuary, the percentage of organic matter content was always lower than 3. In a total of 60,274 individuais obtained, none of them was caught in the estuary and this fact can be related with low values of salinity observed in the local. Thus the species has to be included in the life cycle type 3, which is completed from the inshore to offshore areas. High values of temperature were determinants when associated with adult males and matured females. The species remained in the region ali year round and low temperatures have forced a population migration to lower depths... (Complete abstract click electronic access below)
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Avaliação de moléculas bioativas produzidas por isolados actinomicetos contra cocos Gram positivos de origem clínica / Characterization of bioactive molecules produced by actinomycetes isolated against clinical cocos gram positive

Antunes, Themis Collares January 2013 (has links)
Os actinomicetos são bactérias Gram positivas caracterizadas por sua habilidade em formar hifas, são amplamente distribuídos no ambiente e conhecidos pela diversidade na produção de moléculas biologicamente ativas. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a atividade de compostos produzidos por quarenta isolados de actinomicetos contra isolados clínicos de Enterococcus sp, Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis. O perfil de suscetibilidade das amostras clínicas foi avaliado empregando a técnica de disco difusão em ágar. A atividade antimicrobiana dos actinomicetos foi avaliada pela técnica da dupla camada. Os isolados que apresentaram atividade foram cultivados em caldo amido caseína à temperatura de 30ºC por sete dias, com agitação constante. Após o crescimento, a cultura foi filtrada para obtenção do extrato bruto. A atividade antibiótica do extrato foi avaliada através da técnica de difusão em poço. O isolado que apresentou maior espectro de ação foi selecionado para otimização dos compostos. A otimização da produção dos compostos com atividade antibiótica foi realizada através da avaliação de curva de produção, variação da fonte de carbono, tempo de incubação, pH tamponado e pH não tamponado. No ensaio de sobrecamada os isolados 50 e 8S apresentaram atividade contra a 90% das amostras de microrganismos clínicos de Staphylococcus sp. e Enterococcus sp. No ensaio de difusão em poço o isolado 50 apresentou maior atividade antibiótica que o isolado 8S. Na otimização do extrato as melhores condições de produção foram: 72 h de crescimento, fonte de carbono amido e sem tamponamento de pH. Não foi observada influência de biomassa na produção dos compostos. A cromatografia em camada delgada revelou a presença de duas bandas com fator de retenção de 0,28 (Rf1) e 0,57 (Rf2). / Actinomycetes are Gram positive bacteria, characterized by their ability to form hyphae. They are widely distributed in the environment and known for their diversity in producing biological active molecules. This study aimed to evaluate the activity of compounds produced by forty isolates of Actinomycetes against clinical isolates of Enterococcus sp, Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis. The susceptibility profile of the samples was evaluated using the disk diffusion technique in agar. The antimicrobial activity of actinomycetes was assessed by means of the double layer. Isolates that showed activity were grown in starch casein broth at a temperature of 30 ºC for seven days, with constant agitation. After growth the culture was filtered to obtain a crude extract. The antimicrobial activity of the extract was evaluated by the well diffusion technique. The actinomycete that showed activity against most of the test samples was selected for optimization(s) of the compound(s) production. The optimization of the production was performed by evaluating: growth curve, the use of different carbon source, changes in the incubation time, and culture media with buffered and unbuffered pH. In the overlay assay isolates 50 and 8S presented activity against most of Staphylococcus sp. and Enterococcus sp samples. In diffusion assay isolate 50 showed higher antibiotic activity than the isolated 8S. Compiling the results the best production conditions were: 72 h of growth, carbon source starch without pH buffering at 30°C. There was no effect of biomass (s) compound (s) activity. The thin layer chromatography revealed the presence of two bands with a retention factor of 0.28 (Rf1) and 0.57 (Rf2).
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Estudos de proteômica, estruturais e funcionais de proteínas envolvidas na degradação da biomassa lignocelulósica: expansinas microbianas e hidrolases de glicosídeos termofílicas / Proteomic, structural and functional studies of lignocellulosic biomass degradation: microbial expansins and thermophilic glycosyl hydrolases

Atílio Tomazini Junior 11 March 2016 (has links)
O Brasil possui uma posição privilegiada quando se refere à produção de etanol. Por questões históricas e geográficas o país é responsável por mais de 30 % da produção mundial de etanol, com uma produção nacional de mais de 28 bilhões de litros em 2014. Para maximizar o rendimento desse processo, está em desenvolvimento a tecnologia associada ao etanol de segunda geração ou etanol lignocelulósico. Os principais desafios desta tecnologia são: melhorar a eficiência de conversão do substrato em produto e a produção em grande escala utilizando substratos de baixo custo. Com o objetivo de melhorar a eficiência do processo de conversão foram estudadas proteínas auxiliares (expansinas) que, em conjunto com celulases, melhoram a despolimerização de biomassa lignocelulósica em açúcares fermentescíveis. Além disso, realizou-se também a caracterização de enzimas ativas de carboidratos (CAZymes) de origem termofílica do organismo Thermogemmatispora sp. T81, devido a capacidade que estas proteínas apresentam de manter a atividade e conformação estrutural em altas temperaturas por um prolongado período de tempo. A partir de análises utilizando bioinformática, os genes que codificam para expansinas de Xanthomonas campestris, Bacillus licheniformis e Trichoderma reesei foram clonados e expressos em E. coli, e seus produtos gênicos (as expansinas) tiveram seus índices de sinergismo (devido atuação conjunta com coquetéis comerciais) e atividade catalítica determinados. Adicionalmente, dispondo de alinhamentos estruturais, foi proposto um mecanismo hidrolítico para elas. Em relação à bactéria Thermogemmatispora sp. T81, foram realizadas análises genômicas e proteômicas, a fim de selecionar enzimas superexpressas em meio celulósico. Seus genes foram clonados heterologamente em E. coli e o produto de expressão caracterizado bioquimicamente (cromatografia, ensaios de atividade e perfil de hidrólise) e estruturalmente (SAXS e dicroísmo circular). Os índices de sinergismo determinados foram de 2,47; 1,96 e 2,44 para as expansinas de Xanthomonas campestris, Bacillus licheniformis e Trichoderma reesei, respectivamente. A partir dos alinhamentos estruturais foi proposto a díade Asp/Glu como sitio catalítico em expansinas. As análises de proteômica possibilitaram a seleção de quatro alvos de clonagem, por apresentarem alto índice de expressão quando a bactéria foi cultivada em meio celulósico. Estas proteínas foram caracterizadas quanto a atividade e apresentaram um perfil comum: temperatura ótima de ação (de 70 a 75 °C), pH ótimo de 5, e hidrolisam preferencialmente substratos hemicelulósicos (xilano). A porcentagem de estruturais secundárias das proteínas em estudo foram confirmadas com predições teóricas ao se utilizar a técnica de dicroísmo circular. Desta maneira, os objetivos iniciais propostos neste projeto foram concluídos com a determinação do grau de sinergismo das proteínas expansinas em estudo e a proposição de um mecanismo de hidrólise para as mesmas, considerando que tais proteínas por mais de 20 anos tiveram sua atividade definida exclusivamente como acessória. Além disso, este estudo contribui com a identificação e seleção de genes para CAZymes termofilícas com aplicação biotecnológica devido às propriedades termoestáveis apresentadas. / Brazil holds a privileged position regarding the production of ethanol. Due to geographical and historical reasons the country produces more than 30% of the world’s ethanol, with a national yield of more than 28 billion liters in 2014 alone. To further increase gain in production, technology related to second generation (or lignocellulosic) ethanol is currently under development. The main challenges of this technology are: to improve the substrate-product conversion and large-scale production using low-cost substrates. In order to improve the efficiency of the former, auxiliary proteins (expansins), which enhance lignocellulosic biomass depolymerization to fermentable sugars when associated to celullases, were studied. Besides, due to structural and catalytic resilience when subjected to high temperature, the characterization of carbohydrate-active enzymes (CAZymes) of thermophilic origin from Thermogemmatispora sp. T81 organism was performed. Through the application of bioinformatics, genes coding for Xanthomonas campestris, Bacillus licheniformis e Trichoderma reesei expansins were cloned and expressed in E. coli, being the products assessed regarding their synergism (due to joint action with commercially available enzyme cocktails) and catalytic activity. Additionally, a hydrolytic mechanism was proposed based on structural alignments. Concerning the Thermogemmatispora sp. T81 bacteria, genomic and proteomic analysis were performed in order to select overexpressed enzymes in cellulosic medium. The heterologous cloning of the respective genes was then performed in E. coli, being the products characterized biochemically (utilizing chromatography, activity assay and hydrolysis profile) and structurally (through SAXS and circular dichroism). Determined synergistic indices were 2.47; 1.96 and 2.44 for Xanthomonas campestris, Bacillus licheniformis e Trichoderma reesei expansins, respectively. From structural alignments, the dyad Asp/Glu was proposed as the catalytic site in expansins. Proteomic analysis allowed the selection of four proteins for cloning, due to high expression levels when the bacteria were cultivated in a cellulosic medium. These proteins were characterized based on their activity and showed similar trends: optimal functional temperature (70-75 °C), optimal pH of 5, and preferential hydrolysis of hemicellulosic substrates (xylan). Theoretical predictions of secondary structure percentages of studied proteins were confirmed through circular dichroism technique. Therefore, the initially proposed objectives in this project were accomplished with the determination of synergistic level and proposed hydrolytic mechanism for the expansins, considering that the role of these proteins were deemed marginal for over 20 years. In addition, this study contributes with the identification and selection of genes of thermophilic CAZymes with biotechnological applications due to shown thermostability properties.

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