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Avaliação da superfície radicular após instrumentação manual, ultra-sônica e ultra-sônica seguida de instrumentação manual utilizando dentes mineralizados e desmineralizados / Evalution of root surface after manual and ultra-sonic instrumentation, following by a manual instumentation, utilizing mineralized and desmineralized teeth

Justo, Flávio Roberto Machado 20 March 2003 (has links)
O presente trabalho avaliou o efeito do tratamento da superfície radicular por meio da instrumentação com curetas, US e US seguido de curetas, utilizando dentes mineralizados e desmineralizados conjugando a utilização de cítrico e tetraciclina. As superfícies dentais foram analisadas em MEV por um único examinador, sendo utilizados 66 dentes unirradiculares com presença de cálculo indicando doença periodontal. Os dentes foram divididos em 6 grupos experimentais com 10 dentes cada e um grupo controle com 6 dentes sem tratamento. O protocolo de tratamento dos grupos seguiu a seguinte orientação: grupo 1- dentes mineralizados instrumentados com curetas; grupo 2- dentes mineralizados instrumentados com US; grupo 3- dentes mineralizados instrumentados com US, seguindo-se instrumentação com curetas; grupo 4- dentes instrumentados com curetas, desmineralizados e novamente instrumentados com curetas; grupo 5 - dentes instrumentados com US, desmineralizados e novamente instrumentados com US; e, grupo 6- dentes instrumentados com US, desmineralizados e novamente instrumentados com curetas. Foram analisadas a quantidade de cálculo residual (ICR), a rugosidade da superfície radicular (IRS) e perda da substância dentária (IPSD). Os resultados demonstraram diferenças estatísticas significativas quanto ao ICR do grupo 2 em relação aos grupos 3, 4 e 6 e do grupo 5 com os grupos 4 e 6; quanto ao IRS houveram diferenças estatísticas significativas entre o grupo 2 e os grupos 1, 4 e 6 e entre o grupo 5 e os grupos 1 e 6; quanto ao IPSD, observou-se que não houve diferenças estatísticas significativas entre os grupos. O uso de curetas isoladamente ou após US parece melhor se ajustar aos critérios de preparo adequado da raiz, em função dos parâmetros avaliados. / The present work aimed at evaluating the effect of root treatment by instrumentation of not only mineralized teeth with curettes, ultra-sonics (US) and US followed by curettes, but also of teeth intermediately demineralized in combined instrumentations, by using citric acid and tetracycline. The dental surfaces were analysed on SEM by a unique examiner, being utilized 66 uniradicular teeth presenting calculus and thus indicating periodontal disease. The teeth were divided into 6 experimental groups with 10 teeth each and a control group consisting of 6 teeth with no treatment. The treatment protocol for the groups was as follows: group 1- mineralized teeth instrumented with curettes; group 2- mineralized teeth instrumented with US; group 3- mineralized teeth instrumented with US, followed by curette; group 4 - teeth instrumented with curettes, demineralized and again instrumented with curettes; group 5 - teeth instrumented with US, demineralized and again instrumented with US; and, group 6- teeth instrumented with US, demineralized and instrumented with curettes. The amount of residual calculus (RCI), roughness of the radicular surface (SRI) and loss of dental substance (LTSI) were assessed. The results demonstrated statistically significant differences regarding the RCI of group 2 in relation to groups 3, 4 and 6, and that of group 5 with groups 4 and 6; as for the SRI, there were statistically significant differences between group 2 and groups 1, 4 and 6, and between group 5 and groups 1 and 6; no statistically significant differences were observed for the LTSI among groups. The use of curettes, alone or following US, seems more suitable for the criteria of adequate root preparation, as a function of the parameters evaluated.
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Avaliação da superfície radicular após instrumentação manual, ultra-sônica e ultra-sônica seguida de instrumentação manual utilizando dentes mineralizados e desmineralizados / Evalution of root surface after manual and ultra-sonic instrumentation, following by a manual instumentation, utilizing mineralized and desmineralized teeth

Flávio Roberto Machado Justo 20 March 2003 (has links)
O presente trabalho avaliou o efeito do tratamento da superfície radicular por meio da instrumentação com curetas, US e US seguido de curetas, utilizando dentes mineralizados e desmineralizados conjugando a utilização de cítrico e tetraciclina. As superfícies dentais foram analisadas em MEV por um único examinador, sendo utilizados 66 dentes unirradiculares com presença de cálculo indicando doença periodontal. Os dentes foram divididos em 6 grupos experimentais com 10 dentes cada e um grupo controle com 6 dentes sem tratamento. O protocolo de tratamento dos grupos seguiu a seguinte orientação: grupo 1- dentes mineralizados instrumentados com curetas; grupo 2- dentes mineralizados instrumentados com US; grupo 3- dentes mineralizados instrumentados com US, seguindo-se instrumentação com curetas; grupo 4- dentes instrumentados com curetas, desmineralizados e novamente instrumentados com curetas; grupo 5 - dentes instrumentados com US, desmineralizados e novamente instrumentados com US; e, grupo 6- dentes instrumentados com US, desmineralizados e novamente instrumentados com curetas. Foram analisadas a quantidade de cálculo residual (ICR), a rugosidade da superfície radicular (IRS) e perda da substância dentária (IPSD). Os resultados demonstraram diferenças estatísticas significativas quanto ao ICR do grupo 2 em relação aos grupos 3, 4 e 6 e do grupo 5 com os grupos 4 e 6; quanto ao IRS houveram diferenças estatísticas significativas entre o grupo 2 e os grupos 1, 4 e 6 e entre o grupo 5 e os grupos 1 e 6; quanto ao IPSD, observou-se que não houve diferenças estatísticas significativas entre os grupos. O uso de curetas isoladamente ou após US parece melhor se ajustar aos critérios de preparo adequado da raiz, em função dos parâmetros avaliados. / The present work aimed at evaluating the effect of root treatment by instrumentation of not only mineralized teeth with curettes, ultra-sonics (US) and US followed by curettes, but also of teeth intermediately demineralized in combined instrumentations, by using citric acid and tetracycline. The dental surfaces were analysed on SEM by a unique examiner, being utilized 66 uniradicular teeth presenting calculus and thus indicating periodontal disease. The teeth were divided into 6 experimental groups with 10 teeth each and a control group consisting of 6 teeth with no treatment. The treatment protocol for the groups was as follows: group 1- mineralized teeth instrumented with curettes; group 2- mineralized teeth instrumented with US; group 3- mineralized teeth instrumented with US, followed by curette; group 4 - teeth instrumented with curettes, demineralized and again instrumented with curettes; group 5 - teeth instrumented with US, demineralized and again instrumented with US; and, group 6- teeth instrumented with US, demineralized and instrumented with curettes. The amount of residual calculus (RCI), roughness of the radicular surface (SRI) and loss of dental substance (LTSI) were assessed. The results demonstrated statistically significant differences regarding the RCI of group 2 in relation to groups 3, 4 and 6, and that of group 5 with groups 4 and 6; as for the SRI, there were statistically significant differences between group 2 and groups 1, 4 and 6, and between group 5 and groups 1 and 6; no statistically significant differences were observed for the LTSI among groups. The use of curettes, alone or following US, seems more suitable for the criteria of adequate root preparation, as a function of the parameters evaluated.
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"Interação do laser de diodo de alta potência com a superfície radicular. Efeito na morfologia, na variação de temperatura e na adesão e proliferação de fibroblastos em cultura" / Interaction between high power diode laser and dental root surface. Thermal, morphological and biocompatibility analysis

Haypek, Patrícia 23 February 2006 (has links)
O objetivo do estudo foi analisar a interação entre o laser de diodo de alta potência e a superfície radicular através da análise de: variação de temperatura (Fase A), morfologia superficial das raízes dentárias (Fase B), adesão e a proliferação de fibroblastos cultivados sobre estas superfícies (Fase C). Vinte e um dentes unirradiculares foram utilizados nas 3 fases dos experimentos. Os grupos experimentais foram: Grupo controle - só recebeu o tratamento inicial de raspagem e alisamento radicular; Grupo INT - recebeu o mesmo tratamento do controle seguido de irradiação com o laser de diodo de alta potência, com comprimento de onda de 808 nm e fibra óptica de 400 µm de diâmetro, posicionada paralela à superfície radicular no parâmetro de 1,5 W (597,1 W/cm 2 na ponta da fibra) durante 30 s no modo interrompido; e Grupo CW - onde foi usado o mesmo tratamento do grupo INT, porém com o laser no modo contínuo. Na fase A utilizaram-se termopares para monitorar a temperatura intrapulpar; na Fase B, microscopia eletrônica de varredura (MEV) das superfícies tratadas dos 3 grupos experimentais, e na Fase C, fibroblastos foram plaqueados sobre as superfícies tratadas e em eletromicrografias de varredura as células foram contadas em 24 (adesão), 48 e 72 h (proliferação) após o plaqueamento. A monitoração de temperatura demonstrou que, com os parâmetros utilizados, houve aumento de temperatura dentro dos limites biocompatíveis e que esse aumento foi significantemente maior no grupo CW do que no grupo INT. Nos grupos irradiados observou-se presença de smear-layer modificada, exibindo uma superfície com áreas de aspecto mais liso correspondendo às áreas de fusão e ressolidificação, entremeadas por zonas de aspecto mais corrugado. Túbulos dentinários abertos não foram observados. Os fibroblastos plaqueados sobre as superfícies irradiadas aderiram e aumentaram em número no decorrer do tempo experimental. As curvas de crescimento celular sobre as superfícies irradiadas com os dois modos do laser apresentaram comportamento biológico similar entre si e com o controle. Pode-se concluir, nas condições deste estudo, que o uso do laser de diodo de alta potência é seguro do ponto de vista térmico, e causa alterações morfológicas superficiais similares, independentemente dos modos de irradiação. Adicionalmente, essas superfícies radiculares irradiadas são biocompatíveis, possibilitando a adesão e a proliferação celular / The aim of this study was to analyze the interaction between the high power diode laser and the dental root surface through the temperature variation analysis (Step A), root surface morphological observation (Step B), adhesion and proliferation of fibroblasts cultured on the top of the root surfaces (Step C). Twenty-one uniradicular teeth were used in the 3 steps of the experiments. The experimental groups were, as follows: Control group - root planning and scaling using Gracey curets; INT group - the root surfaces received the same treatment as control group followed by laser irradiation (high power diode laser, wavelength 808 nm, 400 µm optical fiber used parallel to the root surface, 1,5 W for 30 s, 597,1 W/cm 2 ), and CW - treated as the INT group however in a continuous wave. For the step A thermocouples were used; for step B, scanning electron microscopy (SEM) of the treated root surfaces of the 3 experimental groups, and at the Step C, fibroblasts were plated on the top of the root surfaces, and in scanning electronmicrographs the attached cells were counted 24 (adhesion), 48 e 72 h (proliferation) after plating. The temperature monitorization showed that, with the parameters used, there was an increase in temperature within the biological safety limits and, this increase was significantly higher for the CW group. At the root surfaces of irradiated groups a modified smear-layer was observed exhibiting rough areas intermingled to smooth areas corresponding to areas of fusion and resolidification of dental hard tissues. Open dentinal tubules were not observed. The fibroblasts plated on the top of the irradiated surfaces adhered and proliferated throughout the experimental time (0 to 3 days). The growth curves of the irradiated groups, independently of the irradiation mode, showed biological behavior similar between them and with the control group. At the conditions of this study, we concluded that the use of high power diode laser for root surface conditioning is thermically safe and causes similar superficial morphological changes independently of the irradiation mode used. Additionally, these root surfaces are biocompatible because did not impair the cell adhesion and growth
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"Interação do laser de diodo de alta potência com a superfície radicular. Efeito na morfologia, na variação de temperatura e na adesão e proliferação de fibroblastos em cultura" / Interaction between high power diode laser and dental root surface. Thermal, morphological and biocompatibility analysis

Patrícia Haypek 23 February 2006 (has links)
O objetivo do estudo foi analisar a interação entre o laser de diodo de alta potência e a superfície radicular através da análise de: variação de temperatura (Fase A), morfologia superficial das raízes dentárias (Fase B), adesão e a proliferação de fibroblastos cultivados sobre estas superfícies (Fase C). Vinte e um dentes unirradiculares foram utilizados nas 3 fases dos experimentos. Os grupos experimentais foram: Grupo controle - só recebeu o tratamento inicial de raspagem e alisamento radicular; Grupo INT - recebeu o mesmo tratamento do controle seguido de irradiação com o laser de diodo de alta potência, com comprimento de onda de 808 nm e fibra óptica de 400 µm de diâmetro, posicionada paralela à superfície radicular no parâmetro de 1,5 W (597,1 W/cm 2 na ponta da fibra) durante 30 s no modo interrompido; e Grupo CW - onde foi usado o mesmo tratamento do grupo INT, porém com o laser no modo contínuo. Na fase A utilizaram-se termopares para monitorar a temperatura intrapulpar; na Fase B, microscopia eletrônica de varredura (MEV) das superfícies tratadas dos 3 grupos experimentais, e na Fase C, fibroblastos foram plaqueados sobre as superfícies tratadas e em eletromicrografias de varredura as células foram contadas em 24 (adesão), 48 e 72 h (proliferação) após o plaqueamento. A monitoração de temperatura demonstrou que, com os parâmetros utilizados, houve aumento de temperatura dentro dos limites biocompatíveis e que esse aumento foi significantemente maior no grupo CW do que no grupo INT. Nos grupos irradiados observou-se presença de smear-layer modificada, exibindo uma superfície com áreas de aspecto mais liso correspondendo às áreas de fusão e ressolidificação, entremeadas por zonas de aspecto mais corrugado. Túbulos dentinários abertos não foram observados. Os fibroblastos plaqueados sobre as superfícies irradiadas aderiram e aumentaram em número no decorrer do tempo experimental. As curvas de crescimento celular sobre as superfícies irradiadas com os dois modos do laser apresentaram comportamento biológico similar entre si e com o controle. Pode-se concluir, nas condições deste estudo, que o uso do laser de diodo de alta potência é seguro do ponto de vista térmico, e causa alterações morfológicas superficiais similares, independentemente dos modos de irradiação. Adicionalmente, essas superfícies radiculares irradiadas são biocompatíveis, possibilitando a adesão e a proliferação celular / The aim of this study was to analyze the interaction between the high power diode laser and the dental root surface through the temperature variation analysis (Step A), root surface morphological observation (Step B), adhesion and proliferation of fibroblasts cultured on the top of the root surfaces (Step C). Twenty-one uniradicular teeth were used in the 3 steps of the experiments. The experimental groups were, as follows: Control group - root planning and scaling using Gracey curets; INT group - the root surfaces received the same treatment as control group followed by laser irradiation (high power diode laser, wavelength 808 nm, 400 µm optical fiber used parallel to the root surface, 1,5 W for 30 s, 597,1 W/cm 2 ), and CW - treated as the INT group however in a continuous wave. For the step A thermocouples were used; for step B, scanning electron microscopy (SEM) of the treated root surfaces of the 3 experimental groups, and at the Step C, fibroblasts were plated on the top of the root surfaces, and in scanning electronmicrographs the attached cells were counted 24 (adhesion), 48 e 72 h (proliferation) after plating. The temperature monitorization showed that, with the parameters used, there was an increase in temperature within the biological safety limits and, this increase was significantly higher for the CW group. At the root surfaces of irradiated groups a modified smear-layer was observed exhibiting rough areas intermingled to smooth areas corresponding to areas of fusion and resolidification of dental hard tissues. Open dentinal tubules were not observed. The fibroblasts plated on the top of the irradiated surfaces adhered and proliferated throughout the experimental time (0 to 3 days). The growth curves of the irradiated groups, independently of the irradiation mode, showed biological behavior similar between them and with the control group. At the conditions of this study, we concluded that the use of high power diode laser for root surface conditioning is thermically safe and causes similar superficial morphological changes independently of the irradiation mode used. Additionally, these root surfaces are biocompatible because did not impair the cell adhesion and growth
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Efeitos do condicionamento ácido na descontaminação da superfície radicular e no recobrimento radicular: análise em MEV e estudo clínico randomizado / Effects of acid conditioning in root surface decontamination and in root coverage: analysis by SEM and randomized clinical trial

Barros, João Paulo Corrêa 25 March 2013 (has links)
O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos do condicionamento radicular em diferentes tempos de aplicação na descontaminação das superfícies radiculares in vitro e avaliar seus efeitos no recobrimento radicular em seres humanos. Para o estudo in vitro, 132 fragmentos radiculares foram divididos em 11 grupos (n=12), de acordo com o tratamento: AF180 Raspagem e Alisamento Radicular (RAR) + aplicação de ácido fosfórico (AF) por 180 segundos; AF90 RAR + AF por 90 segundos; EDTA180 RAR + EDTA por 180 segundos; EDTA90 RAR + EDTA por 90 segundos; ACT180 RAR + ácido cítrico associado à tetraciclina (AC+T) por 180 segundos; ACT90 RAR + [AC+T] por 90 segundos; AC180 RAR + ácido cítrico (AC) por 180 segundos; AC90 RAR + AC por 90 segundos; T180 RAR + Tetraciclina ácida (T) por 180 segundos; T90 RAR + T por 90 segundos; Controle RAR. Os fragmentos foram analisados por meio de microscopia eletrônica de varredura para determinar o grau de descontaminação da superfície radicular, de acordo com os índices de rugosidade superficial (IRS), cálculo residual (ICR), perda de substância dentária (IPSD), presença de restos teciduais (IPRT) e remoção da smear layer (IRSL). Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelo método de Kruskal-Wallis. No estudo clínico randomizado, 27 pacientes com idade variável entre 23 e 60 anos (39,9 ± 13,22 anos), de ambos os sexos, apresentando recessão gengival classes I ou II de Miller, foram aleatoriamente alocados em três diferentes grupos para avaliar os efeitos do condicionamento ácido no recobrimento radicular: G180- aplicação de ácido cítrico associado à tetraciclina (ACT) durante 3 minutos após RAR (n= 20 sítios); G90- aplicação de ACT durante 90 segundos após RAR (n= 20 sítios); G0- RAR (n= 20 sítios). Todos os sítios foram tratados por meio de enxerto de tecido conjuntivo subepitelial. As medidas de profundidade de sondagem (PS), nível de inserção clínica (NIC), altura da recessão (AR), quantidade de gengiva ceratinizada (GC), índice de sangramento à sondagem (ISS) e índice de placa (IPl) foram investigadas nos exames inicial e pós-operatórios de 1, 3, 6 e 12 meses. Os pacientes responderam a questionário para determinar a intensidade da sensibilidade radicular segundo escala de dor variável de 0 (ausente) a 10 (máximo de dor) no exame inicial, aos 7 e 14 dias, 1, 3, 6 e 12 meses pós-operatórios. O grupo controle apresentou os maiores índices de rugosidade superficial (2,0 ± 1,02) e remoção da smear layer (3,83 ± 1,19), enquanto que o grupo EDTA180 apresentou os menores índices de cálculo residual (1,33 ± 0,63), IPSD (1,0 ± 0,0), IPRT (1,08 ± 0,28) e IRSL (1,08 ± 0,28). Não houve diferença estatisticamente significante (p>0.05) entre os grupos EDTA180, EDTA 90, AC90, AC180, ACT90 e ACT180 em todos os índices investigados. No estudo clínico, observou-se ganho significante (p<0.0001) de inserção clínica, redução da altura da recessão e aumento da faixa de gengiva ceratinizada em todos os grupos, sem alteração significante da profundidade de sondagem (p> 0.05). O percentual médio de recobrimento radicular foi maior no G180 (59,58% ± 34,76%), porém sem diferenças significantes (p= 0.31) em relação aos grupos G90 (52,12% ± 30,98%) e G0 (40,87% ± 36,96%). Houve maior redução média da recessão no G90 (1,95 ± 1,27) do que no grupo controle (0,95 ± 1,05), porém sem diferenças significantes (p> 0.05) em relação ao G180 (1,20 ± 0,69). Observou-se maior quantidade de GC nos grupos G90 (3,50 ± 1,90) e G180 (4,05 ± 0,44) após 12 meses, com diferenças estatisticamente significantes (p=0.0018) em relação ao G0 (2,0 ± 1,41). Houve redução significante da sensibilidade radicular em todos os grupos (p< 0.0001), sem diferenças entre os grupos (p> 0.05). Esses achados sugerem que o uso de condicionamento da superfície radicular favorece o aumento da faixa de gengiva ceratinizada e a redução da recessão, com diminuição da sensibilidade radicular. Dentre os diferentes tipos de agentes condicionantes investigados, os melhores resultados foram observados com EDTA a 24%, AC pH 1,0 e ACT, podendo ser empregados pelos períodos de 90 segundos ou 3 minutos. / The aim of this study was to investigate the effects of root conditioning in different periods of time in decontamination of root surfaces in vitro and to evaluate the effects in root coverage in humans. For the in vitro study, 132 root fragments were separated in 11 groups, according to treatment: PA180 scaling and root planing (SRP) + phosphoric acid (PA) application for 180 seconds; PA90 SRP + PA application for 90 seconds; EDTA180 SRP + EDTA application for 180 seconds; EDTA90 SRP + EDTA application for 90 seconds; ACT180 SRP + citric acid associated to tetracycline (ACT) for 180 seconds; ACT90 SRP + ACT for 90 seconds; AC180 SRP + citric acid (CA) for 180 seconds; AC90 SRP + CA for 90 seconds; T180 SRP + acid tetracycline (T) for 180 seconds, T90 SRP + T for 90 seconds; Control SRP. Fragments were analysed by scanning electron microscopy to determine the degree of root surface decontamination, according to surface rugosity index (SRI), residual calculus index (RCI), loss of tooth substance index (LTSI), presence of tissue remnants index (PTRI) and removal of smear layer index (RSLI). The results obtained were statistically analysed according to Kruskal Wallis method. At the randomized clinical trial, 27 patients aged 23-60 years (39,9 ± 13,22 years), both genders, presenting Millers class I or II recessions, were randomly allocated into one of the following groups to investigate the effects of acid conditioning in root coverage: G180- application of citric acid associated to tetracycline (ACT) for 3 minutes after SRP(n= 20 sites); G90- application of ACT for 90 seconds after SRP (n= 20 sites); G0- RAR (n= 20 sites).All sites were treated by subepithelial connective tissue graft. Probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), recession heigth (RH), width of keratinized gingiva (KGW), sulcular bleeding index and plaque index were investigated at baseline and at 1, 3, 6 and 12 months postoperative. Patients have answered a questionnaire to determine the intensity of hypersensitivity according to a pain scale varying from 0 (absent) to 10 (highest pain) at baseline and 7 and 14 days, 1, 3, 6 and 12 months postoperative. Control group showed the highest RSI (2.0 ± 1.02) and RSLI (3.83 ± 1.19), while EDTA180 showed the lowest RCI (1.33 ± 0.63), LTSI (1.0 ± 0.0), PTRI (1.08 ± 0.28) and RSLI (1.08 ± 0.28). No significant differences (p> 0.05) were observed among EDTA180, EDTA90, AC90, AC180, ACT90 and ACT180 at all investigated indexes. At randomized clinical trial, a significant (p< 0.0001) gain of attachment level, reduction of recession height and increase in keratinized gingiva width in all groups, along with no significant alteration in PD (p> 0.05).The mean percentage of root coverage was greater at G180 (59.58% ± 34.76%), but with no significant differences (p= 0.31) when compared to G90 (52.12% ± 30.98%) and G0 (40.87% ± 36.96%). A higher mean reduction of recession height was observed at G90 (1.95 ± 1.27) than at control group (0.95 ± 1.05), but with no significant differences (p> 0.05) when compared to G180 (1.20 ± 0.69). A wider keratinized gingiva was observed at G90 (3.50 ± 1.90) and G180 (4.05 ± 0.44) after 12 months, with significant differences (p=0.0018) when compared to G0 (2.0 ± 1.41). A significant reduction of hypersensitivity was observed at all groups (p< 0.0001), with no differences among groups (p> 0.05). These findings suggest that root conditioning favors an increase in keratinized gingiva width and reduction of recession height, along with reduction of hypersensitivity. Among the different types of conditioning agents, the best results were observed with 24% EDTA, CA pH 1.0 and ACT applied for 90 seconds or 3 minutes.
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Efeitos do condicionamento ácido na descontaminação da superfície radicular e no recobrimento radicular: análise em MEV e estudo clínico randomizado / Effects of acid conditioning in root surface decontamination and in root coverage: analysis by SEM and randomized clinical trial

João Paulo Corrêa Barros 25 March 2013 (has links)
O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos do condicionamento radicular em diferentes tempos de aplicação na descontaminação das superfícies radiculares in vitro e avaliar seus efeitos no recobrimento radicular em seres humanos. Para o estudo in vitro, 132 fragmentos radiculares foram divididos em 11 grupos (n=12), de acordo com o tratamento: AF180 Raspagem e Alisamento Radicular (RAR) + aplicação de ácido fosfórico (AF) por 180 segundos; AF90 RAR + AF por 90 segundos; EDTA180 RAR + EDTA por 180 segundos; EDTA90 RAR + EDTA por 90 segundos; ACT180 RAR + ácido cítrico associado à tetraciclina (AC+T) por 180 segundos; ACT90 RAR + [AC+T] por 90 segundos; AC180 RAR + ácido cítrico (AC) por 180 segundos; AC90 RAR + AC por 90 segundos; T180 RAR + Tetraciclina ácida (T) por 180 segundos; T90 RAR + T por 90 segundos; Controle RAR. Os fragmentos foram analisados por meio de microscopia eletrônica de varredura para determinar o grau de descontaminação da superfície radicular, de acordo com os índices de rugosidade superficial (IRS), cálculo residual (ICR), perda de substância dentária (IPSD), presença de restos teciduais (IPRT) e remoção da smear layer (IRSL). Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelo método de Kruskal-Wallis. No estudo clínico randomizado, 27 pacientes com idade variável entre 23 e 60 anos (39,9 ± 13,22 anos), de ambos os sexos, apresentando recessão gengival classes I ou II de Miller, foram aleatoriamente alocados em três diferentes grupos para avaliar os efeitos do condicionamento ácido no recobrimento radicular: G180- aplicação de ácido cítrico associado à tetraciclina (ACT) durante 3 minutos após RAR (n= 20 sítios); G90- aplicação de ACT durante 90 segundos após RAR (n= 20 sítios); G0- RAR (n= 20 sítios). Todos os sítios foram tratados por meio de enxerto de tecido conjuntivo subepitelial. As medidas de profundidade de sondagem (PS), nível de inserção clínica (NIC), altura da recessão (AR), quantidade de gengiva ceratinizada (GC), índice de sangramento à sondagem (ISS) e índice de placa (IPl) foram investigadas nos exames inicial e pós-operatórios de 1, 3, 6 e 12 meses. Os pacientes responderam a questionário para determinar a intensidade da sensibilidade radicular segundo escala de dor variável de 0 (ausente) a 10 (máximo de dor) no exame inicial, aos 7 e 14 dias, 1, 3, 6 e 12 meses pós-operatórios. O grupo controle apresentou os maiores índices de rugosidade superficial (2,0 ± 1,02) e remoção da smear layer (3,83 ± 1,19), enquanto que o grupo EDTA180 apresentou os menores índices de cálculo residual (1,33 ± 0,63), IPSD (1,0 ± 0,0), IPRT (1,08 ± 0,28) e IRSL (1,08 ± 0,28). Não houve diferença estatisticamente significante (p>0.05) entre os grupos EDTA180, EDTA 90, AC90, AC180, ACT90 e ACT180 em todos os índices investigados. No estudo clínico, observou-se ganho significante (p<0.0001) de inserção clínica, redução da altura da recessão e aumento da faixa de gengiva ceratinizada em todos os grupos, sem alteração significante da profundidade de sondagem (p> 0.05). O percentual médio de recobrimento radicular foi maior no G180 (59,58% ± 34,76%), porém sem diferenças significantes (p= 0.31) em relação aos grupos G90 (52,12% ± 30,98%) e G0 (40,87% ± 36,96%). Houve maior redução média da recessão no G90 (1,95 ± 1,27) do que no grupo controle (0,95 ± 1,05), porém sem diferenças significantes (p> 0.05) em relação ao G180 (1,20 ± 0,69). Observou-se maior quantidade de GC nos grupos G90 (3,50 ± 1,90) e G180 (4,05 ± 0,44) após 12 meses, com diferenças estatisticamente significantes (p=0.0018) em relação ao G0 (2,0 ± 1,41). Houve redução significante da sensibilidade radicular em todos os grupos (p< 0.0001), sem diferenças entre os grupos (p> 0.05). Esses achados sugerem que o uso de condicionamento da superfície radicular favorece o aumento da faixa de gengiva ceratinizada e a redução da recessão, com diminuição da sensibilidade radicular. Dentre os diferentes tipos de agentes condicionantes investigados, os melhores resultados foram observados com EDTA a 24%, AC pH 1,0 e ACT, podendo ser empregados pelos períodos de 90 segundos ou 3 minutos. / The aim of this study was to investigate the effects of root conditioning in different periods of time in decontamination of root surfaces in vitro and to evaluate the effects in root coverage in humans. For the in vitro study, 132 root fragments were separated in 11 groups, according to treatment: PA180 scaling and root planing (SRP) + phosphoric acid (PA) application for 180 seconds; PA90 SRP + PA application for 90 seconds; EDTA180 SRP + EDTA application for 180 seconds; EDTA90 SRP + EDTA application for 90 seconds; ACT180 SRP + citric acid associated to tetracycline (ACT) for 180 seconds; ACT90 SRP + ACT for 90 seconds; AC180 SRP + citric acid (CA) for 180 seconds; AC90 SRP + CA for 90 seconds; T180 SRP + acid tetracycline (T) for 180 seconds, T90 SRP + T for 90 seconds; Control SRP. Fragments were analysed by scanning electron microscopy to determine the degree of root surface decontamination, according to surface rugosity index (SRI), residual calculus index (RCI), loss of tooth substance index (LTSI), presence of tissue remnants index (PTRI) and removal of smear layer index (RSLI). The results obtained were statistically analysed according to Kruskal Wallis method. At the randomized clinical trial, 27 patients aged 23-60 years (39,9 ± 13,22 years), both genders, presenting Millers class I or II recessions, were randomly allocated into one of the following groups to investigate the effects of acid conditioning in root coverage: G180- application of citric acid associated to tetracycline (ACT) for 3 minutes after SRP(n= 20 sites); G90- application of ACT for 90 seconds after SRP (n= 20 sites); G0- RAR (n= 20 sites).All sites were treated by subepithelial connective tissue graft. Probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), recession heigth (RH), width of keratinized gingiva (KGW), sulcular bleeding index and plaque index were investigated at baseline and at 1, 3, 6 and 12 months postoperative. Patients have answered a questionnaire to determine the intensity of hypersensitivity according to a pain scale varying from 0 (absent) to 10 (highest pain) at baseline and 7 and 14 days, 1, 3, 6 and 12 months postoperative. Control group showed the highest RSI (2.0 ± 1.02) and RSLI (3.83 ± 1.19), while EDTA180 showed the lowest RCI (1.33 ± 0.63), LTSI (1.0 ± 0.0), PTRI (1.08 ± 0.28) and RSLI (1.08 ± 0.28). No significant differences (p> 0.05) were observed among EDTA180, EDTA90, AC90, AC180, ACT90 and ACT180 at all investigated indexes. At randomized clinical trial, a significant (p< 0.0001) gain of attachment level, reduction of recession height and increase in keratinized gingiva width in all groups, along with no significant alteration in PD (p> 0.05).The mean percentage of root coverage was greater at G180 (59.58% ± 34.76%), but with no significant differences (p= 0.31) when compared to G90 (52.12% ± 30.98%) and G0 (40.87% ± 36.96%). A higher mean reduction of recession height was observed at G90 (1.95 ± 1.27) than at control group (0.95 ± 1.05), but with no significant differences (p> 0.05) when compared to G180 (1.20 ± 0.69). A wider keratinized gingiva was observed at G90 (3.50 ± 1.90) and G180 (4.05 ± 0.44) after 12 months, with significant differences (p=0.0018) when compared to G0 (2.0 ± 1.41). A significant reduction of hypersensitivity was observed at all groups (p< 0.0001), with no differences among groups (p> 0.05). These findings suggest that root conditioning favors an increase in keratinized gingiva width and reduction of recession height, along with reduction of hypersensitivity. Among the different types of conditioning agents, the best results were observed with 24% EDTA, CA pH 1.0 and ACT applied for 90 seconds or 3 minutes.
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Influência do meio de conservação e efeito do tratamento de superfície na anquilose e na reabsorção de tecidos mineralizados após o reimplante de dentes avulsionados / Influence of the storage medium and effect of root surface treatment on ankylosis and resorption of mineralized tissues after tooth replantation

Longo, Daniele Lucca 03 July 2017 (has links)
O tratamento preconizado para dentes permanentes avulsionados devido a traumatismos dentários em crianças é o reimplante dental. Entretanto, sabe-se que o sucesso após o reimplante depende, especialmente, do tempo em que o dente permanece fora do alvéolo e do meio de conservação no qual o dente é armazenado. Nesse sentido, para que se tenha sucesso após o reimplante faz-se necessário que o dente seja imediatamente reimplantado e/ou seja mantido em um meio capaz de manter a vitalidade das células da superfície radicular. Se isso não for possível, o tratamento da superfície radicular deverá ser instituído com o objetivo de prevenir a reabsorção radicular. Dessa maneira, esta pesquisa teve como primeiro objetivo avaliar a influência de diferentes meios de conservação para dentes avulsionados, por meio de uma revisão sistemática, com a finalidade de estabelecer se há um consenso sobre o meio mais adequado para conservação capaz de prevenir sequelas como anquilose e reabsorção dentária. A seguir, o segundo objetivo desse estudo foi testar o Denosumab, um anticorpo monoclonal anti-RANKL, como substância para o tratamento tópico da superfície radicular, a fim de evitar a anquilose e a reabsorção dentária por substituição. Para tanto, foram utilizados 36 incisivos superiores direitos de ratos submetidos à extração cirúrgica, manutenção em meio extra-alveolar seco por 60 minutos e posterior reimplante. No grupo I, controle positivo, foi realizado o reimplante tardio sem tratamento de superfície; nos grupos II e III, grupos experimentais, previamente ao reimplante tardio foi realizado o tratamento da superfície radicular com solução de Denosumab a 60 mg/mL e a 30 mg/mL, respectivamente, por 10 minutos. Os canais radiculares dos animais dos três grupos foram preenchidos com pasta à base de hidróxido de cálcio, via retrógrada, e em seguida os dentes foram reimplantados. Decorridos 15 e 60 dias do reimplante, os animais foram submetidos à eutanásia e as peças, contendo dente e osso, foram removidas para o processamento histotécnico. A seguir cortes histológicos foram realizados, corados por hematoxilina e eosina (HE), para descrição das características da superfície dentária e do ligamento periodontal e para mensuração do comprimento (perímetro) da anquilose e/ou reabsorção por substituição e das áreas de reabsorção dentária, em microscopia de luz e, para mensuração da área do ligamento periodontal, em microscopia de fluorescência. Espécimes sequenciais foram analisados por meio de coloração de Brown & Brenn modificada para identificação de micro-organismos e imunohistoquímica para identificação dos marcadores RANKL, OPG e Periostina (PRT). As análises foram realizadas de forma descritiva e quantitativa. Dados quantitativos foram submetidos à analise estatística por meio do teste paramétrico ANOVA de uma via e pós-teste de Tukey e dos testes não-paramétricos de qui-quadrado e exato de Fisher, com nível de significância de 5%. Ao final da revisão sistemática da literatura pudemos concluir que não há evidência para estabelecer qual o melhor meio de conservação para dentes avulsionados. Dentre os meios que foram encontrados estão a água de coco, água da torneira, leite de soja, leite integral, solução salina, saliva, própolis, soro fisiológico, solução Euro-Collins, solução salina balanceada de Hanks (HBSS) e Viaspan®. Ainda que esta revisão tenha sido conduzida em modelo animal experimental, a baixa qualidade dos estudos bem como a sua heterogeneidade indicam que a extrapolação para humanos deva ser cautelosa. No estudo experimental em modelo animal, o tratamento de superfície com Denosumab a 60 mg/mL preveniu a anquilose, a reabsorção por substituição e a reabsorção dentária, após 60 dias, comparado com o grupo sem tratamento. A coloração de Brown & Brenn evidenciou uma menor contaminação nos tecidos mineralizados quando do tratamento de superfície com Denosumab, independente da concentração utilizada. Com relação à imunohistoquímica, o tratamento com Denosumab inibiu a síntese de RANKL sem modular OPG. A Periostina foi observada no ligamento periodontal dos dentes reimplantados. Porém, essa marcação estava ausente nas áreas de anquilose, em ambos os períodos experimentais, indicando que durante o processo de anquilose a síntese de periostina é inibida, o que resulta na fusão do osso à superfície radicular. / The treatment of choise for permanent dental avulsion is replantation. However, it is known that the success of the repair after replantation depend especially the extracellular and the storage medium in which is stored the tooth. Accordingly, in order to have success after replantation is necessary that the tooth is replanted immediately and/or to be kept in a medium capable of maintaining the cell´s vitality of the root surface. If that is not possible, treatment of the radicular surface should be done in order to prevent radicular resorption. Thus, the firstly aim was to perfom a systematic review to evaluate the in vivo effectiveness of different storage media for avulsed teeth. So, the second aim of this study is to test the substance as Denosumab, a monoclonal antibody, for the topical treatment of the root surface in order to prevent dental ankylosis and replacement resorption. For this, we used 36 rat incisors rights, extracted and replanted, and divided into: group I, positive control, delayed replantation without root surface treatment; groups II and III , experimental groups, delayed replantation without root surface treatmen with Denosumab 60 mg/mL and 30 mg/mL, respectively, for 10 minutes. The canals were filling with calcium hydroxide and the teeth were replanted. After periods of 15 and 60 days of the replantation, the animals will be euthanized. Then, samples are removed and processed for microscopic analysis. Histological sections were performed, stained with hematoxylin and eosin, to describe the characteristics of the dental surface and the periodontal ligament and to measure the length of ankylosis, replacement resorption and dental resorption by conventional microscopy, and for the measure the area of periodontal ligament, by fluorescence microscopy. Sequential specimens were analyzed by Brown & Brenn, for localization of bacteria; and markek by immunohistochemistryfor RANKL, OPG and Periostin (PRT). The analysis were displayed qualitatively or quantitatively. Data were subjected to statistical analysis by oneway ANOVA and the Tukey post-test and by chi-square and Fisher\'s exact tests. The significance level was set at 5%. The systematic review does not provide enough evidence to determine the best storage medium to achieve successful tooth replantation. This systematic review has identified many storage media that have been used to preserve avulsed teeth, including coconut water, tap water, soy milk, whole milk, saline solution, saliva, propolis, physiologic saline, Euro-Collins solution, HBSS, and Viaspan®. Although this review was conducted in an experimental animal model, a poor quality of the studies as well as their heterogeneity indicates that a human extrapolation should be cautious. In the experimental study in animal model, root surface treatment with Denosumab 60 mg/mL prevented ankylosis, replacement resorption, and tooth resorption, 60 days after replantation, compared with the untreated group. Brown & Brenn staining showed a lower contamination in the mineralized tissues in the Denosumab surface treatment group, regardless of the concentration used. As for immunohistochemistry, Denosumab inhibited the synthesis of RANKL without modulating OPG. Periostin was observed in periodontal ligament of tooth replanted. However, this labeling was absent in the ankylosis areas, in both experimental periods, indicating that during the ankylosis process, the periostin synthesis is inhibited, resulting in the fusion between bone and root surface.
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Aspectos metabólicos, nutricionais e produtivos de cultivares de Brachiaria e Panicum visando eficiência no uso do nitrogênio / Metabolic, nutritional and production aspects of Brachiaria and Panicum cultivars aiming nitrogen use efficiency

Garcez, Tiago Barreto 01 October 2013 (has links)
O melhor entendimento sobre os aspectos metabólicos, nutricionais e produtivos das gramíneas forrageiras quanto ao uso do nitrogênio é necessário para aumentar a eficiência de uso do nutriente e para a sustentabilidade da produção pecuária. Com isso, objetivou-se analisar alguns cultivares de gramíneas forrageiras utilizados em pastagens no Brasil, quanto a: I) modificações morfológicas e produtivas da parte aérea e das raízes; II) formas de partição do nitrogênio absorvido para melhorar a eficiência de uso do nitrogênio e III) forma de assimilação do nitrogênio absorvido, sendo avaliados pelas variáveis: produção de massa seca, números de folhas e perfilhos, área foliar, concentração e conteúdos de nitrogênio total, nitrato e amônio, eficiência de uso do nitrogênio, atividades das enzimas nitrato redutase e glutamina sintetase e concentração de aminoácidos livres totais na parte aérea e nas raízes dessas gramíneas, quando submetidas a alta e baixa dose de nitrogênio. Na baixa dose de nitrogênio os cultivares Marandu, Xaraés, Piatã, Basilisk e Mombaça mantiveram o número de perfilhos constante e diminuíram o número de folhas e a área foliar, enquanto o cultivar Tanzânia manteve o número de perfilhos e área foliar constantes e reduziu o número de folhas e os cultivares Aruana e Massai aumentaram o número de perfilhos e de folhas e reduziram a área foliar. A baixa dose de nitrogênio resultou em proporções da massa seca da parte aérea e das raízes distintas entre os cultivares quando comparada à alta dose de nitrogênio, favorecendo o crescimento das raízes. Os cultivares estudados modificaram a partição de nitrogênio, nitrato e amônio da parte aérea e raízes, quando em alto e baixo suprimento de nitrogênio. Essas diferenças refletiram na mais alta eficiência de uso do nitrogênio pelos cultivares Mombaça e Tanzânia. A assimilação do nitrato ocorreu principalmente na parte aérea desses capins. Os cultivares Mombaça e Aruana apresentaram elevadas atividades da enzima nitrato redutase nas folhas diagnósticas. A atividade da enzima glutamina sintetase nas folhas diagnósticas foi mais elevada nos cultivares de Panicum. A concentração de amônio nas raízes foi mais alta nos cultivares Piatã e Xaraés, na baixa dose de nitrogênio, e nos capins Aruana e Mombaça, na dose alta de nitrogênio. A concentração de aminoácidos totais nas folhas diagnósticas foi mais elevada nos cultivares de Panicum, quando submetidos à alta dose de nitrogênio, enquanto nas raízes foi maior nos cultivares de Brachiaria, nas duas doses de nitrogênio. / A better understanding of the metabolic, nutritional and production aspects of nitrogen use by grasses are needed to increase nutrient use efficiency and livestock production sustainability. Thus, this study aimed to analyze some forage grasses cultivars used in Brazilian pastures, for: i) morphological and production changes in shoots and roots; II) absorbed nitrogen partition to improve nitrogen use efficiency and III) nitrogen assimilation, evaluated by the variables: dry matter production, number of leaves and tillers, leaf area, concentration and content of total nitrogen, nitrate and ammonium, nitrogen use efficiency, nitrate reductase and glutamine synthetase activities and free amino acids concentration in shoots and roots of these grasses, when supplied with high and low nitrogen rates. At low nitrogen rate, Marandu, Xaraés, Piatã, Basilisk and Mombaça cultivars kept the number of tillers constant and decreased the number of leaves and leaf area, while Tanzânia cultivar kept the number of tillers and leaf area constant and reduced the number of leaves, and Aruana and Massai cultivars increased the number of tillers and leaves and reduced leaf area. The low nitrogen rate resulted in different shoots to roots proportions among cultivars when compared to the higher nitrogen rate, which favored roots growth. The cultivars changed the partition of nitrogen, nitrate and ammonium between roots and shoots, in both nitrogen rates. These differences reflect the higher nitrogen use efficiency by Mombaça and Tanzânia cultivars. The nitrate assimilation occurred mainly in the shoots of these grasses. Mombaça and Aruana cultivars showed high nitrate reductase activity in diagnostic leaves. The glutamine synthetase activity in diagnostic leaves was higher in Panicum cultivars. Ammonium concentration in the roots was high in Piatã and Xaraés, at low nitrogen rate, and Aruana and Mombaça grasses, at high nitrogen rate. The total amino acids concentration in diagnostic leaves was higher in Panicum cultivars than in Brachiaria cultivars, when high nitrogen rate was supplied, whereas Brachiaria cultivars had this concentration high in the roots, at the two nitrogen rates.
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Aspectos metabólicos, nutricionais e produtivos de cultivares de Brachiaria e Panicum visando eficiência no uso do nitrogênio / Metabolic, nutritional and production aspects of Brachiaria and Panicum cultivars aiming nitrogen use efficiency

Tiago Barreto Garcez 01 October 2013 (has links)
O melhor entendimento sobre os aspectos metabólicos, nutricionais e produtivos das gramíneas forrageiras quanto ao uso do nitrogênio é necessário para aumentar a eficiência de uso do nutriente e para a sustentabilidade da produção pecuária. Com isso, objetivou-se analisar alguns cultivares de gramíneas forrageiras utilizados em pastagens no Brasil, quanto a: I) modificações morfológicas e produtivas da parte aérea e das raízes; II) formas de partição do nitrogênio absorvido para melhorar a eficiência de uso do nitrogênio e III) forma de assimilação do nitrogênio absorvido, sendo avaliados pelas variáveis: produção de massa seca, números de folhas e perfilhos, área foliar, concentração e conteúdos de nitrogênio total, nitrato e amônio, eficiência de uso do nitrogênio, atividades das enzimas nitrato redutase e glutamina sintetase e concentração de aminoácidos livres totais na parte aérea e nas raízes dessas gramíneas, quando submetidas a alta e baixa dose de nitrogênio. Na baixa dose de nitrogênio os cultivares Marandu, Xaraés, Piatã, Basilisk e Mombaça mantiveram o número de perfilhos constante e diminuíram o número de folhas e a área foliar, enquanto o cultivar Tanzânia manteve o número de perfilhos e área foliar constantes e reduziu o número de folhas e os cultivares Aruana e Massai aumentaram o número de perfilhos e de folhas e reduziram a área foliar. A baixa dose de nitrogênio resultou em proporções da massa seca da parte aérea e das raízes distintas entre os cultivares quando comparada à alta dose de nitrogênio, favorecendo o crescimento das raízes. Os cultivares estudados modificaram a partição de nitrogênio, nitrato e amônio da parte aérea e raízes, quando em alto e baixo suprimento de nitrogênio. Essas diferenças refletiram na mais alta eficiência de uso do nitrogênio pelos cultivares Mombaça e Tanzânia. A assimilação do nitrato ocorreu principalmente na parte aérea desses capins. Os cultivares Mombaça e Aruana apresentaram elevadas atividades da enzima nitrato redutase nas folhas diagnósticas. A atividade da enzima glutamina sintetase nas folhas diagnósticas foi mais elevada nos cultivares de Panicum. A concentração de amônio nas raízes foi mais alta nos cultivares Piatã e Xaraés, na baixa dose de nitrogênio, e nos capins Aruana e Mombaça, na dose alta de nitrogênio. A concentração de aminoácidos totais nas folhas diagnósticas foi mais elevada nos cultivares de Panicum, quando submetidos à alta dose de nitrogênio, enquanto nas raízes foi maior nos cultivares de Brachiaria, nas duas doses de nitrogênio. / A better understanding of the metabolic, nutritional and production aspects of nitrogen use by grasses are needed to increase nutrient use efficiency and livestock production sustainability. Thus, this study aimed to analyze some forage grasses cultivars used in Brazilian pastures, for: i) morphological and production changes in shoots and roots; II) absorbed nitrogen partition to improve nitrogen use efficiency and III) nitrogen assimilation, evaluated by the variables: dry matter production, number of leaves and tillers, leaf area, concentration and content of total nitrogen, nitrate and ammonium, nitrogen use efficiency, nitrate reductase and glutamine synthetase activities and free amino acids concentration in shoots and roots of these grasses, when supplied with high and low nitrogen rates. At low nitrogen rate, Marandu, Xaraés, Piatã, Basilisk and Mombaça cultivars kept the number of tillers constant and decreased the number of leaves and leaf area, while Tanzânia cultivar kept the number of tillers and leaf area constant and reduced the number of leaves, and Aruana and Massai cultivars increased the number of tillers and leaves and reduced leaf area. The low nitrogen rate resulted in different shoots to roots proportions among cultivars when compared to the higher nitrogen rate, which favored roots growth. The cultivars changed the partition of nitrogen, nitrate and ammonium between roots and shoots, in both nitrogen rates. These differences reflect the higher nitrogen use efficiency by Mombaça and Tanzânia cultivars. The nitrate assimilation occurred mainly in the shoots of these grasses. Mombaça and Aruana cultivars showed high nitrate reductase activity in diagnostic leaves. The glutamine synthetase activity in diagnostic leaves was higher in Panicum cultivars. Ammonium concentration in the roots was high in Piatã and Xaraés, at low nitrogen rate, and Aruana and Mombaça grasses, at high nitrogen rate. The total amino acids concentration in diagnostic leaves was higher in Panicum cultivars than in Brachiaria cultivars, when high nitrogen rate was supplied, whereas Brachiaria cultivars had this concentration high in the roots, at the two nitrogen rates.
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Influência do meio de conservação e efeito do tratamento de superfície na anquilose e na reabsorção de tecidos mineralizados após o reimplante de dentes avulsionados / Influence of the storage medium and effect of root surface treatment on ankylosis and resorption of mineralized tissues after tooth replantation

Daniele Lucca Longo 03 July 2017 (has links)
O tratamento preconizado para dentes permanentes avulsionados devido a traumatismos dentários em crianças é o reimplante dental. Entretanto, sabe-se que o sucesso após o reimplante depende, especialmente, do tempo em que o dente permanece fora do alvéolo e do meio de conservação no qual o dente é armazenado. Nesse sentido, para que se tenha sucesso após o reimplante faz-se necessário que o dente seja imediatamente reimplantado e/ou seja mantido em um meio capaz de manter a vitalidade das células da superfície radicular. Se isso não for possível, o tratamento da superfície radicular deverá ser instituído com o objetivo de prevenir a reabsorção radicular. Dessa maneira, esta pesquisa teve como primeiro objetivo avaliar a influência de diferentes meios de conservação para dentes avulsionados, por meio de uma revisão sistemática, com a finalidade de estabelecer se há um consenso sobre o meio mais adequado para conservação capaz de prevenir sequelas como anquilose e reabsorção dentária. A seguir, o segundo objetivo desse estudo foi testar o Denosumab, um anticorpo monoclonal anti-RANKL, como substância para o tratamento tópico da superfície radicular, a fim de evitar a anquilose e a reabsorção dentária por substituição. Para tanto, foram utilizados 36 incisivos superiores direitos de ratos submetidos à extração cirúrgica, manutenção em meio extra-alveolar seco por 60 minutos e posterior reimplante. No grupo I, controle positivo, foi realizado o reimplante tardio sem tratamento de superfície; nos grupos II e III, grupos experimentais, previamente ao reimplante tardio foi realizado o tratamento da superfície radicular com solução de Denosumab a 60 mg/mL e a 30 mg/mL, respectivamente, por 10 minutos. Os canais radiculares dos animais dos três grupos foram preenchidos com pasta à base de hidróxido de cálcio, via retrógrada, e em seguida os dentes foram reimplantados. Decorridos 15 e 60 dias do reimplante, os animais foram submetidos à eutanásia e as peças, contendo dente e osso, foram removidas para o processamento histotécnico. A seguir cortes histológicos foram realizados, corados por hematoxilina e eosina (HE), para descrição das características da superfície dentária e do ligamento periodontal e para mensuração do comprimento (perímetro) da anquilose e/ou reabsorção por substituição e das áreas de reabsorção dentária, em microscopia de luz e, para mensuração da área do ligamento periodontal, em microscopia de fluorescência. Espécimes sequenciais foram analisados por meio de coloração de Brown & Brenn modificada para identificação de micro-organismos e imunohistoquímica para identificação dos marcadores RANKL, OPG e Periostina (PRT). As análises foram realizadas de forma descritiva e quantitativa. Dados quantitativos foram submetidos à analise estatística por meio do teste paramétrico ANOVA de uma via e pós-teste de Tukey e dos testes não-paramétricos de qui-quadrado e exato de Fisher, com nível de significância de 5%. Ao final da revisão sistemática da literatura pudemos concluir que não há evidência para estabelecer qual o melhor meio de conservação para dentes avulsionados. Dentre os meios que foram encontrados estão a água de coco, água da torneira, leite de soja, leite integral, solução salina, saliva, própolis, soro fisiológico, solução Euro-Collins, solução salina balanceada de Hanks (HBSS) e Viaspan®. Ainda que esta revisão tenha sido conduzida em modelo animal experimental, a baixa qualidade dos estudos bem como a sua heterogeneidade indicam que a extrapolação para humanos deva ser cautelosa. No estudo experimental em modelo animal, o tratamento de superfície com Denosumab a 60 mg/mL preveniu a anquilose, a reabsorção por substituição e a reabsorção dentária, após 60 dias, comparado com o grupo sem tratamento. A coloração de Brown & Brenn evidenciou uma menor contaminação nos tecidos mineralizados quando do tratamento de superfície com Denosumab, independente da concentração utilizada. Com relação à imunohistoquímica, o tratamento com Denosumab inibiu a síntese de RANKL sem modular OPG. A Periostina foi observada no ligamento periodontal dos dentes reimplantados. Porém, essa marcação estava ausente nas áreas de anquilose, em ambos os períodos experimentais, indicando que durante o processo de anquilose a síntese de periostina é inibida, o que resulta na fusão do osso à superfície radicular. / The treatment of choise for permanent dental avulsion is replantation. However, it is known that the success of the repair after replantation depend especially the extracellular and the storage medium in which is stored the tooth. Accordingly, in order to have success after replantation is necessary that the tooth is replanted immediately and/or to be kept in a medium capable of maintaining the cell´s vitality of the root surface. If that is not possible, treatment of the radicular surface should be done in order to prevent radicular resorption. Thus, the firstly aim was to perfom a systematic review to evaluate the in vivo effectiveness of different storage media for avulsed teeth. So, the second aim of this study is to test the substance as Denosumab, a monoclonal antibody, for the topical treatment of the root surface in order to prevent dental ankylosis and replacement resorption. For this, we used 36 rat incisors rights, extracted and replanted, and divided into: group I, positive control, delayed replantation without root surface treatment; groups II and III , experimental groups, delayed replantation without root surface treatmen with Denosumab 60 mg/mL and 30 mg/mL, respectively, for 10 minutes. The canals were filling with calcium hydroxide and the teeth were replanted. After periods of 15 and 60 days of the replantation, the animals will be euthanized. Then, samples are removed and processed for microscopic analysis. Histological sections were performed, stained with hematoxylin and eosin, to describe the characteristics of the dental surface and the periodontal ligament and to measure the length of ankylosis, replacement resorption and dental resorption by conventional microscopy, and for the measure the area of periodontal ligament, by fluorescence microscopy. Sequential specimens were analyzed by Brown & Brenn, for localization of bacteria; and markek by immunohistochemistryfor RANKL, OPG and Periostin (PRT). The analysis were displayed qualitatively or quantitatively. Data were subjected to statistical analysis by oneway ANOVA and the Tukey post-test and by chi-square and Fisher\'s exact tests. The significance level was set at 5%. The systematic review does not provide enough evidence to determine the best storage medium to achieve successful tooth replantation. This systematic review has identified many storage media that have been used to preserve avulsed teeth, including coconut water, tap water, soy milk, whole milk, saline solution, saliva, propolis, physiologic saline, Euro-Collins solution, HBSS, and Viaspan®. Although this review was conducted in an experimental animal model, a poor quality of the studies as well as their heterogeneity indicates that a human extrapolation should be cautious. In the experimental study in animal model, root surface treatment with Denosumab 60 mg/mL prevented ankylosis, replacement resorption, and tooth resorption, 60 days after replantation, compared with the untreated group. Brown & Brenn staining showed a lower contamination in the mineralized tissues in the Denosumab surface treatment group, regardless of the concentration used. As for immunohistochemistry, Denosumab inhibited the synthesis of RANKL without modulating OPG. Periostin was observed in periodontal ligament of tooth replanted. However, this labeling was absent in the ankylosis areas, in both experimental periods, indicating that during the ankylosis process, the periostin synthesis is inhibited, resulting in the fusion between bone and root surface.

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