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Estudos fotofísicos e fotobiológicos da ftalocianina NzPc e de nanotubos de carbono aplicáveis a processos fotodinâmicos / Studies of photophysical and photobiological of the NzPc phthalocyanine and carbon nanotubes used for photodynamic processes.Vaccari, Carolina Bortolatti 06 October 2011 (has links)
O câncer de pele, no Brasil, é responsavel por 25% de todos os tipos de câncer. Uma alternativa aos tratamentos usuais é a Terapia Fotodinâmica (TFD). Os processos fotodinâmicos em geral dependem da retenção de um composto fotossensível nos tecidos alvos e posterior irradiação com luz visível em comprimento de onda adequado. Após ativação, o fármaco tranfere energia para outras moléculas do meio, podendo gerar espécies como o oxigênio singlete (1O2) , radicais livres (O2,OH) e outras espécies reativas de oxigênio (EROs), essas, são responsáveis pelo processo fotooxidativo e indução da morte celular. Neste trabalho, o fármaco fotossensível NzPc (uma ftalocianina) foi estudado para verificar se suas características fotofísicas e fotoquímicas são adequadas a TFD, e, em seguida, foi associado a nanotubos de carbono de parede múltipla (NTCPM) funcionalizados com o tensoativo Pluronic F-127. Esse sistema de liberação de fármaco desenvolvido, foi caracterizado através de ensaios in vitro nas linhagens de melanoma de rato B16-F10 e carcinoma humano OSCC . O sistema NzPc/NTCPM/PF-127 apresentou atividade fotodinâmica superior ao fármaco na forma livre, possibilitando, maior interiorização do fármaco nas linhagens celulares e maior morte celular após irradiação. / Skin cancer in Brazil are responsible for 25% of all cancers. An alternative to the usual treatments is photodynamic therapy (PDT). Photodynamic processes in general depend on the retention of a photosensitive compound in target tissues and subsequent irradiation with visible light at an appropriate wavelength. After activation, the drug, transfer energy to other molecules of the medium, which can generate species reactivate such as singlet oxygen (1O2), free radicals (O2 , OH) and other reactive oxygen species (ROS), these are responsible for photo-oxidative process and induction of cell death. In this work, NzPc photosensitive drug (a phthalocyanine) was studied to see if their photophysical and photochemical characteristics are suitable for PDT, and then was associated with multi-walled carbon nanotubes (MWCNT) functionalized with surfactant Pluronic F-127. This drug delivery system developed was characterized by in vitro assay on strains of mouse melanoma B16-F10 and carcinoma human OSCC. The system presented NzPc/NTCPM/PF-127 photodynamic activity than the drug in the free form, enabling greater internalization of the drug in cell and increased cell death after irradiation.
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Inativação dos micro-organismos causadores da onicomicose por terapia fotodinâmica - estudo in vitro e clínico / Photodynamic inactivation of micro-organisms causing onychomycosis - clinical and in vitro studySilva, Ana Paula da 20 February 2013 (has links)
A onicomicose é a mais frequente das doenças ungueais, pode ser causada por dermatófitos, leveduras e fungos não-dermatófitos. A infecção caracteriza-se por unhas quebradiças, espessadas e despigmentadas ou com excesso de pigmentação. O tratamento convencional consiste na administração sistêmica de antifúngicos e antibióticos por longos períodos, podendo ser o responsável pelo aumento de linhagens microbianas resistentes às drogas disponíveis. Esse fator associado a alta incidência deste tipo de infecção na população tornam importante o desenvolvimento de novas tecnologias e opções terapêuticas. Esta dissertação está composta por duas partes: pesquisa básica (estudos in vitro) e aplicada (estudo clínico), além do desenvolvimento de equipamento para o tratamento da onicomicose por Terapia Fotodinâmica (TFD). A TFD consiste no emprego do fotossensibilizador (FS) ativado por luz em comprimento de onda adequado que, na presença de oxigênio, produz espécies reativas de oxigênio tóxicas que inativam as células alvo (fungos e bactérias). Nos ensaios in vitro, utilizamos um dos principais fungos causadores da onicomicose, o Trychophyton mentagrophytes e dois fotossensibilizadores diferentes: Solução de curcuminóides (PDTPharma Ltda., Cravinhos-SP, Brasil) e Photogem® (Limited Liability Company Photogem, Moscou, Rússia), onde analisamos por microscopia confocal o tempo de incubação dos fotossensibilizadores nos fungos e a viabilidade celular dos micro-organismos para os diversos parâmetros avaliados. Para os estudos clínicos, foram desenvolvidos dois equipamentos emissores de luz em comprimentos de onda distintos: em 630 nm, para o Photogem®, e em 470 nm, para a curcumina. Estes foram desenvolvidos no IFSC (Grupo de Óptica, Laboratório de Apoio Tecnológico) e consiste em diodos emissores de luz (LED) acoplados em presilhas anatomicamente desenhadas para as unhas dos pés e das mãos. Foram tratados 90 pacientes divididos em dois grupos, diferenciados pelo fotossensibilizador tópico utilizado: Photogem® (1 mg/mL) ou curcumina (1.5 mg/mL). Após 1 hora a presença do fotossensibilizador foi confirmada por imagem de fluorescência e o local iluminado por 20 minutos (fluência de 120 J/cm2). Nova avaliação clínica foi realizada após sete dias e o acompanhamento do tratamento foi realizado tanto por imagens, quanto por exames laboratoriais. Observou-se a cura de 63 pacientes com uma média de seis meses de tratamento. Em comparação aos tratamentos convencionais, a TFD apresenta resultados mais rápidos, sem recidivas. Além disso, aspectos como o baixo custo da instrumentação envolvida, a possibilidade de tratamento local ao invés de sistêmico e a simplicidade de operação são fatores relevantes para a garantia da implantação dessa tecnologia no tratamento de um problema de saúde de ampla incidência. O protótipo utilizado durante o estudo resultou em patente que se tornou ainda alvo de interesse comercial por uma empresa nacional, juntamente com uma das medicações testadas. Com os resultados obtidos, foi possível concluir que a TFD possui potencial para se tornar uma importante ferramenta no tratamento da onicomicose. / Onychomycosis is the most common nail diseases may be caused by dermatophytes, yeasts and non-dermatophyte fungi. The infection is characterized by brittle nails, thickened and pigmented or pigmented with excess. Conventional treatment consists of systemic administration of antifungals and antibiotics for long periods and may be responsible for the increased microbial strains resistant to available drugs. This factor associated with high incidence of this type of infection in the population become important to develop new technologies and treatment options. This dissertation is composed of two parts: basic research (in vitro studies) and applied (clinical study), and the development of equipment for the treatment of onychomycosis Photodynamic Therapy (PDT). The PDT is the use of photosensitizer (FS) activated by light at a wavelength appropriate that, in the presence of oxygen, produces reactive oxygen species that inactivate toxic target cells (fungi and bacteria). In vitro, we used one of the main causative fungi of onychomycosis, Trichophyton mentagrophytes and the two different photosensitizers: Solution of curcuminoids (PDTPharma Ltda., Cravinhos-SP, Brazil) and Photogem® (Photogem Limited Liability Company, Moscow, Russia) where analyzed by confocal microscopy incubation time of photosensitizers in fungi and cell viability of micro-organisms for the various parameters. For clinical studies, we developed two light emitting devices in distinct wavelengths: 630 nm, for Photogem®, and 470 nm for curcumin. These were developed in the IFSC (Optics Group, Laboratory Technology Support) and consists of light emitting diodes (LED) coupled cleats anatomically designed for toenails and hands. Were treated 90 patients divided into two groups differentiated by topical photosensitizer used: Photogem® (1 mg/ml) or curcumin (1.5 mg/mL). After 1 hour the presence of the photosensitizer was confirmed by fluorescence image and bright place for 20 minutes (fluence of 120 J/cm2). New clinical evaluation was performed after seven days of treatment and follow-up was conducted by both images, as per laboratory. It was observed healing of 63 patients with an average of six months of treatment. Compared to conventional treatments, PDT offers faster results without recurrence. Moreover, aspects such as the low cost of instrumentation involved, the possibility of local treatment rather than systemic and simplicity of operation are important factors for ensuring the implementation of this technology in the treatment of a health problem of widespread impact. The prototype used during the study resulted in patent that became even target of interest for a national company, along with one of the drugs tested. With these results, we concluded that PDT has the potential to become an important tool in the treatment of onychomycosis.
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Sintese e avaliação como fotossensibilizadores de novos triazoil-fulerenos funcionalizados com AZT e com calcogenos derivados de AZT / Synthesis and evaluation as photosensitizer of new triazoil-fullerenes functionalized with AZT and chalcogen derivatives of AZTRavanello, Bruno Brisólla 07 August 2014 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Herein we report the synthesis of a new class of AZT-functionalized fullerenes. The synthetic strategic furnished the desired products in few reactional steps, in a convergent manner, in yields ranging from 22 to 43 %.
Studies of reaction conditions were also performed. Time, temperature, catalyst adding and solvents, involved in the main step of the synthesis were optimized.
The target molecules were evaluated as photosensitizers for use in photodynamic therapy. The generation of singlet oxigen were confirmed using the singlet oxigen scavenger DPBF (1,3-diphenylisobenzofuran). Analysing the decay of the absorbance of DPBF at 418 nm, it was possible to measure the generation of singlet oxygen (1O2). In this context, the respective compounds showed a potential ability of 1O2 generation, demonstrating a prominent application of these molecules as photosensitizer / O presente trabalho apresenta a síntese de uma nova classe de fulerenos funcionalizados, derivados do AZT e de calcogenos derivados de AZT. A estratégia sintética adotada permitiu a obtenção dos compostos desejados em poucas etapas reacionais de maneira convergente, com rendimentos que variaram entre 22 e 43%. Também realizou-se o estudo de algumas condições reacionais, tais como tempo, temperatura, catalisadores e solventes, visando uma otimização abrangente para a etapa chave da rota proposta. Avaliaram-se os compostos obtidos como fotossensibilizadores para possível uso em terapia fotodinâmica, através da análise de geração de oxigênio singleto dos fulerenos funcionalizados sintetizados. Para este teste, usou-se o reagente DPBF (1,3-Difenil-isobenzofurano) como captador de oxigênio singleto e mediu-se o decaimento da absorbância do DBPF no comprimento de onda de 418 nm. Neste contexto, os fulerenos obtidos apresentaram uma potencial capacidade de geração de oxigênio singleto, demonstrando a possibilidade de emprego destes compostos como fotossensibilizadores.
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Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (TFDa) Associada ou não a Fototerapia LASER em Osteomielite Induzida por Staphylococcus aureus: Estudo Microbiológico e HistológicoReis Júnior, João Alves dos 12 February 2014 (has links)
Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-05-02T14:01:13Z
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Tese_ODONTO_João Alves dos Reis Júnior.pdf: 925805 bytes, checksum: 0bcef2c8c9a48fca7b38fa65514614a1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-06T13:17:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Tese_ODONTO_João Alves dos Reis Júnior.pdf: 925805 bytes, checksum: 0bcef2c8c9a48fca7b38fa65514614a1 (MD5) / CAPES / Osteomielite é um processo inflamatório agudo ou crônico nos espaços medulares
ou nas superfícies corticais do osso e pode estar associado com infecções
bacterianas ou fúngicas. A Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (TFDa) a laser é
um tratamento baseado na reação fotoquímica citotóxica que resulta em uma série
de reações metabólicas que culminam na morte bacteriana. O objetivo do presente
estudo randomizado foi avaliar, in vitro e in vivo, através de análise microbiológica
e histológica, os efeitos da TFDa em defeitos ósseos cirúrgicos em tíbias de ratos
infectados por Staphylococcus aureus com tempo de observação de 0 e 30 dias
após o tratamento. No estudo in vitro, um laser de diodo (λ660 nm; 40 mW; Ø =
0,04 cm², 5 ou 10 J/cm²) e concentrações de 5, 10 e 15 μg/mL do Azul de Toluidina
foram testados e o melhor parâmetro escolhido para o estudo in vivo. A
concentração de 5 μg/mL foi escolhida para realizar a descontaminação da
infecção por Staphylococcus aureus nos defeitos ósseos. Nos grupos tratados com
Fototerapia utilizou-se o laser (λ = 780 nm, P = 70 mW, CW, 16,8 J/cm2 por sessão,
t= 240s, divididos em quatro pontos NSLO de 4,2 J/cm2, 134,4 J/cm2 por
tratamento). Os protocolos de irradiação foram realizados a cada 48 horas durante
15 dias. Os resultados foram submetidos à análise estatística. Para todos os
grupos TFDas do estudo microbiológico in vitro, houve redução significativa (p <
0,001) na quantidade de bactérias com as diferentes concentrações do
fotossensibilizador. No estudo microbiológico in vivo, no tempo 0, o grupo TFDa
apresentou redução bacteriana de 97,4 % (p < 0,001). Já no tempo de observação
de 30 dias, observou-se redução bacteriana de mais de 99,9% (p < 0,001). No
estudo histológico, observou-se que os grupos tratados com TFDa demonstraram
presença intensa de osteócitos e ausência de sequestro ósseo e de micro
abscessos. A TFDa com azul de toluidina foi eficaz na redução da contagem de
Staphylococcus aureus possibilitando um reparo ósseo de melhor qualidade.
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Síntese e funcionalização de nitrosilo complexos de rutênio do tipo cis-[Ru(bpy)2(L)NO] em nanopartículas metálicas / Synthesis and functionalization of the nitrosyl ruthenium cis-[Ru(bpy)2(L)NO] type in metallic nanoparticlesPereira, Walysson Gomes January 2013 (has links)
PEREIRA, Walysson Gomes. Síntese e funcionalização de nitrosilo complexos de rutênio do tipo cis-[Ru(bpy)2(L)NO] em nanopartículas metálicas. 2016. 94 f. Dissertação (Mestrado em Química)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Aline Mendes (alinemendes.ufc@gmail.com) on 2016-12-27T20:35:17Z
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Previous issue date: 2013 / In the present work was carried out the synthesis nitrosyl complex ruthenium cis-[Ru(bpy)2(L) NO]n+, where L = sulfite or 1,4-dithiane. The synthesis of complexes made with the aim of studying the interaction of the compounds with metal nanoparticles. The nitrosyl complex induces the irreversible aggregation of both AgNPs as AuNPs, suggesting the interaction of the compounds with the surface of the nanoparticle by adsorption via a sulfur bonding and/ or electrostatic interaction. It was found that, among the nitrosyl complexes used only cis-[Ru (bpy)2(1,4-dt )NO] 3+ interacts with silver nanoparticles protected by galactomannan, thus indicating the functionalization of the surface of the nanoparticles by nitrosyl complex via the sulfur atom. It is evident the increase in amount of NO released from the complex anchored nanoparticles when compared to the free compound. This indicates a contribution of the SPR ban of GFD-NPsAg in the photorelease of NO from nitrosyl studied complex. / No presente trabalho foi realizada a síntese de nitrosilo complexos de rutênio do tipo cis-[Ru(bpy)2(L)NO]n+, onde L = sulfito ou 1,4-ditiano. A síntese dos complexos se deu com o objetivo de estudar a interação dos compostos com nanopartículas metálicas, de prata e de ouro. Os nitrosilo complexos induzem a agregação irreversível tanto de NPsAg quanto de NPsAu, sugerindo a interação dos compostos com a superfície das nanopartículas, por adsorção via átomo de enxofre e/ou atração eletrostática. Foi verificado que, dentre os nitrosilo complexos utilizados, apenas o cis-[Ru(bpy)2(1,4-dt)NO]3+ interage com as nanopartículas de prata protegidas por galactomanana, indicando assim a funcionalização da superfície das nanopartículas pelo nitrosilo complexo via átomo de enxofre. É evidenciado o aumento da quantidade de NO liberado a partir do complexo ancorado as nanopartículas quando comparado ao complexo livre. Este fato indica uma contribuição da banda de SPR das GFD-NPsAg na fotoliberação do NO a partir do nitrosilo complexo estudado.
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Ensaio clínico para a avaliação da segurança e eficácia da terapia fotodinâmica mediada por nanoemulsão de al-cl-ftalocianina no tratamento do carcinoma basocelular de peleAlbuquerque, Itajaí Oliveira de 30 June 2017 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Biologia, Programa de Pós-Graduação em Nanociências e Nanobiotecnologia, 2017. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-08-11T13:08:29Z
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Previous issue date: 2017-09-20 / As estatísticas globais mostraram aumento progressivo da incidência de câncer de pele em diversos países. A exposição cumulativa à radiação solar (ultravioleta B) nas duas primeiras décadas da vida representa fator de risco crítico para o desenvolvimento da doença. O carcinoma basocelular (CBC) é uma neoplasia com origem na derme profunda. TFD demonstra potencial inovador para tratar pacientes diagnosticados com CBC que têm contra-indicações para outras modalidades terapêuticas e que estão de acordo com os riscos de recorrência relacionados ao tratamento. Para melhor avaliar como a TFD modifica o histórico natural do CBC, é necessário realizar ensaios controlados randomizados avaliem não apenas a efetividade imediata dos protocolos, mas seus efeitos a longo prazo em termos de resposta terapêutica completa, de modo a gerar melhores evidências que orientem a prática clínica. Para responder a essas questões, foi desenhado um ensaio clínico fase II, aberto, com TFD combinada a nanoemulsão de Alumínio-Cloro Ftalocianina (TFD-AlClFc-N). A pesquisa foi projetada com dois braços de intervenções, um primeiro para definir a melhor dose - resposta patológica do CBC (30 pacientes) e um segundo para avaliar a não inferioridade da TFD em comparação ao tratamento cirúrgico, com 120 sujeitos de pesquisa. Durante a realização da primeira parte do ensaio, foi observado que a nanoemulsão de AlClFc a 10 μM apresentou permeação cutânea inadequada, observando-se histologicamente a não remissão dos tumores. / Basal Cell Carcinoma (BCC) is an epithelial neoplasm with origin in the deep dermis. Global statistics have shown the progressive increase in the incidence of skin cancer in several countries. The cumulative exposure to solar radiation (ultraviolet B) in the first two decades of the lifetime represents the critical risk for the development of the disease. TFD demonstrates innovative potential for treat patients diagnosed with BCC who may prefer best cosmetic results or have contraindications to others therapeutic modalities, which are in accordance with the risks of recurrence. Although, in order to better evaluate how TFD modify the natural history of BCC it is necessary to perform randomized controlled trials which should assess not only the immediate effectiveness of the protocols but their long-term effects in terms of complete therapeutic response, in order to generate the best evidence to guide the clinical practice. To answer these questions, it was designed a clinical trial phase II, open label, with PDT combined to a nanoemulsion of Aluminum-Chloride Phthalocyanine (PDT-AlClFc-N) to treat Superficial Basal Cell Carcinoma clinical and histologically diagnosed. The research was designed with two arms of intervention, one to define the best dose to achieve a complete pathologic answer of sBCC (30 patients) and a second branch to evaluate the non-inferiority of TFD when compared to surgery treatment (130 patients). The second arm would be a non-inferiority study to compare PDT to surgery with 120 patients. During the realization of the first part of research, it was observed the nanoemulsion of AlClFc 10 μM was not absorbed, with no histologically remission of the tumors and the trial was cancelled for ethical reasons.
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Terapia fotodinâmica com nanoemulsão de AlumínioCloroFtalocianina para tratamento de onicomicose – estudo clínicoMorgado, Luciano Ferreira 09 June 2016 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Nanociência e Nanobiotecnologia, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-07-13T16:31:13Z
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2016_LucianoFerreiraMorgado.pdf: 1304438 bytes, checksum: 6ef8146f6954febd010ffeba432e4c7b (MD5) / A onicomicose é uma das patologias mais comuns do aparelho ungueal, com uma prevalência populacional de até 30%, resultando em danos estéticos e funcionais, facilitando o encravamento da unha e predispondo a infecções bacterianas secundárias. O seu tratamento padrão envolve o uso prolongado de medicações tópicas e antifúngicos sistêmicos, que apresentam potencial de hepatotoxicidade, além de várias possibilidades de interações medicamentosas. Dessa forma, a investigação de novas terapias locais eficazes é de extrema relevância. Entre estas terapias, destaca-se a Terapia Fotodinâmica (TFD), que se baseia na aplicação de um fármaco fotossensibilizador (FS), com posterior irradiação com uma luz de comprimento de onda específico. Consequentemente, ocorre uma ativação do FS, com transferência de energia ao oxigênio molecular e geração de espécies reativas de oxigênio (ROS), que reagem com as estruturas celulares adjacentes, promovendo a morte das células alvo. Neste trabalho realizamos o tratamento com TFD em 18 pacientes com um FS de segunda geração, a AlumínioCloroFtalocianina (AlClFt), associada a um carreador nanoestruturado (nanoemulsão), de forma a aumentar a penetração e dispersão do FS nos tecidos ungueais. As sessões foram realizadas a cada duas semanas, com um tempo de oclusão do FS de 15 minutos, e irradiação com LED (660 nm), a 51,5 mW/cm2, por 10 minutos, a 10 cm das unhas afetadas. Os pacientes foram tratados previamente com uréia a 40% por 7 dias. Obtivemos uma taxa de cura clínica ou micológica de 63,6% e com melhora entre 70 e 90% das unhas afetadas na maioria dos pacientes não completamente curados, com o número de sessões realizadas variando entre 3 e 7. Percebeu-se também, durante o estudo, uma tendência à cura clínica na maioria dos pacientes, com o aumento do número de sessões realizadas. Entre as vantagens do uso da AlClFt como FS podemos citar o menor tempo de oclusão necessário (15 minutos) em relação aos derivados porfirínicos (1-3 horas), com uma razoável taxa de cura com não muitas sessões. Todavia, observamos uma taxa de recidiva de até 42,8%, o que justifica adaptações no protocolo como forma de aumentar o efeito fungicida do tratamento e melhorar ainda mais a penetração do FS na lâmina ungueal. Entre estas adaptações, podemos citar a possibilidade de associação de agentes antifúngicos tópicos durante o tratamento e modificações no veículo nanoestruturado carreador, visando maior penetração nos tecidos ungueais. ______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Onychomycosis is one of the most common conditions of the nail unit, with a population prevalence of 30%, resulting in damage aesthetic and functional, facilitating the locking of the nail and predisposing to secondary bacterial infections. Your standard treatment involves prolonged use of topical medications and systemic antifungal drugs that have the potential for hepatotoxicity, as well as several potential drug interactions. Thus, research into new effective local therapies is extremely important. Among these therapies, there is photodynamic therapy, which relies on the application of photosensitizing drugs (FS), with subsequent irradiation with light of a specific wavelength. Consequently, there is an activation of the photosensitizer with energy transfer to molecular oxygen and generation of reactive oxygen species (ROS), which react with the adjacent cell structures, promoting the death of the target cells. In this work, we conducted treatment with photodynamic therapy of 18 patients with a second generation photosensitizer, the aluminumchloridephthalocyanine (AlClPc) associated with a nanostructured carrier (nanoemulsion) in order to increase the FS penetration of the nail tissue. The sessions were held every two weeks with an FS occlusion time of 15 minutes and irradiation with 660 nm LED, intensity of 51,5 mW/cm2, for 10 minutes, at 10 cm from the affected nails. Patients were pre-treated with urea at 40% for 7 days. We obtained a clinic or mycological cure rate of 63.6% and improvement of 70 to 90% of the affected nails in most patients not fully cured. The number of sessions was from 3 to 7. It was also noticed during study, a trend towards clinical cure in many patients, with increased number of sessions. Among the advantages of using AlClFt as FS we can quote the lowest necessary occlusion time (15 minutes) compared to the porphyrin derivatives (1-3 hours) with a reasonable cure rate with not many sessions. However, we observed a recurrence rate of up to 42.8%, which justifies adjustments to the protocol in order to increase the fungicidal effect of the treatment and further improve the penetration of the FS in the nail plate. Among these changes, we can mention the possibility of association of antifungal topical agents for the treatment and changes in vehicle nanostructured carrier, seeking greater penetration in nail tissues.
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Hipericina, Photodithazine e Photogem: um estudo comparativo da atividade fotodinâmica / Hypericin, Photodithazine e Photogem: a comparative study of the photodynamic activityClaudia Bernal 19 April 2011 (has links)
A Terapia Fotodinâmica (TFP) é uma técnica para tratamento de câncer que usa um fotossensibilizador (FS) na presença de luz e oxigênio gerando espécies altamente reativas de oxigênio que levam as células tumorais à morte. <br />Neste trabalho foi realizado um estudo comparativo com três FSs: Photogem® (PG), um derivado de hematoporfirina que está sendo usado em TFD no Brasil; Photodithazine® (PZ), um derivado hidrossolúvel de mono-L-aspartil clorina, que está na fase clínica para aprovação e Hipericina (HY), um pigmento fotoativo encontrado na planta Hypericum perforatum e usado na medicina popular que está sendo considerado como um promissor agente fotodinâmico para o tratamento de tumores. Este estudo utilizou uma Hipericina sintetizada no Brasil e diversos parâmetros para comparar os três FSs: a concentração inibitória média (IC50) em linhagens celulares; a constante de velocidade de fotoxidação da albumina de soro bovino na presença dos FSs e luz determinada pelo decréscimo na fluorescência da BSA em 340 nm; a fotoxidação do ácido úrico acompanhada pelo decréscimo da banda característica do ácido úrico em 290 nm após irradiação na presença dos FSs como uma estimativa indireta do rendimento quântico de formação de oxigênio singlete (ΔΦ); o rendimento quântico de fluorescência utilizando rodamina B como padrão; a acumulação dos FSs em células em função do tempo de incubação e a estimativa da quantidade de radicais livres formados após irradiação através da técnica de captura de spins. Todos os resultados obtidos evidenciam uma maior eficiência fotodinâmica da HY seguida pelo PZ e depois por Photogem e, portanto sugerem a Hipericina como o FS de maior potencial para utilização em Terapia Fotodinâmica. / Photodynamic Therapy (PDT) is a technique for the cancer treatment that uses a photosensitizer (FS) in the presence of light and oxygen which combined are able to generate highly reactive oxygen species that lead to tumor cells death. <br />In this investigation, a comparative study with three FSs: Photogem ® (PG), a hematoporphyrin derivative being used in PDT in Brazil; Photodithazine ® (PZ), a soluble derivative of mono-L-aspartyl chlorin, which is in clinical phase for approval and Hypericin (HY), a photoactive pigment found in the plant Hypericum perforatum and used in popular medicine that is being considered as a promising agent for photodynamic treatment of tumors. The present study used a Hypericin synthesized in Brazil and several parameters to compare these three FSs: the mean inhibitory concentration (IC50) in cell lines; the rate constant for the photooxidation of bovine serum albumin in the presence of light and the FSs determined by the decrease in the fluorescence of BSA at 340 nm; the photooxidation of uric acid assessed by the decrease of the characteristic band of uric acid at 290 nm after irradiation in the presence of the FSs as an indirect estimate of the quantum yield of formation of singlet oxygen (ΔΦ); the quantum yield of fluorescence using rhodamine B as a standard; the accumulation of FSs in cells as a function of the incubation time, and the estimative of the produced free radicals after irradiation by the technique of spin trapping. All the results show a higher photodynamic efficiency of HY followed by PZ and then by Photogem suggesting Hypericin as the FS with the greatest potential for use in Photodynamic Therapy.
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Efeitos da terapia fotodinâmica sobre cepas de Candida isoladas de pacientes submetidos à antibioticoterapia prolongadaMajewski, Marta [UNESP] 16 June 2008 (has links) (PDF)
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majewski_m_me_sjc.pdf: 226691 bytes, checksum: bf111426017106bfa273c02fafa52492 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da terapia fotodinâmica, utilizando-se os fotossensibilizadores azul de metileno e azuleno associados ao laser em baixa intensidade, sobre cepas de Candida isoladas da cavidade bucal humana. Foram estudadas 20 cepas de Candida, sendo 5 C. albicans, 4 C. tropicalis, 4 C. glabrata, 2 C. parapsilosis, 2 C. kefyr, 1 C. krusei, 1 C. stellatoidea e 1 C. lipolytica. Cada cepa foi submetida a 6 condições experimentais: associação de laser em baixa intensidade com 660 nm e azul de metileno (L+AM+), associação de laser e azuleno (L+AZ+), irradiação com laser (L+F-), tratamento com azul de metileno (L-AM+), tratamento com azuleno (LAZ+) e tratamento apenas com solução fisiológica como controle (L-F-). Após o tratamento de cada cepa, foram realizadas diluições seriadas e semeaduras em ágar Sabouraud dextrose. Os dados de unidades formadoras de colônias (UFC/mL) foram submetidos à análise de variância e teste de Tukey (p<0,05). Os resultados demonstraram que todos os grupos tratados com laser (L+AM+, L+AZ+ e L+F-) apresentaram médias de UFC/mL (Log) inferiores aos grupos sem laser (L-AM+, L-AZ+ e L-F-). Os grupos com terapia fotodinâmica (L+AM+ e L+AZ+) apresentaram média de UFC/mL (Log) semelhante ou superior ao grupo L+F-. Concluiu-se que as cepas de Candida isoladas da cavidade bucal de pacientes submetidos à antibioticoterapia prolongada foram resistentes a terapia fotodinâmica com azul de metileno e azuleno nos parâmetros utilizados neste trabalho. / The aim of this study was to evaluate the effects of the photodynamic therapy using methylene blue and azulene on isolated Candida strains of the oral cavity of patients who underwent a prolonged antibioticotherapy to treat lung tuberculosis. Twenty Candida strains were studied: 5 C. albicans, 4 C. tropicalis, 4 C. glabrata, 2 C. parapsilosis, 2 C. kefyr, 1 C. krusei, 1 C. stellatoidea and 1 C. lipolytica. Each strain underwent 6 experimental conditions: laser in combination with methylene blue (L+MB+), laser in combination with azulene (L+AZ+), irradiation with laser (L+P-), treatment with methylene blue (L+MB+), treatment with azulene (L+AZ+), and treatment with physiologic solution as a control group (L-P-). After the treatment of each strain, serial dilutions and spreading on Sabouraud dextrose agar were performed. Data from colony forming units per milliliter (CFU/ml) were analyzed by Tukey’s test (p<0.05). The results showed that all the groups treated with laser (L+MB+, L+AZ+ and L+P-) presented the lowest mean CFU/ml (Log) value in relation to the groups treated without laser (L+MB+, L+AZ+ and L+F-). The groups treated with photodynamic therapy (L+MB+, L+AZ+) presented an average of CFU/ml (Log) similar or higher to the L+P- group. In summary, the results showed that isolated Candida strains of the oral cavity of patients who underwent a prolonged antibioticotherapy were resistant to the photodynamic therapy with methylene blue and azulene.
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Efeitos da terapia fotodinâmica na candidose experimental e resposta imunológica no modelo hospedeiro de Galleria mellonella / Effects of photodynamic therapy on experimental candidosis and immune response in the Galleria mellonella host modelFigueiredo, Lívia Mara Alves [UNESP] 30 May 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-05-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A terapia fotodinâmica (TFD) tem demonstrado ação antimicrobiana sobre as leveduras do gênero Candida, sendo considerada uma técnica promissora para o tratamento de candidose. Recentemente foi relatado que a aplicação de TFD também pode resultar em ativação do sistema imunológico, contribuindo para a melhora da infecção. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar a ação da TFD e da terapia laser sobre a resposta imunológica à candidose experimental utilizando Galleria mellonella como modelo hospedeiro de infecção. Larvas de G. mellonella foram infectadas com diferentes cepas de Candida albicans e, após 30 min, foram tratadas com TFD mediada por azul de metileno e laser diodo emitido em 660 nm. A seguir, as larvas foram incubadas a 37°C por sete dias e analisadas diariamente para determinação da curva de sobrevivência. Para o estudo da resposta imunológica, após os tempos de 3, 6, 18 h da TFD foram realizados testes de determinação da densidade de hemócitos na hemolinfa de G. mellonella. Os dados obtidos na curva de sobrevivência foram avaliados pelo teste de Log-rank (Mantel Cox) e os resultados da análise imunológica por análise de variância ANOVA e teste de Tukey, com significância de 5%. Os resultados obtidos demonstraram que tanto para a cepa ATCC 18804 como para a cepa clínica 17 de C. albicans, a TFD prolongou a sobrevivência das larvas de G. mellonella infectadas por uma dose fúngica letal. Entretanto, houve diferença estatisticamente significante entre os grupos PDT e controle somente com cepa ATCC (p=0,0056). Foi verificado também que a infecção pela cepa ATCC 18804 de C. albicans em G. mellonella levou a uma redução no número de hemócitos na hemolinfa, e o tratamento com TFD e terapia laser conseguiram aumentar o número de hemócitos, mas sem apresentar diferença estatística significante. Foi possível concluir com esse estudo que a TFD bem como a terapia laser influenciaram de maneira positiva na melhora da infecção por C. albicans no modelo de G. mellonella. / Photodynamic therapy (PDT) has demonstrated antimicrobial activity on the yeast of the genus Candida and is considered a promising technique for the treatment of candidiasis. Recently it was reported that the application of PDT may also result in activation of the immune system, contributing to the improvement of the infection. The objective of this study is to evaluate the action of PDT and laser therapy on the immune response to experimental candidiasis using Galleria mellonella as host of the infection. G. mellonella larvae were infected with different Candida albicans strains and, after 30 min were treated with methylene blue-mediated PDT and laser diode emitted at 660 nm. Then, the larvae were incubated at 37° C for seven days and analyzed daily in order to determine the survival curve. For the study of the immunological response, after intervals of 3, 6, 18 h of the PDT, tests were performed to determine the density of hemocytes in the hemolymph of G. mellonella. The data obtained in the survival curve were evaluated by the Log-rank test (Mantel Cox) and the results of the immunological analysis by analysis of variance ANOVA and Tukey test, with significance of 5%. The results demonstrated that for both the ATCC 18804 strain and the C. albicans clinical strain 17, PDT prolonged the survival of the infected G. mellonella larvae by a lethal fungal dose. However, there was a statistically significant difference between the PDT and the control groups only with ATCC strain (p = 0.0056). It was also found that infection by the C. albicans ATCC 18804 strain in G. mellonella led to a reduction in the number of hemocytes in the hemolymph, and the treatment with PDT and laser therapy succeeded in increasing the number of hemocytes but without significant statistical difference . It was possible to conclude from this study that PDT as well as laser therapy positively influenced the improvement of C. albicans infection in the G. mellonella model.
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