Resumo: Nas bactérias Gram-positivas Streptomyces davawensis e Streptomyces coelicolor a transcrição dos genes responsáveis pela biossíntese de riboflavina (RF; vitamin B2) ribBMAH é iniciada a partir do promoter da riboflavina (Prib). Nas duas espécies um ribB FMN riboswitch está presente imediatamente à montante em relação a Prib, regulando a expressão gênica ao nível traducional. S. davawensis produz o atibiótico roseoflavina (RoF), um análogo de riboflavina, o qual é convertido a roseoflavina 5'-mononucleotídeo (RoFMN) no citoplasma das células alvo. S. davawensis é resistente a RoF, enquanto que S. coelicolor é sensível a RoF. Através de experimentos de transcrição/tradução in vitro foi demonstrado que o ribB FMN riboswitch de S. coelicolor é desligado na presença de RoFMN. Em contraste, o ribB FMN riboswitch de S. davawensis mostrou-se mais ativo na presença de RoFMN. Compatível com esse resultado, a atividade enzimática correspondente ao produto do primeiro gene (ribB) do cluster ribBMAH foi fortemente reduzida em S. coelicolor, mas não em S. davawensis, quando ambas foram cultivadas em meio acrescido de RoF. Através de mutagênese sítio-dirigida foi identificado um único nucleotideo (A61) na estrutura do ribB FMN riboswitch de S. davawensis como sendo responsável pela resposta diferencial a RoFMN. A introdução do ribB FMN riboswitch de S. davawensis em S. coelicolor gerou uma linhagem resistente a RoF. O presente trabalho apresenta evidências de que o ribB FMN riboswitch de S. coelicolor é controlado termodinamicamente, enquanto que o ribB FMN riboswitch de S. davawensis é controlado cineticamente. Os últimos resultados muito provavelmente explicam as diferentes respostas com relação a RoFMN observada para os dois ribB FMN riboswitches quase idênticos. Em resumo, os... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In the Gram-positive soil bacterium Streptomyces davawensis and in the closely related Streptomyces coelicolor transcription of the riboflavin (RF; vitamin B2) biosynthetic genes ribBMAH originates from the riboflavin promoter (Prib). In both species a ribB (ribo)flavin mononucleotide (FMN) binding riboswitch is present immediately downstream of Prib regulating gene expression at the translational level. S. davawensis produces the antibiotic roseoflavin (RoF), a RF analog, which is converted to roseoflavin mononucleotide (RoFMN) within the cytoplasm of target cells. S. davawensis is RoF resistant, whereas S. coelicolor is RoF sensitive. In vitro transcription/translation experiments revealed that the S. coelicolor ribB FMN riboswitch was turned off in the presence of RoFMN. In contrast, the S. davawensis ribB FMN riboswitch was found to be more active in the presence of RoFMN. In line with this finding was that the activity of the product of the first gene (ribB) of the ribBMAH cluster was strongly reduced in S. coelicolor, but not in S. davawensis, when cells were grown in the presence of RoF. Sequence alignments and site directed mutagenesis experiments identified a single nucleotide (A61) within the S. davawensis ribB FMN riboswitch which is responsible for its specific response to RoFMN. Introduction of the S. davawensis ribB FMN riboswitch to S. coelicolor produced a RoF resistant S. coelicolor strain. The present work gives evidence that the ribB FMN riboswitch of S. coelicolor is thermodynamically controlled whereas the S. davawensis ribB FMN riboswitch is kinetically controlled. The latter finding most likely explains the different response of the two almost identical ribB FMN riboswitches with respect to RoFMN. Altogether, the present results show that a highly specialized FMN riboswitch confers RoF resistance to... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Eleonora Cano Carmona / Coorientador: Matthias Mack / Banca: Henrique Ferreira / Banca: Maria Celia Bertolini / Banca: Carla Columbano de Oliveira / Banca: Luis Henrique Souza Guimarães / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-05-14Bitstream added on 2014-06-13T20:44:16Z : No. of bitstreams: 1 pedrolli_db_dr_rcla.pdf: 4403922 bytes, checksum: cff32aaf3ddb331abc9c2e138fcfeefb (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Nas bactérias Gram-positivas Streptomyces davawensis e Streptomyces coelicolor a transcrição dos genes responsáveis pela biossíntese de riboflavina (RF; vitamin B2) ribBMAH é iniciada a partir do promoter da riboflavina (Prib). Nas duas espécies um ribB FMN riboswitch está presente imediatamente à montante em relação a Prib, regulando a expressão gênica ao nível traducional. S. davawensis produz o atibiótico roseoflavina (RoF), um análogo de riboflavina, o qual é convertido a roseoflavina 5´-mononucleotídeo (RoFMN) no citoplasma das células alvo. S. davawensis é resistente a RoF, enquanto que S. coelicolor é sensível a RoF. Através de experimentos de transcrição/tradução in vitro foi demonstrado que o ribB FMN riboswitch de S. coelicolor é desligado na presença de RoFMN. Em contraste, o ribB FMN riboswitch de S. davawensis mostrou-se mais ativo na presença de RoFMN. Compatível com esse resultado, a atividade enzimática correspondente ao produto do primeiro gene (ribB) do cluster ribBMAH foi fortemente reduzida em S. coelicolor, mas não em S. davawensis, quando ambas foram cultivadas em meio acrescido de RoF. Através de mutagênese sítio-dirigida foi identificado um único nucleotideo (A61) na estrutura do ribB FMN riboswitch de S. davawensis como sendo responsável pela resposta diferencial a RoFMN. A introdução do ribB FMN riboswitch de S. davawensis em S. coelicolor gerou uma linhagem resistente a RoF. O presente trabalho apresenta evidências de que o ribB FMN riboswitch de S. coelicolor é controlado termodinamicamente, enquanto que o ribB FMN riboswitch de S. davawensis é controlado cineticamente. Os últimos resultados muito provavelmente explicam as diferentes respostas com relação a RoFMN observada para os dois ribB FMN riboswitches quase idênticos. Em resumo, os... / In the Gram-positive soil bacterium Streptomyces davawensis and in the closely related Streptomyces coelicolor transcription of the riboflavin (RF; vitamin B2) biosynthetic genes ribBMAH originates from the riboflavin promoter (Prib). In both species a ribB (ribo)flavin mononucleotide (FMN) binding riboswitch is present immediately downstream of Prib regulating gene expression at the translational level. S. davawensis produces the antibiotic roseoflavin (RoF), a RF analog, which is converted to roseoflavin mononucleotide (RoFMN) within the cytoplasm of target cells. S. davawensis is RoF resistant, whereas S. coelicolor is RoF sensitive. In vitro transcription/translation experiments revealed that the S. coelicolor ribB FMN riboswitch was turned off in the presence of RoFMN. In contrast, the S. davawensis ribB FMN riboswitch was found to be more active in the presence of RoFMN. In line with this finding was that the activity of the product of the first gene (ribB) of the ribBMAH cluster was strongly reduced in S. coelicolor, but not in S. davawensis, when cells were grown in the presence of RoF. Sequence alignments and site directed mutagenesis experiments identified a single nucleotide (A61) within the S. davawensis ribB FMN riboswitch which is responsible for its specific response to RoFMN. Introduction of the S. davawensis ribB FMN riboswitch to S. coelicolor produced a RoF resistant S. coelicolor strain. The present work gives evidence that the ribB FMN riboswitch of S. coelicolor is thermodynamically controlled whereas the S. davawensis ribB FMN riboswitch is kinetically controlled. The latter finding most likely explains the different response of the two almost identical ribB FMN riboswitches with respect to RoFMN. Altogether, the present results show that a highly specialized FMN riboswitch confers RoF resistance to... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-27T11:32:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinheiro_ErickaTavares_M.pdf: 4998114 bytes, checksum: d72d3e9a21d2f1287e4ac3eb48078f98 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Vários fatores estão envolvidos no insucesso do tratamento endodôntico, entretanto as bactérias são os principais agentes etiológicos. Tais microrganismos podem ter sobrevivido ao tratamento endodôntico anterior ou reinfectado o canal através das microinfiltrações. Estudos revelam que a microbiota do canal radicular do dente tratado endodonticamente associado à lesão periapical persistente difere substancialmente da microbiota de dentes com polpas necrosadas e não tratados. A microbiota dos canais com insucesso endodôntico é composta por um número bastante limitado de espécies bacterianas, que se apresentam mais resistentes aos métodos de combate à infecção utilizados na Endodontia. O objetivo deste trabalho foi estudar a microbiota de 30 dentes com insucesso do tratamento endodôntico e realizar testes de sensibilidade antimicrobiana das bactérias isoladas. Foram utilizados meios de transporte, cultura e incubação que propiciam o crescimento de bactérias anaeróbias estritas. Microrganismos viáveis estavam presentes em 80% dos casos, sendo que a maioria dos canais apresentava somente 1 ou 2 espécies bacterianas. Do total de 55 espécies bacterianas isoladas, 58% eram bactérias anaeróbias facultativas, 42% anaeróbias estritas, 80% Grani-positivas e 20% Gram-negativas. Os gêneros bacterianos mais freqüentemente isolados dos canais radiculares foram: Enterococcus (36,7%), Streptococcus (33,3%), Peptostreptococcus (23,3%), Actinomyces (13,3%), Prevotella (10%), Staphylococcus (10%), Gemella (10%), Fusobacterium (6,7%), Veil/onella (6,7%), Lactobacil/us (6,7%), Propionibacterium (3,3%) e Haemophilus (3,3%). Espécies dos gêneros Enterococcus e Peptostreptococcus foram testadas quanto à suscetibilidade antimicrobiana através do método do E-test, utilizando as seguintes substâncias: benzilpenicilina, amoxicilina, amoxicilina + ácido clavulânico, eritromicina, azitromicina e clindamicina. Enterococcus faecalis e Peptostreptococcus spp. Foram sensíveis a benzilpenicilina, amoxicilina e amoxicilina + ácido clavulânico. Entretanto, 20% dos Enterococcus faecalis foram resistentes a eritromicina e 60% a azitromicina. Concluímos que a microbiota dos canais de dentes com insucesso do tratamento endodôntico é composta em sua maioria por bactérias anaeróbias facultativas, predominantemente Gram-positivas. Os testes de suscetibilidade antimicrobiana revelaram a presença de resistência bacteriana entre espécies de Enterococcus faecalis spp. aos antibióticos eritromicina e azitromicina / Abstract: Although many failure cases of endodontic therapy are caused by technical problems during treatment, the cause is generally believed to be intracanal infection resisting treatment or microorganisms invading the canal via coronal leakage of the root filling. Studies of the microbiota from the canaIs ofteeth with failure of endodontic therapy have revealed that the flora differ markedly ftom that of untreated necrotic dental pulps. It appears to be a very limited assortment of microorganisms, and studies have indicated difficulties in the elimination of this microbiota during endodontic retreatments. This study aimed to evaluate the microbiota of 30 teeth with failed endodontic treatment and to test the sensivity of this microbiota to antibiotics. Microbial samples, isolation and speciation were done using advanced microbiologic techniques for anaerobic species. Microorganisms were recovered from 80% of the examined teeth. In most of the cases, one or two strains per canal were found. From the 55 microbial species isolated, 58 % were facultative anaerobe species, 42 % strict anaerobes, 80% Gram-positive organisms and 20 % Gram-negatives. The most ftequently bacterial genera recovered ftom the root canaIs were Enterococcus (36,7%), Streptococcus (33,3%), Peptostreptococcus (23,3%), Actinornyces (13,3%), Prevotella (10%), Staphylococcus (10%), Gernella (10%), Fusobacteriurn (6,7%), Veillonella (6,7%), Lactobacillus (6,7%), Propionibacteriurn (3,3%) and Haernophilus (3,3%). Antibiotic sensivity of Enterococcus and Peptostreptococcus species was accomplished with the E-test System. These bacterial isolates were tested for their susceptibility/resistance to benzylpenicilin, amoxicilin, amoxicilin combined with clavulanate, erythromycin, azithromycin, and clindamycin. Enterococcus spp. and Peptostreptococcus spp. Were susceptible to benzylpenicilin, amoxicilin, amoxicilin combined with clavulanate. However, 20% of the Enterococcus spp. isolates were resistant to erytromycin and 60% of these isolates were resistant to azitromycin. It was cocluded that microbial flora in canaIs after failure of the endodontic therapy comprised predominantly facultative anaerobic species and Gram-positive organisms. Antibiotic susceptibility results showed erythromicin and azithromycin resistance among Enterococcus sp / Mestrado / Endodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Maria Luiza Moretti Branchini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:05:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moreira_LucianaSarmento_M.pdf: 615387 bytes, checksum: 42dae5da9ccb25a99c7957261e5866ca (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O crescente aumento de casos de candidemia nas últimas décadas vem sendo um fato preocupante devido a diversos fatores, e dentre eles destacam-se a mortalidade, o aumento de casos de espécies não-albicans como causadoras de candidemia, e a crescente emergência da resistência de leveduras aos antifúngicos. Para o tratamento da candidemia, temos como drogas mais usadas a anfotericina B (ANF), o itraconazol (ITZ), o fluconazol (FCZ), a 5-fluorocitosina (5-FC), como também as combinações de ANF com FCZ ou 5-FC que visam favorecer a terapia. Porém, atualmente, ainda pouco se sabe a respeito das respostas clínicas dadas por Candida sp. ás terapias utilizadas quando comparadas com testes de suscetibilidade in vitro. Os testes padronizados para estudar a suscetibilidade de Candida sp. in vitro não avaliam as células individualmente, e sim uma população celular. O sistema automatizado Bio-Cell Tracer ® (BCT®), surge como uma nova ferramenta complementar para o estudo da dinâmica da formação de hifas, pseudo-hifas e germinação de conídios e de respostas quanto a suscetibilidade aos antifúngicos. Neste trabalho, utilizamos o BCT® para avaliar o crescimento de cepas de Candida albicans frente aos seguintes antifúngicos: FCZ, 5-FC e ANF, além das combinações 5-FC/ANF e FCZ/ANF em adições com tempos simultâneos e seqüenciais. O sistema BCT® consiste de uma base para placas, microscópio, digitalizador de imagem e computador com programa que permitiu o acompanhamento do crescimento automático das extremidades das pseudo-hifas estudadas. Os resultados para Candida albicans obtidos com o teste de resistência ao FCZ, encontrados no BCT® foram correspondentes àqueles utilizando o teste padrão de microdiluição em caldo (NCCLS A27), sugerindo diferentes classes de taxas de inibição que poderiam ser agrupadas como valores associados a suscetibilidade e resistência. Os estudos com drogas combinadas, em tempos seqüenciais, revelou que a cepa (UN 219) apresentou comportamento de antagonismo para a combinação de FCZ/ANF, dado que diferiu do encontrado na microdiluição em caldo. Neste caso, a possibilidade de monitoramento de hifas, pseudo-hifas pode permitir maior versatilidade e induzir respostas biológicas antes não encontradas nos testes in vitro. Este estudo contribuiu com novas informações a respeito de um sistema automatizado para análise de pseudo-hifas e germinação de conídios, que pode vir a ser utilizado no desenvolvimento de novas estratégias para uma rápida determinação de suscetibilidade antifúngica de C. albicans ou de outros fungos patogênicos / Abstract: Candida species are opportunistic fungal pathogens that are often the causative agents of infections in immunocompromised patients. amphotericin B (AMPH), itraconazole (ITCZ), fluconazole (FLCZ) and 5-flucytosine (5-FC) are the principal drugs used on the treatment of candidemic patients. However, in some cases, the clinical responses of Candida are different from those obtained with the in vitro susceptibility tests. Moreover, the standard methods of monitoring the susceptibility of Candida to antifungal agents are unable to evaluate single cells, true hyphae or pseudohyphae forms. Thus, new techniques developed to measure the growth rate of true hyphae or pseudohyphae forms in vitro could contribute to better understand the dynamics of the formation of these invasive structures and the response of the organism to antifungal agents. Here we describe the application of an automated system (Bio-Cell Tracer® - BCT®) to examine the responses of Candida albicans to AMPH, FLCZ, 5-FC, as well as AMPH/FLCZ and AMPH/5-FC combinations, in simultaneous and distinct addiction times. The BCT® consists of a culture vessel, a microscope and a image analyzer with a computer program system that traces the growth of a hyphal tip automatically. The results obtained using the BCT® system were correspondent to those using the standard MIC (NCCLS A27) assay on the detection of susceptibility and resistance in clinical isolates and reference samples. The combinatory studies show an antagonistic pattern on the UN 219 strain, differently from the MIC studies. The possibility of tracing pseudohyphae structures allows a larger versatility and biological responses not found on the other tests. This work contributed with new information about an automated system for analysis of pseudohyphal structures, that may be used on the development of new strategies for a rapid and reliable assessment of antifungal susceptibility in Candida albicans or other infectious species / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Juliana Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Iara Teresinha Correia Silva Sousa / Banca: Elisabeth Loshchagin Pizzolitto / Resumo: A substituição do óxido de bismuto por óxido de zircônio (ZrO2) e o acréscimo de hidroxiapatita nanoparticulada (HAn) podem favorecer propriedades do Cimento Portland (CP). Este estudo objetiva comparar propriedades físico-químicas, mecânicas e antibiofilme do CP com ZrO2, acrescido de HAn. Os materiais avaliados foram: G1 - MTA Angelus; G2 - CP/ZrO2; G3 - CP/ZrO2/HAn10%; G4 - CP/ZrO2/HAn20%. O pH foi analisado em phmetro digital, a solubilidade pela perda de massa e o tempo de presa pelo teste de Gilmore. A resistência à compressão foi avaliada por meio de ensaio mecânico. Amostras dos materiais foram radiografadas com uma escala de alumínio para análise da radiopacidade. Para a avaliação antibiofilme os materiais foram colocados em contato com biofilme de E. faecalis formado em blocos de dentina, e avaliado pela contagem de unidades formadoras de colônias (UFCmL-1). Os resultados foram submetidos aos testes ANOVA e Tukey com 5% de significância. G2 e G3 apresentaram pH mais elevado. Maior solubilidade foi observada para G3 e G4. O tempo de presa inicial foi menor para G1 e o tempo de presa final para G3. Todos os materiais apresentaram radiopacidade superior a 3 mm Al. A resistência à compressão foi maior para G2 nos períodos avaliados. Nenhum cimento foi capaz de neutralizar completamente o biofilme bacteriano, mas G3 e G4 proporcionaram maior redução bacteriana. Conclui-se que a associação CP/ZrO2 e CP/ZrO2 com 10% de HAn apresentam propriedades físico-químicas adequadas e que o acréscimo de HAn melhora a atividade antibiofilme de E faecalis. / Abstract: The bismuth oxide replacement by zirconium oxide (ZrO2) and the addition of hydroxyapatite nanoparticle may improve the Portland Cement (PC) properties. This study aimed evaluate the physicochemical, mechanical and antibiofilm of Enterococcus faecalis properties of Portland Cement (PC) association with zirconium oxide (ZrO2), added with hydroxyapatite nanoparticles (HAn). The analised materials were: G1 -MTA Angelus; G2 - PC/ZrO2; G3 - PC/ZrO2/HAn10%; G4 - PC/ZrO2/HAn20%. The pH was measure with a digital phmeter and the solubility by the weight loss. Setting time was assayed by Gilmore needle. Compressive strength was tested in universal testing machine. Materials samples were radiographed alongside an aluminum (Al) step wedge. For the antibiofilm test, the samples were place in direct contact with E. faecalis biofilm over dentine blocks, and assessed by colony forming units (CFU mL-1). The results were submitted to ANOVA and Tukey's test at 5% significance. G2 and G3 showed the higher pH in both experimental periods. Bigger solubility was noted for G3 and G4. The initial setting time was shorter for G1, and the final setting time for G3 and G4. All material presented radiopacity greater than 3 mmAl. Compressive strength was better for G2 in both experimental periods. No cement was able to completely neutralize the bacterial biofilm, however G3 and G4 exhibited higher bacteria reduction. The PC/ZrO2 and PC/ZrO2 with HAn 10% association presented the better physicochemical and mechanical properties, and the association with HAn improves the E. faecalis antibiofilm activity. / Mestre

Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-18Bitstream added on 2015-03-03T12:06:55Z : No. of bitstreams: 1 000806319_20170318.pdf: 286636 bytes, checksum: 64922788f65d60312ba9c1e2cf44d0e1 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-24T12:04:48Z: 000806319_20170318.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-24T12:05:39Z : No. of bitstreams: 1 000806319.pdf: 499928 bytes, checksum: 47cea57d744e94922d90057a76e21d25 (MD5) / A substituição do óxido de bismuto por óxido de zircônio (ZrO2) e o acréscimo de hidroxiapatita nanoparticulada (HAn) podem favorecer propriedades do Cimento Portland (CP). Este estudo objetiva comparar propriedades físico-químicas, mecânicas e antibiofilme do CP com ZrO2, acrescido de HAn. Os materiais avaliados foram: G1 – MTA Angelus; G2 – CP/ZrO2; G3 – CP/ZrO2/HAn10%; G4 – CP/ZrO2/HAn20%. O pH foi analisado em phmetro digital, a solubilidade pela perda de massa e o tempo de presa pelo teste de Gilmore. A resistência à compressão foi avaliada por meio de ensaio mecânico. Amostras dos materiais foram radiografadas com uma escala de alumínio para análise da radiopacidade. Para a avaliação antibiofilme os materiais foram colocados em contato com biofilme de E. faecalis formado em blocos de dentina, e avaliado pela contagem de unidades formadoras de colônias (UFCmL-1). Os resultados foram submetidos aos testes ANOVA e Tukey com 5% de significância. G2 e G3 apresentaram pH mais elevado. Maior solubilidade foi observada para G3 e G4. O tempo de presa inicial foi menor para G1 e o tempo de presa final para G3. Todos os materiais apresentaram radiopacidade superior a 3 mm Al. A resistência à compressão foi maior para G2 nos períodos avaliados. Nenhum cimento foi capaz de neutralizar completamente o biofilme bacteriano, mas G3 e G4 proporcionaram maior redução bacteriana. Conclui-se que a associação CP/ZrO2 e CP/ZrO2 com 10% de HAn apresentam propriedades físico-químicas adequadas e que o acréscimo de HAn melhora a atividade antibiofilme de E faecalis. / The bismuth oxide replacement by zirconium oxide (ZrO2) and the addition of hydroxyapatite nanoparticle may improve the Portland Cement (PC) properties. This study aimed evaluate the physicochemical, mechanical and antibiofilm of Enterococcus faecalis properties of Portland Cement (PC) association with zirconium oxide (ZrO2), added with hydroxyapatite nanoparticles (HAn). The analised materials were: G1 –MTA Angelus; G2 – PC/ZrO2; G3 – PC/ZrO2/HAn10%; G4 – PC/ZrO2/HAn20%. The pH was measure with a digital phmeter and the solubility by the weight loss. Setting time was assayed by Gilmore needle. Compressive strength was tested in universal testing machine. Materials samples were radiographed alongside an aluminum (Al) step wedge. For the antibiofilm test, the samples were place in direct contact with E. faecalis biofilm over dentine blocks, and assessed by colony forming units (CFU mL-1). The results were submitted to ANOVA and Tukey’s test at 5% significance. G2 and G3 showed the higher pH in both experimental periods. Bigger solubility was noted for G3 and G4. The initial setting time was shorter for G1, and the final setting time for G3 and G4. All material presented radiopacity greater than 3 mmAl. Compressive strength was better for G2 in both experimental periods. No cement was able to completely neutralize the bacterial biofilm, however G3 and G4 exhibited higher bacteria reduction. The PC/ZrO2 and PC/ZrO2 with HAn 10% association presented the better physicochemical and mechanical properties, and the association with HAn improves the E. faecalis antibiofilm activity.

Submitted by Elizabete Silva (elizabete.silva@ufes.br) on 2015-03-26T19:48:31Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Luiz Guilherme Schimidt Castellani.pdf: 1781231 bytes, checksum: 875aa69391e57600531cb990b00dd009 (MD5) / Approved for entry into archive by Elizabete Silva (elizabete.silva@ufes.br) on 2015-04-07T18:30:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Luiz Guilherme Schimidt Castellani.pdf: 1781231 bytes, checksum: 875aa69391e57600531cb990b00dd009 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-07T18:30:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Luiz Guilherme Schimidt Castellani.pdf: 1781231 bytes, checksum: 875aa69391e57600531cb990b00dd009 (MD5) Previous issue date: 2013-08 / A resistência a fármacos antituberculose tem constituído uma grande ameaça ao controle da tuberculose em âmbito mundial. A sua detecção precoce permite ao médico instituir um esquema de tratamento mais adequado ao paciente e consequentemente quebrar a cadeia de transmissão dos bacilos. Os testes de sensibilidade a antimicrobianos atuais, embora eficientes, são caros e/ou demorados e/ou trabalhosos. Com base nesta premissa, nos propusemos a desenvolver e padronizar um método fenotípico direto para determinação da sensibilidade do Mycobacterium tuberculosis a antimicrobianos de primeira linha do tratamento da tuberculose. Para o desenvolvimento deste novo teste, utilizaram-se os princípios do método das proporções e do exame de cultura pelo método de Ogawa–Kudoh. O estudo foi dividido em duas fases. A primeira, caracterizada pelo desenvolvimento e padronização do método proposto e a segunda, pela análise da concordância entre o método desenvolvido e o método do MGIT (padrão-ouro). Na primeira fase, foram realizados diversos ensaios para definir: os volumes de absorção e de liberação de líquidos de diferentes tipos de swab, o meio de cultura, as concentrações dos antimicrobianos e o tempo de leitura/interpretação das culturas. Além disso, foi verificado se a amostra deveria ou não ser diluída. Com base nos resultados destes ensaios, padronizou-se o método com: swab comercial, em meio de cultura Ogawa- Kudoh contendo separadamente 0,2 μg/mL de isoniazida, 40,0 μg/mL de rifampicina, 10,0 μg/mL de estreptomicina e 500,0 μg/mL de ácido para-nitrobenzóico. Padronizou-se ainda a inoculação da amostra de escarro de forma direta, ou seja, sem diluir e a leitura/interpretação do resultado do teste no período entre 21 e 28 dias. A análise comparativa entre este método e o teste de sensibilidade a antimicrobianos no sistema MGIT realizada na segunda fase do projeto indicou um índice kappa igual a 1,000, ou seja, uma concordância muito boa em relação ao padrão-ouro. Diante desses resultados promissores, acreditamos que o método desenvolvido apresente um grande potencial para ser utilizado em laboratórios com pouca infra-estrutura, por ser de baixo custo, fácil execução e relativamente rápido. / Drug resistance has become a worldwide threat to tuberculosis control. Its early detection allows the doctor to use more appropriate treatment regimens and thereafter to break the transmission chain of the bacilli. Current drug susceptibility tests, though efficient, are expensive and/or lengthy and/or laborious. Based on that premise, we proposed to develop and standardize a direct phenotypic method to determinate the susceptibility of Mycobacterium tuberculosis to first line drugs used on tuberculosis treatment. To develop this new method, it was used the principles of the proportion method and the Ogawa-Kudoh swab culture method. The study was divided in two phases. The first was characterized by the development and standardization of the proposed method and the second by analyzing the agreement between the developed method and the MGIT method (gold standard). In the first phase, several assays were realized to define: the absorption and liberation volumes of liquids from different kinds of swab, the culture medium, the drugs concentrations and the time to read/interpret the cultures. Besides, it was verified if the sample should or should not be diluted. Based on results, the method was standardized with: commercial swab, Ogawa-Kudoh culture medium containing separately 0,2 μg/mL of isoniazid, 40,0 μg/mL of rifampicin, 10,0 μg/mL of streptomycin e 500,0 μg/mL of para-nitrobenzoic acid. It was also standardized that the sample should not be diluted and the cultures should be read/interpreted between 21 and 28 days. The comparative analyzes between this method and the susceptibility test on MGIT system indicated a kappa index equal to 1,000, which means a perfect agreement to gold standard. Given these promising results, we believe that the developed method presents a great potential to be used in laboratories with little infrastructure, because of its low cost, it is easy to perform and relatively fast.

Orientador: Francisco Carlos Groppo, Pedro L. Rosalen / Tese (doutorado) Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T14:40:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simoes_RobertaPessoa_D.pdf: 1118717 bytes, checksum: 945a71577d31d5cbd94cdcb1af6a803a (MD5) Previous issue date: 2003 / Doutorado

Resumo:O florfenicol é um antibiótico utilizado para o tratamento de doença respiratória em bovinos. Estudar e compreender a sua farmacocinética são ferramentas importantes para o controle eficaz e adequado dessas enfermidades, minimizando assim o aparecimento de cepas bacterianas resistentes. Por isso, este estudo teve por objetivo determinar o perfil farmacocinético do florfenicol em plasma bovino após aplicação intramuscular de duas doses e avaliar a sua eficácia contra bactérias sensíveis. No estudo, foram utilizados 8 bovinos que receberam duas aplicações de florfenicol por via intramuscular e na posologia de 20 mg/Kg com intervalo de 48 horas. A concentração plasmática foi determinada por cromatografia líquida de alta performance acoplada a um espectrofotômetro de massa. A concentração inibitória mínima foi realizada em um laboratório veterinário seguindo os padrões internacionais do Clinical and Laboratory Standard Institute. Os parâmetros farmacocinéticos calculados foram: Cmax = 1,21 ± 0,25 µg/mL, Tmax = 3,43 ± 2,23 h, AUC0-t = 34,16 ± 4,50 h.µg/mL, T½ = 63,46 ± 23,76 h; e Cmax = 1,17 ± 0,20 µg/mL; Tmax = 6,00 ± 0,00 h; AUC0-t = 52,37 ± 5,50 h.µg/mL; T½ = 77,74 ± 43,65 h, respectivamente para a primeira e segunda aplicação. Os níveis de florfenicol no plasma mantiveram-se acima da concentração inibitória mínima para as bactérias: Mannheimia haemolytica (0,75 µg/mL), Pasteurella multocida tipo capsular A (0,75 µg/mL) e Histophilus sommus (0,30 µg/mL). Estes resultados comprovam a eficácia do florfenicol contra bactérias que causam a doença respiratória dos bovinos / Abstract:The florfenicol is an antibiotic used for the treatment of respiratory disease in cattle. Study and understand its pharmacokinetics are important tools for effective control of these diseases and appropriate, thereby minimizing the appearance of resistant bacterial strains. Therefore, this study aimed to determine the pharmacokinetic profile of florfenicol in bovine plasma after intramuscular injection of two doses and evaluate their effectiveness against susceptible bacteria. In the study, we used eight cattle that received two applications of florfenicol and intramuscularly at a dose of 20 mg/kg at intervals of 48 hours. The plasma concentration was determined by high performance liquid chromatography coupled to a mass spectrometer. The minimum inhibitory concentration was performed in a veterinary laboratory following the international standards of the Clinical and Laboratory Standards Institute. Pharmacokinetic parameters were calculated: Cmax = 1.21 ± 0.25 µg/mL, Tmax = 3.43 ± 2.23 h, AUC0-t = 34.16 ± 4.50 h.µg/mL, T½ = 63.46 ± 23.76 h, and Cmax = 1.17 ± 0.20 µg/mL, Tmax = 6.00 ± 0.00 h, AUC0-t = 52.37 ± 5.50 h.µg/mL, T½ = 77.74 ± 43.65 h, respectively for the first and second application. The florfenicol levels in plasma remained above the minimum inhibitory concentration for bacteria: Mannheimia haemolytica (0.75 µg/mL), Pasteurella multocida capsular type A (0.75 µg/mL) and Histophilus sommus (0.30 µg/mL). These results indicate the effectiveness of florfenicol against bacteria that cause respiratory disease of cattle / Orientador:Luiz Cláudio Nogueira Mendes / Banca:Sérgio Diniz Garcia / Banca:Antonio de Queiroz Neto / Mestre

Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Antonio Olavo cardoso Jorge / Banca: Elizabete Brasil dos Santos / Banca: José Roberto Cortelli / Banca: Rocha, Rosilene Fernandes da / RESUMO: Staphylococcus não são usualmente estudados na cavidade bucal. Quando presentes são considerados pertencentes à microbiota transitória. Indivíduos que apresentam doença periodontal representam possíveis reservatórios dessas bactérias oportunistas na cavidade bucal. O uso de antibióticos, quer seja para tratamento da doença periodontal, ou em consequência de infecções hospitalares, pode predispor o aumento do número de Staphylococcusspp. naboca, pois estes adquirem facilmente resistência aos antibióticos, podendo resultar em super-infecção. Participaram deste estudo 88 pacientes, com no mínimo 25 anos de idade e apresentando periodontite crônica, com pelo menos dois sítios com profundidade de sondagem maior ou igual a 5mm. Após anamnese e exame clínico periodontal foram feitas coletas de material da bolsa periodontal com cones de papel e da cavidade bucal por meio de bochechos. Do total de pacientes 37,50% apresentaram Staphylocaccusspp. na bolsa periodontal e 61,36% na cavidade bucal, sendo que 27,27% apresentaram a bactéria nos 2 sítios, não sendo necessariamente a mesma espécie. S. epidermidisfoi a espécie mais prevalente para bolsa periodontal (15,9%) e cavidade bucal (27,27%). Foram positivos para S. aureus na bolsa periodontal, 4,5% e para cavidade bucal 25%, sendo 3,4% positivos para os dois sítios. Não houve diferença estatística significante quanto à presença desses microrganismos entre as faixas etárias, hábito de fumar e aumento da profundidade de sondagem. A maioria das cepas de Staphylococcus isoladas mostrou resistência aos antibióticos testados, indicando que a utilização sistêmica destas drogas, como adjunto à terapia periodontal. deve ser vista com cautela / ABSTRACT: "Staphylococcus" are not usually studied in the oral cavity, when this happens, they are considered to belong to transitory microflora. Individuals that present periodontal disease represent possibles reservoirs of these opportunist bacteria in the oral cavity. The use of antibiotics whether for treatment of periodontal disease or due to hospital infections, may predispose the increase of the "Staphylococcus" spp. in the oral cavity because they easily become resistant to antibiotics, resulting in superinfection. The study was made with 88 patients, minimum age- 25 years old, presenting chronical periodontitis, with, at least, two sites having a probing pocket bigger or equal to 5mm. After anamnese and clinical periodontal examination samples were taken from the periodontal pocket using paper cones and from the oral cavity using mouth rinse. Of the total patients 37,50% presented "Staphylococcus" spp. in the periodontal pocket and 61,36% in lhe oral cavity; 27,27% presented bacteria in the two sites, not necessarily of the same specie. "S. epidermidis" was the most prevailing specie in periodontal pocket (15,9%) and oral cavity (27,27%). Positive for "S. aureus" in the periodontal pocket were 4,5% and for the oral cavity 25%, and 3,4% were positive for the two sites. There was not found significative statistical difference referring to the presence of the microorganisms as to age, smoking habit and increase of the probing depth. The majority of the isolated "Staphylococcus" samples showed resistance to the tested antibiotics, indicating that the drugs as an adjunct to periodontal therapy, must be seen with caution / Doutor