Made available in DSpace on 2018-06-27T18:56:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Queli Fernandes Lenz.pdf: 1109122 bytes, checksum: c96662d246963285f793b662d227cbe8 (MD5) Queli Fernandes Lenz.pdf.jpg: 3574 bytes, checksum: 11b4e5a1cb8de551f92f8caa41435ad9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Non-steroidal anti-inflammatories (NSAIDs) represent one of the most commonly used classes of drugs, they are often applied in the treatment of chronic or acute inflammatory processes. Nimesulide, a drug which belongs to the NSAIDs, is usually applied in inflammatory processes, such as: inflammation of lower respiratory tract, oral cavity and in inflammatory processes associated to tendinitis, synovitis and rheumatoid arthritis. However, it is known that the oral administration of nimesulide might cause several adverse effects, from gastrointestinal disturbances to liver and kidney toxicity. Therefore, the topical administration of the drug is an alternative to these problems. Besides the use of such option, carriers ,such as nanoparticles, present many advantages for topic application. Among them, the sustained liberation, which becomes important for the drug supply on the skin during a longer period of time. This work aims at assessing the anti-inflammatory and the antioxidant activity of a topical gel containing nanoencapsulated nimesulide by using experimental models, as well as carrying out comparative analysis related to the nimesulide activity either free or nanostructured. In order to determine the anti-inflammatory activity, either acute or chronic, male rats were used Wistar (200 e 250g). In order to evaluate the acute inflammation, paw edema induced by carrageenan and acute arthritis inductions by Freud Adjuvant were used. The chronic inflammation models in vivo applied were induction of chronic arthritis by Freud Adjuvant, induction of formation of granulomatous tissue by cotton pellet and healing. The antioxidant activity was assessed through radical capturing method DPPH and dosage of substances reactive to the tiobarbituric acid (TBARS) in dorsal damaged tissue (healing model). The nanocapsules of nimesulide (1,5 mg/ml) were prepared through the method of nanoprecipitation of preformed polymer (Fessi, et al. 1998), developed and characterized by Alves and collaborators (2005). From the obtained data in the acute inflammation models, no significative difference was observed between the activity of the nimesulide in nanocapsules (GHNCN) and in the free form (GHN), where both the formulations were able to inhibit the inflammatory process. On the other hand, in the chronic inflammation the formulation containing the nonostructured drug showed a better activity than that showed by the free drug. In the chronic arthritis model the anti-inflammatory activity was 81,5%, compared to the free drug (27,75%). The formulation containing the nanostructured drug was also able to inhibit the formation of granulomatous tissue in 36,66% compared to the free drug, which inhibited just 2,82. In the healing trial the free drug (GHN) presented an tissue retraction of 38,82%, the nanostructured of 19,35% and the control of 10,5%. Through the DPPH technique, it was not possible to observe any significant difference between the formulations (GHNCN e GHN), however, both demonstrated excellent antioxidant action. Although not statistically different, it was possible to observe a higher action in the formulation containing nimesulide in nanocapsules in all tested concentrations. In the determination of TBARS malondialdehyde levels (MDA) for the free and the nanostructured drugs were respectively 730,20 e 571,33 nmol MDA/g tissue, compared to the control group (1.457 nmol MDA/g tissue). From the obtained data, it was possible to demonstrate that the nanostructured nimesulide incorporated to the hydro gel presents adequate anti-inflammatory and antioxidant activities, becoming an alternative to the treatment of inflammatory processes through topical administration. / Anti-inflamatórios não-esteroides (AINEs) representam uma das classes de fármacos mais comumente usados, sendo frequentemente usados para o tratamento de estados inflamatórios agudos e crônicos. A nimesulida, fármaco pertencente à classe dos AINEs, é comumente utilizada em processos inflamatórios, tais como: inflamações do trato respiratório, da cavidade oral e em situações inflamatórias associadas com tendinite, sinovite e artrite reumatóide. Sabe-se, porém, que a administração oral da nimesulida pode causar inúmeros efeitos adversos, incluindo desde perturbações gastrintestinais até toxicidade hepática e renal. Em virtude disso, a administração tópica do fármaco constitui uma alternativa a esses problemas. Além da utilização dessa via, carreadores como nanopartículas apresentam muitas vantagens para aplicação tópica, dentre elas, a liberação sustentada, a qual se torna importante para o suprimento de fármaco na pele, por um período prolongado de tempo. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade anti-inflamatória e antioxidante de um gel tópico contendo nimesulida nanoencapsulada utilizando modelos experimentais, bem como a realização de análises comparativas com relação à atividade da nimesulida na forma livre e na forma nanoestruturada. Para determinação da atividade anti-inflamatória, tanto aguda quanto crônica, foram usados ratos machos Wistar (200 e 250g). Para avaliação de inflamação aguda foram usados os modelos de indução de edema de pata por carragenina e indução de artrite aguda por Adjuvante de Freud. Os modelos de inflamação crônica in vivo utilizados foram indução de artrite crônica por Adjuvante de Freud, indução de formação de tecido granulomatoso por introdução de pellet de algodão e cicatrização. A atividade antioxidante foi avaliada através dos métodos de captação do radical DPPH e dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) em tecido de lesão dorsal (modelo de cicatrização). As nanocápsulas de nimesulida (1,5 mg/ml) foram preparadas através do método de nanoprecipitação de polímero pré-formado (Fessi, et al, 1998), desenvolvidas e caracterizadas por Alves e colaboradores (2005). A partir dos dados obtidos nos modelos de inflamação aguda, não foi observada diferença significativa entre a atividade da nimesulida em nanocápsulas (GHNCN) e na forma livre (GHN), onde ambas as formulações foram capazes de inibir o processo inflamatório. Por outro lado, nos modelos de inflamação crônica a formulação contendo o fármaco nanoestruturado demonstrou uma atividade significativamente maior do que aquela contendo o fármaco livre. No modelo de artrite crônica a atividade anti-inflamatória foi de 81,5%, comparada ao fármaco livre (27,75%). A formulação contendo o fármaco nanoestruturado também foi capaz de inibir a formação de tecido granulomatoso em 36,66% em relação ao fármaco livre, o qual inibiu apenas 2,82%. No ensaio de cicatrização, o fármaco livre (GHN) apresentou uma retração do tecido de 38,82%; o nanoestruturado, de 19,35%; e o controle de 10,5%. Através da técnica do DPPH não foi possível observar diferença significativa entre as formulações (GHNCN e GHN), entretanto ambas demonstraram excelente ação antioxidante. Embora não estatisticamente diferentes, foi possível observar uma ação mais acentuada na formulação com a nimesulida em nanocápsulas em todas as concentrações testadas. Na determinação de TBARS, os níveis de malondialdeído (MDA) para o fármaco livre e nanoestruturado foram, respectivamente, 730,20 e 571,33 nmol MDA/g tecido, comparados com o grupo controle (1.457 nmol MDA/g tecido). A partir dos dados obtidos, foi possível demonstrar que a nimesulida nanoestruturada incorporada em hidrogel apresenta atividades anti-inflamatória e antioxidante adequadas, constituindo-se numa alternativa para tratamentos de processos inflamatórios através da via tópica de admistração.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-14T17:48:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_QueliFernandesLenz.pdf: 1103937 bytes, checksum: b2116f3f0ba1823908aaa8b249897b50 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-14T17:48:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_QueliFernandesLenz.pdf: 1103937 bytes, checksum: b2116f3f0ba1823908aaa8b249897b50 (MD5) Previous issue date: 2009-08-31 / Non-steroidal anti-inflammatories (NSAIDs) represent one of the most commonly used classes of drugs, they are often applied in the treatment of chronic or acute inflammatory processes. Nimesulide, a drug which belongs to the NSAIDs, is usually applied in inflammatory processes, such as: inflammation of lower respiratory tract, oral cavity and in inflammatory processes associated to tendinitis, synovitis and rheumatoid arthritis. However, it is known that the oral administration of nimesulide might cause several adverse effects, from gastrointestinal disturbances to liver and kidney toxicity. Therefore, the topical administration of the drug is an alternative to these problems. Besides the use of such option, carriers ,such as nanoparticles, present many advantages for topic application. Among them, the sustained liberation, which becomes important for the drug supply on the skin during a longer period of time. This work aims at assessing the anti-inflammatory and the antioxidant activity of a topical gel containing nanoencapsulated nimesulide by using experimental models, as well as carrying out comparative analysis related to the nimesulide activity either free or nanostructured. In order to determine the anti-inflammatory activity, either acute or chronic, male rats were used Wistar (200 e 250g). In order to evaluate the acute inflammation, paw edema induced by carrageenan and acute arthritis inductions by Freud Adjuvant were used. The chronic inflammation models in vivo applied were induction of chronic arthritis by Freud Adjuvant, induction of formation of granulomatous tissue by cotton pellet and healing. The antioxidant activity was assessed through radical capturing method DPPH and dosage of substances reactive to the tiobarbituric acid (TBARS) in dorsal damaged tissue (healing model). The nanocapsules of nimesulide (1,5 mg/ml) were prepared through the method of nanoprecipitation of preformed polymer (Fessi, et al. 1998), developed and characterized by Alves and collaborators (2005). From the obtained data in the acute inflammation models, no significative difference was observed between the activity of the nimesulide in nanocapsules (GHNCN) and in the free form (GHN), where both the formulations were able to inhibit the inflammatory process. On the other hand, in the chronic inflammation the formulation containing the nonostructured drug showed a better activity than that showed by the free drug. In the chronic arthritis model the anti-inflammatory activity was 81,5%, compared to the free drug (27,75%). The formulation containing the nanostructured drug was also able to inhibit the formation of granulomatous tissue in 36,66% compared to the free drug, which inhibited just 2,82. In the healing trial the free drug (GHN) presented an tissue retraction of 38,82%, the nanostructured of 19,35% and the control of 10,5%. Through the DPPH technique, it was not possible to observe any significant difference between the formulations (GHNCN e GHN), however, both demonstrated excellent antioxidant action. Although not statistically different, it was possible to observe a higher action in the formulation containing nimesulide in nanocapsules in all tested concentrations. In the determination of TBARS malondialdehyde levels (MDA) for the free and the nanostructured drugs were respectively 730,20 e 571,33 nmol MDA/g tissue, compared to the control group (1.457 nmol MDA/g tissue). From the obtained data, it was possible to demonstrate that the nanostructured nimesulide incorporated to the hydro gel presents adequate anti-inflammatory and antioxidant activities, becoming an alternative to the treatment of inflammatory processes through topical administration. / Anti-inflamatórios não-esteroides (AINEs) representam uma das classes de fármacos mais comumente usados, sendo frequentemente usados para o tratamento de estados inflamatórios agudos e crônicos. A nimesulida, fármaco pertencente à classe dos AINEs, é comumente utilizada em processos inflamatórios, tais como: inflamações do trato respiratório, da cavidade oral e em situações inflamatórias associadas com tendinite, sinovite e artrite reumatóide. Sabe-se, porém, que a administração oral da nimesulida pode causar inúmeros efeitos adversos, incluindo desde perturbações gastrintestinais até toxicidade hepática e renal. Em virtude disso, a administração tópica do fármaco constitui uma alternativa a esses problemas. Além da utilização dessa via, carreadores como nanopartículas apresentam muitas vantagens para aplicação tópica, dentre elas, a liberação sustentada, a qual se torna importante para o suprimento de fármaco na pele, por um período prolongado de tempo. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade anti-inflamatória e antioxidante de um gel tópico contendo nimesulida nanoencapsulada utilizando modelos experimentais, bem como a realização de análises comparativas com relação à atividade da nimesulida na forma livre e na forma nanoestruturada. Para determinação da atividade anti-inflamatória, tanto aguda quanto crônica, foram usados ratos machos Wistar (200 e 250g). Para avaliação de inflamação aguda foram usados os modelos de indução de edema de pata por carragenina e indução de artrite aguda por Adjuvante de Freud. Os modelos de inflamação crônica in vivo utilizados foram indução de artrite crônica por Adjuvante de Freud, indução de formação de tecido granulomatoso por introdução de pellet de algodão e cicatrização. A atividade antioxidante foi avaliada através dos métodos de captação do radical DPPH e dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) em tecido de lesão dorsal (modelo de cicatrização). As nanocápsulas de nimesulida (1,5 mg/ml) foram preparadas através do método de nanoprecipitação de polímero pré-formado (Fessi, et al, 1998), desenvolvidas e caracterizadas por Alves e colaboradores (2005). A partir dos dados obtidos nos modelos de inflamação aguda, não foi observada diferença significativa entre a atividade da nimesulida em nanocápsulas (GHNCN) e na forma livre (GHN), onde ambas as formulações foram capazes de inibir o processo inflamatório. Por outro lado, nos modelos de inflamação crônica a formulação contendo o fármaco nanoestruturado demonstrou uma atividade significativamente maior do que aquela contendo o fármaco livre. No modelo de artrite crônica a atividade anti-inflamatória foi de 81,5%, comparada ao fármaco livre (27,75%). A formulação contendo o fármaco nanoestruturado também foi capaz de inibir a formação de tecido granulomatoso em 36,66% em relação ao fármaco livre, o qual inibiu apenas 2,82%. No ensaio de cicatrização, o fármaco livre (GHN) apresentou uma retração do tecido de 38,82%; o nanoestruturado, de 19,35%; e o controle de 10,5%. Através da técnica do DPPH não foi possível observar diferença significativa entre as formulações (GHNCN e GHN), entretanto ambas demonstraram excelente ação antioxidante. Embora não estatisticamente diferentes, foi possível observar uma ação mais acentuada na formulação com a nimesulida em nanocápsulas em todas as concentrações testadas. Na determinação de TBARS, os níveis de malondialdeído (MDA) para o fármaco livre e nanoestruturado foram, respectivamente, 730,20 e 571,33 nmol MDA/g tecido, comparados com o grupo controle (1.457 nmol MDA/g tecido). A partir dos dados obtidos, foi possível demonstrar que a nimesulida nanoestruturada incorporada em hidrogel apresenta atividades anti-inflamatória e antioxidante adequadas, constituindo-se numa alternativa para tratamentos de processos inflamatórios através da via tópica de admistração.

Orientadores: Marcos José Salvador, Carlos Amilcar Parada / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T07:08:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Teixeira_AlyneGrasiela_M.pdf: 2262328 bytes, checksum: 66c66f7a3fa3f4137fae0f3a0d3fe076 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Este estudo teve por objetivo a preparação de extratos padronizados (fluidos e secos em leito de jorro) das folhas de Maytenus ilicifolia (Celastraceae), a elaboração de formulações tópicas (creme, gel e gel-creme) contendo os extratos ativos, a caracterização química dos extratos por CLAE-DAD/ESI-MS e UPLC-MS e a avaliação in vitro da atividade antioxidante utilizando ensaios indiretos mediados pela transferência de elétrons, tais como redução do radical DPPH e Folin-Ciocalteu (FCR) e ensaios diretos baseados em mecanismos de transferência de hidrogênio, tais como ensaio beta-caroteno e ORACFL. O extrato fluido concentrado foi submetido ao processo de secagem por leito de jorro, utilizando como adjuvante de secagem o dióxido de silício coloidal (Tixosil 333®, Rhodia, São Paulo, Brasil) na proporção de 40, 60 e 80% em relação ao total de sólidos do extrato fluido e a capacidade antioxidante dos extratos foram analisados. Observou-se que tanto o extrato fluido concentrado, como os extratos secos apresentaram atividade antioxidante in vitro, porém os extratos secos mostraram atividade mais intensa, com destaque para o extrato seco com 40% de dióxido de silício coloidal (Mi40). A análise dos constituintes químicos presentes nos extratos ativos utilizando CLAE-DAD/ESI-MS e UPLC-MS sugeriu a presença de flavonols (aglicona e O-heterosídeos) e catequinas, sendo quantificados por UPLC-MS a (+)-catequina, (-)-epicatequina e rutina que apresentaram promissora atividade antioxidante nos ensaios DPPH e ORACFL. Os extratos (fluidos e secos em leito de jorro) mostraram considerável conteúdo de constituintes fenólicos (2,15 a 3,72 mg de GAE/kg), assim como atividade antioxidante elevada nos dois ensaios (IC50 entre 7,98 e 51,79 ?g/mL no DPPH e capacidade antioxidante entre 5828,3 e 15249,3 ?mol de TE/g de extrato no ORACFL). Os resultados demonstraram que, de maneira geral, a atividade antioxidante e os perfis cromatográficos dos extratos secos não foram consideravelmente afetados pela operação de secagem em leito de jorro, mas os melhores resultados quanto à atividade antioxidante e maior quantidade de (+)-catequina, (-)-epicatequina e rutina foram verificados no extrato seco Mi40 com menor percentagem de adjuvante de secagem. Visando avaliar o comportamento dos extratos ativos em formulação farmacêutica e com o propósito de avaliar a possibilidade de uma nova aplicação para o extrato hidroalcoólico das folhas de M. ilicifolia em uso tópico, os extratos com promissora atividade antioxidante foram incorporados em formulações tópicas (creme, gel e gel creme), estabelecendo-se um estudo comparativo da atividade antioxidante dos extratos (fluidos e secos em leito de jorro) e destes nas formulações elaboradas. Os melhores resultados observados em termos de atividade antioxidante foram para as formulações creme, gel e gel creme contendo como ativo o extrato seco Mi40 a 10% / Abstract: This study aimed to the preparation of standardized fluid and spouted bed-dried extracts from the leaves of Maytenus ilicifolia, preparation of topical formulations (cream, gel and gel-cream) containing the active extracts, chemical characterization of the extracts by HPLC-DAD/ESI-MS and UPLC-MS and in vitro evaluation of antioxidant activity assays using indirect mediated electron transfer, such as reduction of DPPH and Folin-Ciocalteu (FCR) and direct assays based on hydrogen transfer, such as beta-carotene assay and ORACFL. The concentrate fluid extract was subjected to spouted bed drying, using as drying adjuvant, the colloidal silicon dioxide (Tixosil 333®, Rhodia, Sao Paulo, Brazil) in a proportion of 40, 60 and 80% in relation to total solids of the fluid extract, and the antioxidant capacity of the extracts was analyzed. It was observed that both the concentrated fluid extract, such as spouted bed-dried extracts showed antioxidant activity in vitro, but the dried extracts showed the strongest activity, with emphasis on the dried extract with 40% colloidal silicon dioxide (Mi40). The analysis of chemical constituents present in the active extracts using HPLC-DAD/ESI-MS and UPLC-MS suggested the presence of the flavonols (aglycone and O-glycosides) and catechin. Using UPLC-MS analysis were quantify the (+)-catechin, (-)-epicatechin and rutin that showed antioxidant activity in the DPPH and ORACFL assays. The fluid and spouted bed-dried extracts showed significant content of phenolic constituents (2.15 to 3.72 mg of GAE kg) and high antioxidant activity in both methods (IC50 between 7.98 and 51.79 ?g/ mL in DPPH and antioxidant capacity between 5828 and 15249 micromol TE/g extract in ORACFL). The results showed that, in general, the antioxidant activity and the chromatographic profiles of the dried extracts were not significantly affected by the drying operation in spouted bed, but the best results for antioxidant activity and higher amount of (+)-catechin, (-)-epicatechin and rutin were observed in the dry Mi40 with lowest percentage of drying adjuvant. To evaluate the behavior of active extracts in pharmaceutical formulation, the extracts with antioxidant activity have been incorporated into topical formulations (cream, gel cream and gel), setting up a comparative study of the antioxidant activity of the fluid and spouted bed-dried extracts and these in developed formulations. The best results were observed in terms of antioxidant activity for formulations cream, gel and gel cream containing the dried extract Mi40 as active at 10% / Mestrado / Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde / Mestra em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos