Submitted by Caroline Falcao (caroline.rfalcao@ufpe.br) on 2017-05-22T17:27:10Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_BeatrizLavoranteFinal_BC.pdf: 2045652 bytes, checksum: 19f106b93f6d316fc93419a636ca837a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-22T17:27:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_BeatrizLavoranteFinal_BC.pdf: 2045652 bytes, checksum: 19f106b93f6d316fc93419a636ca837a (MD5) Previous issue date: 2014-08-29 / O Complexo Industrial Portuário-SUAPE, localizado no complexo estuarino de Suape (Pernambuco, Brasil), conta com grandes empresas das mais diversas atividades produtivas. A região possui grande importância ecológica e econômica e estudos relatam a ocorrência de modificações fisiográficas, hidrológicas e ecológicas desde a implantação de SUAPE. Segundo estudos ecotoxicológicos realizados, a área apresenta contaminação moderada e variável. Contudo, ainda não foi possível indicar quais substâncias poderiam estar relacionadas com a toxicidade das amostras ambientais. Neste sentido, o teste de Avaliação e Identificação da Toxicidade – AIT surge como uma importante ferramenta, pois permite a identificação de contaminantes potencialmente causadores da toxicidade. O emprego de um ensaio ecotoxicológico rápido com um organismo-teste sensível antes e após as manipulações de AIT é necessário para este tipo de análise. Os náuplios de copépodos, dentre estes o da espécie Tisbe biminiensis, têm sido indicados para avaliação de amostras de água marinha devido a maior sensibilidade dos estágios larvais, porém o teste normalmente é realizado em microplacas o que o torna bastante laborioso. Este trabalho teve como objetivos aprimorar um protocolo para realização de bioensaios com náuplios de T. biminiensis e avaliar sua sensibilidade usando uma substância de referência, no caso o sulfato de zinco. Posteriormente, o teste foi empregado na avaliação da toxicidade de amostras de água superficial coletadas em diferentes pontos de Suape entre os anos de 2011 e 2013. Visando aumentar a sensibilidade do método, além dos parâmetros de mortalidade, desenvolvimento e inibição, também foram avaliados tamanho e estágio de desenvolvimento dos copepoditos. Para AIT foram estudadas amostras de água superficial coletadas em Abril e Setembro de 2013, sendo realizadas análises químicas de metais, amônia, hidrocarbonetos e agrotóxicos neste último mês. O tempo de duração do teste foi definido em 72 horas. Os testes de alimentação utilizando as microalgas Chaetoceros gracilis e Thalassiosira fluviatilis com e sem adição de ração para peixe demonstraram o pior desempenho de T. fluviatilis sem adição de ração como alimento. Foi verificado que o desenvolvimento nas concentrações de C. gracilis superiores a 2,5 x 105 células mL-1 foram estatisticamente maiores do que controle (água do mar sem adição de alimento) quando na temperatura de 28°C após 72 h. Entretanto a 25°C após 72 horas, apenas a partir da concentração de 5,5 x 105 células mL-1 de C. gracilis, o desenvolvimento dos náuplios para copepoditos foi superior ao controle, indicando que a temperatura de 28°C promove maior desenvolvimento. Logo, foram definidas as seguintes condições para o teste: concentração de C. gracilis de 2,5 x 105 células mL-1 , temperatura de 28°C e um tempo de 72 h. Após os sete testes de sensibilidade foram estimadas as CE50/72h, CL50/72h e a CENO em 3,25 ± 0.59; 3,46 ± 0.72 e 2,0 mg L- 1 para o ZnSO4.7H2O, indicando que os náuplios de T. biminiensis são tão sensíveis quanto outros copépodos frequentemente empregados em estudos ecotoxicológicos. Avaliando-se amostras de água superficial coletadas na região de Suape verificou-se a presença de toxicidade sub-letal para os náuplios de T. biminiensis, mais associada ao mês de Setembro, início do período seco. Dentre os parâmetros avaliados, a inibição foi o que mais indicou toxicidade, seguido pelo desenvolvimento. Apesar da obtenção das medidas dos comprimentos total e da cabeça (geral e por estágio de copepoditos) e da frequência de estágios reduzirem a praticidade do método, em um dos pontos de coleta elas aumentaram a detecção de efeitos tóxicos. O estudo de AIT indicou que os compostos orgânicos, os metais e a amônia seriam os principais agentes causadores da toxicidade das águas de Suape, sendo os resultados da caracterização da fase I do AIT considerados bastante complexos. Nas análises químicas, os Hidrocarbonetos Aromáticos de Petróleo Dissolvidos ou Dispersos estavam em níveis subletais, os agrotóxicos não foram detectados e houve diminuição das concentrações de Fe após a macroalga Ulva sp. A adição de novos parâmetros no teste com náuplios T. biminiensis foi importante para confirmação dos resultados obtidos. A variedade de agentes tóxicos indicados pode ser atribuída à diversidade de atividades realizadas na área, às diferentes influências sofridas pelos pontos estudados e ao regime de chuvas, marés e correntes, indicando a necessidade de monitoramento e avaliação constantes das condições ambientais da região. / The Suape estuarine complex (Pernambuco, Brazil) is located close to the industrial port complex-SUAPE which includes major companies from various productive activities. The region has great ecological and economic importance, and studies have reported the occurrence of physiographic, hydrological and ecological changes since the implementation of SUAPE. According ecotoxicological studies, the area has moderate and variable contamination. However, has not yet been possible to indicate which substances could be related to the toxicity of environmental samples. In this sense, the test for Toxicity Identification and Evaluation - TIE emerges as an important tool because it allows the identification of possible toxic agents. The use of a fast ecotoxicological test with a sensitive test organism before and after the manipulations of TIE is required for this type of analysis. The copepod nauplii, among these the species Tisbe biminiensis, have been indicated for evaluation of samples of estuarine and sea water due to increased sensitivity of the larval stages, but the test is usually performed in microplates which makes it very laborious. This study aimed to improve a protocol for conducting bioassays with nauplii of T. biminiensis and evaluate their sensitivity to zinc sulphate, a reference substance. Subsequently, the test was used to evaluate the toxicity of surface water samples collected at different points of Suape between the years 2011 and 2013. Aiming to increase the sensitivity of the method, beyond the parameters of mortality, development and inhibition, size and stage of development of copepodites were also evaluated. For AIT were studied samples collected in April and September 2013, chemical analysis of metals, ammonia, hydrocarbons and pesticides were performed in the last month. The duration of the test was 72 h. The feeding test using microalgae Chaetoceros gracilis and Thalassiosira fluviatilis with and without addition of fish ration showed the worst performance of T. fluviatilis as food. It was observed that the development C. gracilis concentrations above 2.5 x 105 cells mL-1 were significantly higher than control (sea water without the addition of food) when the temperature of 28 °C after 72 h. However, at 25 °C after 72 h, only at concentrations of 5.5 x 105 cells mL-1 C. gracilis, the development nauplii to copepodites were higher than the control, indicating that the temperature of 28 °C promotes further development. Then, the following conditions were established for the protocol: C. gracilis at 2.5 x 105 cells mL-1 as food, incubation at 28 °C and 72h duration. After the seven sensitivity tests were estimated CE50/72h, CL50/72h and NOEC of 3.25 ± 0:59; 3.46 ± 0.72 and 2.0 mg L -1 for ZnSO4.7H2O, indicating that the nauplii of T. biminiensis are as sensitive as other copepods employed in ecotoxicological studies. Was detected sub-lethal toxicity of surface water samples for the nauplii of T. biminiensis, more associated to September, early dry season. Among the parameters evaluated, inhibition was the most indicated toxicity, followed by the development. Despite obtaining measurements of the total length and head (general and by stage of copepodites) and the frequency of stages reduce the practicality of the method, one of the points, they increased the detection of toxic effects. The TIE study indicated that mainly organic compounds, metals and ammonia would be the toxicity agents of Suape waters, this characterization is considered complex. In chemical analysis, the HAPDDs were at sublethal levels, the pesticides were not detected and concentrations of Fe decreased after Ulva sp. The addition of new parameters in the test Nauplii T. biminiensis was important to confirm the results obtained. The variety of toxic agents can be attributed to the diversity of activities in the area, the different influences suffered by points studied and rainfall, tides and currents, indicating the need for constant monitoring and evaluation of environmental conditions in the region.