Com o objetivo de estudar a viabilidade de implantação e a sobrevivência além da ação dos lactobacilos no trato intestinal de humanos adultos, foram realizados dois tipos de tratamento, com duração de 45 dias ininterruptos. Os indivíduos foram divididos em dois grupos designados grupo A e grupo B. O grupo A consumiu iogurte natural e o grupo B consumiu iogurte natural e leite "in natura" tipo C. Para avaliar a ação dos lactobacilos sobre a flora intestinal e sua permanência no trato digestivo, foram efetuadas análises microbiológicas periódicas das fezes dos indivíduos. Os resultados obtidos permitem concluir que os lactobacilos podem permanecer no intestino mesmo após a interrupção da ingestão de iogurte, embora em números inferiores aos encontrados durante o período experimental, e que somente com ingestão diária desse produto será possível sua persistência exercendo efeito controlador sobre a flora intestinal. / With the objective of studying the possibility of the implantation and subsequent survival - as well as the action - of lactobacilli in the adult human intestinal tract, two types of treatment were administered during 45 uninterrupted days. The individual were divided into two groups, designated as group A and group B. Group A consumed natural yogurt, while group B consumed natural yogurt plus ordinary milk (called type C, in Brazil). In order to evaluate the effect of the lactobacilli on the intestinal flora and the permanence of such in the digestive tract, microbiological analyses were effected upon the feces of the same individuals. The results obtained permit to conclud that the lactobacilli may remain in the intestine even after interrupting the yogurt intake, though in smaller numbers than previously encontered during the experimental period, and that only with the daily intake of the said product is any permanence made possible, as well as the exercise of any controlling effect upon the intestinal flora.

LIMA JÚNIOR, Francisco José Batista de. Ação antiespasmódica e anti-inflamatória do cinamato de metila em trato gastrintestinal de ratos submetidos a modelo de colite por ácido acético. 2013. 99 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-22T13:13:21Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_fjblimajunior.pdf: 1622438 bytes, checksum: e5689fb1a406f1c272a9eb1e4d38c2b6 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-22T13:28:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_fjblimajunior.pdf: 1622438 bytes, checksum: e5689fb1a406f1c272a9eb1e4d38c2b6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-22T13:28:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_fjblimajunior.pdf: 1622438 bytes, checksum: e5689fb1a406f1c272a9eb1e4d38c2b6 (MD5) Previous issue date: 2013 / It was previously shown that the essential oil of Ocimum micranthum (EOOM), and its major constituent, methyl cinnamate (MC), have myorelaxant action on tracheal smooth muscle, airway anti-inflammatory and anti-nociceptive on rodents. The present work aimed to evaluate the antispasmodic and anti-inflammatory potential of MC on gastrointestinal tissues from rats subjected to acetic acid-induced colitis model. EOOM inhibited carbamylcholine- (CCh; 1 M) and KCl-induced (60 mM) contractions in stomach fundus strips with IC50 of 91.9 g/mL and 46.8 g/mL, respectively. It significantly reduced the basal tonus as well as the spontaneous contractions in duodenum. The isomers (Z)- or (E)-MC also inhibited CCh and KCl contractions in fundus, antrum, duodenum and colon strips, without differences between the effects caused by the isomers in each segment. MC significantly inhibited CCh in lower concentration in comparison with KCl, but with decreased potency if compared to atropine. (E)-MC inhibited intracellular calcium stores-dependent contractions, and its effect seems not to involve the activity of the nitric oxide synthase or the opening of potassium channels. Analyzed by confocal microscopy, freshly dissociated colon cells showed reduced basal cytosolic calcium levels (60%) after (E)-MC (600 M) exposure. In vivo, a first dose of (E)-MC (50 mg/kg) did not affect gastric contractions, but following a second dosage (50 mg/kg) administered a half an hour later, it reduced gastric contractions for 10 minutes. Colitis was induced by rectal instillation of acetic acid 5%. Sham group received only saline in instillation, while treated groups, beyond acid instillation, received (E)-CM 50 mg/kg/day p.o. or prednisolone 1 mg/kg/day p.o. during three days. Acetic acid instillation induced colitis that was macroscopically confirmed, leukocytosis, increased interleucin-1β and functional response loss due to voltage operated calcium channel disorder. These parameters were recovered by (E)-MC or prednisolone. Therefore, EOOM and CM have in vitro antispasmodic effect on rat gastrointestinal tract. The effect of CM involves reduction of the intracellular levels of calcium being independent of the nitric oxide synthase and potassium channels. CM has anti-inflammatory action comparable to prednisolone in magnitude. / Previamente demonstrou-se que o óleo essencial de Ocimum micranthum (OEOM) e seu constituinte majoritário, cinamato de metila (CM), têm ações miorrelaxante e antinflamatória em tecidos traqueais de ratos, e efeito antinociceptivo em camundongos. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial antiespasmódico e anti-inflamatório do CM no trato gastrintestinal de ratos submetidos a modelo de colite induzida por ácido acético. OEOM inibiu contrações induzidas por carbamilcolina (CCh; 1 M) e KCl (60 mM) em tiras de fundo de estômago com CI50 de 91,9 g/mL e 46,8 g/mL, respectivamente, e reduziu significativamente o tônus basal e amplitudes de contrações espontâneas de duodeno. CM, em conformações isoméricas (Z)- ou (E)-, também inibiu essas respostas induzidas por CCh e KCl em fundo, antro, duodeno e cólon, sem diferenças nos efeitos dos isômeros em cada segmento. CM começa a inibir as contrações induzidas por CCh em concentração mais baixa que KCl, contudo com potência menor se comparado aos efeitos da atropina. (E)-CM inibe contrações dependentes dos estoques intracelulares de cálcio, e seu efeito inibitório parece não depender da ação da óxido nítrico sintase ou da abertura de canais de potássio. Analisadas em microscópio confocal, células de cólon dissociadas a fresco tiveram nível citossólico de cálcio reduzido para 60% do basal após exposição a (E)-CM (600M). Avaliando a pressão intragástrica in vivo, uma dose de (E)-CM 50 mg/kg não afeta amplitude das contrações gástricas, mas se repetida após 30 minutos, as diminui por até 10 minutos. A indução de colite foi através de instilação de ácido acético a 5% via retal. O grupo sham recebeu instilação apenas de salina, e os grupos tratados, além da instilação de ácido receberam (E)-CM 50 mg/kg/dia ou prednisolona 1 mg/kg/dia durante três dias. A instilação com ácido acético induziu colite confirmada por alteração macroscópica, leucocitose, aumento de interleucina-1 tecidual e déficit funcional de resposta dependente de canais para cálcio operados por voltagem. Esses parâmetros foram revertidos pelos tratamentos com (E)-CM e prednisolona. Portanto, OEOM e CM apresentam ação antiespasmódica em trato gastrintestinal de ratos in vitro. O efeito do CM passa pela redução dos níveis intracelulares basais de cálcio e independe da participação da enzima óxido nítrico sintase e de canais de potássio. CM possui ação anti-inflamatória de magnitude comparável à prednisolona.

Com o objetivo de estudar a viabilidade de implantação e a sobrevivência além da ação dos lactobacilos no trato intestinal de humanos adultos, foram realizados dois tipos de tratamento, com duração de 45 dias ininterruptos. Os indivíduos foram divididos em dois grupos designados grupo A e grupo B. O grupo A consumiu iogurte natural e o grupo B consumiu iogurte natural e leite “in natura” tipo C. Para avaliar a ação dos lactobacilos sobre a flora intestinal e sua permanência no trato digestivo, foram efetuadas análises microbiológicas periódicas das fezes dos indivíduos. Os resultados obtidos permitem concluir que os lactobacilos podem permanecer no intestino mesmo após a interrupção da ingestão de iogurte, embora em números inferiores aos encontrados durante o período experimental, e que somente com ingestão diária desse produto será possível sua persistência exercendo efeito controlador sobre a flora intestinal. / With the objective of studying the possibility of the implantation and subsequent survival - as well as the action - of lactobacilli in the adult human intestinal tract, two types of treatment were administered during 45 uninterrupted days. The individual were divided into two groups, designated as group A and group B. Group A consumed natural yogurt, while group B consumed natural yogurt plus ordinary milk (called type C, in Brazil). In order to evaluate the effect of the lactobacilli on the intestinal flora and the permanence of such in the digestive tract, microbiological analyses were effected upon the feces of the same individuals. The results obtained permit to conclud that the lactobacilli may remain in the intestine even after interrupting the yogurt intake, though in smaller numbers than previously encontered during the experimental period, and that only with the daily intake of the said product is any permanence made possible, as well as the exercise of any controlling effect upon the intestinal flora.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:06:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006 / Introdução: A doença por citomegalovírus é uma das principais e mais comuns complicações pós-transplante. A doença gastrointestinal é a doença invasiva mais freqüente, podendo acometer qualquer segmento do trato digestivo e está relacionada à hemorragia digestiva e perfuração intestinal diminuindo a sobrevida dos pacientes transplantados. No Brasil, até o momento, não há trabalhos publicados na literatura sobre os aspectos clínicos e epidemiológicos da doença gastrointestinal por citomegalovírus em transplantados renais. Além disso, não há estudos que avaliam sistematicamente a sensibilidade da antigenemia no diagnóstico desta doença. Objetivos: Estudar os aspectos clínicos e epidemiológicos da doença do trato gastrointestinal por citomegalovírus após transplante renal e avaliar a sensibilidade da antigenemia para CMV como método diagnóstico para a doença. Materiais e Métodos: Trata-se de estudo retrospectivo envolvendo pacientes transplantados renais com sintomas gastrointestinais, Endoscopia Digestiva Alta e/ou Colonoscopia evidenciando um ou mais dos seguintes achados: enantema difuso, erosões difusas ou úlceras localizadas (múltiplas ou única) e biópsia de lesão do trato gastrointestinal com presença de alterações histopatológicas e inclusões citomegálicas em células epiteliais ou endoteliais. Foram incluídos os pacientes transplantados no período de 18 de agosto de 1998 a 31 de agosto de 2005. Resultados: A taxa de incidência de doença do trato gastrointestinal por citomegalovírus foi de 2,1%, sendo 1,3% em transplante de doador vivo e 4,3% em transplante de doador cadáver (P=0,001). O período póstransplante de ocorrência de doença foi variável, resultando em uma mediana de 66,5 dias (2,2 meses). Pacientes com doença primária, receptores de doador cadáver e aqueles que fizeram uso de micofenolato e/ou tratamento de indução apresentaram doença mais precoce. As regiões mais acometidas, em ordem decrescente de freqüência, foram estômago, esôfago, duodeno e cólon. Em 13 pacientes (17,5%) houve comprometimento de 2 ou mais locais. Vinte e três pacientes (31%) apresentaram febre e, manifestações sistêmicas associadas, foram relatadas em 58,1% dos casos. Vinte e dois pacientes (29,7%) não apresentaram nenhum destes sintomas. Leucopenia (leucócitos < 3.500/mm³) e plaquetopenia (plaquetas < 150.000/mm³) foram as alterações laboratoriais mais comuns, sendo evidenciadas xiv (associadas ou não) em 37 pacientes (50%). Antigenemia para CMV foi solicitada em 97,3% dos casos (72 pacientes) e resultou negativa em 33,3%. Comparando os pacientes com antigenemia positiva e negativa, houve diferença significante em relação à ocorrência de manifestações sistêmicas, sendo observada com menor freqüência no grupo de pacientes com antigenemia negativa. Em análise univariada, doador cadáver, doença primária, tratamento anti-rejeição e valor elevado de antigenemia foram associados com doença recorrente. Complicações clínicas associadas à doença do trato gastrointestinal por CMV, tais como hemorragias e perfuração visceral ocorreu em 16,2% dos pacientes. Um paciente evoluiu a óbito relacionado à doença, sendo 1,3% a taxa de mortalidade atribuída neste grupo de pacientes durante o período do estudo. Conclusões: O presente estudo reafirma o papel da doença como importante causa de morbidade em pacientes transplantados renais. A antigenemia para citomegalovírus foi um método limitado para o diagnóstico de doença do trato gastrointestinal, já que uma porcentagem relevante dos pacientes apresentou exame negativo. Portanto, o diagnóstico deve ser feito através da correlação entre os sinais e sintomas clínicos, achados endoscópicos e histopatológicos compatíveis com a doença. Os resultados obtidos podem sugerir alguns fatores de risco para doença do trato gastrointestinal, tais como, transplante de doador cadáver, uso de micofenolato mofetil e tratamento de indução ou para rejeição. Para a confirmação destes dados é necessário realização de estudo utilizando grupo controle e análise multivariada. / Introduction: CMV disease is one of the most frequent complications following kidney transplantation. The gastrointestinal tract is the site most frequently affected, involving virtually any specific segment. Bleeding and/or intestinal perforation may occur, reducing both patient and graft survival. In Brazil, to our knowledge no study analyzing a large cohort of patients to study clinical and epidemiological aspects of CMV gastrointestinal disease has been yet published. Moreover, there are no studies that systematically evaluate the sensitivity of antigenemia in the diagnosis of CMV gastrointestinal disease. Objectives: To study the clinical and epidemiological aspects of CMV gastrointestinal disease in kidney transplant patients and to evaluate the sensitivity of antigenemia as a diagnostic method in this setting. Patients and Methods: We conducted a retrospective study comprising kidney transplant patients with symptoms related to the gastrointestinal tract and a endoscopy/colonoscopy with anatomic lesions (diffuse edema, erosions or ulcers) and a biopsy of the referred lesions with histopathological findings showing typical CMV inclusions in endothelial and epithelial cells. Patients transplanted between 18 August 1998 and 31 August 2005 were included. Results: the overall incidence of CMV disease was 2.1%, being 1.3% in patients with a living donor and 4.3% with a deceased donor (p= 0.001). The disease occurred a median of 66.5 days post-transplant. Patients with primary disease, receptors of a deceased donor and those using mycophelolate mofetil (MMF) were diagnosed earlier. The stomach was the most frequent site of disease followed by esophagus, duodenum and colons. In three patients, more than one site was involved (17.5%). Twenty three patients (31%) had fever and general symptoms were reported in 58.1% of the patients. Twenty two patients (29.7%) were asymptomatic. Leukopenia (< 3500 /mm3) and thrombocytopenia (< 150.000 mm3) were the most common laboratorial findings, occurring associated or not in 37 patients (50%). Antigenemia was requested for 72 patients (97.3%) and was negative in 33.3%. Comparing patients with positive and negative antigenemia, there was a significant difference regarding asymptomatic patients, more frequently observed in the negative group. Of 58 patients with follow-up available, Disease recurrence was observed in 20.7%. In univariate analysis, a deceased donor, primary disease, anti-rejection therapy and a higher antigenemia value were significantly associated with disease recurrence. Clinical complications associated to CMV gastrointestinal disease, such as bleeding and visceral perforation occurred in 16.2% of all patients. One patient died as a direct consequence of the disease leading to a 1.3% mortality rate. Conclusions: The present study emphasizes the role of CMV gastrointestinal disease in post-transplant morbidity in kidney transplant patients. Antigenemia was a limited tool for the diagnosis of the disease, with a high percentage of antigenemia negative patients. Thus, diagnosis should rely on combined clinical, endoscopic and histopathological information. Some risk factor for CMV gastrointestinal disease, such as mycophenolate mofetil , induction or anti-rejection therapy and the use of deceased donors are suggested, but should rely on information using a control group with multivariate analysis. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T16:31:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 289039.pdf: 1645045 bytes, checksum: 04fc5f82cc2565abe48b6acb5256d1ff (MD5) / O ensaio PAMPA tem demonstrado sua versatilidade desde 1998, sendo utilizado para avaliar a permeabilidade passiva transcellular de fármacos/compostos, e tem ganhado espaço por ser de baixo custo, muito rápido e por auxiliar, particularmente, na elucidação dos mecanismos de transporte, em conjunto com os ensaios que utilizam células Caco-2. Para padronizar este ensaio no Laboratório de Virologia Aplicada da UFSC, dois modelos: o PAMPA TGI, variante Double-Sink e o PAMPA Pele foram selecionados por mimetizar, respectivamente, a absorção de fármacos/compostos através do trato gastrointestinal e da pele,sendo que estas duas vias foram escolhidas pela fácil adesão do paciente aos tratamentos por via oral e tópica. Inicialmente, para demonstrar a funcionalidade dos modelos em estudo, foram selecionados fármacos de alta e baixa permeabilidade, classificados segundo o Sistema de Classificação Biofarmacêutica. Além dos fármacos utilizados para a padronização, alguns cardenolídeos e o composto galato de pentila foram selecionados para testar os modelos padronizados. Para a quantificação das amostras nos compartimentos aceptores e doadores das placas usadas nos experimentos, foram desenvolvidos e validados métodos analíticos por espectrofotometria no UV, segundo critérios preconizados pela ANVISA e ICH. Os resultados obtidos na validação analítica demonstraram que tais métodos foram suficientemente específicos, lineares, precisos e exatos para quantificar as amostras. A partir dos resultados obtidos nos modelos PAMPA TGI, variante Double-Sink e PAMPA Pele, foram calculados os coeficientes de permeabilidade efetiva (Log Pe) para os fármacos/compostos testados, que permearam através das membranas lipídicas usadas e, desta forma, foi possível correlacioná-los com dados da literatura, quando existentes. O galato de pentila apresentou alta permeabilidade nos dois modelos avaliados; já os cardenolídeos apresentaram baixa permeabilidade nos dois modelos, exceto a digitoxigenina, que permeou através da membrana usada no ensaio PAMPA TGI, variante Double-Sink. A integridade das membranas lipídicas usadas nos dois modelos foi avaliada com corantes marcadores de baixa permeabilidade, Azul de Cresil Brilhante (ACB) e Lucifer Yellow (LY), e foi possível demonstrar a integridade e a uniformidade destas membranas, pela baixa passagem do ACB e pela rejeição do LY. / PAMPA assay has demonstrated its versatility since 1998, and it has been used to assess the passive transcellular permeability of drug/compounds, and has gained importance because of its low cost, fast making profile, and also for its particularly help on the elucidation of transport mechanisms together with the assays that make use of caco-2 cells. In order to standardize this assay in the Laboratorio de Virologia Aplicada UFSC, two models: variant Double-Sink PAMPA-GIT and Skin PAMPA were selected by its mimetizing effect on drugs absorption through the gastrointestinal tract and skin, respectively. These two routes were chosen because of easy patient adherence to topical and oral treatment. Initially, to demonstrate the studying models functionality, drugs with high and low permeability were selected, as classified by the Biopharmaceutics Classification System. In addition to the drugs used for standardization, some cardenolide compounds and pentyl gallate were selected to test the standard models. To quantify the samples in compartment acceptors and donors of the plates used in the experiments were developed and analytical methods were validated by UV spectrophotometry, according to the criteria recommended by ICH and ANVISA. The results obtained in the analytical validation showed that these methods were sufficiently specific, linear, precise and accurate to quantify the samples. From the results obtained in PAMPA GIT model, variant Double-Sink PAMPA and skin, the effective permeability coefficients were calculated (log pe) for the drugs / compounds tested that permeated through the lipid membranes used and thus could correlate them with the literature data. The pentyl gallate showed high permeability in the two models evaluated, the cardenolide already had low permeability in the two models, except the digitoxigenin, that permeated through the membrane used in the PAMPA assay TGI, variant Double-Sink. The integrity of the lipid membranes used in both models was assessed with colored markers of low permeability, brilliant cresyl blue (ACB) and Lucifer Yellow (LY), and it was possible to demonstrate the integrity and uniformity of these membranes, the low pass and the ACB rejection of LY.

Microrganismos do gênero Clostridium, particularmente Clostridium petfringens, permanecem como um grave problema na avicultura mundial, do ponta de vista de saúde animal, de saúde pública tanto quanto econômico. O Clostridiurn perfrngens é considerado um habitante comensal do trato intestinal de frangos de corte, no entanto, quando submetidos a alteraçóes na dieta ou mesmo então após a abolição de determinados promotores de crescimento pela Comissão das Comunidades da União Européia, o controle da população microbiana tornou-se reduzido. Uma dieta rica em grãos. trigo, cevada, e arroz aumentam a viscosidade intestinal através do aumento da produção de muco, como conseqüência do aumento de retenção de água no Iúmem intestinal e pela ausência de enzimas capazes de agir sobre os produtos da digestão destes carboidratos. De fato, o aumento do crescimento microbiano comprometem as funçóes da mucosa intestinal. A partir destes fatores, o presente trabalho tem como objetivo quantificar Clostridium perfrngens em duas diferentes dietas com e sem promotor de crescimento, utilizando um método analítico alternativo em dois segmentos do trato intestinal de frangos de corte. Para avaliar este método foi proposto a inclusão de alguns critérios de verificação do protocolo de validação para métodos microbiológicos alternativos, métodos quantitativos, referenciados na NordVal Validation (2005). Para avaliar o efeito das dietas foram analisadas 73 aves quanto a presença de Clostridium periringens pelo método bacteriológico convencional segundo MAPA e BAM adaptados de acordo com a natureza da amostra no laboratório do CDPA-UFRGS pelo seguinte protocolo: l g de inóculo de raspado de ileo e 1 g de conteúdo cecal acondicionados em 9 mL de água peptonada tamponada 0,1%, diluição 1:10, homogenizados e diluídos até a diluição 10º , posteriormente mantidos em banho-maria a 80°C durante 10 minutos seguido de refrigeração em água a 20°C. aliquotas de 1 mL eram inoculadas em ágar TSC e incubados a 37" C por 24 horas. Foram analisados 4 tratamentos: T1- dieta vegetal com promotor de crescimento, T2- dieta vegetal sem promotor de crescimento, T3- dieta vegetal milho e soja mais produtos de origem animal com promotor de crescimento e T4- dieta vegetal milho soja mais produtos de origem animal sem promotor de crescimento. A dieta do tratamento 3 obteve menor quantificação para Clostridium perfrngens nas diferentes idades de coleta. Algumas combinações de amostras intestinais diferiram com maior destaque. As amostras 26, 28, 42 e 48 são consideradas significativas com valores menores que o nível de 10% de significância (<0,10) - para interações triplices utiliza-se um nível de significância maior. Podemos considerar que a partir do 16" dia de idade iniciou a multiplicação de Clostridium perfringens no trato intestinal das aves e a partir do 25º dia de idade ocorreu uma redução mais significativa no ceco e íleo. Os ensaios para verificação do limite de detecção do método usado para ileo e ceco demonstraram um intervalo de detecção entre >40 células e c421 células por mL. Desta forma o método demonstrou um limite de detecçáo por perda de recuperação de células nas matrizes de ceco indicando que os resultados são quantitativamente maiores nas amostras. Possivelmente fatores interferentes tais como, analíticos, redução de ph, ácidos graxos de cadeia curta, exposição ao oxigênio podem ter interferido sob a recuperação das células. / Microorganism of the genus Clostridium particularly Clostridium perfringens, rernain a serious problern to the world's poultry industry, in aspects not only of animal and hurnan health but alço econornical. Clostridium perfringens considered a co mensal inhabitant of the intestinal tract of broiler chickens, however when subjected to diet alterations or even after elimination of certain growth prornoters by the Cornmission of the European Cornmunities, the control of the rnicrobial population has become reduced. A diet rich in grains such as wheat, barley and rice, increase the intestinal viscosity through increasing the production of mucous as a consequence of water retention in the intestinal lumen and the absence of enzyrnes capable of acting upon the products of the digestion of these carbohydrates. In fact, microbial growth affects the intestinal rnucous function. Based on these factors the following study has the objective to analyze the influente of two diets with or without growth prornoters under the evaluation of a new method for the isolation and quantification of Clostridium perfringens in two segrnents of the gastrointestinal tract of broiler chickens. To evaluate this method there were proposed the inclusion of some verification criteria for the validation protocol in alternative rnicrobiological methods, quantitative rnethods referred to in NordVal Validation (2005). To evaluate the effect of the diets, 73 birds were analyzed as to the presence of Clostridium perfrngens using the conventional bacteriological method according to MAPA and BAM adapted to the type of sample in the CDPAIUFRGS laboratory using the following protocol: l g of scraped inoculurn of the ileurn and 1 g of cecurn content suspended in 9 rnL of peptonated and parnptonated water at 0,1%, dilution 1:10, homogenized and diluted to 10". later maintained in a hot water bath of 80°C during 10 rninutes followed by refrigeration in water at 20°C, samples of 1 mL were suspended in agar TSC and incubated at 37" C for 24 hours. Four different treatments were analyzed: TI- vegetable diet with a growth promoter, T2- vegetable diet without a growth promoter, T3- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products and a growth promoter and T4- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products without a growth promoter. The diet of treatment 3 obtained the lowest quantification for Clostridium perfrngens at different collection times. Some combinations of ileum samples had outstanding differences. Samples 26,28, 42 and 48 are considered significant with values lower than the 10% level of significance (>0,10) -for the triple interactions a greater level of significance is utilized. We may consider that from the 16th day of development the multiplication of Clostridium perfringens began, in the gastrointestinal tract of the chickens and from the 25th day of development there occurred a more significant reduction in the ileum and cecum. The practices to verify the limit of detection of the method used for the ileum and cecum demonstrated an interval of detection between >40 cells and c421 cells per mL. As such, the method showed a limit of detection per loss of cell recuperation in the cecum matrix indicating results that are quantitatively greater in the samples. Possibly, interfering factors such as analyiical, reduction of ph, short-chain fatty acids, exposure to oxygen could have interfered with the recuperation of cells.

Microrganismos do gênero Clostridium, particularmente Clostridium petfringens, permanecem como um grave problema na avicultura mundial, do ponta de vista de saúde animal, de saúde pública tanto quanto econômico. O Clostridiurn perfrngens é considerado um habitante comensal do trato intestinal de frangos de corte, no entanto, quando submetidos a alteraçóes na dieta ou mesmo então após a abolição de determinados promotores de crescimento pela Comissão das Comunidades da União Européia, o controle da população microbiana tornou-se reduzido. Uma dieta rica em grãos. trigo, cevada, e arroz aumentam a viscosidade intestinal através do aumento da produção de muco, como conseqüência do aumento de retenção de água no Iúmem intestinal e pela ausência de enzimas capazes de agir sobre os produtos da digestão destes carboidratos. De fato, o aumento do crescimento microbiano comprometem as funçóes da mucosa intestinal. A partir destes fatores, o presente trabalho tem como objetivo quantificar Clostridium perfrngens em duas diferentes dietas com e sem promotor de crescimento, utilizando um método analítico alternativo em dois segmentos do trato intestinal de frangos de corte. Para avaliar este método foi proposto a inclusão de alguns critérios de verificação do protocolo de validação para métodos microbiológicos alternativos, métodos quantitativos, referenciados na NordVal Validation (2005). Para avaliar o efeito das dietas foram analisadas 73 aves quanto a presença de Clostridium periringens pelo método bacteriológico convencional segundo MAPA e BAM adaptados de acordo com a natureza da amostra no laboratório do CDPA-UFRGS pelo seguinte protocolo: l g de inóculo de raspado de ileo e 1 g de conteúdo cecal acondicionados em 9 mL de água peptonada tamponada 0,1%, diluição 1:10, homogenizados e diluídos até a diluição 10º , posteriormente mantidos em banho-maria a 80°C durante 10 minutos seguido de refrigeração em água a 20°C. aliquotas de 1 mL eram inoculadas em ágar TSC e incubados a 37" C por 24 horas. Foram analisados 4 tratamentos: T1- dieta vegetal com promotor de crescimento, T2- dieta vegetal sem promotor de crescimento, T3- dieta vegetal milho e soja mais produtos de origem animal com promotor de crescimento e T4- dieta vegetal milho soja mais produtos de origem animal sem promotor de crescimento. A dieta do tratamento 3 obteve menor quantificação para Clostridium perfrngens nas diferentes idades de coleta. Algumas combinações de amostras intestinais diferiram com maior destaque. As amostras 26, 28, 42 e 48 são consideradas significativas com valores menores que o nível de 10% de significância (<0,10) - para interações triplices utiliza-se um nível de significância maior. Podemos considerar que a partir do 16" dia de idade iniciou a multiplicação de Clostridium perfringens no trato intestinal das aves e a partir do 25º dia de idade ocorreu uma redução mais significativa no ceco e íleo. Os ensaios para verificação do limite de detecção do método usado para ileo e ceco demonstraram um intervalo de detecção entre >40 células e c421 células por mL. Desta forma o método demonstrou um limite de detecçáo por perda de recuperação de células nas matrizes de ceco indicando que os resultados são quantitativamente maiores nas amostras. Possivelmente fatores interferentes tais como, analíticos, redução de ph, ácidos graxos de cadeia curta, exposição ao oxigênio podem ter interferido sob a recuperação das células. / Microorganism of the genus Clostridium particularly Clostridium perfringens, rernain a serious problern to the world's poultry industry, in aspects not only of animal and hurnan health but alço econornical. Clostridium perfringens considered a co mensal inhabitant of the intestinal tract of broiler chickens, however when subjected to diet alterations or even after elimination of certain growth prornoters by the Cornmission of the European Cornmunities, the control of the rnicrobial population has become reduced. A diet rich in grains such as wheat, barley and rice, increase the intestinal viscosity through increasing the production of mucous as a consequence of water retention in the intestinal lumen and the absence of enzyrnes capable of acting upon the products of the digestion of these carbohydrates. In fact, microbial growth affects the intestinal rnucous function. Based on these factors the following study has the objective to analyze the influente of two diets with or without growth prornoters under the evaluation of a new method for the isolation and quantification of Clostridium perfringens in two segrnents of the gastrointestinal tract of broiler chickens. To evaluate this method there were proposed the inclusion of some verification criteria for the validation protocol in alternative rnicrobiological methods, quantitative rnethods referred to in NordVal Validation (2005). To evaluate the effect of the diets, 73 birds were analyzed as to the presence of Clostridium perfrngens using the conventional bacteriological method according to MAPA and BAM adapted to the type of sample in the CDPAIUFRGS laboratory using the following protocol: l g of scraped inoculurn of the ileurn and 1 g of cecurn content suspended in 9 rnL of peptonated and parnptonated water at 0,1%, dilution 1:10, homogenized and diluted to 10". later maintained in a hot water bath of 80°C during 10 rninutes followed by refrigeration in water at 20°C, samples of 1 mL were suspended in agar TSC and incubated at 37" C for 24 hours. Four different treatments were analyzed: TI- vegetable diet with a growth promoter, T2- vegetable diet without a growth promoter, T3- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products and a growth promoter and T4- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products without a growth promoter. The diet of treatment 3 obtained the lowest quantification for Clostridium perfrngens at different collection times. Some combinations of ileum samples had outstanding differences. Samples 26,28, 42 and 48 are considered significant with values lower than the 10% level of significance (>0,10) -for the triple interactions a greater level of significance is utilized. We may consider that from the 16th day of development the multiplication of Clostridium perfringens began, in the gastrointestinal tract of the chickens and from the 25th day of development there occurred a more significant reduction in the ileum and cecum. The practices to verify the limit of detection of the method used for the ileum and cecum demonstrated an interval of detection between >40 cells and c421 cells per mL. As such, the method showed a limit of detection per loss of cell recuperation in the cecum matrix indicating results that are quantitatively greater in the samples. Possibly, interfering factors such as analyiical, reduction of ph, short-chain fatty acids, exposure to oxygen could have interfered with the recuperation of cells.

Microrganismos do gênero Clostridium, particularmente Clostridium petfringens, permanecem como um grave problema na avicultura mundial, do ponta de vista de saúde animal, de saúde pública tanto quanto econômico. O Clostridiurn perfrngens é considerado um habitante comensal do trato intestinal de frangos de corte, no entanto, quando submetidos a alteraçóes na dieta ou mesmo então após a abolição de determinados promotores de crescimento pela Comissão das Comunidades da União Européia, o controle da população microbiana tornou-se reduzido. Uma dieta rica em grãos. trigo, cevada, e arroz aumentam a viscosidade intestinal através do aumento da produção de muco, como conseqüência do aumento de retenção de água no Iúmem intestinal e pela ausência de enzimas capazes de agir sobre os produtos da digestão destes carboidratos. De fato, o aumento do crescimento microbiano comprometem as funçóes da mucosa intestinal. A partir destes fatores, o presente trabalho tem como objetivo quantificar Clostridium perfrngens em duas diferentes dietas com e sem promotor de crescimento, utilizando um método analítico alternativo em dois segmentos do trato intestinal de frangos de corte. Para avaliar este método foi proposto a inclusão de alguns critérios de verificação do protocolo de validação para métodos microbiológicos alternativos, métodos quantitativos, referenciados na NordVal Validation (2005). Para avaliar o efeito das dietas foram analisadas 73 aves quanto a presença de Clostridium periringens pelo método bacteriológico convencional segundo MAPA e BAM adaptados de acordo com a natureza da amostra no laboratório do CDPA-UFRGS pelo seguinte protocolo: l g de inóculo de raspado de ileo e 1 g de conteúdo cecal acondicionados em 9 mL de água peptonada tamponada 0,1%, diluição 1:10, homogenizados e diluídos até a diluição 10º , posteriormente mantidos em banho-maria a 80°C durante 10 minutos seguido de refrigeração em água a 20°C. aliquotas de 1 mL eram inoculadas em ágar TSC e incubados a 37" C por 24 horas. Foram analisados 4 tratamentos: T1- dieta vegetal com promotor de crescimento, T2- dieta vegetal sem promotor de crescimento, T3- dieta vegetal milho e soja mais produtos de origem animal com promotor de crescimento e T4- dieta vegetal milho soja mais produtos de origem animal sem promotor de crescimento. A dieta do tratamento 3 obteve menor quantificação para Clostridium perfrngens nas diferentes idades de coleta. Algumas combinações de amostras intestinais diferiram com maior destaque. As amostras 26, 28, 42 e 48 são consideradas significativas com valores menores que o nível de 10% de significância (<0,10) - para interações triplices utiliza-se um nível de significância maior. Podemos considerar que a partir do 16" dia de idade iniciou a multiplicação de Clostridium perfringens no trato intestinal das aves e a partir do 25º dia de idade ocorreu uma redução mais significativa no ceco e íleo. Os ensaios para verificação do limite de detecção do método usado para ileo e ceco demonstraram um intervalo de detecção entre >40 células e c421 células por mL. Desta forma o método demonstrou um limite de detecçáo por perda de recuperação de células nas matrizes de ceco indicando que os resultados são quantitativamente maiores nas amostras. Possivelmente fatores interferentes tais como, analíticos, redução de ph, ácidos graxos de cadeia curta, exposição ao oxigênio podem ter interferido sob a recuperação das células. / Microorganism of the genus Clostridium particularly Clostridium perfringens, rernain a serious problern to the world's poultry industry, in aspects not only of animal and hurnan health but alço econornical. Clostridium perfringens considered a co mensal inhabitant of the intestinal tract of broiler chickens, however when subjected to diet alterations or even after elimination of certain growth prornoters by the Cornmission of the European Cornmunities, the control of the rnicrobial population has become reduced. A diet rich in grains such as wheat, barley and rice, increase the intestinal viscosity through increasing the production of mucous as a consequence of water retention in the intestinal lumen and the absence of enzyrnes capable of acting upon the products of the digestion of these carbohydrates. In fact, microbial growth affects the intestinal rnucous function. Based on these factors the following study has the objective to analyze the influente of two diets with or without growth prornoters under the evaluation of a new method for the isolation and quantification of Clostridium perfringens in two segrnents of the gastrointestinal tract of broiler chickens. To evaluate this method there were proposed the inclusion of some verification criteria for the validation protocol in alternative rnicrobiological methods, quantitative rnethods referred to in NordVal Validation (2005). To evaluate the effect of the diets, 73 birds were analyzed as to the presence of Clostridium perfrngens using the conventional bacteriological method according to MAPA and BAM adapted to the type of sample in the CDPAIUFRGS laboratory using the following protocol: l g of scraped inoculurn of the ileurn and 1 g of cecurn content suspended in 9 rnL of peptonated and parnptonated water at 0,1%, dilution 1:10, homogenized and diluted to 10". later maintained in a hot water bath of 80°C during 10 rninutes followed by refrigeration in water at 20°C, samples of 1 mL were suspended in agar TSC and incubated at 37" C for 24 hours. Four different treatments were analyzed: TI- vegetable diet with a growth promoter, T2- vegetable diet without a growth promoter, T3- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products and a growth promoter and T4- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products without a growth promoter. The diet of treatment 3 obtained the lowest quantification for Clostridium perfrngens at different collection times. Some combinations of ileum samples had outstanding differences. Samples 26,28, 42 and 48 are considered significant with values lower than the 10% level of significance (>0,10) -for the triple interactions a greater level of significance is utilized. We may consider that from the 16th day of development the multiplication of Clostridium perfringens began, in the gastrointestinal tract of the chickens and from the 25th day of development there occurred a more significant reduction in the ileum and cecum. The practices to verify the limit of detection of the method used for the ileum and cecum demonstrated an interval of detection between >40 cells and c421 cells per mL. As such, the method showed a limit of detection per loss of cell recuperation in the cecum matrix indicating results that are quantitatively greater in the samples. Possibly, interfering factors such as analyiical, reduction of ph, short-chain fatty acids, exposure to oxygen could have interfered with the recuperation of cells.

Dispepsia funcional e hipolactasia primária do tipo adulto (HPTA) são duas condições altamente prevalentes na prática clínica. Ambas podem coexistir ou até mesmo serem confundidas devido à sobreposição de alguns dos seus sintomas, principalmente a sensação de distensão abdominal. No entanto, a literatura é escassa em relação a estudos que tenham avaliado a associação entre a dispepsia funcional e a HPTA. O presente trabalho tem o objetivo investigar a associação entre a HPTA e a dispepsia funcional, através da análise molecular da HPTA em pacientes dispépticos funcionais e controles assintomáticos. Pacientes dispépticos funcionais (conforme os critérios de Roma III) e voluntários assintomáticos foram convidados para participar do estudo. Indivíduos com genótipo CC do polimorfismo de nucleotídeo único -13910C/T eram considerados portadores de HPTA. Os sintomas dispépticos (dor em abdômen superior, náuseas, vômitos, sensação de distensão abdominal e saciedade precoce) foram avaliados através de um questionário validado (Porto Alegre Dyspeptic Symptoms Questionnaire). Foram incluídos 408 indivíduos no estudo (197 dispépticos funcionais e 211 controles). HPTA foi identificada em 88 (44,7%) dispépticos funcionais e 107 controles (50,7%) (P=0,468). No grupo dos dispépticos funcionais, os escores dos sintomas dispépticos foram comparados entre os pacientes classificados como portadores de HPTA e aqueles classificados como “não portadores de HPTA”. Foi observado maior escore da sensação de distensão abdominal em dispépticos funcionais com HPTA do que em dispépticos sem HPTA (P=0,014). Não foram observadas diferenças entre os grupos em relação aos escores dos demais sintomas. Em conclusão, a ausência de diferença na frequência de HPTA entre todos os dispépticos funcionais e o grupo de indivíduos assintomáticos indica que não há uma associação entre a HPTA e a dispepsia funcional como um todo. No entanto, o maior escore da sensação de distensão abdominal entre os dispépticos funcionais com HPTA sugere um papel da HPTA em uma parcela dos pacientes com dispepsia funcional. / Functional dyspepsia and Adult Type Hypolactasia (ATH) are frequent conditions that may coexist or even be confounded. There may be some overlap between their symptoms, especially abdominal bloating. Studies on this association are scarce. The aim of the study is to investigate the association between functional dyspepsia and ATH, through molecular analysis of ATH in functional dyspeptics and asymptomatic individuals. Patients with functional dyspepsia according to Rome III criteria and volunteers for blood donation were invited to participate in the study. A CC genotype por -13910C/T SNP was diagnostic of ATH. Five symptoms of functional dyspepsia (upper abdominal pain, nausea, vomiting, abdominal bloating and early satiety) were evaluated using a validated questionnaire (Porto Alegre Dyspeptic Symptoms Questionnaire). A total of 408 subjects were included in the study (197 functional dyspeptics and 211 controls). Eighty-eight dyspeptic patients (44.7%) had ATH, compared to 107 individuals (50.7%) in the control group (P=0.468). In the group of dyspeptic patients, mean scores of symptoms were compared between those classified as ATH and non-ATH. Dyspeptic patients with ATH had higher scores for abdominal bloating, compared to non-ATH patients (P=0.014). The scores of the other dyspeptic symptoms were not statistically different between those two groups. In conclusion, the similar frequency of ATH in patients with functional dyspepsia and asymptomatic individuals indicate an absence of association between functional dyspepsia and ATH. However, our data of higher bloating scores among functional dyspeptics with ATH suggest a possible role of ATH in a subset of patients with functional dyspepsia.

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