BACKGROUND:Interruption of vector-borne transmission of Trypanosoma cruzi remains an unrealized objective in many Latin American countries. The task of vector control is complicated by the emergence of vector insects in urban areas.METHODS:Utilizing data from a large-scale vector control program in Arequipa, Peru, we explored the spatial patterns of infestation by Triatoma infestans in an urban and peri-urban landscape. Multilevel logistic regression was utilized to assess the associations between household infestation and household- and locality-level socio-environmental measures.RESULTS:Of 37,229 households inspected for infestation, 6,982 (18.8% / 95% CI: 18.4 - 19.2%) were infested by T. infestans. Eighty clusters of infestation were identified, ranging in area from 0.1 to 68.7 hectares and containing as few as one and as many as 1,139 infested households. Spatial dependence between infested households was significant at distances up to 2,000 meters. Household T. infestans infestation was associated with household- and locality-level factors, including housing density, elevation, land surface temperature, and locality type.CONCLUSIONS:High levels of T. infestans infestation, characterized by spatial heterogeneity, were found across extensive urban and peri-urban areas prior to vector control. Several environmental and social factors, which may directly or indirectly influence the biology and behavior of T. infestans, were associated with infestation. Spatial clustering of infestation in the urban context may both challenge and inform surveillance and control of vector reemergence after insecticide intervention.

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / Mediante el uso de morfometría geométrica, el presente estudio generó una base de datos de las características morfométricas de cabezas de T. infestans de laboratorio, lo que permitirá realizar comparaciones con vectores capturados en el medio ambiente, estableciendo las posibles variaciones presentes entre poblaciones silvestres y de laboratorio. Se estudió un total de 200 individuos obtenidos del Laboratorio de Parasitología de la Facultad de Medicina, Campus Occidente de la Universidad de Chile, los que fueron mantenidos bajo condiciones de laboratorio (25 ºC, 45% humedad relativa y alimentados con sangre de ave). Estos correspondieron a imagos machos, imagos hembras y ninfas IV y V, utilizándose 50 individuos de cada estadio. Para los análisis se recurrió a los programas computacionales de la serie TPS (Thin-plate spline), TPSdig, TPSreg y TPSrelw; para los análisis multivariados se utilizó el programa estadístico JMP (S.A.S. Institute). No se observaron diferencias en conformación entre individuos y entre grupos mediante los análisis de componentes principales y análisis discriminante, pero si se evidenció diferencia significativa en cuanto al tamaño de los diferentes estadios (p < 0.0001). Este aumenta desde el estadio ninfal IV hacia el estadio adulto. Además, se evidenció dimorfismo sexual mediante los análisis de tamaño, siendo la hembra más grande que el macho. Las ninfas de IV estadio presentaron una baja predicción, mientras que las ninfas de V mostraron mayor valor predictivo en relación a las de IV estadio. La ausencia de similitudes en conformación posiblemente se debe a que los grupos pertenecen a una misma población con características genéticas propias y sometidas a un medio ambiente homogéneo. El aumento de tamaño desde los estadios ninfales al adulto está dado por el desarrollo hemimetabólico. Debido al bajo nivel de predicción de las ninfas de IV estadio, se recomienda utilizar las ninfas de V estadio, ya que presentaron un mayor valor predictivo, mostrando cambios más marcados que permiten diferenciarlos de los adultos. Se corroboró la utilidad del ocelo como punto utilizado en estudios de morfometría geométrica y tradicional. Se determinó la utilidad del punto de unión entre cuello y cabeza como punto homólogo, permitiendo comparar los estadios ninfales con los adultos / Proyecto Nº 1070960 del Fondo Nacional de Desarrollo Científico y Tecnológico (FONDECYT)

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La enfermedad de Chagas, zoonosis ampliamente distribuida en América, es causada por el protozoo Trypanosoma cruzi que es transmitido principalmente a través de las deyecciones de insectos hematófagos de la subfamilia Reduviidae. En Chile existen tres vectores reconocidos: Triatoma infestans (ciclo doméstico), Mepraia spinolai (ciclo silvestre) y Mepraia gajardoi (ciclo silvestre, pero de zonas costeras) denominadas vulgarmente como vinchucas. El objetivo de esta memoria fue determinar la frecuencia de infección por T. cruzi en los perros procedentes de las viviendas con índice de infestación positivo a T. infestans en las provincias de Petorca, San Felipe y Los Andes durante el periodo 2005-2007. Durante mayo 2008 a enero 2009 se muestrearon 175 perros de viviendas cuyos vectores se encontraron positivos a la infección de T cruzi y de manera proporcional se muestrearon 81 perros de las casas cuyos vectores estaban negativos a T cruzi. Para realizar el diagnóstico se uso por primera vez en Chile una técnica serólogica por inmunocromatografía (Trypanosoma Detect Rapid Test for Canine, InBios. Inbios International, Inc.563 1st Ave. South Suite 600 Seattle, WA 98104). Se dispuso de 200 tiras reactivas. Los resultados obtenidos fueron negativos. Pudiendo concluir, que los perros al ser considerados animales centinelas para esta infección, no existe transmisión activa, a pesar de que la población esta expuesta. Lo anterior se podría deber a que los perros no son una fuente de alimentación preferencial para las vinchucas, o, que las vinchucas provienen de focos silvestres, ya alimentadas, y que solo llegan de manera circunstancial a las viviendas y no lo hacen en búsqueda de alimento

Orientador: Maria Tercília Vilela de Azeredo Oliveira / Banca: Grasiela de Campos Dias Severi Aguiar / Banca: Hermione Elly Melara de Campos Bicudo / Resumo: As análises citogenéticas têm se mostrado como importantes ferramentas para o estudo da taxonomia dos triatomíneos. Dessa forma, a utilização de técnicas citogenéticas poderá esclarecer a problemática existente na classificação atual das espécies que compõem o subcomplexo Brasiliensis. Essas espécies foram agrupadas apenas por dados morfológicos e pela distribuição geográfica e diferem das espécies agrupadas no complexo Triatoma brasiliensis, com base em diferentes abordagens que levaram à indicação da monofilia. O presente trabalho descreve aspectos citogeneticos de T. lenti, T. sherlocki, T. melanocephala e T. vitticeps, com o intuito de avaliar a posição desses vetores no subcomplexo Brasiliensis e analisar uma possível relação de T. lenti, T. melanocephala e T. vitticeps com o complexo T. brasiliensis. Análises citogenéticas clássicas (Orceína Lacto-Acética, Impregnação por íons prata e Bandamento C) e moleculares (Hibridização in situ - FISH) foram realizadas em machos adultos. T. lenti e T. sherlocki, que apresentaram muitas características cromossômicas em comum, como o número de cromossomos (2n = 20A + XY), disposição da heterocromatina constitutiva nos autossomos (uma ou ambas as extremidades dos cromossomos) e na disposição das Regiões Organizadoras Nucleolares (RONs) (um par de autossomos). Esses insetos foram diferenciados por meio de marcações observadas nas espermátides, o que foi proposto como ferramenta citotaxonômica diagnóstica. T. melanocephala e T. vitticeps apresentaram o mesmo número de cromossomos (2n = 20A + X1X2X3Y) e as mesmas características durante a espermatogênese. No entanto, esses vetores puderam ser diferenciados pela disposição dos blocos heterocromáticos, pela disposição das RONs e pela análise da espermiogênese. Assim, com base nessas características, corroboramos a posição de T. lenti e T. sherlocki no subcomplexo Brasiliensis e propomos a ... / Abstract: Cytogenetic analyzes have shown to be important tools to study the taxonomy of the triatomines. Thus, the use of cytogenetic techniques may clarify the problems existing in the current classification of species that form the Brasiliensis subcomplex. The species in the subcomplex were grouped only by morphological data and geographical distribuition and differs from the species in the Triatoma brasiliensis complex, on the basis of on different approaches that indicate the monophyly. The present paper describes cytogenetically T. lenti, T. sherlocki, T. melanocephala and T. vitticeps, in order to evaluate the position of these vectors in the Brasiliensis subcomplex and analyze a possible relationship of T. lenti, T. melanocephala and T. vitticeps with the T. brasiliensis complex. Classical cytogenetic analysis (Lacto-acetic orcein, silver nitrate staining and C banding) and molecular (in situ hybridization - FISH) were performed in adult males. T. lenti and T. sherlocki showed several chromosomal characteristics in common, such as the number of chromosomes (2n = 20A + XY), disposition of constitutive heterochromatin in the autosomes (one or both ends of the autosomes) and the staining of nucleolar organizer regions (NORs) (a pair of autosomes). These insects were able to be differentiated by markings observed in spermatids, which were proposed as a diagnostic tool cytotaxonomic. T. melanocephala and T. vitticeps shared the chromosome number (2n = 20A + X1X2X3Y) and the same characteristics during spermatogenesis. However, these vectors were able to be differentiated by the disposition of heterochromatic blocks, by the arrangement of NORs and the examination of spermiogenesis. Thus, these characteristics corroborate the position of T. lenti and T. sherlocki on Brasiliensis subcomplex and and we propose the exclusion of T. melanocephala, T. vitticeps and T. tibiamaculata because they present fragmentation of the sex chromosome X and are ... / Mestre

Orientador: João Aristeu da Rosa / Banca: Cleber Galvão Ferreira / Banca: Carlos Eduardo Almeida / Resumo: O subcomplexo Triatoma rubrovaria é constituído por: T. carcavalloi, T. circummaculata, T. klugi, T. limai, T. oliverai, T. pintodiasi e T. rubrovaria, que podem veicular T. cruzi, agente etiológico da doença de Chagas. A partir de triatomíneos coletados no estado do Rio Grande do Sul e de colônias mantidas em laboratório, foram estudados caracteres morfológicos, morfométricos e moleculares de T. carcavalloi, T. circummaculata, T. pintodiasi, T. klugi e T. rubrovaria. Nos estudos morfológicos foram examinados caracteres da cabeça, tórax dorsal/ventral e abdômen. Por meio de microscopia eletrônica de varredura foram observados 17 caracteres que contribuíram para a identificação das cinco espécies do subcomplexo T. rubrovaria. Doze caracteres da cabeça, um do tórax e um do abdômen foram estudados por morfometria e avaliados por análises estatísticas. As análises morfométricas possibilitaram diferenciar as cinco espécies, entretanto T. circummaculata e T. pintodiasi mostraram-se distintas por apenas três parâmetros morfométricos. Por microscopia óptica foram desenvolvidos estudos por morfometria geométrica de cabeças e asas. Os estudos moleculares foram realizados por meio de sequenciamento e análise dos genes mitocondriais COI, Cytb, 16S e indicaram que T. circumaculata e T. pintodiasi são espécies afins e estão inseridas no subcomplexo T. rubrovaria juntamente com T. carcavalloi, T. klugi e T. rubrovaria. Em T. circumaculata e T. pintodiasi os genes mitocondriais COI e 16S são... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The subcomplex Triatoma rubrovaria is composed for T. carcavalloi, T. circummaculata, T. klugi, T. limai, T. oliverai, T. pintodiasi and T. rubrovaria, which can carry T. cruzi, etiologic agent of Chagas' disease. From triatomines collected in the state of Rio Grande do Sul and colonies kept in the laboratory, were studied morphologic, morphometric and molecular characters of T. carcavalloi, T. circummaculata, T. pintodiasi, T. klugi and T. rubrovaria. In the morphologic studies, head, ventral / dorsal thorax and abdomen. By means of scanning electron microscopy 17 characters were observed that contributed to the identification of the five species of the T. rubrovaria subcomplex. Twelve characters of the head, one of the thorax and one of the abdomen were studied by morphometric and evaluated by statistics analysis. The morphometric analysis allowed to differentiate the five species, however T. circummaculata and T. pintodiasi were distinguished by only three morphometric parameters. By optical microscopy studies were developed by geometric morphometric of heads and wings. Molecular studies were performed out by means of amplification of the mitochondrial genes COI, Cytb, 16S and indicated that T. circumaculata and T. pintodiasi are similar species and are inserted in the subcomplex T. rubrovaria together with T. carcavalloi, T. klugi and T. rubrovaria. The mitochondrial genes COI and 16S in T. circumaculata and T. pintodiasi are more evolutionarily distant from T. carcavalloi and T. klugi, whereas no mitochondrial Cytb gene a greater evolutionary distance is in relation to T. carcavalloi. The results obtained show that T. circummaculata and T. pintodiasi are similar species and morphologically differ in pronotum, scutellum, estridulatory sulcus and female external genitalia, as well as in the molecular analyzes with the three mitochondrial genes. / Mestre

In recent decades, transmission of Trypanosoma cruzi, the causative agent of Chagas disease, by Triatoma infestans and other vector insects has expanded from historically rural areas to urban centers across Latin America. The urbanization of the T. cruzi transmission cycle necessitates new understanding of Chagas disease ecology and epidemiology, as well as new approaches to the surveillance, control, and prevention of vector infestation and parasite transmission. In rural La Joya, Peru, analyses highlight how the complexities of human migration and intermittent intervention influence the prevalence and incidence of Chagas disease. Substantial prevalence of T. cruzi infection was found in the adult population as a result of relatively higher incidence of infection among long-term inhabitants and relatively lower incidence of infection among short-term in-migrants. While an insecticide intervention in 1995 effectively eliminated incidence of infection among children, T. infestans and T. cruzi were rapidly reemerging in the absence of continuing vector control. In Arequipa, Peru, T. infestans had extensively and intensively infested an urban and peri-urban landscape prior to vector control. Environmental and social factors, which may directly or indirectly influence insect biology and behavior, were associated with infestation. Large clusters of infestation and spatial dependence among infested households at short and long distances suggest that T. infestans can disperse by crawling or flying in an urban environment, which may challenge ongoing vector surveillance and control. Reemergence of vector insects, including T. infestans, complicates continuing control of Chagas disease. While relatively rare, reemergence of T. infestans is a present and possibly persistent problem in urban and peri-urban Arequipa. The probability of a reemergence event varied spatially. Events were both clustered and non-clustered, and were spatially dependent at distances up to 1,600 meters. Event-to-event spatial proximity occurred at shorter distances in higher risk areas and longer distances in lower risk areas. Identifiable predictors and patterns of risk offer opportunities for more effective and efficient strategies for vector surveillance and control.

Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-03-29T14:20:47Z No. of bitstreams: 1 marcia_xg_rocha_ioc_mt_0013_2011.pdf: 3336146 bytes, checksum: 11a90a4e3dcfc5cc6e0dc5fb85018b79 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-29T14:20:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 marcia_xg_rocha_ioc_mt_0013_2011.pdf: 3336146 bytes, checksum: 11a90a4e3dcfc5cc6e0dc5fb85018b79 (MD5) Previous issue date: 2011-05-31 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Apesar de o Brasil ter recebido o certificado internacional de interrupção de transmissão vetorial da doença de Chagas em 2006 pela Comissão Intergovernamental do Cone Sul, esta via continua sendo muito importante na transmissão da doença de Chagas e portanto estudos focando o vetor são de extrema importância. No Brasil, especialmente o Estado de Pernambuco apresenta elevados índices de infestação domiciliar por triatomíneos do complexo Triatoma brasiliensis. Nesse Estado foi registrada a presença de T. brasiliensis macromelasoma infestando vários ecótopos artificiais e naturais. Costa e col. (2009a) sugerem que em Pernambuco pode haver uma área de hibridação natural de membros do complexo T. brasiliensis o que poderia gerar uma alta variabilidade fenotípica nessa área. Devido aos elevados índices de infestação domiciliar, o relato de casos crônicos da doença de Chagas e a possível existência de fenótipos intermediários no Estado de Pernambuco, foram realizadas capturas de triatomíneos em ecótopos domiciliares, peridomiciliares e silvestres em 10 localidades (Afrânio, Aguas Belas, Bodocó, Cabrobó, Iatí, Lagoa Grande, Ouricuri, Petrolina, Salgueiro, Sertânia) de três das cinco áreas fisiogeográficas. Os exemplares coletados foram caracterizados quanto ao padrão cromático pela técnica de morfometria geométrica e percentagem de positividade para T. cruzi – like através do exame de gotas de fezes observadas ao microscópio óptico. Também foram avaliadas as possíveis fontes alimentares através do teste de ELISA. A técnica de isoenzimas foi empregada na tentativa de se observar possíveis híbridos coletados no Estado. Entre os principais resultados destaca-se o encontro de 13 diferentes espécimes no Estado de Pernambuco, classificados qualitativamente em relação ao padrão de coloração do tórax, cabeça e pernas. De 180 insetos observados somente um espécime macho pertencendo ao padrão bras escuro apresentou o parasito T. cruzi pela microscopia ótica. A análise das possíveis fontes alimentares, feita através do teste imuno-enzimático ELISA evidenciou que esses insetos se alimentavam principalmente de sangue de aves e roedores. Em relação aos resultados morfométricos, foi possível observar que os espécimes com diferentes padrões de coloração mostram proximidade morfológica e possivelmente genética com T. b. macromelasoma e T. b. brasiliensis. No entanto, utlilizando a técnica das isoenzimas não encontramos polimorfismos nos diferentes loci examinados. Os diversos fenótipos encontrados e as correlações entre T. b. macromelasoma e T. brasiliensis corroboram a idéia de que no Estado de Pernambuco existe uma área de hibridação natural entre os membros do complexo T. brasiliensis. As implicações epidemiológicas relacionadas aos diferentes padrões cromáticos encontrados deverão ser investigadas principalmente, com relação à suscetibilidade ao T. cruzi e índices de infestação domiciliar. / ABSTRACT In spite of having received the international certification of combat against vectorial transmission of Chagas disease in 2006, Brasil still faces problems with this way of transmission and any effort in this regard is appreciated. The state of Pernambuco presents highly domestic infestation indexes by triatomines from the T. brasiliensis complex. The presence of T. b. macromelasoma has been detected infesting diverse artificial and natural ecotopes. In this regard, Costa et al. (2009a) have suggested that in this area, a natural hybridization of Triatoma brasiliensis complex might be taking place that would lead as a result to an increase of the phenotypic variability. Due to high indexes of domestic infestation, the report of chronic cases of the disease and the suspect presence of intermediate phenotypes in the state of Pernambuco, a series of collects of triatomíneos took place in domestic, peri-domestic and sylvatic ecotopes in three out of five physiogeographic areas of the state. The specimens were characterized through geometric morphometric techniques according to the chromatic pattern and examined for T. cruzi infection by microscopical observation. Later, possible food-source were analyzed by ELISA tests and finally isoenzimatic procedures were used to identify the presence of possible hybrids collected in Pernambuco. Among principal results, we can highlight thirteen different phenotypes qualitatively classified according to the thorax, head and legs chromatic pattern. From 180 studied insects, only in one male belonging to bras escuro pattern T. cruzi parasite was observed by optical microscopy. The analysis of possible food source by ELISA test showed that these insects fed mainly from birds and rodents blood. Morphometric analysis allowed us to observe that specimens with different chromatic pattern have morphological closeness and possibly genetic proximity with T. b. macromelasoma and T. b. brasiliensis. On the contrary, with isoenzimatic procedures we didn`t found any polymorphism in any loci studied. The diverse phenotypes found in the state of Pernambuco and the correlations evidenced with T. b. macromelasoma and T. b. brasiliensis support the idea that in this state exist an area of natural hybridization between members of T. brasiliensis complex. The epidemiologic implications of different chromatic patterns should be further investigated in relation to the susceptibility to T. cruzi and the index of domestic infestation.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2013-01-25T10:55:52Z No. of bitstreams: 1 Ana Carolina borella anhe.pdf: 14934696 bytes, checksum: 8837678c96ca7fb7e6fb4a64a9f5b3a8 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-25T10:55:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Carolina borella anhe.pdf: 14934696 bytes, checksum: 8837678c96ca7fb7e6fb4a64a9f5b3a8 (MD5) Previous issue date: 2011 / Os triatomíneos são vetores do Trypanosoma cruzi e do Trypanosoma rangeli. Apresentam hábito hematófago durante todo o ciclo de vida. Durante o repasto, secretam uma saliva que antagoniza os sistemas hemostático, inflamatório e imunológico do hospedeiro vertebrado. A fim de caracterizar os aspectos morfológicos da glândula salivar, foi desenvolvido um estudo do crescimento desse órgão em triatomíneos de três espécies: Rhodnius prolixus, Panstrongylus megistus e Triatoma infestans. Os insetos foram cedidos pelo insetário do Laboratório de Triatomíneos e Epidemiologia da Doença de Chagas (CPqRR - FIOCRUZ). As glândulas salivares foram dissecadas e processadas para microscopia de luz, de fluorescência, laser confocal e eletrônica de varredura. Os resultados indicaram que a glândula é morfologicamente semelhante durante todo o ciclo de vida do inseto, sendo formada por um par de lobos, cada qual formado por dois (R. prolixus) ou três lóbulos (P. megistus e T. infestans). Durante o ciclo de vida, a glândula quadruplicou o seu tamanho inicial, devido ao crescimento celular, visto que o número de células permaneceu constante. Os lóbulos se mostraram formados por um epitélio simples que delimita o lúmen (onde a saliva é armazenada), revestidos por fibras musculares (cuja contração permite a liberação da saliva), traquéias e nervos. Serotonina apresentou intensa atividade na glândula das três espécies analisadas durante alimentação. Em R. prolixus, atividade dopaminérgia e de tirosina-hidroxilase (enzima da via das catecolaminas) também foram observadas. Dobras de membrana foram visualizadas na região apical das células e associadas ao aumento da área de secreção (tipo merócrina). Além disso, a presença de vesículas de secreção e células inteiras (estas observadas apenas em R. prolixus) no lúmen indicaram secreções do tipo apócrina e holócrina, respectivamente. Bactérias Gram-negativas e Gram-positivas foram observadas dentro das células e do lúmen do lóbulo posterior de T. infestans. / Triatomines are vectors of Trypanosoma cruzi e Trypanosoma rangeli. They are hematophagous during all life cycle. During the bite, they secrete saliva that antagonizes hemostatic, inflammatory and immunological systems imposed by the vertebrate host. In order to understand gland structure, a study of the organ growth was carried out with three important species: Rhodnius prolixus, Panstrongylus megistus e Triatoma infestans. The triatomines were provided by the Insectary of the Insectary of the Laboratory of Triatomines and Epidemiology of Chagas Disease (CPqRR - FIOCRUZ). Glands were dissected and processed routinely for light, fluorescence, laser scanning confocal and scanning electron microscopies. The results indicated that the gland is very similar during all cycle. It is formed by a pair of lobes, each one formed by two (R. prolixus) or three lobules (P. megistus e T. infestans). During the life cycle, salivary gland grew four times. This happened because cell volume increased, since the number of cells was the same during all life. The results showed that lobules are formed by a single epithelium that delimits a large central lumen (where saliva is stored), covered by muscle fibers (gland contraction and saliva releasing), trachea and nerves. Serotonin was considered an important neurotransmitter released during feeding, since it showed intense activity in the gland of the three species. In R. prolixus, activity of dopamine and tyrosine-hydroxylase (indicative of the presence of catecholamines) were also visualized. Membrane infoldings were observed in the apical surface of the cells, increasing the membrane area available for secretion (merocrine type). In addition, the presence of secretion vesicles and entire cells in the lumen (just in R. prolixus) indicated aprocrine and holocrine types of secretion, respectively. Gram-negative and Gram-positive bacteria were observed inside the cells and in the lumen of the posterior lobule of T. infestans.

Made available in DSpace on 2014-12-05T18:40:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) carlota_belisario_ioc_mest_2006.pdf: 1121044 bytes, checksum: 25daf8af9a2ba2cbded57e0f1f900c58 (MD5) Previous issue date: 2014-10-07 / Devido às suas grandes semelhanças morfológicas, Triatoma maculata e Triatoma pseudomaculata, que constituem para Carcavallo et al. (2000) o ´complexo maculata`, eram consideradas a mesma espécie até 1964 (Corrêa e Espínola, 1964). Essas espécies são alopátricas e, segundo Schofield (1988), T. maculata teria sido introduzida no Nordeste brasileiro por aves migratórias, com subseqüente especiação, e formação da espécie T. pseudomaculata. Estudos utilizando isoenzimas demonstraram grande distância genética entre as duas espécies e grande proximidade entre T. pseudomaculata e Triatoma wygodzinsky, com subseqüente proposta de reestruturação do ´complexo maculata`(Santos et al., 2003) Os estudos de cruzamentos entre em triatomíneos permitem a formulação de hipóteses acerca da origem e divergência de espécies e podem ajudar a entender a sistemática do grupo. O objetivo deste trabalho é determinar o grau de isolamento reprodutivo entre T. maculata e T. pseudomaculata, e caracterizar geneticamente as espécies e os híbridos obtidos pelos cruzamentos interespecíficos, permitindo o cotejamento de aspectos genéticos com características biológicas e comportamentais destes insetos. Os nossos resultados mostram que T. maculata e T. pseudomaculata não apresentam diferenças quanto à reprodução e são espécies que se cruzam produzindo híbridos inférteis. Os resultados dos cruzamentos intra e interespecíficos, da morfologia, da morfometria geométrica e da análise de RAPDs mostram T. maculata e T. pseudomaculata como espécies bem diferenciadas Os híbridos obtidos são mais semelhantes morfologicamente à T. maculata, entretanto, geneticamente estão mais próximos à T. pseudomaculata. T. wygodzinsky e os híbridos obtidos com estas espécies foram os que se apresentaram mais distantes dos demais grupos estudados. Os resultados indicam que independentemente de uma origem evolutiva comum entre essas três espécies, atualmente elas estão bastante diferenciadas geneticamente e não devem, portanto, constituir complexo entre elas / Due to its great morphological similarities, Triatoma maculata and Triatoma pseudomaculata , classified by Carcavallo et al. (2002) in the “maculata complex”, were considered the same species until 1964 (Corrêa e Espínola, 1964). These species are alopatric and, according to Schofield (1988), T. maculata would be introduced in the brazilian Northeastern by migratory birds, with subsequent speciation, forming the species T. pseudomaculata . Studies using isoenzymes showed great genetic distance among these two species and high affinity among T.pseudomaculata and Triatoma wygodzinsky , resulting in a new proposal of ́ maculata complex ` re-organization (Santos et al, 2003). Hybridization studies in Triatomines allo w the formulation of hypothesis about the origin and divergence of species and may help to understand the systematic of the group. Therefore, the objective of this work was to determine the level of reproductive isolation among T. maculata and T. pseudomaculata , and to characterize genetically the species an d hybrids obtained by the interspecific cross breeding, allowing the comparison of genetic aspects with other biological characteristics and behavior of these insects. T. maculata and T. pseudomaculata did not present difference in relation to the reproduction (eggs laid, time for eclosion and viability of the eggs) and are able to produce hybrids, but infertiles. The results obtained with the intra and interspecific cross breeding, morphological analysis, geometric morphometry and RAPDs showed T. maculata and T. pseudomaculata as well differentiated species. The hybrids obtained are morphologically more similar to T. maculata , but are genetically more close to T. pseudomaculata. T.wygodzinsky and the hybrids obtained with these species were the most distant from the other st udied groups. Our results indicate that, independent of the existence or not of a common evolutive origin among these species at present they are already genet ically well differentiated and would not constitute a complex

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-28Bitstream added on 2014-11-10T11:58:06Z : No. of bitstreams: 1 000790500.pdf: 1949921 bytes, checksum: 70d91b69034def2fe2d63147d4dd2d04 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As análises citogenéticas têm se mostrado como importantes ferramentas para o estudo da taxonomia dos triatomíneos. Dessa forma, a utilização de técnicas citogenéticas poderá esclarecer a problemática existente na classificação atual das espécies que compõem o subcomplexo Brasiliensis. Essas espécies foram agrupadas apenas por dados morfológicos e pela distribuição geográfica e diferem das espécies agrupadas no complexo Triatoma brasiliensis, com base em diferentes abordagens que levaram à indicação da monofilia. O presente trabalho descreve aspectos citogeneticos de T. lenti, T. sherlocki, T. melanocephala e T. vitticeps, com o intuito de avaliar a posição desses vetores no subcomplexo Brasiliensis e analisar uma possível relação de T. lenti, T. melanocephala e T. vitticeps com o complexo T. brasiliensis. Análises citogenéticas clássicas (Orceína Lacto-Acética, Impregnação por íons prata e Bandamento C) e moleculares (Hibridização in situ – FISH) foram realizadas em machos adultos. T. lenti e T. sherlocki, que apresentaram muitas características cromossômicas em comum, como o número de cromossomos (2n = 20A + XY), disposição da heterocromatina constitutiva nos autossomos (uma ou ambas as extremidades dos cromossomos) e na disposição das Regiões Organizadoras Nucleolares (RONs) (um par de autossomos). Esses insetos foram diferenciados por meio de marcações observadas nas espermátides, o que foi proposto como ferramenta citotaxonômica diagnóstica. T. melanocephala e T. vitticeps apresentaram o mesmo número de cromossomos (2n = 20A + X1X2X3Y) e as mesmas características durante a espermatogênese. No entanto, esses vetores puderam ser diferenciados pela disposição dos blocos heterocromáticos, pela disposição das RONs e pela análise da espermiogênese. Assim, com base nessas características, corroboramos a posição de T. lenti e T. sherlocki no subcomplexo Brasiliensis e propomos a ... / Cytogenetic analyzes have shown to be important tools to study the taxonomy of the triatomines. Thus, the use of cytogenetic techniques may clarify the problems existing in the current classification of species that form the Brasiliensis subcomplex. The species in the subcomplex were grouped only by morphological data and geographical distribuition and differs from the species in the Triatoma brasiliensis complex, on the basis of on different approaches that indicate the monophyly. The present paper describes cytogenetically T. lenti, T. sherlocki, T. melanocephala and T. vitticeps, in order to evaluate the position of these vectors in the Brasiliensis subcomplex and analyze a possible relationship of T. lenti, T. melanocephala and T. vitticeps with the T. brasiliensis complex. Classical cytogenetic analysis (Lacto-acetic orcein, silver nitrate staining and C banding) and molecular (in situ hybridization - FISH) were performed in adult males. T. lenti and T. sherlocki showed several chromosomal characteristics in common, such as the number of chromosomes (2n = 20A + XY), disposition of constitutive heterochromatin in the autosomes (one or both ends of the autosomes) and the staining of nucleolar organizer regions (NORs) (a pair of autosomes). These insects were able to be differentiated by markings observed in spermatids, which were proposed as a diagnostic tool cytotaxonomic. T. melanocephala and T. vitticeps shared the chromosome number (2n = 20A + X1X2X3Y) and the same characteristics during spermatogenesis. However, these vectors were able to be differentiated by the disposition of heterochromatic blocks, by the arrangement of NORs and the examination of spermiogenesis. Thus, these characteristics corroborate the position of T. lenti and T. sherlocki on Brasiliensis subcomplex and and we propose the exclusion of T. melanocephala, T. vitticeps and T. tibiamaculata because they present fragmentation of the sex chromosome X and are ... / FAPESP: 12/22361-2