Orientador: Winston Bonetti Yoshida / Banca: Hamilton Almeida Rollo / Banca: Guilherme Benjamin Brandão Pitta / Banca: Roberto Augusto Caffaro / Banca: José Maria P. Godoy / Resumo: A tromboflebite superficial (TS) de membros inferiores é doença de ocorrência comum, estando associada a diversas condições clínicas e cirúrgicas. Historicamente considerada como doença benigna devido à sua localização superficial e ao fácil diagnóstico, o tratamento foi conservador durante muito tempo na grande maioria dos casos. Entretanto, relatos recentes de freqüências altas de complicações tromboembólicas associadas, variando de 22 a 37% para trombose venosa profunda (TVP) e de até 33% para embolia pulmonar (EP), alertaram para a necessidade de abordagens diagnósticas e terapêuticas mais amplas, visando diagnosticar e tratar essas possíveis complicações. A possibilidade da coexistência dessas e de outras desordens sistêmicas (colagenoses, neoplasias, trombofilias) interfere na avaliação e influencia na conduta terapêutica que pode ser clínica, cirúrgica ou combinada. No entanto, devido à falta de ensaios clínicos controlados e, também a uma série de incertezas quanto a sua história natural, o diagnóstico e o tratamento da TS continuam indefinidos. Neste capítulo, foi feita uma revisão da literatura analisando-se a epidemiologia, fisiopatologia, e estado atual do diagnóstico e tratamento da TS. / Abstract: Superficial thrombophlebitis (ST) of the lower limbs is a commonly occurring disease, and it is associated with various clinical and surgical conditions. Historically considered to be a benign disease due to its superficial location and easy diagnosis, its treatment was, for a long time, conservative in most cases. Nevertheless, recent reports of high frequency and associated thromboembolic complications, which vary from 22 to 37% for deep venous thrombosis (DVT) and up to 33% for pulmonary embolism (PE), have indicated the need for broader diagnostic and therapeutic approaches in order to diagnose and treat such possible complications. The possibility of co-existence of these and other systemic disorders (collagenosis, neoplasia, thrombophilia) interferes with evaluation and influences therapeutic conduct, which may be clinical, surgical or combined. However, due to a lack of controlled clinical assays as well as to a series of uncertainties regarding its natural history, the diagnosis and treatment of ST remain undefined. In this chapter, a literature review was performed analyzing the epidemiology, physiopathology and current status of the diagnosis and treatment of ST. / Doutor

Orientador: Joyce Maria Annichino Bizzacchi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T15:02:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sanchez_YajairaAnayansiSingh_M.pdf: 3379773 bytes, checksum: e17058ecd9e6c695cd4f240c4256a6e4 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A proteína C é o componente central de um importante sistema natural de regulação antitrombótico. É uma glicoproteína plasmática dependente da vitamina K que age degradando proteoliticamente os fatores procoagulantes V e vm ativados. Além disso, a proteína C estimula a fibrinólise através da fonnação de um complexo com o inibidor do ativador do plasminogênio. A deficiência hereditária de proteína C é uma causa importante de doença tromboembólica venosa. Os primeiros relatos sobre esta deficiência sugeriam que a herança era autossômica dominante. Contudo, posteriormente a hipótese de uma herança autossômica recessiva, em que somente os homozigotos ou duplo heterozigotos desenvolvem trombose foi proposta. Por um longo período as bases moleculares para essas observações contlitantes não foram esclarecidas, apesar da hipótese de que em famílias com trombose a interação de outro defeito genético que interfere com o gene da proteína C, ou da associação com outros defeitos que predispõem à trombofilia devem estar presentes. O gene da proteína C está localizado no cromossomo 2 na posição q13-qI4. Composto por 9 exons e 8 introns, abrange aproximadamentellkD, e origina um RNAm de 1,6 a 1,8kb. Segundo dados do último database de mutações no gene da proteína C publicado em 1996 por Reistma et aI., foram descritas 160 mutações. Dentre estas, 135 eram diferentes mutações de ponto, sendo 79% mutações missense, 8% mutações no sítio de splicing, 6.6% mutações silenciosas e 6% mutações nonsense. Delas, 32% ocorreram em diIíucIeotídeos CpG, que são considerados hipermutáveis (hotspot). Foram também descritas 8 diferentes inserções, 12 pequenas deleções e uma grande deleção. Além disso, 4 polimorflsmos foram descritos. Neste trabalho foram estudados 6 pacientes com deficiência de proteína C que apresentaram trombose venosa. Outras deficiências que predispõem à trombose também foram avaliadas. Todos os exons e regiões intrônicas flanqueadoras do gene da proteína C foram estudados utilizando uma estratégia que combinava reação em cadeia da polimerase (PCR), análise de polimorfismo de conformação em hélice simples (SSCP) e eletroforese em gel sensível à conformação (CSGE) para o rastreamento de mutações. Os ftagmentos amplificados de PCR que apresentaram um padrão eletroforético alterado em relação aos controles normais nas análises por SSCP ou CSGE foram sequenciados para a determinação precisa das alterações moleculares. A análise pelo método de PCR-CSGE se mostrou mais eficaz no rastreamento de alterações moleculares que a análise pelo método de PCR-SSCP. Com essa metodologia foram detectadas mutações em 83% dos pacientes, identificando-se 5 mutações de ponto, incluindo uma mutação silenciosa, além de um polimorfismo para vários dos pacientes. Apenas uma dessas mutações ainda não foi descrita na literatura. A primeira, detectada em 2 pacientes não relacionados, é decorrente de uma transversão c~ T (posição 6182), que substitui o aminoáciqo Arg 157 por um codon de terminação prematura (stop), no exon 7. Este exon codifica a r~gião do peptídeo de ativação. Esta alteração r,esulta na exclusão do alelo mutante ou na síntese de uma proteína truncada que pode ou não ser secretada. A segunda, é uma transversão G~A (posição 6246), que substitui o aminoácido Arg 178 por GIn, no exon 7. Esta mutação afeta as interações entre os aminoácidos, causando uma mudança confonnacional, e rápida degradação, e conseqüente redução na secreção da proteína. A terceira, uma substituição A~G na região promotora (posição -1533), afeta a eficiência transcricional, uma vez que a mesma ocorre dentro de uma seqüência consenso de ligação com o HNF-3 (futor nuclear dos hepatócitos). A última, decorre de uma transversão G~T, (posição 3190), substituindo o aminoácido Gly 83 por Cys, no exon 5. Este exon codifica o primeiro domínio EGF. Esta mutação, que ainda não foi descrita na literatura, provavelmente afeta as interações entre aminoácidos, causando alterações na estrutura terciária, e redução na secreção da proteína. Es+..as &'terações devem ser as responsáveis pela deficiência hered.it:árúl de proteína C, pois segregam com a deficiência nos familiares estudados, e 3 delas já foram descritas como a causa da doença em outros pacientes. Nossos resultados indicam que na deficiência de proteína C é freqüente a ocorrência de mutações recorrentes, pois 4 mutações já haviam sido descritas em outros países, em famílias com essa deficiência, e 2 delas ocorreram em sítios hipermutáveis, de dimeros CpG, no exon 7. A determinação das alterações moleculares no gene da proteína C é uma importante ferramenta para o esclarecimento de àiagnósticos duvidosos de deficiência de proteína C e para a investigação da relação estrutura e função da proteína C / Abstract: Protein C is the central component of an important natural system of antithrombotic regulation. 1t is a pIasmatic vitamin-K dependent glicoprotein that acts degrading proteolitycal1y the procoagulant active factors V and vrn. In addition, protein C stimulates fibrinolysis through the fonnation of a complex with plasminogen activator inhibitor (PAI). The hereditary protein C deficiency is an important cause of venous thromboembolic disease. The first reports about protein C deficiency suggested that it had a dominant autossomic hereditary pattem. Nevertheless, subsequentlyan hypothesis of a recessive autossomic pattem in which only homozygotes and double heterozygotes would develop thrombosis was proposed. For a long time, the molecular basis for these conflicting observations were not elucidated, in spite ofthe hypothesis that in thrombofilic families other genetic defects which interfere with protein C gene or the association with other defects which predispose to thrombofilia might be presents. The gene which controIs the synthesis of protein C is locatedin chromosome 2, at position q13-q14. 1t spans 9 exons and 8 introns comprising a.region over llkb, which originates a rnRNA of 1.6 to 1.8kb. According to the protein C gene mutation database published by Reitsma et al.,1996; 160 mutations were described. Among these, 135 were different point mutations, 79% were miss~nse mutations, 8% were splice site mutations, 6.6% were silent mutations and 6% were nonsense mutations. Thirty two percent occurred in CpG dinucleotides, which are considered mutation hotspots. Eight different insertions, twelve short and one large deletion were descnDed. In addition, four polymorphisms were also described. In this work, 6 patients with protein C deficiency who developed venous thrombosis were studied. Other defiCÍenCÍes which predispose to thrombosis were also evaluated. All the nine exons and exon-intron boundaries of the proteinC gene were studied using a strategy which combines polymerase chain reaction (PCR), nonradioactive single-strand confonnational polymorphism (SSCP) and onfonnation-sensitive-gel electrophoresis (CSGE) ana1ysis for mutation screening. The PCR amplified fragments which revealed an altered pattem related to normal controls on SSCP or CSGE ana1ysis were sequenced to precise determination ofthe molecular alterations. The strategy which combines PCR-SCGE resulted more effective to detect alterations than the PCR SSCP strategy. This metodology allowed to detect mutations in 83% of studied patients: 5 point mutations, inc1uding a silent mutation, apart ftom a polymorphism in some patients. Only one of these mutations was not previously descnlJed. T.ae first one was detected in two unrelated patients, a C~T substitution (position 6182), that generated a premature stop codon at Arg 157, in exon 7. This exon code for the activation peptide. This mutation results in exclusion ofthe mutant allele or in a truncated protein. The second one, a G~A substitution (position6246), converted Arg178 to Gln, in exon 7. This alteration affects aminoacids interactions leading to a confonnational change withincreased degradation, that impair protein secretion. The third is a A~G substitution (position -1533), in the promoter region. This alteration affects transcriptional efficiency, since it occurs within HNF-3 (hepatocite nuclear factor) binding site consensus sequence. Finally, a G~T substitution (position 3190), converted Gly 83 to Cys, in exon 5. Tbis exon code for the first EGF domain. This mutation was not described, and could atfects aminoacids interactions, leading to terciary structure alterations and subsequent decrease of protein secretion. These alterations must be responsibles for the hereditary protein C deficiency, because they segregate with deficiency in families, and 3 of them were previously described as the cause of the disease in other patients. Our results indicate that in protein C deficiency the incidence of recurrent mutations is high1y ftequent, since 4 mutations were previously described in families with protein C deficiency in other countries and 2 of them involved the hypermutable region of CpG dimmers, in exon 7. The determination of the molecular alterations in the protein C gene is an important tool to elucidate doubtfu1 diagnostics of protein C deficiency and to investigate the relation between structure and function of protein C / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Carlos Alberto Hussni / Banca: Pierre Barnabé Escodro / Banca: Regina Moura / Resumo: As tromboses podem ocorrer frequentemente em equinos como decorrência de coagulopatia intravascular disseminada, hipóxia, endotoxemia, cólica e laminite ou ainda por processos iatrogênicos. Porém, há poucos estudos em relação à cirurgia vascular e alterações morfológicas deste processo em equinos. Este trabalho teve por objetivo estudar a morfologia e os aspectos histopatológicos da veia cefálica em dois modelos experimentais. Foram utilizados 10 equinos hígidos, divididos em dois estudos: Estudo Trombose (ET), avaliou-se os aspectos histopatológicos da veia cefálica na tromboflebite aguda induzida. Estudo Fogarty (EF) avaliou-se os aspectos histopatológicos após a aplicação imediata do cateter de Fogarty. Para obtenção de base morfológica para avaliação das túnicas, coletou-se uma amostra controle (AC) de veia cefálica hígida. Nos animais do ET, foi realizada a indução química da trombose na veia cefálica e após 24 horas procedeu-se a coleta de segmento venoso para avaliações histopatológicas. Nos animais do EF, foi realizada a passagem do cateter de Fogarty na veia cefálica hígida e coleta imediata do segmento venoso. Os segmentos da veia cefálica foram divididos em segmento proximal e distal e analisados quanto à morfologia e histometria. Os segmentos do ET apresentaram espessamento da parede vascular, com desorganização das células musculares lisas, maior quantidade de matriz extracelular e alteração morfológica das células endoteliais em relação à AC. Os segmentos do EF apresentaram alterações morfológicas das células endoteliais e menor quantidade de células musculares lisas em relação à AC. A partir destes resultados, podemos concluir que a trombose induziu resposta inflamatória na parede vascular e espessamento das túnicas associada à presença do trombo. O EF apresentou alteração morfológica das células endoteliais em resposta imediata à passagem... / Abstract: Thrombosis can occur frequently in horses as a consequence of disseminated intravascular coagulopathy, hypoxia, endotoxemic, colics and laminitis or a iatrogenic process. However, there are few studies regarding vascular surgery and morphology changes of this process in horses. This research aimed to study the morphology and histopathological aspects of the cephalic vein in two experimental models. Ten healthy horses, was divided into two studies: Thrombosis study (ET), were used to evaluate the histopathological aspects of the cephalic vein in induced acute thrombophlebitis. Fogarty study (EF) was evaluated histopathological aspects after the immediate application of the Fogarty catheter. To achieve morphological based measures of the coats, were collected a sample control (AC) from a healthy cephalic vein. The animals of ET, chemical induction of thrombosis was performed in the cephalic vein and 24 hours proceeded the segment collection of the vessel for histological evaluation. The animals of EF, were submitted to the passage of a Fogarty catheter in the patent and healthy cephalic vein, followed by immediate collection of a segment venous. The cephalic vein segments were divided into proximal and distal and analyzed for morphology and histometry. The ET segments showed thickening of the vascular wall, with disorganization of the smooth muscle cells, increased amount of extracellular matrix and morphological alteration of endotelial compared to AC. The segments EF showed morphological changes in endothelial cells and fewer smooth muscle cells in relation to AC. From these results, we can conclude that thrombosis induced inflammatory response in vascular wall thickening and coats related to the presence of thrombus. The EF presented morphological alteration of endothelial cells in immediate response to the passage of the catheter, but so did the segment where there was the passage of the catheter / Mestre

Proefschrift Universiteit van Amsterdam. / Met lit.opg. en een samenvatting in het Nederlands.

Proefschrift Universiteit van Amsterdam. / Met een Nederlandse samenvatting.

Thesis (doctoral)--Universiteit van Amsterdam.

Thesis (doctoral)--Utrecht, 1981.

Proefschrift Maastricht. / Met lit. opg. - Met samenvatting in het Nederlands.

Proefschrift Universiteit Maastricht. / Met lit. opg.

Proefschrift Universiteit Maastricht. / Met bibliogr., lit. opg. - Met samenvatting in het Nederlands.