Le Virus de Varicelle et du Zona (VZV) est un -herpesvirus responsable de deux maladies distinctes : la varicelle et le zona. Dans ce travail, nous nous sommes intéressés à la protéine Immediate Early 63 (IE63) du VZV. Cette protéine est essentielle pour la réplication virale et critique pour létablissement de la latence du virus dans les ganglions sensoriels. Lors du cycle lytique, elle présente une localisation majoritairement nucléaire, alors que durant la latence, cest dans le cytoplasme quelle se concentre pour finalement se répartir entre les deux compartiments une fois la réactivation du virus enclenchée. Ses propriétés régulatrices sont sujet à controverse depuis de nombreuses années. Les phénomènes de phosphorylation sont connus pour jouer un rôle clé dans la régulation de lactivité de nombreuses protéines. Dans la première partie de ce travail, nous nous sommes penchés sur la phosphorylation dIE63 par deux types de kinases cellulaires importantes, la Protéine Kinase AMPc-dépendante (PKA) et les Cycline-dépendante Kinases (Cdks). Nous avons tenté de mettre en évidence limpact de cette modification post-traductionnelle sur la localisation cellulaire et les propriétés régulatrices dIE63. Nous avons pu montrer quIE63 est phosphorylée par la PKA. Il sest avéré que cette phosphorylation nétait pas essentielle pour la localisation cellulaire correcte de la protéine, mais bien pour ses propriétés régulatrices. Ensuite, nous avons pu démontrer quIE63 est phosphorylée in vitro par la Cdk1 et la Cdk5, et in vivo par la Cdk1. Cette phosphorylation est apparue comme cruciale pour la localisation cellulaire et lactivité régulatrices dIE63 en cellules Vero. A lentame de la seconde partie de ce travail, une compréhension des fonctions globales dIE63 sur lexpression de lensemble des gènes cellulaires manquait toujours. Dans ce contexte, nous avons décidé dexaminer les effets dIE63 sur la transcription de lensemble du génome cellulaire par la technique de microarray. Nous avons pu montrer que : (i) en labsence dautres protéines virales, IE63 affecte lexpression dun nombre limité de gènes, incluant des gènes impliqués dans la transduction de signaux, la transcription, la réponse immunitaire et la signalisation des protéines « Heat-Shock ». (ii) Lexpression dIE63 provoque suivant les cas une diminution ou une stimulation de la liaison de la RNA polymérase II sur les promoteurs réprimés et activés par la protéine, respectivement. (iii) En cellules HeLa, la phosphorylation correcte dIE63 est cruciale pour ses propriétés régulatrices sur les promoteurs endogènes. Des travaux antérieurs émanant de notre laboratoire ont montré quIE63 était capable dinhiber lexpression de certains gènes dépendants du NF-B comme lIL-8 et lIL-6. De plus, plusieurs études montrent que le VZV est capable déchapper au système immunitaire via notamment une répression des gènes dépendant du NF-B. De manière surprenante, lexpression basale de ces gènes nest pas affectée dans nos conditions, cela étant peut être du à un problème daccessibilité de leur promoteur lié à louverture de la chromatine. De manière à tester cette hypothèse, nous avons mesuré linfluence dIE63 sur lexpression de certains de ces gènes (IL-8, IL-6, ICAM-1 et IB) après un traitement des cellules au TNF, une cytokine proinflammatoire connue pour provoquer louverture de la chromatine au niveau du promoteur de nombreux gènes. Les résultats intéressants obtenus lors de ce travail sont : (i) dans des cellules stimulées au TNF, lexpression de certains gènes dépendant du NF-B est affectée par IE63 dune manière dépendante du promoteur étudié, (ii) le niveau de phosphorylation de la protéine influence ces propriétés régulatrices, (iii) leffet dIE63 est corrélé à une modification de louverture de la chromatine et enfin, (iv) IE63 est capable de modifier la liaison du NF-B sur les promoteurs testés.

Thèse d'exercice : Pharmacie : Université de Nantes : 2005. / Bibliogr. f. 94-109 [107 réf.].

Thèse d'exercice : Médecine. Pédiatrie : Université de Nantes : 2007. / Bibliogr.

Reproduction de : Thèse d'exercice : Médecine générale : Nancy 1 : 2002. / Thèse : 2002NAN11055. Titre provenant de l'écran-titre.

Thesis (doctoral)--Karolinska Institutet, Stockholm, 1988. / Extra t.p. with thesis statement inserted. Includes bibliographical references.

Thesis (doctoral)--Karolinska Institutet, Stockholm, 1988. / Extra t.p. with thesis statement inserted. Includes bibliographical references.

L’infection primaire au VZV et la réactivation du VZV latent sont fréquemment observées à la suite d’une GMO ou d’une GSCO, ce qui cause de sérieuses complications chez le patient. Pour prévenir ces infections, une prophylaxie antivirale est administrée systématiquement chez tous les greffés de MO ou de SCO, alors qu’il n’existe aucun consensus sur la durée optimale d’une telle prophylaxie. Pour résoudre ce problème, notre objectif est de développer et valider une méthode ELISpot-VZV-IFN- qui permettra de suivre la reconstitution de l’immunité à médiation cellulaire anti-VZV chez les receveurs de GMO ou de GSCO et ainsi déterminer le moment opportun pour réduire ou interrompe la prophylaxie chez les receveurs de greffes de CSH. Dans un premier temps, des valeurs-seuil de la réponse à médiation cellulaire anti-VZV chez la population pédiatrique saine ont dû être générées. À la lumière de nos résultats, un enfant avec un résultat ELISpot-VZV-IFN- > 190.0 SFU/106 PBMC devrait être protégé contre une possible infection à VZV. Pour valider cette étude, une étude prospective de la reconstitution immunitaire anti-VZV a été effectuée chez 9 enfants greffés de MO ou de SCO. Nos résultats préliminaires ont montré qu’il n’y avait eu aucune reconstitution significative de l’immunité à médiation cellulaire anti-VZV dans les 18 premiers mois post-transplantation chez 8 de ces 9 enfants. Les résultats de ces expériences vont fournir d’importantes informations quant à la reconstitution de l’immunité anti-VZV à la suite d’une GMO ou d’une GSCO et pourraient permettre l’amélioration des soins apportés aux receveurs de GMO ou de GSCO. / Primary infection with VZV and reactivation of latent VZV are commonly observed following BMT and UCBT, leading to serious complications in patients. As a result, antiviral prophylaxis is systematically administered to BMT and UCBT recipients, yet there is no consensus that defines its optimal duration. To resolve this problem, our objective was to develop and validate a VZV-IFN--ELISpot with which reconstitution of VZV immunity can be followed in BMT and UCBT recipients, providing clinicians a practical tool to gauge the need for and adjust antiviral prophylaxis in individual HSCT recipients. First of all, threshold values for anti-VZV immunity in healthy pediatric subjects were generated. Based on our results, a child exhibiting > 190.0 VZV-specific SFU /106 PBMC should be protected against a possible VZV infection. To validate these results, a prospective study on the recovery of VZV-specific T cell immunity was performed on 9 children following BMT or UCBT. Preliminary results demonstrated that there was no significant recovery of VZV-specific T cell immunity in the first 18 months post-transplantation in 8 of 9 cases. Results of these experiments will yield important new information regarding reconstitution of anti-VZV immunity following BMT and UCBT and could lead to improvements in clinical management of BMT and UCBT recipients.

L’infection primaire au VZV et la réactivation du VZV latent sont fréquemment observées à la suite d’une GMO ou d’une GSCO, ce qui cause de sérieuses complications chez le patient. Pour prévenir ces infections, une prophylaxie antivirale est administrée systématiquement chez tous les greffés de MO ou de SCO, alors qu’il n’existe aucun consensus sur la durée optimale d’une telle prophylaxie. Pour résoudre ce problème, notre objectif est de développer et valider une méthode ELISpot-VZV-IFN- qui permettra de suivre la reconstitution de l’immunité à médiation cellulaire anti-VZV chez les receveurs de GMO ou de GSCO et ainsi déterminer le moment opportun pour réduire ou interrompe la prophylaxie chez les receveurs de greffes de CSH. Dans un premier temps, des valeurs-seuil de la réponse à médiation cellulaire anti-VZV chez la population pédiatrique saine ont dû être générées. À la lumière de nos résultats, un enfant avec un résultat ELISpot-VZV-IFN- > 190.0 SFU/106 PBMC devrait être protégé contre une possible infection à VZV. Pour valider cette étude, une étude prospective de la reconstitution immunitaire anti-VZV a été effectuée chez 9 enfants greffés de MO ou de SCO. Nos résultats préliminaires ont montré qu’il n’y avait eu aucune reconstitution significative de l’immunité à médiation cellulaire anti-VZV dans les 18 premiers mois post-transplantation chez 8 de ces 9 enfants. Les résultats de ces expériences vont fournir d’importantes informations quant à la reconstitution de l’immunité anti-VZV à la suite d’une GMO ou d’une GSCO et pourraient permettre l’amélioration des soins apportés aux receveurs de GMO ou de GSCO. / Primary infection with VZV and reactivation of latent VZV are commonly observed following BMT and UCBT, leading to serious complications in patients. As a result, antiviral prophylaxis is systematically administered to BMT and UCBT recipients, yet there is no consensus that defines its optimal duration. To resolve this problem, our objective was to develop and validate a VZV-IFN--ELISpot with which reconstitution of VZV immunity can be followed in BMT and UCBT recipients, providing clinicians a practical tool to gauge the need for and adjust antiviral prophylaxis in individual HSCT recipients. First of all, threshold values for anti-VZV immunity in healthy pediatric subjects were generated. Based on our results, a child exhibiting > 190.0 VZV-specific SFU /106 PBMC should be protected against a possible VZV infection. To validate these results, a prospective study on the recovery of VZV-specific T cell immunity was performed on 9 children following BMT or UCBT. Preliminary results demonstrated that there was no significant recovery of VZV-specific T cell immunity in the first 18 months post-transplantation in 8 of 9 cases. Results of these experiments will yield important new information regarding reconstitution of anti-VZV immunity following BMT and UCBT and could lead to improvements in clinical management of BMT and UCBT recipients.

Le but de l'étude a été d'évaluer le fardeau associé à la varicelle et au zona au Québec à la suite de l'introduction du programme public de vaccination contre la varicelle à une puis à deux doses. La première dose contre la varicelle a été introduite dans le programme régulier d'immunisation québécois en 2006 et la deuxième dose a été mise en place en 2016. La revue de littérature a démontré que l'ajout d'une deuxième dose de vaccin pouvait permettre de réduire davantage les consultations, les hospitalisations et les décès liés à la varicelle et au zona (chez les 0-9 ans). Cette étude a utilisé un devis de recherche quantitatif à visée descriptive afin de dresser le portrait de la varicelle et du zona au Québec de 1996 à 2018. Elle a utilisé des données clinico-administratives de la Régie de l'assurance maladie du Québec (RAMQ), les données Maintenance et exploitation des données pour l'étude de la clientèle hospitalière (MED-ECHO), la Banque de données communes des urgences (BDCU) ainsi que le registre de décès de l'Institut de la statistique du Québec (ISQ) pour mesurer le fardeau de la varicelle et du zona au Québec. Entre la période pré-vaccinale (1996-2000) et la période de vaccination à une dose contre la varicelle (2006-2015), une baisse du taux de consultation pour varicelle de 93 % a été enregistrée. Il y a eu une réduction de 83 % du taux d'hospitalisation pour la varicelle entre la période vaccinale à deux doses (2017-2018) et la période vaccinale dans le secteur privé (2001-2005). Il y a eu une diminution de 76 % du taux d'hospitalisation pour le zona chez les 0-9 ans entre la période 2017-2018 et la période 2001-2005. Une poursuite de la surveillance est nécessaire pour mieux cerner l'impact de la deuxième dose. / The purpose of this study was to assess the burden associated with varicella and herpes zoster in Quebec following the introduction of the one and two-dose public varicella vaccination programs. The first dose of the varicella vaccine was introduced as part of the regular immunization program in 2006, and the second dose was introduced in 2016. A review of the literature conducted outside Quebec demonstrated that the addition of a second dose of vaccine could further reduce consultations, hospitalizations and deaths related to varicella and shingles (0-9 years old). This study used a quantitative, descriptive research design in order to evaluate the burden of varicella and shingles in Quebec from 1996 to 2018. It used clinico-administrative data from the Régie de l'assurance maladie du Québec (RAMQ), the Maintenance et exploitation des données pour l'étude de la clientèle hospitalière (MED-ECHO), the Banque de données communes des urgences (BDCU), and the Institut de la statistique du Québec (ISQ) death registry to measure the burden of varicella and herpes zoster in Quebec. Between the pre-vaccination era (1996-2000) and the one-dose varicella vaccination era (2006-2015), a 93 % decrease in the rate of varicella consultations was recorded. There was an 83% reduction in the hospitalization rate for varicella between the two-dose vaccine period (2017-2018) and the pre-vaccine period (1996-2000). There was a 76 % decrease in the hospitalization rate for shingles in 0-9 years olds between 2017-2018 and the private sector vaccine period (2001-2005). Continued surveillance is necessary in order to measure the impact of the second dose.

La transplantation de sang de cordon ombilical (TSCO) constitue un traitement de choix pour une multitude de pathologies hématologiques malignes et non malignes chez l’enfant et dans certains cas l’adulte. La TSCO est associée à certaines complications, dont une reconstitution immunitaire plus lente et une incidence élevée d’infections opportunistes, notamment celles reliées au cytomégalovirus (CMV) et au virus varicella-zoster (VZV). Dans le cadre de ce travail, nous nous sommes intéressés dans un premier temps à la caractérisation de la reconstitution immunitaire spécifique au CMV et au VZV. Nos résultats ont démontré que la reconstitution de l’immunité cellulaire ne requiert ni un statut séropositif pré-transplantation ni le développement de la maladie. De plus, des reconstitutions spontanées ont été détectées chez certains patients séronégatifs vis-à-vis du CMV ou du VZV. Outre le fait qu’elle se manifeste surtout à partir de 6 mois post-transplantation, ladite reconstitution mérite le qualificatif de « protectrice » en termes de réactivations virales et du développement de signes cliniques lorsqu’une fréquence de 150 cellules produisant l’IFN-γ/million est dépassée. Toutefois, moins de 5% des patients développent une réponse T anti-VZV et anti-CMV au cours 100 premiers jours suivant la TSCO. Il est donc possible que les lymphocytes CD8+ T provenant du SCO, comparativement à leurs homologues provenant de la moelle osseuse (MO), présentent un défaut de fonctionnalité, communément appelé « épuisement clonal ». La caractérisation du répertoire de récepteurs inhibiteurs exprimés par les cellules T CD8+ suivant la TSCO ou la transplantation de moelle osseuse (TMO) a révélé une augmentation significative de la fréquence des cellules exprimant PD-1 tôt suivant la transplantation. Cette population, caractérisée majoritairement par un phénotype effecteur-mémoire (EM), démontre une perte significative de la capacité proliférative et exprime moins d'IFN-γ, d'IL-2, de TNF-α et de CD107a. Une meilleure caractérisation de la reconstitution immunitaire après TSCO permettrait, d'une part de sélectionner des biomarqueurs en vue d’une meilleure gestion des patients à risques de développer des infections virales et/ou de rechuter, et d'autre part d'améliorer leur pronostic. / Umbilical cord blood transplantation (UCBT) is a treatment of choice for a variety of hematological malignancies and non-malignant diseases in children and, in some cases, in adults. UCBT is associated with a slower immune reconstitution and a high incidence of viral infections, especially related to cytomegalovirus (CMV) and the varicella-zoster virus (VZV). As part of this work, we aimed to assess the reconstitution of CMV and VZV-specific T cell responses. Neither pre-transplant serostatus nor disease development is required for development of T cell mediated immunity. Moreover, spontaneous reconstitution detected in some patients who were seronegative for CMV or VZV. Detected especially after 6 months post-transplant, antiviral responses are protective in terms of viral reactivation and development of clinical signs, when a frequency of 150 cells producing d'IFN-γ / million is achieved. However, less than 5% of patients develop an antiviral response during the first 100 following UCBT. Compared to their bone marrow (BM) counterparts, UCB CD8+ T lymphocytes may be functionally impaired, a state commonly called « clonal exhaustion ». Characterization of the inhibitory receptors repertoire expressed by CD8+ T cells following UCBT and BMT showed a significant increase in the frequency of cells expressing PD-1 early after transplantation. This population, mainly characterized by effector phenotype, showed a significant loss of proliferative capacity and produced less IFN-γ, IL-2, TNF-α and CD107a. An improved understanding of the CD8+ T cell compartment following UCBT, as well as biomarkers related to T cell exhaustion will decrease infection, transplant related mortality and correlate with better prognosis