A leishmaniose visceral (LV) é uma doença crônica e potencialmente fatal causada, no Brasil, pelo protozoário Leishmania infantum. A resistência à LV é relacionada ao desenvolvimento de uma resposta imune celular eficiente. Para isso, células dendríticas (DCs) reconhecem produtos antigênicos do parasito, através dos Toll-like Receptors (TLRs), e, após ativação, produzem fatores, que irão orquestrar o recrutamento celular e desenvolvimento da resposta imune protetora. Dentre os vários TLRs, tem sido demonstrado que o TLR9 está relacionado com a resistência à infecção em modelo de leishmaniose cutânea. No presente estudo, nosso objetivo foi determinar o papel do TLR9 durante a infecção por L. infantum. Nossos resultados demonstram que a expressão de TLR9 é modulada positivamente durante a infecção in vivo e in vitro pela L. infantum. O TLR9 é essencial para o controle da infecção contra L. infantum, uma vez que camundongos TLR9-/- são mais susceptíveis à infecção, apresentando maior número de parasitos no baço e fígado na 4ª e 6ª semana pós-infecção. A fenotipagem de leucócitos presente no baço demonstrou que camundongos TLR9-/- possuem menor número de neutrófilos. De maneira semelhante, a análise imuno-histoquímica mostrou uma reduzida marcação de células 7/4+ (específica para neutrófilos) no fígado de animais TLR9-/-. A falha na migração de neutrófilos observada em animais TLR9-/- não está associada a uma incapacidade de ativação dos polimorfonucleares, mas sim a deficiências na produção de fatores quimiotáticos, como CXCL1 (KC) e CXCL2 (MIP-2) nos órgãos-alvo. Investigando o mecanismo de ação, as células dendríticas oriundas de animais TLR9-/- falham em seu processo de ativação frente à infecção in vitro e in vivo com L. infantum, apresentando um fenótipo semi-maduro, com redução de expressão de MHC-II e moléculas coestimuladoras. Interessante que essas células apresentaram deficiência na produção de mediadores quimiotáticos de neutrófilos como KC e MIP-2, e consequentemente, induzindo o menor recrutamento de neutrófilos in vitro. Em conjunto, nossos resultados demonstram que o TLR9 é essencial para o controle da infecção por L. infantum, através de um mecanismo dependente do recrutamento de neutrófilos para o sítio inflamatório mediado pela ativação apropriada de fatores quimiotáticos de neutrófilos pelas DCs. / Visceral leishmaniasis (VL) is a chronic and potentially fatal disease caused by protozoan Leishmania infantum, in Brazil. The resistance against VL is related to the development of cellular immune response. During infection, the dendritic cells (DCs) recognize antigenic products through Toll-like Receptors (TLRs) and then orchestrate the cellular recruitment and immune response development. Among several TLRs, it has been showed that TLR9 is related to resistance to cutaneous leishmaniasis. In the present study, our aim was to determinate the role of TLR9 during L. infantum infection. Our results demonstrated that TLR9 is up regulated during in vitro and in vivo L. infantum infection. TLR9 is critical for protective immunity against L. infantum, since TLR9-/- mice infected were more susceptible to infection, displaying high amounts of parasites in spleen and liver, at 4th and 6th weeks post-infection. Phenotyping the leukocytes into the spleen, TLR9-/- mice presented reduced neutrophils when compared to WT. Likewise, imunohistochemistry analyses showed the reduced of 7/4+ cells (specific to neutrophils) staining into the TLR-9-/- liver. The failure of neutrophil migration is not associated to their stage of activation impaired, but due the reduced levels of CXCL1 (KC) and CXCL2 (MIP-2) (neutrophil chemoatracttant) produced into into the spleen cells culture from infected TLR9-/-. Furthermore, DCs from TLR9-/- presented a semi-mature stage during in vitro and in vivo L. infantum infection, showing reduced expression of MHC-II and co-stimulatory molecule. Interestingly, the ability of DC to produce the neutrophil chemotact mediators (KC and MIP-2) was completely reduced by that derived from TLR9-/- mice, affecting neutrophil migration into Boyden chamber. Altogether, we demonstrated that TLR9 presents a critical role in the protective response against L.infantu through the mechanism dependent of crosstalk between neutrophil recruitment and DC activation.

A leishmaniose visceral (LV) é uma doença crônica e potencialmente fatal causada, no Brasil, pelo protozoário Leishmania infantum. A resistência à LV é relacionada ao desenvolvimento de uma resposta imune celular eficiente. Para isso, células dendríticas (DCs) reconhecem produtos antigênicos do parasito, através dos Toll-like Receptors (TLRs), e, após ativação, produzem fatores, que irão orquestrar o recrutamento celular e desenvolvimento da resposta imune protetora. Dentre os vários TLRs, tem sido demonstrado que o TLR9 está relacionado com a resistência à infecção em modelo de leishmaniose cutânea. No presente estudo, nosso objetivo foi determinar o papel do TLR9 durante a infecção por L. infantum. Nossos resultados demonstram que a expressão de TLR9 é modulada positivamente durante a infecção in vivo e in vitro pela L. infantum. O TLR9 é essencial para o controle da infecção contra L. infantum, uma vez que camundongos TLR9-/- são mais susceptíveis à infecção, apresentando maior número de parasitos no baço e fígado na 4ª e 6ª semana pós-infecção. A fenotipagem de leucócitos presente no baço demonstrou que camundongos TLR9-/- possuem menor número de neutrófilos. De maneira semelhante, a análise imuno-histoquímica mostrou uma reduzida marcação de células 7/4+ (específica para neutrófilos) no fígado de animais TLR9-/-. A falha na migração de neutrófilos observada em animais TLR9-/- não está associada a uma incapacidade de ativação dos polimorfonucleares, mas sim a deficiências na produção de fatores quimiotáticos, como CXCL1 (KC) e CXCL2 (MIP-2) nos órgãos-alvo. Investigando o mecanismo de ação, as células dendríticas oriundas de animais TLR9-/- falham em seu processo de ativação frente à infecção in vitro e in vivo com L. infantum, apresentando um fenótipo semi-maduro, com redução de expressão de MHC-II e moléculas coestimuladoras. Interessante que essas células apresentaram deficiência na produção de mediadores quimiotáticos de neutrófilos como KC e MIP-2, e consequentemente, induzindo o menor recrutamento de neutrófilos in vitro. Em conjunto, nossos resultados demonstram que o TLR9 é essencial para o controle da infecção por L. infantum, através de um mecanismo dependente do recrutamento de neutrófilos para o sítio inflamatório mediado pela ativação apropriada de fatores quimiotáticos de neutrófilos pelas DCs. / Visceral leishmaniasis (VL) is a chronic and potentially fatal disease caused by protozoan Leishmania infantum, in Brazil. The resistance against VL is related to the development of cellular immune response. During infection, the dendritic cells (DCs) recognize antigenic products through Toll-like Receptors (TLRs) and then orchestrate the cellular recruitment and immune response development. Among several TLRs, it has been showed that TLR9 is related to resistance to cutaneous leishmaniasis. In the present study, our aim was to determinate the role of TLR9 during L. infantum infection. Our results demonstrated that TLR9 is up regulated during in vitro and in vivo L. infantum infection. TLR9 is critical for protective immunity against L. infantum, since TLR9-/- mice infected were more susceptible to infection, displaying high amounts of parasites in spleen and liver, at 4th and 6th weeks post-infection. Phenotyping the leukocytes into the spleen, TLR9-/- mice presented reduced neutrophils when compared to WT. Likewise, imunohistochemistry analyses showed the reduced of 7/4+ cells (specific to neutrophils) staining into the TLR-9-/- liver. The failure of neutrophil migration is not associated to their stage of activation impaired, but due the reduced levels of CXCL1 (KC) and CXCL2 (MIP-2) (neutrophil chemoatracttant) produced into into the spleen cells culture from infected TLR9-/-. Furthermore, DCs from TLR9-/- presented a semi-mature stage during in vitro and in vivo L. infantum infection, showing reduced expression of MHC-II and co-stimulatory molecule. Interestingly, the ability of DC to produce the neutrophil chemotact mediators (KC and MIP-2) was completely reduced by that derived from TLR9-/- mice, affecting neutrophil migration into Boyden chamber. Altogether, we demonstrated that TLR9 presents a critical role in the protective response against L.infantu through the mechanism dependent of crosstalk between neutrophil recruitment and DC activation.

Made available in DSpace on 2016-08-19T17:47:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vera Lucia Lopes Barros.pdf: 356672 bytes, checksum: fa9fcb65e8732da1508a875220de3fc2 (MD5) Previous issue date: 2006-11-27 / The Lutzomyia longipalpis vector of the Leishmania chagasi, etiológico agent of Leishmaniose American Visceral (LVA). One verified the hens influence in the distribution and longipalpis maintenance of Lutzomyia in the human environment. The study intra was carried through in environments and peridomicílio of 12 houses in the Preiçueira city of Is Jose de Ribamar-MA, with the 06 lumisosas traps CDC of the 18 hs. It of the 512 flebótomos was studied relative abudancia and had been captured L.longipalpis, being 105 units in the houses without hen house and 407 in the houses with hen house. In the distance of the hen houses for the habitations human beings and the influence of the hens in the attraction of the vector for the intradomicílio. In this Goal the repetitions had been captured 36 added specimens. The effect of the hen house in the accessibility of the habitation human being for the flebótomos was resulted in 320 l L.longipalpis units of in the interior of an abandoned house, was observed that in the last night, with the addition of longipalpis females of L., 78.8% of the total sample were captured. For ends of comparison of the importance of the hen in the attraction of the Lutzomya longipalpis, hens had been carried through captures during 4 nights using only isca. One verified that the bird continued attracting the vector for the intradomicílio had been collected 55 specimens of this insect, in the first night with 5 (9%), second 16 (29%), third 16 (29%) and in the fourth night with 18 (33%) of the total sample. In all the carried through goals the hen was important in the attraction of flebotómo, more isca of females of the same species was the one that more attracted the Lutzomyia longipalpis for the interior of the domiciles. / Americana (LVA). Verificou-se as galinhas influenciam na distribuição e manutenção de Lutzomyia longipalpis no ambiente humano. O estudo foi realizado nos ambientes intra e peridomicílio de 12 casas na Preiçueira município de São José de Ribamar-MA, com armadilhas lumisosas CDC das 18 as 06 hs. Estudou-se a abudancia relativa dos flebótomos e foram capturados 512 L.longipalpis, sendo 105 exemplares nas casas sem galinheiro e 407 nas casas com galinheiro. A distância dos galinheiros para as habitações humanas e a influência das galinhas na atração do vetor para o intradomicílio. Nesta Meta foram capturados 36 espécimes somados as repetições. O efeito do galinheiro na acessibilidade da habitação humana pelos os flebótomos resultou-se em 320 exemplares de L. longipalpis no interior de uma casa abandonada, observou-se que na última noite, com o acréscimo de fêmeas de L. longipalpis, capturou-se 78,8% da amostra total. Para fins de comparação da importância da galinha na atração da Lutzomya longipalpis, foram realizadas capturas durante 4 noites usando apenas a isca galinhas. Verificou-se que a ave continuou atraindo o vetor para o intradomicílio foram coletados 55 espécimes deste inseto, na primeira noite com 5 (9%), segunda 16 (29%), terceira 16 (29%) e na quarta noite com 18 (33%) da amostra total. Em todas as metas realizadas a galinha foi importante na atração do flebotómo, mais a isca de fêmeas da mesma espécie foi a que mais atraiu a Lutzomyia longipalis para o interior dos domicílios.

Made available in DSpace on 2016-08-19T17:47:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Eliana Alves Lima.pdf: 553107 bytes, checksum: be4bd4e239925385f7fa29eb8819cb22 (MD5) Previous issue date: 2007-04-10 / Prospectivo study of the conditions and methods of the education of science in schools of basic education in São Luís as form of recognition between pupils of Leishmaniose American Visceral (LVA), problem of endemic health in the island of Is Luis with prevalence in children in the pertaining to school etária band. It is focused necessity of contribution of the school for the clarification of the community on the control of the illness. The research had as objective to verify if the education of sciences in the schools of basic education contributes for the recognition, between pupils, of leishmaniose visceral. The study it was carried through in the Island of São Luís, in the localities of Cidade Olímpica, the city of Are Luis and Vila Bom Viver in the City of Raposa as endemic areas for collection of data and the quarters of Alemanha and Centro in the City of São Luís, as control areas. Five schools of the municipal public net had been selected, being 3 in endemic area and 2 in not endemic area, for application of questionnaires halfstructuralized between the pupils of 3ª and 7ª series of basic education with questions on recognition of the epidemiologia of the LVA and on partner-economic aspects of the pupils. Tests of Qui-Square (x2) of independence had been applied to analyze the differences in the level of knowledge on the LVA in the searched schools. The result analysis showed that it did not have significant difference in the answers of the two areas with regard to the knowledge of the LVA (x2 = 0,886), as well as on its transmission (x2 1,904); in the questions on the form of knowledge on illness only 4.4% of the pupils in endemic area and 3.8% in not endemic area they affirm to have heard to speak on the LVA in the science lessons; however in the two areas it did not have reply difference on the learning by means of the science lesson (x2 = 0,007). The school is concluded exactly that it does not have significant difference in the knowledge of the pupils of endemic and not endemic area on the LVA and that the lessons of sciences are not contributing for the recognition of the illness, when if it finds in a community of endemic area, that, therefore, it possess greater contact with the problematic one. / Estudo prospectivo das condições e métodos do ensino de ciência em escolas de ensino fundamental em São Luís como forma de reconhecimento entre alunos da Leishmaniose Visceral Americana (LVA), problema de saúde endêmica na ilha de São Luis com prevalência em crianças na faixa etária escolar. Enfoca-se a necessidade de contribuição da escola para o esclarecimento da comunidade sobre o controle da doença. A pesquisa teve como objetivo verificar se o ensino de ciências nas escolas de ensino fundamental contribui para o reconhecimento, entre alunos, da leishmaniose visceral. O estudo foi realizado na Ilha de São Luís, nas localidades de Cidade Olímpica, no município de São Luis e Vila Bom Viver no Município de Raposa como áreas endêmicas para coleta de dados e os bairros da Alemanha e Centro no Município de São Luís, como áreas de controle. Foram selecionadas cinco escolas da rede pública municipal, sendo 3 em área endêmica e 2 em área não endêmica, para aplicação de questionários semi-estruturados entre os alunos de 3ª e 7ª séries do ensino fundamental com perguntas sobre reconhecimento da epidemiologia da LVA e sobre aspectos sócio-econômicos dos alunos. Foram aplicados testes de Qui-Quadrado (x2) de independência para analisar as diferenças no nível de conhecimento sobre a LVA nas escolas pesquisadas. A análise de resultado mostrou que não houve diferença significativa nas respostas das duas áreas com relação ao conhecimento da LVA (x2 = 0,886), assim como sobre sua transmissão (x2 1,904); nos quesitos sobre a forma de conhecimento sobre a doença apenas 4,4% dos alunos em área endêmica e 3,8% em área não endêmica afirmam ter ouvido falar sobre a LVA nas aulas de ciência; porém nas duas áreas não houve diferença de resposta sobre a aprendizagem por meio da aula de ciência (x2 = 0,007). Conclui-se que não há diferença significativa no conhecimento dos alunos de área endêmica e não endêmica sobre a LVA e que as aulas de ciências não estão contribuindo para o reconhecimento da doença, mesmo quando a escola se encontra em uma comunidade de área endêmica, que, portanto, possui maior contato com a problemática.