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Caracterização molecular de um fitoplasma associado ao superbrotamento do melão-de-São-Caetano (Momordica charantia L) com base nas sequências dos genes 16S rRNA e secY / Molecular characterization of a phytoplasma associated with Momordica charantia witches\'-broom based on the sequences of the genes 16S rRNA and secY

Elizeu Merizio Munhoz 30 January 2013 (has links)
O melão-de-São-Caetano (Momordica charantia L) é uma cucurbitácea que ocorre em todas as regiões geográficas brasileiras. A espécie apresenta duas \"variedades\" distintas, comumente conhecidas por \"variedade silvestre\" e \"variedade cultivada\", esta última caracterizada por plantas de maior tamanho. Plantas da \"variedade selvagem\" são hospedeiras de um fitoplasma do grupo 16SrIII-J, que causa superbrotamento de ramos, nanismo generalizado, clorose, redução no tamanho de folhas e frutos. No entanto, não há informação da \"variedade cultivada\" ser hospedeira de fitoplasmas. Assim, no presente estudo, plantas sintomáticas desta \"variedade\" foram analisadas quanto à presença de fitoplasmas em seus tecidos, visando associar este tipo de patógeno à doença. Neste mesmo trabalho, os isolados do fitoplasma encontrados nas plantas sintomáticas da \"variedade cultivada\" foram molecularmente analisados em relação ao gene secY, atualmente usado como um marcador que permite identificar variações genéticas sutis. Buscou-se, com isto, identificar possíveis variantes entre os isolados. Amplificações de fragmentos de DNA a partir dos genes 16S rRNA (1,2Kb) e secY (1,6Kb) demonstraram a associação de fitoplasma do grupo 16SrIII com as plantas sintomáticas de melão-de-São-Caetano da \"variedade cultivada\". Nestas plantas, corpúsculos pleomórficos, típicos de fitoplasmas, foram visualizados no floema dos tecidos doentes, confirmando os resultados dos testes moleculares. Análises de RFLP virtual, conduzidas com o fragmento genômico correspondente ao gene secY e diversas enzimas de restrição, permitiram identificar o referido fitoplasma como pertencente ao subgrupo 16SrIIIJ. A análise filogenética evidenciou que o fitoplasma padrão do subgrupo 16SrIII-J emergiu do mesmo ramo que o fitoplasma identificado no melão-de-São-Caetano, confirmando que ambos estão estritamente relacionados. O emprego do gene secY como marcador para diferenciação fina entre fitoplasmas não apontou variabilidade genética entre os isolados do fitoplasma detectado tanto nas plantas da \"variedade cultivada\" como naquelas pertencentes à \"variedade selvagem\". Como conclusão, a \"variedade cultivada\" de M. charantia é hospedeira do mesmo fitoplasma encontrado na \"variedade selvagem\", o qual é afiliado ao subgrupo 16SrIII-J; por sua vez, o gene seY não distinguiu geneticamente os isolados do fitoplasma pertencente ao subgrupo 16SrIII-J, presentes nas plantas de melão-de-São- Caetano. / Momordica charantia is a species of the family Cucurbitaceae that occurs in all Brazilian geographic regions. This species presents two distinct \"varieties\", commonly called \"wild variety\" and \"cultivated variety\", whose plants are bigger than those belonging to the \"wild variety\". Plants of the \"wild variety\" are hosts of a phytoplasma of the group 16SrIII-J, which is associated with shoot proliferation, stunting, chlorosis, and small leaves and fruits. However, there is no information about the occurrence of phytoplasmas in plants of the \"cultivated variety\". Thus, in the present study, symptomatic plants belonging to this \"variety\" were analysed in order to associate phytoplasmas with the disease. In addition, strains of the phytoplasma found in symptomatic plants of the \"cultivated variety\" were molecularly analyzed in relation to the gene secY, which is currently used as a marker for identification fine of genetic diversity, aiming provide elements for construction of new schemes for classification of phytoplasmas. The objective was to identify distinct strains among the strains present in plants of the wild and cultivated varieties. Amplifications of DNA fragments from the genes 16Sr rRNA (1.2Kb) and secY (1.6Kb) demonstrated the association of a phytoplasma of group 16SrIII with the symptomatic plants belonging to \"cultivated variety\". These plants revealed the presence of pleomorphic bodies, typical of phytoplasmas, which was visualized in the phloem vessel from diseased tissues, confirming the results obtained by molecular assays. Virtual RFLP analysis, performed with the genomic fragment corresponding to the gene secY and various restriction enzymes, allowed to identify this phytoplasma as a member of the subgroup 16SrIII-J. Phylogenetic analysis revealed that the phytoplasma used as reference for 16SrIII-J subgroup and the phytoplasma identified in plants of M. charantia emerged from the same branch, confirming that both phytoplasmas are closely related. The gene secY, used as marker for fine differentiation of phythoplasmas, did not show genetic variability among the strains of the phytoplasma detected both plants belonging to \"cultivated variety\" and \"wild variety\". In conclusion, plants of the \"cultivated variety\" are hosts of the same phytoplasma found in the \"wild variety, which is affiliated with the 16SrIII-J subgroup; in addition, the gene secY did not distinguish isolates of the phytoplasma belonging to 16SrIII-J subgroup, present in plants of M. charantia.
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Amarelos da videira: identificação e análise filogenética dos fitoplasmas, transmissão dos agentes causais e otimização da diagnose / Grapevine yellows: identification and phylogenetic analyses of the phytoplasmas, transmition of the causal agents and diagnosis optimization

Raquel de Cássia Neroni 05 June 2009 (has links)
Fitoplasmas são procariotos sem parede celular, pertencentes à classe dos Mollicutes, que habitam os vasos de floema e causam doenças de relevância econômica em uma ampla gama de espécies vegetais. A videira (Vitis sp) é a terceira fruteira mais cultivada no mundo e apresenta elevada importância econômica no Brasil. Aspectos fitossanitários se constituem em fatores limitantes da produção, com destaque para as doenças causadas por fitoplasmas, denominadas de amarelos. Essas doenças estão amplamente disseminadas nos continentes europeu e americano, ocorrendo em tradicionais países produtores. Plantas exibindo sintomas característicos da doença têm sido também observadas em cultivos comerciais localizados em algumas áreas do território brasileiro. Visando investigar este tipo de doença, plantas sintomáticas foram amostradas em parreirais comerciais dos Estados de São Paulo e Paraná e mantidas em casa de vegetação. O presente estudo visou demonstrar a associação entre fitoplasmas e os amarelos, identificar e analisar filogeneticamente os fitoplasmas detectados, demonstrar sua transmissão para plantas sadias e determinar o melhor estádio fenológico da planta para amostragem de tecidos, para confirmação da diagnose. Para isto, durante 45 meses, amostras foram coletadas de plantas doentes envasadas sendo usado o método de PCR, análise de RFLP, sequenciamento das bases nucleotídicas e enxertia de tecidos entre plantas de videira. Os produtos amplificados em PCR evidenciaram a presença de fitoplasmas em todas as plantas portadoras de amarelos. Estes fitoplasmas foram identificados como representantes dos grupos 16SrI-B e 16SrIII, os quais ocorreram em infecções simples ou mistas. Os fitoplasmas apareceram em todas as fases de desenvolvimento da planta, porém com maior freqüência nas amostras coletadas no estádio fenológico correspondente à brotação de ramos e aparecimento de folhas novas. Esta fase se mostrou a mais indicada para as amostragens, visando à detecção de fitoplasmas para fins de diagnose. A transmissão dos fitoplasmas por enxertia foi alta, demonstrando que estes são os agentes causais da doença e que inspeções devem ser adotadas como medida de controle para evitar sua disseminação via material de propagação vegetativa. / Phytoplasmas are wall-less prokaryotes, phloem-limited plant pathogens, belonging to Mollicute class. They are agents of diseases that cause serious damage to a diversity of cultivated especies. Grapevine (Vitis sp) is the third most cultivated fruit crop in the world and it has high economical impact in Brazil. Phytossanitary aspects are important production constraint factors, especially regarding diseases caused by phytoplasmas, which are generally known as grapevine yellows. These diseases are widely spread throughout main producer countries, located in Europe and North America. Plants exhibiting typical symptoms of the disease have also been observed in crops located in some areas of Brazilian territory. In order to investigate this kind of malady, symptomatic plants were sampled from commercial vineyards located in the States of São Paulo and Paraná, Brazil and kept in greenhouse conditions. The present study aimed to: demonstrate the association between phytoplasmas and yellows; identify and analyse phylogenetically the detected phytoplasmas; demonstrate their transmission to healthy plants and determinate optimal phenologycal stage for phytoplasma detection to diagnosis confirmation. Samples were collected from diseased plotted plants grown during 45 months. PCR method, RFLP analyses, sequencing of nucleotide bases from 16S rRNA, and grafting technique were used in this study. Amplified genomic fragments revealed the presence of phytoplasmas in all plants with symptoms of yellows. Those phytoplasmas were identified as representatives of the groups 16SrI-B and 16SrIII, occurring in simple and mixed infections. Phytoplasmas were detected in all phenological stages evaluated, but they occurred with high frequences in material collected during budburst. These stage may be considered as the most indicated for sampling to confirm diagnosis based on symptomatology. Phytoplasmas transmission by grafting of healthy scion grafts onto infected rootstocks was high, demonstrating that they are the disease agents and inspection is a control practice that must be adopted to prevent their dissemination through propagative material.
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Characterization of Effector Encoding Genes from the Novel Sugar Beet Pathogen Fusarium Secorum

Bian, Zhuyun January 2015 (has links)
A new disease of sugar beet, named Fusarium yellowing decline, was recently found in in the Red River Valley of MN and ND. This disease is caused by a novel pathogen named Fusarium secorum. Pathogens such as F. secorum secrete proteins during infection called ‘effectors’ that help establish disease. Since pathogenicity and disease development may depend on effector proteins produced by F. secorum during infection, effector protein identification furthers our understanding of the biology of this important pathogen. A list of 11 candidate effectors was generated previously. In this study, to characterize putative effectors, we developed a transformation system using polyethylene glycol–mediated transformation. Several mutant lines were created with an effector deleted from the genome using a split-marker knock-out strategy. To explore their role in pathogenicity, mutant strains have been inoculated to sugarbeet and compared to WT F. secorum.
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First report of Cucurbit Chlorotic Yellows Virus (CCYV) and Tomato Leaf Curl New Delhi Virus (ToLCNDV) in Algeria and Lack of Evidence for Seed Transmission of ToLCNDV in Melon and Pumpkin

Kheireddine, Amina 14 September 2023 (has links)
[ES] En este trabajo, se detectó por primera vez el virus de la clorosis amarilla de las cucurbitáceas (CCYV, cucurbit chlorotic yellows virus) infectando pepino y calabacín en Argelia. El CCYV (género Crinivirus, familia Closteroviridae) forma parte de un complejo de virus transmitidos por la mosca blanca Bemisia tabaci, que causan enfermedades de amarillamiento en las cucurbitáceas. Se obtuvo la secuencia completa del gen que codifica la proteína de la cápside (CP) y secuencias parciales de los genes RdRp y Hsp70 de un aislado argelino de CCYV y se compararon con las secuencias presentes en las bases de datos. ToLCNDV (género Begomovirus, familia Geminiviridae) también se detectó por primera vez infectando plantas de cucurbitáceas en Argelia. ToLCNDV es un begomovirus bipartito que causa importantes epidemias en cultivos económicamente valiosos de las familias Solanaceae y Cucurbitaceae. Se obtuvo la secuencia genómica completa de un aislado de ToLCNDV de pepino de Argelia (ToLCNDV-Biskra). La alineación de las secuencias de nucleótidos de los segmentos de ADN-A y ADN-B reveló identidades del 98,7% y 97,6%, respectivamente, con los segmentos de los aislados de la cuenca del Mediterráneo, mientras que la identidad con los aislados de Asia fue de aproximadamente del 90% y 81%. Los aislados presentes en la cuenca mediterránea son monofiléticos y forman un único grupo, mientras que los aislados de la cepa asiática presentan una mayor variabilidad genética y forman varios grupos. Todos los aislados de Argelia mostraron una variación de nucleótidos muy baja. Solo se observó una duplicación de 17 nucleótidos en el ADNB de algunos aislados que daría lugar a una proteína de movimiento 53 aminoácidos más larga, aunque la funcionalidad de esta supuesta proteína es desconocida. A pesar de esa duplicación, no se detectaron eventos de recombinación entre los aislados secuenciados. La baja variación genética podría dificultar la detección de recombinantes. / [CA] En aquest treball, es va detectar per primera vegada el virus de la clorosi groga de les cucurbitàcies (CCYV, cucurbit chlorotic yellows virus) infectant cogombres i carabassetes a Algèria. El CCYV (gènere Crinivirus, família Closteroviridae) forma part d'un complex de virus transmesos per mosca blanca que causen malalties d'esgrogueïment en les cucurbitàcies. Es va realitzar la determinació de la seqüència completa de la proteïna de la càpsida (CP) i seqüències parcials dels gens RdRp i Hsp70 d'un aïllat algerià de CCYV i es van comparar amb les seqüències publicades en les bases de dades. ToLCNDV (gènere Begomovirus, família Geminiviridae) també va ser detectat per primera vegada infectant plantes de cucurbitàcies a Algèria. ToLCNDV és un begomovirus bipartit que causa importants epidèmies en cultius econòmicament valuosos de les famílies Solanaceae i Cucurbitaceae. Es va obtindre la seqüència genòmica completa d'un aïllat de ToLCNDV de cogombre d'Algèria (ToLCNDV-Biskra). La alineació de les seqüències de nucleòtids del segments d'ADN-A i ADN-B van mostrar identitats del 98.7% i 97.6%, respectivament, amb els segments corresponents dels aïllats de la conca del Mediterrani, mentre que la identitat amb els aïllats d'Àsia va ser d'aproximadament el 90% i 81%. Els aïllats presents a la conca del Mediterrani són monofilètics i formen un únic grup, mentre que els aïllats de la soca asiàtica presenten una major variabilitat genètica i s'agrupen en diversos grups. Tots els aïllats algerians van mostrar una variació de nucleòtids molt baixa. Només es va observar una duplicació de 17 nucleòtids en d'ADNB d'alguns aïllats que lonaria lloc a una proteïna de moviment 53 aminoàcids més llarga, encara que la funcionalitat d¿aquesta suposada proteïnaés desconeguda. A més, malgrat la duplicació, no es van detectar esdeveniments de recombinació entre els aïllats seqüenciats. La baixa variació genètica podria dificultar la detecció de recombinants. / [EN] In this work, cucurbit chlorotic yellows virus (CCYV) was first detected infecting cucumber and zucchini in Algeria. CCYV (genus Crinivirus, family Closteroviridae) is part of a complex of whitefly-transmitted viruses that cause yellowing disease in cucurbits. Determination of the complete CP, and partial RdRp and Hsp70 sequences of an Algerian CCYV isolate was conducted to unveil the evolutionary relationships with the published isolates in databases. The phylogenetic analysis showed that the Algerian isolate clustered into group I together with the majority of the reported CCYV isolates. ToLCNDV (genus Begomovirus, family Geminiviridae) was also detected for the first time infecting cucurbit plants in Algeria. ToLCNDV is a bipartite begomovirus that causes major epidemics in economically valuable crops. epidemics in economically valuable crops of the Solanaceae and Cucurbitaceae families. Cucurbitaceae. The complete genome sequence of a ToLCNDV isolate from Algerian cucumber (ToLCNDV from Algeria (ToLCNDV-Biskra) was obtained. Alignment of the nucleotide sequences of the A-DNA and B-DNA segments revealed the identity of the DNA-A and DNA-B segments revealed identities of 98.7% and 97.6%, respectively, with the segments of the isolates from the Algerian segments of the Mediterranean basin isolates, while the identity with the Asian isolates was approximately 90% and 81%, respectively. was approximately 90% and 81%. The isolates present in the Mediterranean Basin are monophyletic and form a single monophyletic and form a single cluster, whereas isolates from the Asian strain have a higher genetic variability and form several clusters. genetic variability and form several clusters. All isolates from Algeria showed very low nucleotide variation. very low nucleotide variation. Only a duplication of 17 nucleotides was observed in the B-DNA of some isolates which would result in a longer 53 amino acid movement protein, although the functionality of this putative protein is unknown. Despite this duplication, no recombination events recombination events were detected among the sequenced isolates. The low genetic variation could hinder the detection of recombinants. / This work was supported by the following grants: Programa de Ayudas de Investigación y Desarrollo (PAID-11-21) of the Universitat Politècnica de València; PID2021-125787OR-C33 funded by MCIN/AEI/10.13039/501100011033 and by “ERDF A way of making Europe”; and PROMETEO project for excellence groups 2021/072 Conselleria de Innovación, Universidades, Ciencia y Sociedad Digital (Generalitat Valenciana). / Kheireddine, A. (2023). First report of Cucurbit Chlorotic Yellows Virus (CCYV) and Tomato Leaf Curl New Delhi Virus (ToLCNDV) in Algeria and Lack of Evidence for Seed Transmission of ToLCNDV in Melon and Pumpkin [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/196840
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Diversity of aster yellows phytoplasmas in lettuce

Zhang, Jianhua 03 February 2004 (has links)
No description available.
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Incidencia, caracterización y epidemiología del virus de la tristeza de los cítricos en Chile

Besoain Canales, Jimena Alejandra 07 May 2008 (has links)
El virus de la tristeza de los cítricos (CTV) ha causado millonarias pérdidas a la citricultura a nivel mundial. En Chile, la situación real era desconocida aunque se había reportado su presencia en limoneros Meyer, los que fueron erradicados. El objetivo de esta tesis fue analizar la situación actual de CTV en Chile, realizar una amplia prospección y estimar su incidencia, estudiar su epidemiología y realizar una caracterización biológica, serológica y molecular de 100 aislados chilenos de CTV representativos. Se realizó un estudio epidemiológico en seis parcelas experimentales y dos ensayos de trasnsmisión con 10 aislados representativos. CTV fue detectado en casi todas las zonas citrícolas de Chile, con una incidencia media del 0,38%. En el oasis de Pica (I Región), se observaron acanaladuras en la madera en árboles de pomelo y lima mejicana. Se detectan todas las especies vectoras de CTV, a excepción de Toxoptera citricida. En la zona central de Chile se determina la presencia mayoritaria de aislados atenuados (MCA13 negativos). En la I Región (oasis de Pica y Malilla) la presencia de aislados agresivos, siendo todos MCA13 positivos y características moleculares asociadas al tipo VT. Se demostró un aumento en la incidencia de CTV en las parcelas experimentales, salvo en un huerto de limonero. En ensayos de transmisión sólo un aislado de CTV fue transmitido con una eficiencia baja de transmisión. En base a los resultados obtenidos se dan recomencaciones para la citricultura chilena. / Besoain Canales, JA. (2008). Incidencia, caracterización y epidemiología del virus de la tristeza de los cítricos en Chile [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/2009 / Palancia
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Detecção e identificação molecular de fitoplasmas associados ao amarelo da videira. / Detection and molecular identification of phytoplasmas associated to grapevine yellow disease.

Neroni, Raquel de Cássia 01 February 2005 (has links)
Os amarelos estão associados a fitoplasmas, procariotos pertencentes à classe Mollicutes que não possuem parede celular e habitam o floema de plantas. Os danos causados pelas doenças de etiologia fitoplasmática são relevantes e podem ocorrer em diversas espécies economicamente importantes. Em videira, pesquisas realizadas em várias partes do mundo têm relatado a presença das doenças do tipo "amarelo", porém, no Brasil, estas doenças ainda não foram relatadas para esta cultura. Em vinhedos comerciais localizados nos Estados de São Paulo e Paraná têm sido observadas plantas com sintomas semelhantes àqueles provocados por fitoplasmas em outros países. Estes sintomas têm sido caracterizados por amarelecimento e ou avermelhamento foliar, necrose do limbo e rachaduras nas nervuras principais. Com o objetivo de detectar e identificar molecularmente fitoplasmas associados a estes tipos de sintomas, folhas e ramos foram amostrados a partir de plantas sintomática e assintomáticas. A detecção foi conduzida com PCR duplo usando-se os iniciadores R16 mF1/mR2 ou P1/P7 na primeira reação e R16 F2n/R2 na segunda reação. A identificação foi realizada através de PCR duplo com iniciadores específicos e análises de RFLP com as enzimas de restrição AluI, RsaI, KpnI, MseI, HhaI, HpaII, HinfI e MboI. Em 23 plantas amostradas, fitoplasmas foram detectados em 10 delas, através da amplificação do 16S rDNA, visualizado em gel de agarose na forma de bandas de 1,2Kb. A identificação por PCR demonstrou que os fitoplasmas associados ao amarelo da videira pertenciam aos grupos 16SrI e 16SrIII. As análises dos perfis eletroforéticos obtidos com o uso da técnica de RFLP revelaram a presença de fitoplasmas afiliados ao subgrupo 16SrI-B. A constatação de fitoplasmas pertencentes a estes dois grupos nas plantas amostradas demonstraram a ocorrência da doença conhecida como amarelo da videira nos Estados de São Paulo e Paraná. As pesquisas desenvolvidas neste trabalho vêm contribuir para aumentar os conhecimentos sobre o papel e a diversidade dos fitoplasmas no agroecossistema brasileiro. / Yellows diseases are associated with phytoplasmas, wall-less prokaryotes, inhabitant of phloem vessels. Damage caused by these diseases are relevant for some important cultivated botanical species. Grapevine yellows diseases have been observed in several areas of the world, but in Brazil the presence of these diseases had not been reported yet. In vineyards located in São Paulo and Paraná States, plants exhibiting symptoms similar those observed in grapevines from other countries have been observed. The symptoms were characterized by yellowing or redding of leaf blade and ribs, leaf blade necrosis and main ribs fissures. In order to detect and identify phytoplasmas associated with those kind of symptoms, leaves and stems were sampled from symptomatic and asymptomatic plants. The phytoplasma detection was conducted with nested PCR using the primer pairs R16mF1/mR2 or P1/P7 for first reaction and 16 F2n/R2 for second reaction. The identification was carried out by nested PCR with group-specifc primer pairs and RFLP analyses with enzymes AluI, RsaI, KpnI, MseI, HhaI, HpaII, HinfI and MboI. From a total of 23 samples analysed, phytoplasmas were detected in 10 of them, through amplification of the 16S rDNA, visualized through a 1.2Kb band in agarose gel. The identification by PCR demonstrated that phytoplasmas associated with grapevine yellow belong to 16SrI and 16SrIII groups. Analyses of electrophoretic profiles revealed the presence of phytoplasmas affiliated to 16SrI-B subgroup. The presence of phytoplasmas belonging to these two groups in the sampled plants demonstrated the occurrence of yellow disease in grapevine in São Paulo and Paraná States. The investigation conducted in the present work contributed to the knowledgement of the role and the diversity of phytoplasmas in Brasilian ecosystem.
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Detecção e identificação molecular de fitoplasmas associados ao amarelo da videira. / Detection and molecular identification of phytoplasmas associated to grapevine yellow disease.

Raquel de Cássia Neroni 01 February 2005 (has links)
Os amarelos estão associados a fitoplasmas, procariotos pertencentes à classe Mollicutes que não possuem parede celular e habitam o floema de plantas. Os danos causados pelas doenças de etiologia fitoplasmática são relevantes e podem ocorrer em diversas espécies economicamente importantes. Em videira, pesquisas realizadas em várias partes do mundo têm relatado a presença das doenças do tipo “amarelo”, porém, no Brasil, estas doenças ainda não foram relatadas para esta cultura. Em vinhedos comerciais localizados nos Estados de São Paulo e Paraná têm sido observadas plantas com sintomas semelhantes àqueles provocados por fitoplasmas em outros países. Estes sintomas têm sido caracterizados por amarelecimento e ou avermelhamento foliar, necrose do limbo e rachaduras nas nervuras principais. Com o objetivo de detectar e identificar molecularmente fitoplasmas associados a estes tipos de sintomas, folhas e ramos foram amostrados a partir de plantas sintomática e assintomáticas. A detecção foi conduzida com PCR duplo usando-se os iniciadores R16 mF1/mR2 ou P1/P7 na primeira reação e R16 F2n/R2 na segunda reação. A identificação foi realizada através de PCR duplo com iniciadores específicos e análises de RFLP com as enzimas de restrição AluI, RsaI, KpnI, MseI, HhaI, HpaII, HinfI e MboI. Em 23 plantas amostradas, fitoplasmas foram detectados em 10 delas, através da amplificação do 16S rDNA, visualizado em gel de agarose na forma de bandas de 1,2Kb. A identificação por PCR demonstrou que os fitoplasmas associados ao amarelo da videira pertenciam aos grupos 16SrI e 16SrIII. As análises dos perfis eletroforéticos obtidos com o uso da técnica de RFLP revelaram a presença de fitoplasmas afiliados ao subgrupo 16SrI-B. A constatação de fitoplasmas pertencentes a estes dois grupos nas plantas amostradas demonstraram a ocorrência da doença conhecida como amarelo da videira nos Estados de São Paulo e Paraná. As pesquisas desenvolvidas neste trabalho vêm contribuir para aumentar os conhecimentos sobre o papel e a diversidade dos fitoplasmas no agroecossistema brasileiro. / Yellows diseases are associated with phytoplasmas, wall-less prokaryotes, inhabitant of phloem vessels. Damage caused by these diseases are relevant for some important cultivated botanical species. Grapevine yellows diseases have been observed in several areas of the world, but in Brazil the presence of these diseases had not been reported yet. In vineyards located in São Paulo and Paraná States, plants exhibiting symptoms similar those observed in grapevines from other countries have been observed. The symptoms were characterized by yellowing or redding of leaf blade and ribs, leaf blade necrosis and main ribs fissures. In order to detect and identify phytoplasmas associated with those kind of symptoms, leaves and stems were sampled from symptomatic and asymptomatic plants. The phytoplasma detection was conducted with nested PCR using the primer pairs R16mF1/mR2 or P1/P7 for first reaction and 16 F2n/R2 for second reaction. The identification was carried out by nested PCR with group-specifc primer pairs and RFLP analyses with enzymes AluI, RsaI, KpnI, MseI, HhaI, HpaII, HinfI and MboI. From a total of 23 samples analysed, phytoplasmas were detected in 10 of them, through amplification of the 16S rDNA, visualized through a 1.2Kb band in agarose gel. The identification by PCR demonstrated that phytoplasmas associated with grapevine yellow belong to 16SrI and 16SrIII groups. Analyses of electrophoretic profiles revealed the presence of phytoplasmas affiliated to 16SrI-B subgroup. The presence of phytoplasmas belonging to these two groups in the sampled plants demonstrated the occurrence of yellow disease in grapevine in São Paulo and Paraná States. The investigation conducted in the present work contributed to the knowledgement of the role and the diversity of phytoplasmas in Brasilian ecosystem.

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