Aeromonas hydrophila ML09-119 is an important fish pathogen that severely affects channel catfish aquaculture. To better understand this strain’s virulence factors, outer membrane vesicles (OMVs) were isolated, and their proteome was assessed. Using transmission electron microscopy and dynamic light scattering, OMVs were shown to be monodispersed particles with an average diameter of 120.33 nm. OMV proteins were identified using mass spectrometry, and analysis of the resulting proteome of 74 proteins revealed that many originated from the cytoplasm, but there was an enrichment of outer membrane, periplasmic, and extracellular proteins compared to the total proteome. The majority of the functional classifications were associated with bacterial metabolism. Of the predicted virulence factors, several had a putative function in adherence, and there were type III secretions system proteins as well as three secreted exotoxins. Overall, our data reveal new insights into A. hydrophila OMVs and their potential roles in physiology and virulence.

The aspects of the biology of Aeromonas hydrophila with respect to a striped mullet (Mugil cephalus L.0 nursery were examined. A. hydrophila density in the natural water was found to be strongly correlated with turbidity and weakly correlated with water temperature. No correlations were found between A. hydrophila density and water depth, dissolved oxygen, pH, total alkalinity, specific conductivity, or phytoplankton chlorophyll concentration. A. hydrophila density/g dry weight of stomach content were found to be correlated with chlorophyll concentration/g dry weight stomach content. The survivability of striped mullet after capture was found to be primarily related to stress. Stressed striped mullet tended to become infected by A. hydrophila more readily. The mortality of transported striped mullet was reduced with the use of quinaldine, a fish tranquilizer, and by reducing crowding during transport.

Orientador: Percilia Cardoso Giaquinto / Resumo: Pesquisas recentes têm considerado aspectos individuais de personalidade em seus resultados. As personalidades podem explicar o sucesso adaptativo e aptidões individuais, além de outros fatores, como a variação imunológica. Estudos realizados em mamíferos comprovam a existência de variação em fatores imunológicos, dependendo do tipo de personalidade. Em peixes, os estudos em relação à personalidade são incipientes e são poucos os estudos que correlacionem perfil de personalidade e predisposição a doenças nesses animais. Assim, testamos a suscetibilidade dos perfis de personalidade tímido e ousado em tilápia do Nilo infectando o ambiente aquático com a bactéria Aeromonas hydrophila. Como resultados obtivemos que as lâminas histológicas com esfregaços sanguíneos apresentaram hifas fungicas e alterações nas membranas dos eritrócitos dos indivíduos com perfil tímido. A infecção bacteriana interferiu no comportamento alimentar de ambos os perfis, com diminuição da ingestão. Por outro lado, a infecção não afetou os demais parâmetros comportamentais e nem o número de células sanguíneas. / Abstract: Recent studies have considered individual aspects of personality in their results. Personalities can explain the adaptive success and individual fitness, and other factors, such as immune variation. Studies in mammals prove the existence of variation in immune factors, depending on type of character. In fishes, the studies on personality are incipient and there isn't study that correlates personality profile and susceptibility to disease in these animals. Thus, we tested the susceptibility of “shy-bold” personality profiles in Nile tilapia infecting the aquatic environment with the bacterium Aeromonas hydrophila. As a result we found that the histological slides with blood scrub showed fungal hyphae and alterations in the erythrocyte membranes of individuals with a shy profile. The bacterial infection interfered in the feeding behavior of both profiles, with decreased ingestion. Still, the infection did not affect the other behavioral parameters nor the number of blood cells. / Mestre

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T10:36:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 285130.pdf: 230840 bytes, checksum: 3fd8eaff1a8926c2458f7dc1a645529d (MD5) / Este estudo avaliou o efeito de vacina polivalente sobre as respostas hematológica e imunológica da tilápia do Nilo desafiada com Aeromonas hydrophila. Duas doses de vacina (1x104 e 1x108 Unidades Formadoras de Colônia (UFC) x mL-1), contendo proporções iguais de Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeruginosa e Enterococcus durans inativadas em formalina, foram testadas por injeção intraperitoneal (i.p.). Os peixes foram desafiados seis dias após a vacinação i.p. com a dose de desafio de 1x107 UFC de A. hydrophila x mL-1 diluída em 1 mL de solução salina estéril. Seis dias após a imunização e 48h após o desafio, foi realizada a análise hematológica, atividades antimicrobiana e aglutinante do soro. Antes do desafio, o número de eritrócitos foi superior nos peixes vacinados com 1x108 UFC x mL-1. Após o desafio, o número total de trombócitos também foi maior nos peixes vacinados com a maior dose. Antes e após o desafio, o número total de leucócitos e o número de linfócitos apresentaram os maiores valores nos peixes vacinados. O número de monócitos nos peixes vacinados e nos injetados com salina foi maior antes do desafio. Após a imunização e o desafio, o soro de peixes vacinados com a maior dose apresentaram maior título de aglutinação contra A. hydrophila, P. aeruginosa e E. durans. Antes do desafio a atividade antimicrobiana do soro foi maior nos peixes não vacinados e nos vacinados com a maior dose, sendo que após o desafio os peixes não vacinados e os injetados com salina apresentaram maior atividade antimicrobiana. Este estudo mostrou que após seis dias, a vacina polivalente na concentração de 1 x108 UFC x mL-1 estimulou a produção de eritrócitos, leucócitos, trombócitos e linfócitos circulantes e reduziu os níveis de glicose.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:07:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 319269.pdf: 636611 bytes, checksum: 289ef05112ae16db4b0eded1dc8d4c81 (MD5) Previous issue date: 2013 / No presente estudo avaliou-se a suplementação de seis níveis (0, 10, 20, 40, 60, 80 g kg-1) de uma fonte de nucleotídeos (NuPro®) no crescimento, utilização de nutrientes, resistência à infecção por patógeno e respostas hemato-imunológicas da tilápia-do-Nilo. No ensaio alimentar, com duração de 75 dias, os peixes (2,63 ± 0,63 g) foram alimentados até a saciedade aparente, três vezes ao dia. Houve aumento linear no consumo, com reflexo no ganho em peso, com o aumento da inclusão de NuPro® nas dietas (P<0,05), sem efeito na sobrevivência, conversão alimentar ou retenção proteica. Após o ensaio de crescimento, os peixes foram desafiados com Aeromonas hydrophila, por injeção intraperitonial. A sobrevivência e as respostas imunes inatas avaliadas (fagocitose e concentração de lisozimas) não foram significativamente afetadas pelas doses do suplemento. Entretanto, dentre as variáveis hematológicas analisadas, a contagem de trombócitos, leucócitos e monócitos aumentaram linearmente (P<0,05). A medida indireta da digestibilidade em juvenis (122,32 ± 11 g), com coleta de fezes por sedimentação, indicou diminuição linear da digestibilidade proteica, energética e matéria seca com a inclusão das doses do suplemento (P<0,05) na ordem de 1,41%, 5,72% e 4,10%, respectivamente. NuPro® se mostrou um aditivo benéfico para suplementação em dietas para juvenis de tilápia-do-Nilo, proporcionando aumentos significativos no ganho em peso e nas contagens de trombócitos, leucócitos e monócitos no sangue, indicando possível reação de defesa mais eficiente nas maiores doses testadas. <br>

Orientador : Angela Maria Moraes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:13:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_AnaPaula_M.pdf: 5214400 bytes, checksum: b8bb3c6ef9ad6478b2e16a5aaa216caa (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A vacinação de peixes por via oral é considerada como uma alternativa relevante de imunização destes animais, visto que elimina o estresse associado com a vacinação via rota parenteral, possibilita a rápida vacinação de um grande número de peixes a custos reduzidos. Entretanto, esta técnica é apenas parcialmente efetiva devido à parcial destruição da vacina no sistema digestivo dos animais e a possíveis interações desta com componentes da ração. Este trabalho abordou a preparação e Cat11cterização de microesferas de alginato incorporando células inativadas de Aeromonas hydrophila, visando a imunização por via oral de peixes do tipo tilápia do Nilo, com cultivo de importância econômica considerável no Brasil, contra esta bactéria, comum na piscicultura de alta densidade animal. O uso de matérias primas de baixo custo e metodologias de preparação passíveis de utilização em escala industrial foi enfocado. Paralelamente aos estudos com Aeromonas hydrophila, efetuou-se estudos comparativos de incorporação de albumina de soro bovino (BSA), como antígeno modelo, nas partículas. As microesferas foram preparadas por emulsão com óleos vegetais, avaliando-se a influência das concentrações de alginato, agente ativo e tenso ativo (Span@ 80), da taxa de agitação e da proporção entre as fases nas características das partículas. Partículas esféricas com diâmetros médios de 55,3 Ilm a 143,0 Ilm contendo de 0,7 a 4,20 mg/mL de BSA foram obtidas, correspondendo a eficiências de incorporação da proteína de 72 a 84 % para BSA. Para as bactérias, a eficiência de incorporação atingiu 100 %, obtendo-se partículas de diâmetro de 39,2 a 82,0 /lm. Partículas contendo 14,22 mg de bactérias obtidas utilizando-se 1:9 (v/v) de fase aquosa (contendo 3,5% de alginato) em relação à fase oleosa (óleo de milho e Span@ 80 a 0,2%) agitadas a 2000 rprn apresentaramse estáveis em condições equivalentes às gastrintestinais por 12 horas / Abstract: The oral vaccination of fishes has been considered a relevant altemative for the innnunization of these animals, since it eliminates the stress eaused by the immunologieal agent parenteral administration, added to the possibility of quickly vaccinating large numbers of animals / Mestrado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Mestre em Engenharia Química

Orientadores: Carlos Francisco Sampaio Bonafé, Cláudio Chrysostomo Werneck / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-17T12:27:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_RicardoDuraesde_M.pdf: 7651307 bytes, checksum: 3194190cf6a33de3b0cdc4ddb7424afd (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A exposição à alta pressão é um método eficiente na inativação bacteriana, o qual é importante para a esterilização de alimentos. Neste trabalho, examinamos a inativação por alta pressão hidrostática em Aeromonas hydrophila AH 191, produtora de aerolisina, a qual possui atividades citotóxica, enterotóxica e hemolítica. Trinta min a 250 MPa (25 °C em PBS 0,1 M, pH 7,4), resultou em 9 log de UFC/mL de inativação bacteriana (a partir de 109 UFC/mL para <10 UFC/mL), porém, os tratamentos não alteraram a atividade hemolítica, enterotóxica e citotóxica produzidas por A. hydrophila AH 191. O sobrenadante de cultura bacteriana e o leite contaminado por A. hydrophila AH 191, pressurizado ou não, foram aplicados sobre células Vero e CaCo2, suspensões de hemácias humanas e de carneiro, e injetadas por via oral gástrica em camundongos Swiss, reproduzindo o ensaio de Dean. Os resultados mostram que os títulos das toxinas em amostras pressurizadas permaneceram iguais aos do controle, assim como as toxinas presentes nos sobrenadantes de cultura e no leite foram capazes de produzir acúmulo de líquidos no intestino de camundongos recém-nascidos. Estes resultados indicam a relevância do estudo na inativação de bactérias para a segurança alimentar e realça a importância de cautela no uso de alta pressão para a esterilização de alimentos, pois embora as bactérias possam ser inativadas, as toxinas produzidas por este micro-organismos podem continuar ativas, representando uma ameaça à saúde humana / Abstract: Exposure to high pressure is an efficient method for bacterial inactivation, which is important for the food sterilization. We examine the inactivation by high hydrostatic pressure in A. hydrophila AH 191, producer of aerolysin, which has cytotoxic, enterotoxic and hemolytic activities. A 30 min treatment at 250 MPa (25 °C in 0.1 M PBS, pH 7,4) resulted in 9 log CFU/mL of bacteria inactivation (from 109 CFU/mL to <10 CFU/mL). However, the treatment did not inactivate the hemolytic, enterotoxic and cytotoxic activities produced by A. hydrophila AH 191. The supernatant of bacterial culture and milk contaminated with A. hydrophila AH 191 pressurized or not were applied to Vero and CaCo2 cells, suspensions of human and sheep erythrocytes, and injected into mice via oral gastric Swiss reproducing the Dean test. The results show that evidence of toxins in samples pressurized remained similar to that of control, and the toxins in culture supernatants and milk were able to produce fluid accumulation in the intestine of suckling mouse. These results indicate the relevance of the study for bacteria inactivation to food security and enhance the importance for caution in the use of high prssure in foods sterilization, since although the bacteria can be inactivated, the toxins produced by micro-organisms continue to be active, representing a human health threat / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Aeromonas hydrophila is a Gram-negative, rod shaped, facultative anaerobic bacterium that is ubiquitous to freshwater and slightly brackish aquatic environments and can cause infections in fish, humans, reptiles, and avian species. Recent severe outbreaks of disease in catfish aquaculture have been associated with a highly virulent Aeromonas hydrophila strain (VAH) that is genetically distinct from less virulent strains. Given that A. hydrophila is known to infect birds, we hypothesized that fish eating birds may serve as a reservoir for VAH and spread the pathogen by flying to uninfected ponds. Great Egrets were used in this transmission model because these wading birds frequently predate catfish farms. We found that Great Egrets that were fed VAH infected catfish shed VAH demonstrating their potential to spread VAH. Histologically there were changes found in selected tissue samples.

Resumo: O tambaqui, Colossoma macropomum, é a espécie de maior importância na piscicultura amazônica. Entretanto, a sua criação tem enfrentado problemas com relação a perdas provocadas pela instalação de doenças que surgem com a intensificação do cultivo. Por isso, o tambaqui foi escolhido como modelo experimental nesta tese. Inicialmente foi avaliado o emprego dos imunoestimulantes 'beta'-glucano e nucleotídeos na dieta do tambaqui sobre o desempenho produtivo, respostas fisiológicas, imunológicas e resistência frente ao desafio com Aeromonas hydrophila, cujos resultados são apresentados no capítulo II. Os resultados deste estudo permitiram estabelecer que a suplementação de 'beta'-glucano e nucleotídeos na dieta do tambaqui não influenciam o desempenho produtivo; que o desafio bacteriano promoveu anemia normocítica-normocrômica ( 'beta'-glucano) e anemia macrocítica-hipocrômica (nucleotídeos); que a suplementação de 'beta'-glucano não alterou a concentração e atividade de lisozima e a de nucleotídeos determinou redução na atividade respiratória de leucócitos, e que a menor suplementação dos imunoestimulantes (0,1% de -glucano e 0,2% de nucleotídeos) promoveu maior sobrevivência para a espécie após o desafio com Aeromonas hydrophila. No capítulo III da tese avaliou-se as respostas fisiológicas de estresse de tambaquis alimentados com dietas suplementadas com 'beta'-glucano ou nucleotídeos após transporte em sistema fechado. Os resultados deste estudo permitiram estabelecer que as alterações dos parâmetros hematológicos, bioquímicos e imunológicos (atividade respiratória de leucócitos) ocorreram imediatamente após o transporte, com retorno aos níveis basais após 24 e 48 horas de recuperação. Entretanto, a suplementação de 'beta'-glucano ou nucleotídeos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Colossoma macropomum is the most farmed species in the Amazon region. Therefore, disease has been a significant problem in tambaqui culture with overcrowding. Thus, the tambaqui was chosen as experimental model in this work. First it was to evaluate the use of the immunostimulants 'beta'-glucan and nucleotide in the tambaqui diet on the productive performance, physiological and immunological responses and resistance of Aeromonas hydrophila challenge exposed into chapter II. These results provide that the 'beta'-glucan and nucleotide dietary supplementation had no influence on the productive performance; that the bacterial challenge promoted normocytic-normochromic anemia ( 'beta'-glucan) and macrocytichipocromic anemia (nucleotide); that the 'beta'-glucan supplementation did not change the lysozime concentration and activity; the nucleotide supplementation determinate the reduction of burst activity of leukocyte and the lowest concentrations of both immunoestimulants (0.1% -glucan and 0.2% nucleotide) were effective to secure higher survival of tambaqui when challenged with Aeromonas hydrophila. After, was to evaluate the physiological stress response of tambaqui fed with 'beta'-glucan or nucleotide supplemented diet after transportation in closed system, exposed into chapter III. The results of this study demonstrated that the alteration in the hematological, biochemical and immunological (oxidative burst of leukocyte) occurred immediately after the transportation and returned to base levels after 24 and 48 hours to recover. However the -glucan and nucleotide supplementation did not reduce the stress responses. In the last, the adjuvant effect of 'beta'-glucan in the efficiency of oil vaccine against Aeromonas hydrophila for tambaqui juveniles in the hematological responses, the concentration and activity... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Flávio Ruas de Moraes / Coorientador: Fabiana Pilarski / Banca: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Banca: Cleni Mara Marzocchi Machado / Banca: Marco Antonio de Andrade Belo / Banca: Margarida Maria Barros / Doutor

The six major drainage basins of Indiana were sampled for Aeromonas hydrophila. Daring the summer of 1979 a statewide mean of 53 colony forming units (W u) per ml with a range of 0-383 was obtained using membrane filter techniques and Rimler-Shotts differential media. Density values were correlated with the following physico-chemical water quality parameters: temperature, dissolved oxygen, and conductivity. Temperature showed the highest significant correlation when regressed with Gru, accounting for 25% of the variation during the statewide survey. Four sites on the White River, Delaware County, Indiana, were sampled biweekly, in the same manner as the statewide surrey, for cne year to determine seasonal variatic± in A:. hydrophila densities. The mean varied from a low of 2 CFC ml-1 in the winter months , a summer high in July of 205 CFU ml-1. No significant correlations could be found between CFU and water quality parameters during summer months. Antibiotic sensitivities were performed on 112 environmental isolates. All were resistant to ampicillin and carbenicillin and all but seven were resistant to cephalothin.Ball State UniversityMuncie, IN 47306