Orientador: Regina Maria Puppin-Rontani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-17T10:32:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castilho_AlineRogeriaFreirede_D.pdf: 4223932 bytes, checksum: d68ac38e0ad424f4cce1e0e952fd0608 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Procedimentos de remoção parcial de cárie, indicados para os dentes com lesão de cárie profunda, utilizam-se do preceito de retirar a dentina mais amolecida e infectada,deixando-se uma fina camada de dentina afetada por cárie, sobre a câmara pulpar, evitandoseassim, exposição pulpar mecânica. Contudo, algumas bactérias cariogênicas podem permanecer na dentina por indeterminados períodos de tempo, podendo ocasionar progressão da lesão. Assim, estudos conduzidos com o propósito de melhorar a propriedade antibacteriana de materiais restauradores, sem, contudo produzir efeitos citotóxicos em células odontoblastóides e capaz de manter as propriedades básicas do material pode ser uma alternativa no tratamento de lesões de cárie profundas, uma vez que não existe um produto comercialmente disponível que associe todas estas características. No intuito de facilitar a apresentação desta Tese, a mesma foi dividida em dois capítulos, como descrito nas proposições seguintes. Capítulo 1: avaliar in vitro as propriedades biológicas (ação antibacteriana contra Streptococcus mutans, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei e Actinomyces viscosus, e cito toxicidade em células de linhagem odontoblástica MDPC-23)e mecânicas (resistência à compressão e à tração diametral) de um cimento de ionômero de vidro modificado por resina (Fuji Lining LC), contendo digluconato de clorexidina em diferentes concentrações (0,2%, 0,5%, 1,25% e 2,5%) e assim determinar a concentração terapêutica para utilização desta substância em tratamentos restauradores. Capítulo 2:verificar in vitro o comportamento de um cimento de ionômero de vidro modificado por resina (Fuji Lining LC) contendo hiclato de doxiciclina nas concentrações 1,5%, 3% e 4,5%frente a diferentes patógenos cariogênicos (Streptococcus mutans, Lactobacillusacidophilus, Lactobacillus casei e Actinomyces viscosus), células odontoblástóides MDPC-23 e quando submetidos aos ensaios mecânicos de resistência à compressão e à tração diametral. Os resultados observados em ambos os estudos mostraram que a incorporação de antimicrobianos ao cimento de ionômero de vidro, é capaz de melhorar significativamente efeito inibitório do cimento contra microrganismos criogênicos. A adição de dig luconato de clorexidina a 2,5% promoveu ligeira alteração no metabolismo e morfologia das células MDPC-23. O hiclato de doxiciclina, quando incorporado ao ionômero de vidro mesmo em maiores concentrações, não causou efeitos tóxicos em cultura de células odontoblásticas MDPC-23. Além disso, o cimento de ionômero de vidro contendo digluconato declorexidina a 2,5% apresentou resistência à compressão reduzida, sem alteração da propriedade de resistência a tração diametral do cimento. A adição de hiclato de doxiciclina não alterou as propriedades mecânicas do cimento. Assim, a adição de hiclato de doxiciclina e de digluconato de clorexidina nas concentrações estudadas produziu aumento na atividade antimicrobiana sem efeitos citotóxicos e alteração nas propriedades mecânicas da mistura, exceto para o digluconato de clorexidina a 2,5%, que apresentou o menor resistência a compressão e alterações no metabolismo e morfologia de células pulpares. / Abstract: Partial caries removal approaches are indicated to the management of deep caries. It consists of the incomplete removal of softened carious dentine during cavity preparation, leaving a soft dentine layer over the pulp, so that it is not mechanically exposed. However, some viable cariogenic bacteria have been found in the remaining affected dentine, which may promote caries lesion progression. Therefore, studies aimed to improve inhibitory effect of the restorative materials, without cytotoxic effects on odontoblast cells and able to keep properties of material could be an alternative to the treatment of deep caries lesions. Nevertheless, the disposal-marketed products do not associate all those features. In order to facilitate the accomplishment of this Thesis, it was divided into two chapters, as described on the following descriptions. Chapter 1: to evaluate in vitro biological properties (antibacterial effect against Streptococcus mutans, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei and Actinomyces viscosus, and cytotoxicity at odontoblast cell line MDPC-23) and mechanical properties (compressive strength and diametral tensile strength) of a resin-modified glass ionomer cement (Fuji Lining LC) containing different concentrations of chlorhexidine digluconate (0.2%, 0.5%, 1.5% and 2.5%) and, thus to determine the therapeutic concentration of it for using in restorative dental treatment. Chapter 2: to verify in vitro the performance of a resin-modified glass ionomer cement (Fuji Lining LC) containing the antibiotic doxycycline hyclate at 1.5%, 3% and 4.5% against some cariogenic pathogens (Streptococcus mutans, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei and Actinomyces viscosus); to analyze it indirect contact with odontoblast-like MDPC-23 cells; and, to reveal the mechanical properties under compressive strength and diametral tensile strength. Results of both studies proved that the incorporation of antimicrobials at adequate proportions into the glass ionomer cement have the ability to become better inhibitory effects of the cement against cariogenic bacteria. The 2.5% chlorhexidine digluconate added to glass ionomer cement promoted slight alteration on the mebolism and morfology of MDPC-23 cells. The incorporation of doxycycline hyclate to glass ionomer cement, even in the highest concentration, did not cause toxic effects on culture of odontoblast-like MDPC-23 cells. In addition, 2.5% chlorhexidine digluconate-containing glass ionomer cement decreased the compressive strength of cement, although there was no difference to diametral tensile strength. The adding of doxycycline hyclate did not alter mechanical properties of cement. It was concluded that doxycycline hyclate and chlorhexidine digluconate in the studied concentrations produced increased antimicrobial activity without cytotoxic effects and changes in mechanical properties of the mixture, except for the 1.25% chlorhexidine digluconate that presented the lowest compressive strength and alterations on metabolism and morphology of pulp cells. / Doutorado / Odontopediatria / Doutor em Odontologia

Orientador: Marcelo Brocchi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-13T01:01:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MartinsJunior_Dorival_M.pdf: 1174036 bytes, checksum: 073886b15ce1e9305f7c5b8fc5eb8f81 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Uma vez que violaceína - um composto com atividade antibiótica, aniparasitária e antitumoral - apresenta baixa solubilidade em água, nanopartículas poliméricas contendo esse composto podem aumentar a sua solubilidade em água e potencializar sua atividade biológica. Logo, o objetivo desse trabalho foi a obtenção e caracterização de nanopartículas poliméricas biocompatíveis de poli-D,L-(lactídeo-co-glicolídeo) 50:50 encapsulando violaceína para posterior avaliação de sua atividade antibacteriana in vitro e in vivo. As nanopartículas foram preparadas pelo método de nanoprecipitação e caracterizadas em termos físico-químicos (distribuição de tamanho e potencial Zeta), taxas de recuperação de polímero, eficiência de encapsulamento e cinética de liberação in vitro. Posteriormente, sua atividade antibacteriana foi testada frente a linhagens de Staphylococcus aureus (incluindo linhagens meticilina-resistentes e resistentes intermediárias a vancomicina) por ensaios de determinação de concentrações mínimas inibitórias, curvas de tempo morte e ensaios de interação com outros antibióticos. Por fim, avaliações da atividade antibacteriana in vivo foram realizadas contra uma linhagem de Staphylococcus aureus resistente a meticilina em modelo murino imunocomprometido (C3H Nude) e imunocompetente (Balb/C). A metodologia otimizada resultou em nanopartículas com diâmetro entre 116 e 139 nm, bem como carga superficial negativa. A eficiência de encapsulamento variou entre 84 e 90% e a taxa de recuperação do polímero foi de 93%. Pelos ensaios de cinética de liberação in vitro, observou-se que a violaceína encapsulada apresenta perfil de liberação sustentada até 160 h de análise nas condições experimentais analisadas. O sistema obtido apresentou atividade antibacteriana frente a cepas de Staphylococcus aureus e atividade não significativa frente à linhagens de enterobactérias Gram-negativas. O sistema apresentou atividade pelo menos duas vezes maior que a violaceína livre in vitro e in vivo. Por fim, foi observada uma interação aditiva entre o sistema e antibióticos ß-lactâmios e interação sinérgica quando combinado com inibidores de síntese proteíca. / Abstract: Since violacein - an antibiotic, antiviral and antiparasitic compound - exhibits poor solubility in water, polymeric nanoparticles containing this compound could improve its solubility in water and biological activities. Therefore, the aim of this work was the preparation and characterization of biodegradable and biocompatible poly-D,L-(lactide-co-glycolide) 50:50 nanoparticles loading violacein to further evaluation of their antibiotic activity in vitro and in vivo. The nanoparticles were prepared by nanoprecipitation method and characterized in terms of average diameter and Zeta potential, drug loading and polymer recovery, in vitro release kinetics, in vitro and in vivo antibacterial activity against Staphyloccocus aureus strains. Nanoparticles with diameter between 116 and 139 nm and negative-charged outer surface were obtained. Drug loading efficiency and polymer recovery were 87% and 93%, respectively. In vitro release kinetics assays showed that violacein loaded in these nanoparticles has sustained release profile until 5 days of analysis. The system exhibited antibacterial activity in vitro and in vivo against Staphylococcus aureus methicilin-resistant (MRSA) strains and no significant activity against Gram-negative Enterobacteriaceae. Nanoparticles-loaded violacein was at least two times more efficient as antibiotic compound than free violacein both in vitro and in vivo. Also, this system presented additive interactions when combined with ß-lactam antibiotics and strong synergic interactions when combined with protein synthesis inhibitors. / Mestrado / Genetica de Microorganismos / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientadores: Maria Luiza Moretti, Raquel Silveira Bello Stucchi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T06:04:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vigani_AlineGonzalez_D.pdf: 3903866 bytes, checksum: ff088b307f62ac2226ce3f88499695cf (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O enterococo é o terceiro agente mais freqüente em infecção de corrente sangüínea (ICS) hospitalar, responsável por 10% dessas infecções e está associado com alta letalidade. Durante as duas últimas décadas, o surgimento de alto nível de resistência à gentamicina (HLGR) e resistência à vancomicina adicionaram desafios ao tratamento das infecções por Enterococcus faecalis. Avaliamos as ICSs por E. faecalis no Hospital de Clínicas (HC) da Universidade Estadual de Campinas (Unicamp) identificadas de janeiro de 1999 a dezembro de 2003. Nosso objetivo foi determinar as características clínicas, microbiológicas e moleculares das ICSs por E. faecalis com HLGR e sem HLGR em pacientes internados no HC-Unicamp. ICS foi definida como pelo menos uma cultura de sangue positiva para E. faecalis com ou sem sinais e sintomas associados. Em casos de múltiplos episódios de ICS em um mesmo paciente, somente o primeiro episódio foi considerado. Coletamos informações de prontuários médicos utilizando formulários estruturados. A tipagem molecular de isolados de E. faecalis estocados foi realizada através da técnica de eletroforese em gel com campo pulsátil (PFGE). Identificamos 164 pacientes com ICS por E. faecalis, dos quais 145 (88,4%) foram incluídos neste estudo. Nossos achados demonstraram que pacientes com ICS por E. faecalis são graves. Dentre os 145 pacientes, 128 (88,3%) apresentavam pelo menos uma co-morbidade. Além disso, a realização de procedimento invasivo ou presença de dispositivos invasivos foram freqüentes (75,2%), assim como o uso prévio de antimicrobianos (61,4%). Das 145 ICSs, 66 (45,5%) foram por E. faecalis com HLGR e 79 (54,5%) sem HLGR. Na análise univariada, idade avançada, malignidade hematológica, cateterização urinária e uso prévio de cefalosporinas, quinolonas e carbapenêmicos foram mais freqüentes em pacientes com infecção por HLGR quando comparados com pacientes sem HLGR (p <0,05). A análise multivariada mostrou idade avançada, presença de malignidade hematológica e uso prévio de vancomicina como variáveis independentes associadas com infecção por HLGR (p <0,05). A taxa de letalidade foi de 46,2% e não apresentou diferença estatística significativa entre pacientes com infecção por HLGR (50,0%) e sem HLGR (43,0%) (p= 0,40). Ventilação mecânica e gravidade das co-morbidades foram associadas com óbito (p <0,05). Durante o período de estudo, a taxa de resistência à ampicilina foi de 2,0%; ciprofloxacina, 51,7%; penicilina, 35,1%; e estreptomicina, 27,6%. Nenhum isolado resistente à vancomicina foi identificado. A genotipagem dos 44 isolados disponíveis (32 de pacientes incluídos no estudo e 12 controles) revelou 29 isolados distribuídos em 11 perfis genotípicos e 15 isolados apresentaram perfis genotípicos únicos e distintos. Alguns isolados geneticamente relacionados eram suscetíveis à gentamicina e outros possuíam HLGR, o que pode ser resultado da transferência de gene plasmidial de resistência HLGR entre isolados. Nossos resultados permitem concluir que ICSs por E. faecalis estão associadas com alta taxa de letalidade e são freqüentemente causadas por HLGR. Medidas de controle de infecção, incluindo vigilância ativa, respeito às normas de precauções de contato e uso criterioso de antimicrobianos devem ser consideradas para reduzir o risco de transmissão de E. faecalis resistentes em ambiente hospitalar. / Abstract: Enterococus is the third most frequent agent in nosocomial blood stream infection (BSI), accounting for 10% of nosocomial BSI, and is associated with high mortality. During the last two decades, the emergence of high-level gentamicin resistance (HLGR) and vancomycin resistance added additional challenges in the treatment of Enterococcus faecalis infections. We evaluated E. faecalis BSI at the Hospital de Clínicas (HC) of the Universidade Estadual de Campinas (Unicamp) in Brazil between January 1999 and December 2003. We sought to determine the clinical, microbiological, and molecular characteristics of BSI caused by HLGR and non-HLGR strains. E. faecalis BSI was defined as at least one positive blood culture for E. faecalis during the study period with or without associated symptoms. In patients with multiple BSI episodes, only the first episode was considered. We collected information from medical charts using standard forms. Banked E. faecalis isolates were typed using pulsed field gel electrophoresis (PFGE). We identified 164 patients with E. faecalis BSI, 145 (88.3%) patients were included in this study. Our data showed that patients with E. faecalis BSI are severely ill. One hundred twenty-eight (88.3%) patients had some underlying chronic disease. Invasive procedure or invasive device (75.2%) and previous use of antimicrobial (61.4%) were also frequent. Of the 145 BSIs, 66 (45.5%) were due to HLGR isolates and 79 (54.5%) were non-HLGR. In the univariate analysis, patients with HLGR infection were older, had hematological malignancy, had higher rates of bladder catheterization, and more often had treatment with cephalosporin, quinolone, and carbapenem when compared with non-HLGR infection patients (p <0.05). Multivariate analysis indicated that older age, hematological malignancy, and previous use of vancomycin were independent risk factors associated with HLGR (p <0.05). Mortality rate was 46.2% and was not statistically significantly different among patients with HLGR (50.0%) and non-HLGR (43.0%) infections (p= 0.40). Multivariate analysis indicated that mechanical ventilation and severity of underlying chronic diseases were associated with death (p <0.05). During the study period, the prevalence of resistance to ampicilin was 2.0%; to ciprofloxacin, 51.7%; to penicillin, 35.1%; and to streptomycin, 27.6%. We did not detect any isolate resistant to vancomycin. We genotyped 44 available isolates, 32 from study patients and 12 controls. Twenty-nine isolates were distributed in 11 PFGE patterns, the remaining 15 isolates had distinct and unique PFGE patterns. Some isolates with related PFGE pattern were HLGR and others non-HLGR, this may have result from transference of HLGR resistance plasmidial between isolates. Our results suggest that E. faecalis BSI are associated with high mortality and are frequently caused by HLGR. Hospital infection control measures, including active surveillance and judicious use of antibiotics, should be considered to reduce the spread of resistant E. faecalis infections in healthcare settings. / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-09T16:41:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martinho_FredericoCanato_M.pdf: 2565020 bytes, checksum: d3b12dfab50de25f375d07ea0056245c (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O conhecimento das espécies microbianas assim como da suscetibilidade das mesmas à terapia endodôntica é importante para o sucesso do tratamento. Sendo assim, a proposta do presente estudo foi: 1) Analisar a microbiota endodôntica de dentes com necrose pulpar e presença de lesão periapical (C1) e correlacionar com os sinais e sintomas clínicos; 2) investigar mudanças microbiológicas após o preparo químico-mecânico (PQM) (C2); 3) investigar a presença de Entreococcus spp., Candida spp. e enterobactérias na saliva dos pacientes submetidos a terapia endodôntica; 4) quantificar endotoxinas antes (C1) e após PQM (C2); 5) determinar in vitro a suscetibilidade antimicrobiana de algunsmicrorganismos isolados das infecções endodônticas primárias. Amostras microbiológicas foram coletadas da saliva e do canal radicular de 30 pacientes. Foram identificados 182 microrganismos nos canais radiculares, sendo 65,38% anaeróbios estritos. As espécies mais freqüentemente encontradas foram P. micros (63,3%), P. intermedia (50%), S. mitis (30%). Associações positivas foram encontradas entre dor à percussão e E. lentum; dor à palpação e G.haemolysans e E. lentum; fístula e P. micros; exsudato purulento e Bifidobacterium spp. As espécies Peptostreptococcus spp., Fusobacterium spp., Porphyromonas spp., Prevotella spp. foram analisadas e mostraram-se suscetíveis a ação da amoxicilina e da mesma associada ao ácido clavulânico. Maiores concentrações de endotoxinas foram quantificadas nos dentes com sintomatologia clínica. Associação positiva entre LPS e a presença de dor à percussão foi encontrada (p<0,01) Conclusão: A infecção endodôntica primária caracterizou-se ser do tipo mista e polimicrobiana, com predomínio de microrganismos anaeróbios estritos, principalmente bacilos Gramnegativos; a presença de sinais e/ou sintomas clínicos mostrou estar relacionada com determinadas espécies tais como Eubacterium lentum, Gemella haemolysans, Peptostreptococcus micros e Bifidobacterium spp. comumente isoladas em infecções endodônticas primárias; Candida spp. e Enterococcus spp. foram mais freqüentemente isolados da saliva do que as Enterobacteria spp. O isolamento das espécies C. albicans e E. faecalis no canal radicular foram associados com a identificação das espécies na saliva; o PQM dos canais radiculares foi eficaz na redução do número de microrganismos. Mudança na microbiota foi encontrada após PQM. Amoxicilina associada ao ácido clavulânico mostrou ser uma potente combinação contra microrganismos envolvidos na infecção de origem endodôntica. Altas concentrações de endotoxinas nos canais radiculares parecem estar relacionadas com a presença de sintomatologia clínica, particularmente com a dor à percussão. O PQM foi capaz de reduzir a concentração inicial de endotoxinas em todos os canais radiculares, entretanto não foi capaz de eliminá-las / Abstract: Bacteria and their by-products play an important role in the etiology and development of pulp and periapical diseases. The knowledge of endodontic microbiota and its susceptibility to endodontic therapy is important to a successful treatment. Therefore the aims of this study were: 1) to analyse the root canal microbiota in infected teeth with pulp necrosis and periapical lesions (C1) and its correlation with the clinical signs and symptoms; 2) to investigate the variations in the susceptibilities of endodontic microflora to biomechanical procedures (C2); 3) to investigate Candida spp., Enterococcus spp. and enterobacteria in saliva from the patients under endodontic therapy; 4) to quantify endotoxins before (C1) and after chemo-mechanical preparation (CMP) (C2); 5) to determine in vitro the antimicrobial susceptibility rates of the microrganisms recovered from the root canals with primary endodontic infections. Thirty root canals were microbiologically sampled before (C1) and after CMP (C2). At the baseline samples (C1), a total of 182 microrganisms were identified. Strict anaerobic or microphilic species predominated in 65.38%. P. micros (63.3%), P. intermedia (50%), S. mitis (30%) were the most frequent species recovered from the root canals at the baseline samples (C1). Associations between terderness to percussion and the presence of E. lentum; pain on palpation and G. haemolysans and E. lentum; sinus tract and P. micros; Purulent exudate and Bifidobacterium spp. (p<0.05) were found. Peptostreptococcus spp., Fusobacterium spp., Porphyromonas spp., Prevotella spp. were susceptible to amoxicilin and amoxicillin + clavulanate. Higher levels of endodotoxin were detected in teeth with clinical symtphomatology. A positive association was found between the presence of LPS and tenderness to percussion (p<0.01).It was concluded that microbiota from infected root canals with pulp necrosis and periapical lesions was comprised by a mixed and polimicrobial flora, dominated by strict anaerobes, particulary Gram-negative rods. Signs and symptoms seemed to be related to the presence of specific bacteria species Eubacterium lentum, Gemella haemolysans, Peptostreptococcus micros e Bifidobacterium spp.. Candida spp. and Enterococcus were more requently recovered from saliva than Enterobacteria spp. Isolation of C. albicans and E. faecalis from root canals were associated with their identification in the saliva samples. CMP was efficient in reducing the number of microorganisms. Changing in root canal flora was detected after endodontic procedures. Amoxicilin associated with clavulanate was an effective and a strong antimicrobial agent against microorganisms involved in endodontic infections. High contents of LPS seem to be related to the presence of clinical symptomatology, particulary tenderness to percussion. CMP was effective in reducing the initial amount of endotoxin in all root canal samplings but was not able to eliminate it / Mestrado / Endodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Marcelo Brocchi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-11T01:11:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Micas_AndreFernandoDitondo_M.pdf: 1496595 bytes, checksum: c51897315ae5950ced334700741f31cf (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A violaceína é um composto indol, de intensa cor violeta que é produzido por Chromobacterium violaceum, uma bactéria ubíqua de zonas tropicais e subtropicais. Esta molécula apresenta inúmeras propriedades antimicrobianas, tais como agente antimicótico, antiviral e atividade contra certos protistas. Observações importantes apontam para uma atividade bactericida considerável, tornando premente um estudo mais aprofundado a cerca desta propriedade. No presente trabalho sondou-se a sensibilidade a este composto para algumas bactérias de interesse médico e um fitopatógeno, sua cinética de inibição do crescimento bacteriano, assim como se obtiveram importantes pistas sobre o mecanismo de ação. Foi encontrada atividade inibitória considerável para Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis, com uma maior inibição durante a fase estacionária, assim como para Xanthomonas axonopodis p.v passifloraceae. Através de micrografias eletrônicas pôde-se constatar profundas alterações na parede celular em S. aureus, indicando esta estrutura como sítio de atuação da violaceína, assim como através de espectrometria de massa (MALDI-TOF) a identificação de proteínas diferencialmente expressas por S. aureus na presença ou ausência de violaceína, indicando uma grande perturbação no metabolismo bacteriano, com inibição a alguns fatores de patogenicidade e também inibição da síntese protéica / Abstract: Violacein is a deeply violet indol compound produced by Chromobacterium violaceum, an ubique tropical and subtropical bacterium. This molecule presents many antimicrobial properties, like antimycotic, antiviral and activity against some protists. Important reports pointed to a considerable bactericide activity, which brings an extremely necessary quest. This work evaluated the resistance of many clinical bacteria, the violacein kinetic of bacterial growth inhibition and some cues about the mechanism of action of this molecule. It was obtained significant inhibition activity against Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Xanthomonas axonopodis p.v passifloraceae. From transmission electron micrographs it was observed profound disturbs on S. aureus cell wall, which indicates this structure as violacein site of action. By using mass spectrometry (MALDI-TOF) of proteins differently expressed from bidimensional gel electrophoresis of S. aureus treated and not-treated with violacein, it was found a strong metabolic disturb, with inhibition of some pathogenical factors and inhibition of proteic synthesis / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Fernando Antonio Santos Coelho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-11T02:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rezende_Patricia_D.pdf: 4429618 bytes, checksum: 8b5bb87a85f841dc4aeabf56b44376ea (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Este trabalho teve como objetivo sintetizar e avaliar a atividade biológica de algumas 2-oxazolidinonas. As oxazolidinonas são compostos versáteis utilizados na preparação de uma série de outras classes de compostos e são largamente utilizados como auxiliares quirais em sínteses orgânicas assimétricas. Biologicamente são de grande importância por apresentarem efeitos neurolépticos, efeitos psicotrópicos, antialérgicos e antibacterianos. No que se refere a atividade antibacteriana, as oxazolidinonas, apresentam atividade notável contra muitas cepas resistentes de bactérias gram-positivas, através de um novo mecanismo de ação. As oxazolidinonas 4- e 4,5-substituídas oriundas de aldeídos alifáticos e aromáticos foram sintetizadas a partir de adutos de Morita-Baylis-Hillman (MBH), através de duas principais rotas: via rearranjo de Curtius e via reação de ozonólise do aduto de MBH, sendo esta última, resultado de estudos prévios realizados em nosso laboratório. A reprodutibilidade desta rota sintética nos possibilitou a preparação de um intermediário avançado da substância isocitoxazona, um isômero estrutural da citoxazona, uma oxazolidinona que apresenta atividade citocina moduladora sobre células Th2. A partir da rota via Rearranjo de Curtius e através de uma adaptação da mesma, sintetizamos cetonas a, b-saturadas, a partir de adutos de MBH. E finalmente, iniciamos um estudo para a síntese assimétrica de 2- oxazolidinonas, utilizando a base quiral b-isocupreidina. A mesma foi sintetizada e utilizada na reação de MBH na preparação de um aduto de MBH quiral. As oxazolidinonas sintetizadas estão sendo submetidas a ensaios para a determinação da atividade biológica frente a uma série de microorganismos / Abstract: This work has been as main purpose the synthesis and the biological evaluation of some 2-oxazolidinones. These compounds have been used as substrates for the preparation of different compounds and used as chiral auxiliary in asymmetric organic synthesis. Besides the synthetic relevance of this class of compounds, they also exhibit important biological effects, as neuroleptic, psychotropic, anti-allergenic and antibacterial. In the last years, an special attention has been paid to these compounds due to their antibacterial activity, since they show a remarkable activity against Gram-positive drugs multi-resistant strains, through a new action mechanism. In this work several 4- and 4,5-substituted oxazolidinones were synthesized from Morita-Baylis-Hillman prepared from aliphatic and aromatic commercial aldehydes, using two synthetic approaches. The first approach was based on employing a Curtius rearrangement, and the second was based on the utilization of an ozonolysis reaction of the MBH adducts. Both synthetic approaches have permitted preparing several oxazolidinones. An advanced intermediate for the total synthesis of isocytoxazone, a structural isomer of cytoxazone, was also prepared. Cytoxazone, a natural oxazolidinone, exhibits cytocine modulator activity for Th2 cells. Through an adaptation of the strategy based on Curtius rearrangement, we have also synthesized a, b-unsaturated ketones from MBH adducts. Finally, a study was started aiming at synthesizing chiral oxazolidinones, using chiral base b-isocupreidine prepared by us. Synthetic oxazolidinones prepared in this work are under biological screening for evaluating theirs antibacterial profiles / Doutorado / Quimica Organica / Doutor em Ciências

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / The elimination of bacteria inside the demineralized dentin layer might contribute for a more conservative approach in the restorative treatment of deep dentin caries lesions. This way, this in vitro study aimed to establish safe and effective parameters for using an LED (&#955; = 620-660 nm) associated to the photosensitizer toluidine blue O (TBO) in the disinfection of artificially produced dentin caries lesions. For this, slabs with 25 mm2 of flatted occlusal human dentin were immersed for 5 days in BHI broth inoculated with Streptococcus mutans for caries induction. After demineralization, the slabs were randomly allocated to 10 experimental groups (n=15), as follows Control5; Control10; Control15; TBO; LED5; LED10; LED15; PDT5; PDT10 and PDT15, which were treated with TBO (0.1 mg.ml-1 for 5 min) or 0.9% NaCl solution for 5, 10 or 15 min, and submitted or not to LED irradiation for 5, 10 or 15 min (47, 94, and 187 J/cm2). Dentin samples from caries lesions were collected before and after treatments and bacteria were then cultured for Streptococcus mutans counts. In addition, using a type K thermometer, the temperature inside the pulp and in periodontal area was monitored for the groups PDT5, PDT10 and PDT1510 in 10 teeth with deep occlusal cavities. Paired t test/Wilcoxon matched pairs test (&#61537;=5%) were used to determine differences between microbial population before and after treatments, and ANOVA followed by Tukey test for comparing data of temperature and log reductions. Statistically significant differences in Streptococcus mutans viability were found for the groups: Control15; LED15; PDT5; PDT10 and PDT15. The temperature from intrapulpal and periodontal area were lower than 2oC, being higher inside the pulpal chamber for group PDT15 when compared to group PDT5. Thus, it the experimental conditions used in the study, photodynamic therapy may be a safe and effective treatment to be used for disinfecting carious dentin, however the influence of time of irradiation/exposition it the Streptococcus mutans viability should be better investigated. / A eliminaÃÃo de bactÃrias presentes na camada de dentina desmineralizada poderia contribuir para uma abordagem mais conservadora no tratamento restaurador de lesÃes de cÃrie dentinÃria profundas. Desta forma, este estudo in vitro objetivou estabelecer parÃmetros eficazes e seguros para a utilizaÃÃo de um LED (&#955; = 620-660 nm) associado ao fotossensibilizador azul de orto-toluidina (TBO) na desinfecÃÃo de lesÃes de cÃrie dentinÃria produzidas artificialmente. Para tal, blocos com 25 mm2 de dentina oclusal planificada foram imersos por 5 dias em BHI caldo inoculado com Streptococcus mutans para induÃÃo de cÃrie. Depois da desmineralizaÃÃo, os blocos foram aleatoriamente distribuÃdos em 10 grupos experimentais (n=15), a saber: Controle5; Controle10; Controle15; TBO; LED5; LED10; LED15; TFD5; TFD10 e TFD15, que foram tratados ou nÃo com TBO (0,1 mg.ml-1 por 5 minutos) ou soluÃÃo de NaCl a 0,9% por 5, 10 ou 15 minutos, e submetidos ou nÃo a irradiaÃÃo com LED por 5, 10 ou 15 minutos (47, 94, e 187 J/cm2). Amostras de dentina cariada foram coletadas antes e apÃs os tratamentos e as bactÃrias foram semeadas para contagem de Streptococcus mutans. Adicionalmente, com um termÃmetro tipo K, a temperatura intra-pulpar e da Ãrea periodontal nos grupos TFD5; TFD10 e TFD15 foi monitorada em 10 dentes com cavidades oclusais confeccionadas em dentina profunda. Teste t pareado e ANOVA seguida pelo teste Tukey (&#61537;=5%) foram usados para verificaÃÃo da reduÃÃo microbiana promovida pelos tratamentos, bem como para verificaÃÃo da alteraÃÃo na temperatura durante a irradiaÃÃo. DiferenÃas significativas estatisticamente na viabilidade do Streptococcus mutans entre contagens foram observadas nos grupos: Controle15; LED15; TFD5; TFD 10 e TFD15. A temperatura intra-pulpar e no periodonto foi inferior a 2oC, sendo a no interior da cÃmara pulpar maior para o grupo TFD15 quando comparado ao grupo TFD5. Dessa forma, nas condiÃÃes experimentais atuais, a terapia fotodinÃmica pode ser um tratamento eficaz e seguro a ser usado na desinfecÃÃo de dentina cariada, contudo a influÃncia do tempo de irradiaÃÃo ou exposiÃÃo à soluÃÃo salina na viabilidade do Streptococcus mutans deve ser melhor investigada.

nÃo hà / Este trabalho buscou comparar a eficÃcia anti-cÃrie e antimicrobiana de quatro diferentes substÃncias: carvacrol 20% (CAR), carvacrol 10% em associaÃÃo com o timol a 10% (CAR+THY), clorexidina a 20% (CHX) e fluoreto de sÃdio a 5% (NaF), em crianÃas de alto risco e livres de cÃrie. Cento e vinte crianÃas, entre 36 a 71 meses, foram selecionadas de prÃ-escolas pÃblicas de um bairro do MunicÃpio de Fortaleza (CearÃ), caracterizando-as segundo os critÃrios de risco à carie da Academia Americana de Odontologia PediÃtrica como crianÃas de alto risco. Essas crianÃas foram randomicamente distribuÃdas nos quatro grupos de tratamento. Os antimicrobianos foram manipulados na forma de verniz e aplicados trimestralmente durante um ano. Pacientes foram monitorados trimestralmente, atravÃs de exames clÃnicos periÃdicos para avaliaÃÃo do surgimento de lesÃes de cÃrie. Foram coletadas salivas antes do inÃcio do tratamento (B), apÃs 7 (D7), 30 (D30), 90 (D90), 180 (D180) e 360 (D360) dias de tratamento para detecÃÃo de EGM. Na anÃlise microbiolÃgica as amostras foram cultivadas sobre Agar MSB, incubadas em estufa a 37 C, com atmosfera de microaerofilia, durante 48 horas. As colÃnias foram confirmadas como sendo EGM a partir de provas bioquÃmicas. A contagem bacteriana foi expressa em unidades formadoras de colÃnias (UFC/mL). Dados foram considerados significativos quando p<0.02. Ao comparar os nÃveis de EGM entre B e D7 nÃo observou-se diferenÃa entre os tratamentos (p=0,032). ComparaÃÃes dos percentuais de reduÃÃo de EGM entre os grupos (D30-D90) e demonstrou uma diferenÃa estatisticamente significativa (p=0,002) , havendo diferenÃa entre o CAR versus CAR+THY (p=0,003); CAR +THY versus CHX (p=0,004) e CHX versus NaF, (p=0,014). O CAR+THY apresentou o menor percentual de reduÃÃo e a CHX o maior. Observamos um aumento de EGM nos grupos tratados com CHX e NaF em D360. ComparaÃÃes entre o ceo-s dentro de cada grupo, demonstrou uma diferenÃa significativa entre o ceo-s inicial e o ceo-s do exame realizado 9 meses apÃs o inÃcio dos tratamentos, com exceÃÃo do grupo NaF. Observou-se uma correlaÃÃo positiva significante entre o total de superfÃcies e a idade em todos os tratamentos estudados. NÃo houve diferenÃa significante da densidade de cÃrie entre as vÃrias faixas etÃrias dentro e entre os grupos. NÃo houve diferenÃa no ceo-s entre os grupos (p=0,746). Em conclusÃo, todos os tratamentos produziram significante reduÃÃo de EGM com grandes variaÃÃes dentro e entre os grupos, associada a baixa experiÃncia de cÃrie. / This study aimed to compare the anticaries and antimicrobial efficacy of four different substances: 20% carvacrol (CAR), 10% carvacrol in association with 10% thymol (CAR+THY), 20% chlorhexidine (CHX) and 5% sodium fluoride (NaF), in high-risk, caries-free children. One hundred and twenty children, between 36 and 71-months age, were selected from public preschools from a neighborhood in Fortaleza (CearÃ). Children were classified as a high caries-risk group according to the American Academy of Pediatric Dentistry Guidelines. These children were randomly allocated into four different treatment groups. Antimicrobial agents were made as varnishes and applied every 3 months, during one year. Patients were monitored every 3 months for new caries lesions. Saliva was collected before treatment initiation (B) and after 7 (D7), 30 (D30), 90 (D90), 180 (D180) and 360 (D360) days post-treatment for MS detection. For microbiological analysis, samples were cultivated on MSB agar media and incubated at 37o C under microaerofilic conditions, during 48 hours. Bacterial colonies were confirmed as being MS through biochemical tests. MS counts were expressed in colony forming units (CFU/mL). Data was considered significant when p<0.02. When comparing MS levels between B and D7, no difference was observed between groups (p=0,032). Comparisons of the percentage MS reduction between groups (D30-D90) demonstrated a significant difference (p=0,002), with a difference between CAR versus CAR+THY (p=0.003), CAR+THY versus CHX (p=0.004), and CHX versus NaF (p=0.014). CAR+THY presented the smallest percentage reduction, while CHX presented the greatest. We observed an increase in MS in the groups treated with CHX and NaF at D360. With the exception of the NaF group, comparisons between dmfs within each group, demonstrated a significant difference between the initial dmfs and the dmfs measured 9 months after treatment initiation. A significant positive correlation between the total dental surfaces and the patientâs age was observed in all groups. No significant difference was found between caries density of the different age groups within and between groups. The dmfs scores did not differ between groups (p=0,746). In conclusion, all treatments produced significant MS reduction with great variations within and between groups, associated with low caries experience.

Orientador: Oswaldo Luiz Alves / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-20T15:38:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Holtz_RaphaelDias_D.pdf: 5088635 bytes, checksum: d278014c22731df6df2370e7da3785ba (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Neste trabalho foram desenvolvidas nanoestruturas de vanadatos de prata, de cério e de bismuto e investigadas as suas propriedades antibacterianas. Tais nanoestruturas foram sintetizadas a partir de reações de precipitação entre o vanadato de amônio e os nitratos ou cloretos dos metais correspondentes, sendo posteriormente realizados tratamentos hidrotérmicos em autoclaves providas de agitadores mecânicos e medidores de pressão e de temperatura do meio reacional. Os materiais foram caracterizados por diversas técnicas de caracterização físico-química e morfológica, sendo sua atividade antibacteriana avaliada frente às cepas de bactérias Gram-Positivas e Gram-Negativas de interesse, incluindo cepas de Staphylococcus aureus resistente à meticilina e Enterococcus resistente à vancomicina. Foi observado que o vanadato de prata apresentou uma elevada atividade antibacteriana contra diversas cepas bacterianas. O elevado potencial antibacteriano do vanadato de prata despertou o interesse em avaliar a sua utilização como aditivo antibacteriano em uma tinta comercial à base de água. Os resultados de sua adição foram promissores uma vez que foram observados halos de inibição do crescimento bacteriano. Esses resultados levantaram questionamentos importantes acerca do seu comportamento frente à microorganismos aquáticos, uma vez que existe a possibilidade de, no futuro, este material ser utilizado comercialmente como aditivo antibacteriano para tintas e revestimentos. Foram realizados experimentos de toxicidade aguda frente ao microcrustáceo Daphnia similis, sendo que os valores de CE50 foram próximos aos valores apresentados para os compostos de prata / Abstract; In this work we report the development and characterization of silver-, cerium- and bismuth vanadate nanostructures as well as their antibacterial activity. These nanostructures were synthesized from simple precipitation reaction between ammonium vanadate and nitrates/chlorides of the corresponding metals. The obtained precipitates were treated by hydrothermal process in autoclaves with pressure and temperature gauges and under mechanical stirring. These nanomaterials were characterized by several physico-chemical techniques and morphological characterization, and their antibacterial activities were evaluated against several strains of Gram-positive and Gram-Negative bacteria, including methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and vancomycin-resistant Enterococcus (VRE). We observed that nanostructured silver vanadate presented a high antibacterial activity against a broad spectrum of bacteria. These results stimulated the evaluation of silver vanadate nanostructures as a potential antibacterial additive to commercial water-based paint. It was observed a zone of bacterial growth inhibition against MRSA. The possible use of this material as an additive to water-based paints lead us to investigate the toxicity of this material against aquatic microorganisms, once this material can be commercial used in future as antibacterial additive to paints and coatings. Acute toxicity assays against Daphnia similis showed that EC50 value was close to that observed in silver-based compounds / Doutorado / Quimica Inorganica / Doutor em Ciências

Aisla, selecciona e identifica 100 cepas de Actinocycetos aeróbicos saprófitos con capacidad para producir sustancias antimicrobianas y que contienen ácido L - Diaminopimélico en sus paredes celulares procedentes de muestras de suelos del Jardín Botánico de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, de los jardines de Barranco y Surco, así como de terrenos agrícolas de Supe y Huaral al interior de Lima. Selecciona un medio de cultivo óptimo para la producción de sustancias antimicrobianas por fermentación. Utiliza el medio Arginina-Giyceroi-Sales (AGS) para los cultivos de aislamiento selectivo, previo tratamiento de humedecimiento y secado de las muestras. El 53% de cepas muestra actividad antibacteriana frente a bacterias Gram positivas y negativas. Los cultivos de 24 cepas bioactivas, en 4 medios de fermentación (A, B, E y F), para la producción de metabolitos secundarios activos, muestran una variación de la actividad antibacteriana, determinado por el método de difusión en agar. Selecciona al medio F como el óptimo pues las zonas de inhibición presentan diámetros entre 20-50 mm. Además, el 75% presenta actividad frente a Staphylococcus aureus ATCC 6538, el 91.66% frente a Micrococcus luteus ATCC 9341, el 41,66 5 contra Bacillus subtilis ATCC 6633 y el 25% a Escherichia coli ATCC 25922. La identificación morfológica y quimiotaxonomica de 12 cepas con mayor actividad antibacteriana permiten su clasificación dentro del genero Streptomyces sp. / Tesis