O produto formado a partir da reação entre trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3H2O]2+ e íons nitrito é dependente da concentração hidrogeniônica do meio. Em pH acima de 10, o composto final formado é o trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3NO2]+ (1,1 x 103 M-1.s-1), o qual é convertido quantitativamente em pH 4 ao correspondente nitrosilo (2,2 x 10-3 s-1). Esta reação em meio alcalino ocorre em duas etapas com constantes de velocidades distintas, sendo a primeira etapa mais rápida que a segunda. Esta etapa foi atribuída à formação dos isômeros, trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3NO2]+ e trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3ONO] + (1,1 x 103 M-1 s-1; pH 11). A etapa mais lenta foi atribuída à isomerização do nitrito composto, nitrito ligado pelo oxigênio, para o nitro composto, ligado pelo nitrogênio e que apresenta maior estabilidade (6,9 x 102 M-1 s-1; pH 11). Através de estudos in vitro foi efetuada a avaliação da citotoxicidade de nitrosilos complexos de rutênio tipo trans-[Ru(NO)(NH3)4L] 3+ e trans-[Ru(NH3)4L(SO4)]+ em culturas de células de diferentes modelos de câncer. Verificou-se que estes compostos apresentaram resultados efetivos em células de leucemia Humana (Jurkat) e Melanoma Murino (B16F10-Nex2). Os compostos acima também se mostraram citotóxicos frente a células de câncer de Mama Humana (MCF-7). Estudos in vivo com células B16F10-Nex2 envolvendo nitrosilo complexos e seus análogos sulfatos indicaram que a aplicação intraperitoneal destes compostos retardou o desenvolvimento dos tumores e aumentou a sobrevida dos camundongos. Os resultados também indicam que a morte celular promovida pelos complexos provavelmente não é dependente de caspases. A aplicação dos nitrosilos, SNP e [Ru(NO)Hedta], em culturas celulares embriogênicas de Araucaria angustifolia induziram um aumento na massa fresca das culturas em relação ao controle, após 21 dias. Este efeito foi inibido quando PTIO, captador de NO, foi adicionado às amostras em conjunto com os doadores de NO. Observou-se também, que após 21 dias, as amostras preparadas com os compostos apresentaram maior concentração de óxido nítrico, tanto intra quanto extracelular. As morfologias das células também foram influenciadas pela adição dos nitrosilos, observando-se um acréscimo no número de células embriogênicas em relação ao controle, acréscimo este que ocorreu ocorre de forma desorganizada. / The product of the reaction of trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3H2O]2+ with nitrite ions depends on the hydrogenionic concentration of the medium. In solutions with pH > 10, the final compound is the trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3NO2]+ (1,1 x 103 M-1.s-1), wich is quantitatively converted into the trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3NO]3+ in acid solutions (CH+ > 10-5 mol.L-1; kobs = 2.2 x 10-3 s-1 at pH 4). This reaction presents two different steps with distinct rate constants, being the first step faster than the second. Then, the first process was attributed to the formation of both the isomers, trans-[Ru(NH3)4P(OEt)3NO2]+ and trans-[Ru(NH3)4P(OEt)3ONO]+ (1.1 x 103 M-1s-1; pH 11). The slowest step was then attributed to the isomerization of the nitrito compound, O-bonded, to the nitro compound, Nbonded, which presents more stability (6.9 x 102 M-1s-1; pH 11). In vitro studies were used to evaluate the cytotoxicity of some nitrosyl ruthenium compounds type trans-[Ru(NO)(NH3)4L]3+ and trans-[Ru(NH3)4L(SO4)]+ against some cancer cells models. The compounds showed significant results against human leukemia (Jurkat) and murine melanoma (B16F10-Nex2). The compounds also showed citotoxicity against human breast adenocarcinoma cell line (MCF-7), however the compounds were less active in this culture. In vivo studies with B16F10-Nex2 and the ruthenium compounds suggests that intraperitoneally applications of the complexes delays tumor growth and prolongs animal survival rate. The results also indicates that the compounds should induce a caspase-independent death of the tumor cell. The application of the nitrosyls, SNP and [Ru(NO)Hedta], in embryogenic suspension cultures of Araucaria angustifolia promotes an increase at the fresh mass percent comparing with the control samples. This effect was inhibit when the compound PTIO, a NO scavenger, was added to the samples prepared with NO donors. After 21 days of cellular culture, fluorimetric methods for NO detection showed that the samples prepared with SNP and [Ru(NO)Hedta] presents higher intra and extracellular NO concentrations than control. Morphological organization of embryogenic suspension cultures of A. angustifolia were also influenced by the addition of NO, the cultures with the donors showed increased embriogenic cells numbers relating to the control.

Orientador: Alaxandre Magno Sebbenn / Banca: Mario Luiz Teixeira de Moraes / Banca: Rinaldo Cesar de Paula / Resumo: Os métodos baseados em marcadores genéticos para estimar o coeficiente de herdabilidade em populações naturais são importantes, visto que os métodos tradicionais baseados em teste de progênies são impraticáveis para este fim por introduzirem vícios devido às interações genótipo-ambientes, variações no sistema de reprodução e efeitos amostrais. O objetivo deste trabalho foi investigar o controle genético de caracteres de crescimento em populações contínuas e fragmentadas de Araucaria angustifolia. As seguintes questões que foram abordadas são: i) Existem diferenças nos níveis de herdabilidade entre diferentes populações e entre gerações de mesma população? e ii) Quais os níveis de herdabilidade em caracteres de crescimento em populações naturais? O presente estudo foi desenvolvido com duas populações de A. angustifolia, sendo uma delas localizada na Reserva Genética Florestal de Caçador (RGFC), no Planalto Norte do Estado de Santa Catarina, e a outra em um fragmento de floresta de 5,4 ha (população CENI) localizada em uma fazenda no planalto do Estado do Paraná, dentro das bacias do Iguaçu. As estimativas de herdabilidades foram realizadas utilizando-se dados de genótipos de indivíduos regenerantes e juvenis do fragmento CENI e juvenis da população RGFC. Foram utilizados quatro métodos para estimar o parentesco entre os indivíduos e três modelos de estimação do coeficiente de herdabilidade, implementados no programa Mark. As herdabilidades estimadas pela combinação de todos os métodos de estimação de parentesco e modelos de herdabilidade não foram significativamente diferentes de zero, indicando inadequação dos dados aos modelos ou ausência de controle genético. Um novo método para estimar a herdabildiade em populações naturais, baseado na reconstrução do pedigree, derivado de resultados de análise de maternidade e paternidade foi então ... / Abstract: Marker-based methods for estimating the coefficient of heritability in natural populations are important because traditional methods may be impractical or introduce bias via interaction genotype-environmental effects, mating system variation and sampling effects. Thus, the aim of this study is to investigate the genetic control of growth traits in Araucaria angustifolia population continuous and fragmented. The following questions will be addressed: i) There are differences in the levels of heritability between different populations and between generations of the same population? and ii) What levels of heritability for growth traits in natural populations? This study was carried out using two populations of A. angustifolia, one being located in the Reserve Forest Genetics Caçador (RGFC), on the plateau north of the state of Santa Catarina, and other is in a small forest fragment of 5, 4 ha (CENI) located on a farm in the highlands of the state of Paraná, in the basins of Iguaçu. The estimates of heritability were carried out using data of genotypes of regeneration and juveniles of CENI population and juvenile of RGFC population. We used four methods to estimate the relatedness between pairwise individuals and three models for estimating the heritability coefficient, all implemented in the Mark program. The heritability estimates for the combination of all methods of estimation of relatedness and heritability models were not significant different from zero, indicating the inadequacy of the data to the models. There is a tendency for a higher genetic control in the regeneration than juvenile stage. The CENI fragmented population had generally higher heritability than the RGFC natural population, indicating higher potential to respond to natural selection. The main conclusion of this study is ... / Mestre

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Forestal / La Araucaria araucana es una especie endémica de los bosques de Chile y Argentina, de gran importancia en las comunidades Mapuche-Pehuenches de la zona sur de nuestro país, que a pesar de ser declarada Monumento Natural en el año 1990, se ha visto afectada por una escasa incorporación de regeneración por falta de semillas en los bosques, peligrando su conservación. El objetivo de esta memoria es analizar si existe relación entre la producción de conos con la cantidad de semillas por cono, el peso de las semillas y la germinación de éstas. La investigación se llevó a cabo entre los años 2012 y 2014, en tres localidades de la comuna de Lonquimay, Región de la Araucanía, en las cuales se instalaron las parcelas, identificando los árboles femeninos y se contabilizaron los conos potencialmente disponibles por hectárea. En los conos colectados se midió el número y peso de las semillas. Finalmente se seleccionaron semillas al azar para realizar el ensayo de germinación. Se estableció que el año 2012 corresponde a un año de baja producción, el 2013 a un año de alta producción y el 2014 a un año de producción media de conos. Se obtiene una media de entre 150 y 83 semillas por cono, siendo el año de baja producción, el que presenta los valores más altos. Las semillas tienen un peso promedio 3,3 gramos, pero en el año de producción media esta baja a 2,8 gramos por semilla. Los valores más altos de capacidad germinativa y valor máximo corresponden al año de alta producción con un 91,7% y un 3%/día respectivamente, mientras que el año de producción media presenta valores significativamente más bajos. Los resultados muestran que existe una sincronía o “masting” a nivel regional en la producción de conos. El éxito y velocidad de germinación de las semillas tiene relación con su peso y no con la cantidad de conos producidos ese año.

O mosaico de hábitats e a degradação ambiental são considerados fatores que determinam a distribuição e composição da assembléia de pequenos mamíferos não-voadores em uma paisagem. O objetivo deste estudo foi analisar a composição desta assembléia no gradiente campo-floresta contínua com Araucária e em manchas de floresta com Araucária inseridas na matriz campestre de uma área protegida, e avaliar a influência de distúrbios associados ao manejo extensivo de rebanhos domésticos, como o fogo, a herbivoria e o pisoteio, sobre esta assembléia, comparando duas áreas, uma protegida e outra impactada, localizadas na região nordeste do Estado do Rio Grande do Sul. Foram realizados quatro períodos de amostragem, uma a cada estação do ano de 2004, totalizando um esforço efetivo de 5254 armadilhas-24h, onde foram capturados 325 indivíduos pertencentes a 13 espécies de roedores sigmodontíneos (Akodon montensis, Akodon paranaensis, Akodon sp. 1, Akodon sp. 2 (2n=34), Brucepatersonius iheringi, Delomys dorsalis, Oligoryzomys flavescens, Oligoryzomys nigripes, Oryzomys angouya, Oryzomys russatus, Oxymycterus nasutus, Scapteromys sp. (2n=34) e Thaptomys nigrita) e duas de marsupiais (Monodelphis dimidiata e Philander frenatus). Na área protegida, a análise multivariada dos dados indicou a formação de três assembléias distintas (campestre, de borda e florestal) no gradiente campo-floresta contínua com Araucária, e diferença significativa apenas na comparação entre as assembléias das manchas de maior e menor área, sendo que a menor apresentou maior riqueza, abundância e diversidade que a maior, provavelmente devido a sua maior proximidade com a floresta contínua. Os resultados encontrados na área protegida e na área impactada evidenciaram que a degradação dos hábitats campestre e florestal, decorrente do manejo extensivo tradicional de rebanhos domésticos, afeta negativamente a assembléia de pequenos mamíferos não-voadores na região pesquisada. / The mosaic of habitats and the environmental degradation are considered factors that determine the distribution and composition of the small non-flying mammals’ assemblage in a landscape. The objective of this study was to analyze the composition of this assemblage in the grassland-continuous Araucaria forest gradient and in Araucaria forest patches inserted in a grassland matrix of a protected area, and to evaluate the influence of disturbances associated to the extensive livestock management, as fire, herbivory and trampling, on this assemblage, comparing two areas, a protected and a impacted one, located in the northeast region of the Rio Grande do Sul State. Four sampling periods were accomplished, one in each season of 2004, totalizing an effective effort of 5,254 trap-24h, where 325 individuals belonging to 13 species of sigmodontine rodents (Akodon montensis, Akodon paranaensis, Akodon sp. 1, Akodon sp. 2 (2n=34), Brucepatersonius iheringi, Delomys dorsalis, Oligoryzomys flavescens, Oligoryzomys nigripes, Oryzomys angouya, Oryzomys russatus, Oxymycterus nasutus, Scapteromys sp. (2n=34) and Thaptomys nigrita) and two of marsupials (Monodelphis dimidiata and Philander frenatus) were captured. In the protected area, the multivariate data analysis indicated the formation of three different assemblages (a grassland one, an edge one and a forest one) in the grassland-continuous Araucaria forest gradient, and a significant difference only in the comparison between the assemblages from the largest and the smallest forest patches, where the smallest one presented larger richness, abundance and diversity than the largest one, probably due to its largest proximity with the continuous forest. The results in the protected and impacted areas evidenced that the degradation of the grassland and forest habitats, due to the traditional extensive livestock management, negatively affects the small non-flying mammals’ assemblage in the researched region.

Duas áreas de mata com araucária (Araucaria angustifolia) na Floresta Nacional de São Francisco de Paula (29º23' e 29º27'S; 50º23'e 50º25'W) foram estudadas com base na composição florística e tipos funcionais (TFs) para a detecção de padrões espaciais e sua associação com as condições do solo. TFs foram definidos a partir de 19 atributos morfo-funcionais qualitativos e quantitativos avaliados para cada espécie amostrada. Em cada área, um transecto de quadros contíguos foi marcado com 24 quadros de 4,5 x 4,5m (quadros pequenos) dentro de quatro quadros contíguos de 27 x 27m (quadros grandes). Foi amostrado um total de 568 indivíduos arbóreos lenhosos com pelo menos 2m de altura, pertencentes a 31 famílias e 74 espécies. As análises dos dados com os quadros pequenos consideraram duas escalas: P1, com 4,5 x 4,5m e P3, com 4,5 x 13,5m, formados pelo agrupamento de três quadros pequenos contíguos. Myrtaceae e Lauraceae foram as famílias com maior número de espécies em ambas as matas. Numa mata (A), as espécies com maiores valores de importância (VI) foram Stillingia oppositifolia, Eugenia uruguayensis e Sebastiania brasiliensis; na outra (B), as espécies mais importantes foram Araucaria angustifolia, Casearia decandra, Rudgea parquioides e Ilex paraguariensis. Análises de agrupamento foram aplicadas para estudar padrões espaciais com base na composição de espécies e TFs. A congruência (correlação) entre a variação da vegetação e das condições químicas do solo foi avaliada por meio de teste de Mantel; as maiores correlações foram encontradas para os quadros com tamanho P3 tanto para espécies como TFs, mas foram maiores para os últimos. Em geral, tanto com espécies como com TFs, os tipos de vegetação dentro da mata B foram menos agudos e diferentes daqueles da mata A.O solo da mata B apresentou menores teores de Al e maiores teores de Ca, Mg e matéria orgânica que a mata A. A mata A mostrou uma clara diferença em termos de espécies, TFs e condições de solo entre os quadros próximos à borda com o campo e os quadros do interior da mata, enquanto na mata B não houve quadros em borda. Na mata A, o solo nos quadros próximos à borda foram mais ricos em Al. Os padrões da vegetação em termos de espécies foram determinados pela presença das seguintes arvoretas: Casearia decandra e Rudgea parquioides na mata B, Sebastiania brasiliensis e Roupala brasiliensis nos quadros próximos à borda na mata A e Stillingia oppositifolia nos demais quadros desta mata. Os atributos que determinaram TFs com máxima correlação com as condições do solo não foram os mesmos em cada análise, mas em geral os mais relevantes foram os relacionados a atributos das folhas (largura média, comprimento médio, espessura, decidualidade, filotaxia e número de limbos). Na mata B, TFs típicos apresentaram folhas membranáceas e não perenes, folhas compostas ou folhas grandes e perenes. Na mata A, TFs típicos próximo à borda tiveram folhas pequenas e espessas, enquanto dentro da mata predominaram TFs com tamanhos intermediários de folha. Foram realizadas, tanto para espécies como para TFs, análises de variância com aleatorização para testar se os grupos diferiam significativamente com relação aos fatores do solo. Os grupos definidos com base nas espécies nos quadros de tamanho P1 diferiram significativamente na mata A quanto ao Al (P=0,005), e na análise conjunta de ambas as matas quanto ao Al (P=0,003), à matéria orgânica do solo (0,001) e ao Mg (0,001). Os grupos definidos com base em TFs nos quadros de tamanho P1 diferiram significativamente na mata A para o Al (P=0,008) e a matéria orgânica (P=0,002), e na análise conjunta das duas matas para o Ca, Al, Mg, matéria orgânica e pH (P£0,003); nos quadros de tamanho P3 da mata A os grupos diferiram significativamente para o Al (P=0,004) e na análise conjunta de ambas as matas para o Al e o Mg (P£0,024). / Two areas of forest with araucaria (Araucaria angustifolia) in the National Forest of São Francisco de Paula (29º23' e 29º27'S; 50º23'e 50º25'W) were studied for the detection of spatial patterns and their association with soil conditions, based on floristic and plant functional types (PFTs) composition. PFTs were defined on the basis of 19 qualitative and quantitative morphological traits evaluated for each species present. In each forest area a transect of contiguous quadrats was marked with 24 contiguous quadrats of 4.5 x 4.5 m ("small quadrats") inside 4 contiguous quadrats of 27 x 27 m ("large quadrats"). A total of 568 woody individuals with at least 2 m height were found in the quadrats, belonging to 31 families and 74 species. Data analysis with the small quadrats considered 2 scales: P1 with 4.5 x 4.5 m and P3 with 4.5 x 13.5 m by pooling groups of 3 contiguous small quadrats. Myrtaceae and Lauraceae were the families with the largest number of species in both forest areas. In one forest (A) the species with the largest importance values were Stillingia oppositifolia, Eugenia uruguayensis and Sebastiania brasiliensis; in the other (B), the most important species were Araucaria angustifolia, Casearia decandra, Rudgea parquioides and Ilex paraguariensis. Cluster analysis was applied to study spatial patterns based on species and PFTs composition. Congruence (correlation) between vegetation variation and soil chemical conditions was evaluated by means of a Mantel test; the largest correlations were found for quadrats with size P3 for both species and PFTs, but were larger for the latter. In general, with both species and PFTs, vegetation types within forest B were less sharp than and different from the ones in forest A. The soil in forest B presented lower contents of Al and higher contents of Ca, Mg a organic matter than in forest A. Forest A showed a clear difference in terms of species, PFTs and soil conditions between quadrats near the edge with grassland (Campos) and the ones more inside, while in forest B there were no edge quadrats. In forest A the soil in the quadrats near the edge was richer in Al. Vegetation patterns in terms of species were mostly determined by the presence of the following small trees: Casearia decandra and Rudgea parquioides in forest B, Sebastiania brasiliensis and Roupala brasiliensis in forest A near the edge, and S. oppositifolia in the remaining of forest A. The traits that determined PFTs with maximum correlation with soil conditions were not the same in each analysis, but in general the most relevant ones were related to leaf traits (leaf width, leaf length, leaf thickness, deciduousness, leaf arrangement and simple/composite leaves). In forest B typical PFTs presented membranaceous and nonperennial leaves, composite leaves or large perennial leaves. In forest A near the edge typical PFTs had small and thick leaves, while within the forest predominated PFTs with intermediate leaf size. For both species and PFTs analysis of variance with randomization was performed to test if the compositional groups differed significantly with respect to soil factors. The groups defined on the basis of species in P1 quadrats in forest A differed significantly for Al (P= 0,005) and in the joint analysis of both forests differed significantly for Al (P=0,003), soil organic matter (P=0,001) and Mg (P=0,001). The groups defined on the basis of PFTs in the P1 quadrats in forest A differed significantly for Al (P=0,008) and organic matter (P=0,002) and in the joint analysis of both forests differed significantly for Ca, Mg, Al, organic matter and pH (P£0,003); in the P3 quadrats in forest A differed significantly Al (P=0,004) and in the joint analysis of both forests differed significantly for Al and Mg (P£0,024).

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-10-03T04:19:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 348733.pdf: 3491610 bytes, checksum: efa475fdc12a4b85498a3449beaff28b (MD5) Previous issue date: 2017 / Araucaria angustifolia é uma das espécies de maior importância para o sul do Brasil. Suas sementes apresentam valor alimentício, econômico, social e cultural para as comunidades coletoras. O desenvolvimento das sementes de gimnospermas, como A. angustifolia, pode ser dividida em duas fases principais: a embriogênese zigótica e a maturação das sementes. Diversos estudos têm sido conduzidos durante a embriogênese zigótica de A. angustifolia, contudo pouco se conhece sobre o processo de maturação das sementes, que ocorre entre os meses de abril até julho. Assim, o presente estudo objetivou analisar as mudanças bioquímicas, fisiológicas, morfológicas e no ciclo celular durante a maturação das sementes de A. angustifolia e o efeito de diferentes estádios de desenvolvimento no armazenamento. Sementes de A. angustifolia foram coletadas nos estádios de desenvolvimento cotiledonar, II, III e IV nos anos de 2014 e 2015 e, em seguida, armazenadas em refrigerador por até 360 dias, com intervalos de 30, 60, 90 e 180 dias. Foram realizadas análises morfológicas pela análise de microscopia de luz e eletrônica de transmissão; análises bioquímicas com o uso da espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), atividade enzimática e níveis hormonais; e análises fisiológicas pelos testes de germinação, tetrazólio, condutividade elétrica e índice de velocidade de germinação. Os resultados indicaram uma intensa atividade metabólica durante todo o período de coleta das sementes. Nos estádios III e IV foram observadas mitocôndrias com uma morfologia diferenciada, uma diferenciação do procâmbio e a formação de canais resiníferos. Nestes estádios também foram observados um aumento nas células na fase G2 do ciclo celular e a presença de algumas células em processo de divisão celular pela microscopia de luz. Tais mudanças parecem indicar uma mudança durante o desenvolvimento das sementes para o metabolismo germinativo. Estas mudanças associadas a uma queda nos níveis de ácido abscísico e um aumento nos níveis de ácido indolacético podem ter colaborado para o incremento na qualidade fisiológica nestes estádios. Tais resultados são inéditos e tornam-se evidentes as mudanças morfológicas, hormonais e fisiológicas das sementes, sendo que claramente pode-se observar uma divisão dos estádios cotiledonar e II dos estádios III e IV. As diferenças das sementes em cada estádio de desenvolvimento refletiram no potencial de armazenamento, com um incremento na qualidade fisiológica após o armazenamento, quando as sementes foram coletadas no estádio cotiledonar. As modificações ultraestruturais e enzimáticas indicaram que até os 60 dias de armazenamento as características são semelhantes ao processo germinativo e aos 90 dias de armazenamento, as sementes parecem iniciar o processo de deterioração com um incremento na atividade das enzimas antioxidantes e desorganização celular. Assim, os resultados destacaram a importância do detalhamento do processo de maturação das sementes de A. angustifolia e elucidaram algumas mudanças que podem ocorrer neste período.<br> / Abstract : Araucaria. angustifolia is one of the most important plant species of southern Brazil. Its seeds are of dietary, economic, social and cultural value to the communities that gather them. Seed development of gymnosperms, such as A. angustifolia, can be divided into two main phases: embryogenesis and seed maturation. Several studies have investigated zygotic embryogenesis of A. angustifolia, but little is known about the process of seed maturation, which occurs between April and July. Therefore, the present study aimed to analyze the biochemical, physiological, morphological and cell-cycle changes during the maturation of seeds of A. angustifolia, and the effect of different stages of development on storage. Seeds of A. angustifolia were collected in the cotyledonary developmental stages II, III and IV in the years of 2014 and 2015, and then stored in a refrigerator for up to 360 days at intervals of 30, 60, 90 and 180 days. Morphological analyses were performed using light and transmission elctron microscopy; biochemical analyses were performed using fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), enzymatic activity and hormone levels; and physiological analyses were done using tests for germination, tetrazolium, electrical conductivity and germination speed index. The results indicated an intense metabolic during the period of see collection. Observations in stages III and IV, revealed mitochondria with a differenciated morphology, a differentiated procambium and the formation of resiniferous channels. These stages also revealed an increase in the number of cells in the G2 phase of the cell cycle and the presence of some cells under going division by light microscopy. Such changes seem to indicate an early change during seed development for germinative metabolism. These changes, along with the associated drop in abscisic acid levels, and an increase in indoleacitic acid levels, may have contributed to an increase in physiological quality during these stages. The results of the present study are unprecedented, and the morphological, hormonal and physiological changes of seeds become evident, and a division between cotyledonary stage and stage II, and stages III and IV are clearly observed. The differences among seeds at each stage of development reflect the storage potential, with an increase in physiological quality after storage, when the seeds were collected at the cotylendary stage. The ultrastructural and enzymatic modifications indicated that until 60 days of storage the changes are similar to the germination process, and at the 90 days of storage, the seeds seem to initiate the deterioration process with an increase in the activity of antioxidant enzymes and cellular disorganization. The results of this study highlight the importance of detailing the maturation process of A. angustifolia, and elucidating changes that may occur during this period.

O mosaico de hábitats e a degradação ambiental são considerados fatores que determinam a distribuição e composição da assembléia de pequenos mamíferos não-voadores em uma paisagem. O objetivo deste estudo foi analisar a composição desta assembléia no gradiente campo-floresta contínua com Araucária e em manchas de floresta com Araucária inseridas na matriz campestre de uma área protegida, e avaliar a influência de distúrbios associados ao manejo extensivo de rebanhos domésticos, como o fogo, a herbivoria e o pisoteio, sobre esta assembléia, comparando duas áreas, uma protegida e outra impactada, localizadas na região nordeste do Estado do Rio Grande do Sul. Foram realizados quatro períodos de amostragem, uma a cada estação do ano de 2004, totalizando um esforço efetivo de 5254 armadilhas-24h, onde foram capturados 325 indivíduos pertencentes a 13 espécies de roedores sigmodontíneos (Akodon montensis, Akodon paranaensis, Akodon sp. 1, Akodon sp. 2 (2n=34), Brucepatersonius iheringi, Delomys dorsalis, Oligoryzomys flavescens, Oligoryzomys nigripes, Oryzomys angouya, Oryzomys russatus, Oxymycterus nasutus, Scapteromys sp. (2n=34) e Thaptomys nigrita) e duas de marsupiais (Monodelphis dimidiata e Philander frenatus). Na área protegida, a análise multivariada dos dados indicou a formação de três assembléias distintas (campestre, de borda e florestal) no gradiente campo-floresta contínua com Araucária, e diferença significativa apenas na comparação entre as assembléias das manchas de maior e menor área, sendo que a menor apresentou maior riqueza, abundância e diversidade que a maior, provavelmente devido a sua maior proximidade com a floresta contínua. Os resultados encontrados na área protegida e na área impactada evidenciaram que a degradação dos hábitats campestre e florestal, decorrente do manejo extensivo tradicional de rebanhos domésticos, afeta negativamente a assembléia de pequenos mamíferos não-voadores na região pesquisada. / The mosaic of habitats and the environmental degradation are considered factors that determine the distribution and composition of the small non-flying mammals’ assemblage in a landscape. The objective of this study was to analyze the composition of this assemblage in the grassland-continuous Araucaria forest gradient and in Araucaria forest patches inserted in a grassland matrix of a protected area, and to evaluate the influence of disturbances associated to the extensive livestock management, as fire, herbivory and trampling, on this assemblage, comparing two areas, a protected and a impacted one, located in the northeast region of the Rio Grande do Sul State. Four sampling periods were accomplished, one in each season of 2004, totalizing an effective effort of 5,254 trap-24h, where 325 individuals belonging to 13 species of sigmodontine rodents (Akodon montensis, Akodon paranaensis, Akodon sp. 1, Akodon sp. 2 (2n=34), Brucepatersonius iheringi, Delomys dorsalis, Oligoryzomys flavescens, Oligoryzomys nigripes, Oryzomys angouya, Oryzomys russatus, Oxymycterus nasutus, Scapteromys sp. (2n=34) and Thaptomys nigrita) and two of marsupials (Monodelphis dimidiata and Philander frenatus) were captured. In the protected area, the multivariate data analysis indicated the formation of three different assemblages (a grassland one, an edge one and a forest one) in the grassland-continuous Araucaria forest gradient, and a significant difference only in the comparison between the assemblages from the largest and the smallest forest patches, where the smallest one presented larger richness, abundance and diversity than the largest one, probably due to its largest proximity with the continuous forest. The results in the protected and impacted areas evidenced that the degradation of the grassland and forest habitats, due to the traditional extensive livestock management, negatively affects the small non-flying mammals’ assemblage in the researched region.

Duas áreas de mata com araucária (Araucaria angustifolia) na Floresta Nacional de São Francisco de Paula (29º23' e 29º27'S; 50º23'e 50º25'W) foram estudadas com base na composição florística e tipos funcionais (TFs) para a detecção de padrões espaciais e sua associação com as condições do solo. TFs foram definidos a partir de 19 atributos morfo-funcionais qualitativos e quantitativos avaliados para cada espécie amostrada. Em cada área, um transecto de quadros contíguos foi marcado com 24 quadros de 4,5 x 4,5m (quadros pequenos) dentro de quatro quadros contíguos de 27 x 27m (quadros grandes). Foi amostrado um total de 568 indivíduos arbóreos lenhosos com pelo menos 2m de altura, pertencentes a 31 famílias e 74 espécies. As análises dos dados com os quadros pequenos consideraram duas escalas: P1, com 4,5 x 4,5m e P3, com 4,5 x 13,5m, formados pelo agrupamento de três quadros pequenos contíguos. Myrtaceae e Lauraceae foram as famílias com maior número de espécies em ambas as matas. Numa mata (A), as espécies com maiores valores de importância (VI) foram Stillingia oppositifolia, Eugenia uruguayensis e Sebastiania brasiliensis; na outra (B), as espécies mais importantes foram Araucaria angustifolia, Casearia decandra, Rudgea parquioides e Ilex paraguariensis. Análises de agrupamento foram aplicadas para estudar padrões espaciais com base na composição de espécies e TFs. A congruência (correlação) entre a variação da vegetação e das condições químicas do solo foi avaliada por meio de teste de Mantel; as maiores correlações foram encontradas para os quadros com tamanho P3 tanto para espécies como TFs, mas foram maiores para os últimos. Em geral, tanto com espécies como com TFs, os tipos de vegetação dentro da mata B foram menos agudos e diferentes daqueles da mata A.O solo da mata B apresentou menores teores de Al e maiores teores de Ca, Mg e matéria orgânica que a mata A. A mata A mostrou uma clara diferença em termos de espécies, TFs e condições de solo entre os quadros próximos à borda com o campo e os quadros do interior da mata, enquanto na mata B não houve quadros em borda. Na mata A, o solo nos quadros próximos à borda foram mais ricos em Al. Os padrões da vegetação em termos de espécies foram determinados pela presença das seguintes arvoretas: Casearia decandra e Rudgea parquioides na mata B, Sebastiania brasiliensis e Roupala brasiliensis nos quadros próximos à borda na mata A e Stillingia oppositifolia nos demais quadros desta mata. Os atributos que determinaram TFs com máxima correlação com as condições do solo não foram os mesmos em cada análise, mas em geral os mais relevantes foram os relacionados a atributos das folhas (largura média, comprimento médio, espessura, decidualidade, filotaxia e número de limbos). Na mata B, TFs típicos apresentaram folhas membranáceas e não perenes, folhas compostas ou folhas grandes e perenes. Na mata A, TFs típicos próximo à borda tiveram folhas pequenas e espessas, enquanto dentro da mata predominaram TFs com tamanhos intermediários de folha. Foram realizadas, tanto para espécies como para TFs, análises de variância com aleatorização para testar se os grupos diferiam significativamente com relação aos fatores do solo. Os grupos definidos com base nas espécies nos quadros de tamanho P1 diferiram significativamente na mata A quanto ao Al (P=0,005), e na análise conjunta de ambas as matas quanto ao Al (P=0,003), à matéria orgânica do solo (0,001) e ao Mg (0,001). Os grupos definidos com base em TFs nos quadros de tamanho P1 diferiram significativamente na mata A para o Al (P=0,008) e a matéria orgânica (P=0,002), e na análise conjunta das duas matas para o Ca, Al, Mg, matéria orgânica e pH (P£0,003); nos quadros de tamanho P3 da mata A os grupos diferiram significativamente para o Al (P=0,004) e na análise conjunta de ambas as matas para o Al e o Mg (P£0,024). / Two areas of forest with araucaria (Araucaria angustifolia) in the National Forest of São Francisco de Paula (29º23' e 29º27'S; 50º23'e 50º25'W) were studied for the detection of spatial patterns and their association with soil conditions, based on floristic and plant functional types (PFTs) composition. PFTs were defined on the basis of 19 qualitative and quantitative morphological traits evaluated for each species present. In each forest area a transect of contiguous quadrats was marked with 24 contiguous quadrats of 4.5 x 4.5 m ("small quadrats") inside 4 contiguous quadrats of 27 x 27 m ("large quadrats"). A total of 568 woody individuals with at least 2 m height were found in the quadrats, belonging to 31 families and 74 species. Data analysis with the small quadrats considered 2 scales: P1 with 4.5 x 4.5 m and P3 with 4.5 x 13.5 m by pooling groups of 3 contiguous small quadrats. Myrtaceae and Lauraceae were the families with the largest number of species in both forest areas. In one forest (A) the species with the largest importance values were Stillingia oppositifolia, Eugenia uruguayensis and Sebastiania brasiliensis; in the other (B), the most important species were Araucaria angustifolia, Casearia decandra, Rudgea parquioides and Ilex paraguariensis. Cluster analysis was applied to study spatial patterns based on species and PFTs composition. Congruence (correlation) between vegetation variation and soil chemical conditions was evaluated by means of a Mantel test; the largest correlations were found for quadrats with size P3 for both species and PFTs, but were larger for the latter. In general, with both species and PFTs, vegetation types within forest B were less sharp than and different from the ones in forest A. The soil in forest B presented lower contents of Al and higher contents of Ca, Mg a organic matter than in forest A. Forest A showed a clear difference in terms of species, PFTs and soil conditions between quadrats near the edge with grassland (Campos) and the ones more inside, while in forest B there were no edge quadrats. In forest A the soil in the quadrats near the edge was richer in Al. Vegetation patterns in terms of species were mostly determined by the presence of the following small trees: Casearia decandra and Rudgea parquioides in forest B, Sebastiania brasiliensis and Roupala brasiliensis in forest A near the edge, and S. oppositifolia in the remaining of forest A. The traits that determined PFTs with maximum correlation with soil conditions were not the same in each analysis, but in general the most relevant ones were related to leaf traits (leaf width, leaf length, leaf thickness, deciduousness, leaf arrangement and simple/composite leaves). In forest B typical PFTs presented membranaceous and nonperennial leaves, composite leaves or large perennial leaves. In forest A near the edge typical PFTs had small and thick leaves, while within the forest predominated PFTs with intermediate leaf size. For both species and PFTs analysis of variance with randomization was performed to test if the compositional groups differed significantly with respect to soil factors. The groups defined on the basis of species in P1 quadrats in forest A differed significantly for Al (P= 0,005) and in the joint analysis of both forests differed significantly for Al (P=0,003), soil organic matter (P=0,001) and Mg (P=0,001). The groups defined on the basis of PFTs in the P1 quadrats in forest A differed significantly for Al (P=0,008) and organic matter (P=0,002) and in the joint analysis of both forests differed significantly for Ca, Mg, Al, organic matter and pH (P£0,003); in the P3 quadrats in forest A differed significantly Al (P=0,004) and in the joint analysis of both forests differed significantly for Al and Mg (P£0,024).

O produto formado a partir da reação entre trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3H2O]2+ e íons nitrito é dependente da concentração hidrogeniônica do meio. Em pH acima de 10, o composto final formado é o trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3NO2]+ (1,1 x 103 M-1.s-1), o qual é convertido quantitativamente em pH 4 ao correspondente nitrosilo (2,2 x 10-3 s-1). Esta reação em meio alcalino ocorre em duas etapas com constantes de velocidades distintas, sendo a primeira etapa mais rápida que a segunda. Esta etapa foi atribuída à formação dos isômeros, trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3NO2]+ e trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3ONO] + (1,1 x 103 M-1 s-1; pH 11). A etapa mais lenta foi atribuída à isomerização do nitrito composto, nitrito ligado pelo oxigênio, para o nitro composto, ligado pelo nitrogênio e que apresenta maior estabilidade (6,9 x 102 M-1 s-1; pH 11). Através de estudos in vitro foi efetuada a avaliação da citotoxicidade de nitrosilos complexos de rutênio tipo trans-[Ru(NO)(NH3)4L] 3+ e trans-[Ru(NH3)4L(SO4)]+ em culturas de células de diferentes modelos de câncer. Verificou-se que estes compostos apresentaram resultados efetivos em células de leucemia Humana (Jurkat) e Melanoma Murino (B16F10-Nex2). Os compostos acima também se mostraram citotóxicos frente a células de câncer de Mama Humana (MCF-7). Estudos in vivo com células B16F10-Nex2 envolvendo nitrosilo complexos e seus análogos sulfatos indicaram que a aplicação intraperitoneal destes compostos retardou o desenvolvimento dos tumores e aumentou a sobrevida dos camundongos. Os resultados também indicam que a morte celular promovida pelos complexos provavelmente não é dependente de caspases. A aplicação dos nitrosilos, SNP e [Ru(NO)Hedta], em culturas celulares embriogênicas de Araucaria angustifolia induziram um aumento na massa fresca das culturas em relação ao controle, após 21 dias. Este efeito foi inibido quando PTIO, captador de NO, foi adicionado às amostras em conjunto com os doadores de NO. Observou-se também, que após 21 dias, as amostras preparadas com os compostos apresentaram maior concentração de óxido nítrico, tanto intra quanto extracelular. As morfologias das células também foram influenciadas pela adição dos nitrosilos, observando-se um acréscimo no número de células embriogênicas em relação ao controle, acréscimo este que ocorreu ocorre de forma desorganizada. / The product of the reaction of trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3H2O]2+ with nitrite ions depends on the hydrogenionic concentration of the medium. In solutions with pH &gt; 10, the final compound is the trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3NO2]+ (1,1 x 103 M-1.s-1), wich is quantitatively converted into the trans-[Ru(NH3)4P(OEt) 3NO]3+ in acid solutions (CH+ &gt; 10-5 mol.L-1; kobs = 2.2 x 10-3 s-1 at pH 4). This reaction presents two different steps with distinct rate constants, being the first step faster than the second. Then, the first process was attributed to the formation of both the isomers, trans-[Ru(NH3)4P(OEt)3NO2]+ and trans-[Ru(NH3)4P(OEt)3ONO]+ (1.1 x 103 M-1s-1; pH 11). The slowest step was then attributed to the isomerization of the nitrito compound, O-bonded, to the nitro compound, Nbonded, which presents more stability (6.9 x 102 M-1s-1; pH 11). In vitro studies were used to evaluate the cytotoxicity of some nitrosyl ruthenium compounds type trans-[Ru(NO)(NH3)4L]3+ and trans-[Ru(NH3)4L(SO4)]+ against some cancer cells models. The compounds showed significant results against human leukemia (Jurkat) and murine melanoma (B16F10-Nex2). The compounds also showed citotoxicity against human breast adenocarcinoma cell line (MCF-7), however the compounds were less active in this culture. In vivo studies with B16F10-Nex2 and the ruthenium compounds suggests that intraperitoneally applications of the complexes delays tumor growth and prolongs animal survival rate. The results also indicates that the compounds should induce a caspase-independent death of the tumor cell. The application of the nitrosyls, SNP and [Ru(NO)Hedta], in embryogenic suspension cultures of Araucaria angustifolia promotes an increase at the fresh mass percent comparing with the control samples. This effect was inhibit when the compound PTIO, a NO scavenger, was added to the samples prepared with NO donors. After 21 days of cellular culture, fluorimetric methods for NO detection showed that the samples prepared with SNP and [Ru(NO)Hedta] presents higher intra and extracellular NO concentrations than control. Morphological organization of embryogenic suspension cultures of A. angustifolia were also influenced by the addition of NO, the cultures with the donors showed increased embriogenic cells numbers relating to the control.

A baixa temperatura média anual (< 18ºC), a localização em zona de altitude elevada (> 1500 m) e a diversidade florística, bem representativa da parte sul da serra da Mantiqueira, tornam a região de Monte Verde (município de Camanducaia, sudeste do Estado de Minas Gerais), propícia para a investigação de mudanças climáticas ocorridas no Quaternário tardio, meta desta Dissertação. Para buscar esta meta, propõe-se como objetivo a análise e descrição da sucessão paleoflorística, integrada ao aporte sedimentar e às condições geoquímicas de deposição nesta região, com base de dados palinológicos, sedimentológicos (granulometria, concentração de matéria orgânica e teor e tipos de minerais pesados) e geocronológicos (datações 14C por espectrometria de aceleração de massa). A área amostrada foi a margem esquerda do Córrego dos Cadetes, afluente do rio Jaguari. Trata-se de um vale fluvial encaixado em alvéolo de relevo acidentado, onde se coletou testemunho raso (2,10m) contínuo, com equipamento vibrocorer (vibro-amostrador). Os depósitos sedimentares tertemunhados são argilo-arenosos orgânicos e turfosos. Sua análise sedimentológica demonstra a ocorrência de variações graduais e cíclicas relacionadas a mudanças no balanço entre aporte sedimentar terrígeno e biodretítico e/ou orgânico, controlado por alterações no tipo de processo deposicional, e, por extensão, na cobertura vegetal, esta possivelmente influenciada por oscilações climáticas do Quaternário Tardio. As cinco datações obtidas ficaram compreendidas no intervalo entre 20830-20370 anos 14C cal A.P. (100 cm de profundidade) e 2350?2150 anos 14C cal A.P. (10 cm). Os dados palinológicos permitem interpretar que durante todo esse período a região foi dominada por floresta, principalmente com a presença de Araucaria angustifolia, sob clima predominantemente frio e úmido, porém com possíveis oscilações de umidade. Para efeito de inferências paleoclimáticas, quatro fases principais foram identificadas, expressas a seguir em idades extrapoladas. A primeira fase corresponde ao intervalo de 17000 a 15000 anos A.P., no qual há oscilação da cobertura vegetal e aumento de erosão nas encostas, sob clima frio e úmido. Na segunda fase, de 15000 a 9000 anos A.P., detectou-se aumento de umidade acompanhado da redução do aporte trativo. A terceira fase, correspondente ao intervalo de 9000 a 8000 anos A.P., registra decréscimo na umidade e aumento da taxa de sedimentação. Nos últimos 8000 anos A.P., ocorre a manutenção da floresta de Araucaria em condições climáticas frias e úmidas. / Low annual average temperature (< 18ºC), the localization in a zone of high altitude (> 1500 m) and high floristic diversity, representative of the southern part of the Serra da Mantiqueira highlands, turn the Monte Verde region (city of Camanducaia, Southeast of the State of Minas Gerais), propitious for the inquiry of Late Quaternary climatic changes, the aim of this dissertation. The objective of the study is to analyze and describe the paleofloristic succession based on palynology, integrated with sedimentological (grain size and heavy mineral analysis), geochemical (quantification of organic matter) and geochronological (14C AMS dating) data. The sampled area is located at the left margin of the Cadetes stream, a tributary of the Jaguari River. A 2.10 m long sediment core was collected on the fluvial valley with a vibrocore equipment. The sandy-clay sediments show a high organic content and are similar in appearance to peatbog deposits. The sedimentological analysis demonstrate the occurrence of gradual and cyclic variations related to the change in incoming of terrigenous biodetrital/organic sediments, controlled by alterations in the type of depositional process, and, therefore, possibly by the vegetation cover. All these changes were possibly influenced by climatic oscillations of the Late Quaternary. The five 14C AMS dates obtained encompass the period between 20830-20370 14C cal. A.P. (100 cm of depth) and 2,350-2,150 years 14C cal. A.P. (10 cm). The palynological results indicate that in the last 20,000 years the landscape was characterized by Araucaria angustifolia forest under predominantly cold and humid climates, with minor oscillations of humidity. Four pollen phases had been identified, with extrapolated ages for paleoclimatic inferences. The first one corresponds to the interval between 17,000 and 15,000 years A.P. with oscillation of the forest cover under cold and humid climate. Between 15,000 and 9,000 years A.P., there is an increase of humidity and reduction of tractive sedimentary supply. The third interval corresponds to the period between 9,000 and 8,000 years A.P. with a decrease in humidity and increase of the sedimentation rate. In the last 8,000 years A.P. Araucaria forest was maintained under cold and humid climatic conditions, as it did during the Late Pleistocene.