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Perfil enzimático de fungos colonizadores e agentes de pneumopatiasOLIVEIRA, Heloiza Maria da Silva 24 February 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-02-24 / FACEPE / Infecções fúngicas em imunossuprimidos aumentaram significativamente nas últimas décadas, sendo uma das principais causas de morbidade e mortalidade. Fatores de virulência, como produção de enzimas pelos agentes infecciosos, contribui no dano causado aos pacientes. Neste contexto, os objetivos deste trabalho foram detectar, isolar e identificar fungos em amostras clínicas, principalmente das vias respiratórias, de pacientes com pneumopatias crônicas, internos no Setor de Pneumologia do Hospital Geral Otávio de Freitas – PE e caracterizar os agentes quanto à patogenicidade. Foram realizadas coletas em 137 pacientes, sendo obtidas 327 (92,2%) amostras de escarro, 20 (5,6%) de lavado bronco-alveolar, quatro (1,1%) de secreção da cavidade oral e quatro (1,1%) de fragmentos de tecido pulmonar. Em 10 pacientes (7,29%), foi diagnosticada aspergilose pulmonar, em quatro, (2,9%) colonização causada por espécies de Candida e Geotrichum clavatum, em três (2,1%), colonização por leveduras associada à candidíase oral, em um, (0,7%) feohifomicose pulmonar e em um (0,7%), candidíase oral. Foram obtidos 21 isolados, sendo oito (38,09%) de Aspergillus fumigatus, um (4,76%) de A. flavus, oito (38,09%) de C. albicans, dois (9,54%) de C. tropicalis, um (4,76%) de G. clavatum e um fungo filamentoso demáceo, Cladophialophora devriesii (4,76%). As culturas apresentaram diferentes perfis em relação a capacidade elastinolítica, proteolítica e fosfolipásica, não permitindo estabelecer relação entre os danos ao hospedeiro e a detecção enzimática. O diagnóstico diferencial precoce e preciso é imprescindível para terapêutica adequada e bom prognóstico do paciente. / Opportunistic fungal infections have increased significantly in recent decades, and it is a major cause of morbidity and mortality. Virulence factors, such as enzyme production, contributes to the damage caused to patients. In this context, the objectives were to detect, isolate and identify the fungi occurring in clinical samples, mainly respiratory tract of patients with chronic respiratory disorders, inmates in Pneumology sector of the Hospital Geral Otávio de Freitas - PE and to characterize them in respect to pathogenicity. From the 137 patients collected, 327 (92.2%) were obtained by sputum samples, 20 (5.6%) from bronchoalveolar lavage, four (1.1%) from secretion of the oral cavity and four (1, 1%) from of fragments of lung tissue. In 10 patients (7.29%), it was diagnosed pulmonary aspergillosis, in four patients (2.9%) presented a yeast colonization caused by Candida species and Geotrichum clavatum, three patients (2.1%) presented colonization by yeasts associated with oral candidiasis, one (0.7%) had pulmonary phaeohyphomycosis and one (0.7%), oral candidiasis. From 21 isolates obtained, eight (38.09%) were identified as Aspergillus fumigatus, one (4.76%) isolate as A. flavus, eight (38.09%) as C. albicans, two (9.54%) as C. tropicalis, one (4.76%) G. clavatum and a dematiaceous filamentous fungus, Cladophialophora devriesii (4.76%). The cultures presented different profiles in relation to their capacities to produce elastinolytic, proteolytic and phospholipolytic enzymes, which did not albw to establish a correlation between the host damage and enzymatic detection. The early and accurate differential diagnosis is imperative for appropriate therapy and prognosis for the patients.
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Colonizacao intracavitaria pulmonar por aspergillus niger : analise de suas peculiaridadesSevero, Luiz Carlos January 1987 (has links)
Trezentos pacientes portadores de colonização intracavitária pulmonar (pelos exames soro lógico e/ou tecidual) foram investigados num período de 10 anos. Os casos foram classificados como: Aspergillus fumigatus (246 casos); Ao niger (21 casos); A. flavus (7 casos); Pseudallescheria boydii (1 caso); colonização fúngica não especificada (21 casos) e colonização actinomicética (4 casos). os grupos A. niger (çasos)e A. fumigatus (controles) foram comparados a respeito de variáveis clínicas e laboratoriais, por serem os mais freqUentes e pela pobreza da literatura sobre A. niger. Esta análise mostrou associações estatisticamente significativas com o A. niger para;sexo masculino (Razão de Chances = 3,28; p <0,05); infecção nosocomial, ocorrendo em hospitais de conservação precária (RC = 150,8; p< 0,001); tuberculose ativa (RC = 8,03; P <0,001); diabete mélito tipo 11 (RC = 10,67; p<O,OOl); e êxito letal (RC = 3,1; p<0,02). Por outro lado, cristais de oxalato de cálcio no escarro e oxalose sitêmica só ocorreram no grupo A.niger. As implicações etiológicas e diagnósticas destes achados sao discutidas, enfatizando o papel do ambiente externo, da oxalose, do acúmulo de ácidos e da tuberculose ativa na etiopatogenia do A. niger. / Three hundred patients with intracavitary pulmonary colonization (by serologic and/or tissue examinations) were analysed during a ten years period. The cases were classified as: Aspergillus fumigatus (246 cases); A. niger (21 cases); A. flavus (7cases); Pseudallescheria boydii (1 case); fungal colonization not especified (21 cases) and actinomycetic colonization (4 cases). Due to their frequency and the scarcity of literature about A. niger, the groups A. niger (cases) and A. fumigatus (controls) were compared with respect to clinical and laboratorial variables. This analysis showed statistically significant associations with A. niger for: male sex (Odds Ratio = 3,28; p< 0,05); nosocomial infection, which occurred.in hospitaIs in poor state of repair (aR = 150.8; p<O,ooU; active tuberculosis (aR = 8,03; p<O,OOl); type 11 diabete mellitus (aR = 10,67; p<O,ooU; and lethal outcome (aR = 3, 1; p < o, 02). On the other hand, calcium oxalate crystals in the sputum and sistemic oxalosis occured only in A. niger group. The etiologic and diagnostic implications of these findings are discussed, with emphasis on the role of the externa 1 environernent, oxalosis, acid acurnulation and ative tuberculosis in the etiopathogenesis of A. niger.
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Detecção do antígeno galactomanana para diagnóstico de aspergilose invasiva em pacientes neutropênicosPedroza, Kelly Cristine Moura Costa 11 April 2013 (has links)
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Dissertação_ICS_ Kelly Cristine Moura Costa Pedroza.pdf: 5288656 bytes, checksum: a1a25bd51a585cdef1f51b03e0c54342 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-19T18:54:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertação_ICS_ Kelly Cristine Moura Costa Pedroza.pdf: 5288656 bytes, checksum: a1a25bd51a585cdef1f51b03e0c54342 (MD5) / Aspergilose invasiva (AI) é uma importante causa de morbidade e mortalidade entre
pacientes neutropênicos com câncer hematológico. O diagnóstico desta doença fúngica
invasiva (DFI) permanece um desafio, especialmente devido a seus sintomas inespecíficos e
falta de sensibilidade e especificidade de testes que utilizam metodologia não invasiva. A
detecção de galactomanana (GM) em amostras de fluidos biológicos foi recentemente incluída
como um critério micológico para AI “provável” em consenso para disgnóstico de DFI
elaborado pela European Organization for Research and Treatment of Cancer/ Invasive
Fungal Infection Cooperative Group and the National Institute of Allergy and Infectious
Diseases Mycoses Study Group (EORTC/MSG). A GM é um antígeno solúvel liberado
durante o crescimento da hifa no tecido. O teste de detecção é um ELISA sanduíche (ELISAGM)
que tem um excelente valor preditivo negativo no diagnóstico da AI em pacientes de alto
risco e pode apresentar índices positivos antes das manifestações clínicas da doença. O
objetivo deste estudo foi investigar a incidência da AI em pacientes neutropênicos com
doenças hematológicas malignas acompanhados pelo serviço de hematologia do Hospital
Universitário Professor Edgard Santos, Universidade Federal da Bahia, Brasil. Foram feitos
monitoramentos com testes seriados para detecção de GM em amostras de soro em episódios
de neutropenia e os resultados foram associados com dados clínicos dos pacientes. Um total
de 102 episódios foi incluído de maio de 2011 a julho de 2012, 48 dos quais com neutropenia
prolongada (< 500 neutrófilos/mm3 por mais que 10 days). Um caso com critérios para AI
“provável” e quatro com critérios para AI “possível” foram detectados. Um caso com índices
positivos seriados em teste de GM sem critério radiológico foi observado; este episódio pode
ter representado um estágio inicial da infecção. Os dados obtidos foram condizentes com as
descrições sobre a utilidade do ELISA-GM como ferramenta para diagnóstico da AI;
entretanto, a associação com outros testes não invasivos pode melhorar sua aplicação na
prática clínica.
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Aspergilose invasiva em receptores de transplante de células-tronco hematopoiéticasDias, Viviane Maria de Carvalho Hessel 09 October 2012 (has links)
Resumo
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Colonizacao intracavitaria pulmonar por aspergillus niger : analise de suas peculiaridadesSevero, Luiz Carlos January 1987 (has links)
Trezentos pacientes portadores de colonização intracavitária pulmonar (pelos exames soro lógico e/ou tecidual) foram investigados num período de 10 anos. Os casos foram classificados como: Aspergillus fumigatus (246 casos); Ao niger (21 casos); A. flavus (7 casos); Pseudallescheria boydii (1 caso); colonização fúngica não especificada (21 casos) e colonização actinomicética (4 casos). os grupos A. niger (çasos)e A. fumigatus (controles) foram comparados a respeito de variáveis clínicas e laboratoriais, por serem os mais freqUentes e pela pobreza da literatura sobre A. niger. Esta análise mostrou associações estatisticamente significativas com o A. niger para;sexo masculino (Razão de Chances = 3,28; p <0,05); infecção nosocomial, ocorrendo em hospitais de conservação precária (RC = 150,8; p< 0,001); tuberculose ativa (RC = 8,03; P <0,001); diabete mélito tipo 11 (RC = 10,67; p<O,OOl); e êxito letal (RC = 3,1; p<0,02). Por outro lado, cristais de oxalato de cálcio no escarro e oxalose sitêmica só ocorreram no grupo A.niger. As implicações etiológicas e diagnósticas destes achados sao discutidas, enfatizando o papel do ambiente externo, da oxalose, do acúmulo de ácidos e da tuberculose ativa na etiopatogenia do A. niger. / Three hundred patients with intracavitary pulmonary colonization (by serologic and/or tissue examinations) were analysed during a ten years period. The cases were classified as: Aspergillus fumigatus (246 cases); A. niger (21 cases); A. flavus (7cases); Pseudallescheria boydii (1 case); fungal colonization not especified (21 cases) and actinomycetic colonization (4 cases). Due to their frequency and the scarcity of literature about A. niger, the groups A. niger (cases) and A. fumigatus (controls) were compared with respect to clinical and laboratorial variables. This analysis showed statistically significant associations with A. niger for: male sex (Odds Ratio = 3,28; p< 0,05); nosocomial infection, which occurred.in hospitaIs in poor state of repair (aR = 150.8; p<O,ooU; active tuberculosis (aR = 8,03; p<O,OOl); type 11 diabete mellitus (aR = 10,67; p<O,ooU; and lethal outcome (aR = 3, 1; p < o, 02). On the other hand, calcium oxalate crystals in the sputum and sistemic oxalosis occured only in A. niger group. The etiologic and diagnostic implications of these findings are discussed, with emphasis on the role of the externa 1 environernent, oxalosis, acid acurnulation and ative tuberculosis in the etiopathogenesis of A. niger.
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Dosagem da galactomanana sérica para o diagnóstico de aspergilose invasiva pulmonar em pacientes submetidos ao transplante de células tronco hematopoiéticasRazouk, Fernanda Horn January 2013 (has links)
Orientador: Prof. Dr. José Zanis Neto / Co-orientador: Prof. Dr. Clóvis Arns da Cunha / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 2013 / Inclui referências / Resumo: O fungo Aspergillus, agente causador da aspergilose invasiva pulmonar (AIP), representa um problema grave para área médica, particularmente quando acomete doentes imunocomprometidos, como pacientes com neutropenia prolongada e/ou receptores de transplante de células tronco hematopoiéticas (TCTH), por estar frequentemente associado a altas taxas de morbidade e mortalidade. Apesar da gravidade da AIP, frequentemente associada com disseminação sistêmica, os recursos de diagnóstico ainda são limitados. Os recentes avanços pelo diagnóstico por imagem, principalmente pela tomografia computadorizada, fornecem resultados apenas sugestivos da doença. Na maioria dos casos, o estudo histológico de amostras biopsiadas não é possível de ser realizado pelo risco de sangramento relacionado à plaquetopenia severa que tais pacientes apresentam. Os sistemas automatizados na área da microbiologia, como as hemoculturas, raramente são positivos. A pesquisa de antígenos, especificamente a galactomanana (GM), representa atualmente o melhor biomarcador para o diagnóstico de AIP. O objetivo do presente estudo foi avaliar a reação de enzimaimunoensaio (ELISA) para a dosagem da GM em 200 pacientes consecutivos internados na Unidade de Transplante de Medula Óssea do Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná, todos submetidos ao TCTH, tanto na fase neutropênica pós-TCTH, como pacientes com complicações tardias. Foram realizadas coletas prospectivas de amostras de sangue e dosagem da GM com o emprego de reagentes comerciais (Bio-Rad, Platelia™ Aspergillus EIA) por ELISA sanduíche em microplaca. A detecção de GM apresentou sensibilidade de 100,0%, especificidade de 91,7%, valor preditivo positivo 36,8% e valor preditivo negativo 100,0%, para o diagnóstico e/ou monitoramento de AIP, quando associada ao diagnóstico de AIP provada, provável, possível ou negativa, ressaltando que nesta pesquisa não foi realizado o exame padrão-ouro para o diagnóstico de AIP, que seria a biopsia pulmonar. Apenas um paciente analisado apresentou diagnóstico confirmado de AIP, com a realização da biópsia pulmonar. Nos pacientes que foram a óbito, não foi possível a realização da necropsia na maioria dos casos. Apesar de não ter sido observada a relação da dosagem da GM acima do valor de corte estabelecido de 0,5 em, pelo menos, duas amostras consecutivas, com o diagnóstico de AIP, os pacientes tratados com voriconazol apresentaram melhora significativa do quadro clínico, sugerindo a disseminação deste fungo nos pacientes imunossuprimidos. / Abstract: The fungus Aspergillus, causative agent of invasive pulmonary aspergillosis (IPA) represents a serious problem for the medical field, particularly when it affects immunocompromised patients, such as patients with prolonged neutropenia and / or receptors of stem cell transplantation (HSCT), to be often associated with high morbidity and mortality. Despite the severity of AIP, often associated with systemic spread, diagnostic approaches are limited. Recent advances by diagnostic imaging, especially computed tomography, provide only suggestive results of the disease. In most cases, histological examination of biopsy samples is not possible to be performed by the risk of severe bleeding associated with thrombocytopenia in these patients. Automated systems in microbiology, such as blood cultures are rarely positive. The study of antigens, specifically the galactomannan (GM) is currently the best biomarker for the diagnosis of AIP. The aim of this study was to evaluate the reaction of ELISA for the measurement of GM in 200 consecutive patients admitted to the Unit of Bone Marrow Transplantation, Hospital de Clínicas, Federal University of Paraná, all HSCT, both during neutropenic after HSCT, such as patients with late complications. Prospective blood samples were collected and was measured GM with the use of commercial reagents (Bio - Rad Platelia ™ Aspergillus EIA) by sandwich ELISA microplates. Detection of GM had a sensitivity of 100%, specificity of 91.7%, positive predictive value of 36.8 % and negative predictive value of 100% for the diagnosis and / or monitoring of AIP, when associated with a diagnosis of AIP proven, probable, possible or negative, although this study was not included a gold standard test for the diagnosis of AIP, that is the biopsy pulmonar. Only one patient analyzed had a confirmed diagnosis of AIP, with lung biopsy. Among the patients who died, it was not possible to perform the autopsy in most cases. Despite not having been observed regarding the dosage of GM above the cutoff value of 0.5 in, at least, two consecutive samples, with the diagnosis of AIP, patients treated with voriconazole showed significant improvement of clinical symptoms, suggesting the spread of this fungus in immunosuppressed patients.
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Colonizacao intracavitaria pulmonar por aspergillus niger : analise de suas peculiaridadesSevero, Luiz Carlos January 1987 (has links)
Trezentos pacientes portadores de colonização intracavitária pulmonar (pelos exames soro lógico e/ou tecidual) foram investigados num período de 10 anos. Os casos foram classificados como: Aspergillus fumigatus (246 casos); Ao niger (21 casos); A. flavus (7 casos); Pseudallescheria boydii (1 caso); colonização fúngica não especificada (21 casos) e colonização actinomicética (4 casos). os grupos A. niger (çasos)e A. fumigatus (controles) foram comparados a respeito de variáveis clínicas e laboratoriais, por serem os mais freqUentes e pela pobreza da literatura sobre A. niger. Esta análise mostrou associações estatisticamente significativas com o A. niger para;sexo masculino (Razão de Chances = 3,28; p <0,05); infecção nosocomial, ocorrendo em hospitais de conservação precária (RC = 150,8; p< 0,001); tuberculose ativa (RC = 8,03; P <0,001); diabete mélito tipo 11 (RC = 10,67; p<O,OOl); e êxito letal (RC = 3,1; p<0,02). Por outro lado, cristais de oxalato de cálcio no escarro e oxalose sitêmica só ocorreram no grupo A.niger. As implicações etiológicas e diagnósticas destes achados sao discutidas, enfatizando o papel do ambiente externo, da oxalose, do acúmulo de ácidos e da tuberculose ativa na etiopatogenia do A. niger. / Three hundred patients with intracavitary pulmonary colonization (by serologic and/or tissue examinations) were analysed during a ten years period. The cases were classified as: Aspergillus fumigatus (246 cases); A. niger (21 cases); A. flavus (7cases); Pseudallescheria boydii (1 case); fungal colonization not especified (21 cases) and actinomycetic colonization (4 cases). Due to their frequency and the scarcity of literature about A. niger, the groups A. niger (cases) and A. fumigatus (controls) were compared with respect to clinical and laboratorial variables. This analysis showed statistically significant associations with A. niger for: male sex (Odds Ratio = 3,28; p< 0,05); nosocomial infection, which occurred.in hospitaIs in poor state of repair (aR = 150.8; p<O,ooU; active tuberculosis (aR = 8,03; p<O,OOl); type 11 diabete mellitus (aR = 10,67; p<O,ooU; and lethal outcome (aR = 3, 1; p < o, 02). On the other hand, calcium oxalate crystals in the sputum and sistemic oxalosis occured only in A. niger group. The etiologic and diagnostic implications of these findings are discussed, with emphasis on the role of the externa 1 environernent, oxalosis, acid acurnulation and ative tuberculosis in the etiopathogenesis of A. niger.
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Aspectos clínicos, epidemiológicos e etiológicos de 82 casos de rinossinusite fúngica no Rio Grande do Sul / Clinical, epidemiological and etiological aspects of 82 cases of fungal rhinosinusitis in Rio Grande do SulCardoso, Isabel Cristina Espíndola January 2016 (has links)
Descrição: A rinossinusite fúngica (RSF) é uma infecção oportunística, caracterizada pela inflamação da mucosa nasal e dos seios paranasais. É considerada um problema emergente na clínica médica diária, com prevalência aumentada nas últimas décadas, com etiologia nos mais diversos fungos ubíquos. Objetivos: Este trabalho objetivou analisar todos os casos de RSF pertencentes ao banco de dados do Laboratório de Micologia da Irmandade da Santa Casa de Misericórdia de Porto Alegre, no período de 28 anos (1986-2014), relacionando-os com as características clínicas e epidemiológicas. Materiais e métodos: O estudo foi retrospectivo observacional, resultando em uma série de 82 casos, confirmados histopatologicamente e pelos exames micológicos para identificação de fungos, comparados-os com os achados nas imagens radiológicas. Resultados: Foram identificados 54 casos de RSF por aspergilose, com predominância do agente etiológico Aspergillus fumigatus (14/54), e 27 casos de RSF por fungos diferentes do gênero Aspergillus, com superioridade de isolamento de agentes responsáveis por hialohifomicoses (12/27). Configurado, nestes achados, o ineditismo de três casos em nosso meio, com destaque para o primeiro caso de RSF e infecção humana por Trichoderma asperellum. Conclusões: Estes achados representam a maior casuística brasileira identificada, podendo contribuir para uma melhor compreensão epidemiológica, melhorando os critérios de suspeição médica, refletindo na efetividade dos tratamentos, principalmente, no diagnóstico dos casos de RSF invasiva, com altas taxas de mortalidade. / Description: The fungal rhinosinusitis (FRS) is an opportunistic infection characterized by inflammation of the nasal mucosa and sinuses. It is considered an emerging problem in daily medical practice, with prevalence increased in recent decades, with etiology in diverse ubiquitous fungi. Objectives: This study aimed to analyze all cases of RSF belonging to the Mycology Laboratory of the database of the Brotherhood of the Santa Casa of Misericordia Porto Alegre during the period of 28 years (1986-2014), relating them with the clinical and epidemiological characteristics. Methods: The study was observational retrospective, resulting in a series of 82 cases confirmed by histopathological and mycological examinations for identification of fungi, compared them with the findings on radiographs. Results: We identified 54 cases of aspergillosis by RSF, especially the etiologic agent Aspergillus fumigatus (14/54), and 27 cases of RSF different fungi Aspergillus, with insulation superiority of agents responsible for hyalohyphomycosis (12/27). Configured, these findings, the three cases unprecedented in our country, especially the first case of human infection with RSF and Trichoderma asperellum. Conclusions: These findings represent the largest identified Brazilian series and can contribute to a better epidemiological understanding, improving clinical suspicion criteria, reflecting the effectiveness of treatments, mainly in diagnosing cases of invasive RSF, with high mortality rates.
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Aplicações e limitações do método de detecção do antígeno galactomanana para o diagnóstico de aspergilose / Applications and limitations of a galactomannan detection method in the diagnostic of aspergillosisXavier, Melissa Orzechowski January 2008 (has links)
O Platelia® Aspergillus EIA é um teste de ELISA sanduíche para diagnóstico precoce de aspergilose em pacientes neutropênicos que se baseia na detecção de um antígeno (galactomanana) da parede celular de Aspergillus spp. O trabalho objetivou avaliar a eficácia deste teste em outros hospedeiros suscetíveis à aspergilose e ainda, avaliar a interferência de potenciais falso-positivos no Platelia® Aspergillus EIA, como outras micoses sistêmicas e um antimicrobiano produzido a partir de fungos (piperacilina-tazobactam). Quatro experimentos foram realizados para contemplar os objetivos propostos. Amostras de lavado broncoalveolar de 60 pacientes transplantados de pulmão provenientes da Santa-Casa Complexo Hospitalar de Porto Alegre foram colhidas durante um período de aproximadamente 2 anos e testadas para detecção de galactomanana. Os pacientes foram classificados em aspergilose comprovada, provável e possível, colonização ou exame de vigilância de acordo com critérios do EORTC. Utilizando os casos comprovados (5) e prováveis (6) como positivos, foi calculada a curva ROC que demonstrou valores de sensibilidade de 90,9% e especificidade de 90,6% em um ponto de corte de 1,5. A eficácia do Platelia® Aspergillus EIA foi avaliada também em pingüins em cativeiro. Soros de 35 animais foram incluídos no estudo, 9 com aspergilose, 3 com malária, 2 com caquexia e 21 saudáveis. Os soros foram testados por imunodifusão dupla e ELISA sanduíche, resultando em valores de sensibilidade de 33% e 100% e especificidade de 96% e 0, respectivamente. A reação cruzada de outras micoses sistêmicas no Platelia® Aspergillus EIA foi avaliada a partir de 120 amostras de soro de pacientes com paracoccidioidomicose, histoplasmose, criptococose por Cryptococcus neoformans e criptococose por C. gattii. Todas as micoses foram responsáveis por resultados falso-positivos no ELISA sanduíche, sendo de 50%, 67%, 66% e 36,6% a taxa de positividade de cada micose, respectivamente. Em adição, 5 lotes de piperacilina-tazobactam foram testados em concentração de uso clínico (45mg/ml) para avaliação de interferência no Platelia® Aspergillus EIA. Destas, apenas uma resultou em valores maiores do que o ponto de corte (0,5), sendo submetida a sucessivas diluições até mimetizar concentrações plasmáticas do fármaco alcançáveis no soro humano, as quais resultaram em valores menores que 0,5, sendo consideradas negativas. Concluindo, utilizando um ponto de corte maior do que indicado pelo fabricante para uso em neutropênicos, a eficácia do teste foi comprovada para utilização em amostras de lavado broncoalveolar de pacientes transplantados de pulmão. Por outro lado, no hospedeiro animal testado, pingüins, o teste apresentou especificidade nula, não possuindo aplicabilidade como ferramenta diagnóstica para aspergilose neste grupo. Quanto aos fatores de interferência no Platelia® Aspergillus EIA avaliados, a alta taxa de resultados falso-positivos referentes à infecção por outras micoses sistêmicas reflete na necessidade de interpretar um teste positivo dentro do contexto epidemiológico do paciente. Por outro lado, as piperacilinas-tazobactam disponíveis no mercado brasileiro não interferiram no resultado do Platelia® Aspergillus EIA. No entanto como a variabilidade de galactomanana existe entre lotes, ainda é aconselhável que as amostras para realização do ELISA sanduíche sejam colhidas antes da próxima administração do fármaco. / Platelia® Aspergillus EIA is a sandwich ELISA to the diagnostic of aspergillosis in neutropenic patients. It detects an antigen (galactomannan) from Aspergillus cell wall. Here it was evaluated the performance of this test in other susceptible hosts and the interference of potentials false-positives factors in Platelia® Aspergillus EIA. Systemic mycosis and an antimicrobial produced from molds (piperacillin-tazobactam) were tested. Four experiments were executed to study conduce. Bronchoalveolar samples from 60 lung transplant recipients from Santa Casa-Complexo Hospitalar de Porto Alegre were collected during almost two years and tested for galactomannan detection. Patients were classified in proven, probable or possible aspergillosis according to EORTC criteria, or in colonization or surveillance. Considering proven (5) and probable (6) as true positive cases, ROC curve was calculated and showed 90.9% of sensitivity and 90.6% of specificity with 1.5 as optimal cutoff. Platelia® Aspergillus EIA efficacy was also tested in captive penguins. Sera from 35 animals were included in the study, 9 with aspergillosis, 3 with malaria, 2 with cachexia and 21 healthy. Samples were tested by double immunodiffusion and sandwich ELISA, resulting in sensitivity values of 33% and 100% and specificity of 96% and 0, respectively. Cross reaction in Platelia® Aspergillus EIA was evaluated with 120 serum samples of patients with paracocciddioidomicosis, histoplasmosis, criptococosis due to Cryptococcus neoformans and criptococosis due to C. gattii. False-positive results were observed in all mycosis, with rates of 50%, 67%, 66% and 36,6%, respectively. In addition, 5 piperacillin-tazobactam batches were tested, in a concentration of clinical use (45mg/ml), to evaluate it interference in Platelia® Aspergillus EIA. Those, only one showed positive value, and had been retest after serial dilutions until plasmatic concentration, resulting in value lower than 0.5, negative. In conclusion, with a higher cut-off than the indicated from the manufacturer, the efficacy of bronchoalveolar samples tested in Platelia® Aspergillus EIA for the diagnostic of aspergillosis in lung transplant recipients was proved. Controversially, in penguins, the test specificity was zero, showing non applicability as a diagnostic method for aspergillosis in this group of risk. Interference in Platelia® Aspergillus EIA due to other systemic mycoses shows the necessity to interpret a positive result after the evaluation of patient epidemiologic context. Finally, piperacillin-tazobactam available in the Brazilian market did not correspond to false-positive results in Platelia® Aspergillus EIA. However, given that variability occurs between distinct batches, still is indicating to collect samples for galactomannan detection before the next administration of the drug.
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Avaliação do teste de imunodifusão dupla em gel de agar e do ensaio imunoenzimático - ELISA no diagnóstico e seguimento de pacientes com bola fúngica aspergilar /Azevedo, Priscila Zacarias de. January 2015 (has links)
Orientador: Rinaldo Poncio Mendes / Banca: Silvio Alencar Marques / Banca: Daniela Moris de Oliveira / Resumo: Não disponível / Abstract: Not available / Mestre
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