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Virus da lingua azul : estudo do antigeno viral, produzido a partir do soro tipo 4, para fins de diagnostico sorologico

Arita, Gonçala Maria Martins 17 December 1990 (has links)
Orientador: Antonio Fernandes Pestana de Castro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:19:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arita_GoncalaMariaMartins_M.pdf: 9310353 bytes, checksum: f2ade0de335e487237939e6bbb772414 (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: No presente estudo o virus da lingua azul-sorotipo 4 (VLA-S4) adaptado às linhagens celulares BHK-21, clone 13 e VERO apresentou efeito citopático característico entre 72 e 96h pos-inoculação, com títulos que variaram entre 10 'POT. 3.6¿ a 10 'POT. 5.6¿ DICC 50%/ml. A partir do sedimento das células infectadas as partículas virais foram purificadas em ultracentrifugações em gradiente de CsCI, e apresentavam densidade de cerca de 1,38 g/cm 'POT. 3¿. Ao microscópio eletrônico foram visualizadas partículas com forma aproximadamente esférica e diâmetro médio de 54,99 '+ ou ¿' 0,12 nm, correspondentes ao virion e de 49,68 '+ ou ¿' 0,08 nm, ao nucleocapsideo. O perfil eletroforético do ARN do VLA-S4 mostrou a presença de dez segmentos com valores de PM 2,92 x 10 'POT. 6¿ d (segmento 1) e 0,49 X 10 'POT. 6¿ d (segmento 10) e o das proteínas, as sete proteínas estruturais -VP1 a VP7- com PM variando de 103,69 x 10 'POT. 3¿ d (VP1) a 30,24 x 10 'POT. 3¿ d ( VP7 ) . O antígeno solúvel (AS), produzido a partir do sobrenadante de culturas de células VERO infectadas pelo VLA e concentrado por ultrafiltração sequencial em membranas com CNL de 10.000 e 25.000, apresentou em teste de identidade com os antígenos do NADC e comercial (COM), uma única linha de precipitação, nítida e confluente. Na análise do perfil eletroforético dos três antígenos observou-se um padrão muito semelhante, o que sugere que as três preparações antigênicas contém proteínas semelhantes. A avaliação semi-quantitativa deste antígeno em imunodifusão radial simples apresentou uma potência relativa 127 ligeiramente superior à do NADC e igual à do COM, e na titulação em bloco por imunodifusão dupla. titulo de uso 1/2, evidenciando-se que o AS poderia ser utilizado em provas rotineiras de 1DGA. para o diagnóstico soro lógico da LA. O componente protéico do AS, principal responsável pela linha de precipitação em 1DGA, apresentou PM 60,00 x 10 'POT. 3' d, sugerindo tratar-se, provavelmente, da proteína NS1 (P5a) ou da VP5. A imunofluorescência indireta (IF1), executada em células VERO adicionadas de soros e conjugados anti-1gG de bovinos ou de ovinos, apresentou fluorescência intracitoplasmática, com aspecto granular, e em algumas células foi observada apenas na membrana celular. Foram testadas 190 amostras de soros sanguíneos de bovinos e 72 de ovinos, pelas técnicas de IDGA e 1FI. Em IDGA obteve-se um total de 134 amostras positivas e 128 amostras negativas, enquanto que em 1FI observou-se 137 amostras positivas e 125 negativas. A análise estatística destes dados registrou uma alta concordância para os soros de bovinos e para os soros de ovinos, entre as duas técnicas. Em 1FI encontrou-se alta sensibilidade, especificidade e valores preditivos dos resultados positivos e dos resultados negativos, em comparação com a IDGA. o que nos permite afirmar que as duas técnicas podem ser utilizadas na rotina laboratorial como instrumento para uma avaliação real da situação epidemiológica da LA no nosso meio. A 1FI oferece a vantagem adicional da possibilidade de ser utilizada para detecção de antígenos virais em cultivos celulares inoculados pelo VLA / Abstract: In the present study a strain of Bluetongue virus, serotype 4 (BTV-S4), when adapted to BHK 21, clone 13 and to VERO cell lines has shown a distinctive cytophatic effect between 72 h and 96 h after inoculation, with titres ranging from 10 'POT. 3.6¿ to 10 'POT. 3.6¿ DICT 50%/ml. After a high speed centrifugation of the packed infected cells the viral particles were purified by ultracentrifugation using CsCIgradient, showing density around 1.38 g/cm 'POT. 3¿. In the electron microscope, two types of spherical particles were observed one with a mean diameter of 54.99 ' + ou ¿' 0,12 run corresponding to the virion and the other of 49.68 ' + ou ¿' 0,08 nm, corresponding to the nucleocapsid. The electrophoretic profiles of the RNAextracted from BTV-S4 showed ten segments with MW between 2.96 x 10 'POT. 6¿ d (segment 1) to 0.49 X 10 'POT. 6¿ d (aegment 10). With regard to the atructural proteina, the MW a180 varied from 103.69 X 10 'POT. 3¿ d (VP1) to 30.24 x 10 'POT. 3¿ d (VP7). The aoluble antigen (SA) produced from culture supernatanta of BTV-infected VERO cells and concentrated by aequential ultrafiltration with membranes with cut-off values 10.000 and 25.000, when compared with the antigens produced by by the agar gel the NADC and commercially, showed total identity immunodiffusion (AGID) test forming a nitid and confluent precipitation line without any spur. The electrophoretic protein profile of the 3 antigens was quite ainÜlar suggesting an identical antigen preparation. A semiquantitative evaluation of thia antigen by aingle radial immune diffusion test showed a relative potency slightly higher than the NADC and equal to the commercial one. Furthermore checking block titration revealed that routine dilution of this antigen to be used in AG1D for the serological diagnosis of BT should be 1/2. The proteie eomponent of the AS. main responsible for the IDGA reaction, showed a MW around 60.00 x 10 'POT. 3¿ d suggesting that this might be, probably, the NS1 (P5a) protein or the VP5. The indireet immunofluorescent technique (IIFT) carried out with BTVinfected VERO cells using bovine and ovine sera and anti-1gG conjugates showed a granular intracytoplasmatie fluorescenee and in some cells this fluorescence was observed only on cellular membranes. Sera from 190 bovine and 72 ovine were examined by AG1D and 11FT. In the AG1D 134 samples were positive for BTV antibodies and 128 were negative, whereas in the 11FT 137 sera were positive for BTV antibodies and 125 were negative. Statistical analysis of these data showed close agreement between the two techniques, regardless of the kind of sera examined. 1n the 11FT, high sensitivity, specificity and predictable values for positive and negative results were found compared with the 1DGA, which means, that both techniques can routinely be used in epidemiologic evaluation studies of BT in our country. The 11FT offers an additional advantage as it may be used to detect viral antigens in BT-infected cell lines / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Ciências Biológicas
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Optimización del uso de agar con cetiltrimetilamonio bromuro y azul de metileno para la selección de cepas de Pseudomonas spp. productoras de ramnolípidos

Tabuchi Yagui, Takeshi Ricardo January 2014 (has links)
El uso de biosurfactantes en biorremediación facilita y acelera la degradación microbiana de hidrocarburos. El método del agar CTAB/MB creado por Siegmund y Wagner para el screening de cepas productoras de ramnolípidos (RL), ha sido ampliamente utilizado sin sufrir mejoras significativas en más de 20 años. Con el fin de optimizar la técnica como método cuantitativo, se hicieron placas con agar CTAB/MB y se probaron diferentes variables, tales como tiempo de incubación, refrigeración, concentración de CTAB, presencia de azul de metileno, diámetro de los pozos y volumen del inóculo. Adicionalmente, se desarrolló un nuevo método para detectar el RL de los halos mediante precipitación con HCl, lo cual permite la observación de un nuevo patrón de halos más fáciles de observar y medir. Este trabajo reafirma que este método no es del todo apropiado para un análisis cuantitativo fino, debido a la dificultad de correlacionar de forma precisa la concentración de RL y el área de los halos formados. La difusión del RL no parece tener un comportamiento simple y existen numerosos factores que afectan la velocidad de migración del RL. A pesar de todo, aún es muy útil para una pre-selección semi-cuantitativa de cepas productoras de RL; si bien no es posible determinar exactamente cuánto RL se ha producido, aún es posible diferenciar cepas con productividad significativamente diferentes bajo condiciones similares. La aplicación de este método y su modificación permitió reducir el número candidatos de 2517 cepas potenciales a tan solo 3 cepas superproductoras (0.12%). Palabras clave: Bromuro de Cetiltrimetilamonio (CTAB), azul de metileno, Pseudomonas, screening, ramnolípidos, biosurfactantes / Tesis
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Caracterização de agregados basálticos através da adsorção de azul de metileno / not available

Rodgher, Sandra Fabiana 24 July 1996 (has links)
Este trabalho apresenta uma avaliação do ensaio de adsorção de azul de metileno pelo método da mancha para qualificar agregados basálticos. Analisa-se, também, outros ensaios, tais como ensaios analíticos, ensaios físico-mecânicos, ensaios de adesividade e ensaios de alteração, abordando aspectos relacionados à validade e representatividade dos resultados destes na caracterização de agregados basálticos. Foram estudadas nove amostras de agregados basálticos (quatro sãs e cinco alteradas), originárias de afloramentos existentes em três municípios do interior do estado de São Paulo. Conclui-se que o ensaio ele adsorção ele azul ele metileno pelo método da mancha é promissor para a detecção da alteração de agregados basálticos e que alguns dos ensaios rotineiros não são capazes ele distinguir materiais sãos dos alterados, fatos estes observados mediante um estudo comparativo entre o ensaio de adsorção de azul de metileno pelo método da mancha e os outros ensaios. / An estimative of methylene blue adsorption analysis is used to quality basaltic aggregates. It is also analysed others tests like: analytic, physical-mechanics, adhesiveness and alteration tests showing aspects related to the validity and representativeness of the results of these tests for the basaltic aggregation characterization. In this work it is studied nine samples of basaltic aggregations (four considered good and five changed) extracted from stone-quarries located in three different cities in the state of São Paulo. It is conclued that the methylene blue adsorption test can be promising in detecting the alterability of basaltic samples and also that some routine tests are not able to distinguish good materials from the changed ones. These facts were observed from a comparative study among methylene blue test and other tests.
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Aspectos da biologia reprodutiva da arara-azul Anodorhynchus hyacinthinus (Latham, 1790) no mosaico Carajás-PA /

Silva, Grace Ferreira da. January 2015 (has links)
Orientador: Reginaldo José Donatelli / Banca: Flávia Torres Presti / Banca: Neiva Maria Robaldo Guedes / Resumo: A arara-azul (Anodorhynchus hyacinthinus) é a maior arara do mundo. Esta espécie está distribuída em três regiões do Brasil com populações aparentemente isoladas. Estudos realizados a longo prazo, relacionados a biologia reprodutiva e levantamento dos itens alimentares das araras são necessários, uma vez que muitas das perguntas importantes sobre a ecologia de psitacídeos envolvem estudos de seu habitat e comportamento. Assim, o objetivo desta pesquisa foi coletar informações sobre os aspectos da biologia reprodutiva das araras-azuis na região do mosaico Carajás e seu entorno, bem como observar as espécies vegetais que utilizam para se alimentar e assim, ampliar o conhecimento sobre a espécie em toda a sua área de ocorrência e auxiliar os planos de manejo para a preservação da mesma. Durante quatro anos não consecutivos, itens alimentares foram coletados, cavidades arbóreas foram localizadas e, quando ativas com ovos e/ou filhotes, as árvores foram cadastradas como ninho. Foram obtidos um total de 67 registros de cavidades, onde 24 estavam ativos com ovos e filhotes. A maioria das cavidades-ninho foram registradas em Sterculia sp. (87%) as demais, nas espécies vegetais: Euxylophora paraensis, Bertholletia excelsa, Cariniana sp., Parkia sp., Ceiba pentandra, Bagassa guianensis, Parkia aff. Gigantocarpa, Helicostylis tomenosa, Schizolobium sp. Durante o período reprodutivo, foi observado que as araras-azuis ocupam cavidades disponíveis sem indícios de preferencia pela espécie vegetal. Entretanto, a maioria dos ninhos foram encontrados em Sterculia sp. A postura dos ovos seguiu conforme o usual já verificado em outras populações desta espécie de psitacídeo. Restos de frutos de palmeiras de inajá (Maximiliana maripa), tucum (Astrocaryum sp.), gueroba (Syagrus oleracea), macaúba (Acrocomia aculeata) e bacuri (Scheelea phalerata) foram coletados dentro dos ninhos, no chão abaixo do ninho e próximo as palmeiras,... / Abstract: The Hyacinth macaw (Anodorhynchus hyacinthinus) is the biggest macaw in the world. This species is distributed in three regions of Brazil with apparently isolated populations. It is necessary that long-term studies about the reproductive biology and diet of macaws are made, since many of the important questions about the parrot ecology involve studies of their habitat and behavior. The objective of this research was to collect information about the aspects of the reproductive biology of Hyacinth macaws in the Carajás Mosaic region and its surroundings, as well as observing the food items they consume and thus increase knowledge about the species throughout its hit area of occurrence to assist the appropriate conservancy of the macaw. For four non-consecutive years, tree cavities were located and when active with eggs and / or chicks, the trees were registered as nest. We made observations and collect food items of the species. We obtained a total of 67 records cavities between the years 2007, 2008, 2013 and 2014. Twenty-four nests were active with eggs and chicks. We obtained a total of 67 records cavities where 24 were active with eggs and chicks. Most nest cavities were recorded in Sterculia sp. (87%) and the others in the plant species: Euxylophora paraensis, Bertholletia excelsa, Cariniana sp., Parkia sp., Ceiba pentandra, Bagassa guianensis, Parkia aff. Gigantocarpa, Helicostylis tomenosa, Schizolobium sp. During the breeding period, we observed that the hyacinth macaws occupy available hollows, without preference for the plant species. However, most of the nests were found in Sterculia sp. The laying of eggs followed as usual already observed in other populations of this psittacid species. Fruit remains of inajá palms (Maximiliana maripa), tucum (Astrocaryum sp.), Gueroba (Syagrus oleracea), macaúba (Acrocomia aculeata) and bacuri (Scheelea phalerata) were collected inside the nests, on the ground below the nest and next to the ... / Mestre
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Caracterização de agregados basálticos através da adsorção de azul de metileno / not available

Sandra Fabiana Rodgher 24 July 1996 (has links)
Este trabalho apresenta uma avaliação do ensaio de adsorção de azul de metileno pelo método da mancha para qualificar agregados basálticos. Analisa-se, também, outros ensaios, tais como ensaios analíticos, ensaios físico-mecânicos, ensaios de adesividade e ensaios de alteração, abordando aspectos relacionados à validade e representatividade dos resultados destes na caracterização de agregados basálticos. Foram estudadas nove amostras de agregados basálticos (quatro sãs e cinco alteradas), originárias de afloramentos existentes em três municípios do interior do estado de São Paulo. Conclui-se que o ensaio ele adsorção ele azul ele metileno pelo método da mancha é promissor para a detecção da alteração de agregados basálticos e que alguns dos ensaios rotineiros não são capazes ele distinguir materiais sãos dos alterados, fatos estes observados mediante um estudo comparativo entre o ensaio de adsorção de azul de metileno pelo método da mancha e os outros ensaios. / An estimative of methylene blue adsorption analysis is used to quality basaltic aggregates. It is also analysed others tests like: analytic, physical-mechanics, adhesiveness and alteration tests showing aspects related to the validity and representativeness of the results of these tests for the basaltic aggregation characterization. In this work it is studied nine samples of basaltic aggregations (four considered good and five changed) extracted from stone-quarries located in three different cities in the state of São Paulo. It is conclued that the methylene blue adsorption test can be promising in detecting the alterability of basaltic samples and also that some routine tests are not able to distinguish good materials from the changed ones. These facts were observed from a comparative study among methylene blue test and other tests.
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Valoración de Pesquera Azul Profundo

Coloma V., Cristián, Santa Cruz, Francisco 01 1900 (has links)
Tesis para optar al grado de Magíster en Finanzas / Coloma V., Cristián [Parte I Mediante método de múltiplos], Santa Cruz, Francisco [Parte II Mediante método de flujo de caja descontado] / El desafió por conocer el valor económico de una empresa en el mercado es una tarea que necesariamente se debe realizar, ya que permite a los accionistas conocer cuál es el valor actual de sus inversiones, analizar cuál es la posición que la empresa se encuentra dentro del sector industrial donde opera e identificar los parámetros creadores de valor del negocio para optimizar su utilidad. Esto nos da una visión global del estado de salud financiera de la empresa, y si ésta aporta valor o no a los accionistas. El proceso de valorización comienza principalmente con el estudio del comportamiento financiero histórico de la empresa, para analizar cuáles son las principales cuentas que manejan y como estas se han comportado en los últimos años. Entender claramente cuál es el negocio donde está inserto, que reglas o normas la rigen, cuáles son los principales drivers (impulsores de valor) del negocio, cuál es su riesgo sistemático, potencial de crecimiento y flujos de caja operacional que la empresa es capaz de generar en un plazo de tiempo determinado. Para esto último, se deben establecer supuestos razonables en cada una de las cuentas que se deben proyectar así como la determinación de la tasa de descuento, la cual concentra información de riesgo, deuda y estructura de capital, que nos permitirá estimar un valor de la empresa ajustado a la calidad de los datos considerados. El objetivo de esta tesis es valorizar una sociedad anónima cerrada llamada Pesquera Azul Profundo mediante el método de múltiplos. Considerando múltiplos benchmark del 2015 el resultado de la valorización por múltiplos seria de MUS$49,5
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Efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana na descontaminação de alvéolos com lesão periapical imediatamente pós-exodontia / Effects of antimicrobial photodynamic therapy on the decontamination of alveoli with periapical lesion immediately post-exodontia

Vasconcelos, Ximena Trévia Prado de 26 February 2014 (has links)
VASCONCELOS, X. T. P. Efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana na descontaminação de alvéolos com lesão periapical imediatamente pós-exodontia. 2014. 66 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-23T13:44:16Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_xtpvasconcelos.pdf: 1121415 bytes, checksum: e79052a0497f5cd093e5b6397372dacb (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-23T13:44:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_xtpvasconcelos.pdf: 1121415 bytes, checksum: e79052a0497f5cd093e5b6397372dacb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-23T13:44:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_xtpvasconcelos.pdf: 1121415 bytes, checksum: e79052a0497f5cd093e5b6397372dacb (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / Advances in dentistry, with special attention to the use of immediate implants, have aroused interest in reviewing the aspects related to the subject, such as success and survival rate, treatment protocols for contaminated sites and microbiota found. The present work contains 2 chapters. In the first chapter a systematic review of scientific articles in the English language was performed using the terms immediate implant placement, fresh socket, dental implants, dated between 2003 and 2013, in the databases Bireme, Medline and The Cochrane Library. A total of 131 titles were found, of which 23 abstracts were selected and 6 articles fulfilled the inclusion criteria, which were: prospective randomized clinical trials, with a minimum sampling of 10 immediate implants on contaminated alveoli and a minimum of 12 months of follow-up. It was verified that the success rate of the immediate implants in contaminated sites is around 90 to 100% and the clinical protocol includes the debridement of the alveolus after exodontia and systemic antibiotic therapy pre and postoperative. The second chapter corresponds to a controlled clinical study, in which the effect of antimicrobial photodynamic therapy (TFA) mediated by 0.005% (AM) methylene blue associated with 90-second irradiation with low power laser, 40 mW, of 660 Nm, in the decontamination of periapical lesion dental alveoli after exodontia. We selected 16 patients with indication of extraction of 2 uniradicular elements. After the exodontia, blood samples were collected by inserting sterile absorbent paper cones into each well, which were stored in tubes containing Reduced Transport Fluid. One of the wells was filled with the AM solution and, after 5 minutes, irradiated (P + L +). The other well was filled with AM solution for 5 minutes without irradiation (P + L-). After the intervention, new blood collection was performed. Samples were diluted and seeded in triplicate in Petri dishes containing Blood Agar and enriched BHI. The plates with Blood Agar were incubated in aerobiose for 2 days and those with Brain Heart Infusion (BHI) in anaerobic for 7 days at 37 ° C. The colony-forming units were counted and the data were converted into base 10 logarithms, which were submitted to paired Student's t-test (α = 0.05). The results obtained showed a reduction in the CFU / mL count for aerobic (2.5 log) and anaerobic (1.5 log) bacteria in the P + L + groups, but with no statistically significant difference in relation to the P + L- ( P> 0.05). TFA showed a tendency to reduce contamination in alveoli with periapical lesion, just as AM showed to have an antimicrobial potential in these lesions, independently of laser irradiation. More studies are required with different concentrations of AM and different potencies and times of irradiation of the light source, in order to obtain greater effectiveness for a decontamination protocol alternative to the need for antibiotic therapy reported in the literature. / Os avanços da Odontologia, com especial atenção ao uso dos implantes imediatos, despertou o interesse em revisar os aspectos relacionados ao tema, como taxa de sucesso e sobrevivência, protocolos de tratamento para sítios contaminados e microbiota encontrada. O presente trabalho contém 2 capítulos. No primeiro capítulo foi realizada uma revisão sistemática de artigos científicos na língua inglesa, utilizando os termos immediate implant placement, fresh socket, dental implants, datados entre 2003 e 2013, nas bases de dados Bireme, Medline e The Cochrane Library. Foram encontrados 131 títulos, dos quais 23 resumos foram selecionados e 6 artigos preencheram os critérios de inclusão, que foram: estudos clínicos randomizados prospectivos, com amostragem mínima de 10 implantes imediatos sobre alvéolos contaminados e mínimo de 12 meses de acompanhamento. Foi verificado que a taxa de sucesso dos implantes imediatos em sítios contaminados fica em torno de 90 a 100% e o protocolo clínico inclui o debridamento do alvéolo após exodontia e antibioticoterapia sistêmica pré e pós operatória. O segundo capítulo corresponde a um estudo clínico controlado, em que foi avaliado o efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFA) mediada por azul de metileno 0,005% (AM) associado à irradiação por 90 segundos com laser de baixa potência, 40 mW, de 660 nm, na descontaminação de alvéolos dentários com lesão periapical, após exodontia. Foram selecionados 16 pacientes com indicação de extração de 2 elementos unirradiculares. Após a exodontia, foram coletadas amostras de sangue, inserindo-se cones de papel absorvente estéreis em cada alvéolo, que foram armazenados em tubos contendo Reduced Transport Fluid. Um dos alvéolos foi preenchido com a solução AM e, após 5 minutos, irradiado (P+L+). O outro alvéolo foi preenchido com solução AM por 5 minutos, sem irradiação (P+L-). Após a intervenção, nova coleta de sangue foi realizada. As amostras foram diluídas e semeadas em triplicata em placas de Petri contendo Ágar Sangue e BHI enriquecido. As placas com Ágar Sangue foram incubadas em aerobiose por 2 dias e as com Brain Heart Infusion (BHI) em anaerobiose por 7 dias, a 37°C. Realizou-se a contagem das unidades formadoras de colônias e a conversão dos dados em logaritmos de base 10, que foram submetidos ao teste t de Student pareado (α=0,05). Os resultados obtidos mostraram, nos grupos P+L+, redução na contagem de UFC/mL para bactérias aeróbias (2,5 log) e anaeróbias (1,5 log), porém sem diferença estatisticamente significante em relação aos grupos P+L- (p>0,05). A TFA mostrou uma tendência em reduzir a contaminação em alvéolos com lesão periapical, assim como o AM demonstrou ter um potencial antimicrobiano nestas lesões, independentemente da irradiação com laser. Mais estudos são necessários com diferentes concentrações de AM e diferentes potências e tempos de irradiação da fonte de luz, a fim de se obter maior eficácia para um protocolo de descontaminação alternativo à necessidade de antibioticoterapia relatada na literatura.
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Melaninas quimicamente modificadas

Costa, Thiago Guimarães January 2015 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-01T04:09:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 333866.pdf: 5692100 bytes, checksum: efff527b4aa730fbc990bdab2a4fd67a (MD5) Previous issue date: 2015 / Melaninas são bio-oligômeros de ocorrência natural que podem ser encontradas na pele, no cabelo, nos olhos, no cérebro e também em alguns animais marinhos. Entretanto, a extração das melaninas naturais nem sempre é viável devido ao custo elevado dos reagentes utilizados e normalmente obtém-se um baixo rendimento no processo. Neste contexto, destacam-se as melaninas sintéticas, que podem ser produzidas em laboratório com um custo mais baixo e considerável rendimento.Um dos precursores das melaninas sintéticas é o L-3,4-dihidroxifenilalanina conhecido como L-DOPA que livre em condições reacionais produz a eumelanina, responsável pela coloração escura e em presença de cisteína produz a feomelanina, que dá origem a coloração mais clara, esses precursores se agregam entre 3 a 9 unidades indol para formar a estrutura oligomérica da melanina.Neste contexto, este trabalho tem por objetivo descrever a preparação, purificação e caracterização de melaninas quimicamente modificadas pelos aminoácidos serina, treonina e cisteína (feomelaninas), a fim de se obter os compostos ser-DOPA, thr-DOPA e cys-DOPA respectivamente e seus complexos de Cu(II) e Zn(II), bem como descrever as interações com o corante catiônico azul de metileno avaliando suas toxicidades e atividades antioxidantes.A caracterização espectroscópica das melaninas modificadas mostrou a presença de três grupamentos majoritários: ácido carboxílico, quinona-imina e catecol. Estudos em solução por titulação potenciométrica mostraram a presença do grupamento tiol na melanina cys-DOPA, e todas as melaninas apresentaram baixa toxicidade em células NIH-3T3 com uma relevante atividade antioxidante tendo destaque para a ser-DOPA que apresentou um EC50 para o ensaio de DPPH de 1,02 µg mL-1, valor esse próximo dos padrões utilizados.Os estudos de interação com os íons Cu(II) e Zn(II) revelaram que a formação dos complexos é altamente dependente do pH, em que na faixa ácida para a ser-DOPA e thr-DOPA ocorre a formação das espécies [M(QI)+] e [M(Ac)+], com o aumento do pH detectou-se a espécie [M(Cat)] e [M(QI)2], e em valores de pH acima de 8 as espécies [M(Cat)22-] e [M(QI)(Cat)-] foram detectadas. Já com a melanina cys-DOPA ocorre a formação das espécies [M(Tiol)+], [M(QI)+] e [M(QI)(Tiol)], com o aumento do pH foi evidenciado as espécies [M(Cat)] e [M(Cat)(Tiol)-], sendo esta última não detectada para Cu(II), e em valores de pH acima de 7 as espécies [M(QI)2] e [M(Cat)22-] foram observadas.Todos os complexos obtidos apresentaram uma baixa toxicidade em células HUVEC, e também uma relevante atividade antioxidante com destaque para o complexo cys-DOPA-Zn(II) com valor de 25,24 µg mL-1 para o ensaio de DPPH.As interações com o corante azul de metileno foram caracterizadas por métodos espectroscópicos, e os resultados obtidos revelaram que a adsorção do azul de metileno pelas melaninas é dependente do pH da solução. A maior adsorção ocorreu em pH 7 e 6 para a ser-DOPA e cys-DOPA respectivamente e a melanina thr-DOPA apresentou baixos valores de adsorção em toda faixa de pH. O modelo cinético que apresentou a melhor correlação entre os dados experimentais foi o de pseudo-segunda ordem para todos os sistemas estudados e os dados de equilíbrio de adsorção foram melhor correlacionados pela isoterma de Langmuir em sua forma linear apresentando qm de 162,07 e 109,89 mg g-1 para as melaninas cys-DOPA e ser-DOPA respectivamente.<br> / Abstract : Melanins are bio-oligomers occurring naturaly. They can be found in skin, hair, eyes, brain, and also in some marine animals, however, the extraction of natural melanins is not always feasible due to the high cost of the reagents used and the low yield in the process. In this context, synthetic melanins can be a praticle solution, which can be produced in the laboratory with a low cost and a high considerable yield.One of the synthetic melanins precursor is L-3,4-dihydroxyphenylalanine, known as L-DOPA that when free in reaction conditions produces eumelanin, responsible for the dark coloring, and in the presence of cysteine produces pheomelanin, which leads to a lighter color pigment, these products are aggregated in 3 to 9 indol units to form the oligomeric structure of melanin.In this context, this work aims to describe the preparation, purification and characterization of melanins chemically modified by the amino acids serine, threonine and cysteine (pheomelanins) resulting in compounds ser-DOPA, thr-DOPA and cys-DOPA respectively, and their complexes with Cu(II) and Zn(II) metal ions, evaluating their antioxidant activities and toxicities; as well as interactions with the cationic dye methylene blue.The spectroscopic characterization of the modified melanins showed the presence of three major groups: carboxylic acid, quinone-imine and catechol, and studies in solution by potentiometric titration showed the presence of thiol grouping cys-DOPA melanin, all melanins presented low toxicity in NIH-3T3 cells and a significant antioxidant activity with emphasis on ser-DOPA which showed an EC50 = 1.02 µg mL-1 for the DPPH assay, a value close to the standards used in this work.Interaction studies with Cu(II) and Zn(II) ions proved that the formation of complexes is highly pH dependent, where in the acidic range for ser-DOPA and thr-DOPA the species [M(QI)+] and [M(Ac)+] were formed, the increase of the pH leads to the formation of [M(Cat)] and [M(QI)2] species and pH above 8 the [M(Cat)22-] and [M(QI)(Cat)-] species were detected. On the other hand, in the cys-DOPA system at acidic pH the species [M(Tiol)+], [M(QI)+] and [M(QI)(Tiol)] were formed, with the increase of the pH the [M(Cat)] and [M(Cat)(Tiol)-] species were evidenced, the latter is undetected for Cu(II) system, and for pH above 7 the species [M(QI)2] e [M(Cat)22-] were observerd.All complexes showed low toxicity in HUVEC cells, and also showed a significant antioxidant activity, highlighting for the complex cys-DOPA-Zn(II) with a value of 25.24 µg mL-1 for the DPPH assay.The adsorption of methylene blue by melanins was characterized by spectroscopic methods, and the results showed that adsorption of methylene blue is dependent on the pH solution. The higher adsorption occurred in pH 7 and 6 for the ser-DOPA and cys-DOPA melanin respectively. Thr-DOPA showed low adsorption values independently of the pH. The kinetic model that showed the best correlation omong the experimental data was the pseudo-second order for all systems studied and the adsorption equilibrium data were best correlated with the linear Langmuir isotherm presenting qm values 162.07 and 109.89 mg g-1 for cys-DOPA melanin ser-DOPA respectively.
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Fotossensibilização de biofilmes formados em resinas para base de prótese – in vitro / Photosensitization of in vitro biofilms formed on denture base resin

Gomes, Carlos Eduardo de Albuquerque 16 March 2012 (has links)
GOMES, C. E. A. Fotossensibilização de biofilmes formados em resinas para base de prótese – in vitro. 2012. 45 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-05-16T12:46:08Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_ceagomes.pdf: 266670 bytes, checksum: c5aa068325778aa088920e4f9a4b6845 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-05-16T12:46:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_ceagomes.pdf: 266670 bytes, checksum: c5aa068325778aa088920e4f9a4b6845 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-16T12:46:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_ceagomes.pdf: 266670 bytes, checksum: c5aa068325778aa088920e4f9a4b6845 (MD5) Previous issue date: 2012-03-16 / This study evaluated the effect of PDT (Photodynamic Therapy) against Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans biofilms formed on the surface of acrylic resin specimens. Methods: The PDT consisted in the application of 0.05% methylene blue on the specimens, associated to irradiation with a light-emitting diode (LED) of 630nm and 150mW. The energy doses provided by the LED were set to 10 (a) and 30 (b) J/cm2. For each microorganism, the biofilm formation occurred during immersion of the specimens in a culture medium broth containing 106 colony-forming units (CFU)/ml for 48 hours at 37°C. But, at first, the specimens were sterilized in ethylene oxide gas and randomly divided into groups (n=5): experimental (PDT a,b), which were contaminated, stained and irradiated with the different doses of energy; control 1, only contaminated; control 2, contaminated, stained and not irradiated; control 3 (a,b), contaminated, not stained and irradiated; control 4, not contaminated, not stained and not irradiated. Afterward, the specimens were submitted to contact with culture medium agar for 10 minutes, in separated Petri plates, which were incubated for 48 hours at 37°C. The number of CFU was obtained, and the data were expressed according to scores (1=0; 2=1-10; 3=11-100; 4=101-1000; 5>1000) and analyzed by Kruskall Wallis and Dunn tests (α=0.05). Results: S. mutans was only sensitized by the dye; P. aeruginosa and C. albicans were also sensitized by the dye, but showed a CFU reduction to score 2 by PDTb; S. aureus and E. coli, presented an initial score of 3 and achieved a CFU reduction to score 2 by PDTb (p<0.05). Conclusion: PDT was effective in disinfection of acrylic resin specimens and the effectiveness varied according to the dose of energy of the LEDs. / A busca por métodos alternativos e simples de esterilização de dispositivos acrílicos, como próteses imediatas e guias cirúrgicas para implantes é de interesse clínico. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da terapia fotodinâmica (TFD) sobre S.mutans, S. aureus, E.coli, P. aeruginosa e C. albicans inoculados em corpos-de-prova de resina acrílica termopolimerizável previamente esterilizados. O fotossensibilizador utilizado foi o azul de metileno a 0,05%, associado a um diodo emissor de luz (LED) de 630nm. Para cada microorganismo, os corpos-de-prova foram divididos em grupos (n=5): controle positivo - não inoculado, não corado e não irradiado; controle negativo – inoculado, não corado e não irradiado; controle do fotossensibilizador – inoculado, corado e não irradiado; controle do Led (a e b) – inoculado, não corado e irradiado (10 e 30J/cm2); experimentais TFDa e TFDb, que foram inoculados, corados e irradiados a 10 e 30 J/cm2, respectivamente. Após os tratamentos, os espécimes foram submetidos à cultura de contato por 10 minutos em placas de Petri com BHI Ágar para bactérias e Àgar Sabouraud para leveduras, que depois foram incubadas por 48 horas a 37°C. O número de unidades formadoras de colônias (UFC) foi obtido, sendo os dados transformados em escores e submetidos aos testes estatísticos de Kruskal Wallis e Dunn (p=0,05). O S. mutans se mostrou sensível ao corante azul de metileno, apresentando redução em sua contagem nos grupos apenas corados. Para os espécimes inoculados com S. aureus, o grupo TFDb apresentou redução nos índices de crescimento bacteriano. Esta bactéria não foi sensível ao corante, nem à ação isolada da luz. O grupo TFDb da E. Coli apresentou redução na contagem de UFC. Para os espécimes inoculados com P.aeruginosa, a ação do azul de metileno isolada causou redução dos microorganismos, já a irradiação isolada não fez efeito, enquanto que a ação conjunta da terapia foi bastante eficaz. Para a C. albicans, houve sensibilidade apenas ao azul de metileno e à associação do azul de metileno com o LED vermelho a 30 J/cm2. Concluiu-se que a terapia fotodinâmica utilizando maiores dosagens de energia do LED, foi eficaz na diminuição dos microrganismos inoculados na superfície de resina acrílica.
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Aspectos da biologia reprodutiva da arara-azul Anodorhynchus hyacinthinus (Latham, 1790) no mosaico Carajás-PA

Silva, Grace Ferreira da [UNESP] 04 March 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-10-06T13:03:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-04. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:18:25Z : No. of bitstreams: 1 000847376.pdf: 982514 bytes, checksum: 2b38bf84c7be6f7c02986b6730c59677 (MD5) / A arara-azul (Anodorhynchus hyacinthinus) é a maior arara do mundo. Esta espécie está distribuída em três regiões do Brasil com populações aparentemente isoladas. Estudos realizados a longo prazo, relacionados a biologia reprodutiva e levantamento dos itens alimentares das araras são necessários, uma vez que muitas das perguntas importantes sobre a ecologia de psitacídeos envolvem estudos de seu habitat e comportamento. Assim, o objetivo desta pesquisa foi coletar informações sobre os aspectos da biologia reprodutiva das araras-azuis na região do mosaico Carajás e seu entorno, bem como observar as espécies vegetais que utilizam para se alimentar e assim, ampliar o conhecimento sobre a espécie em toda a sua área de ocorrência e auxiliar os planos de manejo para a preservação da mesma. Durante quatro anos não consecutivos, itens alimentares foram coletados, cavidades arbóreas foram localizadas e, quando ativas com ovos e/ou filhotes, as árvores foram cadastradas como ninho. Foram obtidos um total de 67 registros de cavidades, onde 24 estavam ativos com ovos e filhotes. A maioria das cavidades-ninho foram registradas em Sterculia sp. (87%) as demais, nas espécies vegetais: Euxylophora paraensis, Bertholletia excelsa, Cariniana sp., Parkia sp., Ceiba pentandra, Bagassa guianensis, Parkia aff. Gigantocarpa, Helicostylis tomenosa, Schizolobium sp. Durante o período reprodutivo, foi observado que as araras-azuis ocupam cavidades disponíveis sem indícios de preferencia pela espécie vegetal. Entretanto, a maioria dos ninhos foram encontrados em Sterculia sp. A postura dos ovos seguiu conforme o usual já verificado em outras populações desta espécie de psitacídeo. Restos de frutos de palmeiras de inajá (Maximiliana maripa), tucum (Astrocaryum sp.), gueroba (Syagrus oleracea), macaúba (Acrocomia aculeata) e bacuri (Scheelea phalerata) foram coletados dentro dos ninhos, no chão abaixo do ninho e próximo as palmeiras,... / The Hyacinth macaw (Anodorhynchus hyacinthinus) is the biggest macaw in the world. This species is distributed in three regions of Brazil with apparently isolated populations. It is necessary that long-term studies about the reproductive biology and diet of macaws are made, since many of the important questions about the parrot ecology involve studies of their habitat and behavior. The objective of this research was to collect information about the aspects of the reproductive biology of Hyacinth macaws in the Carajás Mosaic region and its surroundings, as well as observing the food items they consume and thus increase knowledge about the species throughout its hit area of occurrence to assist the appropriate conservancy of the macaw. For four non-consecutive years, tree cavities were located and when active with eggs and / or chicks, the trees were registered as nest. We made observations and collect food items of the species. We obtained a total of 67 records cavities between the years 2007, 2008, 2013 and 2014. Twenty-four nests were active with eggs and chicks. We obtained a total of 67 records cavities where 24 were active with eggs and chicks. Most nest cavities were recorded in Sterculia sp. (87%) and the others in the plant species: Euxylophora paraensis, Bertholletia excelsa, Cariniana sp., Parkia sp., Ceiba pentandra, Bagassa guianensis, Parkia aff. Gigantocarpa, Helicostylis tomenosa, Schizolobium sp. During the breeding period, we observed that the hyacinth macaws occupy available hollows, without preference for the plant species. However, most of the nests were found in Sterculia sp. The laying of eggs followed as usual already observed in other populations of this psittacid species. Fruit remains of inajá palms (Maximiliana maripa), tucum (Astrocaryum sp.), Gueroba (Syagrus oleracea), macaúba (Acrocomia aculeata) and bacuri (Scheelea phalerata) were collected inside the nests, on the ground below the nest and next to the ...

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