Submitted by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-04-20T13:03:58Z No. of bitstreams: 1 RaquelSampaiodeOliveiraTese2015.pdf: 10137790 bytes, checksum: c5825d13e8bc435cc264076585a21c29 (MD5) / Approved for entry into archive by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-04-20T13:04:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RaquelSampaiodeOliveiraTese2015.pdf: 10137790 bytes, checksum: c5825d13e8bc435cc264076585a21c29 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-20T13:04:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RaquelSampaiodeOliveiraTese2015.pdf: 10137790 bytes, checksum: c5825d13e8bc435cc264076585a21c29 (MD5) Previous issue date: 2015-12-15 / Cotton is an economically important natural fiber produced in the world and it is highly affected by insect pests and pathogens. Several transgenic approaches have been developed to improve cotton???s resistance through the expression of different transgenes, including Cry toxins, hydrolytic proteinase inhibitors, toxic peptides, dsRNA, among others. However, transformation methods remain limited by cotton variety due to the difficulties imposed by tissue culture and the steps necessary in Agrobacterium-mediated transformation and/or particle bombardment. The pollen tube transformation technique involves the introduction of an exogenous DNA into the plant genome being independent of tissue culture. This method can be applied into different cotton cultivars and it has been used successfully in generation of Bt cotton. In Chapter 2, the pollen-tube pathway technique was used to transform a Brazilian cotton cultivar. The putative transgenic plants derived from boll seeds injected with a binary expression vector, harboring the cry1Ia12 gene were initially selected with kanamycin. Selected plants were characterized using PCR, Southern blot, Western blot and ELISA techniques to confirm the genetic transformation. Western blot and ELISA data showed variable protein expression among the transgenic plants varying from 1,?? ??g g-1 to ??,??6 ??g g-1. An insect bioassay using T1 plants revealed the entomotoxic effects of Cry1Ia12 on Spodoptera frugiperda, as evidenced by a decrease in the development of insects compared with untransformed controls. Entomotoxic effect with Anthonomus grandis was also demonstrated by a decrease in the number of emerging insect adults. In Chapter 3, the agrolistic transformation technique was used to transform the Coker 310 cultivar. The putative transgenic plants derived from transformed embryos with a vector harboring the cry8Ka5 and ??AI-C3 genes were selected in vitro, and acclimatized in a greenhouse. Acclimatized plants were characterized using PCR and ELISA techniques to confirm the genetic transformation. Collected seeds from positive plants were sown for T1 plants analysis, aiming the technique evaluation. It was observed the cry8Ka5 gene amplification, and the ELISA results showed variable protein expression between transgenic plants. It was possible to demonstrate with this work, the efficacy of GM cotton plants generation using alternative biotechnological approaches, efficiently applied to the lepidopterans and coleopterans control. / O algod??o ?? uma fonte de fibra natural de grande import??ncia econ??mica, sendo uma cultura altamente afetada por diferentes insetos-praga e pat??genos. Diversas estrat??gias de transgenia t??m sido desenvolvidas para melhorar a resist??ncia do algod??o, por meio da express??o de transgenes, incluindo toxinas Cry, inibidores de enzimas hidrol??ticas, pept??deos t??xicos, dsRNA, entre outros. No entanto, os m??todos de transforma????o ainda s??o limitados a algumas variedades de algod??o devido ??s dificuldades impostas pela cultura de tecidos e ??s etapas necess??rias de transforma????o, seja mediada por Agrobacterium e/ou bombardeamento de part??culas. A t??cnica de transforma????o via tubo pol??nico ?? uma t??cnica que envolve a introdu????o de DNA gen??mico ex??geno em plantas, sendo independente de cultura de tecidos. Este m??todo pode ser aplicado para diferentes cultivares de algod??o e tem sido utilizado com sucesso na gera????o de algod??o Bt. No Cap??tulo 2, a t??cnica de transforma????o via tubo pol??nico foi utilizada para transformar uma cultivar de algod??o brasileira. As potenciais plantas transg??nicas geradas, derivadas de sementes que tiveram o bot??o floral injetado com um vetor de express??o bin??rio, portador do gene cry1Ia12, foram inicialmente selecionadas com o antibi??tico canamicina. Plantas selecionadas foram caracterizadas por PCR, Southern blot, Western blot, e ensaio de ELISA, visando confirmar a transforma????o gen??tica. Os dados de Western blot e de ELISA mostraram uma express??o vari??vel da prote??na entre as plantas transg??nicas, com concentra????es variando de 1,?? ??g g-1 a ??,??6 ??g g-1. Ensaios biol??gicos com o inseto alvo utilizando plantas T1 revelaram os efeitos entomot??xicos da toxina Cry1Ia12 em Spodoptera frugiperda, evidenciado por uma diminui????o no desenvolvimento de insetos, em compara????o com as plantas controle n??o transformadas. Foi observado um efeito entomot??xico em Anthonomus grandis, demonstrado pela diminui????o no n??mero de adultos emergentes. No Cap??tulo 3, a t??cnica de transforma????o via agrol??stica foi utilizada para transformar uma cultivar de algod??o Coker 310 visando avaliar essa t??cnica. As plantas potencialmente transg??nicas geradas, derivadas dos embri??es transformados com o vetor portando os genes cry8Ka5 e ??AI-C3 foram selecionados in vitro e, posteriormente, aclimatizados em casa de vegeta????o. Estas plantas foram caracterizadas por PCR e ELISA para confirmar a transforma????o gen??tica. Sementes das plantas positivas foram semeadas para an??lise das plantas T1. A amplifica????o do gene cry8Ka5 foi observada e os resultados de ELISA mostraram uma express??o vari??vel da prote??na entre as plantas transg??nicas. Os estudos aqui apresentados demonstraram a efici??ncia na gera????o de plantas de algod??o GM, utilizando abordagens biotecnol??gicas alternativas e eficientes para controle de lepid??pteros e cole??pteros.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:58:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1156754 bytes, checksum: ec0b59041b7c6272f3daf112a5c980d1 (MD5) Previous issue date: 2013-12-12 / In Brazil, the control of the boll weevil population has been highlighted by the consolidation of a public-private partnership, through the State Agencies for Animal and Plant Production and Health, Ministry of Agriculture, EMBRAPA, State Foundations, Growers Associations, and State Funds of Incentives for Cotton Production, that coordinate and promote the Programs of Prevention, Control and of Suppression of the Cotton Boll Weevil. These efforts have shown satisfactory results in suppressing the pest over the years, sharply reducing yield losses and reducing insecticide applications. Based on the results of research and experience with the legislative control for implementation of the Programs in the State of Goias, in this study is proposed a legislation to meet the interests of cotton growers that adopt the methodologies of the weevil population suppression. The legislation proposed is based on the guidelines of the International Standards for Phytosanitary Measures - ISPM for determining a Low Prevalence Area of Pest - LPAP for the Boll Weevil - Anthonomus grandis, which will subsidize a government policy aimed at the phytossanitary control of the weevil. / No Brasil, o controle populacional do bicudo-do-algodoeiro vem se destacando pela consolidação de uma parceria pública e privada, através dos Órgãos Estaduais de Defesa Agropecuária, do Ministério da Agricultura, da EMBRAPA, das Fundações Estaduais, das Associações de Produtores e Fundos de Incentivos Estaduais à Cotonicultura, que coordenam e fomentam os Programas de Prevenção, Controle e de Supressão do Bicudo-do-Algodoeiro. Ao longo dos anos essas ações demonstraram resultados satisfatórios na supressão da praga, reduzindo acentuadamente as perdas provocadas e diminuindo as aplicações de inseticidas. Baseando-se nos resultados de pesquisas e na experiência obtida no acompanhamento da fiscalização do controle legislativo para implantação dos Programas de Controle e Supressão no Estado de Goiás, é proposto no presente estudo uma legislação para atender ao interesse dos produtores que realizam as metodologias de supressão populacional do bicudo. A minuta de legislação é baseada nas diretrizes das Normas Internacionais de Medidas Fitossanitárias NIMF, para a determinação de uma Área de Baixa Prevalência da Praga ABPP para o Bicudo-do-Algodoeiro Anthonomus grandis, a qual subsidiará uma política governamental voltada para o controle fitossanitário da praga.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-28T16:43:35Z No. of bitstreams: 1 Roberta Leme dos Santos.pdf: 451502 bytes, checksum: 991f9c16de9b987dfbbdae8a5a886141 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-28T16:43:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Roberta Leme dos Santos.pdf: 451502 bytes, checksum: 991f9c16de9b987dfbbdae8a5a886141 (MD5) Previous issue date: 2011-07-01 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Multiple applications of kaolin might be feasible for crop pest management on both conventional and agroecological cotton systems if integrated in harmony with others control strategies. Although kaolin pulverizations in cotton be tested against boll weevil Anthonomus grandis Boheman (Coleoptera: Curculionidae) and others pests, their effect on natural enemies has been neglected. The community of natural enemies in cotton cultivated under low pesticide input is very abundant, diverse, and significant to keep herbivores populations below pest status. The current study investigated the effect of kaolin pulverization on abscission of cotton fruiting structures, emergence of boll weevil and pink bollworm, Pectinophora gossypiella(Saunders) (Lepidoptera: Gelechiidae), and their parasitoids. It was also studied the parasitism of boll weevil by Bracon vulgaris Ashmead (Hymenoptera: Braconidae) in the laboratory. Under field conditions, squares abscission was about 53% less on kaolin-treated plots compared to untreated ones. However the emergence rate of boll weevil and pink bollworm adults from collected structures was similar between treated and untreated plots. The number of bolls per plant (~6 bolls) were not different between the plots. The Survey of natural enemies presents on plant canopy showed seasonal similarity on densities of Areneae, Formicidae, Chrysopidae, and Coccinellidae on kaolin-treated and untreated plots. The parasitoids B. vulgaris and Catolaccus grandis Burks (Hymenopera: Pteromalidae) also exhibited similar emergence rate from structures collected on field treated and untreated with kaolin. Under laboratory conditions, the parasitoid B. vulgaris showed no preference between boll weevil larvae infesting squares treated and untreated with kaolin. Therefore, the results shows that kaolin sprayed in cotton fields does not affect the populations of parasitoids and predators naturally occurring in cotton fields. / Pulverizações do caulim podem ser consideradas no manejo de pragas do algodoeiro tanto em grandes lavouras no sistema convencional de produção como em pequenas lavouras no cultivo agroecológico. No entanto, é necessário que a utilização do caulim se integre de forma harmoniosa com os demais métodos de controle. Apesar do uso do caulim ser estudado visando o controle do bicudo Anthonomus grandis Boheman (Coleoptera: Curculionidae) e demais pragas, o efeito sobre a comunidade de inimigos naturais nessa cultura tem sido negligenciado. A comunidade de inimigos naturais em algodoeiro cultivado com baixo uso de agrotóxicos é abundante, diversa e com significante contribuição para restringir a ocorrência de pragas. Assim, este estudo investigou a aplicação sistemática do caulim, em condições de campo, sobre a perda de estruturas reprodutivas, emergência do bicudo e lagarta rosada Pectinophora gossypiell (Saunders) (Lepidoptera: Gelechiidae) de seus parasitóides e a abundância de predadores no dossel das plantas. Foi estudado o parasitismo do bicudo por Bracon vulgaris Ashmead (Hymenoptera: Braconidae) em botões florais pulverizados ou não com o caulim, em laboratório. A abscisão de botões florais foi 53% menor em parcelas com o caulim, mas a taxa de emergência de bicudo e lagarta rosada dessas estruturas foi similar entre os tratamentos com e sem caulim. Da mesma forma, o número de maçãs remanescentes por planta (~6 maçãs) foi similar entre os tratamentos. A abundância média de predadores Araneae, Formicidae, Chrysopidae e Coccinellidae presentes no dossel das plantas foi similar entre os tratamentos. Os parasitóides B. vulgaris e Catolaccus grandis Burks (Hymenoptera: Pteromalidae) apresentaram similar taxa de emergência em estruturas coletadas do solo nos tratamentos com e sem caulim. A taxa de parasitismo do bicudo por B. vulgaris, em laboratório, sob condições de chance de escolha entre botões florais pulverizadas ou não com o caulim foi similar. Portanto, os resultados mostram que repetidas pulverizações com o caulim, nas condições de campo do estudo conduzido, não causam efeitos adversos sobre os predadores e parasitóides que ocorrem naturalmente no local.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-02-02Bitstream added on 2014-06-13T20:37:49Z : No. of bitstreams: 1 tavares_fm_me_botfca.pdf: 1326049 bytes, checksum: 86d24916183c6adc243be54cbe86a695 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Fundação de Apoio à Pesquisa Agrícola (FUNDAG) / Secretaria Agricultura / Buscando-se novas alternativas para o controle do bicudo da cana-de-açúcar, Sphenophorus levis Vaurie, 1978, foi testado em laboratório, em estufa e no campo, a ação dos nematóides entomopatogênicos Heterorhabditis indica Poinar, 1992 e Steinernema sp., e o efeito da associação desses agentes com subdosagens dos inseticidas químicos fipronil (Regent 800WG), thiamethoxam (Actara 250WG) e imidacloprid (Confidor 700WG), no controle de larvas e adultos do inseto. Inicialmente foram avaliadas diferentes dosagens dos nematóides contra larvas do inseto. O nematóide Steinernema sp. apresentou-se mais eficiente no controle de larvas, podendo ser utilizada na menor dosagem avaliada (2,4 JI/cm2), já que ocasionou 69% de mortalidade corrigida do inseto em estufa, não diferindo significamente das maiores dosagens. Esse nematóide apresentou-se mais eficiente também contra adultos do inseto, em teste de laboratório, proporcionando níveis de mortalidade do inseto igual ou superior a 70% nas dosagens de 2,4, 12 e 60 JI/cm2, quando avaliado em associação com o inseticida thiamethoxam na subdosagem de 250 g p.c./ha. No teste de campo foi possível verificar nas parcelas tratadas com Steinernema sp., na dosagem de l,0xl08 JI/ha, associado ao thiamethoxam na dose de 500 g p.c./ha, ganho superior a 28 toneladas de cana crua quando 2 comparada a testemunha. Quanto ao efeito de fipronil e thiamethoxam sobre a viabilidade dos nematóides em laboratório, esses produtos químicos apresentaram-se compatíveis a esses agentes, não afetando a viabilidade dos juvenis infectivos. O nematóide Steinernema sp. é uma alternativa viável para o controle de S. levis, podendo ser usado isoladamente ou associado com subdosagem de thiamethoxam. Palavras-chave: controle microbiano, controle biológico, bicudo da cana de açúcar, inseticida químico, nematóide entomopatogênico. / With the purpose to find new alternatives to control the sugarcane billbug Sphenophorus levis, this study aimed to evaluate in laboratory, green house and field conditions, the effect of the nematodes Heterorhabditis indica and Steinernema sp., in combinations with sub-dosages of the chemical insecticides fipronil (Regent 800WG), thiametoxam (Actara 250WG) and imidacloprid (Confidor700WG), against larva and adults of this pest. Firstly, several dosages of the nematodes were evaluated against larvae. The nematode Steinernema sp. was the most efficient against larva, with its dosage of 2,4 IJ/cm2 showing to be the best one for the insect control since it provide 69% larva mortality, not significantly differing from the other dosages. This nematode was also the most efficient against adults in laboratory test, providing insect mortality levels equal or higher than 70% when evaluated at the dosages of 2,4; 12 and 60 IJ/ha, in combination with thiametoxam at the sub-dosage 250 g c.p./ha. The insecticides fipronil and thiamethoxam did not affected the viability of the infect juveniles. For the field test, the combination of Steinernema sp. (108 IJ/ha) plus thiamethoxam (500 g c.p./ha) provided an increasing to the sugarcane production higher than 28 ton/ha. The nematode Steinernema sp. seems to be a viable alternative for the 4 controlling of S. levis, providing expressive increasing to the sugarcane production when used alone or in combination with thiamethoxam.