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Síntese e funcionalização de nanopartículas com oligonucleotídeo para aplicação em genossensores no diagnóstico avançado de predisposição à hipertensão arterial / Synthesis and functionalization of nanoparticles with oligonucleotide for application in genosensors as advanced diagnostic tools for arterial hypertensionRolim, Thalita Verônica Calheiros 09 May 2013 (has links)
A crescente prevalência de hipertensão arterial na população mundial e os riscos por ela apresentados nas doenças coronarianas eleva a importância de seu controle. Sendo sua causa, frequentemente multifatorial, o tratamento da patologia é dificultado. Fatores ambientais associados à predisposição genética levam o indivíduo a apresentar índices pressóricos elevados de pressão arterial quando comparados a indivíduos que não apresentam tal predisposição. Identificar a predisposição genética seria ideal para amenizar ou, até mesmo, evitar o desenvolvimento da patologia. As nanopartículas estão cada vez mais associadas com biomoléculas, uma vez que suas propriedades associadas às questões médicas podem criar novos métodos potencialmente eficientes, tanto no diagnóstico como na terapêutica. O presente trabalho teve como objetivo a conjugação de nanopartículas de ouro, estabilizadas com dendrímero poli(amidoamina) de geração 4, com oligonucleotídeo para obtenção de genossensores capazes de detectar o polimorfismo de inserção e deleção do gene da enzima conversora de angiotensina I, o qual está intimamente relacionado com a predisposição à hipertensão arterial sistêmica. As nanopartículas foram caracterizadas por Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM), potencial zeta e Espectroscopia no Ultravioleta-Visível (UV-VIS). A formação do conjugado entre a nanopartícula e o oligonucleotídeo foi confirmada por UV-VIS, Espalhamento Dinâmico de Luz (DLS) e Espectroscopia no Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR). Foram construídos três sistemas de detecção diferentes, nos quais as técnicas empregadas foram Espectroscopia de Impedância Elétrica, Espectroscopia de Impedância Eletroquímica e Transistor de Efeito de Campo de Porta Estendida e Separada (SEGFET). O polimorfismo foi detectado em concentrações da ordem de 1 nM. Com destaque para aqueles em que o emprego do conjugado amplificou o sinal pelas propriedades das nanopartículas de ouro. Os genossensores propostos são promissores e futuramente poderão contribuir com a medicina preventiva. / The increasing prevalence of hypertension in the world population and the risks presented by it in coronary heart disease reveals the importance of their control. Due to its multifactorial causes, the treatment of this disease is difficult. Environmental factors associated with genetic predisposition lead the individual to present high indexes of blood pressure when compared to individuals who do not have a predisposition. To identify the genetic predisposition would be ideal to minimize or even to prevent the pathology development. Nanoparticles are increasingly associated with biomolecules, their properties added with medical questions, can create new methods potentially efficient, both in diagnosis and therapy. This study aims at developing of poly(amidoamine) dendrimer-stabilized gold nanoparticles, conjugated with oligonucleotides to obtain genosensors able to detect the polymorphism of insertion and deletion of angiotensin I converting enzyme (ACE) gene, which is closely related with the predisposition to systemic blood hypertension. The nanoparticles were characterized by Transmission Electronic Microscopy (TEM), Zeta potential and Ultraviolet-Visible Spectroscopy (UV-VIS). The formation of the conjugate formed by the nanoparticle and the oligonucleotide was confirmed by UV-VIS, Dynamic Light Scattering (DLS) and Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR). Three different detection systems were built, in which the following techniques were applied: Electrical Impedance Spectroscopy, Electrochemical Impedance Spectroscopy and Separative Extended Gate Field Effect Transitor (SEGFET). For all systems polymorphism - related sequences were detected at concentrations down to nanomolar. The use of the conjugate amplified the signal of the genosensor due to the nanoparticles. The proposed genosensors may contribute to preventative medicine.
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Síntese e funcionalização de nanopartículas com oligonucleotídeo para aplicação em genossensores no diagnóstico avançado de predisposição à hipertensão arterial / Synthesis and functionalization of nanoparticles with oligonucleotide for application in genosensors as advanced diagnostic tools for arterial hypertensionThalita Verônica Calheiros Rolim 09 May 2013 (has links)
A crescente prevalência de hipertensão arterial na população mundial e os riscos por ela apresentados nas doenças coronarianas eleva a importância de seu controle. Sendo sua causa, frequentemente multifatorial, o tratamento da patologia é dificultado. Fatores ambientais associados à predisposição genética levam o indivíduo a apresentar índices pressóricos elevados de pressão arterial quando comparados a indivíduos que não apresentam tal predisposição. Identificar a predisposição genética seria ideal para amenizar ou, até mesmo, evitar o desenvolvimento da patologia. As nanopartículas estão cada vez mais associadas com biomoléculas, uma vez que suas propriedades associadas às questões médicas podem criar novos métodos potencialmente eficientes, tanto no diagnóstico como na terapêutica. O presente trabalho teve como objetivo a conjugação de nanopartículas de ouro, estabilizadas com dendrímero poli(amidoamina) de geração 4, com oligonucleotídeo para obtenção de genossensores capazes de detectar o polimorfismo de inserção e deleção do gene da enzima conversora de angiotensina I, o qual está intimamente relacionado com a predisposição à hipertensão arterial sistêmica. As nanopartículas foram caracterizadas por Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM), potencial zeta e Espectroscopia no Ultravioleta-Visível (UV-VIS). A formação do conjugado entre a nanopartícula e o oligonucleotídeo foi confirmada por UV-VIS, Espalhamento Dinâmico de Luz (DLS) e Espectroscopia no Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR). Foram construídos três sistemas de detecção diferentes, nos quais as técnicas empregadas foram Espectroscopia de Impedância Elétrica, Espectroscopia de Impedância Eletroquímica e Transistor de Efeito de Campo de Porta Estendida e Separada (SEGFET). O polimorfismo foi detectado em concentrações da ordem de 1 nM. Com destaque para aqueles em que o emprego do conjugado amplificou o sinal pelas propriedades das nanopartículas de ouro. Os genossensores propostos são promissores e futuramente poderão contribuir com a medicina preventiva. / The increasing prevalence of hypertension in the world population and the risks presented by it in coronary heart disease reveals the importance of their control. Due to its multifactorial causes, the treatment of this disease is difficult. Environmental factors associated with genetic predisposition lead the individual to present high indexes of blood pressure when compared to individuals who do not have a predisposition. To identify the genetic predisposition would be ideal to minimize or even to prevent the pathology development. Nanoparticles are increasingly associated with biomolecules, their properties added with medical questions, can create new methods potentially efficient, both in diagnosis and therapy. This study aims at developing of poly(amidoamine) dendrimer-stabilized gold nanoparticles, conjugated with oligonucleotides to obtain genosensors able to detect the polymorphism of insertion and deletion of angiotensin I converting enzyme (ACE) gene, which is closely related with the predisposition to systemic blood hypertension. The nanoparticles were characterized by Transmission Electronic Microscopy (TEM), Zeta potential and Ultraviolet-Visible Spectroscopy (UV-VIS). The formation of the conjugate formed by the nanoparticle and the oligonucleotide was confirmed by UV-VIS, Dynamic Light Scattering (DLS) and Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR). Three different detection systems were built, in which the following techniques were applied: Electrical Impedance Spectroscopy, Electrochemical Impedance Spectroscopy and Separative Extended Gate Field Effect Transitor (SEGFET). For all systems polymorphism - related sequences were detected at concentrations down to nanomolar. The use of the conjugate amplified the signal of the genosensor due to the nanoparticles. The proposed genosensors may contribute to preventative medicine.
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Papel do polimorfismo da posição -786T>C do gene da sintase do óxido nítrico endotelial (eNOS) na resposta pressórica em mulheres no climatério : efeito do treinamento físico /Sponton, Carlos Henrique Grossi. January 2010 (has links)
Orientador: Angelina Zanesco / Banca: Everardo Magalhães Carneiro / Banca: Eliete Luciano / Resumo: O objetivo deste estudo foi verificar a influência do polimorfismo da posição -786T>C do gene da eNOS sobre as respostas pressóricas e as concentrações plasmáticas de nitrito/nitrato em mulheres no climatério normotensas e hipertensas submetidas ao exercício físico aeróbio por 6 meses. Vinte e oito voluntárias normotensas e vinte e oito voluntárias hipertensas idade 51±4 e 59±2 anos respectivamente participaram deste estudo. Os parâmetros antropométricos (peso corporal, índice de massa corporal - IMC e circunferência abdominal - CA) cardiovasculares (consumo máximo de oxigênio - VO2max, pressão arterial sistólica - PAS, pressão arterial diastólica - PAD e frequência cardíaca - FC) e bioquímicos (concentrações de nitrito/nitrato - NOX-) foram analisados no início e após 6 meses de treinamento físico aeróbio. Além disso, também foi realizada a análise do polimorfismo para a posição -786T>C do gene da eNOS. O programa de treinamento físico aeróbio foi realizado com frequência de 3 vezes por semana, duração de 30-40 minutos, intensidade entre 50% a 70% da frequência cardíaca de reserva por um período de 6 meses. Para as análises sem divisão pelo genótipo para a posição -786T>C do gene da eNOS, não foram observadas diferenças significativas tanto para as normotensas quanto para hipertensas em relação ao peso corporal, IMC, CA e VO2max. Por outro lado, foram observadas diferenças significativas para a PAS, PAD e NOX-. Quanto a divisão genotípica para a posição -786T>C, em relação as voluntárias normotensas, observou-se para o grupo não polimórfico (TT) alterações significativas para a PAS, PAD e NOX-. Já para as voluntárias polimórficas (TC+CC), não observou-se alteração significativa da PAS, porém, verificou-se alteração significativa para a PAD e NOX-. Em relação as voluntárias hipertensas, não observou-se... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to investigate the influence of eNOS gene polymorphism at -786T> C position on blood pressure responses and plasma concentrations of nitrite/nitrate in climateric normotensive and hypertensive women submitted to aerobic physical exercise for six months. Twenty-eight normotensive volunteers and twenty-eight hypertensive volunteers age 51 ± 4 and 59 ± 2 years respectively were elegible to this study. Anthropometric parameters (body weight, body mass index - BMI and waist circumference - WC) cardiovascular parameters (maximum oxygen uptake - VO2max, systolic blood pressure - SBP, diastolic blood pressure - DBP and heart rate - HR) and biochemical (nitrite / nitrate concentration - NOX-) were measured at baseline and after 6 months of aerobic exercise. In addition, the analys of eNOS gene polymorphism at -786T>C position was accomplished. The program of aerobic exercise was conducted with frequency of three times a week, duration 30-40 minutes, intensity from 50% to 70% heart rate reserve for a period of six months. For analysis without division by genotype for eNOS gene polymorphism at -786T> C position, no significant differences were observed for both normotensive and hypertensive in relationship to body weight, BMI, and VO2max. Moreover, significant differences were observed for SBP, DBP, and NOX. As the division to eNOS gene polymorphism at -786T> C position, compared to normotensive volunteers, we observed for the group non-polymorphic (TT) significant changes in SBP, DBP and NOX. As for the volunteers polymorphic (TC + CC), there was no significant change in SBP, however, there was significant change in the DBP and NOX. Regarding the volunteers with hypertension, there was no significant change in relationship to SBP for both the TT group and for the TC + CC group. Moreover, for DBP and NOX- there were significant changes to both the TT group and... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Papel do polimorfismo da posição -786T>C do gene da sintase do óxido nítrico endotelial (eNOS) na resposta pressórica em mulheres no climatério: efeito do treinamento físicoSponton, Carlos Henrique Grossi [UNESP] 06 August 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0
Previous issue date: 2010-08-06Bitstream added on 2014-06-13T20:49:26Z : No. of bitstreams: 1
sponton_chg_me_rcla.pdf: 632210 bytes, checksum: 11a0067266d087e1859beed4e19501de (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O objetivo deste estudo foi verificar a influência do polimorfismo da posição -786T>C do gene da eNOS sobre as respostas pressóricas e as concentrações plasmáticas de nitrito/nitrato em mulheres no climatério normotensas e hipertensas submetidas ao exercício físico aeróbio por 6 meses. Vinte e oito voluntárias normotensas e vinte e oito voluntárias hipertensas idade 51±4 e 59±2 anos respectivamente participaram deste estudo. Os parâmetros antropométricos (peso corporal, índice de massa corporal - IMC e circunferência abdominal - CA) cardiovasculares (consumo máximo de oxigênio – VO2max, pressão arterial sistólica – PAS, pressão arterial diastólica - PAD e frequência cardíaca - FC) e bioquímicos (concentrações de nitrito/nitrato – NOX-) foram analisados no início e após 6 meses de treinamento físico aeróbio. Além disso, também foi realizada a análise do polimorfismo para a posição -786T>C do gene da eNOS. O programa de treinamento físico aeróbio foi realizado com frequência de 3 vezes por semana, duração de 30-40 minutos, intensidade entre 50% a 70% da frequência cardíaca de reserva por um período de 6 meses. Para as análises sem divisão pelo genótipo para a posição -786T>C do gene da eNOS, não foram observadas diferenças significativas tanto para as normotensas quanto para hipertensas em relação ao peso corporal, IMC, CA e VO2max. Por outro lado, foram observadas diferenças significativas para a PAS, PAD e NOX-. Quanto a divisão genotípica para a posição -786T>C, em relação as voluntárias normotensas, observou-se para o grupo não polimórfico (TT) alterações significativas para a PAS, PAD e NOX-. Já para as voluntárias polimórficas (TC+CC), não observou-se alteração significativa da PAS, porém, verificou-se alteração significativa para a PAD e NOX-. Em relação as voluntárias hipertensas, não observou-se... / The aim of this study was to investigate the influence of eNOS gene polymorphism at -786T> C position on blood pressure responses and plasma concentrations of nitrite/nitrate in climateric normotensive and hypertensive women submitted to aerobic physical exercise for six months. Twenty-eight normotensive volunteers and twenty-eight hypertensive volunteers age 51 ± 4 and 59 ± 2 years respectively were elegible to this study. Anthropometric parameters (body weight, body mass index - BMI and waist circumference - WC) cardiovascular parameters (maximum oxygen uptake - VO2max, systolic blood pressure - SBP, diastolic blood pressure - DBP and heart rate - HR) and biochemical (nitrite / nitrate concentration – NOX-) were measured at baseline and after 6 months of aerobic exercise. In addition, the analys of eNOS gene polymorphism at -786T>C position was accomplished. The program of aerobic exercise was conducted with frequency of three times a week, duration 30-40 minutes, intensity from 50% to 70% heart rate reserve for a period of six months. For analysis without division by genotype for eNOS gene polymorphism at -786T> C position, no significant differences were observed for both normotensive and hypertensive in relationship to body weight, BMI, and VO2max. Moreover, significant differences were observed for SBP, DBP, and NOX. As the division to eNOS gene polymorphism at -786T> C position, compared to normotensive volunteers, we observed for the group non-polymorphic (TT) significant changes in SBP, DBP and NOX. As for the volunteers polymorphic (TC + CC), there was no significant change in SBP, however, there was significant change in the DBP and NOX. Regarding the volunteers with hypertension, there was no significant change in relationship to SBP for both the TT group and for the TC + CC group. Moreover, for DBP and NOX- there were significant changes to both the TT group and... (Complete abstract click electronic access below)
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