Oral cancer is one of the most common cancers worldwide, in Brazil is estimated for the years 2012 and 2013 the rate of 9,990 new cases. The main risk factors for oral cancer are smoking, alcohol consumption and infection by human papillomavirus (HPV). Due to the impact of HPV infection in sexually active population, and the fact that the infection is an important risk factor for development of oral cancer, the analysis of the presence of the virus in patients with suspicious lesions (oral cancer) proves to be important for understanding infection and innovation diagnosis. This study will emphasize the importance of including in patient diagnosis the analysis of HPV infection, as this would influence prognosis and treatment of disease. Furthermore, this work may contribute to other studies which aim to determine the incidence of HPV in the oral mucosa. The present study aimed to analyze the possible relationship of the virus in the development of malignant oral lesions. The samples of oral biopsy were taken from 25 patients treated at the Clinic of Stomatology of the University Hospital of UFSC in the period from 2006 to 2011. The study was the type retrospective, cross-sectional descriptive with qualitative analysis of material extraction colected. After the extraction by salting-out method, the samples were analyzed by PCR. PCO3/PCO4 primer were used for beta globin gene, MY09/MY11 for HPV detection and GP5 + / GP6 + for nested PCR. The association between patient age and the presence of HPV was analyzed using the Student t test for independent samples. Variables such as smoking, drinking and sex were analyzed using the Fisher exact test. The association between HPV and oral cancer was analyzed using the chi-square test. About 40% of the samples were infected with HPV. The analysis of factors related to HPV infection in neoplastic lesions showed that patients infected with HPV are significantly older than patients without infection. The other variables showed no significant difference / O câncer oral é um dos tipos de câncer mais comuns na população mundial e, no Brasil, estima-se para os anos de 2012 e 2013 uma taxa de 9.990 novos casos. Os principais fatores de risco para o câncer da cavidade oral são o tabagismo, o etilismo e as infecções pelo Papilomavírus Humano (HPV). Devido ao impacto da infecção pelo HPV na população sexualmente ativa, além de um importante fator de risco para o desenvolvimento de câncer na cavidade oral, a análise da presença do vírus nos pacientes com lesões suspeitas (neoplasias orais) se mostra importante para o entendimento da infecção e a inovação do diagnóstico. Este estudo salienta a importância de se incluir no diagnóstico oral do paciente a análise da infecção pelo HPV, já que este influencia o prognóstico e o tratamento da doença, além de contribuir com outras pesquisas que tenham o objetivo de determinar a incidência do HPV na mucosa oral. Foram utilizadas amostras parafinizadas de biópsias orais extraídas de 25 pacientes atendidos no Ambulatório de Estomatologia do Hospital Universitário da UFSC no período de 2006 a 2011. O estudo foi do tipo retrospectivo, transversal, descritivo, com análise qualitativa de material coletado. Após a extração do DNA pelo método Salting-out, as amostras foram analisadas pela técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para verificar da presença do vírus. A associação entre a idade dos pacientes e a presença do HPV foi analisada através do teste T de Student para amostras independentes. As variáveis como tabagismo, etilismo e sexo foram analisadas usando o teste exato de Fisher. A associação entre o HPV e o câncer oral foi analisada através do teste de Qui-quadrado. Foi demonstrado que 40% das amostras analisadas estavam infectadas com HPV. A análise de fatores ligados a infecção pelo HPV nas lesões neoplásicas demonstrou que os pacientes infectados pelo HPV são significtivamente mais velhos que os pacientes que não apresentaram infecção. As outras variáveis não demonstraram diferença significativa

São freqüentes alterações em vias de sinalização de genes de desenvolvimento, no que diz respeito ao carcinoma epidermóide de boca (CEB). Vinte e nove casos de CEB e tecido não tumoral adjacente à neoplasia foram investigados através da técnica de hibridização “in situ". Os transcritos dos genes WNT5A e HOXB5 foram observados em todos os casos de tumor. A hibridização “in situ" revelou que o WNT5A estava mais expresso em tumores bem diferenciados. Adicionalmente, observou-se transcritos do WNT5A em glândulas salivares menores, estroma glandular, estroma tumoral e alguns vasos sanguíneos Entretanto, com respeito ao HOXB5 não foi possível estabelecer mudança do padrão do transcrito nos diferentes graus histológicos nas amostras de CEB. O HOXB5 também pôde ser identificado em alguns fragmentos de glândulas salivares menores, tecido muscular e em endotélio. Os resultados do presente estudo sugerem que a expressão dos genes WNT5A e HOXB5 podem estar relacionadas com a diferenciação e progressão do câncer de boca. / Disruption in developmental genes pathway are common in oral squamous cell carcinoma (OSCC). This study investigated the pattern of expression of two developmental genes, WNT5A and HOXB5, in 29 cases of OSCC and adjacent non tumoural tissue using in situ hybridization technique. Transcripts for WNT5A and HOXB5 were detected in all tumoral samples. In situ hybridization technique demonstrated that WNT5A transcripts were mainly detected in well differentiated tumors when compared with moderately and undifferentiated OSCC. WNT5A transcripts were also observed in accessory salivary glands, glandular stroma, and vessels. Therefore, for the HOXB5 transcript it was not possible to stability a relationship with the tumoral histological grade. The expression of HOXB5 transcripts in non tumoral samples was detected in salivary glands, glandular stroma, endothelium, and muscle. Results suggest that WNT5A and HOXB5 genes play a possible role in tumor differentiation and cancer progression.

A substância P (SP) é um neuropeptídeo da família das taquicininas que regula numerosas funções biológicas por meio da ligação ao seu receptor altamente específico neuroquinina-1 (NK-1R). Este complexo SP/NK-1R está envolvido em diversos processos relacionados à oncogênese, como a mitogênese, angiogênese, migração celular e metástase. O objetivo deste trabalho foi investigar a expressão de substância P e de seu receptor NK-1 e sua correlação com o índice de proliferação celular em 73 pacientes portadores de 90 carcinomas espinocelulares de boca, diagnosticados e tratados no Hospital General e Hospital de La Princesa, Jaen, Espanha, durante o período de 1995 a 2008. Todos os tumores foram corados pela técnica imunoistoquímica da estreptavidina-biotina-peroxidase com os anticorpos anti-SP, anti-NK-1R e anti-Ki-67. As alterações celulares epiteliais das margens cirúrgicas livres de doença também foram registradas. A expressão imunoistoquímica da substância P e do seu receptor neurokinina-1 foi avaliada na membrana, no citoplasma e no núcleo das células epiteliais malignas e do epitélio da mucosa bucal adjacente ao tumor, nos linfócitos e nos vasos sanguíneos dos tumores. O índice de proliferação celular tumoral foi determinado pela expressão imunoistoquímica de Ki-67 identificada no núcleo das células neoplásicas. As correlações entre as diversas localizações da SP, de seu receptor NK-1R e do índice de proliferação tumoral determinado pelo Ki-67 foram determinadas estatísticamente utilizando-se o Crosstab, Regress e Descript de SUDAAN. A expressão de SP foi identificada no estroma de 77% dos tumores, na membrana de 71% das células malignas e no citoplasma de 81,2% dos tumores. A maioria dos tumores apresentou altas taxas de proliferação das células neoplásicas com mais de 50% das células imunopositivas para o Ki-67. Ao analisar as margens cirúrgicas livres de doença, observou-se expressão da SP, sobretudo no terço inferior e médio, tanto no núcleo, como no citoplasma e na membrana celular. A expressão concomitante de substância P e do receptor neurokinina-1 no citoplasma das células neoplásicas ocorreu mais frequentemente nas células tumorais em proliferação. Verificou-se que expressão de SP no câncer bucal ocorre juntamente com o aumento da expressão de NK-1R, sugerindo que as células neoplásicas epiteliais bucais podem utilizar esta via para tornarem-se mais susceptíveis aos estímulos mediados pela SP. A expressão de substância P nos linfócitos do infiltrado inflamatório e vasos sanguíneos intratumorais e peritumorais se associaram a tumores de menor tamanho, menor estádio clínico e com menor frequência metástase ganglionar. Concluiu-se que as células neoplásicas epiteliais bucais podem utilizar a via substância P/NK-1R para tornarem-se mais susceptíveis aos estímulos mediados pela SP, particularmente aqueles associados à proliferação celular. Além disso, a expressão epitelial, citoplasmática e nuclear da substância P é um evento precoce na carcinogênese bucal podendo ser considerado um marcador da presença e intensidade de displasia epitelial. / The substance P (SP) is a neuropeptide of the tachykinin family that regulates multiple biological functions by binding to the highly specific receptor neurokinin-1. This complex SP/NK-1 is involved in several processes related to oncogenesis, such as mitogenesis, angiogenesis, cell migration and metastasis. This study investigated the expression of substance P and its receptor NK-1 and its correlation with the cell proliferation index in 73 patients with oral squamous cell carcinoma, diagnosed and treated at the General Hospital and Princess Hospital at Jaen, Spain, during the period 1995 to 2008. All tumors were stained immunohistochemically by the streptavidin-biotin-peroxidase technique using the antibodies anti-SP, anti-NK-1R and anti-Ki-67. The epithelial cell alterations on the disease-free surgical margins were registered. The immunohistochemical expression of SP and its receptor neurokinin-1 were evaluated on the membrane, cytoplasm and nucleus of malignant epithelial cells and cells of healthy oral mucosa adjacent to the tumor, as well as on the infiltrating lymphocytes and peritumoral or intratumoral blood vessels. The tumor cell proliferation index was determined by the immunohistochemical expression of Ki- 67 identified on the malignant cell nucleus. The correlations between the distinct localizations of SP, its receptor NK-1 and the proliferation index Ki-67 were statistically analyzed using the Sudaan Crosstab, Regress and Descript tests. The SP expression was identified on the stroma of 77% of tumors, on the membrane of 71% of malignant cells and cytoplasm of 81.2% of tumors. Most tumors presented high proliferation rates of neoplastic cells, with more than 50% of cells immunopositive for Ki-67. Analysis of the disease-free surgical margins revealed SP expression especially on the lower and medium third, both on the nucleus, cytoplasm and cell membrane. The simultaneous expression of substance P and its receptor NK-1 on the cytoplasm of neoplastic cells occurred more frequently in proliferating malignant cells. The expression of SP in oral cancer occurred simultaneously to an increased expression of NK-1R, suggesting that the oral malignant epithelial cells might use this pathway to become more susceptible to the stimuli mediated by the SP. The substance P expression on infiltrating lymphocytes and intratumoral or peritumoral blood vessels was associated with tumors of small size, lower clinical stage and less frequent node metastasis. It was concluded that the oral neoplastic epithelial cells may use the pathway SP/NK-1R to become more susceptible to the stimuli mediated by the SP, particularly those associated with cell proliferation. Additionally, the epithelial, cytoplasmic and nuclear expression of substance P is an early event in oral carcinogenesis and may be considered a marker of the presence and intensity of epithelial dysplasia.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:25:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 NADIA DO LAGO COSTA.pdf: 608666 bytes, checksum: 23e2ae20a38159f1979bd765af9f7bd5 (MD5) Previous issue date: 2012-08-21 / Tumor-Associated Macrophages (TAMs) can contribute with events involved in the progression and in the invasion of the tumor (angiogenesis, degradation of the extracellular matrix and local immunosuppression), or collaborate with an effective antitumor response and reduce the progression and metastasis. The purpose of these studies was to evaluate the macrophages (MA) presence in the microenvironment of oral cavity squamous cell carcinoma (OCSCC), and the relationship of these cells with clinicopathological factors. Additionally, we aimed also to characterize these cells through the expression of pro (IL-12/23 e INF-&#947;) and anti-inflammatory (IL-10 and TGF-&#946;) by macrophages and globally in selected samples. Besides that, considering these goals, the techniques of immunohistochemistry, flow cytometry and qRT-PCR were used. The results revealed, even with the flow cytometry technique, that a predominance of M2 phenotype macrophage in the tumor microenviromment of OCSCC, because the proportion of macrophages expressed both cytokines IL-10/TGF-&#946; (10.8%) was higher compared cytokines IL12/23/INF-&#947; (5.7%). Demonstrated although that a high proportion of MA (CD11b+CD11c-) present in OCSCC expressed cytokines IL-10, INF-&#947; and TGF-&#946; compared to the control group, however this difference was significant only for TGF-&#946; (Mann Whitney; P = 0,016). The evaluation of the expression of messenger RNA (mRNA) by qRT-PCR technique revealed a high overall expression of cytokines TGF-&#946;, IL-10 and IL-23 in OCSCC in metastatic when compared with control (P < 0,05 for all groups). The proportion of macrophages (CD68+), identified by immunohistochemistry technique, was significantly lower in the control group (normal oral mucosa) when compared to OCSCC groups with and without cervical lymph node metastasis (Mann Whitney; P = 0,00001 e P = 0,044, respectively). Additionally, the proportion of these cells was significantly higher in metastatic OCSCC when compared with non-metastatic (Mann Whitney; P = 0,038). Survival analysis showed that patients with a high proportion of CD68+ cells showed a trend toward shorter survival (44 months) than those with low proportion of these cells (93 months) (Kaplan-Meier; Log Rank, P = 0,08). In conclusion, the results suggest that there is a predominance of the M2 phenotype on the microenviromment of OCSCCC. Additionally, these cells may promote metastasis and reduce survival of patients affected by OCSCC, probably contributing to a local immunosuppression via TGF-&#946; production. / Os macrófagos associados ao tumor (MATs) podem contribuir com eventos envolvidos tanto na progressão e invasão tumoral (angiogênese, degradação da matriz extracelular e imunossupressão local), quanto para impedir ou reduzir a infiltração local e metástase através de eventos de combate ao tumor. O objetivo desse estudo foi avaliar os macrófagos (MA) presentes no microambiente do carcinoma espinocelular de cavidade oral (CECCO), bem como a relação dessas células com fatores de prognóstico clínicos e microscópicos. Além disso, objetivou-se caracterizar essas células através da expressão das citocinas pró (IL-12/23 e INF-&#947;) e anti-inflamatórias (IL-10 e TGF- &#946;) pelos macrófagos e na totalidade das amostras selecionadas. Considerando esses objetivos, as técnicas de imunoistoquímica, citometria de fluxo e PCR quantitativo (qRT-PCR) foram utilizadas. Os resultados revelaram, com a técnica da citometria de fluxo, que há, no microambiente do CECCO, um predomínio do macrófago fenótipo M2, pois a proporção dessas células que expressaram simultaneamente as citocinas IL-10/TGF-&#946; (10,8%) foi maior quando comparado as citocinas IL12/23/INF-&#947; (5,7%). Demonstrou-se, ainda, que uma alta proporção dos MA (CD11b+CD11c-) presentes no CECCO expressaram as citocinas IL-10, INF-&#947; e TGF-&#946; quando comparado ao grupo controle, no entanto esta diferença foi significativa apenas para o TGF-&#946; (Mann Whitney; P = 0,016). A avaliação da expressão do RNA mensageiro (mRNA) pela técnica do qRT-PCR revelou uma alta expressão total das citocinas TGF-&#946; , IL-10 e IL-23 no CECCO metastático quando comparado ao controle (P < 0,05 para todos os grupos). A proporção de macrófagos CD68+, identificados pela técnica da imunoistoquímica, foi significativamente menor no grupo controle (mucosa bucal saudável) quando comparado aos grupos de CECCO com e sem metástase em linfonodo cervical (Mann Whitney; P = 0,00001 e P = 0,044, respectivamente). Adicionalmente, a proporção dessas células foi significativamente maior no grupo de CECCO metastático quando comparado ao não metastático (Mann Whitney; P = 0,038). A análise da sobrevida demonstrou que os pacientes com uma alta proporção de macrófagos CD68+ apresentaram uma tendência ao menor tempo de sobrevida (44 meses) do que aqueles com baixa proporção dessas células (93 meses) (Kaplan-Meier; Log Rank, P = 0,08). Em conclusão, os resultados sugerem que há no microambiente do CECCO um predomínio do fenótipo M2. Adicionalmente, essas células podem favorecer a metástase e reduzir a sobrevida de pacientes acometidos pelo CECCO, provavelmente contribuindo com uma imunossupressão local via produção de TGF-&#946;.

São freqüentes alterações em vias de sinalização de genes de desenvolvimento, no que diz respeito ao carcinoma epidermóide de boca (CEB). Vinte e nove casos de CEB e tecido não tumoral adjacente à neoplasia foram investigados através da técnica de hibridização “in situ”. Os transcritos dos genes WNT5A e HOXB5 foram observados em todos os casos de tumor. A hibridização “in situ” revelou que o WNT5A estava mais expresso em tumores bem diferenciados. Adicionalmente, observou-se transcritos do WNT5A em glândulas salivares menores, estroma glandular, estroma tumoral e alguns vasos sanguíneos Entretanto, com respeito ao HOXB5 não foi possível estabelecer mudança do padrão do transcrito nos diferentes graus histológicos nas amostras de CEB. O HOXB5 também pôde ser identificado em alguns fragmentos de glândulas salivares menores, tecido muscular e em endotélio. Os resultados do presente estudo sugerem que a expressão dos genes WNT5A e HOXB5 podem estar relacionadas com a diferenciação e progressão do câncer de boca. / Disruption in developmental genes pathway are common in oral squamous cell carcinoma (OSCC). This study investigated the pattern of expression of two developmental genes, WNT5A and HOXB5, in 29 cases of OSCC and adjacent non tumoural tissue using in situ hybridization technique. Transcripts for WNT5A and HOXB5 were detected in all tumoral samples. In situ hybridization technique demonstrated that WNT5A transcripts were mainly detected in well differentiated tumors when compared with moderately and undifferentiated OSCC. WNT5A transcripts were also observed in accessory salivary glands, glandular stroma, and vessels. Therefore, for the HOXB5 transcript it was not possible to stability a relationship with the tumoral histological grade. The expression of HOXB5 transcripts in non tumoral samples was detected in salivary glands, glandular stroma, endothelium, and muscle. Results suggest that WNT5A and HOXB5 genes play a possible role in tumor differentiation and cancer progression.

A substância P (SP) é um neuropeptídeo da família das taquicininas que regula numerosas funções biológicas por meio da ligação ao seu receptor altamente específico neuroquinina-1 (NK-1R). Este complexo SP/NK-1R está envolvido em diversos processos relacionados à oncogênese, como a mitogênese, angiogênese, migração celular e metástase. O objetivo deste trabalho foi investigar a expressão de substância P e de seu receptor NK-1 e sua correlação com o índice de proliferação celular em 73 pacientes portadores de 90 carcinomas espinocelulares de boca, diagnosticados e tratados no Hospital General e Hospital de La Princesa, Jaen, Espanha, durante o período de 1995 a 2008. Todos os tumores foram corados pela técnica imunoistoquímica da estreptavidina-biotina-peroxidase com os anticorpos anti-SP, anti-NK-1R e anti-Ki-67. As alterações celulares epiteliais das margens cirúrgicas livres de doença também foram registradas. A expressão imunoistoquímica da substância P e do seu receptor neurokinina-1 foi avaliada na membrana, no citoplasma e no núcleo das células epiteliais malignas e do epitélio da mucosa bucal adjacente ao tumor, nos linfócitos e nos vasos sanguíneos dos tumores. O índice de proliferação celular tumoral foi determinado pela expressão imunoistoquímica de Ki-67 identificada no núcleo das células neoplásicas. As correlações entre as diversas localizações da SP, de seu receptor NK-1R e do índice de proliferação tumoral determinado pelo Ki-67 foram determinadas estatísticamente utilizando-se o Crosstab, Regress e Descript de SUDAAN. A expressão de SP foi identificada no estroma de 77% dos tumores, na membrana de 71% das células malignas e no citoplasma de 81,2% dos tumores. A maioria dos tumores apresentou altas taxas de proliferação das células neoplásicas com mais de 50% das células imunopositivas para o Ki-67. Ao analisar as margens cirúrgicas livres de doença, observou-se expressão da SP, sobretudo no terço inferior e médio, tanto no núcleo, como no citoplasma e na membrana celular. A expressão concomitante de substância P e do receptor neurokinina-1 no citoplasma das células neoplásicas ocorreu mais frequentemente nas células tumorais em proliferação. Verificou-se que expressão de SP no câncer bucal ocorre juntamente com o aumento da expressão de NK-1R, sugerindo que as células neoplásicas epiteliais bucais podem utilizar esta via para tornarem-se mais susceptíveis aos estímulos mediados pela SP. A expressão de substância P nos linfócitos do infiltrado inflamatório e vasos sanguíneos intratumorais e peritumorais se associaram a tumores de menor tamanho, menor estádio clínico e com menor frequência metástase ganglionar. Concluiu-se que as células neoplásicas epiteliais bucais podem utilizar a via substância P/NK-1R para tornarem-se mais susceptíveis aos estímulos mediados pela SP, particularmente aqueles associados à proliferação celular. Além disso, a expressão epitelial, citoplasmática e nuclear da substância P é um evento precoce na carcinogênese bucal podendo ser considerado um marcador da presença e intensidade de displasia epitelial. / The substance P (SP) is a neuropeptide of the tachykinin family that regulates multiple biological functions by binding to the highly specific receptor neurokinin-1. This complex SP/NK-1 is involved in several processes related to oncogenesis, such as mitogenesis, angiogenesis, cell migration and metastasis. This study investigated the expression of substance P and its receptor NK-1 and its correlation with the cell proliferation index in 73 patients with oral squamous cell carcinoma, diagnosed and treated at the General Hospital and Princess Hospital at Jaen, Spain, during the period 1995 to 2008. All tumors were stained immunohistochemically by the streptavidin-biotin-peroxidase technique using the antibodies anti-SP, anti-NK-1R and anti-Ki-67. The epithelial cell alterations on the disease-free surgical margins were registered. The immunohistochemical expression of SP and its receptor neurokinin-1 were evaluated on the membrane, cytoplasm and nucleus of malignant epithelial cells and cells of healthy oral mucosa adjacent to the tumor, as well as on the infiltrating lymphocytes and peritumoral or intratumoral blood vessels. The tumor cell proliferation index was determined by the immunohistochemical expression of Ki- 67 identified on the malignant cell nucleus. The correlations between the distinct localizations of SP, its receptor NK-1 and the proliferation index Ki-67 were statistically analyzed using the Sudaan Crosstab, Regress and Descript tests. The SP expression was identified on the stroma of 77% of tumors, on the membrane of 71% of malignant cells and cytoplasm of 81.2% of tumors. Most tumors presented high proliferation rates of neoplastic cells, with more than 50% of cells immunopositive for Ki-67. Analysis of the disease-free surgical margins revealed SP expression especially on the lower and medium third, both on the nucleus, cytoplasm and cell membrane. The simultaneous expression of substance P and its receptor NK-1 on the cytoplasm of neoplastic cells occurred more frequently in proliferating malignant cells. The expression of SP in oral cancer occurred simultaneously to an increased expression of NK-1R, suggesting that the oral malignant epithelial cells might use this pathway to become more susceptible to the stimuli mediated by the SP. The substance P expression on infiltrating lymphocytes and intratumoral or peritumoral blood vessels was associated with tumors of small size, lower clinical stage and less frequent node metastasis. It was concluded that the oral neoplastic epithelial cells may use the pathway SP/NK-1R to become more susceptible to the stimuli mediated by the SP, particularly those associated with cell proliferation. Additionally, the epithelial, cytoplasmic and nuclear expression of substance P is an early event in oral carcinogenesis and may be considered a marker of the presence and intensity of epithelial dysplasia.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-08-30T11:54:52Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_PerfilExpressaoMicroRNAs.pdf: 1891665 bytes, checksum: 8441547cef8f393c58ff8360d7f2a5c1 (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-08-30T14:42:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_PerfilExpressaoMicroRNAs.pdf: 1891665 bytes, checksum: 8441547cef8f393c58ff8360d7f2a5c1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-30T14:42:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_PerfilExpressaoMicroRNAs.pdf: 1891665 bytes, checksum: 8441547cef8f393c58ff8360d7f2a5c1 (MD5) Previous issue date: 2016-03-11 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O carcinoma de células escamosas oral (CCEO) é uma doençaa mutifatorial que envolve fatores genéticos, epigenéticos e ambientais. Caracteriza-se por um padrão de crescimento agressivo, altamente metastático e elevadas taxas de mortalidade. Apesar dos avanços da tecnologia nos tratamentos cirúrgicos, rádio e quimioterápicos, a taxa de sobrevivência de cinco anos não houve melhora significativa nos últimos anos. Através da regulação da expressão de genes alvos, os microRNAs desempenham papel importante na iniciação e progressão em cânceres humano, consequentemente, são uma ferramenta promissora para investigação de biomarcadores de identificação de risco, prognóstico e alvos terapêuticos. Com objetivo de investigar o perfil de expressão dos miRNAs no cancêr gástrico, dez tecidos de CCEO foram caracterizados a partir de dados gerados de sequenciamento de alto desempenho. Além disso, por qRT-PCR avaliamos o tecido adjacente ao CCEO para quatro miRNAs. Os resultados mostraram 17 miRNAs diferecialmente expressos, os quais foram capazes de discriminar o tecido CCEO do sem câncer. Dentre esses, encontramos sete novos miRNAs (hsa-let-7c, hsa-miR-10a, hsa-miR- 199a, hsa-miR-381, hsa-miR-501, hsa-miR-654 e hsa-miR-941), os quais ainda não estão descritos na literatura suas participações no CCEO. Adicionalmente, verificamos que os quatro miRNAs hsa-miR-221, hsa-miR-21, hsa-miR-135b e hsa-miR-29c foram hiperexpressos no tecido adjacente, confirmando o efeito de campo de câncerização. Os resultados revelaram que esses miRNAs são potenciais biomarcadores de ocorrencia no CCEO com a capacidade de identificar indivíduos com maior risco de desenvolver este câncer, e indicam sua utilidade como possíveis alvos terapêuticos. / Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a multifactorial disease involving genetic, epigenetic and environmental factors. It is characterized by a pattern of aggressive growth, high metastatic potential and high mortality rates. Despite advances in technology in the surgical treatment, radiotherapy and chemotherapy, the five-year survival rate has no significant improvement in recent years. By regulating the expression of target genes, microRNAs play an important role in the initiation and progression of human cancers. Therefore, they are a promising tool for the identification of biomarkers of risk, as well as prognostic and therapeutic targets. In order to investigate the miRNAs expression profile in ten tissues of OSCC were characterized based on data generated from high-performance sequencing. Furthermore, by qPCR we assessed the adjacent tissue to the OSCC for four miRNAs. The results showed 17 differentially expressed miRNAs were able to discriminate the tissue without cancer. Among these, we found seven new miRNAs (hsalet- 7c, hsa-miR-10a, hsa-miR-199a, hsa-miR-381, hsa-miR-501, hsa-miR-654 and hsamiR- 941) which are not described in the literature their participation in OSCC. Additionally, we found that the four miRNAs hsa-miR-221, hsa-miR-21, hsa-miR-135b and hsa-miR-29c presented overexpression in the adjacent tissue, confirming the field cancerization effect. The results revealed that these miRNAs are potential biomarkers occurring in OSCC with the ability to identify individuals at high risk of developing this type of cancer, and indicate their utility as potential therapeutic targets.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo desse trabalho foi determinar a prevalência, extensão e severidade da periodontite crônica em pacientes com câncer de boca e/ou orofaringe e verificar se essa forma de doença periodontal é indicadora de risco para essas neoplasias. Trinta e cinco pacientes com câncer de boca e/ou orofaringe, atendidos no Instituto Nacional de Câncer (INCA) e 40 pacientes e/ou acompanhantes do ambulatório do Instituto Nacional de Traumatologia e Ortopedia (INTO), não portadores de neoplasias de boca e/ou orofaringe, foram avaliados por meio de anamnese, exame periodontal e índice de dentes cariados perdidos e obturados (CPOD). A população estudada foi formada predominante por indivíduos do sexo masculino, da raça branca, casados, que cursaram até o ensino fundamental e possuíam renda familiar de até 6 salários mínimos. Não houve diferença estatística significante para esses parâmetros entre os grupos. No grupo caso havia significativamente mais pacientes fumantes e que ingeriam mais bebidas alcoólicas. Pacientes do grupo controle praticavam mais exercícios físicos e tinham o índice de massa corporal (IMC) significantemente mais elevado. O consumo de frutas, legumes e vegetais foi maior para o grupo controle (p>0,05), enquanto o consumo de carne vermelha foi maior no grupo caso (p>0,05). O histórico de casos de câncer na família era baixo em ambos os grupos. O grupo caso apresentou mais sítios com placa e sangramento a sondagem e menos sítios com sangramento gengival. Somente o índice de placa teve diferença estatisticamente significante. O número de dentes presentes era significantemente menor no grupo caso embora não houvesse diferença estatística significante entre os grupos para o índice CPOD. As médias de profundidade de bolsa a sondagem (PBS) e nível de inserção clínica (NIC) foram significantemente maiores para o grupo caso. A prevalência da periodontite crônica generalizada foi de 100% nos pacientes com câncer de boca e ou orofaringe. Oitenta e nove por cento dos pacientes do grupo caso apresentaram periodontite crônica severa. A extensão ou a severidade da periodontite crônica permaneceram indicadores de risco para o câncer de boca e/ou orofaringe independentes mesmo após os ajustes para fatores de confusão, álcool e fumo. / The aim of this study was to determine the prevalence, extension and severity of chronic periodontitis in patients with oral cavity and/or oropharynx cancer, as well as to verify whether this form of periodontal disease is a risk indicator for these neoplasms. Thirty five patients with oral cavity and/or oropharynx cancer from the National Cancer Institute (INCA) Hospital as well as 40 outpatients and/or their companions from the National Institute of Traumatology (INTO) were evaluated by means of anamnesis, periodontal examination and decayed, extracted and filled teeth index (DMFT). The predominant individual of the population in study was male, white, married, had completed grammar school and had a family income of up to 6 times the Brazilian minimum wage. There were no significant statistical differences for these parameters between the case and control groups. The case group had significantly more patients who smoked regularly and their individuals ingested more alcoholic beverages. Patients of the control group practiced more physical activities and had a significantly higher body mass index (BMI). The consumption of fruits and vegetables was higher in the control group (p>0,05) while red meat intake was higher in the case group (p>0,05). The family history for cancer was low in both groups. The case group presented more sites with plaque and bleeding on probing but less sites with gingival bleeding. Only the difference in the plaque index was statistically significant. The number of teeth present in the mouth was significantly lower in the case group although there was no statistically significant difference in the DMTF index between the groups. The mean probing pocket depth and clinical attachment level were significantly higher for the case group. The prevalence of chronic generalized periodontitis was 100% in patients with oral cavity and/or oropharynx cancer. Eighty nine percent of the patients in the case group presented chronic severe periodontitis. The extension and severity of chronic periodontitis remained as a risk indicator for oral cavity and/or oropharynx cancer even after the adjustments for confusion factors, i.e. smoke and alcohol.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo desse trabalho foi determinar a prevalência, extensão e severidade da periodontite crônica em pacientes com câncer de boca e/ou orofaringe e verificar se essa forma de doença periodontal é indicadora de risco para essas neoplasias. Trinta e cinco pacientes com câncer de boca e/ou orofaringe, atendidos no Instituto Nacional de Câncer (INCA) e 40 pacientes e/ou acompanhantes do ambulatório do Instituto Nacional de Traumatologia e Ortopedia (INTO), não portadores de neoplasias de boca e/ou orofaringe, foram avaliados por meio de anamnese, exame periodontal e índice de dentes cariados perdidos e obturados (CPOD). A população estudada foi formada predominante por indivíduos do sexo masculino, da raça branca, casados, que cursaram até o ensino fundamental e possuíam renda familiar de até 6 salários mínimos. Não houve diferença estatística significante para esses parâmetros entre os grupos. No grupo caso havia significativamente mais pacientes fumantes e que ingeriam mais bebidas alcoólicas. Pacientes do grupo controle praticavam mais exercícios físicos e tinham o índice de massa corporal (IMC) significantemente mais elevado. O consumo de frutas, legumes e vegetais foi maior para o grupo controle (p>0,05), enquanto o consumo de carne vermelha foi maior no grupo caso (p>0,05). O histórico de casos de câncer na família era baixo em ambos os grupos. O grupo caso apresentou mais sítios com placa e sangramento a sondagem e menos sítios com sangramento gengival. Somente o índice de placa teve diferença estatisticamente significante. O número de dentes presentes era significantemente menor no grupo caso embora não houvesse diferença estatística significante entre os grupos para o índice CPOD. As médias de profundidade de bolsa a sondagem (PBS) e nível de inserção clínica (NIC) foram significantemente maiores para o grupo caso. A prevalência da periodontite crônica generalizada foi de 100% nos pacientes com câncer de boca e ou orofaringe. Oitenta e nove por cento dos pacientes do grupo caso apresentaram periodontite crônica severa. A extensão ou a severidade da periodontite crônica permaneceram indicadores de risco para o câncer de boca e/ou orofaringe independentes mesmo após os ajustes para fatores de confusão, álcool e fumo. / The aim of this study was to determine the prevalence, extension and severity of chronic periodontitis in patients with oral cavity and/or oropharynx cancer, as well as to verify whether this form of periodontal disease is a risk indicator for these neoplasms. Thirty five patients with oral cavity and/or oropharynx cancer from the National Cancer Institute (INCA) Hospital as well as 40 outpatients and/or their companions from the National Institute of Traumatology (INTO) were evaluated by means of anamnesis, periodontal examination and decayed, extracted and filled teeth index (DMFT). The predominant individual of the population in study was male, white, married, had completed grammar school and had a family income of up to 6 times the Brazilian minimum wage. There were no significant statistical differences for these parameters between the case and control groups. The case group had significantly more patients who smoked regularly and their individuals ingested more alcoholic beverages. Patients of the control group practiced more physical activities and had a significantly higher body mass index (BMI). The consumption of fruits and vegetables was higher in the control group (p>0,05) while red meat intake was higher in the case group (p>0,05). The family history for cancer was low in both groups. The case group presented more sites with plaque and bleeding on probing but less sites with gingival bleeding. Only the difference in the plaque index was statistically significant. The number of teeth present in the mouth was significantly lower in the case group although there was no statistically significant difference in the DMTF index between the groups. The mean probing pocket depth and clinical attachment level were significantly higher for the case group. The prevalence of chronic generalized periodontitis was 100% in patients with oral cavity and/or oropharynx cancer. Eighty nine percent of the patients in the case group presented chronic severe periodontitis. The extension and severity of chronic periodontitis remained as a risk indicator for oral cavity and/or oropharynx cancer even after the adjustments for confusion factors, i.e. smoke and alcohol.

Quatro décadas de pesquisas mostraram que muitos mecanismos inflamatórios estão intrinsecamente ligados ao desenvolvimento e manutenção do câncer, e ainda, que as citocinas inflamatórias exercem papel primordial nessa relação. Os anti-inflamatórios não esteroides (AINEs) podem reduzir o desenvolvimento neoplásico por afetar a produção de citocinas inflamatórias pelas células neoplásicas. No entanto, até o momento não foi bem definido se o tratamento com AINEs é capaz de modular a expressão de citocinas inflamatórias por células do carcinoma epidermoide oral (CEO). O objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão de citocinas inflamatórias em linhagens celulares de CEO após tratamento com ácido acetilsalicílico (AAS) e celecoxibe (CLX). Foi realizado screening da expressão de 84 citocinas e quimiocinas, através de PCR array, das linhagens SCC4, 9 e 25 tratadas com doses de AAS e CLX próximas às concentrações plasmáticas dos fármacos em humanos. Os resultados mostraram que AAS e CLX modularam a expressão de citocinas e que as linhagens responderam de maneira diferente aos tratamentos. Observou-se aumento de expressão de citocinas pró-inflamatórias como a IL-1?, IL-8 e TNF na SCC9 e 25, assim como diminuição de expressão de ACKR4 e CXCL10 na SCC4 e 9. / Four decades of research have shown that many inflammatory mechanisms are intrinsically linked to the development and maintenance of cancer and that inflammatory cytokines play pivotal role in this association. Non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) can reduce neoplastic growth on affecting the production of inflammatory cytokines by the neoplastic cells. So far, it is not well established if the treatment with NSAIDs can modulate the expression of inflammatory cytokines by OSCC cells. The objective of this study was to evaluate the expression of inflammatory cytokines by OSCC cell lines after treatment with acetylsalicylic acid (ASA) and celecoxib (CLX). Eighty-four cytokines and chemokines mRNA expression were screened by PCR array on SCC4, 9 and 25 cell lines treated with ASA and CLX at plasma concentrations in humans. The results showed that ASA and CLX modulate the expression of cytokines with all cell lines responding differently to the treatments. Increased expression of proinflammatory cytokines such as IL-1?, IL-8 and TNF in SCC9 and 25, and reduced expression of ACKR4 and CXCL10 in SCC4 and 9, was observed. Thus it follows that the treatments of lines SCC4, SCC9 and SCC25 with ASA and CLX at the next plasma concentrations in humans are able to modulate the gene expression of inflammatory cytokines.