Thèse d'exercice : Médecine : Nancy 1 : 2009. / Titre provenant de l'écran-titre.

Thèse Médecine Paris 1818 numéro 163.

Th.--Méd.--Nancy 1, 1984. N°: 41.

Thèse--Méd.--Reims, 1973. N°: N° 33. / Bibliogr. ff. 109-144.

Th.--Méd.--Nancy 1, 1983. N°: 111.

Reproduction de : Thèse d'exercice : Médecine : Nancy 1 : 2003. / Titre provenant de l'écran-titre.

A partir des données de 2 études de population menées chez des sujets âgés, non institutionnalisés, respectivement l’étude des 3 Cités et l’étude EVA (Epidémiologie du Vieillissement Artériel), nos objectifs étaient 1) de revisiter le rôle de l’athérosclérose carotidienne dans son association avec les évènements coronaires et avec les démences, en dissociant précisément l’athérome (i.e. les plaques carotidiennes ; PC) de l’hypertrophie artérielle (i.e. l’épaississement diffus de l’intima-média mesuré au niveau de l’artère carotide commune ; EIM-ACC) et 2) dans un objectif plus mécanistique, d’analyser le lien différentiel entre l’athérome, l’hypertrophie artérielle et l’un des polymorphismes nucléotidiques (rs1333049) les plus associés à la maladie coronaire et situé sur le chromosome 9 (locus 9p21).Dans un 1er travail, nous avons montré que les PC étaient associées à une augmentation du risque d’évènement coronaire à 6 ans, à l’inverse de l’EIM-ACC qui n’était pas associée au risque coronaire. De plus l’ajout des PC à un modèle comprenant les FDRCV améliorait significativement la prédiction du risque coronaire avec près de 12% des sujets correctement reclassés en terme de risque prédit (NRI = 11,7% ; IC95% = 3,1%-20,0%). Dans la seconde analyse (3C et EVA), nous avons mis en évidence une association spécifique entre les PC et le polymorphisme nucléotidique rs1333049 (OR allèle C = 1,24 ; IC 95% = 1,13-1,36). Chez les sujets de la cohorte EVA, l’allèle C était également associé à la progression des plaques carotidiennes à 4 ans, mais pas à la progression de l’EIM. Dans le dernier volet de cette thèse et de manière similaire aux évènements coronaires, il existait une association spécifiques entre les PC et la survenue de démences vasculaires/mixtes à 7 ans (HR ≥ 2 sites avec plaques vs. 0 = 1,93 ; IC 95% = 1,13-3,28). Aucune association n’était retrouvée avec l’EIM. L’ajout des plaques carotidiennes à un modèle comprenant les FDR CV et de démence permettait de reclasser correctement 43% des sujets en terme de risque de DVasc (NRI=43,0% ; IC95% = 20,2-66,2). Enfin, dans le cadre de cette thèse, nous participons à un travail collaboratif portant sur la progression individuelle de l’EIM au cours du temps en association avec la survenue d’évènements cardiovasculaires. Les données de EVA ont été intégrées à ce projet. Un premier résultat de cette méta-analyse était que la progression annuelle de l’EIM-ACC n’était associée à aucun des évènements cardiovasculaires étudiés. Au total, les résultats de cette thèse indiquent la présence d’une association différentielle des plaques carotidiennes et de l’EIM-ACC avec les évènements coronaires et les démences. Les implications sur le plan de la prévention et en termes de cibles thérapeutiques potentielles sont discutées dans cette thèse. / Using data from 2 large French cohorts of non-institutionalized older adults, namely the Three-City Study (3C) and the Vascular Aging Study (EVA), we aimed 1) to explore the respective contribution of ultrasound detected carotid plaques (e.g. atherosclerosis) and diffuse common carotid intima-media thickness (CCA-IMT) (e.g. arteriosclerosis) to incident coronary events and dementia and 2) to assess the differential relationship between carotid plaques, CCA-IMT and the coronary heart disease (CHD)-associated single polymorphism nucleotide (rs1333049) on chromosome 9p21. First, we showed that carotid plaques but not CCA-IMT were associated with an increased risk of 6-year CHD. Furthermore, carotid plaques significantly improved CHD risk prediction beyond traditional CV risk factors, as nearly 12% of the participants were correctly reclassified in terms of predicted risk(Net Reclassification Improvement (NRI) = 11.7%; 95% CI = 3.1%-20.0%). In our second analysis, including subjects from both 3C and EVA, we found a specific association between carotid plaques and the rs1333049 genotype (OR C allele at risk= 1.24; 95% CI = 1.13-1.36). Moreover, among the EVA participants, the rs1333049 genotype was also associated with carotid plaques progression over 4 years, but not with CCA-IMT progression. Thirdly, we showed a specific relationship between carotid plaques and the occurrence of 7-year vascular/mixed dementia (VaD) (HR ≥ 2 sites with plaques vs. 0 = 1.93; 95% CI = 1.13-3.28). No relationship was found for CCA-IMT. Furthermore, adding carotid plaques to a model including vascular and dementia risk factors resulted in a significant continuous NRI of 43.0% (95% CI = 20.2%-66.2%) for VaD. At last, in line with the present work, we currently participate through the EVA Study to a collaborative project on the relationship between individual IMT progression over time and cardiovascular risk. A first result recently published, showed the absence of relationship between yearly IMT progression and cardiovascular events. In summary, the present work indicates that carotid plaques and CCA-IMT are differentially associated with coronary events and vascular/mixed dementia. Potential implications of our results regarding primary prevention and therapeutic targets are discussed in this thesis.

La prévalence de l'obésité suit une progression sans précédent dans les pays industrialisés et augmente dramatiquement la morbimortalité cardiovasculaire. Le développement excessif du tissu adipeux a un impact direct sur le tissu myocardique au travers des peptides et cytokines qu'il sécrète et un impact indirect au travers de l'augmentation de la volémie. Ces changements induisent des modifications de l'expression génique dans les cardiomyocytes et les fibroblastes cardiaques. Par exemple, l'expression du récepteur M2 diminue dans l'OD de chiens rendus obèses hypertendus.<br />Dans ce modèle canin, nous avons montré dans la voie M2/eNOS qu'il existait des régulations compensatoires au niveau de la eNOS. Nous avons également montré que l'adrénomedulline, peptide impliqué dans l'homéostasie tensionnelle et sécrété par le tissu adipeux, détermine la surexpression compensatoire du récepteur M2, dans le modèle de cardiomyocytes de la lignée P19.<br />Nous avons entrepris une étude globale au niveau du transcriptome dans le but d'identifier l'ensemble des modifications induites dans le cœur de l'obèse. Ces études, dans le modèle de chien obèse hypertendu, puis chez l'Homme ont montré que le cœur de l'obèse modifiait très précocement l'expression de ses gènes et qu'il avait un profil transcriptionnel unique. Ces régulations convergent notamment vers la voie TGF Β et la voie Wnt, toutes deux normalement impliquées dans la cardiogénèse. Enfin, ces travaux ont initié l'étude de gènes nouveaux inconnus (PPR1 & PPR2).

The prevalence of congenital heart defects is approximately 1% of all births, yet the causative factors remain largely uncharacterized. For the majority, the physiopathogenesis is believed to be multifactorial, hindering the identification of causative factors. However, several genes have been identified for septation defects that are part of a syndrome. Yet, in non-syndromic septal defects it has been difficult to identify predisposing genetic factors. When I started this thesis project, only one gene had been identified to be responsible for non-syndromic septal defects. We collected families in which two or more individuals were affected with non-syndromic cardiac septal defects. In five families, arrhythmia was associated with ASD/VSD. We screened the CSX/NKX2-5 gene, previously identified to be responsible for ASD and PR prolongation, and identified 3 novel missense mutations. In parallel, we screened the CSX/NKX2-5 gene in sporadic and familial cases of other cardiopathies, but additional mutations were not found. Substitutions in this gene seem to be a rare cause of cardiopathies without conduction defect. The absence of CSX/NKX2-5 mutations in two families suggest locus heterogeneity. We also examined whether the VEGF gene, which modifies the cardiac phenotype in del22q11 patients, could be responsible for the phenotypic variability observed in the three CSX/NKX2-5 mutated families. No statistically significant association was observed. We also evaluated the role of five candidate genes (GATA4, FOG2, CRELD1, HEY2 and BMP4) in a series of 66 patients affected with structural cardiac malformations, especially septal defects. Twenty nine nucleotide changes were identified. Based on their presence on dbSNP, dbEST and their position in multiple alignements, they were not considered to be mutations. However, we cannot exclude that some of them have an effect on RNA stability or abnormal splicing. We conclude that none of these five genes is a major cause of structural cardiac defects in man. Finally, we studied the genetic basis of heterotaxy. Among the collected families, there was one which was consanguineous, composed of two unaffected parents and three children, two of which presented situs inversus with or without Kartagener syndrome. We hypothezised an autosomal recessive mode of inheritance. Genotype analysis with polymorphic markers did not show linkage to known candidate genes or to loci causing laterality disorders. Array CGH did not detect duplication or microdeletion. Genome wide screening using 10K Affymetrix SNP chips allowed the identification of two autozygous regions, one in chromosome 1 and the other in chromosome 7. Interestingly, the kinesin associated protein 3 (KIF3AP) gene is located in chromosome 1q23.1-1q32.1. We screened this gene for mutations in all members of the family and excluded that mutations in this gene caused the situs inversus/Kartagener syndrome. In conclusion, we identified three new mutations in the CSX/NKX2-5 gene, evaluated the role of five candidate genes in structural cardiac malformations and identified two new candidate loci in situs inversus/Kartagener syndrome. / Les anomalies cardiaques ont une fréquence de 1% chez les nouveaux-nés. Leurs causes peuvent être multiples, mais pour la plupart l'étiologie n'a pas encore été élucidée. Cependant plusieurs gènes ont déjà été identifiés dans les défauts de septation non-syndromiques. En ce qui concerne les anomalies touchant la septation et ne faisant pas partie d'un syndrome, très peu est encore connu. Lorsque j'ai commencé mon travail de thèse, un seul gène était impliqué dans les défauts de septation non-syndromiques. Parmi les familles collectées, cinq familles présentant des défauts de septation associés à des troubles de conduction nous ont particulièrement intéressés. Nous avons criblé le gène CSX/NKX2-5, dont des mutations avaient été décrites auparavant comme étant responsables de CIA associées à des prolongements de l'intervalle PR. Ceci nous a permis d'identifier trois nouvelles mutations dans le gène CSX/NKX2-5. En parallèle, nous avons étudié la fréquence des mutations dans ce gène parmi des patients sporadiques et des cas familiaux atteints de diverses cardiopathies. Comme aucune nouvelle mutation n'a été identifiée, ce gène ne semble donc pas être fréquemment impliqué dans les cardiopathies non associées à des troubles de conduction. L'absence de mutations dans les deux autres familles suggère une hétérogénéité de locus. Nous avons de plus étudié si le gène VEGF, qui modifie le phénotype cardiaque chez les patients atteints du syndrome de DiGeorge, pouvait être responsable de la variabilité phénotypique observée dans les trois familles ayant des mutations dans le gène CSX/NKX2-5. Aucune association significative n'a été observée. Nous avons aussi évalué l'implication de cinq gènes candidats (GATA4, FOG2, CRELD1, HEY2 et BMP4) dans une série de 66 patients atteints de malformations cardiaques structurelles, constituées en grande partie par des défauts de septation. Vingt neuf changements nucléotidiques ont été identifiés. Aucun de ces changements nucléotidiques n'a été considéré comme étant une mutation sur base de leur présence dans les banques de données dbSNP et/ou dbEST. De même l'exclusion s'est basée sur le fait que les changements en acide aminé étaient localisés dans un domaine conservé. Nous ne pouvons cependant pas exclure que les variations des régions non codantes ou exons non transcrits, n'induisent pas une instabilité au niveau de l'ARN ou un épissage anormal. Cette étude nous a permis de conclure que les cinq gènes candidats n'ont aucune implication majeure dans les malformations cardiaques structurelles chez l'homme. La dernière partie du travail a été consacrée à l'étude de l'hétérotaxie. Parmi toutes les familles contactées, une famille consanguine présentait un intérêt particulier. Les parents n'étaient pas atteints et deux de leur trois enfants présentaient un situs inversus ou un syndrome de Kartagener. Sur base de ces données, nous avons émis l'hypothèse d'un mode de transmission autosmique récessif. Tous les gènes et loci connus, de même que des nouveaux candidats ont été exclus à l'aide du génotypage de marqueurs polymorphiques. L'analyse par array CGH n'a pas démontré la présence de microdélétion ou d'amplification. Nous avons donc entrepris un criblage du génome entier sur puce à SNP d'Affymetrix. Ceci nous a permis d'identifier deux régions homozygotes candidates, l'une dans le chromosome 1 et l'autre dans le chromosome 7. Un gène candidat, KIF3AP, situé dans le chromosome 1q23.1-1q32.1 et codant une protéine qui s'associe à la kinésine a été criblé pour tous les membres de la famille. Nous avons exclu l'implication de ce gène dans le situs inversus et le syndrome de Kartagener de la famille étudiée. En conclusion, nous avons identifié trois nouvelles mutations dans le gène CSX/NKX2-5, étudié l'implication de cinq gènes candidats dans des malformations cardiaques structurelles et finalement identifié deux nouveaux loci associés au situs inversus et au syndrome de Kartagener.

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A necessidade do entendimento do processo de remodelação cardíaca tem acarretado em aumento do número de pesquisas envolvendo terapias biológicas. Neste contexto, peixes teleósteos emergem como opção de modelo experimental, pois possuem homologia morfofuncional e imunológica com mamíferos. Tilápias-do-Nilo (Oreochromis niloticus) já vêm sendo empregadas no estudo de diversas doenças que afetam seres humanos. Com a presente pesquisa, objetivou-se desenvolver técnica de acesso videocirúrgico e induzir lesão cardíaca mecânica, em tilápias-do-Nilo; avaliar a eficácia da metadona no controle da dor associada à lesão; e caracterizar os mecanismos de remodelação do miocárdio ventricular, empregando-se avaliações por eletrocardiograma e por microscopias. As avaliações foram conduzidas antes, 1 h depois, e transcorridos 7, 14, 30, 60 e 90 dias da lesão cardíaca. O acesso à cavidade celomática foi realizado utilizando-se um punch de biopsia de 3 mm, permitindo a introdução de endoscópio para posterior amputação do ápice do coração. O procedimento foi executado rapidamente e com baixo índice de mortalidade transoperatória (5,60%) e pós-operatória (3,38%). Aproximadamente 6% de tecido cardíaco, apresentando epicárdio e miocárdio, foi removido com a pinça de biopsia, sendo que a videocirurgia permitiu boa visibilização interna, padronização do tamanho da lesão e alta precisão. A avaliação da analgesia fornecida pela metadona foi realizada por meio de parâmetros fisiológicos e comportamentais. Os resultados demonstraram que, na dose empregada, a metadona não possuiu efeito analgésico em tilápias-do-Nilo, contudo, o tempo de recuperação da anestesia foi maior entre os animais que receberam metadona, sugerindo um possível efeito sedativo do fármaco. Os ventrículos da tilápia-do-Nilo, após lesão, não apresentaram evidências de regeneração e evoluíram para um processo de remodelamento caracterizado pelos espessamentos das paredes do ventrículo e do epicárdio, pela hipertrofia dos cardiomióticos, e por alterações em atividade elétrica. Mudanças no estado ordenado de agregação do colágeno intersticial, no tamanho e no formato dos núcleos dos cardiomiócitos, e na supraorganização da cromatina nuclear dos cardiomiócitos, bem como presença de células poliplóides, de células necróticas e de células apoptóticas foram observadas. Em conclusão, a tilápia-do-Nilo parece ser um bom organismo modelo para estudos em cardiologia experimental, uma vez que seu ventrículo, após amputação do ápice do coração, acumula muitas das alterações vistas em corações de pacientes humanos cardiopatas. Vantagens adicionais referentes ao emprego de tilápias-do-Nilo em pesquisas incluem o tamanho dos animais, o que possibilita a utilização de técnicas menos onerosas; e a facilidade de alojamento e de manutenção de um grande número de indivíduos num espaço reduzido, com baixa taxa de mortalidade. / Cardiovascular disease are a public health big problem. The need for understanding cardiac repair mechanism has increased the number of researches biologic therapy field. In this context, teleost fish show as a experimental model, as they have morpho-functional and immunologic homology whit mammals. Nile tilapia (Oreochromis niloticus) has been used to study several diseases that affect humans. The present study aimed to develop a video surgery access and mechanically induce cardiac injury in Nile tilapia; to evaluate the analgesic activity of methadone in effectively control the pain associated with the injury; and characterize myocardial repair mechanisms by microscopy and electrocardiogram analysis. Data were recorded before cardiac injury and then 1 hour, 7, 14, 30, 60 and 90 days after cardiac injury. The access to coelomatic cavity was made with a 3-mm biopsy punch, allowing the passage of an endoscope for amputation of the cardiac apex. The procedure was quickly performed with intraoperative (5.6%) and post-operatory (3.38%) low mortality rates. Approximately 6% cardiac tissue, including epicardium and myocardium were removed with the biopsy forceps, once video surgery allowed good visualization, standard lesion areas and great precision. To evaluate the analgesic effect of methadone, physiological and behavioral parameters were recorded. Results show that in the dose used, methadone did not show analgesic effect in Nile tilapia. However, recovery time was longer in fish that received methadone, suggesting a sedative effect of the drug in the specie. The ventricles of Nile tilapia, after lesion, did not showed any evidence of regeneration, progressing for a remodeling process, characterized by a thicker ventricle wall and epicardium, by cardiomiocytes hypertrophy, and changes in electrical activity. Changes in the interstitial collagen aggregation state, size and shape of cardiomiocytes nuclei, and in the supra-organization of nuclear chromatin of cardiomiocytes, as well as presence of ploydy, necrotic and apoptotic cells, were also oberved It was concluded that Nile tilapia seems to be a good experimental model organism for experimental cardiology studies, once its ventricle, after have its apex amputated, shows many of the alterations observed in hearts of humans cardiac patients. Additional advantages regarding the use of Nile tilapia in research include the size of the animals, that allows the use of cheaper techniques; and the practical way to keep a great number of animals in small spaces, with low mortality rates.