Bakgrund: Operationer kan pågå under många timmar där instrumenten inte är täckta med steril duk och är utsatta för partiklar som finns i luften på operationssalen. Dessa instrument byts inte ut eftersom det inte finns några riktlinjer eller rutiner på detta. Syfte: Undersöka antal CFU på instrumentborden från uppdukning till att operationsingreppet är avslutad. Samt undersöka sambandet mellan antal bakterier och antal personer, antal dörröppningar, personalens klädsel och den tid som blodagarplattorna har varit framme. Metod: Kvantitativ observationsstudie med indirekt och direkt observation. Mätningarna har gjorts med tre stycken blodagarplattor av storlek 14 centimeter i diameter på ett sjukhus i Mellansverige. Observationer har även gjorts på antal personer, dörröppningar, personalens klädsel. Resultat: Resultatet visar att det finns en tydlig ökning av CFU desto längre tiden går. Blodagarplattor C har ett signifikant högre antal CFU än blodagarplattor A (p= 0,018) samt mot blodagarplattor B (p = 0,00). Den bakterien som förekom på flest blodagarplattor var KNS. Antal personer som fanns på operationssalen har en påverkan på antal CFU som fanns på blodagarplatta C (p=0,047). Däremot fanns inget samband mellan antal dörröppningar, personalens klädsel och antal CFU på blodagarplattorna. Slutsats: Studien visar en tydlig ökning av CFU desto längre tiden går. På samma sätt kan vi anta att det som har hamnat på plattorna även har hamnat på instrumenten samt material under observationstiden.

I vår framtida yrkesprofession läggs stor vikt på de hygieniska aspekterna, där operationsklädernas material och utformning spelar stor roll. Kunskapen om att förhindra bakteriebärande partiklar att spridas ut i luften och vidare till operationssåret är en förutsättning för ett professionellt vårdande.Syftet är att utifrån vetenskaplig litteratur belysa hur operationsklädseln och andra faktorer tillsammans kan reducera antalet bakteriebärande partiklar vid infektionskänslig ortopedisk implantatkirurgi. Vidare är vårt syfte att ta reda på vilka grunder utarbetandet av en medicinsk riktlinje, för en ortopedisk operationsavdelning i västra Sverige, vilar på.Uppsatsen bygger på en litteraturstudie av artiklar med kvantitativ metod tillsammans med en intervju av en ansvarig på en ortopedklinik i västra Sverige. Artiklar söktes i databaser, genom manuell sökning och på Internet. Flemming (1998) har använts för formulering av syfte och problemformulering. Vi har använt oss av Evans (2003) för att analysera litteraturen och Burnard (1991) för att analysera intervjun.I resultatet visas att operationsklädselns material och design spelar stor roll tillsammans med ventilationen, för att hålla halten av bakteriebärande partiklar på en låg nivå. En låg nivå av de bakteriebärande partiklarna är en förutsättning för att undvika eventuella postoperativa sårinfektioner.I diskussionen diskuteras samband mellan operationskläder och postoperativa, vårdrelaterade sårinfektioner. Intervjuns för- och nackdelar tas i beaktande och grunderna för introducering av en ny medicinsk riktlinje diskuteras. / <p>Program: Specialistsjuksköterskeutbildning med inriktning mot operationssjukvård</p><p>Uppsatsnivå: D</p>

The first definitive haematopoietic stem cells (HSCs) produced during embryonic development are generated from a specialised subset of endothelial cells known as haemogenic endothelium. Recently, it was reported that Gata3 plays a dual role in the development of sympathetic nervous system and haematopoietic system. In fact, Gata3 has proven to be crucial for the production of HSCs through regulation of catecholamine production from the co-developing sympathetic nervous system. Also, it was recently shown that Gata3 is expressed in the haemogenic endothelium and haematopoietic progenitor cells. Here, I will specifically examine the role of Gata3 in the production of HSCs; if it is expressed and plays a role in the precursors from which HSCs arise. Using a Gata3-GFP reporter mouse line, we found that Gata3 is expressed in various cell types in the HSCs microenvironment, including mesenchymal cells, endothelial cells, haematopoietic cells and sympathetic nervous system, and this expression was stage dependant. In the endothelial cells, we have found that the haemogenic endothelium activity is enriched in Gata3 expressing cells. Within the haematopoietic cells, we have found that Gata3 marks a specific stage along the developmental pathway towards the generation of definitive haematopoietic stem cells, and that Gata3 expressing haematopoietic cells are enriched for the most immature and stem cell like progenitors. Moreover, Gata3 will be specifically knocked out in haemogenic endothelial cells to determine whether it plays an essential role in the production of HSCs from the endothelium using the Vec-Cre system. We found that Gata3 within the haemogenic endothelium plays a major role in haematopoietic progenitors formation, and possibly haematopoietic stem cell formation. Finally, we used molecular assay (RNA seq) to identify the role of Gata3 in the haematopoietic stem cell microenvironment and found that Gata3 plays a major role in the development and differentiation of various cells and systems, and implicated Gata3 as cell cycle regulator. In summary, we found that Gata3 expressing cells is enriched for haemogenic endothelium, crucial for the haematopoietic progenitors formation, plays and important role in endothelial to haematopoietic transition, and plays a key developmental role in both haematopoietic stem cell and its microenvironment.

No description available.

No description available.

Brucella causes undulant fever in humans and uterine and systemic infection leading to abortions in domestic animals and wild life. For the acquisition of iron in mammalian hosts, species of Brucella are known to produce two siderophores, 2, 3-dihydroxy benzoic acid (2, 3-DHBA) and brucebactin. Inability to synthesize of 2, 3-DHBA affects the ability of pathogen to metabolize erythritol, replicate in trophoblast cells and cause abortion in pregnant ruminant host. The entF gene has been implicated in the unresolved pathway allowing brucebactin biosynthesis in Brucella. The research effort presented in this thesis tries to relate the role of entF in iron acquisition and potential relation with erythritol metabolism by wild type B. abortus 2308. An entF deletion mutant (BAN1) of B. abortus 2308, generated using cre-lox methodology was found to be growth inhibited in iron minimal media compared to wild type strain. Growth inhibition was further enhanced with the addition of an iron chelator or 0.1% erythritol. Compared to wild type strain, no growth inhibition of BAN1 mutant was found in murine J774A.1 macrophages, which suggests that Brucella could acquire iron inside mammalian cells. The entF gene complemented mutant strains of BAN1 (BAN2A and BAN2B) were found to be intermediate in their ability to grow in iron minimal media supplemented with 0.0.05% erythritol, when compared to wild type and BAN1 strain. The results from the present thesis demonstrate that entF gene plays an important role in iron acquisition and erythritol metabolism by B. abortus 2308 under iron limiting conditions. / Master of Science

Vårdrelaterade infektioner (VRI) är ett ökande problem inom hälso- och sjukvården. På neonatalavdelningen på Länssjukhuset Ryhov i Jönköping har det förekommit inkonsekventa odlingsresultat vid misstänkt VRI orsakad av Staphylococcus aureus. Att förebygga VRI samt värna om patientsäkerheten kräver känsliga och pålitliga laboratorieanalyser. Syftet med studien var att bestämma och jämföra lägsta detektionsintervall för metoderna odling och qPCR med och utan anrikning i MAMSA-buljong, av S. aureus. Seriespädningar av S. aureus tillreddes och koncentrationer för ursprungsrören uträknades via viable count (VC). Odling på blodagar samt qPCR med och utan anrikning i MAMSA-buljong utfördes. Resultaten användes för att bestämma ett lägsta detektionsintervall. Odling gav ett lägsta detektionsintervall mellan 0,5–62 CFU/ml, och qPCR mellan 6400–140 000 CFU/ml. Anrikning med MAMSA-buljong innan qPCR-analys gav ett lägsta detektionsintervall mellan 0,6–140 CFU/ml. För detektion via odling räcker enstaka till tiotals CFU/ml i analysprovet. Vid qPCR behövs tusentals till hundratusentals CFU/ml i analysprovet, men vid qPCR med MAMSA-anrikning kan detektionsintervallet sänkas till nivåer jämförbara med odling. För att kunna applicera studiens resultat på den laborativa verksamheten krävs vidare studier med fler bakteriearter och replikat. / Hospital-acquired infections (HAI) are an increasing problem in health care facilities. In the neonatal intensive care unit at Länssjukhuset Ryhov in Jönköping, inconsistent cultivation results have been observed for suspected HAI caused by Staphylococcus aureus. To prevent HAI and to maintain patient safety, sensitive and reliable laboratory tests are essential. The aim of the study was to determine and compare the lowest range of detection for cultivation and qPCR with and without enrichment in MAMSA broth, for S. aureus. Serial dilutions of S. aureus were made, and the original concentration was determined through viable count. Cultivation on blood agar and qPCR with and without enrichment in MAMSA broth was performed. The results were used to determine a minimum detection range. For cultivation, a minimum detection range of 0,5–62 CFU/ml was determined and for qPCR a range of 6400–140 000 CFU/ml. For qPCR after enrichment in MAMSA broth, a lowest detection range of 0,6–140 CFU/ml was determined. For detection with cultivation single to tenths of CFU/ml were needed in the sample. For qPCR thousands to tenths of thousands of CFU/ml were needed. For qPCR with enrichment in MAMSA broth the detection range could be lowered to levels comparable with cultivation. For clinical application, further studies are needed with more bacterial species and replicates.

Bakgrund: Generellt genomförs operationer på en operationssal med anpassade förutsättningar samtsterila och aseptiska förhållanden. Syftet är att bibehålla den rekommenderade mikrobiologiskarenhetsgraden i luften och förebygga postoperativa infektioner. Bakteriebärande partiklar i luften kanuttryckas i colony forming units per kubikmeter (CFU/m³). Mindre operationer genomförs även påmottagningsrum men det saknas kunskap om CFU/m³ i dessa vårdmiljöer. Syfte: Syftet var att jämföra CFU/m³ i en operationssal och ett mottagningsrum vid polikliniskaoperationer samt kartlägga faktorer som kan påverka CFU/m³. Metod: Studien är en icke-experimentell tvärsnittsstudie med kvantitativ metod och observationer avkvalitativa data. Totalt genomfördes 20 aktiva luftmätningar under pågående operationer, varav tio ien operationssal samt tio i ett mottagningsrum. Data analyserades med deskriptiv och analytiskstatistik. För att beskriva skillnader mellan de två grupperna valdes det icke parametriska MannWhitney U test samt Spearman's rangkorrelation för analys av samband mellan CFU/m³ och övrigavariabler. Multivariabel regression användes för att undersöka vilka av variablerna som hade enoberoende effekt på CFU-värdet.Resultat: Av 20 aktiva luftmätningar påvisades ett högre CFU/m³ (p &lt;0,001) och en högrerumstemperatur (p &lt;0,001) i mottagningsrum jämförelsevis med operationssal. Vårdmiljön hade enoberoende effekt på CFU-värdet (p &lt;0,05). Variablerna antal personer och antal dörröppningar bidroginte signifikant till regressionsmodellen. Slutsats: Följande studie kan konstatera att CFU/m³ var högre i mottagningsrummet än ioperationssalen. Huruvida CFU-värdet har en klinisk betydelse för postoperativa infektioner eftermindre polikliniska operationer i mottagningsrum behöver undersökas i framtida forskning. / Bakgrund: Verksamheten utförs i allmänhet i en operationssal med anpassade förhållanden, samt sterila och aseptiska förhållanden. Att upprätthålla mikrobiologisk renhet i luften är ett sätt att förhindra infektioner på operationsstället (SSI). Luftburna bakteriepartiklar uttrycks i kolonibildande ledningar per kubikmeter (CFU/m³). Mindre kirurgiska ingrepp utförs också i klinikbaserade procedurrum men det saknas kunskap om nivåerna av CFU/m³. Syfte: Syftet var att jämföra CFU/m³ i en operationssal med ett klinikbaserat ingrepp som utförde kirurgiska ingrepp och undersöka faktorer som kan påverka CFU/m³. Metoder: En ickeexperimental tvärsnittsstudie med en kvantitativ metod och observation av kvalificerade data utfördes. Totalt genomfördes 20 aktiva luftprovtagningar under mindre kirurgiska ingrepp, tio i varje driftsmiljö. Data analyserades med beskrivande och analytisk statistik. Mann-Whitney U-test tillämpades för att jämföra de två grupperna. Spearmans rank-korrelationmeasured korrelationen och flera regressionsanalys användes för att förstå effekterna av två eller flera oberoende variabler på CFU/m³. Resultat: En högre CFU/m³ (p&lt;0,001) och en rumstemperatur (p&lt;0,001) upptäcktes i klinikenbaserade procedurrummet jämfört med operationssalen. Driftsmiljön hade en oberoende på CFU/m³ (s&lt;0,05). Variabler som antal personer och dörröppningar bidrog inte obetydligt. Slutsatser: Denna studie kan fastställa att CFU/m³ var högre i den klinik-baserade förfarandet roomversus operationssalen. Ytterligare forskning behövs för att undersöka om CFU/m³ har en klinisk betydelse för SSI i klinikbaserade procedurrum.

A utilização das células progenitoras hematopoéticas (CPH) obtidas do sangue de cordão umbilical e placentário (SCUP) apresenta vários benefícios para o transplante de CPH em comparação às células provenientes de outras fontes. Dentre eles, a maior disponibilidade e a maior imaturidade imunológica das CPH, o que permite certa flexibilidade nos critérios de compatibilidade entre doador e receptor e uma menor taxa de reação do enxerto-versus-hospedeiro. A legislação brasileira e órgãos internacionais exigem a realização de vários testes para garantir a qualidade do produto hemoterápico contendo CPH a ser transplantado. O objetivo deste estudo foi confirmar que o teste para quantificação de CPH com elevada atividade da enzima ALDH1(ALDHbr) pode ser considerado um teste de adequado ou seja, é capaz de predizer quais produtos tem melhor capacidade de repopular a medula óssea do recipiente após o transplante. Para isso, foram utilizadas 40 unidades de SCUP coletadas e processadas pelo Banco de Sangue de Cordão Umbilical e Placentário do Cetebio / Fundação Hemominas. As unidades foram processadas por método automatizado e amostras do creme leucocitário (buffy coat) foram coletadas para a realização da quantificação de células ALDHbr, quantificação de células CD34+, ensaio clonogênico (CFU), hemograma e cálculo do total de células nucleadas (TCN). A citometria de fluxo foi utilizada para a quantificação das CPH ALDHbr e CD34+ e das subpopulações CD45dim e CD38+. Outras informações como idade materna, idade gestacional e sexo do recém-nascido também foram coletadas para descrição das unidades. Para verificar a viabilidade da utilização do teste de ALDH pelos BSCUP foi realizado o levantamento do seu custo. A capacidade funcional das CPH em proliferar e se diferenciar em tecido hematopoético foi avaliada por meio do ensaio clonogênico. Detectou-se correlação entre a quantidade de células ALDHbr e o número de colônias no ensaio clonogênico (p<0,001), entre o número de células ALDHbr e de células CD34+ (p=0,001) e entre o número de colônias no ensaio clonogênico e o número de células CD34+ (p<0,001). A imunofenotipagem mostrou que 46,25% das células ALDHbr eram CD45dimCD38+CD34+. Os dados sugerem que a quantificação de células ALDHbr em unidades de SCUP pode ser considerada teste adequado, de baixo custo, de execução simples, rápida e menos dependente do operador em relação ao ensaio clonogênico. / The use of the umbilical cord blood cells presents numberless benefits when compared to the cells from different sources. Among them, the ease of availability, the bigger immunological immaturity, which allows some flexibility in the compatibility between donor and receptor and less induction of reaction of graft-versus-host. The Brazilian legislation and international organizations demand the practice of various tests to guarantee the quality of the product to be transplanted. The aim of this research was to confirm that the test used to quantify ALDHbr cells can be considered a power test, meaning that it tests the ability to repopulate the bone marrow after transplant. For this study, it has been used 40 units of SCUP collected and processed by the Cetebio Umbilical Cord Blood Bank - Fundação Hemominas. The units were processed by the automatized method and the samples of the final product (buffy coat) were collected for the quantification of ALDHbr cells, quantification of CD34+ cells, clonogenic essay (CFU), hemogram and the total number of nucleated cells (TNC). It was used the flow cytometry to perform ALDH and CD34+ tests. Besides that, it was also performed the association of antibodies anti-CD34, anti-CD45 and anti-CD38 for the immunophenotyping of the units. Other information such as maternal age, fertilization age and the newborn gender were also collected for description of the units. In order to verify the viability of the use of the ALDH test by BSCUP its costs were calculated, as well as of the clonogenic essay. The results showed a significant correlation between ALDHbr cells and the clonogenic essay (p<0.001), between ALDHbr and CD34+ cells (p=0,001) and between the clonogenic essay and the quantification of CD34+ cells (p<0,001). The immunophenotyping revealed that 46,25% of ALDHbr cells were CD45dimCD38+CD34+. The data indicated that the quantification of ALDHbr cells in the SCUP units can be considered a powerful and low cost procedure, of easier and quicker execution and less operator dependent.

A utilização das células progenitoras hematopoéticas (CPH) obtidas do sangue de cordão umbilical e placentário (SCUP) apresenta vários benefícios para o transplante de CPH em comparação às células provenientes de outras fontes. Dentre eles, a maior disponibilidade e a maior imaturidade imunológica das CPH, o que permite certa flexibilidade nos critérios de compatibilidade entre doador e receptor e uma menor taxa de reação do enxerto-versus-hospedeiro. A legislação brasileira e órgãos internacionais exigem a realização de vários testes para garantir a qualidade do produto hemoterápico contendo CPH a ser transplantado. O objetivo deste estudo foi confirmar que o teste para quantificação de CPH com elevada atividade da enzima ALDH1(ALDHbr) pode ser considerado um teste de adequado ou seja, é capaz de predizer quais produtos tem melhor capacidade de repopular a medula óssea do recipiente após o transplante. Para isso, foram utilizadas 40 unidades de SCUP coletadas e processadas pelo Banco de Sangue de Cordão Umbilical e Placentário do Cetebio / Fundação Hemominas. As unidades foram processadas por método automatizado e amostras do creme leucocitário (buffy coat) foram coletadas para a realização da quantificação de células ALDHbr, quantificação de células CD34+, ensaio clonogênico (CFU), hemograma e cálculo do total de células nucleadas (TCN). A citometria de fluxo foi utilizada para a quantificação das CPH ALDHbr e CD34+ e das subpopulações CD45dim e CD38+. Outras informações como idade materna, idade gestacional e sexo do recém-nascido também foram coletadas para descrição das unidades. Para verificar a viabilidade da utilização do teste de ALDH pelos BSCUP foi realizado o levantamento do seu custo. A capacidade funcional das CPH em proliferar e se diferenciar em tecido hematopoético foi avaliada por meio do ensaio clonogênico. Detectou-se correlação entre a quantidade de células ALDHbr e o número de colônias no ensaio clonogênico (p<0,001), entre o número de células ALDHbr e de células CD34+ (p=0,001) e entre o número de colônias no ensaio clonogênico e o número de células CD34+ (p<0,001). A imunofenotipagem mostrou que 46,25% das células ALDHbr eram CD45dimCD38+CD34+. Os dados sugerem que a quantificação de células ALDHbr em unidades de SCUP pode ser considerada teste adequado, de baixo custo, de execução simples, rápida e menos dependente do operador em relação ao ensaio clonogênico. / The use of the umbilical cord blood cells presents numberless benefits when compared to the cells from different sources. Among them, the ease of availability, the bigger immunological immaturity, which allows some flexibility in the compatibility between donor and receptor and less induction of reaction of graft-versus-host. The Brazilian legislation and international organizations demand the practice of various tests to guarantee the quality of the product to be transplanted. The aim of this research was to confirm that the test used to quantify ALDHbr cells can be considered a power test, meaning that it tests the ability to repopulate the bone marrow after transplant. For this study, it has been used 40 units of SCUP collected and processed by the Cetebio Umbilical Cord Blood Bank - Fundação Hemominas. The units were processed by the automatized method and the samples of the final product (buffy coat) were collected for the quantification of ALDHbr cells, quantification of CD34+ cells, clonogenic essay (CFU), hemogram and the total number of nucleated cells (TNC). It was used the flow cytometry to perform ALDH and CD34+ tests. Besides that, it was also performed the association of antibodies anti-CD34, anti-CD45 and anti-CD38 for the immunophenotyping of the units. Other information such as maternal age, fertilization age and the newborn gender were also collected for description of the units. In order to verify the viability of the use of the ALDH test by BSCUP its costs were calculated, as well as of the clonogenic essay. The results showed a significant correlation between ALDHbr cells and the clonogenic essay (p<0.001), between ALDHbr and CD34+ cells (p=0,001) and between the clonogenic essay and the quantification of CD34+ cells (p<0,001). The immunophenotyping revealed that 46,25% of ALDHbr cells were CD45dimCD38+CD34+. The data indicated that the quantification of ALDHbr cells in the SCUP units can be considered a powerful and low cost procedure, of easier and quicker execution and less operator dependent.